实验室常用试剂和缓冲液配方
常用缓冲液及培养基配方

常用缓冲液及培养基配方缓冲液和培养基是生物学实验中常用的重要试剂,它们的配方的选择对实验结果有着重要的影响。
下面将介绍几种常用的缓冲液和培养基的配方及其用途。
一、缓冲液配方1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液常被用于细胞培养和生物化学实验中,它的使用范围很广。
常用的磷酸盐缓冲液有PBS(磷酸盐缓冲盐水),配方如下:-NaCl8g-KCl0.2g-Na2HPO41.42g-KH2PO40.24g将以上物质溶解在1L的去离子水中,pH值调到7.4,即可得到1×PBS缓冲液。
2. Tris缓冲液Tris缓冲液在分子生物学实验中常被用作DNA和RNA电泳的产物混合液。
常用的Tris缓冲液有Tris-HCl缓冲液和Tris-acetate缓冲液。
以下是Tris-HCl缓冲液的配方:- Tris 12.1 g-HCl(10M,pH7.6)10mL将Tris和HCl分别溶解在800 mL去离子水中,然后添加水调至1 L,pH值调节到目标值即可。
Tris-acetate缓冲液的配方与Tris-HCl相似,只是在Tris-HCl的基础上添加乙酸。
3. Glycine缓冲液Glycine缓冲液常被用于电泳实验中,用于电泳缓冲液和电泳媒介液的制备。
以下是Glycine缓冲液的配方:- Glycine 3 g- Tris 4.8 g-SDS0.207g-EDTA0.37g将以上物质溶解在1 L的去离子水中,pH值调至8.3,即可得到1×Glycine缓冲液。
1.LB培养基LB培养基是最常用的细菌培养基之一,用于培养大肠杆菌等革兰氏阴性菌。
以下是LB培养基的配方:- Tryptone 10 g- Yeast extract 5 g-NaCl10g将以上物质溶解在1L的去离子水中,加热至溶解,然后进行高压灭菌即可得到LB培养基。
2.M9培养基M9培养基是一种缺乏氮、氨基酸和碳的最小培养基,常被用于重组DNA的传输。
实验室常用试剂缓冲液的配制方法

实验室常用试剂的配制方法2×SDS gel-loading buffer10×PBS10×SDS-PAGE电泳液10×转膜液细胞裂解液□组分浓度 50mM Tris-HCl(pH6.8),100mM DTT,2%SDS,0.1%Bromophenol blue,10%Glycerol□配制量 10ml□配制方法 DTT 0.1572g,Bromophenol blue 0.01g,Tris-HCl(1M pH6.8) 500ul,10% SDS 2ml,Glycerol 1ml,超纯水定容至10ml。
分装后于4度保存。
□组分浓度 NaCl 8%,KCl 0.2%,Na2HPO4.12H2O 2.9%g,KH2PO4 0.2%g□配制量 1L□配制方法称取NaCl 80.0g,KCl 2.0g,Na2HPO4.12H2O29.0g,KH2PO4 2.0g,超纯水定容至1L。
□组分浓度 Tris 250mM,甘氨酸 2M,SDS 1%□配制量 1L□配制方法称取Tris 30.3g,甘氨酸 144.0g,SDS 10.0g,超纯水定容至1L。
□组分浓度 Tris 250mM,甘氨酸 2M□配制量 1L□配制方法称取Tris 30.3g,甘氨酸 144.0g,超纯水定容至1L。
注意:1×转膜液的配制为100ml 10×转膜液,200ml甲醇定容至1L。
□组分浓度 NaCl 150mM,NP-40 0.5%,Tris-HCl 10mM,PMSF 0.1mM, aprotimin 2ug/ml, NaN3 0.02%□配制量 100ml□配制方法称取17mgPMSF溶于1ml甲醇,2mg aprotimin溶于10ml水配制成200ug/ml的储存液备用;称取NaCl 0.88g,NaN3 20mg,加入NP-40 0.5ml,Tris-HCl(1M pH7.2) 1ml,溶有PMSF的甲醇1ml,aprotimin储存液1ml,混匀溶解后超纯水定容至100ml。
常用试剂及缓冲液的配制

65%(V/V)甘油
配 制 量: 配制方法:
配方: 65%(V/V) 丙三醇
100ml
1. 量取 65ml 甘油(丙三醇) 2. 加入 35ml ddH2O,混匀 3. 高温高压灭菌后,4℃保存 4. 或无菌操作,用灭菌 1.5ml 离心管趁热
分装,-20℃保存
10%(V/V)甘油
1M MgCl2
配 制 量: 配制方法:
配方: 1M MgCl2
1L
1. 称取 203.3g MgCl2·6H2O 固体置于烧 杯中
2. 加入 700ml ddH2O,充分溶解 3. 定容至 1L 4. 高温高压灭菌,室温保存
2M MgCl2
配 制 量: 配制方法:
配方: 2M MgCl2
1L
1. 称取 406.6g MgCl2·6H2O 固体置于烧 杯中
100ml
1. 量取 56.9ml ddH2O 2. 加入 43.1ml 浓 HCl(11.6N),混匀 3. 室温保存 注意:先加入水,再加浓盐酸
2.5N HCl
配 制 量: 配制方法:
配方: 2.5N HCl
100ml
1. 量取 78.4ml ddH2O 2. 加入 21.6ml 浓 HCl(11.6N),混匀 3. 室温保存 注意:先加入水,再加浓盐酸
pH= Y
I (ml)
5.8
91.5
6.0
86.8
6.2
80.8
6.4
72.2
6.6
61.9
6.8
50.3
7.0
38.5
7.2
28.3
7.4
19.8
7.6
13.4
7.8
实验室常用试剂和缓冲液配方

实验室常用试剂和缓冲液配方实验室中常用的试剂和缓冲液配方有很多种,下面将介绍一些常用的试剂和缓冲液的配方:一、试剂的配方1. Tris缓冲液:- 3 M Tris-Cl,pH 7.4(准备方法:将121.1 g Tris粉末溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2.NaCl溶液:-5MNaCl(准备方法:将287.7gNaCl溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)3.验血试剂:-4%NaOH溶液(准备方法:将40gNaOH溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-5%CuSO4溶液(准备方法:将50gCuSO4溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)-2%K4[Fe(CN)6]溶液(准备方法:将20gK4[Fe(CN)6]溶解在900mL去离子水中,并将溶液体积加至1L)4.PBS缓冲液(磷酸盐缓冲液):-10×PBS缓冲液(准备方法:将80gNaCl,2gKCl,11.5gNa2HPO4,2gKH2PO4溶解在800mL去离子水中,并将溶液体积加至1L。
pH值可以调节至7.4左右)5. Tris-EDTA缓冲液(TE缓冲液):- 10 mM Tris-HCl,1 mM EDTA,pH 8.0(准备方法:将12.1 gTris溶解在800 mL去离子水中,然后加入0.37 g EDTA,使用HCl调节pH值至8.0,并将溶液体积加至1 L)二、缓冲液的配方1. Tris-HCl缓冲液:- 50 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,1% Triton X-100,pH 7.4(准备方法:将6.05 g Tris,5.8 g NaCl,0.1 g Triton X-100溶解在800mL去离子水中,使用HCl调节pH值至7.4,并将溶液体积加至1 L)2. Tris-Borate缓冲液(TBE缓冲液):- 89 mM Tris,89 mM boric acid,2 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将10.81 g Tris,5.49 g boric acid,3.72 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)3. Tris-Glycine缓冲液:- 25 mM Tris,192 mM glycine,0.1% SDS,pH 8.3(准备方法:将3.03 g Tris,14.35 g glycine溶解在800 mL去离子水中,使用HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)4. Tris-Acetate缓冲液(TAE缓冲液):- 40 mM Tris,20 mM acetic acid,1 mM EDTA,pH 8.3(准备方法:将4.84 g Tris,1.86 g acetic acid,0.37 g EDTA溶解在800 mL去离子水中,使用NaOH或HCl调节pH值至8.3,并将溶液体积加至1 L)5. Phosphate缓冲液:- 100 mM sodium phosphate,pH 7.0(准备方法:根据目标pH值使用磷酸二氢钠和磷酸氢二钠调节溶液pH至7.0,并将溶液体积加至1 L)以上只是一些常用的试剂和缓冲液的配方,并不是全部。
生物 化学 实验室 常用试剂 大全

试剂配制方法一、实验室常用储备液(1)0.5mol/L EDTA(乙二胺四乙酸)在700ml 超纯水中溶解186.1g Na2EDT A·2H2O,在磁力搅拌器上剧烈搅拌。
用10mol/L NaOH调至PH8.0(约用10mol/L NaOH 50ml),补加超纯水至1L。
分装后高压蒸汽灭菌。
室温贮存。
注意:EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的PH值调至接近8.0,才会溶解。
(2)1mol/L Tri s·Cl将121.1g Tris碱溶于800ml超纯水中,用浓盐酸将PH值调至设定值。
PH值HCl7.4 70ml7.6 60ml8.0 42ml应使溶液冷却至室温后,方可最后调定PH值。
加超纯水定容至1L,分装后高压蒸汽灭菌。
如果配制的溶液呈现黄色,应予丢弃。
并使用质量更好的Tris。
Tris溶液的PH值因温度而异,温度每升高1℃,PH值大约降低0.03个单位。
(3)10mol/L 乙酸铵(NH4C2H3O2)将771g乙酸铵溶于800ml蒸馏水中,磁力搅拌至完全溶解,用蒸馏水定容至1L,过滤除菌,室温贮存。
乙酸铵在热水中分解,含有乙酸铵的溶液不能高压蒸汽灭菌。
(4)甘油(10%,V/V)用9体积的灭菌纯水稀释1体积的分子生物学级的甘油。
用0.22μm过滤器过滤除菌。
分装成1ml每份,-20℃贮存。
(5) 10mg/ml溴化乙啶(EtBr)在20ml双蒸水中溶解0.2g溴化乙啶,磁力搅拌数小时,以确保其完全溶解。
然后用铝箔包裹容器或将溶液转移至棕色瓶中,于4℃避光保存。
注意:溴化乙啶是一种诱变剂,必须小心操作。
(6) 70%乙醇(C2H5OH)100ml70ml无水乙醇溶于30ml蒸馏水。
(7) 50×葡萄糖Glucose(150ml储备液)将54g D-葡萄糖溶于超纯水,磁力搅拌至完全溶解,并将体积调至150ml,过滤除菌,室温贮存。
(8) 10mol/L氢氧化钠(NaOH)将400g NaOH颗粒,加入到一个约含有0.9L蒸馏水的烧杯中,磁力搅拌至完全溶解。
实验常用试剂缓冲液的配制方法

实验常用试剂缓冲液的配制方法
一、常用试剂和试剂配置
1、氯仿。
将1L 99.7%纯度的氯仿加入水中,调节pH值至7.4,溶解
即可得到0.5mol/L的氯仿溶液。
2、二氧化碳水。
将100mL弱碳酸氢氧化钠溶液(NaHCO3,0.5mol/L)加入1L水中,经过气泡交换,可制得CO2水。
3、磷酸盐缓冲液。
将200mL磷酸盐溶液(K2HPO4,0.5mol/L)加入800mL水中,调节pH值至7.2,搅拌均匀,即可得到0.2mol/L磷酸盐缓
冲液。
4、EDTA标准溶液。
将25.0g EDTA·4Na(C10H14N2O8Na2)加入
1000mL水中,热溶解,调节pH值至7.0,搅拌均匀,得到0.2mol/LEDTA
标准溶液。
5、肌酐标准溶液。
将10.0g肌酐(C10H13N3O8)=14.2H2O)加入
1000mL的水中,搅拌,调节pH值至7.4,搅拌均匀,即可得到0.1mol/L
的肌酐标准溶液。
二、缓冲液的配置
1、弱酸缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸钠溶液(Na2HPO4)加入到
97mL 0.2mol/L磷酸钙溶液(Ca(H2PO4)2)中,搅拌均匀,即可得到
0.2mol/L的弱酸缓冲液。
2、弱碱缓冲液。
将3.0mL 0.2mol/L磷酸氢氧化钠溶液(NaH2PO4)
加入到97mL 0.2mol/L碳酸氢钙溶液(Ca(HCO3)2)中,搅拌均匀,即可
得到0.2mol/L的弱碱缓冲液。
3、弱盐缓冲液。
实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl(pH8.8)□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后,室温保存。
注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL500 mM EDTA(pH8.0)20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。
3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠(pH5.2)□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
实验室常用溶液及试剂配制

实验室常⽤溶液及试剂配制实验室常⽤溶液及试剂配制实验室常⽤溶液、试剂的配制表⼀普通酸碱溶液的配制表⼆常⽤酸碱指⽰剂表三混合酸碱指⽰剂表四容量分析基准物质的⼲燥表五缓冲溶液的配制-盐酸缓冲溶液1、氯化钾2、邻苯⼆甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液3、邻苯⼆甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液4、⼄酸-⼄酸钠缓冲溶液5、磷酸⼆氢钾-氢氧化钠缓冲溶液6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液7、氨⽔-氯化铵缓冲溶液8、常⽤缓冲溶液的配制实验室常⽤试验⽅法2九、柠檬酸(C6H8O7·H2O)称取试样1.5g(精确到0.0002g)于三⾓瓶内,加⼊⽔50ml溶解,加酚酞指⽰剂3滴,⽤1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定⾄粉红⾊为终点,同时做空⽩试验。
计算:X%(⼀⽔)= (V1-V0)×C×0.06404 m×(1-0.08566)×100X%(⽆⽔)= (V1-V0)×C×0.06404 m×100V1-----消耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml;V0-----空⽩所消耗氢氧化钠标准溶液的体积,ml;C------氢氧化钠标准溶液浓度,mol/L;m---样品质量。
⼗、钙含量测定(磷酸氢钙CaHPO4、磷酸⼆氢钙Ca(H2PO4)2·H2O、钙粉等)称取2g(精确到0.0002g)样品,⽤10ml盐酸(1+1)溶解,转移⾄100ml容量瓶中定溶,⽤移液管吸取10ml于250ml锥形瓶中,加50ml⽔,5ml蔗糖溶液(25g/L),2ml三⼄酸胺(1+1),1ml⼄⼆胺(1+1),1滴孔雀绿指⽰液(1g/L),滴加氢氧化钾溶液(200g/L)⾄⽆⾊,再过量10ml,加0.1g盐酸羟胺(每加⼀种试剂都要摇匀),加钙黄绿素少许,在⿊⾊背景下⽤0.05mol/L的EDTA标准溶液滴定⾄绿⾊荧光消失呈现紫红⾊为滴定终点。
Ca%= C×V×0.4008 m ×100C------EDTA标准溶液的浓度,mol/L;V-----消耗EDTA标准溶液的体积,ml;m----样品质量。
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实验室常用试剂和缓冲液配方
实验室中常用的试剂和缓冲液种类繁多,根据实验需求,可以根据不
同的试剂和缓冲液配方来满足实验要求。
以下是一些常见的试剂和缓冲液
配方,以及其用途和制备方法。
1. 磷酸缓冲液(Phosphate buffer)
磷酸缓冲液常用于生化和分子生物学实验中,用于控制溶液的pH值,适用于酸性和碱性条件下。
常见的配方包括0.1M磷酸盐缓冲液(pH7.2-7.4),需要用磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
2. 氯化钠溶液(Sodium chloride solution)
氯化钠溶液是实验室中常见的缓冲液配方之一,通常用于调节生物样
品的渗透压和离子浓度。
可以制备不同浓度的氯化钠溶液,常见的配方为0.9%氯化钠溶液(生理盐水)。
3. 碳酸氢盐缓冲液(Bicarbonate buffer)
碳酸氢盐缓冲液常用于细胞培养和生理实验中,用于维持细胞培养基
或实验液的pH稳定。
一种常见的配方为10mM碳酸氢盐缓冲液(pH7.2-
7.4),需要用碳酸氢钠和盐酸来制备。
4. Tris缓冲液(Tris buffer)
Tris缓冲液是一种常见的生化实验缓冲液,可以调节到不同的pH值。
常见的配方为50 mM Tris缓冲液(pH 7.4),需要用Tris(三氯甲烷磺酸,Tris-HCl)和盐酸来制备。
5. PBS缓冲液(Phosphate-buffered saline)
PBS缓冲液是一种用于细胞和组织处理的常见缓冲液,具有稳定pH
值和离子浓度的特点。
常见的配方为10mMPBS缓冲液(pH7.4),需要用
磷酸盐和盐酸或氢氧化钠来制备。
6. 甘氨酸缓冲液(Glycine buffer)
甘氨酸缓冲液常用于蛋白质电泳实验中,用作电泳缓冲液和传递缓冲液。
常见的配方为25mM甘氨酸缓冲液(pH8.3),需要用甘氨酸和盐酸来
制备。
7. BSA溶液(Bovine serum albumin solution)
BSA溶液是实验室中常见的蛋白质标准物质,用于测定蛋白质浓度和
酶活性等实验。
常见的配方为1%BSA溶液,需要将BSA加入适量的缓冲液
中来制备。
8. Trypsin溶液
Trypsin溶液常用于细胞培养实验中,用于细胞离析和传代。
配方通
常为0.25% Trypsin溶液,需要用Trypsin和适量的缓冲液,如PBS来制备。
以上是实验室常用的一些试剂和缓冲液配方,它们在生化、分子生物学、细胞生物学等实验中起着重要的作用。
根据实验要求和具体实验目的,可以选择适合的试剂和缓冲液配方来满足实验需求。