总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒说明书 可见分光光度法
总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(FRAP 微板法)说明书
植物样品的吸光度值和 0.5mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则该血浆(血清)样品的总抗氧化 能力为 0.5mM/(0.5g/5ml)=0.5mmol/100g；
血浆(血清)样品的吸光度值和 0.7mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则该血浆(血清)样品的总抗 氧化能力为 0.7mM；
细胞(组织)匀浆样品的吸光度值和 0.3mM 的 Fe2+的吸光度值相同，该匀浆液蛋白浓度为 0.2mg/ml，则该细胞(组织)样品的总抗氧化能力为 0.3mM/0.2mg/ml=0.15mmol/g； 0.3mM 的抗氧化物质，其吸光度值和 0.6mM 的 Fe2+的吸光度值相同，则其相对总抗氧化能力为 0.6mM/0.3mM=2。
注意事项： 1、 实验材料应尽量新鲜，样品提取的整个过程最好在 4℃条件下进行；如取材后不能立即 检测，也可以-80℃冻存后再进行测定(应在 1 个月内测定完毕)。 2、 亚铁标准溶液如变为黄色或棕黄色应弃用。 3、 测定 593nm 如有困难，亦可在 585~605nm 范围内进行测定。 4、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
总抗氧化能力(T-AOC)检测试剂盒(FRAP 微板法)即 Total Antioxidant Capacity Assay Kit with FRAP method，简称 T-AOC Assay Kit，是一种采用铁离子还原能力(Ferric Reducing Ability of Plasma,FRAP)来测定样品抗氧化活性的方法，其原理是在酸性条件下样品中的抗 氧化物质还原 Fe3+-TPTZ 产生 Fe2+-TPTZ，呈现出明显的蓝色(紫色)，于 593nm 处有最大 的光吸收，在 Fe3+-TPTZ 过量的情况下测定蓝色物质的生成量即可获得待测样品的还原能 力即总抗氧化能力，由于反应在酸性条件下进行，可以抑制内源性的一些干扰因素，并且由 于血浆等样品中的铁离子或亚铁离子的总浓度通常低于 10μM，因此血浆等样品中的铁离 子或亚铁离子不会显著干扰 FRAP 法的检测反应，本方法可以对血浆、血清、尿液等各种体 液，细胞或组织裂解液、植物或中草药抽提液或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力进行检测。 该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)
总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)产品编号产品名称包装S0116 总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法) 100次产品简介：总抗氧化能力检测试剂盒(FRAP法)，即Total Antioxidant Capacity Assay Kit with FRAP method，简称T-AOC Assay Kit，是一种采用Ferric Reducing Ability of Plasma (FRAP)方法，可以对血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力进行检测的试剂盒。
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)主要包括羟基自由基、超氧自由基和过氧化氢。
在细胞或组织的正常生理代谢过程中会产生活性氧，同时一些环境因子例如紫外照射、γ射线照射、吸烟、环境污染等也可以诱导活性氧的产生。
活性氧产生后，可以导致细胞内脂、蛋白和DNA等的氧化损伤，诱发氧化应激(Oxidative stress)，继而导致各种肿瘤、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、糖尿病、肝损伤、以及中枢神经系统疾病等。
机体中存在多种抗氧化物，包括抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶等，可以清除体内产生的各种活性氧，以阻止活性氧诱导的氧化应激(oxidative stress)的产生。
一个体系内的各种抗氧化大分子、抗氧化小分子和酶的总的水平即体现了该体系内的总抗氧化能力。
因此测定血浆、血清、尿液、唾液等各种体液，细胞或组织等裂解液中的总抗氧化能力具有非常重要的生物学意义。
植物或中草药抽提液、或各种抗氧化物溶液的总抗氧化能力的检测可以用于检测各种溶液的抗氧化能力的强弱，可以用于筛选强抗氧化能力的药物。
FRAP法测定总抗氧化能力的原理是酸性条件下抗氧化物可以还原Ferric-tripyridyltriazine (Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ，随后在593nm测定蓝色的Fe2+-TPTZ即可获得样品中的总抗氧化能力。
食物总抗氧化能力(TAC)比色法(DPPH)定量检测试剂盒
9． 可以使用比色皿检测 10．如果样品抗氧化剂浓度过高或过低， 建议稀释或增加样品容量或浓度 11．如果测试样品很多，建议使用排枪移液 12．本公司提供系列抗氧化分析试剂产品
质量标准
1． 本产品经鉴定性能稳定 2． 本产品经鉴定检测敏感
4
2、液态食品处理 1． 移取 5 毫升待测液态食品到 15 毫升锥形离心管 2． 放进台式离心机离心 10 分钟，速度为 1500g 3． 移取上清液到新的 15 毫升锥形离心管 4． （选择步骤）可以加入适量的清理液（Reagent A） 5． （选择步骤）过滤纸过滤（如果离心处理，样品仍然不清澈） 6． 置于冰槽里备用或放进-20 冰箱里保存
二、标准液准备
1． 准备好 5 个 1.5 毫升离心管，标记为 1 至 5 号管 2． 移取 xx 微升标准液（Reagent D）到 1 号管 3． 小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）和 xx 微升标准液（Reagent D）到 2 号管，混匀 4． 小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）和 xx 微升标准液（Reagent D）到 3 号管，混匀 5． 小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）和 xx 微升标准液（Reagent D）到 4 号管，混匀 6． 小心移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）到 5 号管 7． 将 1 至 5 号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表
实验开始前，将－20 冰箱里的试剂置于室温下融化，实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂置于室温下融化， 移取 xx 毫升染色液 B（Reagent C2）到 xx 瓶染色液 A（Reagent C1）里，混匀，置于暗室里，标记为染 色工作液，避免光照。然后进行下列操作。
1． 准备 1 个 96 孔板，做好标记：空白对照孔、标准对照孔、样品孔 2． 分别移取 xx 微升缓冲液（Reagent B）到 96 孔板里的每个孔里 3． 分别加入 xx 微升染色工作液 4． 加入 xx 微升缓冲液（Reagent B）到空白对照孔 5． 加入 xx 微升上述配制的标准液（Reagent D）到相应标准对照孔里 6． 加入 20 微升裂解样品（100 微克食品总量）到样品孔里 7． 轻轻摇动 96 孔板，使其混匀 8． 室温下孵育 15 分钟 9． 即刻放进酶标仪里测读：515nm 波长 10． 分析结果：
试剂盒说明
南 京 建 成
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定试剂盒 总抗氧化能力 tT-AOC)测
(货 号 :AO15) 一 、试剂组成及配制 :
试 剂 组成
1 O 0/ 管5 0 样 1×2瓶 60Ⅲ
50管 /25样
保存条件 2~8℃ 保存 2~8℃ 保存
试剂
一
无色液体 白色 晶体
总 抗 氧 化 能 力 o.13卜
o , O I 升 血清 ) = ~ ~ 位 /毫 (单
0.Os3÷ E旦 30×
× l = 9 . 6 2 单位
O . 1
/毫 升
血 清
1茄 60ml× 瓦
试剂 二
粉剂 ×2 支
粉剂 ×1支
l充 (粉 剂较难溶解 , 如需加快溶解 , 可以在 分溶解 试剂 二应用配 制 : 每攴粉 剂加双蒸水 1 2 0 m ) 37水 ℃浴溶解
试剂 三
黄色贮备液 稀释液 无色粘稠液 体 无色透 明液体
1瓶 5ml× 1瓶 60m1×
1瓶 3ml×
咔 参考取样量 : 血ຫໍສະໝຸດ 清(血 浆)为
0,1Ⅲ 1。
2、 单位定义及计算 公式 : (浆 )使反应体系的吸光度 (OD)值 ~清 每增加 0.01 时 ,每分钟每毫升 血 ① 、定义 :在 37℃ 一 时 ,为 个总抗氧 化能力单位 。 ~计 算 公式 : ② 、 -对 反应液总量 样本测试前 照@D值 总抗氧化能力 测 定oD值 ÷ 30× o: l 样量 取 × 稀释倍数 o。 .清 升曲 位 /毫 )=~~~~ (单 3、 计算举例 : 定管 0,1m1测 总抗氧化能力 ,以双蒸水调零 ,测得对照管吸光度为 0.Os3,测 取 血.清 则计算结呆为 : 吸光度 为 0,131。
索莱宝 BC1310 总抗氧化能力（T-AOC）检测试剂盒 说明书
总抗氧化能力（T-AOC ）检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：BC1310规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体50mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体35mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体20mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体5mL×1瓶2-8℃保存标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1、提取液：使用前置于4℃冰箱或冰上预冷；2、标准品：10mg FeSO 4·7H 2O 。
临用前加入0.9mL 蒸馏水，20μL 浓硫酸，配制成40µmol/mL FeSO 4标准溶液备用；3、混合液：将试剂一、试剂二、试剂三按7:1:1的比例混合，现配现用，用多少配多少。
使用前置于37℃水浴锅或37℃恒温培养箱中预热10min 。
产品说明：测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。
在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
在酸性环境下，还原Fe 3+-三吡啶三吖嗪（Fe 3+-TPTZ）产生蓝色的Fe 2+-TPTZ 的能力反映了总抗氧化能力。
Fe 3+-Tripyridyltriazine Fe 2+-Tripyridyltriazine (593nm)技术指标：最低检出限：0.00056μmol/mL 线性范围：0.00078125-0.05μmol/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿、恒温水浴锅、低温离心机、细胞超声破碎仪、研钵/匀浆器、浓硫酸、冰和蒸馏水。
Antioxidant H +Beijing Solarbio Science &Technology Co.,LtdTel:400-968-6088Fax:************操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、血清、血浆、唾液或尿液样本血浆（制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝，不宜使用EDTA抗凝）5000r/min离心10min，取上清待测。
总抗氧化能力(T-AOC)比色法测试盒(ABTS酶催化法)
用途本试剂盒适用于检测血清（浆）、尿液、动植物组织、细胞等样本中总抗氧化能力。
检测范围及灵敏度检测范围：0.047-1.50 mmol/L灵敏度：0.047 mmol/L背景介绍机体存在两类抗氧化系统，一类是酶抗氧化系统，包括超氧化物歧化酶(SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px）；另一类是非酶抗氧化系统，包括尿酸、维生素C、维生素E、谷胱甘肽、胆红素、α-硫辛酸、类胡萝卜素[1-3]。
抗氧化能力被认为是血液和体液中所有抗氧化剂的累积效应[3]。
检测原理ABTS在适当的氧化剂作用下氧化成绿色的 ABTS●+，在抗氧化物存在时ABTS●+的产生会被抑制，在414 nm测定ABTS●+的吸光度即可测定并计算出样本中的总抗氧化能力。
Trolox是一种维生素E的类似物，具有和维生素E相近的抗氧化能力，用作其他抗氧化物总抗氧化能力的参考。
例如，Trolox的总抗氧化能力为1，相同浓度情况下，其他物质的总抗氧化能力用其抗氧化能力和Trolox相应的倍数来表示。
本试剂盒测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用BCA法（货号：E-BC-K318-M）。
提供试剂和物品注：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同批次试剂盒中的试剂不能混用。
Focus on your research Service for life science 耗材：枪头（1000 μL ，200 μL ，10 μL ）。
仪器：酶标仪（405-425 nm ）、微量移液器（1000 μL ，200 μL ，100 μL ，10 μL ）。
所需自备物品配制试剂之前，请穿戴好防护装备。
试剂盒中部分试剂含有危险性物质。
禁止食入，吸入，直接接触眼睛、皮肤和衣物。
使用完后的试剂瓶经彻底清洗后再处理。
安全提示试剂：双蒸水、生理盐水（0.9% NaCl ）、PBS （0.01 M，pH 7.4）、80%乙醇。
实验关键点ABTS工作液配制完成后，室温避光保存，在30 min内使用完毕。
总抗氧化能力(T-AOC)定量检测试剂盒
大鼠总抗氧化能力(T-AOC)定量检测试剂盒(ELISA)使用说明书【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒试剂盒名称】大鼠总抗氧化能力(T-AOC)定量检测试剂盒(ELISA)【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒试剂盒用途】定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中总抗氧化能力(T-AOC)的含量。
【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。
将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠总抗氧化能力(T-AOC)单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。
依次加入底物A、B，底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中大鼠总抗氧化能力(T-AOC)浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准品和样品的OD值，计算样本中大鼠总抗氧化能力(T-AOC)含量。
【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒试剂盒组成】备注：标准品(1号→6号)浓度依次为：1600、800、400、200、100、50 U/L.【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【大鼠总抗氧化能力(T-AOC)Elisa试剂盒操作步骤】1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。
2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍)；空白对照孔不加。
4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。
细胞总抗氧化能力(TAC)荧光法(ORAC)定量检测试剂盒
细胞总抗氧化能力（TAC）荧光法（ORAC）定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途细胞总抗氧化能力（TAC）荧光法（ORAC）定量检测试剂是一种旨在通过使用荧光素探针，受到有机氮自由基AAPH的破坏，但在抗氧化剂的存在下，得到抑制，由此通过荧光分光光度仪，观察其峰值下降程度的变化，来定量检测对应于标准水溶性生育酚Trolox的总抗氧化能力，即消除自由基等值浓度的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
适用于适用于各种新鲜细胞样品总抗氧化能力检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定。
技术背景超氧自由基阴离子（superoxide radical；O2-）、过氧化氢（hydrogen peroxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxyl radical；OH-）、过氧化基（peroxyl radical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxyl radical）、氮氧基（nitric Oxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitrite anion；ONOO-）次氯酸（hypochlorous acid；HOCl）、半醌自由基（semiquinone radical）、单线态氧气（singlet oxygen）等细胞内活性氧族（Reactive Oxygen Species；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡，甚而导致诸如冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。
在生物系统内，通过抗氧化酶例如超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶等，大分子，例如白蛋白、铜蓝蛋白（ceruloplasmin；CER）、铁蛋白（ferritin）和抗氧化因子，例如生育醇、类胡萝卜素、抗坏血酸、还原性谷胱甘肽和尿酸胆红素（bilirubin）等，产生抗氧化能力，即捕获自由基的能力，达到消除或降低ROS的损害。
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总抗氧化能力（T-AOC）检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC1310
规格：50T/48S
产品内容:
提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存，使用前预冷。
试剂一：液体35mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂三：液体5mL×1瓶，4℃避光保存。
标准品：粉剂×1支，10mgFeSO
4·7H
2
O，4℃保存。
临用前加入1.75ml蒸馏水，滴加1滴浓硫酸，制
备20µmol/mL FeSO
4
标准溶液。
混合液(现配现用)：将试剂一、试剂二、试剂三按7:1:1的比例混合，使用前预温至37℃。
产品说明：
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。
在生物学、医学和药学研究中常常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。
在酸性环境下，还原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ的能力反映了总抗氧化能力。
自备实验用品：
可见分光光度计、恒温水浴锅、低温离心机、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
操作步骤：
一、样品的制备：
(1)血清、血浆、唾液或尿液样品
血浆（制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝，不宜使用EDTA抗凝）5000r/min离心10min，取上清待测。
血清、唾液或尿液样品直接用于测定，也可以-80℃冻存（不宜超过30d）后再测定。
(2)细胞或组织样品
收集约100-200万个细胞或者约0.1g组织，加入1.0mL预冷的提取液，匀浆或超声以充分破碎细胞并释放其中的抗氧化物，4℃、10000r/min离心5分钟，取上清待测。
需测定蛋白浓度。
二测定步骤
1、标准曲线绘制：
标准溶液稀释至0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、0.003125、0.00156将20μmol/mL FeSO
4
μmol/mL，分别取500μL标准溶液（蒸馏水作空白）加入500μL试剂二，充分混匀，反应10min，双蒸水，计算ΔA=A标准-A空白，此时Fe2+终浓度为0.1、0.05、0.025、0.0125、0.00625、
调零，1cm光径，测定A
593
0.003125、0.00156、0.00078μmol/mL。
2、分光光度计预热30min以上，调节波长至593nm，蒸馏水调零。
3、操作表
空白管测定管
混合液（μL）900μL900μL
样品（μL）30μL
双蒸水（μL）120μL90μL
，计算△Aˊ=A测定-A空白管。
充分混匀，反应10min，双蒸水调零，1cm光径，测定A
593
（注：空白管只需测定一次）
三、总抗氧化能力计算
1、标准曲线绘制
以Fe2+终浓度为横坐标，以△A为纵坐标绘制标准曲线，得到线性回归方程y=kx+b，将△Aˊ带入方程求得x(μmol/mL）。
2、计算公式：
单位定义：样品的抗氧化能力以达到同样吸光度变化值（△A）所需的标准液离子浓度表示。
(1)按蛋白浓度计算
总抗氧化能力（U/mg prot）=x×V反总÷（V样×Cpr）=34×x÷Cpr
(2)按样品质量计算
总抗氧化能力（U/g鲜重）=x×V反总÷（V样÷V样总×W）=34×x÷W
(3)按细胞数量计算
总抗氧化能力（U/104cell）=x×V反总÷（V样÷V样总×细胞数量）=34×x÷细胞数量
（4）按液体体积计算
总抗氧化能力（U/mL）=x×V反总÷V样=34×x
V样总：加入提取液体积，1mL；V反总：反应总体积，1.02mL；
V样：反应中样品体积，0.03mL；W：样品质量，g；
Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；细胞数量：以104为单位，万个。
注意事项：
1.试剂二对人体有刺激性，请采取适当的防护措施。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴乳胶手套操作。
2.尽量避免使用在酸性条件下呈蓝色或接近蓝色的样本，否则对本试剂盒的检测结果产生干扰。
3.样品中不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢剂和DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的还原剂。
4.如果样品测定出来的吸光值在标准曲线范围以外，需把样品适当稀释或浓缩后再进行测定。
5.试剂盒2-8℃保存。