高效液相色谱法检测大脑神经递质多巴胺-最新文档资料
高效液相色谱_电化学检测法测定生_省略_样品中单胺类神经递质及其代谢产物_杨佳凤

单胺类神经递质及其代谢产物包括去甲肾上腺素(NE)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、高香草酸(HVA)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)。
它们是一类具有广泛生物学活性的物质,既是人体内一类非常重要的神经递质,在神经系统支配体内各个器官,调节各个系统的多种生理功能中处于关键地位[1],也是重要的激素物质,它们和神经冲动、行为及大脑皮质的觉醒和睡眠节律等都有关系,在神经系统中起重要调节作用[2]。
近年来发现病理情况下它们与脑血管病、脑外伤关系密切,过量的单胺类神经递质能够产生大量的活性氧物质,引起神经细胞凋亡,其中一些疾病特别如帕金森病、高血压、交感神摘要:[目的]建立一种简单、快速、灵敏的测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物的高效液相色谱方法。
[方法]色谱柱采用WatersC18反相色谱柱(3.9mm×150mm,5μm),流动相为水相(每500mL中含辛烷磺酸钠1.25g,磷酸二氢钾6.8g,乙二胺四乙酸18mg,pH值3.3)∶甲醇∶乙腈=78∶19∶3,流速为0.8mL/min,柱温35℃;电化学检测器工作电极为玻璃碳电极,参比电极为银/氯化银(Ag/AgCl)电极,工作电压为0.7V。
[结果]5种物质保留时间分别为:去甲肾上腺素3.6min,5-羟吲哚乙酸4.5min,高香草酸5.2min,多巴胺6.2min,5-羟色胺11.9min;线性范围均为20~1000μg/L,最低检测限为4~8μg/L。
[结论]此方法测定生物样品中的单胺类神经递质及其代谢产物,简便,快速且灵敏度高。
关键词:高效液相色谱-电化学检测法;单胺类神经递质;代谢物中图分类号:R284.1文献标识码:A文章编号:1673-9043(2007)04-0192-04DeterminationofmonoamineneurotransmitteranditsmetabolitesbyhighperformanceliquidchromatographyandelectrochemicaldetectionYANGJia-feng,LIJuan,YANGHong,etal(KeyLaboratoryofPharmacologyofTCMFormulae,MinistryofEducationResearchCenterofTCM,TianjinUniversityofTCM,Tianjin300193,China)Abstract:[Objective]Asimple,rapidandsensitiveHPLC-ECDmethodwasestablishedtodetectthemonoamineneurotransmitteranditsmetabolites.[Methods]TheLCwasperformedonaWaters@ODSC18column(3.9×500mm,5μm).Themobilephase,consistedofMethanol-Acetonitrile-Waterphase(containingB81.25g,KH2PO46.8g,EDTA18mgin500mLsolution,pH=3.3)=19∶3∶78.Themobilephasewasataflow-rateof0.8mL/min.TheelectrochemicaldetectorwasequippedwithaglasscarbonworkingelectrodeandaAg/AgClreferenceelectrode.Theworkingvoltwas0.7V.Thecolumntemperaturewaskeptat35℃.[Results]Theirretentiontimewere3.6minforNE,4.5minfor5-HIAA,5.2minforHVA,6.1minforDAand11.9minfor5-HTrespectively.Thesefivecomponentswereallfoundtobelinearoveraconcentrationrangeof20~1000μg/L.Thelowlimitofquantitationwas4~8μg/L.[Conclusion]TheHPLC-ECDmethodwasrapid,sensitiveandspecificforquantitativedeter-minationofmonoamineneurotransmitteranditsmetabolites.Keywords:HPLC-ECDj MonoamineNeurotransmitterj Metabolites高效液相色谱-电化学检测法测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物G杨佳凤,李娟,杨虹,潘桂湘,高秀梅G 基金项目:国家自然科学基金(30672631)。
高效液相色谱同时检测生物样本中8种单胺类神经递质

分析化学 ( FENX I HUAXUE) 研究报告
第 3期
2009年 3月
Chinese Journal of Analytical Chem istry
330 8种单胺类神经递质
赵焕英 1, 2 段春礼 1 范春香 1 刘 琦 1 张 韬 1 杨 慧 3 1
将标准品定量混合并用标准品溶液稀释得到一浓度系列 ,取 20 μL 进样 ,对上述系列浓度各测定 3 次后 ,取其峰面积的平均值 ,以浓度 Y对峰面积 X 回归 ,各种物质的线性范围如表 1,相关系数都在 01994~0. 999之间 。当 S /N = 3时 , 检出限达 pmol/L 水平 。取混合标样 ,在含 8%甲醇流动相下 ,以 014 mL /m in固定流速连续进样 6 次 , 保留时间 RSD 为 0. 24% ~0. 68% ; 峰面积 RSD 为 0. 08% ~ 0143% ,重现性好 。将处理后的 1 份样品分成 5 份 ,其中 1 份作本底量 ,另外 4 份分别添加已知量的 8种标准液 。分别测出 8种物质在各样品中的含量 ,再根据检测本底量计算出 8种物质的回收率及标 准偏差 。
将动物快速断头 ,取脑 ,置于冰上剥离所要组织部位 ;称重后加入组织裂解液 ( 0. 01% L 2半胱氨酸 , 0. 2 mmol/L HC lO4 , 0. 5 mmol/L Na2 EDTA ) ,置 1. 5 mL 离心管中充分匀浆 ,然后再超生破碎两次 ,离心
2008208226收稿 ; 2008210208接受 本文系国家重点基础研究发展计划 (973 No. 2006CB500706) 、国家自然基金项目 (No. 30670655)和北京市教育委员会科技发展计划 面上项目 ( KM200610025002) 3 E2mail: zhaohy75@ sina. com
高效液相色谱—电化学检测法测定尿中多巴胺的含量

高效液相色谱—电化学检测法测定尿中多巴胺的含量
宋宁宁
【期刊名称】《中国职业医学》
【年(卷),期】1999(26)4
【总页数】2页(P64-64)
【关键词】高效液相色谱;尿;多巴胺;含量
【作者】宋宁宁
【作者单位】广西药品检验所
【正文语种】中文
【中图分类】R446.122
【相关文献】
1.高效液相色谱-电化学法测定大鼠脑脊液中多巴胺含量的研究 [J], 黄小莹;张黎君;
2.高效液相色谱-电化学检测法测定尿中8-羟基脱氧鸟苷含量 [J], 王旗;贾光;闫蕾;王昕虹
3.高效液相色谱-电化学法测定大鼠脑脊液中多巴胺含量的研究 [J], 黄小莹;张黎君
4.用离子交换法预处理的高效液相色谱-电化学检测法测定尿中儿茶酚胺 [J], 蔡金莲;章连;赵伟康
5.用高效液相色谱电化学检测法测定鸡蛋中多巴胺的残留量 [J], 刘振秀;李德发因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
高效液相色谱法检测大脑神经递质多巴胺

高效液相色谱法检测大脑神经递质多巴胺作者:张庆云高永光蔡美娜于丽伟梁国欣赵冠楠来源:《科学大众·教师版》2015年第07期摘要:多巴胺是人脑中一种重要的神经递质,帕金森病等神经系统病变与其含量异常有密切的关系。
目前常用的多巴胺检测方法有光谱法、高效液相色谱法、化学修饰电极法、传感器法、毛细管电泳法,本文就高效液相色谱法做一综述。
关键词:高效液相色谱法;多巴胺;检测中图分类号:R742.5 文献标识码:A 文章编号:1006-3315(2015)07-188-001多巴胺(dopamine, DA)是一类儿茶酚胺类物质(CAs),它存在于神经组织及体液中,是下丘脑和脑垂体腺中的一种重要的神经递质,脑垂体内分泌功能的协调与多巴胺在脑内特定区域的分布及含量有密切关系,导致神经功能紊乱,是帕金森病(Parkinson’s disease)发病的一个重要影响因素。
另外,多巴胺还能够引起心脏兴奋,使血流量增加,以用于感染性休克和心源性休克。
所以,进行多巴胺检测的研究具有重要的现实意义[1]。
本文就多巴胺的高效液相色谱法检测作一综述。
高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)[2,3]也是通用的DA 的检测方法。
近年来,由于高效液相色谱技术的不断发展,用HPLC法分离测定体液和组织中CAs的方法日趋完善,检测灵敏度可达pmol水平。
高效液相色谱法具有高分离率,所以在CAs的分析中受到极大重视,HPLC法同电化学检测和荧光检测相结合是目前最有效且最常用的方法。
CAs本身有自然荧光,经HPLC法分离后,可以利用它的荧光进行检测,但是由于其自然荧光相对比较弱,不能用作生物样品灵敏的选择性测定方法。
儿茶酚胺类物质具有两个官能团(氨基和邻二羟基),因此可以通过衍生化形成具有强荧光的物质,借此提高检测灵敏度。
吴予明等[4]利用HPLC和荧光检测器对嗜铬细胞瘤患者和正常人24h尿中DA含量进行测定,对样品进行调酸、萃取、调碱、吸附、洗涤、解析处理后,100微升进样,结果可见:多巴胺浓度在1.3*10-7mol/L~3.8*10-6mol/L内与色谱峰峰高的线性关系良好(r=0.998)精密度RSD(n=6)4.2%~10.3%。
高效液相色谱法快速测定脑梗塞模型大鼠脑组织中多胺的含量

高效液相色谱法快速测定脑梗塞模型大鼠脑组织中多胺的含量何颖娜;尚京川;杨志强【摘要】目的:建立一种简便、灵敏和快速分离测定大鼠脑组织中腐胺、精脒和精胺等多胺含量的高效液相色谱法.方法:采用苯甲酰氯作为衍生化试剂,以1,6-己二胺为内标,采用polygocyl(250×4.6 mm5 μm)C18色谱柱,流动相为甲醇-水(62:38 V/V),流速1.0 mL/min,检测波长229 nm.结果:本法线性范围是1~2 000/mL,回收率大于90%.日内和日间变异系数为1.5%~4.2%.最低定量浓度为1 nmol/mL.结论:该方法符合生物样品分析要求,为脑组织中多胺的含量测定提供了一种简便、准确、灵敏度高的分析方法.【期刊名称】《川北医学院学报》【年(卷),期】2012(027)006【总页数】4页(P538-541)【关键词】多胺;高效液相色谱;固相萃取【作者】何颖娜;尚京川;杨志强【作者单位】河北医科大学中医学院,河北石家庄050091;重庆医科大学药物化学和生物材料研究室,重庆400016;河北瑞洲生物科技有限公司,河北石家庄050021【正文语种】中文【中图分类】R741多胺(polyamines)是指以腐胺(putrescine)、精胺(spermine)和精眯(spermidine)为代表的多个氨基的生物原物质。
多胺做为体内促进细胞生长的重要物质之一,对细胞的生长、增殖及组织的再生起着关键性作用。
在多种病理情况下(如肿瘤、脑损伤等),多胺的代谢可发生明显的紊乱。
近年来的研究表明:脑组织的中多胺代谢的紊乱与多种脑损伤有密切关系,且损伤的程度不同变化不一,因此可以作为脑损伤严重程度的敏感指标[1]。
为了探讨脑梗塞后脑组织中多胺的含量变化,本文提出一种简便、灵敏、快速的多胺检测方法,用于大鼠脑组织中多胺含量的测定,获得满意的结果。
美国Angilent 1100高效液相色谱仪,UV 1100紫外检测器,Model TJ-R离心机(美国贝克曼公司),QL-901漩涡混匀器(江苏海门市琪琳医用仪器厂),固相萃取仪(美国安捷伦公司),Bond-Elut C18固相萃取小柱(美国安捷伦公司)。
人体血液中多巴胺的正常浓度_解释说明

人体血液中多巴胺的正常浓度解释说明1. 引言1.1 概述多巴胺是一种重要的神经递质,它在人体中扮演着重要的角色,参与调节许多生理和心理过程。
正常的多巴胺浓度对于维持身体的健康和功能至关重要。
因此,了解人体血液中多巴胺的正常浓度范围以及影响其水平变化的因素对于全面了解多巴胺在身体中的作用是必不可少的。
1.2 文章结构本文将分为五个部分来详细探讨人体血液中多巴胺的正常浓度。
首先,在“多巴胺概述”部分我们将介绍多巴胺的定义、功能、来源和合成以及作用机制和调节方式。
接下来,在“血液中多巴胺浓度的正常范围”部分,我们将探讨测量多巴胺浓度的方法和技术,不同年龄和性别人群内血液中多巴胺水平的变化情况,以及多巴胺浓度与健康状况之间可能存在的关系。
然后,在“影响血液中多巴胺浓度的因素”部分,我们将重点讨论遗传因素、环境因素以及药物和草药对多巴胺水平的影响。
最后,在“结论”部分,我们将总结文章的主要内容并提出进一步研究的建议。
1.3 目的本文旨在全面了解人体血液中多巴胺的正常浓度范围,并探讨影响其水平变化的因素。
通过对多巴胺在人体内部的作用机制和调节方式的深入研究,我们可以更好地理解多巴胺与健康之间的关系,并为未来相关疾病的预防、诊断和治疗提供理论基础。
通过对遗传、环境以及药物等因素对多巴胺水平影响的分析,我们可以更全面地认识到这些因素如何与正常血液中多巴胺浓度产生联系。
这对于促进个体健康管理以及丰富治疗方法都具有重要意义。
2. 多巴胺概述:2.1 多巴胺的定义和功能:多巴胺是一种重要的神经递质,属于儿茶酚胺类物质,它在中枢神经系统起着关键作用。
多巴胺被广泛分布于脑部不同区域,如大脑皮层、边缘系统、丘脑和基底节等。
多巴胺具有调节情绪、认知、运动控制、奖赏机制和内分泌等功能。
它在情绪方面发挥重要作用,参与快乐感、欣喜和满足感等积极体验的产生。
此外,多巴胺还参与记忆形成和学习过程。
2.2 血液中多巴胺的来源和合成:血液中的多巴胺主要源自两个渠道:一是由脑部释放到外周系统中;二是肾上腺髓质合成分泌到血液中。
固相萃取—高效液相色谱—荧光法测定人体尿液中单胺类神经递质

固相萃取—高效液相色谱—荧光法测定人体尿液中单胺类神经递质作者:高慧邢燕汪洋来源:《中国测试》2017年第02期摘要:建立一种快速、准确测定人体尿液中肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺及5-羟色胺4种单胺类神经递质的方法。
尿液样品以Waters Oasis WCX固相萃取柱富集,依次用2 mL 20 mmol/L乙酸铵-甲醇溶液、2 mL甲醇淋洗杂质,最后用5 mL含2%甲酸的乙腈水溶液(85∶15,ν∶ν)提取被分析物。
经Agilent C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)分离,以甲醇与乙酸钠溶液的不同配比设置流动相梯度,在荧光检测激发波长280 nm,发射波长340 nm条件下,测定人体尿液中4种单胺类神经递质的含量。
结果表明:4种单胺类神经递质的回收率为92.2%~104.8%,相对偏差为1.6%~3.1%,检出限为0.002~0.05 μg/mL。
该方法稳定、快速、简便,能满足人体尿液中多种单胺类神经递质的含量测定。
关键词:单胺类神经递质;固相萃取;高效液相色谱;荧光检测文献标志码:A 文章编号:1674-5124(2017)02-0060-040 引言神经递质是神经末梢分泌的化学物质,在化学突触传递中担当信使的作用。
单胺类物质(MNTs)是最早发现的一类神经递质,包括多巴胺(DA)、肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)。
MNTs在中枢神经系统、外周植物神经系统和激素介导的内分泌及外分泌活动中起着极其重要的作用[1]。
固相萃取(solid-phase extraction,SPE)是近年发展起来的一种样品预处理技术,主要用于样品的分离、纯化和浓缩,与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率,更可将分析物与干扰组分有效分离,正成为复杂样品纯化、富集的有效手段。
人体尿液中单胺类神经递质含量的准确检测,对嗜铬细胞瘤等相关疾病诊断、新药研制开发、药物疗效评价等方面有重要意义。
高效液相色谱-荧光检测法同时测定大鼠不同脑区中的8种单胺类神经递质

高效液相色谱-荧光检测法同时测定大鼠不同脑区中的8种单胺类神经递质赵燕燕;刘丽艳;韩媛媛;白洁;杜光玲;高茜【摘要】A method for the simultaneous detection of L-dihydroxyphenylalanine , norepinephrine, epinephrine , dopamine ,3,4-dihydroxyphenylacetic acid , serotonin hydrochloride, 5-hydroxyindole-3-acetic acid and homovanillic acid in the different sections of mouse brains was established by using high performance liquid chromatography ( HPLC ) with fluorescence detection and isocratic elution. Before analysis, the sample was deproteinized by 0.60 mol/L perchloric acid, followed by adjusting pH value of the sample with 1.20 mol/LK2HPO4, addition of 0.1 g/L L-cysteine as antioxidant and 0.50 mmol/LNa2EDTA as complexing agent. The separation column was a Shim-packC18 column ( 250 m m ×4.6 mm, 5 μm ) and the mobile phase ( pH 3.8 ) was 13% methanol containing 50 mmol/L citric acid , 50 mmol/L sodium acetate . 0.5 mmol/L 1-heptanesulfonic acid sodium salt, 5 mmol/L triethylamine and 0.5 mmol/L Na2EDTA. The flow rate was 1.0 mL/min. The injection volume was 10 μL. The emission and excitation wavelengths were 330 nm and 280 nm , respectively. Under the optimized separation conditions, the calibration curves showed good linearity within the concentrations of 1.25 -5000 μg/L ( r>0.9999 ). The limits of detection were between 0.20 - 5.00 μg/L, the average recoveries were between 94.83%and 99. l9%. and the relative standard deviations ( RSDs ) were between0.08% and 2.51%. The advantages of the method include easy and prompt operation,high recovery, low detection limit, good separation effect, high accuracy and precision. The method has practical value for detecting 8 monoamine neurotransmitters in biological samples.%采用高效液相色谱-荧光检测法同时测定了大鼠不同脑区中的左旋多巴、去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺、二羟基苯乙酸、5-羟色胺、5-羟基吲哚乙酸及高香草酸8种单胺类神经递质的含量.样品经组织裂解液(0.60 mol/L 高氯酸、0.50 mmol/L Na2 EDTA、0.1 g/L L-半胱氨酸的混合水溶液)处理后,冷冻离心得到上清液;上清液中加入高氯酸沉淀剂(1.20 mol/L K2 HPO4、2.00 mmol/L Na2 EDTA的混合水溶液)处理后,冷冻离心、过滤.在该优化的色谱条件下,8种单胺类神经递质在1.25~5 000μg/L范围内线性关系良好(r>0.999 9),最低检出限在0.20~5.00μg/L之间,平均回收率在94.83%~99.19%之间,相对标准偏差在0.08%~2.51%之间.该方法具有操作简便、快捷、回收率高、检出限低、分离度好、结果准确可靠等优点,可以用于体内8种单胺类神经递质的同时检测与分析.【期刊名称】《色谱》【年(卷),期】2011(029)002【总页数】6页(P146-151)【关键词】高效液相色谱;荧光检测;单胺类神经递质;脑;大鼠【作者】赵燕燕;刘丽艳;韩媛媛;白洁;杜光玲;高茜【作者单位】河北大学医学实验中心,河北,保定,071000;河北大学化学与环境科学学院,河北,保定,071002;河北大学化学与环境科学学院,河北,保定,071002;河北大学医学实验中心,河北,保定,071000;河北大学医学实验中心,河北,保定,071000;河北大学医学实验中心,河北,保定,071000;河北大学化学与环境科学学院,河北,保定,071002【正文语种】中文【中图分类】O658单胺类神经递质包括儿茶酚胺类化合物(去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺)、吲哚胺类化合物(5-羟色胺)及相关代谢产物(多巴胺代谢前体左旋多巴、多巴胺代谢产物二羟基苯乙酸和高香草酸、5-羟色胺代谢产物5-羟基吲哚乙酸)。
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高效液相色谱法检测大脑神经递质多巴胺
多巴胺(dopamine, DA)是一类儿茶酚胺类物质(CAs),它存在于神经组织及体液中,是下丘脑和脑垂体腺中的一种重要的神经递质,脑垂体内分泌功能的协调与多巴胺在脑内特定区域的分布及含量有密切关系,导致神经功能紊乱,是帕金森病(Parkinson’s disease)发病的一个重要影响因素。
另外,多巴胺还能够引起心脏兴奋,使血流量增加,以用于感染性休克和心源性休克。
所以,进行多巴胺检测的研究具有重要的现实意义[1]。
本文就多巴胺的高效液相色谱法检测作一综述。
高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)[2,3]也是通用的DA的检测方法。
近年来,由于高效液相色谱技术的不断发展,用HPLC法分离测定体液和组织中CAs的方法日趋完善,检测灵敏度可达pmol水平。
高效液相色谱法具有高分离率,所以在CAs的分析中受到极大重视,HPLC法同电化学检测和荧光检测相结合是目前最有效且最常用的方法。
CAs本身有自然荧光,经HPLC法分离后,可以利用它的荧光进行检测,但是由于其自然荧光相对比较弱,不能用作生物样品灵敏的选择性测定方法。
儿茶酚胺类物质具有两个官能团(氨基和邻二羟基),因此可以通过衍生化形成具有强荧光的物质,借此提高检测灵敏度。
吴予明等[4]利用HPLC和荧光检测器对嗜铬细胞瘤患者和正常人24h尿中DA含量进行测定,对
样品进行调酸、萃取、调碱、吸附、洗涤、解析处理后,100微升进样,结果可见:多巴胺浓度在1.3*10-7mol/L~
3.8*10-6mol/L内与色谱峰峰高的线性关系良好(r=0.998)精密度RSD(n=6)
4.2%~10.3%。
衍生化可分成柱前衍生化和柱后衍生化两种,在分离前需要制备荧光衍生物的柱前衍生化是,有邻苯二甲醛(OPA)、荧光胺(FA)、丹磺酞氯(DNSCI) l,2一二苯基乙二胺(DPE)及萘一2,3一二羧醛等属于柱前衍生化试剂。
这些试剂可用于尿样和一些经提纯的组织样品中的儿茶酚胺类物质的测定,但对血浆中CAs的测定灵敏度较低。
CAs与1,2一二苯基乙二胺有特异性反应,用离子交换树脂柱萃取,经过简单的提纯过程,就可以进行血浆、血红细胞和尿样中CAs的测定。
Nohta等用柱前衍生化方法测定了血浆和尿样中的CAs。
Ragab等用上述试剂作为HPLC法化学发光检测CAs 的灵敏前置柱衍生剂,测定了CAs和异丙肾上腺素,检出限为400~120amol。
目前,日本Hitachi公司已研制出基于1,2一二苯基乙二胺衍生化反应的HPLC法CAs自动分析仪,并已投放市场[5]。