实验实训九 微生物接种技术
微生物接种技术-PPT
大家有疑问的，可以询问和交流
可以互相讨论下，但要小声点
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（1）斜面接平板 a.划线法：见平板划线分离法。 b.点种法：一般用于观察霉菌和酵母细 胞，轻轻点在平板的表面即可。
（2）平板接斜面：一般是将经 平板分散培养得到的单菌落接 种到斜面，以便作鉴定或扩大 培养、保存之用。
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（3）平板涂布法
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1.斜面接种：
从已长好微生物移接到另一斜面管的 方法。此法用于好气性微生物的接种。
左手持菌种管和斜面管，使斜面向上， 并尽量放平。用右手先将塞拧转松动， 再拿接种环，用右手的小指、无名指和 手掌拨下塞并夹紧，同时将管口在火焰 上燃烧一圈，接种环灼烧灭菌后插入管 内，冷却、挑菌，立即转入斜面管底部， 沿斜面划曲线或直线。
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试管斜面接种
1.两支试管呈“V”字形 3.火焰上微烧一周 5.接种、划线
2.拔下试管塞 4.接种环灼烧、冷却 6.塞上塞子，灼烧接种环 6
2.液体接种：
将菌接种到液体培养基（试管、三角瓶等）中的 方法。
操作与上法基本一致，只是在将接种 环送入液体培养基中时使环在液体与 管壁接触的地方轻轻磨擦，使菌体分 散，然后塞上棉塞，再轻轻摇动均匀， 即可培养。 如果菌种是培养在液体培 养基中时，一般用移液管或接种环接 种。
• 倒培养基，制成平板。 • 凝固后，另取一支吸管吸取相应的菌液0.2mL放
至平板上。 •用无菌三角玻棒将稀释液在平板表面涂 抹均匀。倒置于37℃条件下培养1～2d， 观察菌落形态及计数菌落。
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凝 固 后
37℃ 培养
涂布法流程图
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思考题 （1）用接种环接种时有哪些注意事项 （2）涂布棒消毒方法有哪些？各应注意什 么？
微生物常用的接种方法
微生物常用的接种方法微生物接种是微生物学实验中的一项重要步骤，它可以使微生物在实验室中进行培养和繁殖，为微生物学研究提供了基础条件。
接种方法的选择对于微生物的培养和实验结果至关重要，下面将介绍微生物常用的接种方法。
一、平板接种法。
平板接种法是微生物学实验中最常用的一种接种方法。
首先将琼脂平板加热至液态状态，然后将所需接种的微生物悬液均匀地倒在琼脂平板表面，用接种棒均匀涂抹，使微生物均匀分布在琼脂平板表面。
接种后将琼脂平板放置在恒温培养箱中进行培养，待微生物形成菌落后进行观察和实验。
二、液体培养基接种法。
液体培养基接种法适用于需要大量培养微生物的实验。
首先将所需的液体培养基倒入培养瓶中，然后将微生物接种悬液加入培养瓶中，用接种棒均匀搅拌使微生物均匀分布在培养基中。
接种后将培养瓶放置在恒温摇床上进行培养，待微生物培养达到所需数量后进行后续实验。
三、斜面接种法。
斜面接种法适用于需要进行纯培养的微生物。
首先将琼脂斜面培养基倾斜放置，等琼脂凝固后将微生物接种在斜面上并均匀涂抹，使微生物均匀分布在斜面上。
接种后将琼脂斜面培养基放置在恒温培养箱中进行培养，待微生物形成菌落后进行观察和纯培养。
四、深层接种法。
深层接种法适用于需要进行微生物氧气需求的实验。
首先将所需的琼脂深层培养基加热至液态状态，然后将微生物接种悬液倒入琼脂深层培养基中并均匀混合，接种后将琼脂深层培养基倒入培养瓶中，待琼脂凝固后放置在恒温培养箱中进行培养，待微生物培养达到所需数量后进行后续实验。
以上就是微生物常用的接种方法，不同的实验需要选择合适的接种方法来保证实验结果的准确性和可靠性。
希望本文所介绍的接种方法能够帮助到需要进行微生物学实验的研究人员，提高实验效率和准确性。
微生物常用的接种方法
微生物常用的接种方法微生物的接种是微生物学实验中的一个重要步骤，它是将微生物从一个培养基转移到另一个培养基的过程。
接种方法的选择对于微生物的培养和研究具有重要意义。
下面将介绍一些微生物常用的接种方法。
一、平板接种法。
平板接种法是将微生物接种在培养基的表面上，通过接种棒或铅笔头的方式在培养基表面画线或涂抹，形成菌落。
这种接种方法适用于培养革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，通常用于分离和计数微生物。
在进行平板接种时，需要注意接种的均匀性和细菌数量的控制，以避免产生过多或过少的菌落。
二、液体接种法。
液体接种法是将微生物接种在含有营养物质的液体培养基中，通过摇床或振荡器进行培养。
这种接种方法适用于培养需要大量微生物的情况，如大规模生产微生物菌种或进行微生物代谢产物的生产。
在进行液体接种时，需要注意培养液的搅拌速度和通气情况，以保证微生物的充分生长和代谢。
三、斜面接种法。
斜面接种法是将微生物接种在倾斜的培养基表面上，通过接种棒或铅笔头的方式在斜面上画线或涂抹，形成菌落。
这种接种方法适用于培养对氧需求较高的微生物，如厌氧菌和微需氧菌。
在进行斜面接种时，需要注意斜面的倾斜角度和接种的均匀性，以保证微生物的充分生长和代谢。
四、深层接种法。
深层接种法是将微生物接种在含有固体琼脂的试管或培养瓶中，通过接种棒或铅笔头的方式在琼脂表面插入或涂抹，形成菌落。
这种接种方法适用于培养对氧需求较低的微生物，如厌氧菌和微需氧菌。
在进行深层接种时，需要注意琼脂的固化温度和接种的深度，以保证微生物的充分生长和代谢。
五、滴播接种法。
滴播接种法是将微生物接种在含有营养物质的琼脂平板上，通过滴管或移液器滴播微生物悬液，形成菌落。
这种接种方法适用于培养对氧需求较高的微生物，如厌氧菌和微需氧菌。
在进行滴播接种时，需要注意滴播的均匀性和微生物悬液的浓度，以保证微生物的充分生长和代谢。
总结，微生物的接种方法多种多样，选择合适的接种方法对于微生物的培养和研究具有重要意义。
微生物接种方法
微生物接种方法微生物接种是生物实验中的一项基本技术，也是各种微生物检测和研究中不可缺少的步骤。
本文将介绍一些常见的微生物接种方法，包括平板划线法、斜面接种法、液体培养基接种法和穿刺接种法等。
平板划线法是一种常用的微生物接种方法，其目的是将菌种纯化，得到单一的菌落。
该方法通过在固体培养基上划线，使菌种在培养基上繁殖并形成菌落。
具体步骤如下：(1)将固体培养基灭菌后倒入培养皿中，待凝固后加入适量菌液。
(2)用接种环取适量菌液，在培养皿表面划线。
(3)将培养皿放入适宜的温度下培养，观察菌落的生长情况。
(4)根据需要重复划线操作，直至得到单一的菌落。
斜面接种法是一种常用的微生物接种方法，其目的是将菌种接种到斜面培养基上，以便于观察和保存。
该方法通过将菌液加入到灭菌后的斜面培养基中，使菌种在斜面上繁殖并形成菌落。
具体步骤如下：(1)将斜面培养基灭菌后放置在实验台上，用无菌操作法加入适量菌液。
(2)将接种环放入菌液中沾取少量菌种，然后在斜面培养基上划线接种。
(3)将培养皿放入适宜的温度下培养，观察菌落的生长情况。
(4)根据需要重复划线操作，直至得到单一的菌落。
液体培养基接种法是一种常用的微生物接种方法，其目的是将菌种接种到液体培养基中，以便于微生物的生长和繁殖。
该方法通过将菌液加入到灭菌后的液体培养基中，使菌种在液体培养基中繁殖并形成微生物。
具体步骤如下：(1)将液体培养基灭菌后倒入试管中，加入适量菌液。
(2)用摇床或其他设备将试管中的培养基混合均匀。
(3)将试管放入适宜的温度下培养，观察微生物的生长情况。
微生物接种技术是生物工程中一项重要的技术，广泛应用于生物制品制造、环境生物治理、医学诊断等领域。
本文将介绍微生物接种技术的基本原理、应用场景以及发展前景。
微生物接种技术是指将目的微生物通过一定的方式引入到培养基或发酵系统中，使其在特定的环境下生长繁殖，以达到特定的生物制品或环境治理的目的。
该技术的主要环节包括菌种选择、接种量确定、接种方法选择和培养条件控制等。
微生物的无菌操作及接种技术
2、常用的接种方法
划线接种
目的：使混合的细菌呈单个分散生长，形成单个菌落，以便获得纯菌、活菌计数。
方法： 分区划线法：适用于含菌量较多的标本 连续划线法：适用于含菌量较少的标本
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2、常用的接种方法
2、常用的接种方法
划线接种
2、常用的接种方法
分区划线法
第一区划线
灭菌接种环
第二区划线
斜面接种
拔管塞： 用右手的无名指、小指和手掌边先后取下菌种管和待接试管的管塞，让试管口缓缓过火灭菌(切勿烧得过烫)
斜面接种
取菌: 接种环冷却，轻沾取少量菌体或胞子，然后将接种环移出菌种管，注意不要使接种环碰到管壁，取出后带菌接种环不可通过火焰。
接种:
斜面接种
在火焰旁迅速将沾有菌种的接种环伸入待接斜面管。从斜面培养基底部向上作“Z”形来回密集划线，勿划破培养基。 有时也可用接种针仅在斜面培养基的中央拉一条直线作斜面接种，直线接种可观察不同菌种的生长特点。
微生物无菌操作及接种技术
一、微生物无菌操作技术
无菌操作技术：指在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。
一、微生物无菌操作技术
接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀
一、微生物无菌操作技术
原理： 无菌技术：指在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。 接种：将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程。 微生物无菌操作技术与接种技术
※穿刺接种
（4）拔出棉塞 （5）取菌：用冷却接种针的针尖沾取少量菌种 （6）穿刺：将接种针自培养基中心平稳、快速垂直刺入培养基，至接近试管底部，然后沿接种线拔出 （7）塞上棉塞 （8）接种针灼烧灭菌 2、常用的接种方法 ※穿刺接种
(完整版)微生物的接种技术
微生物的接种技术1 目的1.1学习掌握微生物的几种接种技术1.2 建立无菌操作的概念，掌握无菌操作的基本环节2 实验说明将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称之为接种。
接种是微生物实验及科学研究中的一项最基本的操作技术。
无论微生物的分离、培养、纯化或鉴定以及有关微生物的形态观察及生理研究都必须进行接种。
接种的关键是要严格的进行无菌操作，如操作不慎引起污染，则实验结果就不可靠，影响下一步工作的进行。
3 实验器材3.1 器械和用品酒精灯，玻璃铅笔，火柴，试管架、接种环、接种针、接种钩、滴管、移液管、三角型接种棒等接种工具。
3.2 菌种和培养基菌种：大肠杆菌（Escherichia coli），金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）。
培养基：普通琼脂斜面和平板,营养肉汤,普通琼脂高层(直立柱)。
4 实验流程斜面接种法→液体接种法→固体接种法→穿刺接种法。
5 操作步骤5.1 斜面接种法斜面接种法主要用于接种纯菌，使其增殖后用以鉴定或保存菌种。
通常先从平板培养基上挑取分离的单个菌落，或挑取斜面，肉汤中的纯培养物接种到斜面培养基上。
操作应在无菌室、接种柜或超净工作台上进行，先点燃酒精灯。
将菌种斜面培养基(简称菌种管)与待接种的新鲜斜面培养基(简称接种管)持在左手拇指、食指、中指及无名指之间，菌种管在前，接种管在后，斜面向上管口对齐，应斜持试管呈45～0度角，并能清楚地看到两个试管的斜面，注意不要持成水平，以免管底凝集水浸湿培养基表面。
以右手在火焰旁转动两管棉塞，使其松动，以便接种时易于取出。
右手持接种环柄，将接种环垂直放在火焰上灼烧。
镍铬丝部分（环和丝）必须烧红，以达到灭菌目的，然后将除手柄部分的金属杆全用火焰灼烧一遍，尤其是接镍铬丝的螺口部分，要彻底灼烧以免灭菌不彻底。
用右手的小指和手掌之间及无名指和小指之间拨出试管棉塞，将试管口在火焰上通过，以杀灭可能沾污的微生物。
微生物细菌接种培养实验报告
微生物细菌接种培养实验报告一、实验介绍微生物是指细菌、真菌、病毒、原生动物和藻类等微小生物的总称，它们在生命的整个过程中都扮演着重要的角色。
本次实验主要介绍了微生物细菌接种培养的方法和技巧，旨在帮助学生熟悉微生物实验的基本操作。
二、实验原理细菌接种培养实验是通过将细菌接种到含有营养成分的培养基中进行培养，使细菌在适宜的环境中进行繁殖。
细菌在培养基中繁殖所需要的主要营养成分有碳源、氮源、磷源和微量元素等。
根据不同的细菌，培养基的成分也不同，需要根据实验的需要加入不同的营养成分。
三、实验步骤1.准备培养基根据实验需要选择合适的培养基，加入适量的蒸馏水和其他营养成分，将培养基均匀地倒入培养皿中。
2.接种细菌取一支已经生长好的细菌，用吸管沾取适量的细菌液，滴到培养基表面。
如果需要进行斜面培养，可以用细菌接种环将细菌接种到斜面上。
3.标记培养皿在培养皿的盖子上标记好实验的日期、细菌种类等重要信息，避免混淆。
4.封闭培养皿用透明胶带将培养皿的盖子封闭，避免细菌在外界环境的干扰下生长。
5.培养将培养皿置于恒温箱中，根据需要调节恒温箱的温度和湿度。
一般情况下，细菌的培养需要3-5天的时间。
四、实验注意事项1.实验过程中要做到操作规范、注意卫生，避免细菌的污染。
2.在接种细菌前，要先消毒接种器具，避免外界环境中的细菌污染。
3.在标记培养皿时，要将重要信息标注清楚，避免混淆。
4.在恒温箱中放置培养皿时，要将不同种类的培养皿分开放置，避免细菌之间的交叉感染。
5.实验结束后，要做好实验器具和培养皿的消毒和清洗工作，避免细菌的残留和传播。
五、实验结果与分析通过培养皿的观察和细菌的生长情况，可以初步判断细菌的种类和数量。
如果细菌长成了光滑、湿润的菌落，可以说明细菌在培养基中得到了良好的生长和繁殖。
如果发现有异常生长或变异的情况，需要进行进一步的实验和分析。
六、实验总结微生物细菌接种培养实验是学生进行微生物实验的基础操作，通过本次实验，学生可以熟悉微生物实验的基本步骤和操作技巧，同时也可以了解到微生物在适宜的环境中进行繁殖的基本原理。
实训报告细菌接种法
一、实验目的1. 掌握细菌接种的基本原理和方法。
2. 熟悉不同接种方法在细菌培养中的应用。
3. 培养无菌操作技能，提高实验操作能力。
二、实验原理细菌接种是将细菌从一种培养基转移到另一种培养基的过程，目的是为了获得纯种细菌、扩大培养量或进行微生物学实验。
接种方法有平板划线法、稀释涂布平板法、斜面接种法等。
本实验主要介绍平板划线法和斜面接种法。
三、实验材料1. 菌种：金黄色葡萄球菌2. 培养基：牛肉膏蛋白胨固体培养基3. 接种工具：接种环、接种针、无菌镊子、无菌移液器4. 实验器材：恒温培养箱、酒精灯、培养皿、试管、试管架等四、实验步骤1. 平板划线法接种（1）将接种环在酒精灯上灼烧，待其烧红后，迅速伸入装有金黄色葡萄球菌的试管中，挑取适量菌液。
（2）将接种环在酒精灯上灼烧，待其烧红后，伸入牛肉膏蛋白胨固体培养基平板中央，轻轻划一道直线。
（3）将接种环在酒精灯上灼烧，待其烧红后，以“Z”字形在平板上划线，使菌液逐渐稀释。
（4）将平板倒置，放入恒温培养箱中培养。
2. 斜面接种法接种（1）将接种环在酒精灯上灼烧，待其烧红后，伸入装有金黄色葡萄球菌的试管中，挑取适量菌液。
（2）将接种环在酒精灯上灼烧，待其烧红后，伸入牛肉膏蛋白胨固体培养基斜面，从培养基底向上划一道直线。
（3）将接种环在酒精灯上灼烧，待其烧红后，以“Z”字形在斜面上划线，使菌液逐渐稀释。
（4）将斜面放入恒温培养箱中培养。
五、实验结果1. 平板划线法接种：在平板上形成多个菌落，菌落大小不一，边缘不整齐。
2. 斜面接种法接种：在斜面上形成多个菌落，菌落大小不一，边缘不整齐。
六、实验讨论1. 实验过程中应注意无菌操作，避免污染。
2. 接种环在灼烧过程中应保持火焰旺盛，避免接种环接触酒精灯瓶口。
3. 接种时，接种环应尽量靠近培养基表面，避免划破培养基。
4. 接种后，平板和斜面应倒置放置，避免培养基水分蒸发。
5. 不同接种方法适用于不同实验目的，可根据实验需求选择合适的接种方法。
微生物实验中的接种分离和培养操作步骤
微生物实验中的接种、分离和培养操作步骤微生物实验中的接种、分离和培养操作步骤一、目的要求1、掌握各种分离、接种方法。
2、掌握无菌操作基本环节。
二、实验说明微生物在自然界中呈混杂状态存在，要获得所需菌种，必需从中把它们分离出来。
在保存菌种时不慎受到到污染也需予以分纯。
微生物分离和纯化的方法很多，但基本原理却是相似的，即将待分离的样品进行一定的稀释，并使微生物的细胞（或孢子）尽量以分散状态存在，然后使其长成一个个纯种单菌落。
然而上述工作又离不开接种，即将一种微生物移到另一灭过菌的培养基上的过程。
三、实验材料1、恒温培养箱。
2、接种环、玻璃棒、吸管、酒精灯。
3、培养基（上次实验配制的）。
4、大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、酵母菌。
四、方法步骤（一）接种的操作1、斜面接种（接金黄葡萄球菌）（1）操作前，先用75%酒精擦手，待酒精挥发后点燃酒精灯。
（2）将菌种管和斜面握在左手大姆指和其它四指之间，使斜面和有菌种的一面向上，并处于水平位置。
（3）先将菌种和斜面的棉塞旋转一下，以便接种时便于拔出。
（4）左手拿接种环（如握钢笔一样），以火焰上先将环端烧红灭菌，然后将有可能伸入试管其余部位也过火灭菌。
（5）用右手的无名指、小指和手掌将菌种管和待接斜面试管的棉花塞或试管帽同时拔出，然后让试管口缓缓过火灭菌（切勿烧过烫）。
（6）将灼烧过的接种环伸入菌种管内，接种环在试管内壁或未长菌苔的培养基上接触一下，让其充分冷却，然后轻轻刮取少许菌苔，再从菌种管内抽出接种环。
（7）迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。
从斜面底部向上作“Z”形来回密集划线。
有时也可用接种针仅在培养基的中央拉一条线来作斜面接种，以便观察菌种的生长特点。
（7）迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管。
从斜面底部向上作“Z”形来回密集划线。
有时也可用接种针仅在培养基的中央拉一条线来作斜面接种，以便观察菌种的生长特点。
（8）接种完毕后抽出接种环灼烧管口，塞上棉塞。
微生物检验细菌的接种方法
微⽣物检验细菌的接种⽅法微⽣物检验细菌的接种⽅法 常⽤的细菌接种⽅法有平板划线分离法、斜⾯接种法、穿刺接种法、液体和半固体接种法、涂布接种法等。
下⾯是yjbys ⼩编为⼤家带来的关于微⽣物检验细菌的接种⽅法的知识，欢迎阅读。
⼀、平板划线分离法 平板划线分离法:是指把混杂在⼀起的微⽣物或同⼀微⽣物群体中的不同细胞⽤接种环在平板培养基表⾯，通过分区划线稀释⽽得到较多独⽴分布的单个细胞，经培养后⽣长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微⽣物的纯种。
有时这种单菌落并⾮都由单个细胞繁殖⽽来的，故必须反复分离多次才可得到纯种。
其原理是将微⽣物样品在固体培养基表⾯多次作“由点到线”稀释⽽达到分离⽬的的。
为⽅便划线，⼀般培养基不宜太薄，每⽫约倾倒20ml培养基，培养基应厚薄均匀，平板表⾯光滑。
划线分离主要有分区划线法和连续划线法两种(如图1， A、B)。
分区划线法是将平板分四区，故⼜称四分区划线法。
划线时每次将平板转动60~70°划线，每换⼀次⾓度，应将接种环上的菌烧死后，再通过上次划线处划线; 另⼀种连续划线法是从平板边缘⼀点开始，连续作波浪式划线直到平板的另⼀端为⽌，当中不需灼烧接种环上的菌。
1)连续划线法 将琼脂平⽫半开盖倒置于培养箱内⾄⽆冷凝⽔，接种环于酒精灯外焰烧⾄红透，接种棒也要充分灼烧，最后再集中烧接种环⾄红。
轻轻摇匀待接种试管，左⼿⼿⼼托待接种试管底侧部，右⼿执接种环，右⼿⼩指拔下试管塞，于酒精灯附近将接种环伸进试管，稍候，再插⼊待接接种液中，蘸⼀下，取满⼀环，抽出、烧塞、盖盖、放回试管架。
或将接种环通过稍打开⽫盖的缝隙伸⼊平板，在平板边缘空⽩处接触⼀下使接种环冷却，然后以⽆菌操作接种环直接取平板上待分离纯化的菌落。
于靠近酒精灯处打开平⽫盖约30°，右⼿将环伸进平⽫，将菌种点种在平板边缘⼀处，轻轻涂布于琼脂培养基边缘(如图2)，抽出接种环，盖上平⽫盖，然后将接种环上多余的培养液在⽕焰中灼烧，打开平⽫盖约30°伸⼊接种环，待接种环冷却后，再与接种液处轻轻接触，开始在平板表⾯轻巧滑动划线，接种环不要嵌⼊培养基内划破培养基，线条要平⾏密集，充分利⽤平板表⾯积，注意勿使前后两条线重叠，划线完毕，关上⽫盖。
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实验实训九微生物接种技术
一、实验实训目的
学习微生物工作的基本接种方法，建立纯培养技术中的“无菌“概念”，掌握无菌操作技术。
二、实验实训材料
1．菌种葡萄球菌、大肠杆菌斜面菌种。
2．器材牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（斜面、液体、柱状、平板等），接种环（针），酒精灯，酒精棉球。
三、实验实训内容及方法
（一）常用的几种工具（实图9-1）。
（二）无菌操作
菌种分离或移接工作应在无菌环境中进行，接种室、接种箱或超净工作台是常用的接种环境。
用前先清洁好卫生，再进行消毒处理。
可用紫外线灯和甲醛熏蒸的双重作用，或用3%来苏尔及其他表面消毒进行喷雾。
操作者的手应先用肥皂洗净，再用酒精棉球消毒；整个操作过程都要靠近酒精灯火焰；接种工具在用前和用后必须在灯焰上灭菌；棉塞不得乱放，操作中只能夹在手上；不能有跑、跳等力度大的动作，以免引起空气大振动而增加染菌机会。
（三）接种方法
1．斜面接种法把各种培养条件下的菌种，接入斜面上（包括从试管斜面、培养基平板、液体纯培养物等中把菌种移接于斜面培养基上）。
这是微生物学中最常用、最基本的技术之一。
接种前，需在待接种试管上贴好标签，注明菌名及接种日期。
接种最好在无菌室或无菌箱内进行，若无此条件，可在较清洁密闭的室内进行。
室内应事先消毒，桌面要清洁，除去灰尘和杂物，用5%来苏儿溶液擦洗桌面。
斜面菌种移接的基本操作方法及注意事项见实图（9-2）。
（1）点燃酒精灯，灯焰周围约1～2cm处的空间为无菌区，所以在酒精灯灯焰旁进行无菌操作法接种，可避免杂菌污染。
（2）将菌种及接种用的斜面培养基（即两支斜面试管）同时握在左手中，使中指位于两试管之间。
管内斜面向上，两试管管口相互平行，两支试管处于接近水平位置，用右手的小指、无名指及手掌在火焰旁同时拔去两支试管的棉塞，并使管口在火焰上通过，以烧死试管口的杂菌。
随后把管口移至火焰近旁约1-2cm处。
（3）右手拿接种环，先垂直、后水平方向把接种环放在火焰上灼烧。
凡是需进入试管的杆部分均应通过火焰灼烧，下端的环心须烧红，以彻底灭菌。
灼烧时，应把环放在酒精灯之外焰（氧化焰）上，因外焰温度高，易于烧红。
（4）将烧过的接种环伸入菌种管内，先使环接触斜面上端的培养基或试管壁，使接种环充分冷却，待培养基不再被接种环融化时，即可将接种环伸向斜面中部蘸取少量菌体，然后小心地将接种环从试管内抽出。
注意不能让环接触管壁和管口。
取出后，接种环不能通过火焰，在火焰旁抽出并迅速伸入新培养基斜面管内，在斜面下1/5处，由下至上轻轻划线。
注意不要把培养基划破，也不要把菌沾在管壁上。
此过程要迅速、准确完成。
（5）接种完毕，试管口必须迅速通过火焰灭菌，在火焰旁塞入棉塞。
注意
不要使试管离开火焰去迎棉塞，以免进入带菌空气。
操作中如不慎使棉塞着火，要迅速塞入试管内，由于缺氧火自然就会熄灭。
若棉塞外端仍然着火，也不要用嘴吹，迅速用手捏几下棉塞，即可熄灭。
（6）划线完毕，接种环要灼烧灭菌，才能放回原处，以免污染环境。
放回接种环后，再进一步把试管的棉塞塞紧。
置28℃下培养2-3d，进观察2．液体接种
液体接种是一种用移液管、滴管或接种环等工具将菌液移接到培养基中的方法。
吸管不同于其它接种工具，不能灼烧，可预先对其进行烘烤法灭菌。
3．穿刺接种
穿刺接种常用于保藏菌种或细菌运动性的检查。
一般适用于细菌、酵母菌的接种培养。
用接种针沾取少许菌种，移入装有固体或半固体培养基的试管中，自培养基中心垂直刺入到底，然后按原来的穿刺线将针慢慢拔出。
四、实验实训报告
记录几种接种操作的结果。
五、思考题
1．何谓无菌操作？接种前应作哪些准备工作？
2．总结几种接种方法的要点及应注意的事项？。