维生素B1的测定
维生素B1片的含量测定
维生素1B 片的含量测定一．实验目的1.掌握标准曲线法测定药物含量的方法；2.熟悉紫外—可见光光度计的原理和操作。
二、实验原理维生素B1结构中的嘧啶环为一芳香杂环，具有紫外吸收。
用维生素B1的标准品的稀释浓度梯度溶液测吸光度，得到标准曲线，再根据所测样品的吸光度求浓度， 求出标示量%=S*m W*n *V *Cx *100%三、实验药品及仪器实验药品：维生素1B 片10片，盐酸溶液，维生素B1标准品实验仪器：紫外—可见光光度计，50ml 容量瓶*10，玻璃棒，漏斗，烧杯 四、实验内容及步骤1. 用分析天平精密称取维生素B1标准品10mg ，于小烧杯中加适量稀盐酸溶解，振摇十分钟至完全溶解，转移至50ml 容量瓶用盐酸定容；2. 分别精密量取溶液1ml ，1.5ml, 2ml,2.5ml, 3ml 于50ml 容量瓶，加盐酸稀释至刻度，用紫外—可见光光度计测得其对应吸光度，得维生素B1标准曲线； 3取维生素B1药片10片，于分析天平称重，得平均片重`W=10m； 4.研细（用研钵），用分析天平精密称取约0.13g （相当于维生素1B 10mg ），于小烧杯中加适量稀盐酸溶解，振摇十分钟至完全溶解，转移至50ml 容量瓶用盐酸定容，摇匀。
5. 用干燥滤纸滤过，精密量取滤液2mL ，置另一50mL 量瓶中，再加盐酸溶液稀释至刻度，摇匀。
再做平行溶液三份；6.分别测三组样品的吸光度，再依据标准曲线求得浓度，再依据公式求得标示量。
五、注意事项1. 仪器的准备（1）开启电源，使仪器预热20分钟；（2）开机前，先确认仪器样品室内是否有东西挡在光路上，以免影响仪器的自检； 2. 仪器的操作步骤（1）设置波长（246nm ）； （2）测定；（3）数据记录与处理。
3. 将比色皿洗净装盒，关机；4. 维生素1B 的紫外吸收峰随溶液pH 的变化而不同，因此要严格控制溶液的pH 值。
5. 本品含维生素1B （HCl OS ClN H C 41712）应为标示量的90.0%~110.0%。
中国药典维生素b1含量的测定
中国药典维生素b1含量的测定
你想啊，维生素B1在咱身体里起着老大的作用了。
要是含量测定不准，那可咋整？在测定它的含量的时候，就像是一场探秘之旅。
那些搞测定的工作人员，就像是侦探一样。
他们得用特别精确的方法去找出维生素B1到底有多少。
这个过程可不
容易。
他们要准备好多仪器呢，就像给厨师准备好多锅碗瓢盆一样。
这些仪器可都是测定的得力助手。
从样品的选取开始，那都是小心翼翼的。
不能多一点，也不能少一点，就像挑水果，得刚刚好。
然后把样品处理得妥妥当当的，这就像是给维生素B1梳妆打扮一番，好让它能在测定的时候乖乖听话。
测定的时候呀，那数据就像是跳动的音符。
工作人员眼睛都不敢眨一下，紧紧盯着那些数据的变化。
每一个数据都是宝贝，可能稍微一不留神，这个数值就跑掉了。
而且这个测定也不是一个人就能搞定的事儿。
大家得像一个团队一样，互相配合。
就像一群小伙伴一起玩游戏，谁也离不开谁。
如果有人出错了，那整个测定结果可能就不准了。
这个维生素B1含量的测定啊，它关系到好多方面呢。
对药厂来说，准确的测定能保证生产出合格的药品。
对咱们老百姓来说，那就是能吃到质量靠谱的含有维生素B1的东西，像那些维生素片啥的。
这可都是实实在在关系到健康的大事。
咱就希望啊，这个测定的过程能越来越精准，就像神枪手打靶一样，百发百中。
这样咱就不用担心维生素B1的含量是多了还是少了，大家都能健健康康的，多好呀。
维生素b1片含量测定的方法验证
维生素B1在体内参与糖代谢，对维持神经系统正常 功能和防止脚气病有重要作用。
维生素B1的测定方法
荧光分光光度法
01
利用维生素B1在特定波长下的荧光特性进行定量分析。
高效液相色谱法
02
通过色谱柱将维生素B1与其他杂质分离，再通过紫外检测器进
行定量。
微生物法
03
利用含有维生素B1的微生物培养基培养微生物，通过测定微生
维生素B1片含量测 定的方法验证
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 结果分析 • 结论
01
CATALOGUE
实验目的
确定维生素B1片的含量
目的
通过实验测定，确定维生素B1片 中维生素B1的含量，为生产质量 控制和药品监管提供依据。
方法
采用高效液相色谱法（HPLC）进 行测定，通过色谱柱分离、检测 器检测，计算峰面积并外标法定 量。
采用合适的统计分析方法，如平 均值、标准差、变异系数等，对 数据进行分析和比较。
实验误差分析
误差来源
分析实验过程中可能产生的误差来源，如称量误差、滴定误差、 读数误差等。
误差传递
根据误差来源，计算误差对最终结果的影响，并评估误差传递的 规律和特点。
误差控制
针对误差来源，采取相应的措施，如使用高精度天平、规范操作 流程等，以减小误差对结果的影响。
05
CATALOGUE
结论
实验结论总结
实验结果表明，采用高效液相色谱法测定维生素B1片 的含量是可行的，该方法具有较高的准确度和精密度
，能够满足药品质量控制的测定要求。
输标02入题
在实验过程中，我们发现维生素B1片在波长为 246nm处有最大吸收，因此选择该波长作为检测波长 较为合适。
维生素b1的含量测定方法
维生素b1的含量测定方法嘿，咱今儿就来聊聊维生素 B1 的含量测定方法。
这维生素 B1 啊，可重要着呢！就好像是我们身体这个大机器里的一个小零件，缺了它可不行。
那怎么知道食物里或者我们吃的补充剂里维生素 B1 的含量到底有多少呢？这就有好几种办法啦。
比如说有一种叫荧光法的。
你可以把含有维生素 B1 的东西处理一下，然后让它在特定的条件下产生荧光，通过检测这个荧光的强度，就能算出维生素 B1 的含量啦。
这就好像是通过观察一盏灯的亮暗程度来判断它的电量一样，是不是挺有意思的？还有一种叫高效液相色谱法。
这个方法就像是一个超级厉害的分拣员，能把各种成分分得清清楚楚的。
它可以把维生素 B1 从一堆其他的东西里精准地分离出来，然后再进行测量。
就好比在一堆水果里，准确地挑出那个你最想吃的苹果一样。
再有一种是微生物法。
微生物们对维生素 B1 可是很敏感的哟！通过观察微生物在含有维生素 B1 的环境中的生长情况，也能知道维生素B1 的含量呢。
这就好像是看着一群小朋友，根据他们的活跃程度来判断有没有给他们足够的糖果吃。
这些方法各有各的特点和适用范围呢。
荧光法简单快捷，高效液相色谱法准确可靠，微生物法也有它独特的优势。
那在实际应用中，到底该选哪种方法呢？这就得根据具体情况来啦！要是要求速度快，那可能荧光法就比较合适；要是对准确性要求特别高，高效液相色谱法也许是更好的选择；要是面对一些特殊的样品，微生物法说不定能大显身手呢！咱在测定维生素 B1 含量的时候，可得认真仔细呀！不能马马虎虎的，不然得出的结果不准确，那可就麻烦啦！就像你要去一个重要的地方，可不能走错路呀！而且操作的时候，要严格按照步骤来，就像跳舞要跟着节奏一样，不能乱了套。
你说，这维生素 B1 的含量测定是不是挺神奇的？通过这些方法，我们就能知道我们吃进去的维生素 B1 够不够，需不需要再补充一点。
这就像是给自己的身体做了一次“体检”，能让我们更好地照顾自己的身体呢！所以呀，了解这些测定方法还是很有必要的呢，你说是不是？。
维生素b1含量测定计算公式
维生素B1含量（mg/100g）= （吸光度差 × 稀释倍数）/（摩尔吸光系数 × 透射率）
其中： - 吸光度差：在测量前后，样品溶液的吸光度差值。 - 稀释倍数：如果对样品进行稀释，则需要考虑稀释倍数。 - 摩尔吸光系数：维生素B1的摩尔吸光系数，一般为4,700（L·mol^(-1)·cm^(-1)）。 - 透射率：测量时所得到的样品溶液的透射率，一般以小数形式表示。
维生素b1含量测定计算公式
请注意，这个公式是针对光度法测定维生素B1含量的一个一般公式，具体的实验操作和 计算可能会因不同的测定方法和仪器而有所不同。因此，在进行维生素B1含量测定时，建议 参考所使用的具体测定方法和仪器的操作手册，以确保准确性和一致性。
维生素B1的测定
微生物测定法
总结词
微生物测定法是一种基于微生物生长代谢的维生素B1测定方法，通过观察特定 微生物在含有或不含有维生素B1的培养基中生长情况，来计算维生素B1的含 量。
详细描述
微生物测定法具有操作简便、准确度高和特异性好等优点，适用于食品、饲料 和生物样品中维生素B1的测定。该方法需要使用特定的微生物和培养基，并需 要严格控制实验条件。
红外光谱法测定维生素B
总结词
红外光谱法是一种非破坏性、无损、无污染的测定方法，能够提供样品的分子结构和组成信息，适用 于维生素B1的定性分析。
详细描述
维生素B1分子中的特定化学键在红外光区有特征吸收峰，通过测量样品的红外光谱图，可以确定维生 素B1的存在。该方法具有较高的专一性和准确性，但需要较复杂的仪器设备和操作技术。
微生物测定法测定维生素B
总结词
微生物测定法是一种基于微生物生长代谢与维生素B1关系的测定方法，适用于食品和 生物样品中维生素B1的测定。
详细描述
某些微生物的生长代谢需要维生素B1作为辅酶或生长因子，通过培养这些微生物并测 量其生长曲线或代谢产物，可以推算出样品中维生素B1的含量。该方法具有较高的灵
维生素B1的测定
目录
• 引言 • 维生素B1的检测技术 • 维生素B1的测定方法 • 实验操作与注意事项
01
引言
维生素B1的简介
维生素B1，也被称为抗脚气病 维生素，是一种水溶性维生素， 在人体内起着至关重要的作用。
它是由一个嘧啶环和一个噻唑 环通过亚甲基桥连接而成的， 属于一种含氨基的醇类物质。
。
紫外可见光谱法测定维生素B
总结词
紫外可见光谱法是一种简单、快速、准 确的测定方法，适用于维生素B1的定量 分析。
维生素B1的测定
3.净化
a.脱脂棉铺于盐基交换管的交换 柱底部，再加约1g活性人造浮 石使之达到交换柱的1/3高度。
b.用移液管加入提取液20~60ml。
c.加入约10ml热蒸馏水冲洗交换 柱，弃去洗液，重复三次。
d.加入20ml50g/L酸性Kcl,收集此 液于25ml刻度试管内。凉至室 温，用250g/L酸性Kcl定容至 25ml，即为净化液。
做空白试验
重复上述操作，将20ml维生素B1标准使用液加入盐 基交换管以代替试样提取液，即得到标准净化液。
4.氧化
将5ml试样净 化液分别加入 A、B两个反 应瓶； 同时将5ml标 准净化液分别 加入A1、B1 两个反应瓶中。
Maizel-Gerson 反应瓶
氧化流程
A、A1瓶 15%NaO H (3 ml)溶液振摇
操作步骤
1.样品处理
样品采集后用匀浆机打成匀浆于低温冰箱中冷冻 保存，用时将其解冻后使用。
2.样品提取
样品（2.00 ~ 10.00g试样）0.1或0.3mol/L盐酸加热 样品水解2mol/ L乙酸钠 调节PH为4.（5 以溴甲酚绿为外指示剂） 按比例加入淀粉酶和 蛋白酶 定容至100ml 混匀过滤提取液
谢谢！
维生素B1是人体能量代谢，特别是糖代谢所必需的，故 人体对它的需要量通常与摄取的热量有关。当人体的能量主 要来源于糖类时，维生素B1的需要量最大。
成人的建议每日摄取量是1．0～1．5mg。妊娠、哺乳 期每天摄取1．5～1．6mg；在生病、生活紧张、接受手术 时，要增加必要用量。
来源简介
维生素B1广泛存在于天然食物中，含量较丰富的有：动物内 脏(肝、心及肾)、肉类、豆类、花生及精细加工的谷物类。 谷物类是我国人民的主食，也是维生素B1的主要来源。但过 分去除麸皮与糠，维生素B1损失很多，烹调加碱可使维生素 B1损失增高。
维生素B1的测定
维生素B1的测定(一)原理硫胺素在碱性铁氰化钾溶液中被氧化成噻嘧色素，在紫外线照耀下发出荧光。
没有其他物质干扰时，此荧光相对强度与噻嘧色素量成正比，即与溶液中硫胺素量成正比。
如试样中含杂质过多，应用经过离子交换剂使硫胺素与杂质分别岳的溶液测定。
(二)仪器与主要试剂荧光分光光度计；电热恒温培养箱；Maizel—Gerson反应瓶9～1所示；淀粉酶和蛋白酶；0．1mol／L，0．3mol／L盐酸；2mol／L乙酸钠溶液；氯化钾溶液(250g／L)；酸性氯化钾溶液(250g／L)(8．5mL浓盐酸用25％氯化钾溶液稀释至1000mL)；1％铁氰化钾溶液(10g／L)(1g铁氰化钾溶于水中稀释至100mL，放于棕色瓶内保存)；碱性铁氰化钾溶液(取4mL 10g／L铁氰化钾溶液，用150g／L氢氧化钠溶液稀释至60mL。
用时现配，避光用法)。
活性人造浮石：称200g 40～60目人造浮石，以10倍于其容积的热乙酸溶液搅洗两次，每次10min；再用5倍于其容积的250g／L热氯化钾溶液搅洗15min；然后再用稀乙酸溶液搅洗10min；最后用热蒸馏水洗至没有氯离子，于蒸馏水中保存。
硫胺素标准储备溶液(0．1g／mL)：精确称取100mg经氯化钙干燥24h的硫胺素，溶于0.0lmol/L盐酸中，并稀释至1000mL。
于冰箱中避光保存。
用时用0.01mol／L盐酸逐级稀释为0.1μg／mL的硫胺素标准用法液。
溴甲酚绿溶液(0．4g／L)：称取0.1g溴甲酚绿，置于小研钵中，加入1.4mL 0.1mol/L氢氧化钠溶液研磨片刻，再加入少许水继续研磨至彻低溶解，用水稀释至250mL。
(三)测定试样采集后用匀浆机打成匀浆于低温冰箱中冷冻保存，用时将其解冻后混匀用法。
干燥试样要将其尽量粉碎后备用。
精确称取一定量试样(估量其硫胺素养量约为10～30μg，普通称取2～10g试样)，置于l00mL三角瓶中，加入50mL0.1mol／L或0.3mol／L盐酸使其溶解，放人高压锅中加热水解，121℃30rain，凉后取出。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
谢谢！
ml碱性K 3 Fe（CN） 6 B、B1瓶 3 振摇约 15s
硫色素 蓝色荧光
正丁醇（10ml）
反应瓶要同时振摇，准确计时90s.
5、测定
荧光测定条件： 激发波长365nm；发射波长435nm；激发波狭缝5nm；发射 波狭缝5nm。 依次测定下列荧光强度： a. 样品空白荧光强度（样品反应瓶A）； b. 标准空白荧光强度（标准反应瓶A1）； c. 样品荧光强度（样品反应瓶B）； d. 标准荧光强度（标准反应瓶B1）；
荧光法
这里我们主要介绍荧光法 参考GB/T 5009.84-2003 食品中硫胺素(维生素B1)的测定
方法原理
试样在酸性溶液中加热，提取维生素B1，经蛋白分 解酶处理，使维生素B1成为游离型。再经层析柱 纯化，去除荧光淬灭物质，同时浓缩，用碱性铁 氰化钾溶液将其氧化成硫色素，在紫外线下，硫 色素发出荧光，再给定的条件下以及没有其他物 质干扰时，此荧光之强度与硫色素量成正比即与 溶液中维生素B1量成正比。
维生素B1的测定
——营养0901 徐燕萍 张晶荧 赵莎莎 赵小娟
１. 结构与性质
H3C N
嘧啶
N
NH2 CH2
亚甲基
S N+
噻唑
· CH2CH2OH
. Cl-.HCl
CH3
连成的季铵2H17ClN4OS。它是人体必需 的13种维生素之一，是一种水溶性维生素，属于维生素B族， 为无色结晶体，溶于水，在酸性溶液中很稳定，在碱性溶液 中不稳定，易被氧化和受热破坏。
操作步骤
1.样品处理
样品采集后用匀浆机打成匀浆于低温冰箱中冷冻 保存，用时将其解冻后使用。
2.样品提取
.1或 0.3mol / L盐酸加热 样品（2.00 ~ 10.00g试样） 0 mol / L乙酸钠 样品水解 2
调节PH为4.5 （以溴甲酚绿为外指示 剂）
试剂作用
1、蛋白分解酶：用于试样的蛋白分解。 2、盐酸：水解样品。 3、氯化钾：该热溶液可从盐基交换管中的浮石里解析出维生 素B1。 4、铁氰化钾碱性溶液：氧化游离的维生素B1，生成硫色素。 5、正丁醇：溶解紫外荧光物质——硫色素试剂。
注意事项
1 、加热酸性Kcl时不能使其沸腾，热Kcl滤速较快，而不沸 则是使其不至因过饱和而在洗涤中结晶析出阻塞交换柱。 2、 紫外线会分解破坏维生素B1，所以维生素B1形成后要快 速测定。 3、 氧化中加铁氰化钾是整个实验的关键，对每个样品所加 试剂的次序、快慢、振摇时间等都必须尽量一致，尤其是用 正丁醇提取硫色素时必须保证准确振摇90s。
维生素B1是人体能量代谢，特别是糖代谢所必需的，故 人体对它的需要量通常与摄取的热量有关。当人体的能量主 要来源于糖类时，维生素B1的需要量最大。 成人的建议每日摄取量是1．0～1．5mg。妊娠、哺乳 期每天摄取1．5～1．6mg；在生病、生活紧张、接受手术 时，要增加必要用量。
来源简介
维生素B1广泛存在于天然食物中，含量较丰富的有：动物内 脏(肝、心及肾)、肉类、豆类、花生及精细加工的谷物类。 谷物类是我国人民的主食，也是维生素B1的主要来源。但过 分去除麸皮与糠，维生素B1损失很多，烹调加碱可使维生素 B1损失增高。
做空白试验 重复上述操作，将20ml维生素B1标准使用液加入盐 基交换管以代替试样提取液，即得到标准净化液。
4.氧化
将5ml试样净 化液分别加入 A、B两个反 应瓶； 同时将5ml标 准净化液分别 加入A1、B1 两个反应瓶中。
Maizel-Gerson 反应瓶
氧化流程
% NaOH ( 3ml)溶液 A、A1瓶 15 振摇
测定意义
由于人体不能自行合成维生素B1，必须从食物中摄取。因此， 人体需依赖食物提供足够的维生素B1，测定各种食品维生素B1 含量多少将对食品营养价值评价十分重要。如果由于食物摄入 量不足，或因食物的加工、运输、储存、烹饪不当，使维生素 B1受到破坏或损失，都会造成维生素B1的缺乏。因此，食品中 的维生素B1测定对指导食品加工、保存、膳食营养配比等都有 一定的意义。
维生素B1的测定方法：
分光光度法; HPLC法; 荧光分光光度法等。
分光光度法
分光光度法是将维生素B1生成游离型后，与重氮化试剂对氨基 苯乙酮反应，生成紫红色色素，移至二甲苯中测定其浓度。 本法灵敏度差，只适用于食品中维生素B1含量高的试样。
高效液相色谱法
把维生素B1衍生化后导入高效液相色谱仪，经柱分离，通荧光 检测器测定。 本法适用于体系复杂的样品，干扰严重时采用此法。
白酶 100 ml 按比例加入淀粉酶和蛋 定容至 混匀过滤 提取液
3.净化
a.脱脂棉铺于盐基交换管的交换 柱底部，再加约1g活性人造浮 石使之达到交换柱的1/3高度。 b.用移液管加入提取液20~60ml。 c.加入约10ml热蒸馏水冲洗交换 柱，弃去洗液，重复三次。 d.加入20ml50g/L酸性Kcl,收集此 液于25ml刻度试管内。凉至室 温，用250g/L酸性Kcl定容至 25ml，即为净化液。
6.计算
式中：X──样品中硫胺素含量，mg/100g； U──样品荧光强度； Ub──样品空白荧光强度； S──标准荧光强度； Sb──标准空白荧光强度； c──硫胺素标准工作液浓度，μg/ml； V──用于净化的硫胺素标准工作液体积，ml； V1──样品水解后定容之体积，ml； V2──样品用于净化的提取液体积，ml； m──样品质量，g；