最新层析技术简单介绍及其应用
新型层析快速检测技术及其在食品安全中的应用

新型层析快速检测技术及其在食品安全中的应用摘要:近年来,随着科学技术的不断发展,食品安全问题也成为了人们关注的重点问题。
与此同时,各项检测技术也受到了社会普遍的关注。
科学技术的发展促进了食品检测技术的快速更新,以往以胶体金标为代表的免疫层析方法已经在食品检测领域中获得了广泛的应用,其通过试纸上的颗粒达到的密集程度,对于免疫层析产生的指示物性质进行判断,以此来实现对食品中不同物质的检测。
本文笔者则主要针对新型层析快速检测技术以及其在食品检测中的应用问题进行简单的分析。
关键词:新兴层析快速检测技术食品安全食品检测技术当前,对于胶体金标免疫层分析检测技术在我国多数产业中都有着一定的使用规模,但是这些传统的检测方法自身存在的弊端,也随着其应用范围的扩展而逐渐的显露出来,比如有的物质容易受到光学的干扰,这时便只能够完成对其定性或者是半定量的分析,无法及时的获得检测的数据。
同时,有的检测结果只能够在标记物大量聚集,达到一定程度之后才会呈现出肉眼可见的信号,才能获得检测结果。
因此,这些问题的存在对传统的层析方法产生了一定的阻碍作用,新型层析快速检测技术便成为了一种新的发展趋势。
一、标记物免疫层析法技术的应用1、标记物免疫层析法技术标记物免疫层析法主要是以量子点标记免疫分析层为主,并且受到量子尺寸效应的影响,其会产生一定的发光效应,这便能够为检测结果的获得提供更为准确的信息。
一方面,量子点使用的材料与发光特性有着一定的关系,而且在一定的范围内,粒径越大其产生的波长也就越长;另一方面,量子点有着比生物分子更长的荧光寿命,当大部分的生物分子荧光猝灭后,量子点仍然能够依靠自身的特性排除自然本底的干扰,来获得检测结果。
另外,量子点通过稳定的核壳包裹能够使其自身的化学性能更加稳定,而且使细胞毒性大大的降低,因此,其在近年来的食品检测领域中受到了广泛的应用。
2、标记物免疫层析法技术在食品安全中的应用当前,一种新的检测有机磷农药一毒死蜱(三氯吡啶醇,trichloropyridin01)残留的传感器,成为了量子点标记免疫分析法的主要运用媒介,该传感器基于量子点标记免疫层析方法并结合一便携式量子点层析试纸条的读取仪。
层析技术简单介绍及其应用

层析技术简单介绍及其应用层析技术(Tomography)是一种通过对物体进行多角度投影扫描来重建其内部结构的成像技术。
它的基本原理是使用射线或波束从不同的方向通过物体,然后通过对每个方向的投影进行综合分析来重建物体的内部结构。
层析技术可以用于各种领域,包括医学、工程、地质学和材料科学等。
在医学领域,层析技术常用于进行X射线断层扫描(CT扫描)。
CT扫描是一种无创且精确的成像方法,可以用来检测和诊断各种疾病和病变,如肿瘤、骨折和血管病变等。
在CT扫描中,X射线通过患者的身体,然后使用感应器测量X射线通过后的强度。
通过多个不同的角度进行扫描和测量,计算机可以根据这些数据生成患者身体的三维图像,从而帮助医生做出准确的诊断和治疗计划。
层析技术在工程领域也有广泛的应用。
例如,它可以用于检测和识别材料的缺陷,如焊接缺陷和裂纹等。
通过将材料放置在扫描仪中并进行多角度扫描,工程师可以获得材料的内部结构信息,从而判断其质量和可靠性。
此外,层析技术还可以用于工艺过程的监测和优化,如石油勘探和制造业中的流体流动和混合过程等。
地质学是另一个应用层析技术的领域。
地球内部的结构和成分对于理解地球演化和资源勘探具有重要意义。
通过射线或波束的投射和测量,地球科学家可以重建地球内部的密度分布和物质成分,在不必进行物质采样的情况下了解地球深处的情况。
这对于勘探石油、天然气和矿产资源等具有重要价值。
总结来说,层析技术是一种通过多角度投影扫描来重建物体内部结构的成像技术。
它在医学、工程、地质学和材料科学等领域都有重要的应用。
通过层析技术,我们可以获得物体的三维结构信息,帮助医生进行疾病的诊断和治疗,工程师检测材料的质量和可靠性,地球科学家了解地球内部结构和成分。
层析原理的应用有哪些

层析原理的应用有哪些1. 什么是层析原理层析原理是一种通过测量物质在不同位置的衰减情况,从而获取物质内部结构信息的方法。
它基于射线的吸收或散射特性,用于解析和显示物体内部的结构和元素分布。
2. 医学领域的应用层析原理在医学领域有着广泛的应用。
以下是层析原理在医学领域的一些应用示例:•CT扫描:CT(计算机断层扫描)通过层析原理,以图像的形式显示出人体内部器官的详细结构。
它可以用于检测和诊断多种疾病,如肿瘤、骨折、脑血管疾病等。
•PET扫描:PET(正电子发射断层扫描)利用层析原理,通过检测体内放射性示踪剂的分布,来获取人体内部代谢和功能信息。
它广泛应用于癌症的早期诊断和评估治疗效果。
•SPECT扫描:SPECT(单光子发射计算机断层扫描)是利用层析原理来获得体内放射性示踪剂的分布情况,与PET类似。
它主要用于心血管疾病的诊断和评估,如心肌灌注显像等。
•核磁共振成像:核磁共振成像(MRI)是一种基于层析原理的成像技术,通过测量核磁共振信号来生成图像。
MRI广泛应用于人体解剖结构、脑功能、关节疾病等的诊断和研究。
3. 工业检测与成像应用层析原理在工业领域也有着重要的应用。
以下是一些工业检测与成像领域常见的层析原理应用示例:•金属检测:层析原理可以应用于金属检测,通过测量射线的吸收情况来检测金属的存在或缺陷。
•岩石勘探:层析原理可以应用于地质领域的岩石勘探中,通过测量岩石的衰减和散射情况来获取地下岩石的信息。
•非破坏检测:层析原理在非破坏检测方面也有很多应用,如检测建筑物和桥梁的内部结构、检测电子设备的缺陷等。
4. 科学研究与探索应用层析原理在科学研究领域也有广泛的应用,以下是一些科学研究与探索的应用示例:•大气科学:层析原理可以应用于大气科学研究中,通过测量大气中不同物质的吸收和散射情况来研究大气成分和气候。
•材料科学:层析原理可以应用于材料科学中,通过测量材料内部的结构和成分分布来研究材料的性质和应用。
层析分离技术

层析分离技术层析分离技术是一种重要的分离方法,广泛应用于化学、生物、环境等领域。
它基于物质在不同相之间的分配差异,通过多次分配和分离步骤,将混合物中的组分分离开来。
本文将从层析分离技术的原理、类型和应用方面进行介绍。
一、层析分离技术的原理层析分离技术基于物质在不同相中的分配差异,利用不同相中物质的亲疏水性、极性、分子尺寸等特性进行分离。
其原理可以概括为:当混合物通过固定相(静相)时,不同组分会因其与固定相的相互作用力不同而以不同速度通过固定相,从而实现分离。
1. 柱层析:柱层析是最常见的层析分离技术,其主要包括液相层析和气相层析两种形式。
液相层析是在液相中进行分离,常见的有凝胶层析、离子交换层析、亲和层析等;气相层析则是在气相中进行分离,常见的有气相色谱层析、气体吸附层析等。
2. 纸层析:纸层析是一种简单易行的层析分离方法,主要用于分离和鉴定有机化合物。
通过将样品溶液滴到纸上,然后在纸的一端浸入溶剂中,溶剂在纸上上升时,样品中的组分会因其与纸或溶剂的相互作用力不同而以不同速度迁移,从而实现分离。
3. 薄层层析:薄层层析是将样品溶液均匀涂布在薄层层析板上,然后将其浸入溶剂中进行分离。
薄层层析具有操作简便、分离效果好的特点,广泛应用于药物分析、天然产物分离等领域。
三、层析分离技术的应用1. 生物化学:层析分离技术在生物化学研究中得到广泛应用,如蛋白质纯化、核酸提取、酶活性分析等。
2. 药物分析:层析分离技术是药物分析中常用的方法之一,可以用于药物的纯化和分离、药物代谢产物的分析等。
3. 环境监测:层析分离技术可以用于环境中有机物、无机物和杂质的分离和测定,如水质检测、土壤污染分析等。
4. 食品安全:层析分离技术在食品安全领域也有广泛应用,可以用于食品中有害物质的检测和分离,如农药残留、重金属含量等。
层析分离技术作为一种重要的分离方法,具有原理简单、分离效果好、应用广泛的特点。
通过不同类型的层析分离技术,可以实现对混合物中不同组分的高效分离和纯化。
层析技术原理

层析技术原理
层析技术是一种分离和分析混合物中成分的方法,它基于不同化学
物质在固定相(如硅胶、活性炭等)上的吸附特性。
该技术可以用于
食品、医药、环境监测等领域。
原理:1. 吸附:样品通过柱子或板块时,其中的化学物质会被固定相表面吸附。
2. 洗脱:洗脱剂流经固定
相时,将已吸附的化学物质从固定相表面解除,并带走它们。
3. 分离:由于不同化学物质在固定相上的亲和力不同,所以它们会被洗脱剂按
照一定顺序逐个排出来。
4. 检测:检测器对每个组分进行检测并记录
其信号强度。
根据峰高或峰面积大小可计算出每种成分在样品中所占
比例。
应用:1. 食品行业层析技术可用于饮料、果汁、啤酒等食品中
添加剂残留量及营养成分含量的检测与控制;也可以对植物提取液进
行有效成分提取和纯化处理。
2. 医药行业层析技术广泛应用于草药提
取液中有效成份纯化及新型药物开发过程中杂质去除工作;同时还能
够快速准确地确定血清生化指标值等临床诊断数据。
3. 环境监测层析
技术可用于水体、土壤等环境样本中有机污染物及重金属元素含量检
测与评估;同时也能够为大气污染源追溯工作提供科学依据。
层析的原理和应用

层析的原理和应用1. 层析的概念和基本原理层析(Chromatography)是一种将混合物中的组分分离和提纯的技术方法。
它基于组分之间在固定相和流动相之间的相互作用力的不同,使各种组分在系统中以不同速度迁移,达到分离的目的。
层析技术广泛应用于化学、生物、环境等领域。
层析技术的基本原理是利用流动相在固定相上的移动来实现物质的分离。
固定相通常是具有一定吸附性或分配性的材料,如硅胶、纸张、亲水性基质等。
流动相则是将待分离的混合物溶解在溶剂中,通过与固定相的相互作用,使各组分在固定相上以不同速率迁移。
2. 层析技术的分类和应用层析技术根据其基本原理和操作方式的不同,可以分为多种类型。
以下是其中几种常见的层析技术及其应用:2.1 薄层层析法(TLC)薄层层析法是一种在薄层材料上进行的层析技术。
常用的薄层材料包括硅胶和氧化铝等。
它具有简单、快速、经济的特点,广泛应用于药物分析、食品安全检测、环境监测等领域。
2.2 柱层析法柱层析法是将固定相填充在柱中,通过流动相沿着柱内固定相的分布,实现各组分的分离。
根据固定相的不同,柱层析法又可分为凝胶柱层析和高效液相层析等。
柱层析法在药物分离纯化、天然产物提取、有机合成等领域具有广泛应用。
2.3 气相层析法(GC)气相层析法是将待分离的混合物蒸发为气体状态,通过在柱中固定相的分离,最终使各组分在检测器上进行定性和定量分析。
气相层析法广泛应用于石油化学、环境监测、食品安全等领域。
2.4 液相层析法(LC)液相层析法是将待分离混合物溶解于液相,在柱中利用固定相进行分离。
液相层析法根据流动相的不同,可分为常压液相层析和高效液相层析等。
液相层析法在制药、生物、环保等领域具有广泛应用。
2.5 离子层析法(IC)离子层析法是利用不同组分之间的化学亲合性进行分离的一种层析技术。
它广泛应用于水质分析、环境监测、生物学研究等领域,尤其是对离子的分析具有很高的选择性和灵敏度。
3. 层析技术的优点和局限性层析技术具有许多优点,使其成为众多分析方法中的重要手段。
层析成像原理及应用

层析成像原理及应用一、引言层析成像(Tomography)是一种通过对物体进行多次扫描,然后利用计算机重建出物体内部结构的技术。
它可以提供高分辨率的三维图像,广泛应用于医学、工业检测等领域。
本文将介绍层析成像的原理及其在医学诊断、材料检测等方面的应用。
二、层析成像原理层析成像的原理基于射线投影的思想,通过对物体进行多个角度的射线投影扫描,然后通过计算机对这些投影数据进行重建,得到物体的三维结构。
具体来说,层析成像主要包括以下几个步骤:1. 射线投影:在不同的角度上,通过物体的不同位置进行射线投影,得到一系列的投影图像。
2. 数据采集:将投影图像转化为数字信号,并存储在计算机中。
3. 重建算法:对采集的数据进行处理,使用重建算法恢复出物体的内部结构。
4. 图像显示:将重建后的数据以图像形式显示出来,供观察和分析。
三、层析成像的应用1. 医学诊断层析成像在医学领域被广泛应用于疾病的诊断和治疗。
其中最常见的应用就是X射线计算机断层扫描(CT)。
CT扫描可以提供人体内部器官的高分辨率图像,用于检测和诊断各种疾病,如肿瘤、骨折、脑出血等。
同时,CT还可以辅助手术规划,提高手术成功率。
2. 工业检测层析成像在工业领域也有重要应用。
例如,金属材料的缺陷检测。
通过对金属材料进行层析成像扫描,可以检测出内部的裂纹、气孔等缺陷,帮助判断材料的质量和可靠性。
此外,层析成像还可以用于材料的密度分布分析、形状重建等方面,对提高工业产品的质量和效率具有重要意义。
3. 资源勘探层析成像在石油、矿产等资源勘探中也有广泛应用。
通过对地下岩石和矿石进行层析成像扫描,可以获取地下结构的信息,识别石油、矿石等资源的分布情况,为勘探和开采提供重要依据。
层析成像在资源勘探领域的应用,不仅提高了勘探效率,还减少了勘探成本和环境影响。
4. 环境监测层析成像在环境监测中也有一定的应用。
例如,地下水资源的调查和管理。
通过对地下水进行层析成像扫描,可以获得地下水的分布情况、流动方向等信息,帮助科学家和决策者制定合理的水资源管理策略。
层析和膜技术在生物制药中的应用

凝胶层析的应用
分子量测定
测定依据:不同分子量的物质,只要在凝胶的分 离范围内(渗入限与排阻限之间),其洗脱体积 Ve及分配系数Kd值随分子量增加而下降。 待测物质洗脱体积与分子量关系符合下式: Ve=-KlogM+C
K、C 是常数,为直线方程的斜率和外推截距。 同时 Kav=-K′logM +C
层析技术在 生物制药中的应用
一. 离子交换层析技术
定义:利用溶液中各种带电颗粒与离子交 换剂之间结合力的差异进行物质分离的操 作称离子交换法。 离子交换剂由惰性的不溶性载体,功能基 团和平衡离子组成。 平衡离子带正电荷的为阳离子交换剂,平 衡离子带负电荷的为阴离子交换剂,可见 离子交换剂是一类具有活性基团的荷电固 相颗粒。
该法操作简便,需要样品量较少,实用价值较大。
凝胶层析的应用:分子量测定
三. 亲和层析
人们发现生物体中许多高分子化合物具有和某些相对应的 专一分子可逆结合的特性, 例如 酶与底物、抗原与抗体、激素与受体、核糖核酸与 其互补的脱氧核糖核酸,多糖与蛋白复合体等,都具有这 种特性。 生物分子间的这种结合能力称为亲和力,根据生物分子 特异亲和力而设计的层析技术称为亲和层析,在亲和层析 中起可逆结合的特异性物质称为配基,与配基结合的层析 介质称为载体。
离子交换层析技术
离子交换反应:
R—SO3—X+ +Y+ = R—SO3—Y++X+
离子交换剂与交换离子间的作用是由静电引力而产生的, 是一个可逆的反应过程,当这个反应达到动态平衡时,其
平衡点随着pH、温度、溶剂的组成及交换剂本身性质的改
变而变化。例如,向平衡体系中加入过量的X+ 离子,反应 倾向于生成R-SO3-X+。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
层析技术简单介绍及其应用层析法的主要介绍及其应用1.层析法的概念层析法又称色谱法[1].色层法或层离法(Chromatography),是一种应用很广的分离分析方法。
1903年,俄国的植物学家M,C.UBeT在研究分离植物色素过程中,首先创造了色谱法,这是一种根据化合物的不同结构和不同的物理,化学特性,从而具有不同吸附性能的原理,以分离混合物中的化学成分的一种物理化学分离方法,最初用于有色物质,之后应用于大量的无色物质。
色谱法的名称虽然仍然沿用,但已失去原来的含义。
层析法和其他分离方法比较,具有分离效率高,操作又不太麻烦的优点。
因此,层析法的应用越来越广,对于近代化学科学的发展有巨大的影响。
在制药、化工、农业、医学等方面都有着广泛的应用。
2.层析法的历史及原理层析法的历史1903年3月21日俄国植物学家茨维特(Michael Tswett,1872-1919)在华沙自然科学学会生物学会议上发表了“一种新型吸附现象及其在生化分析上的应用”研究论文,介绍了一种应用吸附原理分离植物色素的新方法,并首先认识到这种层析现象在分离分析方面有重大价值。
1906年他在德国植物学杂志发表文章,首次命名上述分离后色带为色谱图,称此方法为色谱法(Chromatography)。
1907年在德国生物学会年会上,展示过带有色带的分离柱管和纯化过的植物色素溶液。
茨维特被世人公认为色谱创始人。
德籍奥地利化学家R.Kuhn 等利用他的方法在纤维状氧化铝和碳酸钙的吸附柱上将过去一个世纪以来公认为单一的结晶状胡萝卜素分离成a 和b 两个同分异构体,并由所取得的纯胡萝卜素确定出了其分子式。
Kuhn正是由于在维生素和胡萝卜素的离析与结构分析中取得了重大研究成果而获得了1938年诺贝尔化学奖.1952年,Martin和James发表第一篇气液色谱论文,首次用气体作流动相,配合微量酸碱滴定,发明了气相色谱,它给挥发性化合物的分离测定带来了划时代的革命。
2.2层析法的原理层析Chromatography(色谱),利用混合物中各组分的物理化学性质间的差异(溶解度、分子极性、分子大小、分子形状、吸附能力、分子亲合力等) ,使各组分在支持物上集中分布在不同区域,借此将各组分分离。
层析法进行时有两个相,一个相称为固定相(Stationary phase ),另一相称为流动相(Mobile phase )。
由于各组分所受固定相的阻力和流动相的推力影响不同,各组分移动速度也各异,从而使各组分得到分离。
层析技术与待分离混合物中各组分的理化性质(分子自然形状、大小、获电状态、溶解度与选择性吸附剂或载体物的吸附能力,分配系数、酸碱环境(pH)、温度、极性以及分子的亲和能力等)有着直接关系[2]。
除此,任何层析技术,均具有两相条件(即流动相和固定相),造成流动相对固定相作单向相对运动。
这种流动相推动样品中各组分通过固定相向前迁移,其运动速率与两相物质和被分离物质状态有关。
由于被分离物各组分中的理化性质不同,对不同的两组或两组以上组分,具有不同的作用力,通过吸附一解吸,或离子交换、分子筛效应、静电引力,免疫特异性吸附等,造成各组间生物分子分离、迁移距离不等,最终达到被测物的分离、纯化的目的。
这一技术的应用,不但能分离有机化合物,还能分离无机物,更主要的是适合于分离分析生物高分子物质,其分离范围广,适用性强。
化学性稳定、灵敏度高,既可纯化又可制备,条件简便。
层析技术的基本原理如此,但是不同的具体层析分离方法用到的技术原理又有所改进和不同,下面我们将根据不同的层析方法分别进行介绍。
层析法的分类层析法的分类由于层析法是利用物质在不同的两相中溶解,吸附或其它亲和作用的不同,使混合物中的各组分达到分离目的,因而层析法有多种类型,也有多种分类方法。
按两相所处的状态分类以液体作为流动相的称为“液相层析”或“液体层析”(liquidchromatography,L.C.或LC);用气体作为流动相的称为“气相层析”或“气相色谱”rga\chromatography,G.C.或GC)-按固定相的种类来分,又可以把液固层析分为;液——固层析(1iquid—solidchromatography,L.S.C或LSC),液——液层析(1iquid—liquidchromatography?L.L.C或LLC);把气相层析分为:气一—固层析tgas—solidchromatography,G.S.C或GSC)、气——液层析(gas—tiqu:dchromotographY,C.L.C.或GLC)。
(二) 按层析机制分类1.吸附层析(adsorptionchromatography)这是利用吸附剂对不同组分有不同的吸附能力使之分离的一种层析方法。
2.分配层析(partitionchromatography)这是利用不同组分在流动相和固定相之间的分配系数不同的一种层析方法。
3.离子交换层析(ion—exchangechromatography)这是利用不同组分对离子交换剂亲和力的不同的一种层析方法。
d.凝胶层析(gelchromatography)这是一种利用凝胶对不同组分因分子大小不同而有不同阻滞作用的一种分离方法。
名称分离原理吸附层析法组份在吸附剂表面吸附固定相是固体吸附剂,各能力不同分配层析法各组份在流动相和静止液相(固相)中的分配系数不同离子交换层析法固定相是离子交换剂,各组份与离子交换剂亲和力不同凝胶层析法固定相是多孔凝胶,各组份的分子大小不同,因而在凝胶上受阻滞的程度不同亲和层析法固定相只能与一种待分离组份专一结合,以此和无亲和力的其它组份分离(三) 按操作形式不同分类:1.柱层析(columnchromatography,C.C.或CC)将固定相装入柱内,装样后,用流动相沿一个方向移动而达到分离的目的。
2.纸层析(paperchromatography,P,C.或PC)用滤纸作为液体的栽体,点样后,用适当的流动相展开,以达到分离的目的。
3.薄层层析(thinlayerchromatography,T.L.C或TLC)将吸附剂铺成薄层,点样后,用流动相展开,以达到分离的目的。
名称操作形式柱层析法固定相装于柱内,使样品沿着一个方向前移而达分层析法几种主要的方法及其特点4.1薄层层析和纸层析薄层层析(T.L.C或TLC)和纸层析(P.C或PC)在层析方面具有广泛的吸引力,这是由于这两种方法可用于定性、定量和制备。
它们对于痕量的分析是很方便的,效果很好。
这二种层析方法应用面很广,应用的例子也很多。
例如:鉴定合成过程中的副产品;测定生物放射同位素中的放射杂质,鉴定天然产物:药物的分离鉴定;食品的分析鉴定;等。
虽然气相层析(G.C.或GC)比薄层层析和纸层析更方便,尤其在定量分析方面,但薄层层析和纸层析的某些优点超过气相层析,所以,现在这两种方法经常被使用。
薄层和纸层与气层比较,有下列优点:1.薄层和纸层可用于分离热不稳定的化合物。
2.薄层和纸层的定量重现性比较容易。
3.薄层和纸层能够用于很多方面,这是由于移动捆(展开剂)可以交换,而且分离过程也很容易。
4.双向薄层和纸层所能产生的结果和得到的资料是单相色谱操作所不能实现的。
5.薄层和纸层的装置简单,成本费较低。
6.一些样品和比较的化合物可以同时在一个简单的色谱中加以比较。
7.在鉴定工作中,可用颜色试验并可测定其R,值。
气层可以看作是对薄层和纸层在技术上的补充和发展,此外,尚有高效液相层析(HPIC)。
但还不能用新技术完全代替薄层和纸层,而且上述4—7的优点超过了气层和高效液相层析。
虽然薄层和纸层可以交换使用,但在大多数情况下,首先选择薄层是比较方便的。
此外,腐蚀性显色试剂在纸层中不能使用。
4.2纸层析纸层析的基本原理及其特点纸层析法是以滤纸作为支持剂(或称为载体、担体),用一定的溶剂系统(展开剂)展开而达到分离拘目的。
固定相一般为滤纸纤维上吸附的水分,流动相为不与水混合的有机溶剂,固定相除水以外,尚可用甲酰胺、缓冲溶液等。
此法可用于定性、定量,也可用于分离制备。
一般将样品溶于适当的溶剂中,点样于滤纸的一端,干后,悬挂在一密闭的层析筒中,用适当的展开剂展开,展开有上行法和下行法,展开完毕后,将滤纸取出,划出溶剂前沿线,阴千,以适当的显色剂显色。
样品层析后,一般用比移值R,表示某一化合物在纸层析谱中的位置,如下图因为纸层析是溶质(样品)在固定相和流动相之间的连续萃取,根据溶质在两相间分配系数的不同而达到分离的目的。
一定的物质在二相间有固定的分配系数,所以有固定的比移值Rf,也就是说在一定的条件下,R+值为一常数,因此可以达到分离鉴定的目的。
R值一般在0到1之间。
影响R‘值的因素很多,主要有下列几方面重要因素:1.样品本身极性的大小一般说来,物质分子中极性基团增加,物质的极性就随着增加,则分配系数变大,R,值变小。
增加分子中的非极性成分,则分子的极性降低,则R,值变大。
2.由二个氨基酸A,B组成的二肽,不管是组成AB或BA,理论上,在任何溶剂中,RfAB和RfBA值应是相等的,但在实际测定中,由于其他种种原因,如吸附等的影响,Rf 值可能会有些差异!这也就是有些同分异构体能够被纸色谱分离的原因所在。
3.氢键的影响溶质和溶剂如能形成氢键,对R+的影响较大。
4.溶剂的性质用与水完全互溶的脂肪醇类作溶剂时,醇类的一CH2基数与溶质的Rf 值呈反比关系,增加一CH2基,则Rf值相应的变小。
同一种有机溶剂由于含水量增加,使某些溶质相应地易于进入有机相,因此,R:值也相应变大。
5.pH因为弱酸与弱碱的解离度与PH有关,由于溶剂pH的改变,溶质的解离度也随之改变,致使在二相中的分配系数改变,结果造成Rf值的改变。
6.展开温度如前所述,有机相中含水量的改变,溶质的R,值也相应改变。
水在有机相中的溶解度是随温度的变化而变化的。
所以展层温度的改变会使R,值有所改变。
但在有些溶剂体系中,Rf值不随温度的变化而变化,因为这一类溶剂体系的组成不随温度变化而变化,或与水完全互溶。
但对温度敏感的溶剂体系,在色谱分离口寸必须严格控制温度。
一股温度变化以不超过±0,5℃为宜。
7.滤纸的性质滤纸厚薄不匀,含水量不一致,溶剂沿着纤维方向的流动就会紊乱,导致溶剂前沿不整齐,色谱分离点畸形,影响R,值的测定。
纸纤维中,如金属离子Ca2+、Fe2+、Mg2+、Cu2+等含量很高时,则影响Rf值。
此外,溶剂配制的时间长短、滤纸的含水量不同,展开的方向,长度和方法的不同,点样位置离溶剂槽的距离不同,溶剂槽中溶剂量的不同,平衡条件的不同等等,都能影响R,值,在做平行实验时必须予以注意。
4.3纸层析的操作方法1.层析纸的选择和处理用于色谱分离的滤纸必须具备下述条件。