藻蓝蛋白别藻蓝蛋白

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《水产食品加工学》练习题及答案解析

《水产食品加工学》练习题及答案解析

《水产食品加工学》练习题及答案解析水产品的化学组成成分一、鱼贝类的水分[1]水的作用●溶解物质如糖、盐;分散蛋白质、淀粉等●参与维持电解质平衡,调节渗透压●影响产品的加工、保藏和质量[2]食品中水分●游离水,结合水[3]水分活度●Aw=P/p0二、鱼贝藻的蛋白质[1]鱼贝类肌肉组织●普通肉和暗色肉●红肉鱼和白肉鱼[2]鱼贝类的蛋白质组织1.鱼肉类蛋白质●细胞内蛋白质◆肌原纤维蛋白质◆肌浆纤维蛋白质●细胞外蛋白质◆肌基质蛋白质2.鱼类肌肉蛋白●肌原纤维蛋白盐溶●肌浆蛋白水溶●肌质蛋白不溶[3]肌肉的构造1.肌纤维●细胞组成◆肌膜◆肌原纤维✓粗肌丝✓细肌丝✓肌原纤维蛋白✧肌动蛋白✧肌球蛋白✧原肌球蛋白✧肌钙蛋白◆肌浆✓溶酶体◆肌细胞核2.肌基质蛋白(构成结缔组织)●胶原蛋白●弹性蛋白3.胶原氨基酸共性组成●胶原蛋白●交联◆胶原蛋白的应用◆其它基质蛋白[4]水产品过敏原[5]水产品过敏蛋白[6]海藻蛋白质1.藻胆蛋白2.藻红蛋白3.藻蓝蛋白4.异藻蓝蛋白三、鱼贝类的脂质[1]脂肪1.非极性脂肪2.极性脂肪[2]鱼贝类脂肪含量1.脂质含量2.作用●作为热源●必须营养素●代谢调节物质●绝缘物质●缓冲3.影响脂质含量的因素●环境条件(水温、生栖深度、生栖场所等)●生理条件(年龄、性别、性成熟度)●食饵状态(饵料的种类、摄取量)四、鱼贝类的糖类[1]鱼贝类的糖原●贝类●鱼类[2]水产品的其他糖类●中性粘多糖●酸性粘多糖五、鱼贝类的提取成分[1]Extract的定义1.抽提成分●含氮成分●非含氮成分2.提取物成分研究课题●生物学方面的研究●食品化学方面的研究●食品工业方面的研究3.提取物成分的分布含氮成分●游离氨基酸●低分子肽●核苷酸及其关联化合物●有机盐类●其他低分子成分非含氮成分●有机酸●游离单糖类六、鱼贝类的维生素[1]脂溶性维生素(A、D、E、K)1.维生素D(Vit D)2.维生素E(Vit E)[2]水溶性维生素(B、C)1.硫氨素(Vit B1)2.核黄素(Vit B2)3.尼克酸又称烟酸(Vit B5)4.维生素C(Vit C)七、鱼贝类的无机质[1]概述1.常量元素(Na、K、Ca、Mg、Cl、P、S)2.微量元素(Mn、Co、Cr、I、Mo、Se、Zn、Cu等)[2]鱼贝类中无机含量的特点●硬组织含量高●肌肉相对含量低●作为蛋白质、脂肪等组成的一部分●体液的无机质主要以离子形式存在,同渗透压力调节和酸碱度平衡相关八、鱼贝类的呈味成分[1]鱼类[2]甲壳类[3]贝类●琥珀酸及其钠盐具有鲜味,其次还有苷氨酸等●糖原具有调和浸出物成分的味,增强浓厚感[4]其他水产食品加工学什么是root effect?答:root effect(鲁特效应):鱼类特有的现象,是指当血液中p(CO2)升高时,Hb对O2的亲和力下降,而且Hb氧容量也下降的现象。

藻蓝素简介

藻蓝素简介

藻蓝素简介1.概况藻蓝素又名藻蓝蛋白,是螺旋藻中一种重要的光合作用蛋白,为水溶性,是目前天然色素品种中极少见的一种营养色素。

藻蓝蛋白本身为亮丽的天蓝色,可以广泛应用于饮料、糖果、糕点、酒类等食品的着色。

藻蓝素还具有保健功能,主要有以下几点:营养功能、帮助人体对铁的吸收、提高免疫力、促进动物血细胞的再生、抗氧化作用等。

[1]2.理化性质2.1.溶解性藻蓝素具有强烈的荧光性,发橙红色荧光,其本身呈蓝色,溶于水、乙醇等极性溶剂,其中在高浓度乙醇中,色素将发生凝聚。

不溶于乙醚、氯仿等非极性溶剂。

[1]2.2.蓝藻素的光吸收峰在200~800nm波长范围内,用分光光度计对藻蓝素水溶液进行扫描,其光谱吸收峰为620nm和348nm(图1),其荧光发射为646nm(图2)。

[2]2.3.温度对藻蓝素稳定性的影响藻蓝素水溶液在35℃以下是稳定的,在45℃时具有较高的稳定性,在50℃时,稳定性下降,温度超高60℃稳定性明显下降。

[1][2][3]2.4.酸碱度对藻蓝素稳定性的影响藻蓝素水溶液在酸性条件下色素颜色较深,随着pH的增大,藻蓝素稳定性下降。

在pH4~8之间较稳定,其水溶液最大吸收峰(A)不变。

[2]2.5.光照对藻蓝素稳定性的影响藻蓝素溶液在避光条件下稳定,色素无损失;在自然光下,对色素影响较小;强日光或其他强光下,影响较大,溶液会逐渐产生沉淀,溶液颜色逐渐消退。

[2][3]2.6.金属离子和糖类对藻蓝素稳定性的影响在所有金属离子中,已发现钙和钾离子对色素没有影响,而铁和锌离子存在时,色素会慢慢出现沉淀,随着铁和锌离子量的增大,色素颜色由蓝色变绿后转黄色。

蔗糖的存在基本不对色素产生影响,而葡萄糖的存在则加快了藻蓝素的降解,产生大量绿色沉淀。

[1]2.7.NaCl对藻蓝素稳定性的影响藻蓝素在不同浓度的NaCl溶液中,A620值均随着保存时间延长而下降。

说明在NaCl溶液不稳定。

参考文献:[1]冯亚非,等. 藻蓝-富有营养保健功能的天然色素. 食品科技,NO 6 2007,171-173.[2]杨东霞. 螺旋藻藻蓝素稳定性的影响因素. 丹东纺专学报,2004第4期,9-10.[3]张少斌,等. 天然食用色素藻蓝蛋白的稳定性研究. 食品科技,NO 6 2007,169-170.。

藻蓝蛋白——亿万年前的蓝色蛋白质

藻蓝蛋白——亿万年前的蓝色蛋白质

藻蓝蛋白——亿万年前的蓝色蛋白质展开全文前言:日本是较早开发和应用藻蓝素的国家,藻蓝素也是美国FDA认可的唯一天然蓝色色素。

欧盟也正在通过相关的法律法规。

中国GB2760食品添加剂目录也把藻蓝素作为天然的着色剂允许使用。

由于藻蓝素工业化生产开发的滞后,中国目前还没有制定出台藻蓝素的国家标准。

但由于市场的强烈需求和人们对健康生活的关注,这个趋势变的越来越迫切。

目前在全球范围内,天然的红色素和天然的黄色素的需求量惊人的增长,而作为红黄蓝三大基本色的天然蓝色素却应用的比较少,其主要原因有两点,一是自然界中天然蓝色系列物质的匮乏,二是藻蓝工业化生产技术没有取得较大突破,导致生产成本居高,日本DIC公司是少数掌握藻蓝工业化生产技术的公司,但其生产成本也非常的高昂,难以满足市场的需求。

所以如果能有效的控制生产成本,藻蓝素作为天然的蓝色素具有不可替代的地位,其市场的容量非常巨大。

另外,藻蓝素作为一种功能性成分在抗癌、消炎、补血、护肝、保养卵巢、抗氧化,增加白细胞方面不断的被科研机构证明,藻蓝素的荧光性质也是肿瘤光动力靶向治疗的优良材料,目前在解放军301医院和解放军210医院等单位进行临床应用研究。

藻蓝素的相关保健品和美容产品在日本和台湾地区已经相对成熟,而国内市场几乎空白,但最近一两年也有一些企业了解了藻蓝素,尝试进行开发。

台州宾美生物是国内最早开发藻蓝蛋白工业化生产的单位,打破了国外的垄断。

如哈尔滨渴康生物推出的藻蓝蛋白美容面膜,威海格瑞安推出的本颜胶原蛋白含藻蓝素,以及深圳海王药业实验室开发藻蓝保健品(以上由我公司提供原料)。

在医药领域藻蓝素在美国和日本已经被开发成复合药品,在英国和美国还应用到兽药领域。

藻蓝素是海藻细胞中的捕光天线,所以在农业领域也具有一定的前景,由北京农科院和山东蔬菜研究所进行藻蓝素叶面肥的研究,证明能较好改善植物的光合作用,提高对光的利用率,还具有抗菌作用。

【商品名】:藻蓝蛋白,藻蓝素。

万东华-藻蛋白的分离纯化及光谱性质研究

万东华-藻蛋白的分离纯化及光谱性质研究

藻蛋白的分离纯化及光谱性质研究Isolation, purification of phycobiliprotein from Porphyra and itsspectroscopic properties一、实验目的和要求1. 了解藻蛋白的生理意义和功能,藻蛋白一般的纯化方法;2. 掌握盐析和凝胶层析的实验技术;3. 掌握紫外可见光谱仪检测蛋白的方法;4. 了解藻蛋白的荧光发射特性。

二、实验原理藻蛋白是藻类特有的捕光色素蛋白,参与光合作用的能量吸收和传递,主要存在于红藻、蓝绿藻和隐藻的藻胆体中。

藻蛋白主要包括藻红蛋白、藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白三类。

藻蛋白在藻类中的含量可达细胞干重的25%~28%, 除了作为荧光探针用于医学诊断、免疫学和细胞学研究之外,藻胆蛋白具有抗氧化、提高机体免疫力和抗肿瘤等重要药理功能,在功能食品、化妆品和药品中有广泛的应用前景。

我国藻类资源十分丰富,是世界上最大的紫菜生产大国,是获取藻蛋白的理想资源。

选用紫菜提取藻红蛋白,具有成本低、得率高的优点,具有较好的利用价值。

1.蛋白质的盐析沉淀盐在水溶液中电离所形成的正负离子可吸引水分子,从而夺取蛋白质分子上的水化膜,还可中和部分电荷,致使蛋白质聚集,从而达到盐析沉淀蛋白质的目的。

由于各种蛋白质颗粒大小、所带电荷的多少及亲水程度不同,当使用某种中性盐对其进行盐析时,所需的最低盐浓度各不相同。

2.葡聚糖凝胶柱层析分离纯化蛋白质凝胶层析也称分子筛层析、排阻层析。

是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离的技术。

单个凝胶珠本身象“筛子”。

不同类型凝胶的筛孔的大小不同。

相对分子质量较大的物质由于直径大于凝胶网孔被完全排阻在孔外,只能在凝胶颗粒外的空间向下流动,因此流程较短,移动速度快;所以首先流出。

相对分子质量较小的物质由于直径小于凝胶网孔,可完全渗透进入凝胶颗粒的网孔,在向下移动过程中,因此流程较长,移动速率慢;所以最后流出。

藻蓝蛋白 实验报告

藻蓝蛋白  实验报告

藻蓝蛋白的分离与纯化姓名:郭均学院:食品与生物工程班级:食安 09-2学号:200906041069藻蓝蛋白的分离与纯化一、实验目的和要求1、了解藻蓝蛋白的生理意义及功能,藻蓝蛋白的一般提取和纯化的方法;2、掌握蛋白含量测定方法;3、掌握盐析和离子交换层析纯化蛋白的分析技术。

二、实验原理藻蓝蛋白(PC)是一类普遍存在于藻蓝蛋白中的光合辅助色素,也是一种天天然色素蛋白,具有水溶性,可用作视频着色剂。

此外,它具有强烈的荧光,在分子生物学上被制成荧光探针,是一种无毒、无副作用的理想光敏剂。

藻蓝蛋白还具有重要的医疗价值,不但能提高机体的非特异性免疫功能,而且对特异性免疫功能有促进作用。

另外它还有清除自由基的能力,可以抗疲劳,延缓衰老,对人体的生理功能有重要的生物学意义。

利用盐析沉淀蛋白质的基本原理:盐在水溶液中电离所形成的正负离子可吸收水分子,从而夺取蛋白质分子上的水化膜,还可以中和部分电荷,致使蛋白质聚集,从而达到盐析沉淀蛋白质的目的。

由于各种蛋白颗粒大小、所带电荷的多少及亲水程度不同,当使用某种中性盐对其进行盐析时,所需的最低盐浓度各不相同。

研究表明可用25%硫酸铵饱和度沉淀除去杂质,55%硫酸铵沉淀藻蓝蛋白。

盐析出来的蛋白质,需通过脱盐以除去硫酸铵等盐类物质。

最常用脱盐的方法是透析。

蛋白质是大分子物质,它不能透过半透膜,故不断更换蒸馏水或缓冲液可将盐类等小分子杂志透析掉。

蛋白质含量测定有紫外分光光度计法和显色法(Folin-酚法、考马斯亮蓝法等),本实验采用考马斯亮蓝法测定提取藻蓝蛋白的含量,考马斯亮蓝G-250在酸性溶液中为棕红色,当它与蛋白质通过疏水作用后变为蓝色,最大光吸收由465nm变为595nm,在一定范围内,蛋白质含量与595nm处吸光值成正比。

离子交换层析法纯化蛋白质,常用的阳离子交换剂有弱酸性的羧甲基纤维素(CM纤维素),阴离子交换剂有弱碱性的二乙胺基乙基纤维素(DEAE-纤维素)。

藻蓝蛋白及其酶解产物的抗肿瘤效应研究进展

藻蓝蛋白及其酶解产物的抗肿瘤效应研究进展

藻蓝蛋白及其酶解产物的抗肿瘤效应研究进展邓伟;王雪青【摘要】从海洋生物中寻找高效、低毒副作用的抗肿瘤药物是近年天然药物研究的新领域.随着海洋生物药学研究的不断深入,发现许多海洋生物的活性物质源于其食物.因此对于海洋生物食物链基层藻类的生物活性物质研究,更具有实际的意义.藻蓝蛋白(C-phycocyanin, C-PC)是存在于一些藻体中的光合色素蛋白,具有抗肿瘤、抗病毒、抗氧化等多种生物学功能,有重要的开发利用价值.国内外关于藻蓝蛋白的抗肿瘤作用及其机制的研究已有报道,而酶解后的藻蓝蛋白多肽抗肿瘤效应研究国内外报道很少.随着酶工程技术的发展和应用,利用蛋白酶水解藻蓝蛋白获取生物活性肽更具研究开发潜力,围绕藻蓝蛋白及其酶解产物的抗肿瘤活性及机制进行了综述.【期刊名称】《海洋通报》【年(卷),期】2010(029)003【总页数】4页(P357-360)【关键词】藻蓝蛋白;酶解产物;抗肿瘤活性【作者】邓伟;王雪青【作者单位】天津市食品与生物技术重点实验室、天津商业大学生物技术与食品科学学院,天津300134;天津市食品与生物技术重点实验室、天津商业大学生物技术与食品科学学院,天津300134【正文语种】中文【中图分类】R282.77;R151.2藻胆蛋白是大量出现于红藻 (Rhodophyta)、蓝绿藻 (Cyanophyta) 和隐藻(Cryptophyta) 中的捕光色素蛋白,主要包括藻红蛋白 (R-PE)、藻蓝蛋白(C-PC)和别藻蓝蛋白 (APC) 3种。

藻胆蛋白在藻类细胞中的主要功能是作为光合作用捕光色素系统,把捕获的光能高效地传递给叶绿素,从而使海藻的光合作用得以发生[1]。

藻蓝蛋白 (Phycocyanin) 是从螺旋藻中提取的藻胆蛋白的一种,其氨基酸组成合理,其中必需氨基酸占氨基酸总量的37.42%。

大量的临床研究结果表明[2-9],藻蓝蛋白具有抗肿瘤、抗辐射、抗疲劳、调节免疫力、清除自由基、促进细胞生长和保护神经等生理作用。

太湖水体中藻蓝蛋白的紫外可见 吸收光谱特征分析

太湖水体中藻蓝蛋白的紫外可见 吸收光谱特征分析

根据待测溶液500~700的吸收峰个数,可将太湖水 体中藻蓝蛋白的吸收光谱划分为无峰型、单峰型 、双峰型三类(图3)。各吸收谱类型包括的样 点数量和日期见表1。
第一类是无峰型,即500~700nm间变化平缓, 620nm附近未检测到藻蓝蛋白的吸收特征。推测 其原因是该光谱形态的水样多采集于春、秋季( 表1),水样中浮游藻类生物量小、蓝藻所占比 例低,致使待测溶液的藻蓝蛋白含量微少难以检 出。根据300~450nm的吸收差异,无峰型又可划 分为无峰Ⅰ和无峰Ⅱ两个亚类。无峰Ⅰ仅260nm 附近出现吸收峰,250~800nm的谱型更接近于水 样的CDOM吸收谱(图4)。无峰Ⅱ在260和 330nm处均具吸收峰,说明待测溶液中其他可溶 性蛋白的含量较高。
对于标准品的配置和测量,sigma公司生产的 藻蓝蛋白标准品0.5mg,加人25mL磷酸盐缓冲 液使其成为20mg· L-1的标准溶液贮备液,装入 棕色瓶中,于4℃保存。实验分析时将标准液取 出并配制为10mg· L-1的标准应用液。以磷酸盐 缓冲液作为空白对照测量吸光度。参照张运林 方法,通过 GF/F玻璃纤维滤膜过滤水样、测量 滤液吸光度,获取有色可溶性有机物(CDOM )的吸收数据,对藻蓝蛋白吸收光谱特征进行 辅助分析。
第三类为双峰型,即在620nm 藻蓝蛋白特征吸收 峰的右侧约670nm处出现了另一个吸收峰,同时 在300~450nm出现吸收肩。按照吸光度的高低顺 序,双峰型光谱的主吸收峰出现在260nm附近, 次吸收峰位于330nm左右,三个吸收峰260,330 ,620nm的平均峰值比约为10:5:1。从图1来看, 双峰型光谱670nm附近的吸收谱带与藻蓝蛋白、 别藻蓝蛋白的吸收具有重叠。
由图2和图3可知,太湖水体藻蓝蛋白吸收光谱的次吸收 峰位于330nm左右,单一藻种则出现在620nm附近。产生 该差异的原因可能有以下两种:一是太湖水体中藻体多以 群体态形式聚集并形成包裹体,包裹体表面附有由果胶酸 、粘多糖等构成的群体胶鞘。群体胶鞘类似于藻体细胞外 壳,其存在会增加藻蓝蛋白提取的难度,使得太湖藻蓝蛋 白待测溶液的提取纯度低于单一藻种。第二种可能是受到 其他非蓝藻门藻种的影响。太湖是多藻种共存的湖泊水体 ,水体中除了蓝藻外,还会存在诸如斜生栅藻、梅尼小环 藻等的其他非蓝藻门藻种。这些非蓝藻门藻种虽不含藻蓝 蛋白,但其细胞体本身也由众多可溶性蛋白质构成;在反 复冻融提取过程中,它们也会发生降解并产生CDOM,致 使太湖藻蓝蛋白紫外波段至蓝波段的的吸收光谱特征

雨生红球藻内生蓝藻的发现及其生理生化特性的初步研究

雨生红球藻内生蓝藻的发现及其生理生化特性的初步研究

河北工业大学硕士学位论文雨生红球藻内生蓝藻的发现及其生理生化特性的初步研究姓名:***申请学位级别:硕士专业:生物化工指导教师:***2011-05雨生红球藻内生蓝藻的发现及其生理生化特性的初步研究摘要首次在单细胞绿藻-雨生红球藻中发现并分离出一株内生蓝藻。

本文对该内生蓝藻进行了初步的形态学鉴定,并对其基本的生理生化特性,包括细胞的形态特征,生长周期,色素组成以及光谱学特性等作了初步的研究。

研究的结果如下:1.初步的形态学鉴定结果表明此株内共生的蓝藻属于色球藻属,与其中的微小色球藻极为相似,但又不完全相同。

2.研究发现,此株内共生蓝藻对光照强度及其敏感,在弱光照(Low-light LL)(800lx)和中等强度光照(Middle-light ML)(2500lx)条件下表现出的生理生化特性存在很大的差异。

具体如下:(1)细胞形态的差异。

LL光照条件下,2-4个细胞为单位由一个透明囊膜包裹的一个微群体聚集生长,并且大多数的细胞都处在分裂的状态,微群体长7-11μm,宽4-8μm。

ML光照条件下,细胞大多以单个的形式存在,少见到分裂中的细胞,细胞大小在4-5μm之间。

(2)生长周期。

两种光照条件下细胞的延滞期都为2天左右,不同的是:LL光照条件下细胞的指数生长在25天左右,30天后进入稳定期;而ML光照条件下的细胞指数生长的时间相对较长(超过30天),并且二者在进入稳定期后,大约在60天后进入衰亡期。

(3)色素组成及光谱学特性。

研究表明,此株内生蓝藻的光合色素组成主要有叶绿素a,类胡萝卜素,藻蓝蛋白和别藻蓝蛋白,而光谱学特性表明,ML光照条件下以叶绿素a为主,藻蓝蛋白的含量很低,相反,LL光照条件下,捕光色素以藻蓝蛋白为主,这就同时获得了一种大量合成藻蓝蛋白的培养方法。

3.初步的研究表明,光照强度对内生蓝藻造成的影响是不可逆的,当把ML光照条件培养的细胞重新置于LL光照条件下时,细胞所表现出的生理形态和生化特性都是不可逆的。

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藻胆蛋白(Phycobiliprotein)是一种水溶性色素蛋白,由脱辅基蛋白和开链吡咯结构的色基通过硫醚键共价交联而成,存在于红藻,蓝藻,隐藻和某些甲藻体内,是这些藻类所特有的光合系统捕光色素。根据结构和光谱特征,藻胆蛋白被分成3个主要大类:藻红蛋白(Phycocrythrin,PE),藻蓝蛋白(Phycocyanin,PC)和别藻蓝蛋白(Allophycocyanin,A-PC)。
(3)环境监测:藻体内藻红蛋白及其它色素的不同种类及含量可通过其不同光学特征而得到区分,因而可在水体中直接检测水花,赤潮,如Cowle等报道,用一种光度计可直接探测水体中含藻红蛋白的浮游植物。
(4)在医药中的应用:螺旋藻藻蓝蛋白能显著提高机体的体液免疫和细胞免疫的能力,特别是小鼠受氢化可的松损伤后,藻蓝蛋白对其免疫功能有一定的恢复作用,因此藻蓝蛋白有望成为肿瘤放化治疗中并用的生物反应修饰剂应用于临床。藻蓝蛋白和藻红蛋白具有抗肿瘤活性,如坛紫菜藻蓝蛋白对HL-60细胞生长具有抑制作用[34];螺旋藻藻蓝蛋白对人血癌细胞株HL-60、K-562和U937这三种肿瘤细胞均有不同程度的抑制作用并存在浓度剂量效应,高浓度抑制作用最强;R-藻红蛋白介导的光敏反应能通过诱导肿瘤细胞出现凋亡,从而有效地杀伤肿瘤细胞,是一种很有前景地光动力药物。Iijima等(1982)的研究发现藻蓝蛋白能促进免疫系统以抵抗各种疾病。哈佛医学院的Schwartz和Shklar(1986)也研究发现螺旋藻藻蓝蛋白对一些癌细胞有抑制作用。1988年,Morcos等的试验和1995年蔡心涵等的研究也证明藻蓝蛋白有光敏作用和良好的抑癌作用。张成武1995年的研究证明藻蓝蛋白对骨髓造血具有刺激作用,可用于临床辅助治疗各种血液疾病。藻胆蛋白具有性质稳定、荧光量子产率高、背景干扰小、易于同生物素抗体和糖蛋白等大分子交联等特点,作为新一代的荧光探针在临床诊断、免疫学、细胞生物学、组织化学、分子生物学等方面可代替同位素和酶作标记物。
allophycocyanin APC:蓝色蛋白晶体,分子量为104 kDa与含巯基的蛋白耦联。用于多标记流式技术和生物芯片检测,633nm/662nm。
2,carboxyfluorescein一种常用荧光素,比FITC受荧光淬灭影响少。与氨基反应,用于蛋白核酸标记,优于FITC,488nm/525nm
取螺旋藻粉50g加入ph7的磷酸盐缓冲液300ml于4℃浸泡后至于磁力震荡搅拌器上高速搅拌30min然后再-20℃和38℃间交替冻融数次
静置30min
7000r/min 4℃离心50min
取上清液用50%饱和度的硫酸铵4℃盐析24h
得藻蓝蛋白
离心沉淀得到的藻渣用PBS溶解后超声波处理9min(功率100w。振幅25%)
粗品的制备
取顿顶螺旋藻(干粉)→细胞破碎→水溶液抽取→冻干得蓝色粗晶体
分离纯化
凝胶过滤→羟基磷灰石核酸分离→磷酸盐溶液梯度洗脱
材料
顿顶螺旋藻粉、羟00
紫外分光光度计
自动部分收集器
高速低温冷却离心机3k30型
超声波细胞破碎仪b-30
恒流泵
提取方法
磷酸盐缓冲液循环冻融联合超声波破碎发提取藻蓝蛋白
然后7000r/min离心40min
50%硫酸铵沉淀得藻蓝蛋白。收集以上两步沉淀用10mlpbs溶解
置于透析袋中2000ml10m mol/l
12小时去除铵离子
藻胆蛋白除了作为光合作用捕光色素系统吸收合和高效传递光能以外,也是细胞内的贮存蛋白。
它还具有多方面的应用价值。
(1)天然色素:根据Kaixian报道,藻红蛋白颜色鲜艳,可作为天然色素应用于食品和化妆品工业,且易着色,无毒,无害。
(2)荧光探针:藻胆蛋白具有性质稳定,荧光量子产率高,背景干扰小,易于同生物素抗体和糖蛋白等大分子交联等特点,作为新一代的荧光探针在临床诊断,免疫学,分子生物学等方面可替代同位素和酶作标记物。
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