菠萝蛋白酶
菠萝蛋白酶
Folin-酚试剂 folin-酚试剂一般用于folin酚法，做蛋白质含量测定的一种显色
剂。 folin-酚试剂
一般原理：folin试剂中的磷钼酸-磷钨酸盐被蛋白质中的色氨酸 和酪氨酸 残基还原，发生显色反应：产生蓝色（钨兰+钼兰）。蓝色的浓重度与 蛋白质含量成正比。
配置：
试剂甲：
（A） 10克 Na2CO3，2克 NaOH和0.25克酒石酸钾钠 （KNaC4H4O6·4H2O）。溶解于500毫升蒸馏水中。
物理性质：
白色至浅棕黄色无定形粉末。溶于水，水溶液
无色至淡黄 色， 有时有乳白光，不溶于乙醇、氯
仿和乙醚。属糖蛋白。
主要作用原理：使多肽类水解为低分子量的肽类。
尚有水解酰胺基键
和酯类的作用。
分子量：约33000，
等电点pH值：9.35
最适pH值：6～8
最适温度：55℃。
化学性质： 中文名称:菠萝蛋白酶
菠萝蛋白酶活力测得的实验过程：
分别取酶制品0. 15 g 克加入pH7. 0 , 0. 05mol/ L 磷酸缓冲溶液定容至100 mL ,过滤,此滤液为溶液酶制 剂。 取1 mL 溶液酶加入0. 9 mL 激活剂(pH7. 0 , 0. 05 mol/ L 磷酸缓冲溶液, 内含15mmol/ L 硫代硫酸钠 及6 mmol/ L EDTA22Na) ,于37 ℃水浴中保温恒定后, 加入同样预热的1 %酪蛋白溶液,混匀,在37 ℃下准确反 应10 min ,加入8mL 1N 氢氧化钠溶液,迅速摇匀,于室 温放置半小时。 取上清液于275 nm 波长下测定OD 值。 计算溶液酶的活力。
二、菠萝蛋白酶在医药、保健品业的应用
1、抑制肿瘤细胞的生长 经相关临床研究观察表明，菠萝蛋白酶能抑制肿瘤细胞的生长。 2、对心血管疾病的防治 菠萝蛋白酶作为蛋白水解酶对心血管疾病的防治是有益的。它能抑制血小 板聚集引起的心脏病发作和中风, 缓解心绞痛症状,缓和动脉收缩, 加速纤维蛋 白原的分解。 3、用于烧伤脱痂 菠萝蛋白酶能选择性地除 皮, 使新皮移植得以尽早进行。动物实验证明, 菠萝蛋白酶对邻近的正常皮肤无不良影响。局部使用抗生素不影响菠萝蛋白酶 的效果。 4、消炎作用 菠萝蛋白酶在各种组织中能有效地治疗炎症和水肿(包括血栓静脉炎、骨骼 肌损伤、血肿、口腔炎、糖尿病人溃疡及运动损伤)，菠萝蛋白酶具有激活炎症 反应的潜力。菠萝蛋白酶还可治疗腹泻。 5、增进药物吸收 将菠萝蛋白酶与各种抗生素(如四环素, 阿莫西林等)联用, 能提高其疗效。 相关研究表明, 它能促进抗生素在感染部位的传输, 从而减少抗生素的用药量。 据推断, 对于抗癌药物, 也有类似的作用。此外，菠萝蛋白酶能促进营养物质 的吸收。
菠萝蛋白酶的制备及其活力的测定
6、按步骤5混匀，在37℃水浴下反应10 min; 7、向10支试管中各加入8ml1mol/L的氢氧化钠溶液， 摇匀，于室温放置30min; 8、取各自对应的试管在275nm波长下测定吸光度 9、测定结果如下
试管号
吸光度A
1
2
3
4
ห้องสมุดไป่ตู้
5
实验过后对结果进行分析和计算
数据的处理
1、由线性关系y=6.2357x，可以计算酶制品中 蛋白酶的总质量m 2、菠萝蛋白酶活力=A/10 3、比活力=菠萝蛋白酶活力/m 4、提取率=m/菠萝的质量
应该注意的事项
1.操作过程温度的控制，确保所得的蛋 白不失活。 2.弄清所加试剂和每步操作对实验结果 的影响。 3.在酶活力的测定中，加入氢氧化钠是 为了终止反应。 4.所加酪蛋白溶液的量对实验结果有影 响。需要多次实验确定所加的量，避免 反应不完全或蛋白剩余，影响实验结果。
一、菠萝蛋白酶在食品加工业的应用
1、焙烤食品：将菠萝蛋白酶加入生面团中， 可使面筋降解，生面团被软化后易于加工。 并能提高饼干与面包的口感与品质。 2、肉类的嫩化：菠萝蛋白酶将肉类蛋白质 的大分子蛋白质水解为易吸收的小分子氨 基酸和蛋白质。可广泛地应用于肉制品的 精加工。 3、干酪：用于干酪素的凝结
菠萝蛋白酶的制备及其活力的测定
背景介绍
菠萝蛋白酶广泛存在于菠萝的果实、芽、叶、茎中，从菠 萝的果实中提取的称为果菠萝蛋白酶（FruitBromelain）， 从菠萝的茎中提取的称为茎菠蛋白酶（Stem Bromelain）。 菠萝蛋白酶的分子量为33000，是典型的巯基蛋白酶，能分 解蛋白质，肽，酯，酰胺。它的水解蛋白的活性比木瓜蛋 白酶的活性高十倍以上，因此有着广泛的用途。它作为一 种食品添加剂可用于肉质嫩化、啤酒澄清，还用于干酪、 明胶、水解蛋白酶的生产。在医药上它可用于生物体内溶 解纤维蛋白及血凝块，因此可用于治疗水肿及多种炎症； 它能迅速溶痂，对正常组织无害，不影响植皮，适用于中 小面积深度烧伤的治疗。这里就菠萝蛋白酶的三种提取方 法
菠萝蛋白酶最佳温度
菠萝蛋白酶最佳温度菠萝蛋白酶是一种存在于菠萝中的酶，它在菠萝成熟过程中发挥着重要的作用。
菠萝蛋白酶最佳温度是指在哪个温度下，菠萝蛋白酶的活性能够达到最高。
菠萝蛋白酶是一种催化蛋白质水解的酶，其存在于菠萝的果肉和果汁中。
菠萝蛋白酶主要由两种蛋白质组成，分别是菠萝蛋白酶A和菠萝蛋白酶B。
这两种酶在酸性条件下最为活跃，而在碱性条件下则会失去活性。
菠萝蛋白酶的最佳温度一般在50-60摄氏度之间。
在这个温度范围内，菠萝蛋白酶的活性能够达到最高。
当温度低于50摄氏度时，菠萝蛋白酶的活性会显著降低，酶的催化效率也会明显下降。
而当温度超过60摄氏度时，菠萝蛋白酶的蛋白结构会发生变性，使其失去催化活性。
菠萝蛋白酶的最佳温度与菠萝生长环境有关。
菠萝生长在热带和亚热带地区，这些地区的气温较高，因此菠萝蛋白酶的最佳温度也相对较高。
菠萝在生长过程中，果实会经历成熟的过程，而菠萝蛋白酶在果实成熟过程中发挥着重要的作用。
菠萝蛋白酶在果实成熟过程中的作用是将果肉中的蛋白质水解为小分子肽和氨基酸，使果肉变得更加软化和甜美。
这个过程中，菠萝蛋白酶的最佳温度能够保证酶的催化效率最高，使果肉的变软和甜味的形成达到最佳状态。
菠萝蛋白酶的最佳温度还与酶的结构和功能密切相关。
菠萝蛋白酶的结构中含有许多氨基酸残基，这些氨基酸残基的空间构型和电荷状态对酶的活性起着关键作用。
在最佳温度下，菠萝蛋白酶的氨基酸残基的构型和电荷状态能够达到最佳状态，从而使酶的催化效率最高。
除了最佳温度外，菠萝蛋白酶的活性还受到其他因素的影响，比如pH值、金属离子和抑制剂等。
在不同的pH值下，菠萝蛋白酶的最佳温度也会有所不同。
在不同的金属离子存在下，菠萝蛋白酶的最佳温度也会有所变化。
而一些特定的抑制剂则可以抑制菠萝蛋白酶的活性。
总结起来，菠萝蛋白酶的最佳温度是在50-60摄氏度之间。
这个温度范围内，菠萝蛋白酶的活性能够达到最高，果肉变得更加软化和甜美。
菠萝蛋白酶的最佳温度还与酶的结构和功能密切相关，同时也受到其他因素的影响。
菠萝蛋白酶
酶和微生物制剂
01 化合物简介
03 安全信息 05 药典标准
目录
02 生产方法 04 应用 06 化合物相关药品说明
菠萝蛋白酶又称菠萝酶。由菠萝汁、皮等提取的巯基蛋白酶。浅黄色无定形粉末，微有特异臭。分子量。对 酪蛋白、血红蛋白、BAEE的最适pH值是6～8，对明胶是pH值5.0。酶活性受重金属抑制。略溶于水，不溶于乙醇、 丙酮、氯仿和乙醚。它优先水解碱性氨基酸(例如精氨酸)或芳香族氨基酸(例如苯丙氨酸、酪氨酸)的羧基侧上的 肽链，选择性水解纤维蛋白，可分解肌纤维，而对纤维蛋白原作用微弱。可用于啤酒澄清、药用助消化和抗炎消 肿。
精密量取供试品溶液1.0ml，置具塞试管(15mm×130mm)中，于(37±0.5)℃水浴预热5分钟，精密加入 (37±0.5)℃预热的底物溶液(取硅胶干燥器中干燥至恒重的酪蛋白0.6g，精密称定，置烧杯中，加0.05mol/L磷 酸氢二钠溶液80ml，水浴中加热溶解，放冷，用1mol/L盐酸调节pH值至7.0，转移到100ml量瓶中，加水至刻度， 临用新配)5.0ml，立即振摇，置(37±0.5)℃水浴中准确反应10分钟后，加三氯醋酸溶液(取三氯醋酸1.8g，无 水醋酸钠2.99g，冰醋酸液1.9ml，加水使溶解并稀释至100ml)5.0ml，振摇，于(37±0.5)℃水浴中准确放置40 分钟，用干燥滤纸滤过，取续滤液，在2小时内，照分光光度法(中国药典2015年版二部附录Ⅳ A)，以水为空白， 在275nm的波长处测定吸收度A，再精密量取供试品溶液1.0ml，加上述三氯醋酸溶液5.0ml，振摇，精密加入底物 溶液5.0ml，同法操作，测定吸收度A。
化合物简介
基本信息 物化性质
毒性 化学性质
中文名称:菠萝蛋白酶 中文别名：菠萝蛋白酶;菠萝酶;菠罗蛋白酶;菠萝蛋白酶 20万单位;BROME LAINE菠萝蛋白酶 英文名称: Bromelain 英文别名： STEM BROMELAIN;3.4.22.32;BROMELAIN;BROMELAIN PINEAPPLE;BROMELIN;EC 3.4.22.1;EC 3.4.22.32;EC 3.4.22.4 CAS号: 9001-00-7 分子量:约 EINECS号:253-387-5
菠萝蛋白酶提取
菠萝蛋白酶提取一、实验目的：1、了解菠萝蛋白酶的提取和纯化工艺2、优化和加深熟悉菠萝蛋白酶提取技术二、实验原理：菠萝蛋白酶(Bromelain，简称菠萝酶，亦称为凤梨酶或凤梨酵素)是从菠萝果茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。
其外观为浅灰色粉末状，分子量为33000 ，等电点为9.55 。
品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工,采用超滤方法进行过滤浓缩,低温冷冻干燥而得的。
产品已被广泛应用于食品、医药等行业。
结果表明。
提取菠萝中菠萝蛋白酶最佳提取工艺条件是添加单宁溶液的浓度为0．2％，提取时最适pH值为6．5～8．5左右，而最适提取温度为60℃。
菠萝蛋白酶作为一种食品添加剂可用于肉质嫩化，啤酒澄清，还用于干酪、明胶及水解蛋白的生产。
在医药上它可以治疗水肿及多种炎症；它能迅速溶痂，对正常组织无害，不影响植皮，适用于中小面积深度烧伤的治疗。
三、实验步骤操作要点：菠萝蛋白酶的提取称取1 kg制备好的鲜果皮汁，加5％苯甲酸钠溶液10 ml搅匀，以4 000 r／min离心7 min，取上清液倒人干净烧杯中。
上清液分装在6个小烧杯中，每个装100 ml菠萝汁，分别缓缓加入空白、0．1％、0．2％、0．3％、0．4％、0．6％单宁溶液10 ml，边加边拌约1 5min，沉淀物析出，静止40 min。
虹吸除去上清废液，把酶复合沉淀物倒入离心杯中，以4 000 r／min。
离心5 min，倒掉上清废液，得到酶糊复合物。
分离、洗涤和保护把提取的蛋白酶糊倒人烧杯中，加0．1％EDTA溶液100 ml搅匀，再将1．5％氯化钠溶液200 ml倒人烧杯中搅匀，以4 000 r／min离心7 min，倒掉上清废液，得到洗涤剂I酶复合沉淀物。
把洗涤剂I酶复合沉淀物倒入烧杯中，加0．5％乙酸锌溶液20 min，搅拌均匀，静止5 min，加0．06％抗坏血酸溶液30 ml，搅匀，静止5 rain，加1．5％氯化钠溶液20 ml，搅匀，静止5 min，最后再加0．5％EDTA溶液20 ml，搅匀，静止5min，以4 000 r／min离心7 min，把上清废液倒掉，得到洗涤剂Ⅱ酶复合沉淀物。
菠萝蛋白酶
医药、保健品业的应用
抑制肿瘤细胞的生长 对心血管疾病的防治 用于烧伤脱痂 消炎作用 增进药物吸收 预防和治疗单胃动物的腹泻
美容化妆品业的应用
菠萝蛋白酶具有嫩肤、美白去斑的优 异功效。基本作用原理：菠萝蛋白酶可作 用于人体皮肤上的老化角质层，促使其退 化、分解、去除，促进皮肤新陈代谢，减 少因日晒引起的皮肤色深现象。使皮肤保 养呈现良好的白嫩状态。
作用条件
最佳温度： 失活温度： 最佳PH值： 失活PH值： 推荐用量: 温度范围： 作用PH值: 53±1℃ ≥65℃ 5.0～8.0 小于3.0和大与9.5 0.05～0.1%对蛋白质计 50～60℃ 6.0～9.0
提取工艺
目前，菠萝蛋白酶主要从菠萝皮及 果实中提取。常用方法有高岭土吸附 法、单宁沉淀法和超滤法等。
饲料业的应用
将菠萝蛋白酶加入饲料配方或直接混 合在饲料中，可以大大提高蛋白质的利用 率和转化率，并能开发更广的蛋白源，从 而降低饲料成本。
结语
菠萝蛋白酶在各个行业的应用越来越受 到重视,尤其在食品工业、医药上尤显示其重 要性。但就日前,国内菠萝蛋白酶的生产还未 能满足巨大的需求量。因而,对菠萝蛋白酶分 离纯化技术进行深入研究,提取高质量的菠萝 蛋白酶具有重要的实用价值。
结果处理及分析
得率w的计算：
菠萝下脚料的质量M1
干酶的质量M2 W=M2/M1×100%
注意事项
高岭土预处理需适宜，温度约为7080℃，偏酸性。 提取粗酶过程中应保持温度适宜，防 止酶失活。 实验过程中酸碱调节应准确，准确度 越高，提取酶的浓度越高。 盐析尽量完全，否则提取酶中杂质较 多。
溶解：将粗品放入溶解罐中，加入10倍量
的自来水，用16%的氢氧化钠溶液调节pH值 至7.0-7.5，搅拌使其溶解，然后过滤，出 去杂质，收集滤液。
2024年菠萝蛋白酶市场发展现状
菠萝蛋白酶市场发展现状1. 引言菠萝蛋白酶是一种重要的生物酶，具有广泛的应用领域。
随着全球经济的发展和人们对健康意识的提高，菠萝蛋白酶市场需求逐渐增加。
本文将对菠萝蛋白酶市场的发展现状进行分析。
2. 菠萝蛋白酶的基本概述菠萝蛋白酶，又称为溶菌酶，是由菠萝果实中提取获得的一种酶，主要成分为溶菌酶A和溶菌酶B。
菠萝蛋白酶可有效分解蛋白质，具有广泛的应用领域，包括食品工业、医药领域等。
3. 菠萝蛋白酶市场需求近年来，人们对健康食品的需求不断增加，而菠萝蛋白酶作为天然的食品添加剂，具有促进消化、增加食品口感等优势，受到市场的广泛关注。
此外，菠萝蛋白酶在医药领域的应用也在不断拓展，如治疗消化系统疾病、改善血液循环等。
4. 菠萝蛋白酶市场现状分析4.1 市场规模全球菠萝蛋白酶市场规模正在不断扩大。
据市场研究机构的数据显示，2019年全球菠萝蛋白酶市场规模约为1.5亿美元，预计到2025年将达到2.2亿美元。
4.2 主要市场地区目前，全球菠萝蛋白酶市场主要集中在北美、欧洲和亚太地区。
北美地区是全球菠萝蛋白酶市场的主要消费地，主要由于该地区人们对健康食品的需求较高。
亚太地区是菠萝蛋白酶的主要生产地，由于该地区菠萝种植面积大，生产成本较低，具有竞争优势。
4.3 主要应用领域菠萝蛋白酶在食品工业、医药领域等有着广泛的应用。
在食品工业领域，菠萝蛋白酶主要用于肉制品的腌制和嫩化，以及面包、饼干等食品的制作。
在医药领域，菠萝蛋白酶被广泛应用于消化系统疾病的治疗和血液循环的改善。
5. 菠萝蛋白酶市场发展趋势5.1 技术创新随着生物技术的不断发展，菠萝蛋白酶的提取和纯化技术不断改良，提高了产品的纯度和活性。
同时，通过基因工程技术改良菠萝蛋白酶的性能，提高其应用范围，进一步推动了市场的发展。
5.2 市场竞争加剧随着市场需求的增加，菠萝蛋白酶生产企业也在不断增加。
市场竞争加剧将促使企业加大研发投入，提高产品质量，降低价格，以获取更大的市场份额。
菠萝中的菠萝蛋白酶
菠萝中的菠萝蛋白酶菠萝中的菠萝蛋白酶1、抑制血小板聚集；2、溶解纤维蛋白；3、消炎；4、抗肿瘤；5、调节细胞因子和免疫；6、对皮肤清创的特性；7、促进其它药物的吸收；8、溶解粘液；9、助消化；1、0促进伤口愈合；11、改善心血管循环系统。
菠萝蛋白酶口服易于吸收，有可靠的证据表明大剂量给药可以提高治疗效果。
虽然所有的相关机理还没有完全搞清楚，但菠萝蛋白酶已被证明是一种安全有效的药物。
在大鼠试验中，服用一定剂量的菠萝蛋白酶会降低血清纤维蛋白原水平，高浓度的菠萝蛋白酶维可明显延长凝血酶原时间（PT）和活化部分凝血酶时间(APTT)。
一定剂量下的菠萝蛋白酶通过刺激ADP、肾上腺素、前列腺素前体，可加强抑制血小板聚集的作用。
在体内和体外，菠萝蛋白酶都是一种有效的纤维蛋白溶解剂在消炎试验中，菠萝蛋白酶和强的松有相似的消炎作用。
具有免疫刺激作用曾有专利认为菠萝蛋白酶的某一组分可用于治疗免疫系统受抑制的病症或作为疫苗佐剂。
菠萝蛋白酶具有免疫刺激作用，血液中丙种球蛋白缺乏症病人的吞噬细胞表现出对这种刺激特别敏感。
体内外的研究表明，通过对辅助细胞的刺激作用和对T细胞的直接抑制反应，菠萝蛋白酶可以增强和抑制T细胞的免疫反应。
抑制毒素分泌实验证明菠萝蛋白酶能降低毒素结合活性并能抑制热不稳定毒素、霍乱毒素及热稳定毒素的分泌效应。
用于烧伤脱痂菠萝蛋白酶能选择性地除去死皮，使新皮移植得以尽早进行。
动物实验证明，菠萝蛋白酶对邻近的正常皮肤无不良影响。
局部使用抗生素不影响菠萝蛋白酶的效果。
用其制备的菠萝蛋白酶脱痂制剂治疗深2度和3度烧伤，可在3-4小时完成脱痂。
全过程无需麻醉，脱痂十分彻底，对于功能部位的烧伤治疗具有更重要的意义。
消炎作用菠萝蛋白酶在各种组织中能有效地治疗炎症和水肿（包括血栓静脉炎、骨骼肌损伤、血肿、口腔炎、糖尿病人溃疡及运动损伤），能在体外激活鼠巨噬细胞和自然杀伤（NK）细胞。
因此，对于免疫缺失的个体，菠萝蛋白酶具有激活炎症反应的潜力。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
四、前景
菠萝蛋白酶的应用已有很长的历史，随着 提取纯化技术的进步，它将有更广泛的应用。 我国菠萝资源丰富，年产菠萝100万吨以上， 每年都有大量的菠萝皮、茎被浪费掉。同时， 我同对菠萝蛋白酶的需求量逐年增多，特别是 高活性的菠萝蛋白酶。因而，对菠萝蛋白酶分 离纯化技术进行深入研究，提取高质量的菠萝 蛋白酶具有重要的实用价值。
三、菠萝蛋白酶在食品加工中的 应用
肉类：菠萝蛋白酶将肉类蛋白质的大 分子蛋白质水解为易吸收的小分子氨 基酸和蛋白质，令肌肉肌丝和筋腰丝 断裂，使肉类变得嫩滑，使人体食用 后易于消化吸收,可广泛地应用于肉制 品的精加工。
酸豆乳:利用菠萝蛋白酶的蛋白水解活 性，将豆乳中的蛋白质部分水解成为 功能性多肽，再添加发酵剂制成酸豆 乳。顾仁勇等采用正交实验法，以蛋 白质水解度为评价指标，确定最佳酶 解条件为：菠萝汁用量15％；pH=7.0； 温度45℃；时间70min。
2.菠萝蛋白酶的理化性质
菠萝蛋白酶的分子量为30000～33000，酶液 的最大吸收波长为280nm，0.051%浓度的酶液 在280nm的光吸收值达0.984%。分子中有4个 N-乙酰化的氨基己糖，含糖 2.1%，分子中含 有285个氨基酸残基，含氮量为15.88%。 一般认为，菠萝蛋白酶无毒、无副作用，少 数人会对菠萝蛋白酶起过敏反应及轻微的肠胃 反应。
溶解：将粗酶放入溶解罐中，加入10倍水。用 NaOH溶液调pH值至7.0～7.5，搅拌使其溶解， 过滤除杂，收集滤液。 沉淀、干燥：在搅拌下用1:3的盐酸凋节上述 滤液的pH值至4.0，静置1小时使酶析出，用离 心机分离出沉淀物，冷冻真空干燥或减压干燥 即得菠萝蛋白酶精品。
2、单宁沉淀法
洗脱：用16％的NaOH溶液调节吸附物的pH值 至7.0左右，再加入吸附质量为7～9％的食盐， 搅拌30min，进行洗脱，然后迅速压滤，收集 滤液。 盐析：将压滤液收集在盐析槽中，用l：3的盐 酸调节PH至5.0左右，搅拌加入压滤液质量 25%的硫酸铵，待完全溶解后,4℃下存放过夜； 然后离心，收集沉淀盐析物，即粗酶。
香肠：菠萝蛋白酶对肌浆球蛋白和其他的 肌原纤维蛋白有明显的水解作用，从而对 香肠有很好的嫩化效果并且不影响香肠固 有的风味。 啤酒：啤酒长期放置，会慢慢变混浊，原 因是在酿造时所造成的蛋白-酚复合物沉淀 所造成，而菠萝蛋白酶可以部分地水解这 些复合物，从而防止了混浊的形成。
焙烤食品：将菠萝蛋白酶加入生面团 中，可使面筋降解，生面团被软化后 易于加工，并能提高饼干与面包的口 感与品质。
菠萝蛋白酶作为有活性的蛋白质，易 受到温度、PH、金属离子等的影响。菠 萝蛋白酶的最适反应温度介于55 ～ 60℃， 温度再高，酶的热失活增强，反应速度 下降。最适pH在7.5～8.5之间。
二、菠萝蛋白酶的提取方法
高岭土吸附法 单宁沉淀法 超滤法
1、高岭土吸附法
压榨：将菠萝下脚料洗净，用压榨机压出汁液， 加入0.05％苯甲酸钠防腐，迅速过滤除杂质。 吸附：将汁液移入吸附槽中搅拌，同时加入4 ％的高岭土，搅拌约20 min，在10℃吸附30～ 60分钟，用虹吸排掉上清液，收集高岭土吸附 物。
1、菠萝蛋白酶的组成
菠萝蛋白酶是由多种不同分子量和分 子结构的酶所组成的酶系，主要由半胱氨 酸蛋白酶组成。除此之外，有的还含磷酸 酯酶、过氧化物酶、纤维素酶、其它糖苷 酶及非蛋白物质。
菠萝蛋白酶是一种糖蛋白，分子结构中 含有一个寡糖分子，由木糖(xylose，xyl)、 岩藻糖(fucose，Fuc)、甘露糖(mannose， Man)和N-乙酰葡糖胺(N-aceltylglucosamine，GIcNAc)组成，共价连接在肽链上， lshihara和Yasuda等人分别推测出了糖分子 的结构如图1和图2。
3、超滤法
压榨：将菠萝下脚料洗净，用压榨机压出汁液，加 入0.05 ％苯甲酸钠防腐，迅速过滤除杂质。可采 用压滤法或离心法去杂质。
超滤浓缩：将 澄清液在管式超 滤设备中进行浓 缩，使体积浓缩 至原体积的l/5。
超滤设备
沉淀：将浓缩液降温至0～4℃，边搅拌 边加入-20℃的95％乙醇，直至混合液中 乙醇浓度为50％，静置，使酶沉淀，移 出上清液，即得湿酶。 干燥：将湿酶在0℃下减压干燥或冷冻真 空干燥即得菠萝蛋白酶精品。
压榨：将菠萝下脚料洗净，用压榨机压出汁液， 加入0.05％苯甲酸钠防腐，迅速过滤除杂质。 加稳定剂：将澄清液移入生产罐中，在搅拌条 件下，加入澄清液体积0.05％的EDTA、 0.06% 的二氧化硫以及0.02％的维生素C。
加单宁：立刻加入0.1％的单宁，在4℃下静 置1h，离心弃去上清液，收沉淀物。 洗脱、干燥：将沉淀物放入溶解罐中，加入 2～3倍pH值为4.5的抗坏血酸溶液(或者采用 l:3的盐酸，调节pH值到3)，搅拌洗脱40min， 然后过滤，收集滤液，减压干燥或冷冻真空 干燥即得菠萝蛋白酶精品。
三种方法比较
高岭土吸附法生产工艺和操作都比较复杂，原材料消 耗多,所需设备也多，但产品质量较好，纯度较高。产品 酶活可达4.0×106u/g上。 单宁沉淀法比高岭土法简单，原料消耗少，产品酶活 力在3.5×106—4.0 ×106u/g.由于单宁是一种有机酸， 本身带有一定的毒性，它的存在限制了该产品的进一步应 用。 超滤法从提取工艺流程上看，其操作步骤简单，并且该 法具有无低温、能耗少、活力损失小、操作简单等特点， 使总生产成本减少，且产品质量好，纯度高，酶活力高， 酶活总回收率高，经济效益明显比传统工艺好。
谢谢!
菠萝蛋白酶的提取及应用
菠萝蛋白酶的简介 菠萝蛋白酶的提取方法 菠萝蛋白酶在食品加工中的 应用 前景
一、菠萝蛋白酶的简介
菠萝蛋白酶，是典型的巯基蛋 白酶，是从菠萝植株中提取的一种 蛋白水解酶系，主要存在于菠萝的 茎和果实中。根据提取部位的不同， 可分为茎菠萝蛋白酶或和果菠萝蛋 向酶两种。因其水解蛋白具有较高 的生物活性，随着提取纯化技术的 不断进步，使其在各个生产领域中 得到了广泛的应用。