海马细胞能量代谢仪检测指标
高尿酸血症认知功能障碍模型大鼠皮层和海马的代谢组学研究
网络出版时间：２０２１－１－２６８：３５ 网络出版地址：ｈｔｔｐｓ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３４．１０８６．Ｒ．２０２１０１２５．１４３９．０２０．ｈｔｍｌ高尿酸血症认知功能障碍模型大鼠皮层和海马的代谢组学研究邵晓妮，黑亚南，孙英凯，吴美薇（西南民族大学药学院，四川成都 ６１００４１）收稿日期：２０２０－１１－２０，修回日期：２０２１－０１－１５基金项目：国家自然科学基金资助项目（Ｎｏ８１８０１０８６）；西南民族大学中央高校基本科研业务费专项资金资助项目（Ｎｏ２０１９ＨＱＺＺ１９）作者简介：邵晓妮（１９９０－），女，博士，讲师，研究方向：代谢性疾病分子机制与创新药物研究，通讯作者，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｎｓｈａｏ＠ｓｗｕｎ．ｅｄｕ．ｃｎｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－１９７８．２０２１．０２．０１０文献标志码：Ａ文章编号：１００１－１９７８（２０２１）０２－０１９６－０７中国图书分类号：Ｒ ３３２；Ｒ３２２，８１；Ｒ３３８ ６４；Ｒ４４５ ２；Ｒ５８９ ９摘要：目的 基于核磁共振氢谱（１Ｈ ＮＭＲ）代谢组学方法研究高尿酸血症诱发大鼠认知功能障碍模型的皮层和海马的内源性差异代谢物变化。
方法 采用含２％尿酸和２％氧嗪酸钾的高尿酸复合饲料饲喂大鼠１２周，Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫测定大鼠认知功能，并利用１Ｈ ＮＭＲ分析大鼠皮层和海马中的差异代谢物。
结果 高尿酸血症大鼠显示较长的逃逸潜伏期，表现出认知功能障碍；且大鼠的皮层和海马中分别筛选出２７和１８种差异代谢物，其中共有６种差异代谢物。
γ 氨基丁酸、谷氨酸、谷氨酰胺、乳酸、甘露醇、牛磺酸和谷胱甘肽均有显著变化，可能作为高尿酸血症认知功能障碍的特征生物标志物，与学习、记忆功能损伤的发生和发展密切相关。
结论 高尿酸饮食可干扰机体的正常代谢，其诱发认知功能障碍机制可能与能量代谢的糖酵解和三羧酸循环、氨基酸代谢、氧化应激、神经递质转化以及细胞膜功能的紊乱等有关。
海马脑片诱发场电位的研究处理及应用
、摘要大脑中的海马组织具有自发和诱发的电生理特性，并且在学习、记忆和癫痫发病中具有起搏点的作用，因此海马脑片成为人们在神经生理学和神经药理学领域常用的实验对象。
本文针对离体海马脑片诱发场皇焦进行了分析，开发了一个适用于神经电生理实验的自动信号分析系统。
它可以自动、快速地测出海马脑片诱发场电位的时域参数，如：幅度、面积、潜伏期等，同时也可以对信号进行频域分析和处理。
此外，系统还具有统计功能，可以方便的对实验数据进行统计，并以图形表示出来，具有良好的人机界面。
该系统不仅适用于离体脑片实验，同时也可以对在体脑部信号进行分析检测，可以做为神经电生理实验的辅助工具。
应用本系统，我们以离体海马脑片为实验对象，对咝的毽鲎塞控作用进行了研究，结果表明，酸枣仁粗提物中的皂甙Ａ可以减小群蜂电位（ＰＳ）的幅度和场电位的上升斜率，增加ＰＳ的潜伏期。
具有一定的抑制性作用。
实验表明本系统可以用于评价药物和进行药物作用机理的研究。
ＡｂｓｔｒａｃｔＨｉｐｐｏｃａｍｐａｌｓｌｉｃｅｓｉｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔａｎａｔｏｍｉｃｐａｒｔａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｌｅａｒｎｉｎｇａｎｄｍｅｍｏｒｙａｎｄｔｈｅｐａｃｅｍａｋｅｒｏｆｅｐｉｌｅｐｓｙ．Ｓｏｍｏｓｔｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｉｓｔａｎｄｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｓｔｆｏｃｕｓｔｈｅｉｒｒｅｓｅａｒｃｈｗｏｒｋｏｎｉｔ．Ｉｎｍｙｒｅｓｅａｒｃｈｗｏｒｋ，ｆｉｅｌｄｐｏｔｅｎｔｉａｌｏｆｂｒａｉｎｓｌｉｃｅｓｈａｓｂｅｅｎａｎａｌｙｚｅｄａｎｄｐｒｏｃｅｓｓｅｄ．Ｉａｌｓｏｄｅｖｅｌｏｐｅｄａｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｓｏｆｔｗａｒｅ，ｗｈｉｃｈｃａｎａｕｔｏｍａｔｉｃａｌｌｙｍｅａｓｕｒｅｔｈｅｔｉｍｅｄｏｍａｉｎｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｆｉｅｌｄｐｏｍｎｔｉａｌｆｒｏｍｔｈｅｂｒａｉｎｓｌｉｃｅｓ，ｓｕｃｈａｓａｍｐｌｉｔｕｄｅ，ａｒｅａ，ｌａｔｅｎｃｙｅｔｃ，ｉｔＣａｌｌａｌｓｏｐｅｒｆｏｒｍｔｈｅｆｒｅｑｕｅｎｃｙ－ｄｏｍａｉｎａｎａｌｙｓｉｓ．Ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎｉｓａｎｏｔｈｅｒｆｅａｔｕｒｅｏｆｔｈｅｓｏｆｌｗｖａｌ＇ｅ，ｔｈｉｓｍａｋｅｉｔｖｅｒｙｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．ＴｈｉｓｓｏｆｔｗａｒｅｈａｓａｎｉｃｅＧｒａｐｈｉｃＵｓｅｒＩｎｔｅｒｆａｃｅ，ｖｅｒｙｅａｓｙｔｏｕｓｅ．Ｉｔａｌｓｏｉｎｃｌｕｄｅｓｍａｎｙｆｅａｔｕｒｅｓｏｆｇｅｎｅｒａｌｉｎｔｅｒｅｓｔｔｏｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｉｓｔｓ，ａｎｄｃ４１ｎｂｅｕｓｅｄｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｓｉｇｍａｒｅｃｏｒｄｅｄｆｒｏｍｔｈｅ／ｎｖ／ｒｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．Ｕｓｉｎｇｔｈｉｓｓｙｓｔｅｍ。
Seahorse海马代谢仪使用说明
配制XF细胞线粒体压力测试盒中药物 母液
检测液体积 Oligomycin FCCP Rotenone/Ant imycin A 630 μL 720 μL 540 μL
终浓度 100 μM 100 μM 50 μM
将药物稀释为10×浓度，用于加到加药孔中
1.按左边表格，用3 mL 检测液将 oligomycin稀释为所需浓度（或使 用大多数细胞都适用的1 μM）。
3.放入无CO2的培养箱，37℃过夜（使校准液能浸没在sensors 中；保证培养箱湿度，防止干燥）
培养细胞
1.100ul 培养液收集细胞，按最佳细胞 密度重悬细胞（10,000 - 80,000个细胞/ 孔）。 2.每孔接种100 μL细胞悬液，背景校正 孔（A1, B4, C3, D6）不接种细胞。将 细胞板室温静置在超净台上1 h。
实验当天 准备XF检测液
一个培养板 手动加液需100ml，仪器加液需 200ml
1.使用NaOH调节pH值至7.35±0.05 2.检测液中所需要添加的底物及浓度取决于细 胞类型和实验设计，或者与生长培养基保持一 致。 3.37℃放置备用。
NO sodium bicarbonate Low phenol red (3 mg/L)
Review Run-----Plate Information-----Well Volume-----Plate by----Start Run，放入测试板。当软件出现校准完成提示时，将Utility板 换为细胞培养板。点击Continue。仪器完成OCR值测定，数据分析。
寡霉素：ATP合酶抑制剂； FCCP：解偶联剂 ； 抗霉素A/鱼藤酮：呼吸链抑制剂；
How do I know whether the cell density is good?
sea horse
Sea horse多功能生物能量代谢监测仪创新点：侦测技术的核心是将可以即时侦测培养环境中氧分子以及氢离子浓度变化的光学侦测器整合在可以活动的探针上。
在观测的过程中将探针贴近细胞，seahorse XF能量侦测仪可以及时观测细胞与周边培养环境交换分子的情况以了解代谢系统的变化，侦测完成之后探针会再离开细胞。
完全满足新世纪代谢侦测四不一没有的要求：不用额外的试剂、不会接触细胞，不破坏细胞结构，,易操控。
多功能生物能量代谢监测仪简介：1 世界上唯一一款无损伤实时同步侦测细胞糖酵解与线粒体功能的独步全球技术系统2 固态探针侦测技术:将可以即时侦测培养环境中之氧分子以及氢离子浓度变化的光学侦测器整合在可以活动的探针上。
在观测的过程中将探针贴近细胞，海马XF能量侦测仪可以及时观测细胞与周边培养环境交换分子的情况以了解代谢系统的变化，侦测完成之后探针会再离开细胞。
完全满足新世纪代谢侦测四不一没有的要求：不用额外的试剂、不会接触细胞，不破坏细胞结构，且没有学习门槛。
3 固态光纤传感技术：***灯激发，使用寿命长，独立24根光纤探针，便于单根探针损坏时更换，仪器维护成本低4荧光功能：高效LED光源，参考型光电二极管检测器及发射光电二极管探测器，减少光散射，提高检测数据的准确度5 检测方式：细胞种于专用24孔细胞培养板，细胞均一的贴在培养板的底部，检测过程自动形成7ul的半封闭环境，检测快速灵敏。
6 样品种类：悬浮细胞、贴附细胞、组织、分离的细胞器等7 质量保证：实时动态侦测，内设对照，真实反应细胞的生理状态，保证了实验的真实性。
8 仪器设计：整合式集成控制设计，全程触摸式操作，无杂乱的链接线，节省空间；人性化操作界面，易学易懂；与探针整合的4道自动加药槽，满足不同实验及不同领域的研究需求。
多功能生物能量代谢监测仪主要功能应用：1、Extracellular Acidification Rate （产酸率）糖酵解作用所产生的丙酮酸（pyruvate）经过乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase）反应产生乳酸（lactate），允许细胞在不消耗氧气的情况下快速产生ATP以满足能量需求，测量乳酸的氢离子可以说明无氧代谢的变化。
《膨腹海马(Hippocampusabdominalis)对纳米微塑料污染的生理与分子响应特征研究》
《膨腹海马（Hippocampus abdominalis）对纳米微塑料污染的生理与分子响应特征研究》摘要：本文以膨腹海马（Hippocampus abdominalis）为研究对象，通过对其暴露于纳米微塑料污染环境下的生理与分子响应特征进行深入研究，旨在揭示纳米微塑料对海马生物的潜在影响及其作用机制。
研究采用多种实验方法，包括生理学、分子生物学及基因表达分析等，以期为海洋生态保护及环境保护策略的制定提供科学依据。
一、引言随着工业化的快速发展和人类活动的增加，海洋环境中纳米微塑料污染问题日益严峻。
作为海洋生态系统的重要组成部分，海马是评估环境污染物对海洋生物影响的理想模式生物。
因此，本文以膨腹海马为研究对象，对其在纳米微塑料污染环境下的生理与分子响应特征进行研究。
二、材料与方法（一）实验材料实验用膨腹海马（Hippocampus abdominalis）采集自特定海域，经实验室培养后用于实验。
纳米微塑料采用特定粒径范围的材料。
（二）实验方法1. 暴露实验：将海马暴露于不同浓度的纳米微塑料溶液中，设立对照组。
2. 生理学分析：通过监测海马的呼吸频率、心率、游泳活动等生理参数变化，分析其对纳米微塑料污染的生理响应。
3. 分子生物学分析：利用基因表达分析、蛋白质组学等方法，研究纳米微塑料对海马基因表达及蛋白质表达的影响。
4. 数据分析：采用统计软件对实验数据进行处理和分析。
三、结果与分析（一）生理学响应特征实验结果显示，膨腹海马在暴露于纳米微塑料后，其呼吸频率和心率均出现显著变化。
高浓度纳米微塑料暴露下，海马的游泳活动能力显著下降。
（二）分子响应特征1. 基因表达分析：纳实验发现，暴露于纳米微塑料后，膨腹海马部分基因表达发生明显改变，其中包括与解毒代谢、细胞应激及能量代谢等相关的基因。
2. 蛋白质组学分析：与对照组相比，暴露于纳米微塑料的海马样品中部分蛋白质表达量出现显著变化，这些蛋白质主要涉及能量代谢、细胞应激及免疫反应等方面。
《蛋白磷酸酶1及其DNA甲基化在低氧预适应小鼠海马和神经细胞中的变化情况》
《蛋白磷酸酶1及其DNA甲基化在低氧预适应小鼠海马和神经细胞中的变化情况》一、引言近年来，生物医学研究在深入探索生理及病理过程上取得了重大突破。
其中，蛋白磷酸酶1（PP1）及其DNA甲基化在低氧预适应过程中的作用，引起了科研人员的广泛关注。
本文将就这一主题展开讨论，分析PP1及其DNA甲基化在低氧预适应小鼠海马和神经细胞中的变化情况。
二、蛋白磷酸酶1（PP1）及其作用蛋白磷酸酶1（PP1）是一种在多种细胞中发挥重要作用的丝氨酸/苏氨酸磷酸酶。
它通过去磷酸化过程参与调节各种细胞内过程，包括神经传递、细胞凋亡和细胞生长等。
PP1在神经细胞中的关键作用表现在维持神经元的稳定性和神经网络的可塑性。
三、低氧预适应及其对小鼠海马和神经细胞的影响低氧预适应是一种生理过程，通过模拟低氧环境来提高机体对缺氧的耐受性。
低氧预适应能刺激机体内多种生理生化反应，其中对小鼠海马和神经细胞的影响尤为显著。
海马区是记忆和情感的重要部位，而神经细胞则对维持正常神经功能起着至关重要的作用。
四、蛋白磷酸酶1（PP1）在低氧预适应过程中的变化在低氧预适应过程中，PP1的表达和活性会发生变化。
具体来说，低氧环境会刺激PP1的表达增加，以应对缺氧带来的压力。
这种变化有助于维持神经细胞的稳定性和功能。
然而，这一过程的机制尚未完全明确，需要进一步的研究来揭示。
五、DNA甲基化在低氧预适应过程中的作用DNA甲基化是一种重要的表观遗传学机制，通过改变基因的表达而不改变基因序列来实现对生物过程的调控。
在低氧预适应过程中，DNA甲基化会发生变化，影响PP1和其他相关基因的表达。
这些变化可能对神经细胞的生存、分化和功能产生重要影响。
六、蛋白磷酸酶1（PP1）与DNA甲基化在低氧预适应小鼠海马和神经细胞中的变化情况在低氧预适应过程中，PP1的表达和活性与DNA甲基化之间存在密切的关联。
一方面，PP1的改变可能影响DNA甲基化的模式和程度；另一方面，DNA甲基化的变化也可能影响PP1的表达和活性。
seahorse实验原理
seahorse实验原理Seahorse（海马仪器）是一种流式细胞代谢分析系统，用于评估细胞的呼吸和酸碱平衡。
它可以通过测量氧气消耗和酸碱转化的动力学来确定细胞的能量代谢状态和功能。
Seahorse仪器的工作原理包括以下几个步骤：细胞预处理、装载、测量和分析。
首先，细胞预处理。
细胞在培养基中孵育，通过调整培养条件来激活或抑制细胞代谢途径。
例如，将细胞孵育在低糖或高糖培养基中，以模拟缺氧或高糖环境。
在处理前，细胞需要进行准备，包括洗涤和预处理。
其次，装载。
经过预处理的细胞被装载到Seahorse培养底片的微孔中，通常每个孔有数千个细胞。
装载时要确保细胞均匀分布，以使测量结果准确。
接下来，测量。
Seahorse系统通过将循环的介质通过底片的微小泵浦系统，将细胞与测量区分离。
细胞所在的区域中有传感器，可以测量介质中的氧气和酸碱变化。
在测量期间，根据预设的实验方案，底板内的介质会逐渐变化。
例如，可以通过控制气体组成来调节氧气浓度，并在短时间内迅速改变实验环境。
最后，分析。
Seahorse系统通过测量介质中的氧气和酸碱变化来计算各种细胞代谢参数。
氧气消耗速率（OCR）是一个关键指标，它反映了细胞的呼吸活性。
酸化速率（ECAR）是另一个关键指标，它反映了细胞的酸碱代谢状态。
通过分析OCR和ECAR之间的关系，可以评估细胞的能量代谢状态和功能。
需要注意的是，Seahorse系统只能提供相关的代谢数据，对于潜在的生物学机制的解释需要进一步的研究和分析。
总结起来，Seahorse（海马仪器）通过测量细胞的呼吸和酸碱平衡来评估细胞的能量代谢状态和功能。
它的工作原理包括细胞预处理、装载、测量和分析。
通过分析氧气消耗速率（OCR）和酸化速率（ECAR）之间的关系，可以评估细胞的能量代谢状态和功能。
Seahorse系统为细胞研究提供了一个有力的工具，可以深入了解细胞代谢的机制。
自动血液细胞分析仪检查项目及缩写、正常值表
18中性粒细胞数目gran2078淋巴细胞百分比lymph200400中间细胞百分比mid10150中性粒细胞百分比gran500700红细胞数目rbc3555血红蛋白hgb110160平均红细胞体积mcvfl800990平均血红蛋白含量mchpg260320101012平均红细胞血红蛋白浓度mchc320360红细胞分布宽度变异系数rdwcv115145红细胞分布宽度标准差rdwsdfl350560红细胞压积hct360480血小板数目plt100300平均血小板体积mpvfl60140血小板分布宽度pdw80180血小板压积pct01102810
自动血液细胞分析仪
检查项目及缩写、正常值表
检查项目 白细胞数目 淋巴细胞数目 中间细胞数目 中性粒细胞数目 淋巴细胞百分比 中间细胞百分比 中性粒细胞百分比 红细胞数目 血红蛋白 平均红细胞体积 平均血红蛋白含量 平均红细胞血红蛋白浓度 红细胞分布宽度变异系数 红细胞分布宽度标准差 红细胞压积 血小板数目 平均血小板体积 血小板分布宽度 血小板压积 WBC Lymph# Mid# Gran# Lymph% Mid% Gran% RBC HGB MCV MCH MCHC RDW-CV RDW-SD HCT PLT MPV PDW PCT %
9
缩写
单位 109/L 109/L 109/L 109/L % % % 1012/L g/L FL pg g/L % FL % 10 /L FL
正常值范围 4.0-10.0 0.6-4.1 01.-1.8 2.0-7.8 20.0-40.0 1.0-15.0 50.0-70.0 3.5-5.5 110-160 80.0-99.0 26.0-32.0 320-360 11.5-14.5 35.0-56.0 36.0-48.0 100-300 6.0-14.0 8.0-18.0 0.11-0.28
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海马细胞能量代谢仪检测指标
海马细胞能量代谢仪是一种用于研究细胞代谢能力的仪器，可以测量细胞内氧气消耗和酸性代谢产物产生情况，从而评价细胞的代谢情况。
在癌症、心血管、神经系统等疾病的研究中，海马细胞能量代谢仪已被广泛应用。
下面将介绍几个主要的检测指标。
1. 氧耗率（OCR）
氧耗率是海马细胞能量代谢仪中最基本的指标之一，反映的是细胞内线粒体呼吸链的功能状况。
当线粒体的功能受损时，氧耗率通常会下降。
而在一些代谢异常的疾病中，如2型糖尿病、肥胖症等，氧耗率会升高。
因此，氧耗率的测量可以提供许多疾病的相关信息。
2. 酸性代谢产物产生率（ECAR）
酸性代谢产物产生率是海马细胞能量代谢仪另一个基本的指标。
它反映的是细胞的糖酵解过程中，由于乳酸的产生而导致的酸化程度。
ECAR和OCR是两个相互独立的指标，但在代谢通路受到调节时，ECAR和OCR相互影响。
例如，当细胞从呼吸状态转变为糖酵解状态时，ECAR会升高，而OCR则会下降。
因此，ECAR对研究细胞代谢的调节机制有着重要的意义。
3. 细胞质色素c释放
细胞质色素c是线粒体呼吸链中的一个分子，其在线粒体不足以提供足够的ATP时会释放到细胞质内，参与细胞凋亡的过程。
因此，测量细胞质色素c释放的水平可以判断细胞的凋亡状态。
海马细胞能量代谢仪可以测量细胞质色素c释放的水平，从而用作判断细胞凋亡的一个指标。
4. 能量变化量（ATP）
ATP是细胞内能量的主要来源，海马细胞能量代谢仪可以测量细胞的ATP水平。
ATP水平常常被用来评价药物对细胞的影响。
例如，在心血管疾病的研究中，海马细胞能量代谢仪可以评估药物对心肌细胞ATP水平的影响，从而更好地评价药效。
综上所述，海马细胞能量代谢仪可以提供细胞代谢情况的多种指标，这些指标可以用于评估药物治疗的效果，探究代谢异常所涉及的分子机制，并在疾病诊断和治疗中发挥重要作用。