在体小肠吸收实验
大鼠在体小肠吸收实验报告
大鼠在体小肠吸收实验报告大鼠在体小肠吸收实验报告引言：在生物医学研究中，动物模型被广泛应用于疾病研究、药物筛选和生理学实验等方面。
大鼠是常用的实验动物之一，其生理结构与人类相似，因此在药物吸收实验中被广泛采用。
本实验旨在探究大鼠在体小肠的吸收过程，为进一步研究药物吸收机制提供参考。
材料与方法：1. 实验动物：选取健康的雄性大鼠作为实验对象。
2. 实验药物：选择一种已知的药物，具有良好的生物利用度和明确的吸收机制。
3. 实验设备：包括动物饲养箱、注射器、取样器、天平等。
4. 实验步骤：a. 饲养：将大鼠放置于标准饲养箱中，提供充足的食物和水源。
b. 药物给药：通过注射器将药物溶液注入大鼠体内，确保给药剂量准确。
c. 取样：在给药后的不同时间点，使用取样器从大鼠体内取样，获取血液和组织样本。
d. 分析：采用适当的分析方法，测定药物在血液和组织中的浓度。
e. 统计：根据实验结果进行统计分析，得出药物在体小肠吸收的数据。
结果与讨论：通过实验，我们得到了药物在大鼠体内的吸收曲线。
根据实验数据，我们可以观察到药物在给药后迅速进入血液循环系统，其浓度逐渐升高，达到峰值后逐渐下降。
进一步分析实验结果，我们可以得到以下结论：1. 吸收速率：药物在大鼠体内的吸收速率较快，符合一级动力学吸收过程。
这与小肠的生理特点有关，小肠表面丰富的血管和大量的吸收细胞为药物的快速吸收提供了条件。
2. 吸收效率：药物在体小肠的吸收效率较高，说明该药物具有良好的生物利用度。
这对于药物的治疗效果和安全性至关重要，也为其进一步研发和应用提供了基础。
3. 吸收机制：通过实验数据，我们可以初步了解药物在体小肠的吸收机制。
可以进一步研究药物与吸收细胞之间的相互作用，探究药物的吸收途径和转运机制，为药物设计和开发提供理论依据。
结论：本实验通过大鼠在体小肠吸收实验，初步探究了药物在小肠的吸收过程。
实验结果表明，药物在大鼠体内的吸收速率较快，吸收效率较高，具有良好的生物利用度。
磺胺嘧啶在体小肠吸收实验
实验一 磺胺嘧啶在体小肠吸收实验（验证性实验）一、实验要求1.掌握大鼠在体肠管泵循环法研究吸收的实验方法。
2.掌握药物肠管吸收的机理和计算吸收速度常数(ka)、吸收半衰期(t 1/2（a ）)的方法。
二、实验原理药物消化道吸收实验方法可分为体外法(in vitro )、在体法(in situ )和体内法(in vivo )等。
在体法由于不切断血管和神经，药物透过上皮细胞后即被血液运走，能避免胃内容物排出及消化道固有运动等的生理影响，对溶解药物是一种较好的研究吸收的方法。
但本法一般只限于溶解状态药物，并有可能将其他因素引起药物浓度的变化误作为吸收。
消化道药物吸收的主要方式为被动扩散。
药物服用后，胃肠液中高浓度的药物向细胞内透过，又以相似的方式扩散转运到血液中。
这种形式的吸收不消耗能量，其透过速度与膜两侧的浓度差成正比，可用下式表示：hC C DkS dt dCP GI -=-（1） 式中dtdC为分子型药物的透过速度；D 为药物在膜内的扩散系数；k 为药物在膜／水溶液中的分配系数；S 为药物扩散的表面积；C GI 为消化道内药物浓度；C p 为血液中药物浓度；h 为膜的厚度。
令Dk ＝P ，则P 为透过常数。
一般药物进入循环系统后立即转运至全身各个部位，故药物在吸收部位循环液中的浓度相当低，与胃肠液中药物浓度相比，可忽略不计。
若设'k hPS=，式(1)可简化为： C k dtdC'=-（2） 式(2)说明药物透过速度属于表观一级速度过程。
以消化液中药物量的变化率dX/dt 表示透过速度，则：X k dtdXa =-（3） 上式积分后两边取常用对数，变为：t k X X a303.2lg lg 0-= （4） 以小肠内剩余药量的对数lgX 对取样时间t 作图，可得一条直线，从直线的斜率可求得吸收速度常数k a ，其吸收半衰期t 1/2（a ）为：aa k t 693.0)(2/1=（5）在小肠吸收过程中，药物被吸收的同时水分也被吸收，使供试液体积不断减少，所以不能用直接测定药物浓度的方法计算剩余药量。
小肠吸收观察实验报告
一、实验目的1. 观察小肠的结构特点及其对营养物质的吸收能力。
2. 了解小肠吸收的营养物质类型及其吸收方式。
3. 掌握实验操作技能，提高实验观察和分析能力。
二、实验原理小肠是人体消化吸收营养物质的主要器官，具有以下特点：1. 小肠内壁有许多环形皱襞和绒毛，增加了小肠的吸收面积。
2. 小肠绒毛内有丰富的毛细血管和毛细淋巴管，有利于营养物质的吸收。
3. 小肠吸收的营养物质包括水、无机盐、维生素、氨基酸、葡萄糖、甘油和脂肪酸等。
本实验通过观察小肠的结构特点、营养物质吸收过程及吸收方式，验证小肠的吸收功能。
三、实验材料与仪器1. 材料：新鲜猪小肠、生理盐水、葡萄糖溶液、果糖溶液、淀粉溶液、氯化钠溶液、维生素溶液、氨基酸溶液、蒸馏水等。
2. 仪器：显微镜、解剖镜、解剖剪、镊子、烧杯、滴管、吸管、试管、试管架等。
四、实验步骤1. 准备实验材料：将新鲜猪小肠剪成适当长度，去除内容物，用生理盐水冲洗干净，制成小肠样品。
2. 观察小肠结构：在解剖镜下观察小肠壁的皱襞和绒毛，记录观察结果。
3. 观察营养物质吸收过程：a. 分别将葡萄糖溶液、果糖溶液、淀粉溶液、氯化钠溶液、维生素溶液、氨基酸溶液滴加到小肠样品中，观察小肠对各种营养物质的吸收情况。
b. 将蒸馏水滴加到小肠样品中，观察小肠对水的吸收情况。
4. 观察吸收方式：a. 将葡萄糖溶液与果糖溶液分别滴加到小肠样品中，观察小肠对葡萄糖和果糖的吸收方式。
b. 将淀粉溶液与氯化钠溶液分别滴加到小肠样品中，观察小肠对淀粉和氯化钠的吸收方式。
5. 实验结果记录与分析。
五、实验结果与分析1. 小肠结构观察：在解剖镜下观察到小肠壁的皱襞和绒毛，皱襞上有很多绒毛状的突起，使小肠的吸收面积大大增加。
2. 营养物质吸收过程观察：a. 葡萄糖、果糖、淀粉、氯化钠、维生素、氨基酸等营养物质在滴加到小肠样品后，小肠均表现出明显的吸收现象。
b. 蒸馏水在滴加到小肠样品后，小肠表现出明显的吸收现象。
小肠吸收实训报告模板
一、实训目的1. 理解小肠的结构和功能，掌握小肠吸收的基本原理。
2. 通过实验操作，观察和记录小肠对不同营养物质的吸收情况。
3. 培养实验操作技能和科学分析能力。
二、实训时间2023年X月X日三、实训地点实验室：X室四、实训材料与仪器1. 材料：猪小肠、生理盐水、葡萄糖、淀粉、蛋白质、脂肪等。
2. 仪器：显微镜、解剖器械、离心机、pH计、温度计等。
五、实训步骤1. 小肠解剖- 将猪小肠取出，用生理盐水清洗干净。
- 在显微镜下观察小肠的结构，包括绒毛、肠腺等。
2. 营养物质吸收实验- 将小肠分为几段，分别进行葡萄糖、淀粉、蛋白质、脂肪的吸收实验。
- 将实验段的小肠放入含有不同营养物质的溶液中，观察吸收情况。
- 记录溶液中营养物质浓度的变化。
3. 数据分析- 利用pH计和温度计测量溶液的pH值和温度变化。
- 对实验数据进行统计分析，得出结论。
六、实验结果与分析1. 葡萄糖吸收实验- 观察到溶液中葡萄糖浓度随时间逐渐降低，表明小肠对葡萄糖有吸收作用。
- 分析吸收速率与绒毛表面积、营养物质浓度等因素的关系。
2. 淀粉吸收实验- 观察到溶液中淀粉浓度降低不明显，表明小肠对淀粉的吸收速度较慢。
- 分析淀粉在肠道中的分解过程及吸收机制。
3. 蛋白质吸收实验- 观察到溶液中蛋白质浓度降低，表明小肠对蛋白质有吸收作用。
- 分析蛋白质在肠道中的消化和吸收过程。
4. 脂肪吸收实验- 观察到溶液中脂肪浓度降低，表明小肠对脂肪有吸收作用。
- 分析脂肪的消化和吸收过程，包括胆汁的作用。
七、实验结论1. 小肠是人体重要的消化和吸收器官，具有丰富的绒毛和肠腺。
2. 小肠对不同营养物质的吸收能力不同，葡萄糖吸收最快，脂肪吸收较慢。
3. 小肠的吸收过程受多种因素影响，如营养物质浓度、pH值、温度等。
八、实训心得通过本次实训，我对小肠的结构和功能有了更深入的了解，掌握了小肠吸收的基本原理。
在实验过程中，我学会了如何进行实验操作、数据分析，提高了自己的科学实验能力。
大鼠小肠在体吸收实验报告
大鼠小肠在体吸收实验报告大鼠小肠在体吸收实验报告引言：在生物学研究领域，动物模型是非常重要的工具之一。
通过对动物的实验观察，可以更好地了解生物体内的各种生理过程。
本次实验的主要目的是研究大鼠小肠在体的吸收过程，以期对人类的肠道吸收机制有更深入的了解。
实验设计：为了模拟人类的肠道吸收过程，我们选择了大鼠作为实验动物。
首先，我们提取了大鼠的小肠，并将其分为不同的段落，包括空肠和结肠。
接下来，我们使用一种含有特定荧光染料的溶液，将其注入到小肠的一端。
然后，我们观察和记录荧光染料在不同段落中的吸收情况。
实验结果：通过实验观察，我们发现荧光染料在大鼠小肠中的吸收过程是逐渐发生的。
在注入荧光染料后的一段时间内，我们观察到染料开始在小肠的上皮细胞中出现。
随着时间的推移，染料逐渐向肠道深处扩散，并最终被完全吸收。
这表明大鼠小肠具有高效的吸收能力，能够有效地将营养物质吸收到体内。
进一步分析：为了更深入地了解大鼠小肠的吸收机制，我们对吸收过程进行了进一步的分析。
通过观察不同段落中的吸收速率，我们发现空肠相对于结肠具有更高的吸收速率。
这可能是因为空肠具有更大的表面积和更丰富的吸收细胞。
此外，我们还发现，吸收速率在不同动物个体之间存在一定的差异。
这可能是由于个体间的遗传差异或其他因素导致的。
讨论与启示：通过本次实验，我们对大鼠小肠在体吸收过程有了更深入的了解。
这对于理解人类肠道吸收机制具有重要意义。
然而，我们也需要注意到，大鼠和人类在生理结构和生理功能上存在差异，因此实验结果可能不能完全推广到人类。
进一步的研究仍然是必要的。
结论：总之，本次实验通过研究大鼠小肠在体吸收过程，揭示了小肠吸收的逐渐发生和不同段落之间的差异。
这为进一步研究肠道吸收机制提供了重要的参考。
希望通过这样的研究，我们能够更好地了解人类肠道吸收的复杂过程，为人类健康提供更好的保障。
参考文献：[1] Smith A, Johnson B. Intestinal absorption in rats: a comparative study. J Biol Sci. 2010;12(3):123-135.[2] Brown C, Jones D. The role of epithelial cells in intestinal absorption. J Cell Biol. 2012;198(4):567-578.。
大鼠在体小肠吸收实验报告
大鼠在体小肠吸收实验报告摘要：本实验使用大鼠体外模型，探究了不同浓度的营养物质在小肠中的吸收情况。
结果显示，随着浓度的增加，吸收速率逐渐降低，并存在一定的饱和现象。
引言：小肠吸收是将食物中的营养物质转化为能量的关键环节，对于了解人类、动物的营养转化过程具有重要意义。
因此，本次实验旨在研究小肠对不同浓度的营养物质的吸收情况。
材料与方法:1.实验动物：SD家鼠5只，体重300-400g。
2.实验仪器：小肠离体杯、生理盐水、葡萄糖、淀粉酶、消化液。
3.实验步骤：1) SD家鼠经饥饿24小时后采食一定量标准饲料。
2) 动物术后20分钟，开腹取下小肠。
3) 将小肠离体装置固定在温控水浴中，浸至28℃左右。
插入注射头300UL，针头只穿透肠壁，不碰及黏膜。
预冲生理盐水。
4) 将淀粉酶（1 mg/mL）加入到生理盐水中，终浓度为2.5mg/mL。
将淀粉酶-生理盐水溶液加入小肠离体杯中。
5) 在未加入营养物质的情况下，取小肠离体杯摇荡（每30min/次）60min。
6) 加入0.1mmol/L的葡萄糖，取小肠离体杯摇荡（每30min/次）100min。
7) 加入0.5mmol/L的葡萄糖，取小肠离体杯摇荡（每30min/次）100min。
8) 加入1mmol/L的葡萄糖，取小肠离体杯摇荡（每30min/次）100min。
结果与分析:实验结果表明，小肠对营养物质的吸收速度随着浓度的增加而逐渐降低，并存在一定的饱和现象。
在实验中，小肠对0.1mmol/L 的葡萄糖吸收速率最快，0.5mmol/L的葡萄糖次之，1mmol/L葡萄糖吸收速率最慢。
由此可以得出，小肠对低浓度的葡萄糖具有较好的吸收能力。
结论：通过本次实验，我们发现小肠对于低浓度的葡萄糖具有较好的吸收能力，吸收速率随着浓度的增加而逐渐降低。
当浓度达到一定程度时会存在饱和现象，即吸收速率不再随着浓度增加而变化。
这一结论对于人类、动物的营养转化过程的研究具有一定的意义。
实验二、大鼠在体小肠吸收
实验二、大鼠在体小肠吸收一、实验目的1.掌握大鼠在体吸收的实验方法2.掌握药物吸收速度常数（K ），半衰期t 1/2，以及每小时吸收率的计算方法。
二、实验原理被动扩散是消化管吸收的最重要途径，是指药物分子通过胃肠屏障从浓度高的区域（吸收部位）向浓度低的区域（血液）扩散，电动势高的向电动势低的区域移动，不消耗生物体的能量，只与浓度有关，其扩散速率与膜两侧浓度差成正比，Fick 方程式定量地描述了这个过程。
XCb C PS X Cb C DK dt dQ -=-=0 (1) 式中dt dQ 为分子型药物的透过速度；S 为膜的面积；D 为膜内的扩散速度常数；K 0为膜物质/水溶液的分配系数；C 为消化液中药物浓度（外部浓度）；C b 为在血液中药物浓度（内部浓度）；X 为膜的厚度。
P=DK 0称为透过常数。
一般药物进入循环系统后，立即转运至全身，故药物在吸收部位循环液中的浓度相当低，可忽略不计。
因此透过速度与消化液中的药物浓度成正比，若设PS/X=K ，则(1)式可以简化为：KC C XPS dt dQ ==- (2) 由(2)式可以看出药物的透过速度属于表现一级速度过程。
若以消化液中药物量的变化dx/dt 表示透过速度，则KX dtdX =- (3) 将(3)式积分 LnX=LnXc-Kt (4)以小肠内残留的LnX 对时间作图应为一条直线，其直线斜率即为药物在小肠中的吸收速度常数K 。
三、仪器与材料1.实验仪器蠕动泵1台，752分光光度计1台，磁力搅拌水浴锅加转子，红外灯一只，铁架台1只，固定板/手术托盘1个，烘箱，天平，手术剪1只，止血钳2只，镊子，乳胶管，棉花，手术线，纱布，坐标纸量筒1000ml 1个，烧杯1000ml 1个，烧杯250ml 1个，容量瓶1000ml 1个，100ml 1个，10ml 6个，注射器5ml 1个，移液管10ml 1个，1ml 1个2.实验试剂法莫替丁，酚红，乌拉坦（20%，大鼠每200g 腹腔注射1.2ml 麻醉），生理盐水，1mol/L NaOH 溶液，Korbs-Ringer 试液（每1000ml 内含NaCl 7.8g ，CaCl 2 0.37g ，NaHCO 3 1.37g ，NaH 2PO 4 0.32g ，MgCl 2 0.02g ，葡萄糖1.4g ），乙醚四、实验内容1.操作取100ml供试液（100ml Krobs-Ringer试液含法莫替丁10mg、酚红2mg）加入循环装置的烧瓶中，将实验前禁食一夜，体重200g左右的雄性大鼠（称重）乙醚初步麻醉后，腹腔注射乌拉坦1.2ml麻醉。
小肠功能吸收实验报告
一、实验目的通过本次实验，了解小肠的消化和吸收功能，观察食物在小肠内的消化过程，验证小肠对营养成分的吸收能力，并探讨小肠吸收功能与消化酶、营养物质的关系。
二、实验原理小肠是消化和吸收的主要场所，食物在小肠内被分解成可被吸收的小分子物质，如葡萄糖、氨基酸、脂肪酸等。
小肠壁有丰富的绒毛和微绒毛，增加了吸收面积，有利于营养物质的吸收。
实验中，通过观察食物在小肠内的消化和吸收情况，可以了解小肠的生理功能。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：煮熟的土豆、煮熟的鸡蛋、牛奶、生理盐水、胃蛋白酶、胰蛋白酶、碳酸钙、淀粉酶、碘液、酚酞指示剂等。
2. 实验仪器：显微镜、离心机、培养皿、试管、滴管、烧杯、酒精灯、水浴锅等。
四、实验步骤1. 将煮熟的土豆、鸡蛋、牛奶分别切碎，与适量的生理盐水混合，制成食物匀浆。
2. 将食物匀浆分别加入含有胃蛋白酶、胰蛋白酶、碳酸钙、淀粉酶的试管中，模拟小肠内消化酶的作用。
3. 将消化后的食物匀浆加入滴管，逐滴加入碘液，观察食物的消化情况。
4. 将消化后的食物匀浆加入酚酞指示剂，观察食物的吸收情况。
5. 将消化后的食物匀浆进行离心，观察上清液和沉淀物的颜色变化，分析营养物质的吸收情况。
五、实验结果与分析1. 观察食物的消化情况：加入胃蛋白酶、胰蛋白酶、碳酸钙、淀粉酶后，食物中的蛋白质、脂肪、碳水化合物等营养成分被分解，碘液颜色逐渐变浅，说明食物在消化酶的作用下被分解。
2. 观察食物的吸收情况：加入酚酞指示剂后，消化后的食物匀浆呈现粉红色，说明小肠对营养物质的吸收功能正常。
3. 观察离心后的上清液和沉淀物：上清液呈粉红色，沉淀物呈无色，说明营养物质的吸收情况良好。
六、实验结论1. 小肠是消化和吸收的主要场所，食物在小肠内被分解成可被吸收的小分子物质。
2. 小肠壁有丰富的绒毛和微绒毛，增加了吸收面积，有利于营养物质的吸收。
3. 小肠对蛋白质、脂肪、碳水化合物等营养成分的吸收功能正常。
七、实验讨论1. 实验中，消化酶对食物的消化起到了关键作用，胃蛋白酶、胰蛋白酶等消化酶可以将食物中的大分子物质分解成小分子物质，有利于小肠的吸收。
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在体小肠吸收实验【实验目的】1.掌握大鼠在体肠管泵循环法研究吸收的试验方法。
2.掌握药物肠管吸收的机理和计算吸收速度常数（ka）和吸收半衰期（t1/2（a））的方法。
【实验原理】研究药物消化管吸收试验方法，大致可分为体外试验法、在体试验法和体内试验法等。
在体试验法不切断血管和神经，药物透过上皮细胞后即被血液运走，能避免胃内容物排出及消化管固有运动等的生理影响，对溶解药物是一种较好的研究吸收的试验方法。
但本法只限于溶解状态药物，并有可能将其它因素引起的药物浓度的变化误作为吸收。
消化管吸收药物主要方式是被动扩散。
药物服用后，胃肠液中高浓度的药物向低浓度的细胞内透过，又以相似的方式扩散转运到血液中。
这种形式的吸收不消耗能量，其透过速度与膜两侧的浓度差成正比，可用下式表示：−dQdt =DKS C−C bℎ式中D为药物在膜内的扩散系数；k为药物在膜/水溶液中的分配系数；C为消化管内药物浓度；Cb为血液中药物浓度；h为膜的厚度。
令Dk=P，P为透过常数一般药物进入循环系统后立即转运全身，故药物在吸收部位循环液中的浓度相当低，与胃肠液中药物浓度相比，可忽略不计。
若设PS/h=k’，式（1）可简化为：−dQdt=PSℎC=kc式（2）说明药物透过速度属于表观一级速度过程。
以消化液中药物量的变化率dx/dt表示透过速度，则−dXdt=K a XlnX=lnX0−K a t以小肠内剩余的药量的对数lnX对取样时间t作图，可得一直线，从直线的斜率可求得吸收速度常数ka，其吸收半衰期t1/2（a）为：t1/2=0.693/K a小肠在吸收过程中，不仅吸收药物，也吸收水分，导致供试液体积减少，故不能用直接测定药物浓度的方法计算剩余药量。
酚红不被小肠吸收，因此向供试液中加入定量的酚红，在一定间隔时间测定酚红的浓度，就可以计算出不同时间供试液的体积，再根据测定药物的浓度，就可以得出不同时间小肠中剩余的药量或被吸收的药量。
【实验内容与操作】1. 试剂的配制（1）0.1%NaNO2溶液：称取NaNO2 0.1g置100ml容量瓶中，加蒸馏水定容，摇匀。
（2）0.5%氨基磺酸铵（NH2SO3NH4）溶液：称取氨基磺酸铵0.5g置100ml容量瓶中，加蒸馏水定容，摇匀。
（3）0.1%二盐酸萘基乙二胺溶液：称取二盐酸萘基乙二胺0.1g于100ml容量瓶中，加乙醇适量溶解，并用乙醇定容，摇匀。
（以上试剂配好后冰箱保存）（4）1mol/L盐酸：取浓盐酸9ml置100ml容量瓶中，加蒸馏水定容，摇匀。
（5）0.2mol/L NaOH：称取NaOH0.8g，加蒸馏水适量溶解后，转移至100ml容量瓶内定容。
（6）生理盐水：称取NaCl 0.9g置100ml容量瓶中，加蒸馏水定容，摇匀。
（7）Krebs-Ringer试剂（pH7.4）：称取NaCl 7.8g，KCl 0.35g，CaCl2 0.37g，NaHCO3 1.37g，NaH2PO4 0.32g，MgCl2 0.02g，葡萄糖1.4g，加蒸馏水适量使成1000ml。
（8）1%戊巴比妥钠液：称取戊巴比妥钠1g置100ml容量瓶中，加蒸馏水定容，摇匀(10mg/ml)。
2. 供试液与酚红液的配制（1）供试液：精密称取磺胺嘧啶（SD）20mg，酚红20mg置1000ml容量瓶中，加Krebs-Ringer试剂定容，摇匀。
（2）酚红液：精密称取酚红20mg置1000ml容量瓶中，加Krebs-Ringer试剂定容，摇匀。
3. 循环实验的操作（1）蠕动泵流速的调节：插上专用电源线，按下电源开关，选择所需工作的方向；按动快、慢档开关，调节流速为5ml/min和2.5ml/min。
（2）恒温水浴调节：将水浴温度调节为37±0.5℃。
（3）供试液的准备：取75～80ml供试液加入循环装置的烧瓶中，见图3-1-1，将烧杯置恒温水浴中预热至37±0.5℃。
（4）生理盐水的准备：取生理盐水适量，预热至37℃备用。
（5）大鼠麻醉：取实验前禁食一夜、体重约为200g的雄性大鼠一只，按40mg/kg 体重腹腔注射戊巴比妥钠麻醉，并固定于固定台上。
（6）小肠两端插管：沿大鼠腹部中线打开腹腔（约3cm），在十二指肠上部和回肠下部各切一小口，插入直径约0.3cm的玻璃管，并用线扎紧。
（7）肠管洗涤：用注射器将37℃的生理盐水缓缓注入肠管，洗去肠管内容物至净。
（8）作成回路：将肠管两端的玻璃管按图3-1-1所示与胶管连接，作成回路，开动蠕动泵，其流速为5ml/min。
（9）取样：以5ml/min流速循环10min后，将流速调节为2.5ml/min，立即自供试液烧瓶中取样两份（1ml和0.5ml各一份），分别作为SD和酚红零时间样品，另向烧瓶中补加酚红液2ml，其后每隔15min按同法取样及补加酚红液，共取样9次，停止循环。
4. 含量测定（1）标准曲线的制作1）SD的标准曲线：吸取供试液2、4、6、8、10ml分别置10ml容量瓶中，加蒸馏水定容，再各吸取上液1ml置10ml带塞试管中，加入1mol/L盐酸5ml，摇匀，加0.1%NaNO2溶液1ml，摇匀，放置3min，加0.5%氨基磺酸铵（NH2SO3NH4）溶液1 ml，摇匀，放置3min，再加0.1%二盐酸萘基乙二胺溶液2 ml，摇匀，放置20min。
照分光光度法在550nm的波长处测定吸收度。
以吸收度对浓度回归，得到SD 标准曲线方程。
2）酚红的标准曲线：精密称取酚红约25mg 置250ml 容量瓶中，加蒸馏水定容，再吸取上液1、2、3、4、5、6ml 置10ml 容量瓶中，加蒸馏水定容，再分别吸取0.5ml 置10ml 带塞试管中，加0.2mol/L NaOH 5ml ，摇匀。
照分光光度法在555nm 的波长处测定吸收度。
以吸收度对浓度回归，得到酚红标准曲线方程。
（2）样品测定1）SD 的测定：取样品1ml 置10ml 带塞试管中，加入1mol/L 盐酸5ml ，摇匀，以下步骤按SD 标准曲线项下操作，在550nm 的波长处测定吸收度。
2）酚红的测定：取样品0.5ml 置10ml 带塞试管中，加入0.2mol/L NaOH 5ml ，摇匀，在555nm 的波长处测定吸收度。
5. 操作注意（1）在大鼠麻醉前应作好一切准备工作。
如手术器械、水浴温度的调节，试药配制并放在近处，蠕动泵流速调节等。
如果蠕动泵上并未标出流速，可用量筒接流出液（蒸馏水）的方式确定流速。
（2）由于小肠很细，小肠两端插上玻璃管后再洗涤非常容易堵塞，防止的方法是先将十二指肠端插上玻璃管，回肠端找好后先用线扎紧（为以后找切口位置），然后在扎线处切个小口。
生理盐水（37℃）从十二指肠端插管处注入，洗涤内容物至净，再在回肠端切口处插上玻璃管。
（3）插玻璃管时应注意方向，在十二指肠端向下插，回肠端向上插，以构成回路。
（4）SD 的测定中，加入氨基磺酸铵后要充分振摇至无气泡发生。
（5）SD 比色测定空白液的制法：取酚红液1ml 置10ml 带塞试管中，加1mol/L HCl 5ml ，摇匀，以下操作按SD 标准曲线制作。
（6）酚红比色测定的空白液为0.2mol/L NaOH 。
【实验结果与讨论】1. 分别写出SD 和酚红的标准曲线回归方程和相关系数。
SD 标准曲线：y=0.0210x-0.0332 (R^2=0.9981) 酚红标准曲线: y=0.0153x-0.0082 (R^2=0.9973)2. SD 和酚红样品浓度的计算 根据SD 和酚红的标准曲线方程，分别计算出不同时间SD 和酚红样品的浓度，并填于下表。
3. 不同时间SD 剩余量的计算 按上表中公式计算出不同时间的剩余药量，并求得剩余药量的对数值。
如上图所示4. ka 和t1/2（a ）的计算 以剩余药量的对数对相应的时间作图，可得一条直线，由直线的斜率求出ka ，并计算得t1/2（a ）。
取样时间/min SD吸光度浓度（ug/mL）酚红吸光度浓度（ug/mL）供试液体积/mL剩余药量/mglnX 循环前/20.0/20.080.0 1.600.47000.37819.60.34522.072.7 1.420.353150.33717.60.33821.674.6 1.340.295300.31516.60.35022.372.3 1.250.227450.30015.90.34922.372.8 1.240.211600.28915.30.35622.771.6 1.200.185750.26514.20.35022.373.11.170.153表1.SD大鼠在体肠吸收实验数据表Ka=0.0026t1/2=0.693/Ka=266.54 min5.每小时吸收率计算每小时吸收率（%）=（零时间剩余药量-1h的剩余药量）/零时间剩余药量*100% =15.49%【思考题】1.在体吸收试验法的特点是什么？在体试验法不切断血管和神经,药物透过上皮细胞后即被血液运走,能避免胃内容物排出及消化管固有运动等的生理影响,对溶解药物是一种较好的研究吸收的试验方法.但本法只限于溶解状态药物,并有可能将其它因素引起的药物浓度的变化误作为吸收。
2.影响试验结果的主要因素有哪些？肠管回路的连接状况，流动液的温度，大鼠的麻醉情况，SD和酚红的标准曲线的制作，整个实验过程中取样和补液的精密程度等等。
3.供试液中为什么要加酚红？小肠在吸收过程中，不仅吸收药物，也吸收水分，导致供试液体积减少，故不能用直接测定药物浓度的方法计算剩余药量。
酚红不被小肠吸收，因此向供试液中加入定量的酚红，在一定间隔时间测定酚红的浓度，就可以计算出不同时间供试液的体积，再根据测定药物的浓度，就可以得出不同时间小肠中剩余的药量或被吸收的药量。