大肠杆菌分型依据 - 360文档中心

第10章 1 肠杆菌科及大肠埃希菌

三、共同特性
（一）形态（二）培养
需氧或兼性厌氧在普通培养基和麦康凯培养基上生长良好，形成光
滑、湿润、灰白色、中等大小（2mm~3mm）的 S型菌落。在液体培养基上呈均匀混浊生长。生长温度：
大多22-35℃，部分22-28℃：耶尔森菌属、哈夫尼亚菌属、致病杆菌属、
光杆菌属
培养特性：
苯丙氨酸
+ + + －－－－－－－－－－
葡萄糖酸盐
－－－ + + + + －－－－－－
第一节埃希菌属（Escherichia）
一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验
一分类
大肠埃希பைடு நூலகம்（E .coli）：
肠道G-的主要成员，重要的条件致病菌卫生学中，常用作被粪便污染的检测指标在分子生物学和基因工程研究中发挥重要作用
三、共同特性
（一）形态（二）培养（三）生化特征（四）抗原构造（五）变异性（六）抵抗力
三、共同特性
（一）形态
均为革兰阴性杆状或球杆菌，大小为 0.5μm~1.0μmｘ2μm~3μm。
无芽胞，多有鞭毛能运动（除克雷伯菌属、志贺菌属）
致病性菌株多数有菌毛。部分菌株有微荚膜或包膜多数菌具有F、R、Col等质粒
（一）形态（二）培养（三）生化特征（四）抗原构造（五）变异性
S-R变异 H-O变异其他变异
1.S-R变异
菌落由光滑型到粗糙型的变异
1.S-R变异 2.H-O变异
鞭毛从有到无的变异
3.其他变异
转导，溶原性转换或接合等转移遗传信息
耐药菌株的形成细菌产生毒素、抗原性和生化反应等特征上发生

埃希菌属(大肠杆菌 E .

EHEC EAEC
大肠小肠
出血性结肠炎、噬菌体编码的尿毒症志贺样毒素婴儿水泻质粒介导的侵袭行粘附
肠产毒性大肠杆菌（ETEC）肠毒素
1. 不耐热肠毒素（heat-labile enterotoxin, LT） 2. 耐热肠毒素（heat-stable enterotoxin,ST） 3.菌毛，亦称定植因子抗原菌毛，（colonization factor antigen,CFA）
埃希菌属（大肠杆菌 E . coli）
大肠杆菌血清型分类
O 抗原 173种 H 抗原 56种 K 抗原 >100种
表示方式 O:K:H
如 O111:K58:H2
致泻性大肠埃希菌致泻性大肠埃希菌埃希
大肠埃希菌 ETEC EIEC EPEC 作用部位小肠大肠小肠所致疾病玈行者、幼儿水泻成人、儿童菌痢样腹泻婴儿腹泻作用机理质粒编码的毒素LT、ST 质粒介导的侵袭行粘附质粒介导的侵袭行粘附
– 肺炎克雷伯菌
医院内感染的重要病原
菌
变形杆菌属 (Proteus) 肠杆菌属 (Enterobacter):常见的环境菌群条件致病菌沙雷菌属
其他肠道杆菌ห้องสมุดไป่ตู้
枸橼酸菌属葡萄糖非发酵杆菌
– – – – – –
艾肯菌属黄杆菌属不动杆菌属产碱杆菌属无色杆菌属
……
变
形
杆
菌
（Proteus）
特性：特性：革兰杆菌，革兰杆菌，周身鞭毛，鞭毛，迁徙性生长尿素酶（尿素酶（苯丙氨酸脱氨酶）氨酶）试验阳性
埃希菌属（大肠杆菌 E . coli）
一、正常菌群：拮抗致病菌定居，正常菌群：拮抗致病菌定居，产生Vit B，Vit K。二、条件致病菌：机体抵抗力下降，条件致病菌：机体抵抗力下降，细菌移出肠外。细菌移出肠外。三、食品与水源被粪便污染的检测指标：食品与水源被粪便污染的检测指标：饮用水: < 3 / 1L，汽水、果汁: < 5 / 100ml 汽水、四、分子生物学研究的重要实验材料：分子生物学研究的重要实验材料：载体菌，提供内切酶。载体菌，提供内切酶。五、致病性大肠杆菌

2020大肠杆菌的分型方法及其研究进展

2020大肠杆菌的分型方法及其研究进展肠埃希氏菌是一种条件性致病菌，致病性的大肠埃希氏菌具有高度的传染性，会严重危害健康。

快速准确地测定大肠埃希氏菌的污染来源对有效缩小疫情影响范围极有帮助，从而避免对人类健康和经济贸易造成重大损失。

建立简便高效的分型方法是微生物溯源的关键，常见的大肠埃希氏菌分型方法可分为表型分型和分子分型，这些分型方法各有优劣，具有不同的适用范围。

大肠埃希氏菌(Escherichia coli，E. coli)又称大肠杆菌，属革兰氏阴性菌，于1885年首次被发现[1]，是人和动物体内的正常寄居菌。

大肠埃希氏菌是一种条件致病菌，在正常情况下不致病，然而一些特殊血清型菌株可导致人或动物腹泻、腹痛甚至会产血性粪便，重症病例会并发溶血性的尿毒综合征以及血小板减少性紫癜[2-3]。

根据大肠埃希氏菌对人类的致病机理不同，可将其分为5种类型：.肠致病性大肠埃希氏菌(Enteropathogenic escherichia coli，EPEC).肠产毒性大肠埃希氏菌(Enterotoxigenic escherichia coli，ETEC).肠侵袭性大肠埃希氏菌(Enteroinvasive escherichia coli，EIEC).肠出血性大肠埃希氏菌(Enterohemorrhagic escherichia coli，EHEC) .肠集聚性大肠埃希氏菌(Enteroaggregative escherichia coli，EAEC) 大肠埃希氏菌的肠道传染具有比较广泛的特性，而食品在生产、包装及运输过程中极易感染此菌，进而引发传染性疾病[5]。

2018年6月，大肠埃希氏菌O157:H7污染生菜事件的暴发，影响了美国36个州，事件造成96人住院和5人死亡[6]。

2019年4月，美国的10个州暴发牛肉感染大肠埃希氏菌O103事件，导致177人感染，其中21人住院，涉事公司紧急召回了53 200磅牛肉[7]。

大肠杆菌

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分子生物学中的应用
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优势方面
大肠杆菌的优势遗传背景清楚
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重组子稳定
载体受体系统完备
生长迅速培养简单
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不足之处
大肠杆菌的不足
型的菌株表现出不同的特性。这些不同基因型特性的菌株在基因工
程的研究和生产中具有广泛的应用价值。
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大肠杆菌的主要基因型
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与基因重组相关的基因型（如recA、recB和recC等）与甲基化相关的基因型（如mcrA、mcrB和C等）与点突变相关的基因型（如mutS、mutT、uvrB等）与核酸内切酶相关的基因型（如hsdR、hsdS和endA等）与终止密码子相关的基因型（如supE和supF）与抗药性相关的基因型（gyrA、rpsl等）
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有益菌群
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• 在不致病的情况下（正常状况下）可认为是互利共生；
• 能合成维生素B和维生素K，对人体有益；
• 能发酵多种糖类，产酸、产气，是人和动物肠道中的正常栖居菌，婴儿出生后即随哺乳进入肠道，与人终身相伴。
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pET 系统。
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pET28载体系统简图
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基因型
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大肠杆菌

大肠菌群测定——MPN法检验几点说明
• MPN检索表： MPN 为最大可能数(Most Probable Number)的简称。这种方法，对样品进行连续系列稀释，加入培养基进行培养，从规定的反应呈阳性管数的出现率，用概率论来推算样品中菌数最近似的数值。MPN检索表只给了三个稀释度，如改用不同的稀释度，则表内数字应相应降低或增加10倍。 • 初发酵和证实试验： 1）两步法进行了两次乳糖发酵试验。初发酵和证实实验所用培养基不同，但都是为了证实培养物是否符合大肠菌群的定义，即“在37℃分解乳糖产酸产气”。 LST中提供了磷酸盐缓冲体系，氯化钠可维持渗透压，月桂基硫酸钠可抑制非大肠菌群的生长，这个缓冲蛋白胨乳糖肉汤允许“缓慢乳糖发酵（Slow lactose fermentations）”来促进菌体产气。BGLB中胆盐和煌绿可以抑制革兰氏阳性细菌和除了大肠菌群的很多革兰氏阴性细菌。 2）初发酵阳性管，不能肯定就是大肠菌群细菌，经过证实试验后，有时可能成为阴性。有数据表明，食品中大肠菌群检验步骤的符合率，初发酵与证实试验相差较大。因此，在实际检测工作中，证实试验是必需的。
biotype 2 + -
reagent
Kovacs’ 甲基红
V-P甲、乙液
-
I M Vi C
生化试验
• 滴加番红复染液，复染1min，水洗、待干、镜检。 • 结果：革兰氏阳性菌呈紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
大肠杆菌测定——生化鉴定
Test Indole MR V-P Citrate
positive negativ e 红色环不变色红色玫瑰红色环生长不变色不变色不生长
biotype 1 + + -
大肠杆菌的生物学特性

大肠杆菌分析课件

常见药物对大肠杆菌的抑菌效果评价
01 02
青霉素类
青霉素类药物对大肠杆菌的抑菌效果较好，但由于大肠杆菌易产生β-内酰胺酶，使其对青霉素类药物产生耐药性，因此临床上常使用酶抑制剂复合制剂来提高治疗效果。
头孢菌素类
头孢菌素类药物对大肠杆菌的抑菌效果也较好，且较少出现耐药性，是临床上治疗大肠杆菌感染的常用药物之一。
03
喹诺酮类
喹诺酮类药物对大肠杆菌的抑菌效果较强，且具有广谱抗菌作用，但由
于大肠杆菌对喹诺酮类药物的耐药性逐渐增加，因此在使用时需要注意
合理用药。
耐药机制研究进展及挑战
要点一
耐药机制研究进展
近年来，随着分子生物学技术的发展和应用，对大肠杆菌耐药机制的研究取得了重要进展。研究发现，大肠杆菌可通过产生β-内酰胺酶、外排泵、改变药物作用靶位等多种方式产生耐药性。此外，基因水平转移也是大肠杆菌获得耐药性的重要途径之一。
比较基因组学研究
物种间比较
通过比较不同大肠杆菌菌株或与其他相关物种的基因组序列，可以揭示物种间的进化关系、基因水平转移等事件。
基因组重排
大肠杆菌基因组在进化过程中可能发生重排事件，如倒位、易位等，这些事件可以通过比较基因组学方法进行检测和分析。
基因家族和同源基因分析
通过比较基因组学方法，可以鉴定大肠杆菌中的基因家族和同源基因，进而研究其功能冗余和适应性进化等问题。
04
大肠杆菌蛋白质组学分析
蛋白质组学技术原理及应用
蛋白质组学技术原理
蛋白质组学是研究生物体内所有蛋白质组成、结构、功能及其相互作用的一门科学。主要技术包括蛋白质分离、鉴定、定量和相互作用研究等。
蛋白质组学技术应用
应用于疾病诊断、药物研发、生物工程、环境科学等领域，如寻找疾病生物标志物、研究药物作用机制、优化蛋白质生产等。

大肠杆菌的基因型-概述说明以及解释

大肠杆菌的基因型-概述说明以及解释1.引言1.1 概述大肠杆菌是一种常见的革兰氏阴性杆菌，属于肠道菌群中的重要成员。

它在自然界和人体内广泛存在，并且具有广泛的基因型多样性。

这使得大肠杆菌成为了微生物遗传学和进化生物学领域的研究模型。

在大肠杆菌中，基因型是指该菌株拥有的基因组合和基因的分布情况。

大肠杆菌的基因型可以通过不同的方法进行分类和鉴定。

目前主要的分类方法包括单核苷酸多态性分析、基因片段分析和全基因组测序等。

通过这些方法，我们可以更全面地了解大肠杆菌的基因型组成和种群结构。

大肠杆菌的基因型在其功能和特点方面具有重要意义。

大肠杆菌是一种典型的益生菌，它在人体内具有多种有益作用，包括帮助消化吸收、维持肠道稳定性和参与免疫调节等。

不同基因型的大肠杆菌可能具有不同的功能特点，比如某些基因型可能携带耐药基因或致病因子，导致感染和疾病的发生。

因此，对大肠杆菌基因型的研究有助于我们深入了解其功能机制和生态适应能力。

总之，大肠杆菌作为一种常见的菌株，其基因型具有多样性和重要性。

通过研究大肠杆菌的基因型，我们可以深入探索其功能特点和生态适应能力，进一步促进微生物遗传学和进化生物学的研究。

未来，我们可以通过结合多样的研究方法和技术，进一步挖掘和解析大肠杆菌基因型的奥秘，并探索其在人体健康和疾病中的作用。

文章结构是指文章部分之间的逻辑关系和组织，它有助于读者理解文章的内容和思路。

本文的结构如下：1. 引言1.1 概述1.2 文章结构1.3 目的2. 正文2.1 大肠杆菌的基因型分类2.2 大肠杆菌基因型的功能和特点3. 结论3.1 大肠杆菌基因型的重要性3.2 未来研究的方向文章结构部分是为了描述本文的组织结构，它有助于读者了解文章的内容安排和逻辑关系。

在本文中，我们首先介绍引言部分，包括概述、文章结构和目的。

在概述中，我们简要介绍了大肠杆菌的基因型。

在文章结构中，我们明确了本文的结构和章节安排，帮助读者理解文章的整体框架。