中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白参考值范围确定资料
人(Human)中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒说明书
本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断人（Human）中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注：标准品（S0-S5）浓度依次为：0、7.5、15、30、60、120ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白化学发光定量免疫分析方法的建立及临床应用
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白化学发光定量免疫分析方法的建立及临床应用周齐洋１，廉倩倩２，梁 辰３，冯 杰３，颜光涛３（１．江苏省医疗器械检验所，江苏南京２１００１２；２．苏州长光华医生物医学工程有限公司，江苏苏州２１５１６３；３．解放军总医院第一医学中心医学检验中心，北京１００８５３）ＤＯＩ：１０．１１７４８／ｂｊｍｙ．ｉｓｓｎ．１００６－１７０３．２０２０．１０．０２６收稿日期：２０２０ ０４ １９；修回日期：２０２０ ０７ ０９基金项目：国家科技支撑计划（编号：２０１５ＢＡＫ４５Ｂ０１）通讯作者：颜光涛，研究员。
研究方向：标记免疫分析技术。
Ｅ ｍａｉｌ：ｙｇｔ３０１＠１６３．ｃｏｍ摘要：目的 建立一种双抗体夹心法定量检测人尿液中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｇｅｌａｔｉｎａｓｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｌｉｐｏｃａｌｉｎ，ＮＧＡＬ）的化学发光免疫分析方法。
方法 以磁颗粒 链酶亲和素 生物素为固相分离系统，生物素标记１株鼠单抗ＮＧＡＬ，吖啶酯标记另１株鼠单抗 ＮＧＡＬ，建立ＮＧＡＬ定量免疫分析方法。
结果 此分析方法功能灵敏度高于３ｎｇ／ｍＬ；批内不精密度不超过５％，批间不精密度不超过８％；线性范围为１０～１５００ｎｇ／ｍＬ；参考区间上限为１３０ｎｇ／ｍＬ；尿液样本中可能存在的干扰物如丙酮、白蛋白、胆红素等对结果的干扰不超过５％；尿液样本２～８℃常规储存１～３周检测水平变化幅度小于２０％；与Ａｂｂｏｔｔ的ＮＧＡＬ免疫试剂相比，斜率达０．９６１１，相关系数０．９９３８。
结论 该ＮＧＡＬ化学发光定量检测方法，性能优良，适合临床推广使用。
关键词：中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白； 急性肾损伤； 肌酐； 尿样储存稳定性中图分类号：Ｒ ３３１ 文献标识码：ＡＴｈｅＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆＣｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅＱｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＩｍｍｕｎｏａｓｓａｙｆｏｒＮｅｕｔｒｏｐｈｉｌＧｅｌａｔｉｎａｓｅＡｓｓｏｃｉａｔｅｄＬｉｐｏｃａｌｉｎＺＨＯＵＱｉｙａｎｇ１，ＬＩＡＮＱｉａｎｑｉａｎ２，ＬＩＡＮＧＣｈｅｎ３，ＦＥＮＧＪｉｅ３，ＹＡＮＧｕａｎｇｔａｏ３（１．ＪｉａｎｇｓｕＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＭｅｄｉｃａｌＤｅｖｉｃｅＴｅｓｔｉｎｇ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００１２，Ｃｈｉｎａ；２．ＳｕｚｈｏｕＨｙｂｉｏｍｅＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＣｏ．，ＬＴＤ，Ｓｕｚｈｏｕ２１５１６３，Ｃｈｉｎａ；３．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＴｈｅＦｉｒｓｔＭｅｄｉｃａｌＣｅｎｔｅｒｏｆｔｈｅＰＬＡＧｅｎｅｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００８５３，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｄｅｖｅｌｏｐａｄｏｕｂｌｅａｎｔｉｂｏｄｙｓａｎｄｗｉｃｈｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｆｏｒｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｇｅｌａｔｉｎａｓｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｌｉｐｏｃａｌｉｎｉｎｈｕｍａｎｕｒｉｎｅｓａｍｐｌｅｓ．ＭｅｔｈｏｄｓＵｓｉｎｇｍａｇｎｅｔｉｃｐａｒｔｉｃｌｅ ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ ｂｉｏｔｉｎａｓｔｈｅｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ，ｏｎｅｍｏｕｓｅｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ ＮＧＡＬｗａｓｌａｂｅｌｅｄｗｉｔｈｂｉｏｔｉｎ，ｗｈｉｌｅａｎｏｔｈｅｒｍｏｕｓｅｍｏｎｏｃｌｏｎａｌａｎｔｉｂｏｄｙ ＮＧＡＬｗａｓｌａｂｅｌｅｄｗｉｔｈａｃｒｉｄｉｎｅｅｓｔｅｒ，ａｎｄａｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｍｅｔｈｏｄｆｏｒＮＧＡＬｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ．ＲｅｓｕｌｔｓＴｈｅｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｉｓａｓｓａｙｗａｓｂｅｌｏｗ３ｎｇ／ｍＬ，ｔｈｅｉｎｔｒａ ｂａｔｃｈａｎｄｔｏｔａｌｐｒｅｃｉｓｉｏｎｗｅｒｅｌｅｓｓｔｈａｎ５％ａｎｄ８％，ｔｈｅｌｉｎｅａｒｒａｎｇｅｗａｓ１０ １５００ｎｇ／ｍＬ，ａｎｄｔｈｅｕｐｐｅｒｌｉｍｉｔｏｆｒｅｆｅｒｅｎｃｅｉｎｔｅｒｖａｌｗａｓ１２８ｎｇ／ｍＬ．Ｉｎｃｒｅａｓｅｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆｏｔｈｅｒｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ（ａｃｅｔｏｎｅ，ａｌｂｕｍｉｎ，ｂｉｌｉｒｕｂｉｎ，ｅｔｃ）ｉｎｕｒｉｎｅｓａｍｐｌｅｓｃａｕｓｅｄｎｏｍｏｒｅｔｈａｎ５％ｃｒｏｓｓ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ．Ｔｈｅｒａｎｇｅｏｆｔｈｅｖａｒｉａｔｉｏｎｏｆｕｒｉｎｅｓａｍｐｌｅｓｄｅｔｅｃｔｉｏｎｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｗａｓｌｅｓｓｔｈａｎ２０％ｕｎｄｅｒｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆ２ ８℃ｆｏｒ１ ３ｗｅｅｋｓ．ＷｈｅｎｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆＡｂｂｏｔｔＮＧＡＬａｓｓａｙ，ｔｈｅｓｌｏｐｅｗａｓ０．９６１１ａｎｄｔｈｅｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｗａｓｏｖｅｒ０．９９３８．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｓｔｕｄｉｅｄＮＧＡＬｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｈａｓａｎｅｘｃｅｌｌｅｎｔｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅａｎｄｉｓｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌｇｅｌａｔｉｎａｓｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｌｉｐｏｃａｌｉｎ； Ａｃｕｔｅｋｉｄｎｅｙｉｎｊｕｒｙ； Ｃｒｅａｔｉｎｉｎｅ； Ｕｒｉｎｅｓａｍｐｌｅｓｔｏｒａｇｅｓｔａｂｉｌｉｔｙ６５７１ＬａｂｅｌｅｄＩｍｍｕｎｏａｓｓａｙｓ＆ＣｌｉｎＭｅｄ，Ｏｃｔ．２０２０，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．１０ 急性肾损伤（ａｃｕｔｅｋｉｄｎｅｙｉｎｊｕｒｙ，ＡＫＩ）是指各种原发性或继发性损伤因素导致的肾脏结构的改变、肾功能下降以及最终肾衰竭的整个过程。
中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白(NGAL)检测的临床应用
中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白（NGAL）检测的临床应用作者：刘津李海平马淑慧来源：《医学信息》2014年第22期摘要：中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白（NGAL）是lipocalin家族新成员，NGAL浓度越高急性肾损伤（AKI）越严重，随着血NGAL浓度的下降，AKI也得到恢复；同时在慢性肾损伤中，尿NGAL可以成为肾小管间质损害的早期标志物；通过NGAL检测可明确反映中性粒细胞活化、内皮细胞受损等病理过程，对于ICU患者常见危重病症发展有相应指示作用。
本文就NGAL在临床诊断中的应用研究近况作一综述。
关键词：中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白（NGAL）；急性肾损伤（AKI）；慢性肾损伤；重症监护室（ICU）中性粒细胞明胶酶脂质运载蛋白（NGAL）1993年在人中性粒细胞中被发现，是细胞化学趋化物N-甲基蛋异亮苯丙肽受体之一，是可正常表达于中性粒细胞、肾小管上皮细胞、肝实质细胞、血管上皮细胞等的一种分泌性糖蛋白。
研究表明[1]，NGAL是诊断肾损伤最有效的生物学标志之一，肾损伤时由肾小管上皮细胞所分泌，其分泌量与各种肾脏疾病相关。
本文现就NGAL在临床诊断中的应用研究近况综述如下。
1 在急性肾损伤（AKI）诊疗中的应用正常生理情况下NGAL水平较低，肾缺血或毒素急性损伤肾小管时，NGAL高表达从而诱导肾小管-间质中浸润的中性粒细胞发生凋亡，以保护肾组织免受攻击。
高水平的NGAL促进肾小管上皮细胞再生修复，使肾功能得以恢复。
AKI患者肾皮质小管、血和尿液中均发现大量NGAL堆积，可在损伤后3h的血和尿液中检测到，早于尿N-乙酰-β-葡萄糖苷酶、β2微球蛋白及血肌酐的改变。
被认为是AKI一种新的预测标志物，对于早期诊断、评估疾病严重程度、治疗监测有重要临床价值[2]。
1.1在冠状动脉搭桥手术后AKI中的应用冠状动脉搭桥手术后肾脏并发症及病死率较高，AKI发生率为1.4%～19.50%，一旦发生肾衰竭，病死率高达15%～30%，围术期对肾损害早期诊疗十分重要[2]。
大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)酶联免疫
大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）水平。
用纯化的大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL），再与HRP标记的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：4500ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存20倍浓缩洗涤液20ml×1瓶23ml×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
肾功能及肾损伤标志物——中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)解析
肾功能及肾损伤标志物——中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）解析中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）是lipocalin的一种，最初是在激活中性粒细胞中被发现的一种小分子量分泌性蛋白，现代研究表明，NGAL是诊断急性肾损伤的最有效生物学标志物之一。
NGAL的合成及分布NGAL由肾小管细胞、中性粒细胞等细胞类型合成，它标志性的存在于循环内，可被肾小球自由滤过，并被肾小管上皮细胞截获降解。
肾功能异常时，引起肾小管上皮细胞损伤，分泌大量的NGAL，大量NGAL通过诱导肾小管间质中浸润的中性粒细胞发生凋亡从而保护肾组织免受炎性细胞的损害，以此诱导肾小管上皮细胞再生。
NGAL在肾脏中的表达会因多种原因的肾损伤而显著升高，并且释放到尿液和血浆中。
正常情况下，NGAL在尿液和血浆中维持一个较低水平，而肾损伤时则在非常短的时间（2-4h左右）急速升高。
NGAL在AKI中的应用NGAL用于AKI 的早期诊断急性肾功能损伤( AKI) 时血、尿NGAL浓度会迅速升高，2h最为明显( 比临界值升高几十至几百倍)，而血清肌酐( sCr) 、尿酶等传统指标往往要在24～72h 后才明显升高，因而NGAL可用于AKI 的早期诊断。
大量研究证明，肾脏在顺铂诱导的肾脏急性损伤后约2h 就能在尿中检测到NGAL，而检测出血肌酐明显改变要在等到3-4 d后，同样在肾脏急性缺血再灌注损伤后3h在尿中也能检测到NGAL。
儿童心脏手术后发生急性肾功能衰竭的患者在手术后2h血、尿NGAL的浓度明显升高，而血肌酐明显升高则要等到1～3d 后。
NGAL可用于AKI的鉴别诊断尿NGAL可鉴别AKI、肾前氨血症、慢性肾病和正常肾功能病人。
NGAL可用于AKI的危险分层ICU诊断中NGAL能够预测急性肾损伤的严重程度；NGAL对不同程度的AKI诊断体现出高灵敏性和特异性。
NGAL可用于AKI临床结果的预测（发病率、死亡率等）评估预后，NGAL 可作为AKI 的预后指标之一。
NGAL 临床应用介绍
3
NGAL简介
肾功能异常时，会引起肾小管上皮细胞的损伤，分泌大量的NGAL，并 且释放到尿液和血浆中。 NGAL在肾脏中的表达会因不同原因的肾损伤而 显著升高。
4
什么是AKI？
急性肾损伤(Acute Kidney Injury,AKI)定义：
定义：在3个月内发生的临床表现为血、尿、组织检测和影像学检查下不同程度
的肾脏结构、功能以及肾脏损害标志的异常，包括急性肾功能衰竭(ARF)、急性
肾小管坏死(ATN)、移植肾延迟复功(DGF)等一大组疾病的临床术语。
5
NGAL的临床意义
NGAL的临床意义小结
AKI早期诊断
AKI后两小时开始 升高
AKI的风险分层
NGAL随AKI严重 程度增高
AKI疗效及预后
CKD患者评估
根据NGAL的浓度变 化判断AKI的疗效
可以根据NGAL评估 CKD患者肾损伤情况
一、概述 二、Lp-PLA2临床意义 三、mLsbs NGAL定位及目标市场 四、 mLsbs Lp-PLA2竞争产品及性能参数
慢性肾脏疾病的晚期阶段均出现肾小管间质损害，NGAL作为肾小管损伤的早期标 志物，在CKD的病理过程中同样发挥重要作用，并可作为CKD风险评估、疾病分期、血 液透析充分性等独立的生物学指标。
[1] Bronner H,Mueller M,Rutherford C,et all.Urinary neutrophil gelatinase·associated lipoealin as a biomarker of nephritis in childhood.onset systemic lupus erythematosus[J].Arthritis Rheum,2006,54(8)：2577-2584．
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的单克隆抗体制备及化学发光免疫定量检测试剂研究
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的单克隆抗体制备及化学发光免疫定量检测试剂研究齐家龙;邵佳;彭宽;黄明聪;邓丽雯;李少伟;张军;夏宁邵;顾颖【期刊名称】《中国生化药物杂志》【年(卷),期】2015(000)004【摘要】目的：获得中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（ NGAL）的单克隆抗体，并对其应用于化学发光定量试剂进行研究。
方法利用原核表达系统表达的NGAL重组抗原，经过Ni2＋-金属螯合层析纯化后用于免疫6～8周龄的雌性BALB／c 小鼠，完成免疫程序后将其脾脏细胞与杂交瘤细胞进行融合，通过间接法ELISA筛选抗NGAL的单克隆抗体，并结合Western blot鉴定抗体与天然NGAL的反应性。
结果获得了由原核表达系统表达的NGAL重组抗原，具有较高的纯度，可形成二硫键交联的二聚体形式；重组抗原具有较好的免疫原性，免疫小鼠多抗血清效价达106以上；筛选获得30株单克隆抗体，其中单抗23C12、38D10的EC50分别为0.034、0.022 g／mL；经NGAL标准品及临床尿液样本初步筛选，由38D10／23C12-SAE组成的抗体配对能够很好的适用于基于化学法发光的免疫反应定量检测试剂的开发；尿液阳性样本与阴性样本检测结果显示具有显著的统计学差异（P＜0.001）；对病患组定量结果与Abbott公司的尿NGAL 测定试剂盒（化学发光微粒子免疫检测法）的相关系数大于0.97，线性范围为10～1500 ng／mL，检测灵敏度为0.63 ng／mL。
结论本研究成功制备了NGAL 重组抗原，获得了NGAL特异单克隆抗体，并开发了NGAL化学发光免疫定量试剂，该试剂检测能力与国际主流试剂相当。
%Objective To obtain monoclonal antibodies ( mAbs ) against neutrophil gelatinase-associated lipocalin( NGAL ) and a chemiluminescense immune quantification assay based one paired mAbs.Methods Six-to-eight weeks old female BALB/c mice were immunized with the purified recombinant human NGAL antigen( rhNGAL) that was produced by the Escherichia coil expression system.The spleen was fused with hybridoma for screening anti-NGAL monoclonal antibodies by indirect ELISA.Western blot was implemented to identify the reactivity with native NGAL. Results The rhNGAL antigen was found to form disulfide cross-linked dimers and present excellent immunogenicity.The reaction titer of the immune serum of NGAL immunized mice was about 106.Thirty mAbs were screened by indirect ELISA, hereinto;the EC50 values ofmAb23C12 and 38D10 were 0.034 g/mL, 0.022 g/mL respectively.The antibodies pair, 38D10/23C12-SAE labeled with AcridiniumEster(AE), were shown to work well in chemiluminescense immune response quantitative detection which was screened by NGAL standardand clinical urine samples.This detection can resolve positive and negative samples with a statistically significant difference (P<0.0001).And the correlation coefficient R2between NGAL quantitative results and that of the Abbott's NGAL chemiluminescence immune assay kit was greater than 0.97.The detection linear range was 10-1500 ng/mL, analytical sensitivity of the method was 0.63 ng/mL.Conclusion Highly purified rhNGAL antigen and specific anti-NGAL monoclonal antibodies are generated in this study.The detection capability of method is comparable with that of the international commercial kit.【总页数】5页(P5-9)【作者】齐家龙;邵佳;彭宽;黄明聪;邓丽雯;李少伟;张军;夏宁邵;顾颖【作者单位】畅厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院，福建厦门 361102;畅厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院，福建厦门 361102;畅厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院，福建厦门 361102;畅厦门万泰凯瑞生物技术有限公司，福建厦门361000;畅厦门万泰凯瑞生物技术有限公司，福建厦门 361000;畅厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院，福建厦门 361102; 畅厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院，福建厦门361102;畅厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院，福建厦门 361102; 畅厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院，福建厦门 361102;畅厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院，福建厦门 361102; 畅厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院，福建厦门 361102;畅厦门大学分子疫苗学与分子诊断学国家重点实验室公共卫生学院，福建厦门 361102; 畅厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心生命科学学院，福建厦门 361102【正文语种】中文【中图分类】S853.7【相关文献】1.胶乳增强免疫比浊法定量测定血浆中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白的方法学评价及临床应用 [J], 孙丽;牛国平2.抗人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白单克隆抗体的研制及其检测试剂的初步应用 [J], 唐曙明;杨自华3.中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白化学发光定量免疫分析方法的建立及临床应用 [J], 周齐洋;廉倩倩;梁辰;冯杰;颜光涛4.中性粒细胞相关脂质运载蛋白、中性粒细胞相关脂质运载蛋白/基质金属蛋白酶-9复合物在心血管疾病中的研究进展 [J], 熊政;张阳扬;李群星;赵新华;邵杨歌;尹德录5.中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白检测试剂盒（胶乳免疫比浊法）检测性能验证 [J], 蔡爱华;李启平;陈丽娟;李静沛;李伟华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
肾脏损伤监测相关指标
肾脏结构
肾脏是由数百万个肾单位组成 ③ ① ②
维持体液平衡及体内酸碱平衡 内分泌功能
01.
生成尿液、排泄代谢产物
02.
肾脏功能
肾小管
重吸收及分泌、排泄作用 原尿→尿（1.8L）
肾小球
滤过作用 血液→原尿（180L）
肾脏功能
滤过作用---肾小球
肾脏功能
三层滤过膜筛孔形成的分子筛屏障
肾脏疾病与早期诊断
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PART.02
目前, 肾脏病已成为危害全世界人民健康的主要疾病，全球有100万以上中末期肾病患者,而且肾病患者的数量还在以每年10%的速度增长。
中国的肾病患者约占全球的1/10。而且随着高血压、糖尿病等疾病的发病率的上升，所导致的肾病患者也日益增多。
带负电荷的氨基多糖等形成的负电荷屏障
滤过动力---有效滤过压=肾小球毛细血管压-（血浆胶体渗透压+囊内压）
03
01
02
重吸收、分泌排泄作用---肾小管
肾脏功能
经肾小球滤出的少量小分子蛋白、水、部分无机盐、全部的葡萄糖，在肾小管重吸收。 肾脏分泌排泄H离子、NH3、K离子，并通过氢钠交换和钾钠交换，保留了钠离子。正常机体产生的肌酐和对氨基马尿酸等，既从肾小球滤过，又能由肾小管排泄；外源性的某些物质如青霉素、酚红等也是通过近端小管的排泄，排到小管腔，再排出体外。
2
肾损伤的早期发现对预后又有十分重要的意义，因而，早期诊断对于延长患者生命、提高生存质量至关重要。
3
经过对大量的肾脏损伤的病理研究，我们发现：尿液中微量蛋白的产生是整个肾脏损伤病程中最早出现的病理变化。
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转铁蛋白（TRF）测定试剂盒（免疫比浊法）
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转铁蛋白（TRF）测定试剂盒（免疫比浊法）
参考值范围确定资料
转铁蛋白(Transferrin，TRF，TF，又称为铁传递蛋白、血清运铁蛋白、运铁蛋白、嗜铁蛋白、铁糖蛋白)是一种重要的β-球蛋白，是脊椎动物体内铁的运输者。
转铁蛋白是体液中不可缺少的成分，不仅参与铁的运输与代谢，参与呼吸、细胞增殖和免疫系统的调节，还能调节铁离子平衡和能量平衡，更具有抗菌杀菌的保护功能，因而转铁蛋白具有较全面的蛋白质生理功能。
转铁蛋白的主要生理功能是把铁离子从吸收和储存的地方运输到红细胞供合成血红蛋白用，或输送到机体的其他需铁部位。
转铁蛋白(transferring，TRF)作为一种特殊的蛋白, 已被广泛应用于临床。
血清TRF测定可用于贫血的诊断及治疗的监测。
血清TRF升高的最常见原因是缺铁性贫血，研究发现血清铁降低，TRF升高可产生在贫血发生之前。
目前，血清TRF测定已普遍应用于贫血的诊断和对治疗的监测。
血清TRF测定还有助于肝、肾疾病的病情观察和预后判断。
近年研究表明，TRF主要在肝脏内合成，反过来又可促进肝细胞的再生，故肝脏发生病变，血清TRF含量降低，且与病情的严重程度一致。
1. 材料和方法
1.1 对象
2011年9－12月到深圳市蛇口人民医院的体检人员，涉及人群有干部、工人、学生、公司职员和医院职工等，对肝肾功能、血脂、血尿常规各项检测指标正常，血压、B超、心电图、X光透视心肺正常的人员。
按性别分为两组，每组各120个参考值数据。
1.2 仪器与试剂
采用锦瑞电子有限公司的全自动生化分析仪GS400，试剂为本公司生产的液体双试剂，转铁蛋白（TRF）采用免疫比浊法。
校准品和两水平值的质控品均为RANDOX生产，校准品为CAL2350复合定标液，批号为685UN；质控为HN1530和HN1532，批号分别为621UN、434UN。
1.3 方法
1.3.1 质量控制
用校准品校准仪器后，每天用两个水平的质控品对测定结果监测，确保结果的准确可靠。
1.3.2 检测方法
取空腹静脉血2-3 ml，及时离心后3－5h内测定完成，结果由电脑记录保存，统计时去除脂血、溶血、黄疸标本的结果。
1.4 数据处理
采用SPSS 13.0统计软件，正态分布检验采用D检验法，测量数据以均数±标准差表示（x±s），各年龄段男女两样本均数用t 检验法，总体参考范围由（x±2s）得出。
2. 结果
表1 男性参考值试验数据
3. 讨论
本实验120例男性和120例女性的血清TRF值经统计后显示呈正态分布，对TRF值调查表明，TRF与性别无明显区别，血清总体范围为2.0-3.6g/L。
医学检验地迅速发展，生化检验基本实现了仪器自动化，再加室内质控和室间质评的开展，实验室内标准操作系统的建立，从而保证了检测TRF的准确性和重复性。
血清TRF除性别、年龄因素外，与一个地区的生活习惯、饮食结构关系密切，出现了各地区间参考值的差异。
而在临床上，医生常把TRF作为疾病诊断、治疗、预后判断的重要指标，因此各实验室应建立适合当地人群的正常参考范围值，对正确运用这些指标有重要的意义。