病毒基因组DNA提取试剂盒使用说明书
基因组DNA提取试剂盒 说明书

基因组DNA 提取试剂盒使用说明书此说明书仅适用于此说明书仅适用于基因组基因组DNA 提取试剂盒提取试剂盒,,使用前请务必仔细阅读说明书有关内容使用前请务必仔细阅读说明书有关内容,,若有任何疑问若有任何疑问,,欢迎致电厦门欢迎致电厦门致致善生物科技有限公司生物科技有限公司((4006618810*************)进行咨询进行咨询,,您也可以登录我们公司的网站您也可以登录我们公司的网站(( )了解相关信息或者通过E-mail ( ****************) 与我们进行沟通与我们进行沟通。
一 产品简介基因组DNA 提取试剂盒采用本公司自行研制的磁珠,用于从抗凝全血、新鲜或冻存组织、培养细胞、石蜡包埋组织、唾液、培养细菌等一系列不同样品中分离、纯化高质量的基因组DNA。
我们根据磁珠的独特分离作用,提供了一个极其简便的操作程序:样品裂解、磁珠吸附、洗涤以及洗脱。
在最适的试剂及操作条件下,可获得高质量DNA。
该方法具有简便、快捷、高效等特点,整个提取过程无须使用苯酚、氯仿等有机溶剂。
品名规格 货号 基因组DNA 提取试剂盒100T 4hk001裂解液DL 120ml ×2 磁粒 40ml 洗涤液 50ml ×5 洗脱液 45ml 缓冲液HTL 20ml ×1 二硫苏糖醇(DTT ) 10管,0.18g/管 说明书 1份储存条件储存条件::本试剂盒所有试剂(除DTT 外)均可以室温保存,应避免阳光直射。
当室温低于15℃时,裂解液中可能有结晶析出,38℃水浴加热几分钟,恢复澄清后即可使用,提取效率不受影响。
DTT 需要于冰箱4℃保存。
本试剂盒有效期为12个月, 请于有效期内使用。
安全信息:试剂中含刺激性化合物,操作时应小心,避免沾染皮肤,眼睛和衣服,若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
三 使用者自配试剂DTT 溶液使用浓度为1mol/L 。
甘棠飞华生物科技 病毒基因组 DNA 快速提取试剂 说明书

病毒基因组DNA快速提取试剂(目录号:DL100、DL101)【产品说明】z本品不含酚、氯仿,能快速裂解病毒或细胞包膜,适用于从血凊或血浆中提取病毒DNA。
z整个提取过程在室温操作,需25分钟完成。
z应用本品提取的DNA,不经任何处理可直接用于PCR实验。
【规格】DL100:50ml;DL101:100ml。
【贮存条件及有效期】15-30℃保存,有效期3年。
【需自备试剂】75%乙醇和异丙醇【操作方法】1.取血清50μl,加入本试剂100μl,异丙醇100μl立即混匀,室温放置10分钟。
2.10000rpm离心10分钟,吸去液体,在沉淀物原管内加入75%冷乙醇100μl。
3.8000rpm离心2分钟,吸去管内液体,沉淀物中即含DNA。
【操作说明及注意事项】1.本实验可使用0.5毫升超薄管提取DNA,直接进行PCR反应。
2.最后一次离心,可用真空泵吸去液体及管壁水珠,如果用加样器吸去液体,常吸不净管边水珠,可在50℃以下烘去管壁水珠,再进行PCR试验。
3.本试剂在0-4℃时,可出现结晶,室温放置或稍加温可溶解,不影响实验效果。
4.将本品加入被检血清后,应摇匀。
5.本品对皮肤及粘膜稍有损害,使用时应特别注意。
如果粘到皮肤上,可立即用异丙醇或乙醇擦拭,然后用清水冲洗。
6.如果用于PCR实验,请按PCR操作规程操作,严防污染。
北京甘棠飞华生物科技有限公司Beijing Gantangfh Biotech Co.,Ltd.地址:北京市海淀区清河安宁庄路4号11号办公楼323室邮编:100085电话:(010)62930532 Email:******************。
华大智造 MGIEasy FFPE 基因组 DNA 提取试剂盒(NE32 预装版)说明书

MGIEasyMGIEasy FFPE基因组DNA提取试剂盒(NE32预装版)说明书说明书版本:2.0 型号:/【产品名称】中文名称:MGIEasy FFPE基因组DNA提取试剂盒(NE32预装版)英文名称:MGIEasy FFPE DNA Extraction Prepacked Kit (MGISP-NE32)【包装规格】货号型号规格940-000113-00 / 32 人份/盒【预期用途】用于FFPE样本中人源核酸的提取、富集、纯化等步骤。
【检验原理】本试剂盒采用安全无毒的脱蜡溶液,特殊的裂解液配方,快速释放样本中的DNA,通过高效的结合纯化系统,提取得到完整性好、高纯度的DNA。
样品处理基于磁珠微粒子,采用了一个通用的分离程序:样品处理,磁珠吸附,洗涤和洗脱,配合MGISP-NE32可以同时高通量的提取多个样品DNA。
整个提取环节所得到的基因组DNA可用于各种常规操作,包括荧光定量PCR、文库构建、高通量测序等实验。
【主要组成成分】表1 试剂盒主要成分及规格【储存条件及有效期】1.试剂盒可在常温下运输(0~40℃)。
2.试剂盒保存:试剂盒保存于2℃-8℃。
3.有效期:本试剂盒有效期12个月,请在有效期内使用。
【适用自动化仪器】本试剂盒适用仪器为:全自动核酸提取纯化仪:仪器型号:MGISP-NE32;【样本要求】可以提取石蜡包埋组织或福尔马林固定组织样本。
注意:1. 样本量:切去表面的与空气接触部分,石蜡切片8片以下。
2. 福尔马林浸泡的样本需要按照说明书要求进行前处理。
【检验方法】A.样本裂解1.样本处理a)石蜡切片:取10μm左右厚度、面积等同于大约0.5cm×0.5cm大小的石蜡切片8片以下,加入到无菌的1.5mL离心管中。
b)石蜡块:用无菌的手术刀切去表面的与空气接触部分,刮取样本组织30mg以下,尽量避免石蜡部分,加入到无菌的1.5mL离心管中。
c)福尔马林浸泡的样本:用无菌手术刀片切取样本组织至小片状(有助于裂解消化),加入到无菌1.5mL离心管,加入1mL 10mM的pH7.0-7.4 PBS溶液或生理盐水,漩涡混匀,离心机最高转速离心1min,吸弃液体部分,再重复洗涤一次。
DNAzol基因组DNA快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书

DNAzol 基因组DNA快速提取试剂目录号:DN26目录编号包装单位DN2601 50mlDN2602 100ml❖产品介绍:DNAzol 是一种完全的、可直接使用的基因组DNA提取试剂,简单高效,结果可靠,可快速提取基因组DNA,适用于多种大量或少量样品。
DNAzol 可在一个步骤中裂解细胞并水解RNA,经过乙醇沉淀后即可快速得到基因组DNA。
整个过程只需10-30 分钟,DNA 回收率可达70-100%,得到的DNA 不需再纯化,可直接用于Southern 杂交、斑点杂交、分子克隆、PCR 反应和其他分子生物学应用。
❖产品储存:室温保存至少一年。
❖注意事项:DNAzol 有毒害性,应避免直接接触皮肤和眼睛。
❖操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)1.裂解,匀浆a.组织:25-50mg 组织加1ml DNAzol ,使用匀浆仪处理5-10 次。
少量(5-10mg)柔软组织,如脾或脑组织,可切成或者捣成小块使用微量取样器吹打混匀,室温放置5-10 分钟。
b.细胞:单层培养的细胞应直接裂解,倒出培养基,加入DNAzol 用取样器吹打几次混匀。
每10cm2 细胞培养板加0.75-1.0ml DNAzol。
c.细胞沉淀或悬浮液:每1-3×107细胞(体积小于0.1ml)加1ml DNAzol,反复吹打混匀。
以上均要使用大口径枪头吹打,以免过度剪切断基因组。
2.离心4 -25℃,10000g 离心10 分钟。
将得到的上清转入新管。
此步骤去除组织碎片、部分水解的RNA和多糖。
如果所提样品为含较多细胞和细胞外物质的样品,如肝、肌肉和大部分植物组织等,或要提取不含RNA 的DNA 时,可加此步骤。
其他样品可省略此步。
3.沉淀每使用1ml DNAzol 加0.5ml 100%乙醇,颠倒离心管5-8 次,混匀样品至出现DNA 沉淀,室温放置1-3分钟。
可以看见DNA 絮状沉淀,让沉淀自然沉降到管底,尽可能吸弃上清。
Biospin 细菌基因组DNA提取试剂盒说明书

* Absolute ethanol
* Vortex mixer
1. Please add 158mg Lysozyme to EL Buffer, mix thoroughly for 30seconds or so until the solution is clear, stored at 2-8℃.
常见问题及对策
1 细菌提取的种类 A 可以提取绝大部分细菌,包括革兰阳性细菌和革兰阴性细菌,可有效破碎细菌细胞 结构。 2 RS 缓冲液有混浊怎么办? A 请充分摇匀。 3 RNase A 是否一定需要? A 建议使用.但具体情况视实验目的而定,如果提取的基因组 DNA 进行 PCR 扩增,酶切 等普通分子生物学下游实验,则不需加入,如果对 DNA 纯度要求比较高,可以加入一定量 的 RNase A 以保证 RNA 被充分消化。 4 提取过程中有有机溶剂吗? A 不需要。 5 提取的细菌基因组片段大小是多少? A 本试剂盒提取的基因组 DNA 片段大小在 20-150kb 之间。 6 提取的基因组 DNA 量很少是怎么回事? A 需要注意的问题主要有以下几点。
FAQ
1. Which kind of bacteria we can extract genomic DNA from? A We can extract genomic DNA from a majority of bacteria, including Gram-Negative Bacterial and Gram-Positive. We can break up the construct of bacteria’s cell. 2. What can we do if RS buffer solution turn to muddiness ? A Please shake up thoroughly. 3. Is RNase A necessary for the test? A Determined by test aim. It’s not necessary, if the extracted genomic DNA is used to backward test of molecular biology such as PCR, enzyme digestion and so on; It’s necessary for RNA digesting adequately, if we want to get high purity genomic DNA. 4. Is there organic solution in the extraction process? A No. 5. How long about the extracted bacteria genomic DNA fragments? A Among 20-150KB. 6. What’s the matter about the small quantity of the extracted genomic DNA? A Pay attention to the following items
通用基因组DNA提取试剂盒使用说明书

北京索莱宝科技有限公司通用基因组DNA提取试剂盒使用说明书货号:D2100规格:50T/100T保存:室温(15℃-25℃)干燥保存,复检期12个月,2℃-8℃保存时间更长。
开封后请将RNase A,蛋白酶K于-20℃保存。
试剂盒内容:D2100-50T D2100-100TRNase A1ml1ml×2蛋白酶K1ml1ml×2溶液A25ml50ml溶液B25ml50ml漂洗液15ml15ml×2洗脱液15ml30ml吸附柱50个100个收集管50个100个说明书1份1份产品简介:本试剂盒为通用型,适合于从土壤,粪便,昆虫,以及其他样本中提取基因组DNA。
对细菌,真菌,昆虫等样本都具有很好的裂解效果,最大限度的保留了生物DNA的多态性。
使用本试剂盒提取的DNA产量大、完整性好,可直接用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
操作步骤:使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1、样品的处理:1)土壤:称取0.1-0.3g(根据干湿)土壤,放入研钵中,倒入适量的液氮,立即研磨,重复3次,第1页共3页使土壤颗粒研成粉末,加500ul溶液A,振荡至彻底悬浮。
2)粪便:称取0.1-0.3g(根据干湿)粪便,加500ul溶液A,振荡至彻底悬浮。
3)昆虫:称取0.1-0.3g昆虫,倒入适量的液氮,立即研磨,重复3次,使昆虫研成粉末,加500ul 溶液A,振荡至彻底悬浮。
4)未知样品,如为细未状,可直接称取0.1-0.3g(根据干湿)加500ul溶液A,如为块状,可0.1-0.3g 用液氮研磨成粉未,再加500ul溶液A,振荡至彻底悬浮。
2、向悬浮液中加入20ul的RNase A(10mg/ml),55℃放置10min。
3、加入20ul的蛋白酶K(10mg/ml),充分混匀,55℃水浴消化,30min。
安捷伦200600 DNA提取试剂盒 使用说明书

DNA Extraction KitINSTRUCTION MANUALCatalog #200600Revision C.0For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures. 200600-12L IMITED P RODUCT W ARRANTYThis warranty limits our liability to replacement of this product. No other warranties of anykind, express or implied, including without limitation, implied warranties of merchantability orfitness for a particular purpose, are provided by Agilent. Agilent shall have no liability for anydirect, indirect, consequential, or incidental damages arising out of the use, the results of use, orthe inability to use this product.O RDERING I NFORMATION AND T ECHNICAL S ERVICESUnited States and CanadaAgilent TechnologiesStratagene Products Division11011 North Torrey Pines RoadLa Jolla, CA 92037373-6300Telephone(858)424-5444Order Toll Free (800)Technical Services(800) 894-1304Internet************************World Wide Web EuropeServices Location Telephone Fax TechnicalAustria 0800 292 499 0800 292 496 0800 292 498Belgium 00800 7000 7000 00800 7001 7001 00800 7400 74000800 15775 0800 15740 0800 15720France 00800 7000 7000 00800 7001 7001 00800 7400 74000800 919 288 0800 919 287 0800 919 289 Germany 00800 7000 7000 00800 7001 7001 00800 7400 7400********************************* Netherlands 00800 7000 7000 00800 7001 7001 00800 7400 74000800 023 0446 +31 (0)20 312 5700 0800 023 0448 Switzerland 00800 7000 7000 00800 7001 7001 00800 7400 74000800 563 080 0800 563 082 0800 563 081 United Kingdom 00800 7000 7000 00800 7001 7001 00800 7400 7400********************************* All Other CountriesPlease contact your local distributor. A complete list of distributors is available at .C ONTENTSMaterials Provided (1)Storage Conditions (1)Introduction (1)DNA Extraction Kit Specifications (1)Protocol I: Extraction from Whole Blood (2)Protocol II: Extraction from Whole Tissue (3)Protocol III: Extraction from Cultured Cells (4)References (5)Endnotes (5)MSDS Information (5)Quick-Reference Protocol (8)M ATERIALS P ROVIDEDMaterials provided a Amount Storagetemperature BuffersSolution1Solution 2Solution3c 500 ml of 3× concentrate b420 ml150 mlroom temperatureroom temperatureroom temperatureRNase 1 ml 10 mg/ml stock –20°CPronase 2 ml 225 mg/ml stock –20°Ca The DNA Extraction Kit contains enough reagents to isolate DNA from 35 blood samples (10 ml/sample), 35 tissueculture pellets (1 × 108 cells/pellet) or 30 solid tissue samples (250 mg tissue/sample).b Dilute concentrate to 1× final concentration with sterile, deionized water.c Solution 3 is a saturated solution of NaCl, and some precipitation may occur during storage. This precipitation isnormal and will not affect DNA extraction.S TORAGE C ONDITIONSEnzymes: –20°CSolutions: Room TemperatureI NTRODUCTIONThe DNA Extraction Kit provides a simple, nontoxic method for efficientlyisolating high-molecular-weight DNA from tissue, whole blood and culturedcells. Depending on the starting material, the entire extraction takes onlytwo to three hours to complete and does not require phenol or chloroform.DNA isolated with the DNA Extraction Kit is free from contaminants andmay be used directly for restriction digests, cloning, Southern blotting, PCRamplification, and other DNA analysis techniques.The DNA Extraction Kit1is a modification of a procedure based onseparating contaminating protein from DNA by salt precipitation.2 Theprocedure involves digestion of cellular proteins, subsequent removal of theproteins by “salting out” using standard sodium chloride, precipitation of theDNA with ethanol and resuspension in the buffer of choice. The number ofsamples that may be processed simultaneously using this technique islimited only by the centrifuge space available.DNA Extraction Kit SpecificationsSource QuantityYieldSize(kb)Time Whole blood 5 ml >30 μg 100–500 2hours Whole tissue 1 gm >250 μg 50–100 2 hours, 45 minutesTissue cultured cells 108 cells >600μg 50–100 2 hours, 15 minutesRevision C.0 © Agilent Technologies, Inc. 2015.P ROTOCOL I:E XTRACTION FROM W HOLE B LOODSample Volume: 5–10 ml of Whole BloodFresh blood extractions yield 30–100 μg of DNA. The yield depends on thesource and freshness of blood. Lower yields will occur with blood that hasbeen stored for a few days.1. Add 40–45 ml of 1× Solution 1 (prepared by mixing 15 ml of 3×concentrate and 30 ml of ddH2O) to the blood sample to yield a finalvolume of 50 ml.2. Incubate the sample on ice for 2 minutes.3. Spin the sample for 15 minutes at 350 × g (1500 rpm using a BeckmanJS-5.2 rotor) at 4°C. Discard the supernatant and save the pellet; whileremoving the supernatant, be careful to not discard the gelatinous-appearing pellet.4. Resuspend the pellet in 11 ml of Solution 2.5. Add pronase (0.44 μl stock/ml sample) to the suspension to yield afinal concentration of 100 μg/ml.6. Incubate with shaking at 60°C for 1 hour, or at 37°C overnight.7. Chill the tube on ice for 10 minutes.8. Add 4 ml of Solution 3 to the tube. Invert several times to mix, thenplace the sample on ice for 5 minutes.Note A precipitate may be visible in solution 3. This precipitationis normal and will not affect DNA extraction.9. Pellet the protein precipitate by spinning for 15 minutes at 2000 × g(3400 rpm using a Beckman JS-5.2 rotor) at 4°C.10. Using a large-bore pipet, carefully transfer the supernatant to a sterile50-ml conical tube.Note Avoid removing any flocculent material when transferring thesupernatant.11. Add RNase (2 μl stock/ml sample) to the supernatant to yield a finalconcentration of 20 μg/ml.12. Incubate at 37°C for 15 minutes.13. Precipitate the DNA by adding 2 volumes of 100% ethanol to thesupernatant. Gently invert until the DNA precipitates (strands of awhite, flocculent material will form).14. Remove the DNA by spooling with a sterile glass rod.15. Rinse the DNA while still on the rod with 70% ethanol. Dry thespooled DNA by briefly touching to a Kimwipe.®16. Carefully resuspend the DNA in 500 μl of 10 mM Tris, 0.1 mM EDTAbuffer, by gently inverting the tube. Do not vortex or pipet sample.Store at 4°C.17. To calculate yield and concentration of your DNA sample,1 OD260 = 50 μg/ml.Note To avoid shearing the genomic DNA, use wide-bore tipsduring manipulations.P ROTOCOL II:E XTRACTION FROM W HOLE T ISSUESample Size: ~250 mg of TissueWhole tissue extractions yield 250–1100 μg of DNA per gram of tissue.Note Tissue should be kept on dry ice before adding Solution 2.1. Add 14 ml of Solution 2 to the tissue sample.2. Homogenize the tissue with a Dounce homogenizer or with amechanical homogenizer at medium setting.3. Add pronase (0.44 μl stock/ml sample) to homogenate to yield a finalconcentration of 100 μg/ml.4. Incubate with shaking at 55°C for 2 hours or 37°C overnight.5. Chill on ice for 10 minutes.6. Add 5 ml of Solution 3. Invert several times to mix.Note A precipitate may be visible in solution 3. This precipitationis normal and will not affect DNA extraction.7. Incubate on ice for 5 minutes.8. Pellet the precipitate for 15 minutes at 2000 × g (3400 rpm with aBeckman JS-5.2 rotor) at 4°C.9. Carefully transfer the supernatant with a large-bore pipet to a sterile50-ml conical tube.Note Avoid removing any flocculent material when transferring thesupernatant.concentration of 20 μg/ml.11. Incubate at 37°C for 15 minutes.12. Proceed to steps 13–17 in Protocol I.P ROTOCOL III:E XTRACTION FROM C ULTURED C ELLSSample Size: 1 x 108 Cells per ExtractionCultured cell extractions yield 600–1000 μg DNA per 108 cells.1. Harvest the cells from the culture vessel.2. Pellet the cells at 350 × g (1500 rpm with a Beckman JS-5.2 rotor) at4°C for 15 minutes.3. Discard the supernatant and resuspend the cells in 20 ml of phosphatebuffered saline.4. Repeat steps 2 and 3.5. Discard the supernatant. Add 11 ml of Solution 2 to the cell pellet.6. Homogenize the pellet as described in Protocol II, step 2.7. Add pronase (0.44 μl stock/ml sample) to the homogenized pellet toyield a final concentration of 100 μg/ml.8. Incubate with shaking at 60°C for 1 hour or at 37°C overnight.9. Chill on ice for 10 minutes.10. Add 4 ml of Solution 3. Invert several times to mix.Note A precipitate may be visible in solution 3. This precipitationis normal and will not affect DNA extraction.11. Incubate on ice for 5 minutes.12. Pellet the precipitate for 15 minutes at 2000 × g (3400 rpm with aBeckman JS-5.2 rotor) at 4°C.13. Carefully transfer the supernatant using a large-bore pipet to a sterile50-ml conical tube.Note Avoid removing any flocculent material when transferring thesupernatant.concentration of 20 μg/ml.15. Incubate at 37°C for 15 minutes.16. Proceed to steps 13–17 in Protocol I.Note If the DNA does not visibly precipitate upon adding ethanol,place the tube at –20°C for a minimum of 2 hours, orovernight. Then pellet the DNA by spinning at 2000 ×g for20 minutes.R EFERENCES1. Grafsky, A. J., Deely, D. and Braman, J. C. (1990) Strategies 3(2):27–28.2. Miller, S. A., Dykes, D. D. and Polesky, H. F. (1988) Nucleic Acids Res 16(3):1215.E NDNOTESKimwipes® is a registered trademark of Kimberly-Clark Corporation.MSDS I NFORMATIONThe Material Safety Data Sheet (MSDS) information for Stratagene products is provided on the web at /MSDS/. Simply enter the catalog number to retrieve any associated MSDS’s in a print-ready format. MSDS documents are not included with product shipments.DNA Extraction KitQ UICK-R EFERENCE P ROTOCOLWhole BloodRequired Steps Procedure Time1–3 Wash and concentrate cells 25 minutes4–7 Lyse cells 75 minutes8–10 Isolate nucleic acids from proteins 30 minutes11–16 Purify DNA 30 minutesWhole TissueRequired Steps Procedure Time1–2 Homogenize tissue 10 minutes3–5 Lyse cells 2 hours6–9 Isolate nucleic acids from proteins 30 minutes10–12 Purify DNA 30 minutesCultured CellsRequired Steps Procedure Time1–3 Concentrate cells 30 minutes4–5 Wash cells 30 minutes6–9 Lyse cells 1.5 hours10–13 Isolate nucleic acids from proteins 30 minutes14–16 Purify DNA 30 minutes。
病毒基因组DNA RNA快速提取试剂盒II操作方法及步骤说明书

试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次(RN2201) 裂解液VLB 室温20 mlPoly Carrier -20℃200μl去蛋白液RE 室温25 ml漂洗液RW 室温10 ml第一次使用前按说明加指定量乙醇RNase-free H2O 室温10 mlRNase-free吸附柱RA和收集管室温50套室温储存12个月不影响使用效果,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍:采用特异性结合病毒DNA/RNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,病毒DNA/RNA提取试剂盒适合于从无细胞体液,包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒DNA/RNA。
该产品可以满足绝大多数的病毒RNA/DNA的同时提取要求,如病毒RNA:HCV(丙肝病毒),HIV(艾滋病毒),和HTLV(人类嗜T淋巴细胞病毒);病毒DNA:HBV(乙肝病毒)和CMV(巨细胞病毒)等等。
病毒裂解后,DNA/RNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜(特别配备了Poly Carrier可以从体系中轻松捕获微量核酸),再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的病毒DNA/RNA从硅基质膜上洗脱。
纯化后的病毒核酸无杂质和PCR抑制剂,可直接适用于PCR/RT-PCR分析。
产品特点:1.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.节省时间,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。
3.多次柱漂洗确保高纯度,提取的病毒DNA/RNA 纯度高,质量稳定可靠,可适用于各种常规操作,包括PCR/RT-PCR、酶切、测序、Southern 杂交等。
注意事项:1.所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2.开始实验前将需要的水浴先预热到特定温度备用。
3.裂解液VLB和去蛋白液RE中含有刺激性化合物,操作时戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。
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病毒基因组DNA 提取试剂盒
Virus Genomic DNA Kit
(目录号:HS0307)
产品包装
自备试剂
无水乙醇
储存条件
蛋白酶K 于-20℃,其他组分室温(15 ~ 25℃)
产品简介
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血浆、血清和无细胞体液中提取高质量的病毒DNA 。
无需使用苯酚、氯仿等有机溶剂抽提,独特的缓冲液/蛋白酶K 体系能迅速裂解病毒,使病毒蛋白与DNA 分离,在蛋白酶K 的作用下降解病毒蛋白,在高盐状态下将病毒DNA 选择性吸附于硅基质膜上,再通过快速的漂洗、离心步骤,去除蛋白等杂质,最后低盐的洗脱缓冲液将高纯度的病毒DNA 从吸附柱膜上洗脱下来。
本试剂盒操作简单、快速,所得病毒DNA 不含蛋白、核酸酶和其他杂质,可直接用于PCR 、RT-PCR 、Real-Time PCR 、印迹等分子生物学实验。
产品特点
1.简便快速,1小时内可获得高纯度的病毒基因组DNA 。
2.无需有机溶剂抽提,使用安全。
3.重复性好,产量高。
北京厚生博泰科技有限公司 Beijing Hooseen Biotech Co., Ltd.
4.所得病毒DNA纯度高,无污染物和抑制剂,方便下游应用。
注意事项
1.血清或血浆避免反复冻融,否则会使蛋白变性或产生沉淀,导致提取的DNA片段小,提取量下降。
2.如缓冲液Buffer GB、Buffer GD结晶或产生沉淀,可在56℃水浴溶解。
3.所有离心步骤均为室温下操作。
操作步骤
1. 取1.5 ml离心管(自备),加入20 ul的Proteinase K溶液。
2. 向离心管中加入200 ul血清或血浆,然后再加入200 ul Buffer GB,涡旋震荡15 sec。
(注意:1、样本体积不足200 ul可以加入0.9% NaCl(自备)补足。
2、为确保样本有效裂解,加入Buffer GB后,需将样本与Buffer GB充分混匀。
)
3.56℃孵育15 min,短暂离心,将管壁上的溶液收集到管底。
4. 加入250 ul无水乙醇,涡旋震荡15 sec,室温放置5 min,短暂离心,将管壁上的溶液收集到管底。
(注意:如果环境温度超过25℃,无水乙醇应在冰上预冷后使用。
)
5.将一个Spin Columns CG*放入Collection Tubes(2 ml)中,将上一步所得溶液转移到离心吸附柱中,10 000 rpm离心30 sec,弃收集管中的废液。
6. 向吸附柱内加入500 ul的Buffer GD,室温10 000 rpm离心30 sec,弃收集管中废液。
(注意:Buffer GD中含有乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发)
7. 向吸附柱内加入500 ul的Buffer PW,室温10 000 rpm离心30 sec,弃收集管中废液。
(注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤7一次。
Buffer PW中含有乙醇,用后及时盖紧,以防乙醇挥发)
8.向吸附柱中加入500 ul无水乙醇,10 000 rpm离心30 sec,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
9.室温12 000 rpm离心3 min,甩干残留液体。
(注意:此步不能省略,否则残留乙醇会影响质粒的后续使用)
10. 将离心吸附柱置于一个新的1.5 ml塑料离心管(自备)中,小心打开吸附柱的盖子,室温放置3 min,使吸附膜完全变干。
加入30 ~ 100 ul的洗脱液,室温放置2 ~ 5 min。
12 000 rpm
离心1 min,离心管底溶液即病毒DNA。
(注意:为增加洗脱效率,可将洗脱液在50 ~ 60℃预热。
如需使用去离子水洗脱,可用NaOH调整其pH值在7.0 ~ 8.5之间,为了增加DNA回收率,可将得到的溶液重新加入到离心管中,室温放置2 min,再次离心收集)。