高中生物第十单元生物技术实践第35讲微生物的培养与应用课件
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人教版高中生物课件-微生物的培养与应用
(2)測定方法一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素 後所產生的__葡__萄__糖__進行定量測定。
高頻考點突破
培養基 1．概念：人們按照微生物對營養物質的不 同要求，配製出供其生長繁殖的營養基質。
2．培養基的類型、用途
3.無菌技術 消毒與滅菌的區別
【易誤警示】 (1)芽孢是細菌發育後期形成 的休眠體，耐高溫，故消毒僅殺死物體表面 或內部一部分對人體有害的微生物而不包括 其芽孢和孢子。 (2)滅菌和消毒的實質大都是使微生物的蛋白 質或核酸發生變性。
【解析】 (1)因為纖維素分解菌與耐熱菌有不同 的生活習性，生活在不同的環境中，故要根據目 的菌株對生存環境的要求，到相應的環境中去尋 找。(2)因為葡萄糖是纖維素水解成的、能被微生 物直接利用的有機小分子，所以如果將其中的纖 維素粉換成葡萄糖，纖維素分解菌及其他細菌會 生長繁殖得更快，故菌落數明顯多於選擇培養基。 (3)因為稀釋塗布平板法要將菌液進行一系列的梯 度稀釋，故該法可根據稀釋體積計算每克樣品中 的細菌數，而平板劃線法則不能這樣，所以本實 驗宜採用稀釋塗布平板法。
細菌的分離與計數
1．菌株篩選原理的比較
土壤中分解尿素的細菌
分解纖維素的微生物
剛果紅染色法，即在含有纖維素
常用選擇培養基進行篩選， 的培養基中，加入剛果紅時，剛
既提供有利於目的菌株生 果紅與培養基中的纖維素形成紅
長的條件，如營養、溫度、 色複合物。當纖維素被分解後，
pH等，同時抑制其他微生 該複合物不能形成，培養基中出
即時應用(隨學隨練，輕鬆奪冠) 1．(2011年湘潭高三第一次模擬)關於滅菌和消毒的 理解不正確的是( ) A．滅菌是指殺滅環境中一切微生物的細胞、芽孢 和孢子
B．消毒和滅菌實質是相同的 C．接種環用灼燒法滅菌 D．常用滅菌方法有灼燒滅菌、幹熱滅菌、高壓蒸 汽滅菌等
高頻考點突破
培養基 1．概念：人們按照微生物對營養物質的不 同要求，配製出供其生長繁殖的營養基質。
2．培養基的類型、用途
3.無菌技術 消毒與滅菌的區別
【易誤警示】 (1)芽孢是細菌發育後期形成 的休眠體，耐高溫，故消毒僅殺死物體表面 或內部一部分對人體有害的微生物而不包括 其芽孢和孢子。 (2)滅菌和消毒的實質大都是使微生物的蛋白 質或核酸發生變性。
【解析】 (1)因為纖維素分解菌與耐熱菌有不同 的生活習性，生活在不同的環境中，故要根據目 的菌株對生存環境的要求，到相應的環境中去尋 找。(2)因為葡萄糖是纖維素水解成的、能被微生 物直接利用的有機小分子，所以如果將其中的纖 維素粉換成葡萄糖，纖維素分解菌及其他細菌會 生長繁殖得更快，故菌落數明顯多於選擇培養基。 (3)因為稀釋塗布平板法要將菌液進行一系列的梯 度稀釋，故該法可根據稀釋體積計算每克樣品中 的細菌數，而平板劃線法則不能這樣，所以本實 驗宜採用稀釋塗布平板法。
細菌的分離與計數
1．菌株篩選原理的比較
土壤中分解尿素的細菌
分解纖維素的微生物
剛果紅染色法，即在含有纖維素
常用選擇培養基進行篩選， 的培養基中，加入剛果紅時，剛
既提供有利於目的菌株生 果紅與培養基中的纖維素形成紅
長的條件，如營養、溫度、 色複合物。當纖維素被分解後，
pH等，同時抑制其他微生 該複合物不能形成，培養基中出
即時應用(隨學隨練，輕鬆奪冠) 1．(2011年湘潭高三第一次模擬)關於滅菌和消毒的 理解不正確的是( ) A．滅菌是指殺滅環境中一切微生物的細胞、芽孢 和孢子
B．消毒和滅菌實質是相同的 C．接種環用灼燒法滅菌 D．常用滅菌方法有灼燒滅菌、幹熱滅菌、高壓蒸 汽滅菌等
第35讲 微生物的培养与应用-考点三 分解纤维素的微生物的分离
鉴别
琼脂（或凝固剂）
（3） 通过观察产生透明圈的不同菌落,该实验室提出山羊瘤胃中存在多种纤维素分解菌的观点,他们的实验依据是___________________________________________。
（4） 将不同纤维素分解菌纯化培养,并对其纤维素酶种类进行比较,发现均至少包括三种组分,即___________________________。若定量比较不同微生物纤维素酶的活性高低,应如何操作？写出简要的实验思路：_______________________________________________________________________________________________________________________。
（1） 为保证分离得到纤维素分解菌,所取的土壤样品应具有什么特点？_____________。
富含纤维素
[解析] 纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中,因此为保证分离到纤维素分解菌,所取的土壤样品应该富含纤维素。
（2） 选择培养时,应选择_______（填“液体”或“固体”）培养基,原因是____________________________________________________________。
（5） 挑选透明圈较大的菌落进一步扩大培养若干天后,将发酵液离心、取上清液、浓缩、冻干,即获得纤维素酶冻干粉。测定该纤维素酶活性的一般方法是__________________________________________________。
对纤维素酶分解纤维素后产生的葡萄糖进行定量测定
[解析] 纤维素分解菌可以产生纤维素酶,纤维素酶是一种复合酶,包括 酶、 酶和葡萄糖苷酶等,纤维素酶能将纤维素分解形成葡萄糖,因此测定该纤维素酶活性的一般方法是对纤维素酶分解纤维素后产生的葡萄糖进行定量测定。
琼脂（或凝固剂）
（3） 通过观察产生透明圈的不同菌落,该实验室提出山羊瘤胃中存在多种纤维素分解菌的观点,他们的实验依据是___________________________________________。
（4） 将不同纤维素分解菌纯化培养,并对其纤维素酶种类进行比较,发现均至少包括三种组分,即___________________________。若定量比较不同微生物纤维素酶的活性高低,应如何操作？写出简要的实验思路：_______________________________________________________________________________________________________________________。
（1） 为保证分离得到纤维素分解菌,所取的土壤样品应具有什么特点？_____________。
富含纤维素
[解析] 纤维素分解菌大多分布在富含纤维素的环境中,因此为保证分离到纤维素分解菌,所取的土壤样品应该富含纤维素。
（2） 选择培养时,应选择_______（填“液体”或“固体”）培养基,原因是____________________________________________________________。
（5） 挑选透明圈较大的菌落进一步扩大培养若干天后,将发酵液离心、取上清液、浓缩、冻干,即获得纤维素酶冻干粉。测定该纤维素酶活性的一般方法是__________________________________________________。
对纤维素酶分解纤维素后产生的葡萄糖进行定量测定
[解析] 纤维素分解菌可以产生纤维素酶,纤维素酶是一种复合酶,包括 酶、 酶和葡萄糖苷酶等,纤维素酶能将纤维素分解形成葡萄糖,因此测定该纤维素酶活性的一般方法是对纤维素酶分解纤维素后产生的葡萄糖进行定量测定。
微生物的培养与应用ppt课件
40
考点三
考情 解读
微生物的数量测定 本考点内容在生物技术实践中占有比较重要的 地位，有关特定微生物的数量测定广泛应用于食品 及水质检测等实践中，具重要的应用价值，近年高 考常将微生物计数与微生物培养及筛选综合命题， 故2013年备考仍需重点关注。
41
[做一题] [例3] 急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化 道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量 是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水 有关的问题： (1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀
2
2．消毒和灭菌
项目
消毒
灭菌
使用 较为温和
条件
的
使用 强烈 的理化因素
理化方法
杀死物体表面或内部
杀死物体内外
一部分对人体有害的
所有的
结果 微生物(不包括芽孢和 微生物，包括芽孢和
孢子)
孢子
3
项目 适用
常用 方法
消毒
灭菌
实验操作的空间、操作者 培养器皿、接种用具和培
的衣着和手
养基等
煮沸 消毒法， 巴氏 消 灼烧 灭菌、 干热 灭 毒法，酒精、氯气、石炭 菌、 高压蒸汽 灭菌
()
成分 含量
NaN O3
3g
K2H PO4
1g
MgS KCl O4·7
H2O
0.5 0.5 gg
FeS O4
(CH2 O)
H2O
1 0.0
30 g 000 1g
mL
青霉 素
0.1 万单
位
35
A．依物理性质划分，该培养基属于液体培养基 B．依用途划分，该培养基属于选择培养基 C．培养基中的唯一碳源是(CH2O)，唯 一氮源是NaNO3 D．若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去(CH2O)，
考点三
考情 解读
微生物的数量测定 本考点内容在生物技术实践中占有比较重要的 地位，有关特定微生物的数量测定广泛应用于食品 及水质检测等实践中，具重要的应用价值，近年高 考常将微生物计数与微生物培养及筛选综合命题， 故2013年备考仍需重点关注。
41
[做一题] [例3] 急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化 道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量 是有效监控疾病发生的必要措施，请回答下列与检验饮用水 有关的问题： (1)检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀
2
2．消毒和灭菌
项目
消毒
灭菌
使用 较为温和
条件
的
使用 强烈 的理化因素
理化方法
杀死物体表面或内部
杀死物体内外
一部分对人体有害的
所有的
结果 微生物(不包括芽孢和 微生物，包括芽孢和
孢子)
孢子
3
项目 适用
常用 方法
消毒
灭菌
实验操作的空间、操作者 培养器皿、接种用具和培
的衣着和手
养基等
煮沸 消毒法， 巴氏 消 灼烧 灭菌、 干热 灭 毒法，酒精、氯气、石炭 菌、 高压蒸汽 灭菌
()
成分 含量
NaN O3
3g
K2H PO4
1g
MgS KCl O4·7
H2O
0.5 0.5 gg
FeS O4
(CH2 O)
H2O
1 0.0
30 g 000 1g
mL
青霉 素
0.1 万单
位
35
A．依物理性质划分，该培养基属于液体培养基 B．依用途划分，该培养基属于选择培养基 C．培养基中的唯一碳源是(CH2O)，唯 一氮源是NaNO3 D．若用该培养基培养纤维素分解菌，则应除去(CH2O)，
高中生物微生物的培养PPT课件
严格控制无菌操作，在培 养过程中要更换培养基， 调节细胞分裂素和生长素 的比例和添加顺序。
严格控制无菌操 作，整个培养过 程无需更换培养 基
第8页/共52页
适宜的环境条件，基质 垫底并固定幼苗，不需 要保证无菌条件，注意 溶氧和矿质元素的浓度。
3.下列关于植物组织培养、微生物培养和无土栽培技术的比较的
第12页/共52页
拓展深化
某些细菌在其生长发育后期，可在细胞内形成一个圆形的抗逆性休眠体，称为芽 孢。每个细菌细胞仅形成一个芽孢，故它无繁殖功能。芽孢有极强的抗热、抗辐 射、抗化学药物和抗静水压的能力。芽孢的休眠能力十分惊人，可保持几年到几 十年的生活力。 孢子是微生物产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞。一般是单细胞，个体微小， 通常是适应于从不利环境条件中存活下来，并在条件改变时产生新的营养体，能 直接发育成新个体。
用途
_工__业___生__产
物理 性质
化学 成分
用 途
半固体培养基 加凝固剂，如
__固__体__培养基
琼脂
观察微生物的运动、分类、鉴定
微保生藏物菌分_种__离_、鉴___定_、活菌计数、
_天___然__培养基
含化学成分不明确的 天然物质
工业生产
_合___成__培养基
培养基成分明确(用化学成分 已知的化学物质配成)
牛肉膏 天然培养基，主要提供C源、磷酸盐和维生素、N源。
玉米粉
主要提供C源与能量
②．大肠杆菌、硝化细菌、乳酸菌等微生物营养类型。
大肠杆菌：异养兼性厌氧型 乳酸菌：异养厌氧型
硝化细菌：自养需氧型
③由①②可以得到什么结论？
根据不同的微生物营养类型不同，选择配制不同的培养基。 ④．微生物培养与植物组织培养的营养成分区别？
微生物的培养技术及应用ppt课件
二、无菌技术 获得纯净的微生物培养物的关键是 防止杂菌污染 ， 主要包括 消毒 和 灭菌 。
无菌技术除用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，
还有什么作用？
还能有效避免操作者被微生物感染。
二、无菌技术 1.消毒 （1）概念
使用较为 温和 的物理、化学或生物等方法杀死物体 表面 或内部 一部分 微生物。 （2）消毒方法
杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污 接种结束后 染环境和感染操作者
接种环共需灼烧 几次？
6次
【问题探究2】在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？
避免接种环温度太高，杀死菌种。
【问题探究3】在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次 划线的末端开始划线？ 划线后，线条末端酵母菌的数目比线条起始处要 少 ，每次从上一次 划线的末端开始，能使酵母菌的数目随着划线次数的增加而逐步 减少 ， 最终能得到由 单个 细胞繁殖而来的 菌落 。
培养、分离出 特定微生物
鉴别不同种类 微生物
【注意】病毒为非细胞结构生物，只能在活细胞中营寄生生活，目前不能
利用人工培养基来培养。
一、培养基的配制 4.培养基的营养构成：（1）基本成分
一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等。
组分 牛肉膏 蛋白胨 NaCl
H2O
1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的营养组成
含量
怎样才能保证无处不在的杂菌不混入发酵物呢？
应该先对制作用具和原料进行灭菌处理，再接种纯的菌种，并 控制发酵条件，避免杂菌进入。
研究和应用微生物的前提，发酵工程的重要基础： 防止杂菌污染，获得纯净的微生物培养物。
在实验室培养微生物： ①为微生物提供合适的营养和环境条件 ——培养基
②确保其它微生物无法混入，并将需要的微生物分离出来。 ——无菌技术、微生物的纯培养
【高中生物】微生物的培养技术与应用课件+高二下学期生物人教版选择性必修3
2)不同接种工具的使用： 接种针——用于穿刺接种 接种环——用于斜面接种或平板划线接种 玻璃涂布器——用于涂布平板接种
3)接种的方法：涂布平板法、穿刺接种法、斜面接种法、平板划线法。
连续划线
生长繁殖
4)原理： 微生物群体
单个细胞
单个菌落
分散或稀释
▼平板划线的两种 划线方法：
连续划线法
分区划线法
探究实践
将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落存在以 确定是否被污染或灭菌是否彻底。
探究实践
(2)接种和分离酵母菌：
通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释 分散到培养基表面。经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。
1)接种：指在无菌条件下将微生物或含菌材料转移到合适其生长繁殖的培 养基中的过程。
(3)水：是生命活动所必需的，生物体内含量最多的化合物。 (4)无机盐：为微生物提供除碳、氮以外的元素。
新课讲解
组分 牛肉膏 蛋白胨 NaCl
H2O
表：1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成
含量
提供的主要营养
5g 10g 5g 定容至1000ml
碳源、磷酸盐和维生素等 氮源和维生素等 无机盐 水
方 法
▼平板划线的实验操作
1.将接种环放在火焰上 灼烧，直到接种环烧红。
探究实践
2.在火焰旁冷却接种环，并拔 出装有酵母菌的棉塞
划3个平板（重复实验） 1个不划线（空白对照）
3..将试管口通过火焰
4.将已冷却的接种环伸入 菌液中，蘸取一环菌液
5.将试管通过火焰，并 塞上棉塞
6.左手将皿盖打开一条缝隙，右手将 沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划 三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要 划破培养基。
3)接种的方法：涂布平板法、穿刺接种法、斜面接种法、平板划线法。
连续划线
生长繁殖
4)原理： 微生物群体
单个细胞
单个菌落
分散或稀释
▼平板划线的两种 划线方法：
连续划线法
分区划线法
探究实践
将所倒平板放入37℃的恒温箱中培养12h～24h，观察是否有菌落存在以 确定是否被污染或灭菌是否彻底。
探究实践
(2)接种和分离酵母菌：
通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释 分散到培养基表面。经过数次划线后培养可以分离得到单菌落。
1)接种：指在无菌条件下将微生物或含菌材料转移到合适其生长繁殖的培 养基中的过程。
(3)水：是生命活动所必需的，生物体内含量最多的化合物。 (4)无机盐：为微生物提供除碳、氮以外的元素。
新课讲解
组分 牛肉膏 蛋白胨 NaCl
H2O
表：1000mL牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成
含量
提供的主要营养
5g 10g 5g 定容至1000ml
碳源、磷酸盐和维生素等 氮源和维生素等 无机盐 水
方 法
▼平板划线的实验操作
1.将接种环放在火焰上 灼烧，直到接种环烧红。
探究实践
2.在火焰旁冷却接种环，并拔 出装有酵母菌的棉塞
划3个平板（重复实验） 1个不划线（空白对照）
3..将试管口通过火焰
4.将已冷却的接种环伸入 菌液中，蘸取一环菌液
5.将试管通过火焰，并 塞上棉塞
6.左手将皿盖打开一条缝隙，右手将 沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划 三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要 划破培养基。
微生物的培养技术及应用 高二生物课件(人教版2019选择性必修3)
培养基
酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半，可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养，这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母，并进行大量培养。下图所示为操作流程，请回答下列问题：（3） 挑取分离平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有______________（多选）。a. 为保证无菌操作，接种针使用前都必须灭菌b. 划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落c. 最后一次划线要和第一次划线首尾相连d. 在后面的划线处容易获得单菌落
固体培养基
半固体培养基
1
2
3
培养基的分类
（按物理性质分）
用于实验室培养、研究、分离和鉴别微生物
用于研究微生物的运动
培养基的种类
培养基的分类
按用途
选择培养基
鉴别培养基
如含抗生素的培养基
如不加氮源的培养基
伊红美蓝（大肠杆菌）
酚红（分解尿素菌）
刚果红（分解纤维素菌）
思考：结合培养基的类型，设计一种C/N不等于4:1的细菌培养基。
是一种利用沸水、流通蒸汽或高压蒸汽进行灭菌的方法
1
常见高压蒸汽灭菌法（效果最好）
2
主要用于对培养基及多种器材、物品灭菌
3
100Kpa，121℃，15-30 min
微生物培养的无菌技术
湿热灭菌
1.灭菌物品不要装得太挤，以妨碍蒸汽流通而影响灭菌效果
注意事项
2.锥形瓶和试管口不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包裹的瓶口的纸渗入棉塞
第2节 微生物的培养技术及应用
Culture techniques and applications of microorganisms
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重点透析
微生物的纯化培养
剖析考点 拓展深化
方法
平板划线法
稀释涂布平板法
可以观察菌落特征
进行分离
缺点
不能计数
吸收量较少,较麻烦,平板不干燥 效果不好,容易蔓延
(1)接种环的灼烧
①第一次划线前:杀死接种环
上的微生物,避免污染培养物
②每次划线前:杀死残留菌种,
保证每次划线菌种来自上次划
(3)分离分解尿素的细菌的培养基中要以尿素为唯一氮源。 答案:(2)防止外来杂菌入侵 灭菌 消毒
(3)氮源
考点二 微生物的分离、计数及应用
知识梳理
自主学习 夯实基础
1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
项目
详细内容
实验 原理
(1)能合成 脲酶 (2)配制以 尿素
分解尿素的细菌
的细菌才能分解尿素 为唯一氮源的培养基,能够生长的细菌就是能
以每次划线前都要
,平板划线结束后,最后一次划的线不能
与第一次划的线
。
解析:(3)培养基由于含有微生物生活所必需的水,所以只能用高压蒸汽 灭菌法灭菌,接种环属于金属接种工具,可以用灼烧灭菌。 (4)平板划线法接种时,为保证每次划线都不能有杂菌污染,每次划线前 都要对接种环灼烧灭菌;平板划线结束后,最后一次划的线不能与第一次 划的线相交(相接、相连、交叉等)。 答案:(3)高压蒸汽灭菌 灼烧灭菌
2016全国Ⅰ卷T39;2015 全国Ⅰ卷T39
2015全国Ⅰ卷T39;2014 全国Ⅰ卷T39;2013全国 Ⅱ卷T39
全国卷六年考题分值统计
考点一 微生物的实验室培养
知识梳理
自主学习 夯实基础
1.培养基 (1)概念:人们按照微生物对 营养物质 的不同需求,配制出供其生长繁 殖的 营养基质 。
一 般 都 含 有水、碳源、氮源、无机盐
需的温度、
以及是否需要O2等。
解析:(1)微生物的营养成分主要有碳源、氮源、水和无机盐等。 (2)微生物的培养需要考虑温度、pH和O2等条件。 答案:(1)碳源 氮源
(2)pH
(3)对培养基进行灭菌时,多采用
法,而对接种环灭菌时
则用
法。
(4)平板划线时,为保证每次划线都从上次划线末端的微生物浓度开始,所
数量 (1) 直接计数 法(显微镜下用特定细菌计数板或血细胞计数板) 统计 (2)间接计数法: 稀释涂布平板法 .
实验 流程
土壤取样→样品稀释→培养与观察→细菌的计数
2.分解纤维素的微生物的分离
(1)纤维素酶 ①组成:纤维素酶是一种 复合酶 即 C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶 。
②作用:
,一般认为它至少包括三种组分,
(2)成分: 还 要 满 足 不 同 微 生 物 生 长 对pH 、 特 殊 营 养 物 质
以 及氧气
的 要 求
(3)分类:按照物理性质可以分为 液体培养基 和固体培养基。
2.无菌技术
(1)目的:获得 纯净培养物
。
(2)关键:防止 外来杂菌
的入侵。
(3)无菌技术的主要方法及适用对象[连线]
答案：
操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 b. 稀释涂布平板 法:将菌液进行一系列的 梯度稀释 ,然后将 不同 .
稀释度 的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。
(3)菌种的保存方法 ①对于频繁使用的菌种,可以采用 临时保藏 的方法。 ②对于需要长期保存的菌种,可以采用 甘油管藏 的方法。
第35讲 微生物的培养与应用
考情分析·备考导航
最新考纲
1.微生物的分离和 培养
2.某种微生物数量 的测定
3.培养基对微生物 的选择作用
4.利用微生物发酵 来生产特定的产物 以及微生物在其他 方面的应用
全国卷六年考题统计
2016全国Ⅰ卷T39;2016 全国Ⅲ卷T39;2014全国 Ⅱ卷T39;2013全国Ⅱ卷 T39;2011全国卷T39
3.大肠杆菌的纯化培养
(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 计算 → 称量 → 溶化 → 灭菌 → 倒平板 .
(2)纯化大肠杆菌的方法 ①纯化培养原理:在培养基上得到 由一个细胞繁殖而来 见的 菌落 ,即可获得较纯的菌种。
②纯化大肠杆菌的关键步骤: 接种 。
的肉眼可
③常用的微生物接种方法有两种。 a.平板划线法:通过 接种环 在琼脂固体培养基表面 连续划线 的
②不要将过热的涂布器放在盛放 酒精的烧杯中,以免引燃其中的 酒精 ③酒精灯与培养皿距离要合适, 移液管管头不要接触任何物体
题组例练
分类例练 提炼方法
1.(2016·江西宜春模拟)回答下列问题:
(1)微生物所需的营养成分一般包括
、
、水和无机盐。
(2)培养微生物时,除考虑微生物生长所需的营养外,还要考虑微生物生长所
线末端
注意 事项
③划线结束后:杀死残留菌种, 避免污染环境和感染操作者 (2)灼烧接种环之后,要冷却后
再进行操作,以免温度太高杀
死菌种
(3)划线时最后一区域不要与
第一区域相连
(4)划线用力要大小适当,防止
用力过大将培养基划破
(1)稀释操作时:每支试管及其中 的9 mL水、移液管等均需灭菌; 操作时,试管口和移液管应在离 火焰 1～2 cm 处 (2)涂布平板时 ①涂布器用体积分数为70% 酒精 消毒,取出时,让多余酒精在烧杯 中滴尽,然后将沾有少量酒精的 涂布器在酒精灯火焰上引燃
(2)在微生物的实验室培养过程中,获得纯净培养物的关键是
,
因此需要对培养基和培养皿进行
处理,操作者的双手需要进行清
洁和
。
(3)分离分解尿素的细菌的培养基中要以尿素为唯一
(填“碳源”
或“氮源”)。
解析:(2)在微生物的实验室培养过程中,获得纯净培养物的关键是防止 外来杂菌入侵,因此需要对培养基和培养皿进行灭菌处理,操作者的双手 需要进行清洁和消毒。
(4)对接种环灼烧灭菌 相交(相接、相连、交叉等)
2.(2016·安徽名校联盟模拟)根据微生物分离和培养的知识,回答下列问
题:
(1)分离纯化大肠杆菌的关键步骤是
,该步骤常用的方法有两种:
和
,其中后者是将菌液进行一系列
的
,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基
的表面进行培养。
解析:(1)分离纯化大肠杆菌的关键步骤是接种,该步骤常用的方法有: 平板划线法和稀释涂布平板法。其中稀释涂布平板法是将菌液进行 一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培 养基的表面进行培养。 答案:(1)接种 平板划线法 稀释涂布平板法 梯度稀释