生物制药综合性实验实验报告
生物制药毕业综合实训报告
一、实训背景与目的随着生物技术的飞速发展，生物制药行业在我国得到了广泛的关注和发展。
为了提升毕业生的实践能力和就业竞争力，我校生物制药专业特开展了毕业综合实训。
本次实训旨在通过实际操作，使学生对生物制药的基本原理、工艺流程和实验技能有更深入的了解，培养学生的创新思维和团队协作精神。
二、实训内容与过程1. 实训内容本次实训主要包括以下几个方面：（1）生物制药基本原理：学习生物制药的基本概念、发展历程、应用领域等。
（2）生物制药工艺流程：了解生物制药的生产工艺、质量控制、设备操作等。
（3）实验技能培训：掌握生物制药实验的基本操作，如细胞培养、发酵、提取、纯化等。
（4）团队协作与沟通：通过分组合作完成实验项目，提高团队协作能力和沟通能力。
2. 实训过程（1）前期准备：实训开始前，学生需完成实训计划、实训报告等准备工作。
（2）理论培训：邀请生物制药行业专家进行理论授课，使学生掌握生物制药的基本知识和技能。
（3）实验操作：在实验室进行生物制药实验，包括细胞培养、发酵、提取、纯化等。
（4）项目实施：分组合作完成实验项目，如生物药物的开发、生产等。
（5）成果展示：各小组进行实验成果展示，分享实验经验，互相学习。
三、实训成果与收获1. 实训成果通过本次实训，学生取得了以下成果：（1）掌握了生物制药的基本原理、工艺流程和实验技能。
（2）提高了团队协作能力和沟通能力。
（3）培养了创新思维和解决问题的能力。
（4）完成了实验项目，积累了实践经验。
2. 实训收获（1）提高了自身综合素质，为就业打下坚实基础。
（2）了解了生物制药行业的发展趋势，明确了职业规划。
（3）结识了志同道合的朋友，拓展了人际关系。
（4）学会了如何将理论知识应用于实践，提高了动手能力。
四、实训总结与反思1. 总结本次生物制药毕业综合实训取得了圆满成功，达到了预期目标。
通过实训，学生不仅掌握了生物制药的基本知识和技能，还提高了综合素质，为今后的学习和工作打下了坚实基础。
制药工程生物实验报告
实验名称：重组人干扰素α2b的表达与纯化实验日期：2023年4月10日实验目的：1. 掌握重组蛋白的表达方法。
2. 学习重组蛋白的纯化技术。
3. 了解生物工程在制药领域的应用。
实验原理：重组人干扰素α2b（rhIFNα2b）是一种具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用的生物活性蛋白。
本实验采用原核表达系统，将rhIFNα2b基因构建到表达载体中，转化大肠杆菌，通过诱导表达、离心分离、离子交换层析和凝胶过滤层析等方法，实现对rhIFNα2b的纯化。
实验材料：1. 基因组DNA2. 质粒载体3. 大肠杆菌DH5α4. 重组表达载体5. IPTG（异丙基-β-D-硫代半乳糖苷）6. 诱导剂（如甘油、葡萄糖等）7. 离心机8. 层析柱9. 超纯水10. 透析袋11. 紫外分光光度计12. 纯化试剂盒实验步骤：1. 基因克隆：将rhIFNα2b基因从基因组DNA中扩增，连接到质粒载体上，转化大肠杆菌DH5α，筛选阳性克隆。
2. 表达载体构建：将阳性克隆的质粒提取，进行PCR鉴定，确认目的基因的正确插入。
3. 重组表达菌株的诱导表达：将重组表达载体转化大肠杆菌BL21（DE3），挑选阳性克隆，在含有IPTG的培养基中诱导表达。
4. 离心分离：收集诱导表达后的菌体，离心分离菌体和上清液。
5. 粗蛋白提取：将上清液用硫酸铵进行盐析，收集沉淀，复溶于超纯水中。
6. 离子交换层析：将粗蛋白溶液上样至离子交换层析柱，用不同浓度的NaCl溶液进行梯度洗脱，收集目标蛋白峰。
7. 凝胶过滤层析：将离子交换层析后的蛋白溶液上样至凝胶过滤层析柱，收集目标蛋白峰。
8. 蛋白纯度鉴定：利用SDS-PAGE电泳、紫外分光光度计等方法鉴定蛋白纯度。
实验结果：1. 成功构建了rhIFNα2b基因的原核表达载体，转化大肠杆菌BL21（DE3）后，诱导表达得到目标蛋白。
2. 通过离子交换层析和凝胶过滤层析，成功纯化了rhIFNα2b蛋白，纯度达到95%以上。
生物制药的实习报告
实习报告一、实习背景与目的随着生物技术的飞速发展，生物制药作为一个新兴行业，在我国得到了广泛的关注和快速的发展。
作为一名生物制药专业的学生，为了更好地将理论知识与实践相结合，提高自己的实际操作能力和综合素质，我利用暑假期间，前往某生物制药公司进行了为期一个月的实习。
二、实习时间与地点实习时间：2021年7月1日至2021年7月31日实习地点：某生物制药公司研发部三、实习单位与指导老师实习单位：某生物制药公司指导老师：张博士四、实习内容在实习期间，我主要参与了以下几个方面的内容：1. 文献查阅：通过查阅相关文献，了解生物制药领域的最新研究动态和发展趋势，为后续实验提供理论支持。
2. 实验操作：在指导下，参与实验室的日常实验操作，包括细胞培养、酶联免疫吸附实验（ELISA）、聚合酶链式反应（PCR）等，熟悉各种实验仪器的使用方法和操作技巧。
3. 数据分析：对实验数据进行整理和分析，运用统计学方法对实验结果进行验证，确保实验数据的准确性。
4. 团队协作：与实验室的其他成员共同完成实验项目，提高团队协作能力和沟通技巧。
五、实习总结与体会1. 实习使我深刻认识到理论知识与实践操作的重要性。
在实习过程中，我将所学的生物制药知识运用到实际操作中，不仅提高了自己的实践能力，也对理论知识有了更深刻的理解。
2. 实习让我体验到了生物制药行业的魅力。
通过参与实验，我见证了生物制药技术在疾病诊断、治疗和预防等方面的重要作用，对未来的职业发展充满信心。
3. 实习过程中的团队协作，使我更加懂得如何与人沟通、协作。
这对于我今后在职场中的人际交往和团队协作具有重要意义。
4. 实习使我认识到自身的不足，激发了我继续学习的动力。
在实践中，我发现自己在专业知识和技能方面还有很多不足，需要继续努力提高。
六、致谢感谢某生物制药公司为我提供这次宝贵的实习机会，让我在实践中学习和成长。
同时，感谢实习期间张博士的悉心指导，使我受益匪浅。
在今后的工作中，我将继续努力，为生物制药行业的发展贡献自己的力量。
生物制药专业实训报告
一、实训背景随着我国生物制药行业的快速发展，生物制药专业人才需求日益增长。
为了提高学生的实践能力和专业技能，我校生物制药专业组织了一次为期两周的实训活动。
本次实训旨在让学生深入了解生物制药行业现状，掌握生物制药生产过程中的关键技术，为将来从事生物制药相关工作打下坚实基础。
二、实训内容1. 实训单位介绍本次实训我们选择了我国一家知名生物制药企业——XX生物制药有限公司。
该公司成立于2005年，主要从事生物制品的研发、生产和销售，拥有完善的生产线和先进的技术设备。
2. 实训项目（1）参观生产车间在实训期间，我们参观了XX生物制药有限公司的生产车间，了解了生产流程、设备运行情况以及生产环境。
通过实地观察，我们对生物制药生产过程有了直观的认识。
（2）学习生物制药关键技术在实训过程中，我们学习了生物制药关键技术，包括细胞培养、发酵工程、生物分离纯化、生物制品检测等。
通过实际操作，我们掌握了相关技术的基本原理和操作方法。
（3）微生物实验室实训在微生物实验室，我们学习了微生物的分离、纯化、鉴定和培养技术。
通过实验，我们了解了微生物在生物制药中的应用，以及如何进行微生物质量控制。
（4）药品生产过程模拟为了让学生更加深入地了解药品生产过程，我们进行了药品生产过程模拟实训。
通过模拟实际生产过程，我们掌握了生产过程中的关键环节和注意事项。
三、实训收获1. 提高了实践能力通过本次实训，我们掌握了生物制药生产过程中的关键技术，提高了自己的实践能力。
在实际操作中，我们学会了如何运用所学知识解决实际问题。
2. 拓宽了知识面在实训过程中，我们接触到了许多生物制药领域的最新技术和发展动态，拓宽了知识面。
3. 增强了团队协作能力在实训过程中，我们与同学们共同完成各项任务，培养了团队协作精神。
4. 增进了对生物制药行业的了解通过参观企业、学习关键技术，我们对生物制药行业有了更深入的了解，为将来从事相关工作打下了基础。
四、实训总结本次生物制药专业实训活动取得了圆满成功。
生物制药实习报告（优秀范文五篇）
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第一篇：药厂实习报告一、药业企业概况；始建于20XX年，通化药业股份有限公司前身系通化白山制药八厂，厂区座落在风景秀丽、群山环抱的长白山脚下―省通化县黎明工业园区。
公司占地面积5万平方米，建筑面积2万平方米拥有中药前处理提取、片剂、胶囊剂、颗粒剂等等四条生产线和设施齐全、仪器先进的质量检验中心。
其中专业技术人员128人，公司现有员工560人。
具有中级以上各类专业技术职称人员占职工总数比例30%药业现已成为集科研、开发、生产、销售于一体的现代化制药企业。
相关领域深入研究、专业创新、专业服务经营理念：集中所有资源。
二、实习任务然后被调换到化验室，刚刚开始是生产车间。
主要学习如何鉴别药品，检验药品的合格与否，以及微生物限度检查。
三、实习内容1.制备硅胶板。
将一份固定相和三份水在研钵中研磨混匀，倒入涂布器上，玻璃板上平稳的移动涂布器进行涂布，晒干，105%活化30分钟，备用。
2.使用崩解仪测定药品的崩解时限。
电子天平等。
3.测定药品的干燥失重称取药品1克。
置于称量瓶中，105摄氏度干燥至恒重，减失的重量不得超过10%.4.微生物限度检察1）对所有器具进行消毒。
将吸管，平皿用牛皮纸包好，165摄氏度，高温灭菌4小时，取出，备用。
2）制备供试样ph7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液。
取磷酸氢二钾，磷酸氢二钠，氯化钠，蛋白胨，液体样需90毫升固体样需100毫升。
培养基，营养琼脂培养基，虎红琼脂培养基，每个平皿约放入15毫升。
当配置完成后，将其放入灭菌器中，进行灭菌，121摄氏度，15分钟。
放入冰箱中，冷冻保存。
3）做实验之前。
应用苏尔消毒液对操作台进行消毒，通风，紫外灭菌用洗手液洗手后，将所需物品通过传递窗放进菌检室，进行实验，操作时要穿洁净服，戴口罩及手套，每个样品至少制备两个平皿以上。
生物制药实习报告范文2篇
生物制药实习报告范文生物制药实习报告范文精选2篇（一）标题：生物制药实习报告一、实习单位概况我所在的实习单位是一家生物制药公司，专注于研发和生产生物药品。
公司位于市中心的高科技园区，占地面积约5000平方米，拥有现代化的研发实验室、生产车间和质量检验中心。
二、实习目的和任务我参加这次实习的主要目的是了解生物制药行业的运作方式，熟悉生物药品的生产流程，并运用所学知识进行实践操作。
在实习期间，我承担了以下任务：1. 参与药品生产过程中的核心环节，如菌种培养、发酵、纯化等；2. 负责执行质量控制测试，确保药品符合规定的质量标准；3. 参与研发项目的实验设计和数据分析，为新药的开发做出贡献；4. 学习并掌握生物制药相关的实验技术和设备操作。
三、实习经历和收获在实习期间，我主要参与了一项新药研发项目的实验工作。
通过在实验室中进行菌种培养、发酵和纯化等环节，我逐渐熟悉了生物制药的生产流程，并了解了每个环节的重要性和操作技巧。
同时，我也学习了许多生物制药的相关知识，如药品的工艺流程、质量控制标准、生物反应器的操作原理等。
通过与实验室的研发人员和技术人员的交流，我不仅加深了对知识的理解，还掌握了一些实用的实验技术和数据分析方法。
通过实习，我还意识到了生物制药行业的挑战和机遇。
生物制药技术的不断发展，为新药的研发和生产提供了更多的可能性，但也带来了更高的要求和风险。
在未来的工作中，我将更加注重实践能力和创新思维的培养，努力为生物制药行业的发展做出贡献。
四、实习总结和建议通过这次实习，我收获了许多宝贵的经验和知识，对生物制药行业有了更深入的了解。
同时，我也发现了自己在实践能力、团队合作和创新思维方面的不足之处，需要进一步提升。
针对这些问题，我提出以下建议：1. 加强实践能力的培养：通过更多的实验操作和项目参与，提高自己的实践能力和解决问题的能力。
2. 多参与团队合作：在实习期间，我发现团队合作对于解决问题和推动项目的进展非常重要。
生物制药实习报告
生物制药实习报告实习目的本次实习的目的是让我们了解和掌握基本的生物制药生产方法，学习实验操作技能以及正确使用相关仪器设备的方法和注意事项。
实习内容1. 培养微生物我们首先需要培养出我们需要的微生物。
首先，要准备好培养基，选用适合微生物生长的基质，并给予适宜的温度和气氛。
我与同组同学负责培养大肠杆菌。
我们首先按照配方将培养基制作好后，使用无菌技术将培养基装到培养皿中。
目的是避免细菌的污染。
接下来，我们将微生物接种到培养皿里，并将培养皿置于恒温培养箱内，控制温度和气氛使其生长。
2. 粗提材料制备粗提材料制备是整个生物制药生产过程中至关重要的一步。
我们需要通过对微生物的培养，并进行后续处理得到目标生物分子的混合液体，即粗提材料。
我的小组负责大肠杆菌的培养和粗提材料的制备。
在得到足够量的菌体后，我们使用离心机将培养液离心。
通过离心的方式使菌体集中在一起。
接下来，我们将离心分离出的细菌在蠕动的匀浆器内不断打破，使细胞内部的目标分子释放出来。
这样处理后，我们得到了粗提材料。
3. 粗提材料的纯化为了得到高纯度的目标分子，我们需要对粗提材料进行纯化。
纯化的原理是根据生物分子的特性，分离出我们需要的目标物。
我们的组负责的是进一步的纯化。
我们使用了层析技术，将粗提材料加入到指定的层析柱中，并通过电泳等手段，使其物质在层析柱中发生分离。
最后，我们得到了较高纯度的目标生物分子。
4. 生物药物制剂的研究生物药物制剂的研究是针对我们得到的高纯度的目标分子进行的。
我们要对目标分子进行进一步的研究，以制定出合适的剂量和制剂方式。
我的组负责的是研究大肠杆菌所产生的胰岛素类生物药物制剂。
我们的主要任务是根据制剂要求，设计出不同的制剂，并进行对比实验，确定制剂方式和适宜的剂量。
实习体会在这次实习中，我学习了生物制药生产的基本流程和技巧，了解了生物药物制剂的研究过程。
同时，我也深刻体会到，生物制药的生产过程需要高度的精细和耐心，并且需要更高的无菌实验技能，更严格的信息管理技巧，每一个环节都需要严格、细致的操作和态度。
生物制药综合性实验实验报告
广东药学院基因工程（跨课程）综合性实验论文姓名班级学号指导教师广东药学院生命科学与生物制药学院生物制药研究所目录摘要 (2)前言 (3)一、材料与方法 (3)1.1 材料 (3)1.1.1 重组蛋白质药物单元的实验材料 (3)1.1.2重组DNA药物单元的实验材料 (3)1.2 方法 (4)1.2.1 重组蛋白质药物单元 (4)1.2.1.1 工程菌构建（已由老师完成） (4)1.2.1.2 工程菌表达筛选 (6)1.2.1.3 制备IL-18工程菌甘油种 (8)1.2.1.4 GST工程菌生长曲线分析 (8)1.2.1.5 GST工程菌表达影响因素试验 (8)1.2.1.6 表达进程分析 (9)1.2.1.7 凝胶扫描分析 (9)1.2.1.8 发酵工艺（观摩） (9)1.2.2 重组DNA药物单元 (9)1.2.2.1 质粒TCRVα12.2-Vβ7.1-EYFP的大规模制备 (9)1.2.2.2 TCR质粒-脂质体复合物制备与分析 (10)1.2.2.3 TCR体外转染活性检测 (11)1.2.2.4 TCR转染体内试验 (12)二、结果与讨论 (12)2.1 重组蛋白质单元结果与讨论 (12)2.1.1 IL-18工程菌表达筛选SDS-PAGE (12)2.1.2 GST工程菌生长曲线分析 (14)2.1.3表达影响因素试验 (15)2.1.4 表达进程试验 (16)2.2 重组DNA药物单元结果与讨论 (18)2.2.1质粒阴离子交换层析纯化 (18)2.2.2 质粒柱层析样品琼脂糖电泳分析 (19)2.2.3 质粒-脂质体复合物制备 (20)2.2.4 TCR转染基因表达荧光检测 (20)2.2.5 TCR体外转染活性检测 (21)2.2.6 TCR转染体内试验 (23)三、小结 (25)致谢 (25)摘要：本综合性实验分为“重组蛋白质类药物”和“重组DNA类药物”二个单元。
重组蛋白质药物以hIL-18的大肠杆菌表达系统为例，全面介绍工程菌构建、表达筛选、甘油种制备、生长与表达分析、发酵工艺单元操作和表达产物分离纯化等基因工程药物研发与生产实践中最常用的技术与工艺过程。
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广东药学院基因工程（跨课程）综合性实验论文姓名班级学号指导教师广东药学院生命科学与生物制药学院生物制药研究所目录摘要 (2)前言 (3)一、材料与方法 (3)1.1 材料 (3)1.1.1 重组蛋白质药物单元的实验材料 (3)1.1.2重组DNA药物单元的实验材料 (3)1.2 方法 (4)1.2.1 重组蛋白质药物单元 (4)1.2.1.1 工程菌构建（已由老师完成） (4)1.2.1.2 工程菌表达筛选 (6)1.2.1.3 制备IL-18工程菌甘油种 (8)1.2.1.4 GST工程菌生长曲线分析 (8)1.2.1.5 GST工程菌表达影响因素试验 (8)1.2.1.6 表达进程分析 (9)1.2.1.7 凝胶扫描分析 (9)1.2.1.8 发酵工艺（观摩） (9)1.2.2 重组DNA药物单元 (9)1.2.2.1 质粒TCRVα12.2-Vβ7.1-EYFP的大规模制备 (9)1.2.2.2 TCR质粒-脂质体复合物制备与分析 (10)1.2.2.3 TCR体外转染活性检测 (11)1.2.2.4 TCR转染体内试验 (12)二、结果与讨论 (12)2.1 重组蛋白质单元结果与讨论 (12)2.1.1 IL-18工程菌表达筛选SDS-PAGE (12)2.1.2 GST工程菌生长曲线分析 (14)2.1.3表达影响因素试验 (15)2.1.4 表达进程试验 (16)2.2 重组DNA药物单元结果与讨论 (18)2.2.1质粒阴离子交换层析纯化 (18)2.2.2 质粒柱层析样品琼脂糖电泳分析 (19)2.2.3 质粒-脂质体复合物制备 (20)2.2.4 TCR转染基因表达荧光检测 (20)2.2.5 TCR体外转染活性检测 (21)2.2.6 TCR转染体内试验 (23)三、小结 (25)致谢 (25)摘要：本综合性实验分为“重组蛋白质类药物”和“重组DNA类药物”二个单元。
重组蛋白质药物以hIL-18的大肠杆菌表达系统为例，全面介绍工程菌构建、表达筛选、甘油种制备、生长与表达分析、发酵工艺单元操作和表达产物分离纯化等基因工程药物研发与生产实践中最常用的技术与工艺过程。
“重组DNA药物”单元以质粒TCRVα12.2-Vβ7.1-EYFP为例，介绍质粒DNA大规模制备、阳离子脂质体与质粒DNA复合物制备、T细胞体外转染、转染T细胞目的基因表达和体外活性检测、体内给药试验等。
关键词重组蛋白药物; hIL-18 ; 重组DNA药物 ; 阳离子脂质体与质粒DNA复合物Abtract：The comprehensive experiments are divided into two units ,which is " Recombinant Protein Drugs" and "Recombinant DNA Drugs". The unit ,Recombinant protein drugs ,takes example for hIL-18 in E. coli expression system.It comprehensively introducted the most usual technology and process of R & D and production practice of the genetic engineering drugs , such as the construction of engineering bacteria, expression screening, glycerol kind of preparation, growth and Expression Analysis, fermentation process unit operation and the purification of expression product.The unit of "Recombinant DNA drug" taked plasmid TCRVα12.2-Vβ7.1-EYFP as example.It introducted the large-scale preparation of plasmid DNA, Preparation of cationic liposomes- plasmid DNA complex, in vitro Transfection of T cells, expression and in vitro activity assaying of the target gene of transfected T cells and undertaking the test in vivo.Key words Recombinant Protein drugs ; hIL-18 ; Recombinant DNA drugs ; cationic liposomes-plasmid DNA complex前言生命科学与生物技术的最主要任务之一是利用其理论与技术研究成果为人类的健康服务，生物技术制药则是其最主要的应用领域，且在重大传染性疾病、恶性肿瘤及其它疑难杂症防治方面具有巨大的潜力。
药品的研究开发是一项庞大的系统工程，实验室研究发现的任何候选药物要开发成新药都需要经过生产工艺和质量控制研究、有效性评价和安全性评价等过程。
需要特别指出的是，生产工艺和质量控制研究的内容和任务还会始终贯穿于产品投产上市的过程中，相应的技术手段也是作为企业生产或质量控制人员必备的技能。
因此，作为生命科学与生物制药学院的本科生，了解生物技术药物研究、开发和生产的过程、掌握与生产工艺和质量控制研究密切相关的技术手段是非常必要的。
以蛋白质为基础的基因工程药物和基因工程抗体是当今最主要的生物技术药物形式，以DNA为基础的基因治疗制剂和DNA疫苗是未来生物制药的主要发展方向之一。
一、材料与方法1.1 材料1.1.1 重组蛋白质药物单元的实验材料1.1.1.1 仪器超净工作台、移液枪（量程：10—100，0—1000）、灭菌枪头、标记笔、无菌牙签、带塞试管、恒温摇床、恒温培养箱、带塞三角瓶（500mL）、EP管(1.5mL)、可见分光光度计、电泳仪、垂直电泳装置、水浴锅、离心机、台式高速离心机、培养皿、冰箱（-20℃，-80℃，4℃）、烧杯、凝胶成像系统1.1.1.2 试剂氨苄青霉素、LB培养基、pBV220—hIL-18转化平板、GST工程菌平板、2×上样缓冲液、10×电泳缓冲液、10%APS、30%胶母液、10%SDS、TEMED、分离胶缓冲液（pH8.8）、浓缩胶缓冲液（pH6.8）、考马斯亮蓝染色液、脱色液、10%甘油、去离子水、IPTG1.1.2重组DNA药物单元的实验材料1.1.2.1 仪器高速冷冻离心机、台式高速离心机、离心机、离心杯、离心管、水浴锅、4℃冰箱、超净工作台、移液枪、灭菌枪头、500mL 三角瓶、常压层析系统、烧杯、水平电泳装置、电泳仪、紫外检测仪、凝胶成像系统、紫外分光光度计、1.5mLEP 管、恒温培养箱、灭菌玻璃滴管、12孔培养板、细胞计数板、电子显微镜、培养瓶、荧光显微镜、一次性1mL 注射器、冰盒1.1.2.2 试剂STE 、碱裂解溶液Ⅰ（（高压灭菌）：50mmol/L 葡萄糖、 25mmol/L Tris －Cl （pH8.0））、碱裂解溶液Ⅱ（0.2M NaOH 、 1％（m/V ）SDS （高压灭菌））、碱裂解溶液Ⅲ（5 mol/L 乙酸钾、冰乙酸、H 2O ）、异丙醇、70%乙醇、TE 、0.02MNaCl 的TE 溶液、0.3M NaCl的TE 溶液、1.0M NaCl 的TE 溶液、0.5M NaOH 、RNA 酶、双蒸水、生理盐水、1.0MnaCl 、20%乙醇、琼脂糖、TAE 、EB 、电泳缓冲液、Marker 、Buffer 、质粒TCRV α12.2-V β7.1-EYFP 、脂质体、肿瘤细胞BEL-7402、胰酶、完全培养基、4%苯酚溶液、1640培养基、胎牛血清、IL-2、双抗（青霉素、链霉素）1.2 方法1.2.1 重组蛋白质药物单元1.2.1.1 工程菌构建（已由老师完成）（1）pBV220-hIL-18表达载体和工程菌构建在本综合性实验中目的基因的表达载体为pBV220，该载体的物理图谱见图1。
该载体有一个氨苄青霉素抗性基因，在多克隆位点的上游为λ噬菌体的P L 和P R 启动子，P L 和P R 启动子受λ噬菌体CI 基因的负调控。
CI 阻遏蛋白是温度敏感蛋白，在28-37℃培养时，CI 产生抑制作用，在温度升至42℃时，CI 被破坏，这样就解除了对启动子的封闭，使P L 和P R 启动子开始下游基因转录。
目的基因为hIL-18的编码序列（cDNA ），采用RT-PCR 技术从外周血细胞中获得。
首先据Genebank 报道序列设计引物，并在引物的5’端引入EcoR I 位点和启始密码子ATG ，在3’端引入Hind Ⅲ位点。
IL-18基因的RT-PCR 扩增产物经EcoR I 和Hind Ⅲ双酶切插入表达载体pBV220的相同位点即得hIL-18的表达载体pBV220-hIL-18。
构建的表达载体pBV220-hIL-18按常规方法转化大肠杆菌DH5α株后即得“重组hIL-18”的工程菌。
图 1 pBV220物理图谱（2）pGEX-GST表达载体和工程菌构建pGEX-GST为商品化融合表达载体，主要用于外源基因的可溶性融合表达。
GST （谷胱甘肽转移酶）为大肠杆菌宿主细胞的天然高效、可溶性表达的蛋白。
以其作为融合表达“标签”有二点优势：a) GST可以促进二硫键的形成，使目的基因融合表达产物能正确折叠，因而常以可溶的表达产物存在；b)GST属于大肠杆菌高效表达的天然产物，其mRNA的5‘端具有最适的结构，有利于融合基因mRNA的翻译，因此可大大提高融合基因表达水平。
在pGEX-GST中，GST处于复合启动子Tac的控制之下，因此可采用IPTG诱导。
其载体如图2所示，图中所示载体中还有一个特殊设计，即GST与目的蛋白的融合位点位PreScission蛋白酶识别位点，融合蛋白可在4℃下进行酶切反应，可避免其它蛋白酶类37℃那样的高温条件对目的产物的破坏。
本综合实验中采取的是无外源基因的载体，即只表达GST，主要用于给同学们展示与pVB220-hIL-18不同的另一种启动子和表达诱导方式（PL/PR vs Tac；温控vs IPTG诱导），并便于“表达进程分析”。