植物转基因的操作流程
人教版高中生物选修三流程图
人教版高中生物选修三流程图work Information Technology Company.2020YEAR选修三流程图一、基因工程流程图1、转基因植物的培育流程：2、转基因动物的培育流程：1、基因工程的操作工具有：。
2、基因工程的操作流程是：（1）；（2）；（3）；（4）。
其中核心步骤是：。
3、获取目的基因的方法有：；为了获得更多的目的基因，可以用技术使目的基因在生物体外大量扩增。
4、构建基因表达载体需要的工具酶有；构建基因表达载体的目的是：。
5、将目的基因导入植物细胞常用的方法是；导入动物细胞的常用的方法是。
一般选用受精卵作为目的基因的受体细胞，原因是。
6、基因表达载体的组成：。
其中启动子的作用是；标记基因的作用是。
7、检测目的基因是否成功表达的方法是：（1）分子水平的检测：用放射性同位素标记的 片段做探针进行分子杂交，检测目的基因是否成功转录出mRNA 或用 技术检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质。
（2）个体水平的检测： 。
二、蛋白质工程流程图：1、 工程是蛋白质工程的基础，从本质上看蛋白质工程是通过改造 ， 从而达到改造 的目的。
三、植物组织培养流程图：1、植物组织培养的理论依据是： 。
2、植物细胞表现出全能性的条件： 。
3、植物组织培养的核心技术： 。
4、愈伤组织的结构特点是： 。
5、植物组织培养的培养基中除各种营养物质外，还需要添加 ，目的是 。
同时在培养过程中，除必要的温度、光照和氧气等外界条件外，操作过程中还必须保证 。
6、植物组织培养技术有哪些应用？（写出三种）7、若要制作人工种子，应进行到哪一阶段？。
若用紫杉细胞生产治疗癌症的紫杉醇，应进行到哪一阶段？。
四、植物体细胞杂交流程图： 1、如何去除细胞壁？2、诱导原生质体融合常用的方法有 。
植物细胞杂交的原理是： 。
3、植物原生质体融合完成的标志是 。
4、由杂种细胞培养成杂种植株的技术是： 。
5、植物体细胞杂交培育新品种的优点是 。
转基因植物的流程
转基因植物的流程一、转基因植物的流程简介哎呀，宝子们！今天咱们来唠唠转基因植物的流程，这可老有趣啦。
转基因植物呢，简单说就是把一些原本不属于这个植物的基因给它弄进去，让这个植物有一些新的本事。
二、基因的获取要做转基因植物，首先得有那个要转进去的基因呀。
这个基因可以从好多地方来呢。
比如说有些是从别的植物身上找到的，那些植物可能有一些特别厉害的特性，像特别抗虫或者特别耐旱啥的。
还有些基因是从微生物身上弄来的，微生物虽然小，但是它们身上的一些基因可不得了，能让植物发生大变化。
科学家们会用各种高科技的办法把这些基因给提取出来，就像从宝藏里把宝贝找出来一样。
三、构建载体有了基因还不行呢，得给这个基因找个小“车”，这个小“车”就是载体啦。
载体就像个小快递员，能把基因送到植物细胞里面去。
这个载体一般是一些很小的环状的DNA，叫质粒。
科学家们会把提取出来的基因和这个质粒进行一些处理，让基因能稳稳地坐在这个“车”上。
这个过程就像是把宝贝小心翼翼地放在快递盒里一样，可不能马虎，得用各种化学试剂和仪器，操作老精细啦。
四、植物细胞的转化接下来就是把带着新基因的载体送到植物细胞里去啦。
这可不容易呢。
有好几种办法，比如说农杆菌介导转化法。
农杆菌这个小细菌可神奇了，它就像个小间谍，能悄悄地把载体送到植物细胞里面去。
还有一种方法是基因枪转化法，就像拿个小枪把载体“打”进植物细胞里。
不管用哪种方法，目的就是让植物细胞能接受这个新的基因。
五、筛选转化细胞把基因送进去之后，不是所有的植物细胞都接受了这个新基因的。
这时候就得把那些成功接受了新基因的细胞给找出来。
科学家们会用一些特殊的标记，就像给接受了新基因的细胞贴上一个小标签一样。
比如说，在载体上加上一个能让细胞在特殊的培养基上存活的基因，这样只有那些接受了载体的细胞才能在这个培养基上生长，其他没接受的就不行啦。
六、植物的再生找到那些成功转化的细胞之后，就可以让它们长成一棵完整的植物啦。
几种育种方法比较
几种育种方法比较（1）常规杂交育种原理：基因重组操作流程：甲品种×乙品种→F1→F1自交→F2→人工选择需要的个体→F2自交→F3→人工选择需要的个体→逐代自交……→直至性状稳定遗传（纯合新品种）优点：操作简单；缺点：耗时较长，一般需7~8个生长季才能得到纯种。
（2）单倍体育种原理：染色体数目(整倍)变异和细胞全能性操作流程：第一步（第1年完成），具有不同优良性状的亲本杂交：甲品种×乙品种→F1（种子）第二步（第2年完成），花药离体培养： F1种子→F1成熟植株→取其花药离体培养→若干单倍体小苗。
第三步（第2年完成），人工诱导产生纯系品种：单倍体小苗→秋水仙素处理→若干纯系品种→人工选择→新品种。
（该品种严格地说，不能叫纯合体。
）优点:极大缩短育种年限（3）多倍体育种原理：染色体数目(染色体组增加)变异操作流程：正在萌发的种子或幼苗→秋水仙素处理→若干多倍体植株→人工选择→新物种（4）人工诱变育种原理：基因突变操作流程：正在萌发的种子或幼苗→物理辐射或亚硝酸、硫酸二乙酯等处理→多种性状植物体→人工选择→新品种优点：操作简单；缺点：需要处理大批种子（5）基因工程(转基因技术)育种原理:基因重组和细胞全能性操作流程：第一步，基因工程：甲种植物细胞→通过某种载体导入其它生物的基因→转基因细胞第二步，植物组织培养：转基因细胞→脱分化→愈伤组织→再分化→胚状体→人工种子或幼苗→新品种优点:可以定向改变生物性状；（6）植物体细胞杂交技术育种原理：细胞膜的流动性和细胞全能性操作流程：第一步，制备原生质体：两种植物细胞→利用纤维素酶和果胶酶酶解去壁→两种原生质体第二步，原生质体融合：两种原生质体→聚乙二醇或物理方法诱导融合→融合的原生质体→杂种细胞→筛选出需要的杂种细胞第三步，植物组织培养：杂种细胞→脱分化→愈伤组织→再分化→胚状体→人工种子或幼苗→新物种优点：克服了远源杂交不亲和的障碍，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。
烟草转基因及gus染色的方法
转基因烟草的方法 1.接种单菌落于加有KAN,RIF和STR的3ML液体YEB培养基中，28度培养2天，转接与20ML YEB液体培养基中，28度继续培养至OD600=0.6-0.8。
2.菌液经4000RPM离心10分钟，倒掉上清液，用MS液体培养基重悬菌体，调OD600=0.6-0.8 3.取无菌烟草叶片，去除边缘，主叶脉，剪成大小约1CM*1CM的小块，浸泡在菌体悬浮液中，2-3分钟，期间不断轻轻摇晃。
4.取出叶片，用灭菌滤纸吸取表面菌液，将叶片至于共培养培养基上（MS+6-BA 1MG/L,NAA 0.1MG/L）28度黑暗共培养2-3天。
5.将共培养后的叶片在无菌水和加入羧苄青霉素的无菌水中清洗一遍，灭菌滤纸吸取多余水分，然后转到分化选择培养基上（MS+6-BA 1MG/L,NAA 0.1MG/L，潮霉素10-60MG/L,CARB 500MG/L）25度光照培养，每两周更换一次培养基，直至分化出愈伤组织，进而分化出不定芽。
6.将长至2CM以上的不定芽切下并转移到生根培养基上（1/2MS+NAA 0.1MG/L，潮霉素20-100MG/L,CARB 500MG/L）诱导生根。
7.将一次生根的再生苗切取根尖，接种到新的生根培养基上，诱导生根，不能生根的芽丢掉。
叶盘法转基因烟草技术一．实验目的：学习并了解叶盘法转基因烟草的技术流程。
二. 实验原理：土壤中的农杆菌是一种革兰氏阴性菌，能够感染植物的受伤部位。
农杆菌中有一种环形的Ti质粒，Ti质粒最重要的两个区域为T-DNA区和毒性区，T-DNA是Ti质粒上唯一能够整合到植物染色体上的序列，而毒性区上一系列则帮助T-DNA区整合到植物的染色体上。
土壤农杆菌转化植物的常用方法是叶盘法。
这种转基因方法十分简单，一般是将植物的叶片切成小圆片，用农杆菌感染后共培养2-4天，而后转移到加有选择压的分化培养基上分化出芽，在MS培养基上生根后，再生出完整的植株。
转基因大豆.doc
一、国外转基因大豆新品种培育研发的基本流程以现有大豆品种作为受体材料，利用基因工程手段，构建重组植物表达载体，用农杆菌介导法和基因枪法两种方法将目的基因导入大豆，获得转基因植株，分析其对疫霉根腐病的抗病性，筛选出抗病大豆新株(品)系。
由于根癌农杆菌介导的转基因技术体系具有插入基因拷贝数低、遗传稳定、转化过程相对简单、成本相对低廉等诸多优点，一直是植物转基因研究的首选技术，在大豆中亦是如此。
自Hinchee 等于1988年建立根癌农杆菌介导的大豆子叶节器官发生转化系统之后，许多实验室以此为基础开展了优化、改进工作和转基因材料创制研究，也使该技术体系成为了最为重要的大豆转基因手段。
在根癌农杆菌介导的大豆转基因技术体系建立的同时，基因枪介导的大豆转基因技术体系也获得了成功。
尽管基因枪介导的转基因技术体系存在多拷贝插入频率高、断裂的DNA 片段插入难以避免、转基因后代遗传稳定性较差等缺点，但由于其受基因型限制较小，操作流程相对简单、遗传转化相对较易实现等优点，仍是植物转基因研究的重要手段之一。
在大豆遗传转化较为困难的现实条件下，其在大豆中的使用依然较为普遍，特别是在利用转基因大豆材料进行基因功能分析的研究中更为常见。
二、如何有效减少转基因后代材料中目的基因沉默或丢失的现象1、避免基因间的同源性由于重复或同源序列是基因沉默的普遍诱因，因此，在构建表达载体时，尽量降低所设计的序列与内源基因的同源性，以减少或避免配对。
应尽量使外源DNA碱基组成与植物DNA碱基组成相一致，以避免被植物限制修饰机制所识别。
同时，也可以采用定点插入方法，将外源基因插入到具有与其相似碱基组成的染色体区域。
另外，在育种过程中要选择外源基因表达稳定的株系。
2、避免重复序列的出现基因枪法以及电激法等直接DNA导入法易引起多个拷贝基因整合，使用根癌农杆菌介导法转化植物可在一定程度上避免这一问题。
因此在进行植物转化时，应优先考虑使用后一方法。
基因工程操作的基本程序活动单
基因工程操作的基本程序活动单1.选择目标基因：首先确定需要操作的目标基因，可以是其中一种特定功能蛋白的基因，也可以是其中一种疾病相关基因等。
目标基因的选择将决定后续操作的方向和方法。
2.克隆目标基因：通过PCR扩增、酶切、连接、转化等技术，将目标基因从源DNA中纯化得到，并插入到适当的表达载体中。
这一步骤要求操作技术准确、熟练，以确保目标基因的高效表达。
3.转化宿主细胞：将包含目标基因的表达载体转化到目标宿主细胞中，使目标基因能够在宿主细胞中表达。
转化可以通过真菌、细菌、植物等多种方法实现，比如热激、电转、化学转等。
4.筛选阳性克隆：为了找到成功表达目标基因的宿主细胞，需要对转化后的细胞进行筛选。
通常使用抗生素、报告基因标记等方法，筛选出表达目标基因的阳性克隆。
5. 基因组整合：将目标基因稳定整合到宿主细胞的染色体中，确保目标基因在细胞代代传递中持续表达。
可以通过CRISPR/Cas9、诱导重组等技术实现基因组整合。
6.目标基因表达：经过上述步骤后，目标基因将在宿主细胞中表达，产生目标蛋白或特定产物。
表达的目标基因可以用于生产物质、疫苗、药物等。
7.分析验证：对表达的目标基因及其产物进行分析验证，确认目标基因已经稳定地整合到宿主细胞染色体中，并且表达水平符合预期。
8.优化改良：根据实际需求，对目标基因的表达效率、产物纯度、功能活性等进行优化改良，使基因工程产品更具有实用性和商业价值。
9.产业化应用：将优化后的基因工程产品进行产业化应用，如规模化生产、市场推广等。
同时需要遵守法规标准，确保产品质量和安全性。
总的来说，基因工程操作的基本程序活动单涵盖了从目标基因选择到产业化应用的全过程，需要科研人员精确操作、审慎考虑，以确保基因工程技术的成功运用和推广。
农杆菌介导的植物转基因技术实验指导
农杆菌介导的植物转基因技术一、实验目的1 了解低温离心机、恒温振荡培养箱、超净工作台等仪器的使用。
2 学习真核生物的转基因技术及农杆菌介导的转化原理；掌握农杆菌介导转化植物的实验方法，了解转基因技术的操作流程。
二、实验原理农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤。
农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中。
因此，农杆菌是一种天然的植物遗传转化体系。
人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转基因植株。
实验一培养基配制一、仪器和试剂1、仪器：高压灭菌锅，超净工作台2、药品：Beef extract (牛肉浸膏) 5g/L ，Yeast extract (酵母提取物) 1g/L ，Peptone (蛋白胨) 5g/L ，Sucrose (蔗糖) 5g/L ，MgSO4.7H2O 0.4g/100ml ，Agar (琼脂) 1.5g/100ml， MS粉，有机溶液，肌醇，Fe盐，NAA（萘乙酸），6-BA （6-苄氨基腺嘌呤），卡那霉素（kan），利福平（rif），链霉素（str）。
二、实验方法第一组配制YEB固体培养基1、配制250mlYEB固体培养基：先称取1.25g Beef extract (牛肉浸膏)；1.25g Peptone (蛋白胨)；0.25g Yeast extract (酵母提取物)；1.25g Sucrose (蔗糖)；1g MgSO4.7H2O；琼脂粉3.75g；将上述药品置于250ml三角瓶中，用量筒称取200ml蒸馏水将其溶解混匀，然后再定容至250ml，用NaOH调pH=7.4。
称，用高压灭菌锅进行灭菌。
3、抗生素的加入：高压灭菌后，待培养基温度降到50-60℃时（手可触摸）加入已经过滤好的抗生素（100μg/ml kan+50μg/ml Str+50μg/ml rif），以免温度过高导致抗生素失效。
水稻 花粉管通道法
水稻花粉管通道法摘要水稻花粉管通道法是一种高效、实用的遗传转化方法，广泛应用于水稻遗传改良。
本文介绍了水稻花粉管通道法的原理、技术流程、优缺点以及应用前景，以期为相关研究提供参考。
一、引言水稻是全球重要的粮食作物之一，对人类生活和经济发展具有重要意义。
为了提高水稻产量和品质，科学家们不断探索新的遗传改良方法。
其中，花粉管通道法是一种具有广泛应用前景的遗传转化方法。
二、原理花粉管通道法的基本原理是利用植物的花粉管通道，将外源基因导入植物受精卵中，实现基因的转移和表达。
在花粉与卵细胞结合形成受精卵的过程中，花粉管会穿过卵细胞壁，与卵细胞融合。
此时，外源基因可以通过花粉管通道进入受精卵，并随受精卵的发育而表达。
三、技术流程1. 基因构建：首先，将目标基因与合适的载体连接，构建成表达载体。
2. 载体转化：将构建好的表达载体导入植物细胞或原生质体中，获得转基因细胞或原生质体。
3. 细胞培养：将转基因细胞或原生质体进行培养，筛选出转化成功的细胞或原生质体。
4. 植株再生：将转化成功的细胞或原生质体培养成植株，并进行表型鉴定和分子检测。
5. 遗传稳定性检测：对转基因植株进行多代繁殖，检测其遗传稳定性。
四、优缺点1. 优点：花粉管通道法具有操作简便、转化效率高、适用范围广等优点。
此外，该方法不需要组织培养和病毒载体等辅助手段，降低了实验成本和操作难度。
2. 缺点：花粉管通道法也存在一些缺点，如转化过程中可能存在基因沉默现象、转化植株的遗传稳定性有待进一步验证等。
此外，该方法对环境可能产生一定影响，需要加强安全性和可持续性方面的研究。
五、应用前景随着基因编辑技术的发展和应用，花粉管通道法在基因功能验证、新品种培育等方面具有广阔的应用前景。
未来，科学家们可以进一步优化花粉管通道法技术流程，提高转化效率和安全性，为水稻遗传改良提供更加高效、实用的方法。
同时，随着人们对食品安全和环境保护意识的提高，对转基因作物的监管和审批也将更加严格。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
植物转基因的操作流程
1.制备基因载体：首先要确定所需转入植物的基因，然后将该基因克隆到适当的基因载体中，如农杆菌介导的转化系统中常用的质粒载体。
2. 构建转化质粒：将基因载体与其他必需的元件如启动子、终止子、选择标记等组装成转化质粒。
3. 制备植物材料：选择合适的植物作为转基因植物的母本，如经济作物或模式植物。
4. 农杆菌介导的转化：将构建好的转化质粒通过农杆菌注入到植物的叶片、茎或愈伤组织等处，利用农杆菌的生物学特性，在植物细胞中导入转化质粒。
5. 筛选转基因植物：通过在培养基中加入相应的选择标记，筛选出已经被转化的植物细胞，进而培育出转基因植物。
6. 鉴定转基因植物：通过PCR、Southern blot等分子生物学技术鉴定转基因植物是否成功，同时进行表型分析，确定转基因植物的性状和稳定性。
- 1 -。