菠萝蛋白酶最佳温度
菠萝蛋白酶的研究及应用进展
Ｎｏ．８．２００８品工业科技，２００１，１７（３）：４３－４６［１５］李霞．保加利亚乳杆菌缩浓缩培养及生化代谢规律的研究［Ｊ］．河南工业大学学报（自然科学版），２００５，２６（２）：７５－７８［１６］刘飞．罗地亚．直投型发醉剂发酵特性研究［Ｊ］．中国乳品工业，２００５，３３（１）：１１－１３［１７］郭本恒．乳品微生物［Ｍ］．北京：中国轻工业出版社，２００１：２３０－２３９菠萝蛋白酶的研究及应用进展吴茂玉１，２，马超３，乔旭光３，宋烨１，赵岩１（１．中华全国供销合作总社济南果品研究院，济南２５００１４；２．中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京１０００９４；３．山东农业大学食品学院，泰安２７１０１８）摘要：综述菠萝蛋白酶的结构和性质，工业生产和实验室分离提纯方法及在医药和食品行业中的应用。
关键词：菠萝蛋白酶；纯化；应用中图分类号：ＴＳ２０１．２＋５文献标志码：Ｂ文章编号：１００５－９９８９（２００８）０８－００１７－０４ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎａｎｄｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｆｂｒｏｍｅｌａｉｎＷＵＭａｏ－ｙｕ１，２，ＭＡＣｈａｏ３，ＱＩＡＯＸｕ－ｇｕａｎｇ３，ＳＯＮＧＹｅ１，ＺＨＡＯＹａｎ１（１．ＪｉｎａｎＦｒｕｉｔＲｅｓｅａｒｃｈＩｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＡｌｌＣｈｉｎａＦｅｄｅｒａｔｉｏｎｏｆＳｕｐｐｌｙ＆ＭａｒｋｅｔｉｎｇＣｏ－ｏｐｅｒａｔｉｖｅｓ，Ｊｉｎａｎ２５００１４；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＮｕｔｒｉｔｉｏｎａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＣｈｉｎａＡｇｒｉｃｕｌｔｕａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００９４；３．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＳｈａｎｄｏｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉ＇ａｎ２７１０１８）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅｒｅｖｉｅｗｓｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｌａｂｏｒａｔｏｒｙａｎｄｃｏｍｍｅｒｃｉａｌｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｂｒｏｍｅｌａｉｎａｓｗｅｌｌａｓｉｔｓａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌａｎｄｆｏｏｄｉｎｄｕｓｔｒｙ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｂｒｏｍｅｌａｉｎ；ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ菠萝蛋白酶（ｂｒｏｍｅｌａｉｎ）是从菠萝植株中提取的一类蛋白水解酶的总称，主要存在于菠萝茎和果实中，根据提取部位的不同，分为茎菠萝蛋白酶和果菠萝蛋白酶。
菠萝中提取菠萝蛋
冷冻、干燥
把提取的酶糊放入冰室中( - 12℃) ,低温冷冻 15～20 h ,取出解冻,离心得酶膏,把酶膏倒人 装有氯化钙或五氧化二磷的干燥器中干燥6～ 10 h 得干酶,研磨成粉状,低温保存
结果与讨论
单宁对菠萝蛋白酶的沉淀分 离效果以不同浓度的单宁处 理菠萝汁后,得到的菠萝蛋 白酶及蛋白质的沉淀曲线, 从曲线中可以看出,在添加 单宁溶液浓度时 ,单宁溶液 浓度为0. 2 %～0. 4 %时沉 淀蛋白的效果最好,菠萝汁 中菠萝蛋白酶的沉淀率达到 72 %。
建议与改进
超滤浓缩后的浓缩液用有机溶剂沉淀法提取精酶， 由于需要低温使生产成本上升，但产品质量、纯度、 酶活都优于前者，是菠萝蛋白酶升级换代的新工艺。 因些本次实验结全超过滤法和单宁沉淀法，以达到 更可观的提取结果。 超滤法生产工艺和操作比较复杂，且设备一次性投 资大。超滤浓缩后的浓缩液若再用高岭土吸附法或 者单宁沉淀法提取，可大大节约其他辅助原料的用 量，总生产成本减少且产品质量好，纯度高，酶活 力高，酶活总回收率高，经济效益明显比传统工艺 好。
5%苯甲酸钠液 混匀 10mi合液 混合液
离心4000r/min 7min
静止40min
酶糊复合物
操作要点
菠萝蛋白酶的提取：称取 1 kg制备好的鲜果皮汁,加 5 %苯甲酸钠溶液 10 ml搅匀,以4 000 r/ min 离心 7 min ,取上清液倒人干净烧杯中。上清液分装在 6 个 小烧杯中,每个装100 ml 菠萝汁,分别缓缓加入空白、 0. 1 %、0. 2%、 0. 3 %、 0. 4%、 0. 6 %单宁溶液 10 ml ,边加边拌约15min ,沉淀物析出,静止40 min。 虹吸除去上清废液 ,把酶复合沉淀物倒入离心杯中, 以4 000 r/ min离心5 min ,倒掉上清废液,得到酶糊 合物。
菠萝蛋白酶提取
菠萝蛋白酶提取一、实验目的：1、了解菠萝蛋白酶的提取和纯化工艺2、优化和加深熟悉菠萝蛋白酶提取技术二、实验原理：菠萝蛋白酶(Bromelain，简称菠萝酶，亦称为凤梨酶或凤梨酵素)是从菠萝果茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。
其外观为浅灰色粉末状，分子量为33000 ，等电点为9.55 。
品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工,采用超滤方法进行过滤浓缩,低温冷冻干燥而得的。
产品已被广泛应用于食品、医药等行业。
结果表明。
提取菠萝中菠萝蛋白酶最佳提取工艺条件是添加单宁溶液的浓度为0．2％，提取时最适pH值为6．5～8．5左右，而最适提取温度为60℃。
菠萝蛋白酶作为一种食品添加剂可用于肉质嫩化，啤酒澄清，还用于干酪、明胶及水解蛋白的生产。
在医药上它可以治疗水肿及多种炎症；它能迅速溶痂，对正常组织无害，不影响植皮，适用于中小面积深度烧伤的治疗。
三、实验步骤操作要点：菠萝蛋白酶的提取称取1 kg制备好的鲜果皮汁，加5％苯甲酸钠溶液10 ml搅匀，以4 000 r／min离心7 min，取上清液倒人干净烧杯中。
上清液分装在6个小烧杯中，每个装100 ml菠萝汁，分别缓缓加入空白、0．1％、0．2％、0．3％、0．4％、0．6％单宁溶液10 ml，边加边拌约1 5min，沉淀物析出，静止40 min。
虹吸除去上清废液，把酶复合沉淀物倒入离心杯中，以4 000 r／min。
离心5 min，倒掉上清废液，得到酶糊复合物。
分离、洗涤和保护把提取的蛋白酶糊倒人烧杯中，加0．1％EDTA溶液100 ml搅匀，再将1．5％氯化钠溶液200 ml倒人烧杯中搅匀，以4 000 r／min离心7 min，倒掉上清废液，得到洗涤剂I酶复合沉淀物。
把洗涤剂I酶复合沉淀物倒入烧杯中，加0．5％乙酸锌溶液20 min，搅拌均匀，静止5 min，加0．06％抗坏血酸溶液30 ml，搅匀，静止5 rain，加1．5％氯化钠溶液20 ml，搅匀，静止5 min，最后再加0．5％EDTA溶液20 ml，搅匀，静止5min，以4 000 r／min离心7 min，把上清废液倒掉，得到洗涤剂Ⅱ酶复合沉淀物。
菠萝蛋白酶
医药、保健品业的应用
抑制肿瘤细胞的生长 对心血管疾病的防治 用于烧伤脱痂 消炎作用 增进药物吸收 预防和治疗单胃动物的腹泻
美容化妆品业的应用
菠萝蛋白酶具有嫩肤、美白去斑的优 异功效。基本作用原理：菠萝蛋白酶可作 用于人体皮肤上的老化角质层，促使其退 化、分解、去除，促进皮肤新陈代谢，减 少因日晒引起的皮肤色深现象。使皮肤保 养呈现良好的白嫩状态。
作用条件
最佳温度： 失活温度： 最佳PH值： 失活PH值： 推荐用量: 温度范围： 作用PH值: 53±1℃ ≥65℃ 5.0～8.0 小于3.0和大与9.5 0.05～0.1%对蛋白质计 50～60℃ 6.0～9.0
提取工艺
目前，菠萝蛋白酶主要从菠萝皮及 果实中提取。常用方法有高岭土吸附 法、单宁沉淀法和超滤法等。
饲料业的应用
将菠萝蛋白酶加入饲料配方或直接混 合在饲料中，可以大大提高蛋白质的利用 率和转化率，并能开发更广的蛋白源，从 而降低饲料成本。
结语
菠萝蛋白酶在各个行业的应用越来越受 到重视,尤其在食品工业、医药上尤显示其重 要性。但就日前,国内菠萝蛋白酶的生产还未 能满足巨大的需求量。因而,对菠萝蛋白酶分 离纯化技术进行深入研究,提取高质量的菠萝 蛋白酶具有重要的实用价值。
结果处理及分析
得率w的计算：
菠萝下脚料的质量M1
干酶的质量M2 W=M2/M1×100%
注意事项
高岭土预处理需适宜，温度约为7080℃，偏酸性。 提取粗酶过程中应保持温度适宜，防 止酶失活。 实验过程中酸碱调节应准确，准确度 越高，提取酶的浓度越高。 盐析尽量完全，否则提取酶中杂质较 多。
溶解：将粗品放入溶解罐中，加入10倍量
的自来水，用16%的氢氧化钠溶液调节pH值 至7.0-7.5，搅拌使其溶解，然后过滤，出 去杂质，收集滤液。
[菠萝蛋白酶提取]果菠萝蛋白酶的提取失败原因
![[菠萝蛋白酶提取]果菠萝蛋白酶的提取失败原因](https://img.taocdn.com/s3/m/8ea02ca0ed630b1c59eeb5dd.png)
[菠萝蛋白酶提取]果菠萝蛋白酶的提取失败原因菠萝蛋白酶提取一、实验目的：1、了解菠萝蛋白酶的提取和纯化工艺2、优化和加深熟悉菠萝蛋白酶提取二、实验原理：菠萝蛋白酶(Bromelain，简称菠萝酶，亦称为凤梨酶或凤梨酵素)是从菠萝果茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。
其外观为浅灰色粉末状，分子量为 33000 ，等电点为 9.55 。
品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工,采用超滤方法进行过滤浓缩,低温冷冻干燥而得的。
产品已被广泛应用于食品、医药等行业。
结果表明。
提取菠萝中菠萝蛋白酶最佳提取工艺条件是添加单宁溶液的浓度为0．2％，提取时最适pH值为6．5～8．5左右，而最适提取温度为60℃。
菠萝蛋白酶作为一种食品添加剂可用于肉质嫩化，啤酒澄清，还用于干酪、明胶及水解蛋白的生产。
在医药上它可以治疗水肿及多种炎症；它能迅速溶痂，对正常组织无害，不影响植皮，适用于中小面积深度烧伤的治疗。
三、实验步骤操作要点：菠萝蛋白酶的提取称取1 kg制备好的鲜果皮汁，加5％苯甲酸钠溶液10 ml搅匀，以4 000 r／min离心7 min，取上清液倒人干净烧杯中。
上清液分装在6个小烧杯中，每个装100 ml菠萝汁，分别缓缓加入空白、0．1％、0．2％、0．3％、0．4％、0．6％单宁溶液10 ml，边加边拌约1 5min，沉淀物析出，静止40 min。
虹吸除去上清废液，把酶复合沉淀物倒入离心杯中，以4 000 r／min。
离心5 min，倒掉上清废液，得到酶糊复合物。
分离、洗涤和保护把提取的蛋白酶糊倒人烧杯中，加0．1％EDTA溶液100 ml搅匀，再将1．5％氯化钠溶液200 ml倒人烧杯中搅匀，以4 000 r／min离心7 min，倒掉上清废液，得到洗涤剂I酶复合沉淀物。
把洗涤剂I酶复合沉淀物倒入烧杯中，加0．5％乙酸锌溶液20 min，搅拌均匀，静止5 min，加0．06％抗坏血酸溶液30 ml，搅匀，静止5 rain，加1．5％氯化钠溶液20 ml，搅匀，静止5 min，最后再加0．5％EDTA溶液20 ml，搅匀，静止5min，以4 000 r／min离心7 min，把上清废液倒掉，得到洗涤剂Ⅱ酶复合沉淀物。
菠萝蛋白酶部分酶学性质的研究
菠萝蛋白酶部分酶学性质的研究黄志坚;董瑞兰;罗刚;江和基【期刊名称】《福建农业学报》【年(卷),期】2014(000)001【摘要】通过菠萝蛋白酶的最佳吸收峰、酶的浓度及大小，红外光谱分析和酶活性的测定，研究菠萝蛋白酶的部分性质。
结果表明，菠萝蛋白酶具有热稳定性，其大小约为28.8 kD ，且最适温度为60℃，最适p H为7.5。
Fe2＋对菠萝蛋白酶有激活作用，Z n2＋、C u2＋低浓度有促进作用，高浓度有抑制作用，N aC l对菠萝蛋白酶能起到一定的保护作用、KCl对酶反应影响不大，MgSO4·7H2O和无水CaCl2对菠萝蛋白酶活性均有一定程度的抑制作用。
菠萝蛋白酶经pH2.5胃蛋白酶和 pH3.2胃蛋白酶作用后，随处理时间的延长，其酶活力都呈下降的趋势。
其中，pH2.5条件下的胃蛋白酶对菠萝蛋白酶活力的影响较大。
表明在模拟猪胃条件下pH2.5胃蛋白酶对菠萝蛋白酶影响较大。
【总页数】5页(P62-66)【作者】黄志坚;董瑞兰;罗刚;江和基【作者单位】福建农林大学动物科学学院/福建省动物药物工程实验室，福建福州350002;福建农林大学动物科学学院/福建省动物药物工程实验室，福建福州350002;福建农林大学动物科学学院/福建省动物药物工程实验室，福建福州350002;福建农林大学动物科学学院/福建省动物药物工程实验室，福建福州350002【正文语种】中文【中图分类】S859.1【相关文献】1.杏鲍菇菌糠漆酶分离纯化及部分酶学性质研究 [J], 刘骊;单书凯;张杰;闫苗;赖春芬;艾柳英;孙淑静2.产几丁质酶侧孢短芽孢杆菌M64的产酶条件优化及部分酶学性质研究 [J], 刘蒲临;程德勇;缪礼鸿3.香菜叶多酚氧化酶的分离纯化与部分酶学性质研究 [J], 孙才云;方玲;唐云明4.一株关中热泉液口普鲁兰酶产生菌的筛选鉴定及部分酶学性质研究 [J], 常帆;薛文娇;马赛箭;安超;贾凤安5.TiO_2吸附及超滤法部分纯化果菠萝蛋白酶的研究 [J], 李兴;林哲甫因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
菠萝蛋白酶
菠萝蛋白酶的性质：
综上所述，菠萝蛋白酶有一个较高的最适 的反应温度，较广的酶反应pH，一般金属 盐NaCl、kCl对酶的反应影响不大,MgCl、 CaCl在高浓度下对酶有一定程度的抑制作 用，在低浓度下影响不明显。
菠萝蛋白酶的提取方法：
1、高岭土吸附法
抑制血小板聚集 加速纤维蛋白原的分解：
对心血管疾病的防治：菠萝蛋白酶能抑制 血小板聚集引起的心脏病发作和中风，缓 解心绞痛症状，缓和动脉收缩，加速纤维 蛋白原的分解。
抑制毒素分泌作用：
试验结果证明，菠萝蛋白酶能降低毒素结 合活性并能抑制热不稳定毒素(LI)、霍乱毒 素(CT)及热稳定毒素(ST)的分泌效应。
预防和治疗动物腹泻：
仔猪大肠杆菌性腹泻是养猪场最常见的疾病 之一，而肠毒源性大肠杆是引起仔猪腹泻 的主要病菌之一。 菠萝蛋白酶防治仔猪腹泻可能通过以下几 个方面实现：(1) 抗炎作用；(2) 抑制细菌 毒素分泌作用；(3) 增加抗生素吸收作用； (4) 细胞因子和免疫Βιβλιοθήκη 节作用；(5)促进伤口 愈合作用。
菠萝蛋白酶的提取 及医药运用
主要内容
菠萝蛋白酶的简介 菠萝蛋白酶的性质
菠萝蛋白酶的提取方法
菠萝蛋白酶在医药中的应用 应用前景
简介
菠萝蛋酶:(Bromelain， 简称菠萝酶，亦称为凤 梨酶或凤梨酵素)是从 菠萝果茎、叶、皮提取 出来，经精制、提纯、 浓缩、酶固定化、冷冻 干燥而得到的一种纯天 然植物蛋白酶。
简介
于在1975年，发现菠萝蛋白酶可作为一种 治疗性成分。它的纯品是一种糖蛋白，其 糖分子结构有以下两种：
菠萝蛋白酶的性质是 什么呢？
1.温度的影响 菠萝蛋白酶有一个较高的最适反应温度, 介 于55～60℃, 温度再升高, 酶的热失活增强, 2.反应速度下降 pH的影响 菠萝蛋白酶的最适pH 在6.5～7.5, 在7. 1 附近 达到最大值。在酸性环境下酶反应速度直线下 3金属离子的影响 滑, 在碱性环境下则有一个较广的应用区间。 金属离子(如NaCl、KCl、MgCl2、CaCl2 ) 对酶 当pH由5.6升到7.1时, 酶反应速度提高了14.6%， 反应均有影响。随着浓度的增加, NaCl、KCl对 酶较稳定的pH 在3.5～4.5, 在3.9附近效果最佳 酶反应影响不大,而MgCl2 和CaCl2 对酶有一定 (章佩芬等, 2003)。菠萝蛋白酶的最适pH为7.1。 程度的抑制作用。但是, 当盐浓度不超过0.001 N
菠萝蛋白酶应用的性质研究
Abstract This paper studies the effect of several factors on bromelain. The results show that the optimal pH value for reaction is 7. 1, and the optimal temperature is 55 . The enzyme is stable relatively in the pH range from 3. 9 to 4. 2, NaCl and kCl don t obviously affect enzyme activ ity , MgCl2. CaCl2 of higher concentration inhibit the enzyme activity, with lower concentration hasn t distinctness inhibition. Within the cer tain range of concentration, Cysteine can promote the reaction. EDTA do esn t stimulate the bromelain, it can reduce the enzyme activity by chelating the metal ion needed for the reaction of enzyme.
表 2 EDTA、半胱氨酸盐酸盐存在下酶反应速度与对照速度之比率
浓度( g/ ml )
5 10- 5 5 10- 4 5 10- 3
EDTA 存在下的比值( % )
99. 0
100
73. 7
半胱氨酸盐酸盐存 在下的比值( % )
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菠萝蛋白酶最佳温度
菠萝蛋白酶是一种存在于菠萝中的酶，它在菠萝成熟过程中发挥着重要的作用。
菠萝蛋白酶最佳温度是指在哪个温度下，菠萝蛋白酶的活性能够达到最高。
菠萝蛋白酶是一种催化蛋白质水解的酶，其存在于菠萝的果肉和果汁中。
菠萝蛋白酶主要由两种蛋白质组成，分别是菠萝蛋白酶A和菠萝蛋白酶B。
这两种酶在酸性条件下最为活跃，而在碱性条件下则会失去活性。
菠萝蛋白酶的最佳温度一般在50-60摄氏度之间。
在这个温度范围内，菠萝蛋白酶的活性能够达到最高。
当温度低于50摄氏度时，菠萝蛋白酶的活性会显著降低，酶的催化效率也会明显下降。
而当温度超过60摄氏度时，菠萝蛋白酶的蛋白结构会发生变性，使其失去催化活性。
菠萝蛋白酶的最佳温度与菠萝生长环境有关。
菠萝生长在热带和亚热带地区，这些地区的气温较高，因此菠萝蛋白酶的最佳温度也相对较高。
菠萝在生长过程中，果实会经历成熟的过程，而菠萝蛋白酶在果实成熟过程中发挥着重要的作用。
菠萝蛋白酶在果实成熟过程中的作用是将果肉中的蛋白质水解为小分子肽和氨基酸，使果肉变得更加软化和甜美。
这个过程中，菠萝蛋白酶的最佳温度能够保证酶的催化效率最高，使果肉的变软和甜
味的形成达到最佳状态。
菠萝蛋白酶的最佳温度还与酶的结构和功能密切相关。
菠萝蛋白酶的结构中含有许多氨基酸残基，这些氨基酸残基的空间构型和电荷状态对酶的活性起着关键作用。
在最佳温度下，菠萝蛋白酶的氨基酸残基的构型和电荷状态能够达到最佳状态，从而使酶的催化效率最高。
除了最佳温度外，菠萝蛋白酶的活性还受到其他因素的影响，比如pH值、金属离子和抑制剂等。
在不同的pH值下，菠萝蛋白酶的最佳温度也会有所不同。
在不同的金属离子存在下，菠萝蛋白酶的最佳温度也会有所变化。
而一些特定的抑制剂则可以抑制菠萝蛋白酶的活性。
总结起来，菠萝蛋白酶的最佳温度是在50-60摄氏度之间。
这个温度范围内，菠萝蛋白酶的活性能够达到最高，果肉变得更加软化和甜美。
菠萝蛋白酶的最佳温度还与酶的结构和功能密切相关，同时也受到其他因素的影响。
了解菠萝蛋白酶的最佳温度有助于我们在食品加工和烹饪过程中更好地利用菠萝蛋白酶的作用。