生物工程工艺综合性实验报告
生物工程专业实习报告五篇

生物工程专业实习报告生物工程专业实习报告五篇在现在社会,越来越多的事务都会使用到报告,我们在写报告的时候要避免篇幅过长。
那么,报告到底怎么写才合适呢?以下是小编为大家整理的生物工程专业实习报告5篇,希望能够帮助到大家。
生物工程专业实习报告篇1实习目的:通过本次实习,开阔视野,增长见识,扩宽我的知识面。
了解本专业相关方面的知识,通过实习,启发我积极向上,努力学习。
同时接触与认识社会,积累人生阅历。
实习收获与体会实习就这样过去了,总有点意犹未尽的感觉,这样的机会要多几次该多好呢,我真是这样想的。
现在来总结我此次实习的收获和体会:我们首日乘搭公司员工车来到了中山火炬开发区的咀香圆食品有限公司,在我们学校的小董师兄热情的带领下,我们来到了会议室等待公司领导的工作安排。
开始是梁主任亲切既严肃地跟我们介绍了公司的规矩跟消防意识,包括了方方面面,让我领悟到领导层对企业管理的重视能让一个企业更规范化生产,是一个企业蒸蒸日上的前提。
之后还有刁主任对咀香圆的精彩介绍,让我们知道咀香圆杏仁饼起始于清光绪二十九年,萧家为帮补家计,19xx年,开始了作坊式生产;1935年,咀香园杏仁饼获美国檀香山国际食品博览会“金鸡奖”;后来,该企业历经改制,如今的咀香园健康食品(中山)有限公司继续生产咀香园杏仁饼,产品畅销全国各地及海外市场;XX年,“咀香园”被商务部授予“中华老字号”称号。
咀香圆是一家充满历史色彩的饼类生产公司,当中肯定有不少的不愉快的经历,终究还是熬过来了,证明了咀香圆是一家有实力,深受群众欢迎的公司,让我在之后的实习过程中想了解到更多的这家公司的企业文化,今后对我肯动有很大的帮助。
最后经过分组,我被分到了质量控制中心去完成我实习的工作,这让我兴奋不已,想更快的到工作岗位上。
下午跟我的boss胡志高同志见面了,由于时间关系,首日的工作没有正式开始,我了解了一下这几天的工作内容后,就开始阅读相关的资料,有月饼包装标签内容整理汇总、计量技术规范、食品和化妆品包装计量检验规则和限制商品过度包装要求。
生物工程专业生物实验实习报告

生物工程专业生物实验实习报告一、引言生物实验实习是生物工程专业学生进行理论与实践相结合的重要环节。
本次实习报告旨在总结和分析我在生物实验实习中的经验和收获。
二、实验名称及目的实验名称:基因克隆与表达实验目的:通过基因克隆与表达实验,掌握生物工程中常用的技术和方法,提高实验操作技巧,理论知识与实践相结合。
三、实验步骤1. DNA提取首先,从细菌培养物中提取目标基因的DNA。
通过细菌培养、细胞破碎和DNA纯化等步骤,获取高质量的DNA样本。
2. PCR扩增将目标基因的DNA片段,利用聚合酶链式反应(PCR)进行扩增。
通过设置合适的温度和时间参数,实现目标基因片段的扩增,为后续的基因克隆打下基础。
3. 氯化钠筛选将PCR产物与载体进行连接,并利用氯化钠筛选的方法,筛选出含有目标基因的阳性克隆子。
该步骤的目的是确保基因的准确克隆,减少假阳性结果。
4. 酶切与连接将目标基因与载体进行酶切,并利用DNA连接酶将两者连接起来。
通过正确选择酶切位点和连接方法,确保基因的正确插入载体。
5. 转化与筛选将连接好的DNA导入到宿主细胞中,利用特定培养基进行筛选。
通过选择适当的培养条件和细菌菌株,筛选出含有目标基因的正常菌落。
6. 培养与表达将筛选出的正常菌落进行培养,促进目标基因的表达。
通过优化培养条件和时间,最大限度地提高基因表达水平。
四、实验结果与分析通过以上实验步骤,我成功地完成了基因克隆与表达实验,并获得了相应的实验结果。
在PCR扩增实验中,我成功扩增出了目标基因的DNA片段,并通过琼脂糖凝胶电泳验证了PCR产物的大小和纯度。
在氯化钠筛选实验中,我筛选出了含有目标基因的阳性克隆子,并进行了进一步的酶切验证。
酶切结果符合预期,表明基因成功克隆。
在转化与筛选实验中,我成功将连接好的DNA导入到宿主细胞中,并通过培养基筛选出了含有目标基因的正常菌落。
这些正常菌落的形成证明了基因的成功转化和表达。
在培养与表达实验中,我选择合适的培养条件和时间,在培养过程中观察到目标基因的表达情况。
【实习报告】生物工程实习报告4篇

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前言
我学习的专业是生物工程,今年在一家动物药业公司进行生产实习,现在实习已经结束,回头总结我的实习报告时,感受颇深,它使我在实践中了解了社会,让我们学到了多在课堂上根本就学不到的知识,也打开了视野、增长了见识,更为我即将走向社会打下坚实的基础,基本上达到了学校要求的
第二部分公司的总平面布置图
分析:
1,就企业所选的厂址来看:它位于成都经济技术开发区××区私营园区内,具备以下优势:①在土地费用和纳税结构等方面享有一定的优惠政策;②在私营园区内分布有众多的医药产业,在研发、包装、运输、服务等环节形成共生的“地利”条件有利于企业的发展;③龙泉当地水资源丰富且符合注射剂生产所需水源要求,廉价方便。
第三部分工艺流程简介
一,可灭菌小容量注射剂生产工艺流程:
可灭菌小容量注射剂生产工艺过程包括原辅料的准备、注射用水的制备、安瓿处理、配液过滤、灌装封口、灭菌检漏、印包装、质量检查等工序。
(一) 原辅料的准备
1)领料:根据生产指令内容及车间生产作业计划,分别领取原料、辅料。应按生产指令内容仔细核对原、辅料名称、代码、规格、数量(重量),必须做到物料的名称、代码、批号、规格、数量准确无误。
1) 空安瓿的排整:将密集堆放的灭菌安瓿,依照灌封机动作周期的要求将固定只数的安瓿,按一定距离间隔组排在传送装置上
2) 灌注:采用灌封机进行操作。灌封机是利用具有单向阀的计量活塞完成定体积药液的抽取及灌注。机器上设有自动止灌装置。当安瓿空缺时计量活塞不工作,即停止灌注。
3) 充气:由于某些产品的稳定性较差,在安瓿内往往要通入惰性气体以置换其中的空气。所有充气过程都是在充气针头插入安瓿内的瞬时完成的。针头的动作要快速进退与短时停留,气阀要同时快速启闭。
生物技术综合实验报告(原生质体相关)

生物技术综合实验报告(第一部分)实验一工作液的配制、培养基配制、器皿洗涤及灭菌一、实验目的掌握各种工作液配制方法;了解植物培养基的构成及配制方法;掌握高温高压灭菌的方法。
二、原理培养基是植物组织培养的基本条件,同时也是关键因素。
湿热条件(121℃的蒸汽,10分钟)能够有效地杀灭附着在玻璃器皿、器具以及溶液和培养基中的微生物达到灭菌的目的。
三、器具和试剂灭菌锅,天平,电炉,微波炉,三角瓶,封口膜,移液管,移液器,量筒,烧杯,pH试纸,培养皿,滤纸,Parafilm封口膜。
琼脂,MS培养基大量元素,无菌水,葡萄糖,2, 4-D,IBA,KT (激动素),1M NaOH及HCl,卡那霉素,头孢霉素,乙酰丁香酮。
四、实验内容PH调节剂的配制、培养基母液的配制、培养基的配制、各种相关物品的准备(一)培养基的配制步骤1、取个干净烧杯,加入1/3-2/3左右的蒸馏水,用移液管取所需的母液加入烧杯。
2、称取定量的蔗糖加入烧杯中并不断搅拌,直到完全溶解,定容。
3、用NaOH或者稀HCL调剂酸碱值。
4、称取定量琼脂糖加入烧杯中,加热煮沸搅拌,待琼脂完全溶解,分装。
5、高压灭菌(121℃,15min-20min)。
6、冷却,取出,备用。
(二)棉花无菌苗培养基的制备1、取25 ml MS大量元素母液,称取葡萄糖15g、于1升的烧杯中,定容后调pH值为6.0,加入7.5g/l 琼脂煮沸。
2、然后将其分装到100毫升的三角瓶中,每瓶40毫升。
3、用封口膜封口后在灭菌锅中灭菌15分钟。
4、灭菌后臵于水平的工作台上冷却即可。
要求:配制1L(三)拟南芥无菌苗培养基的制备1、拟南芥无菌苗培养基:1/2 MS大量元素+蔗糖10g/L,PH值6.0;加入7.5g琼脂高温高压灭菌。
2、0.1%琼脂糖:0.1g琼脂糖/100ml 蒸馏水;无菌苗培养基和0.1%琼脂糖均121°高压灭菌15分钟。
3、另准备20套9cm培养皿,灭菌。
生物工程生产实习报告3篇

生物工程生产实习报告生物工程生产实习报告精选3篇(一)实习报告一、实习背景本次生物工程生产实习是在某生物制药公司进行的,该公司专注于生物药物的研发和生产。
实习期限为两个月,目的是让学生通过实际操作和参与,了解生物工程生产的流程和相关技术,提高实践能力。
二、实习目标1.了解生物工程生产的流程和设备。
2.掌握生物工程生产中的常用实验操作技术。
3.学习生物工程生产过程中的质量控制方法。
4.提升团队合作和沟通能力。
三、实习内容1.工厂参观:参观了生物制药工厂的各个车间和生产线,了解了生产设备的种类和工作原理,以及生产过程中的质量控制措施。
2.实践操作:参与了生物工程生产中的实验操作,如细胞培养、发酵过程控制、离心等。
学习了实验操作的基本技巧,如灭菌操作、稀释液体的配制等。
3.数据分析:学习了生物工程生产过程中的数据分析方法,如生长曲线分析、菌体密度的测定等。
4.质量控制:了解了生物工程生产中的质量控制方法,包括原料检验、成品检验和中间产品检验等。
参与了产品质量检验的过程,并学习了相关的质量控制标准和操作规程。
四、实习心得通过这次实习,我对生物工程生产有了更深入的了解。
我发现生物工程生产是一个复杂的过程,需要严格的操作和质量控制,以确保产品的质量和安全性。
在实践操作中,我遇到了一些困难,例如细胞培养的操作需要严格控制环境条件和参数的变化,我需要不断调整和优化实验步骤和条件,以获得高质量的细胞培养。
此外,团队合作也是一个重要的能力。
在实习过程中,我和其他实习生一起合作完成了一些实验任务,通过相互配合和交流,我们能够更有效地完成工作。
总的来说,这次实习对我个人的成长有着重要的意义。
我不仅学到了实际操作技能,还提高了团队合作和沟通能力。
这将对我以后在生物工程领域的从业生涯有着积极的影响。
生物工程生产实习报告精选3篇(二)实习报告摘要:通过参与生物工程生产实习项目,我对生物工程领域的生产工艺和操作流程有了更深入的了解。
最新-生物工程实习报告【精彩8篇】

生物工程实习报告【精彩8篇】一段时间的实习生活又将谢下帷幕,这次实习让你有什么心得呢?请好好写一份实习报告将它总结下来吧。
但是实习报告有什么要求呢?生物工程实习报告篇一一、实习目的1、通过深入各实习岗位进行综合性的实习,将所学的基础理论、基础知识和基本技能运用于实践之中,将所学的知识转化为能力,培养实际工作能力、科研能力。
2、掌握现代生物技术手段与运用能力,训练实际操作技能。
3、了解校外科研机构的实际工作情况,尤其是与所学专业相关的学科如生物学、化学、医学、药学等学科的研究情况和前沿状况。
4、从实际出发,检验自己在态度、知识、能力、技能等四项指标方面所达到的程度。
二、实习时间20xx—20xx学年上学期(20xx年8月25日—9月30日)三、实习地点中国科学院xx植物研究所四、实习内容1、植物组织培养技术---------组培室2、标本的采集、制作、鉴定、保藏技术---------标本馆内3、植物分类、引种、栽培、鉴定、管理---------植物园内的苗圃基地4、植物化学方面的研究-------------植物化学实验室5、专业讲座、科普训练、学术报告----------专家指导五、实习人员xxxxxx化学与生物技术学院05级生物技术专业六、实习方式1、以小组为单位轮转到各个点实习,根据指导教师的安排及要求完成各项实习任务。
2、积极主动,充分发挥个人能动性和团队合作精神。
正文实习,是一种期待,是对自己成长的期待,是对自己角色开始转换的期待,更是对自己梦想的期待;实习,也有一份惶恐,有对自己缺乏信心的不安,有对自己无法适应新环境的担忧,更有怕自己会无所适从的焦虑。
带着一份希望和一份茫然来到了来到隶属中国科学院的昆明植物研究所,开始我的'实习生涯。
为期一个月的时间我们先后在植物所的苗圃、标本管、植化室、组培室进行了实习。
这次实习让我见识了许多,也收获了许多,不仅仅感受在这的那份自豪与优越,而是感染他们的那份敬业、求实与无私精神以及实习给我带来的种种思考。
生物工程实习报告

生物工程实习报告生物工程实习报告(通用6篇)转眼间一个辛苦的实习生活又结束了,这次实习让你心中有什么感想呢?让我们一起来学习写实习报告吧。
那么什么样的实习报告才是好的实习报告呢?下面是店铺为大家整理的生物工程实习报告(通用6篇),希望能够帮助到大家。
生物工程实习报告1一、生产实习目的使学生了解和掌握基本业务知识,印证、巩固和丰富已学过的专业课程内容,培养学生理论联系实际,在实际中调查研究、观察问题、分析问题,以及解决问题的能力和方法,为后续专业课程的学习打下基础。
二、生产实习内容正阳河酱油厂原理:以大豆、小麦为主要原料,采用传统天然发酵工艺,经十余道工序精酿而成,内含多种人体必需的氨基酸、还原糖等营养成份。
色泽鲜艳、质纯味正、酱香浓郁、咸甜适口,-是烹任各式菜肴、冷拌、餐桌盛宴的佐餐调味佳品。
分特级、特鲜、精制佳酿优级等1有瓶装及复全薄膜软包装,计14个品种。
工艺流程:制作方法1、种曲制造①菌种②培养:试管菌种→锥形瓶菌种→曲盒种曲(或曲池、曲匾)逐级扩大培养。
试管菌种应定期进行纯化、复壮。
③质量要求:感官指标——孢子丛生,黄绿色,无异味,无污染。
理化指标——每克菌种(干基)含孢子数510*9个以上。
孢子发芽率在90以上。
2、原料处理①脱脂大豆的破碎脱脂大豆破碎程度,以粗细均匀为宜。
要求颗粒直径2~3mm,2mm以下的粉未量不超过20。
②润水脱脂大豆与麸皮混合蒸料时,脱脂大豆应先从80℃左右热水进行浸润适当时间后,再混入麸皮,拌匀,蒸料。
3、制曲①接种入池熟料冷却到45℃以下,接入种曲2‰~4‰,混合均匀后,移入曲池制曲②制曲工艺条件曲层厚度25~30cm,曲料应保持松散,厚度一致,制曲过程中应控制品温28~32℃,最高不得超过35℃室温28~30℃,曲室相对湿度在90以上,制曲时间24h以上。
在制曲过程中应进行2~3次翻曲。
4、发酵①盐水的配制:食盐加水溶解,澄清后使用。
②拌曲盐水盐水的温度:夏季45~50℃,冬季:50~55℃;控制:成曲拌盐水量使酱醅水分为50~53(移池浸出法)55~58(原池浸出法)。
生物工程专业生物工艺实验实习报告

生物工程专业生物工艺实验实习报告一、实验目的本次生物工艺实验旨在通过实习操作,加深对于生物工程专业相关实验及技术的理解与掌握,培养学生的实践能力和创新思维。
二、实验材料与方法材料:1.大肠杆菌(Escherichia coli)培养基2.PCR试剂盒3.热循环仪方法:1. 预备实验室设备和试剂,并按实验要求准备所需培养基。
2. 向培养基中加入预先制备的大肠杆菌液,使其浓度适宜。
3. 利用热循环仪对特定DNA片段进行PCR扩增,并按照试剂盒操作说明进行操作。
4. 将PCR扩增产物进行检测和分析,验证扩增效果。
5. 统计实验结果,撰写实验报告。
三、实验结果与分析经过实验操作,观察到PCR扩增产物带有明显的DNA条带,说明扩增效果良好。
根据PCR结果,我们可以进一步分析所得到的DNA 序列与目标序列是否一致,从而检测特定基因或序列的存在与否。
四、实验总结通过本次实习,我对生物工艺实验的基本操作流程和相关实验技术有了更深入的了解。
我学会了运用PCR技术进行DNA扩增,并通过结果分析进行实验结果的验证。
实习过程中,我不仅巩固了课堂理论知识,还提高了实践操作能力和团队合作意识。
五、实验心得体会生物工程专业的实验实习对于学生来说是至关重要的一环。
通过亲身参与实验操作,不仅可以提高实践能力,更能加深对所学知识的理解和应用。
在本次实验中,我深切感受到了实验技术的重要性和实验设计的合理性。
同时,也意识到在实验中的每一个细节都需要严谨和仔细的处理,这将直接影响到结果的准确性。
在今后的学习与工作中,我将继续注重实验实习的重要性,不断提高自己的实践能力和科研素养。
通过不断的努力和实践,我相信我可以更好地应对生物工艺领域中的挑战,并为生物工程的发展做出自己的贡献。
六、参考文献[1] Smith J, Doe J. PCR Amplification of DNA[M]. New York: Academic Press, 2015.[2] Brown T. Understanding PCR: A Practical Bench-Top Guide[M]. New York: Routledge, 2018.七、致谢特此感谢实验指导老师的辛勤付出和悉心指导。
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(此文档为word格式,下载后您可任意编辑修改!) 生物工程工艺综合性实验报告院(系):城市建设学院专业班级:生物工程1101学生姓名:马雪文学号:指导教师:李世杰20 14 年 5 月 26 日至20 14 年 6 月 15 日发酵工艺综合性实验指导书一、实验目的微生物发酵技术是生物工程最核心的技术,微生物发酵按其对氧的需求可分为好氧微生物发酵,和厌氧微生物发酵。
好氧和厌氧发酵有较大的区别,各自对工艺条件、发酵设备有不同的要求。
分别掌握好氧和厌氧发酵技术也就比较全面的掌握了工业微生物技术。
本实验分别开出典型的好氧和厌氧发酵实验,训练学生掌握这两种工艺的基本技术、操作程序、分析手段,全面锻炼同学们实际动手能力。
巩固和提高微生物净化操作能力、显微观察技术、培养基配制和灭菌技术、无菌取样和细胞量的确定、生长曲线的制作、光谱分析技术、气象色谱分析技术。
初步培养同学们工业微生物领域科学研究和技术开发的基本能力。
二、实验原理红曲霉通过有氧发酵将淀粉质原料转化为次级代谢产物红曲色素。
丙丁梭状芽孢杆菌经厌氧发酵将农副产品转化为丁醇和丙酮。
三、实验内容1、好氧实验:红曲的发酵实验及其抑菌作用研究2、厌氧实验:丁醇的发酵实验及其气相色谱检测四、仪器设备和试剂、消耗品:1.仪器设备:电子分析天平手提式蒸汽灭菌锅、自动控制蒸汽灭菌锅双孔水浴锅1000W电炉 5台生物显微镜、电脑成像生物显微镜生物培养箱、培养摇床真空干燥箱紫外可见分光光度计离心机真空泵、真空干燥器蒸发器气象色谱仪2.药品和耗材:药品:可溶淀粉 1瓶(500克),蛋白胨 1瓶(500克),琼脂,饴糖(麦芽汁)麦芽1000克,大米粉 5公斤,硝酸钠NaNO31瓶(500克),磷酸二氢钾KH2PO41瓶(500克),磷酸氢二钾K2HPO41瓶,硫酸镁MgSO4·7H2O 1瓶(500克),硫酸铵(NH4)2SO41瓶,氯化锰MnCL21瓶,硫酸锰MnSO4·H2O 1瓶,碳酸钙CaCO31瓶,维生素B1(盐酸硫胺素)1小瓶,酵母膏1瓶,乳酸(液态1瓶500克),葡萄糖(分析纯)1瓶,乙醇(分析纯)5瓶(5×500克),乙醇(色谱纯Aladdin) 2瓶,丁醇(色谱纯Aladdin)2瓶,丙酮(色谱纯Aladdin)2瓶,叔戊醇(色谱纯Aladdin)2瓶耗材:500ml三角瓶50只, 250ml三角瓶16个,100ml粗口径试管50只,1000ml烧杯10个,培养皿160套,常规试管160个,200ml烧杯16个,1ml移液枪头5盒,标签纸若干,玻璃真空干燥器大号1个,波美计8只,移液枪(1000ml)2只,玻璃珠2盒,100ml量筒8个,500ml量筒2个,称量纸2盒,不锈钢试剂勺4根, pH试纸2包,玻璃棒若干,玻璃推棒32根,5ml移液管16只五、实验方法步骤和具体操作过程(一)红曲的发酵实验及其抑菌作用研究红曲是一种具有一定营养和药理作用的纯天然红色素,可赋予肉制品、食品、饮料等鲜艳的色泽及特殊风味,而且具有较好的营养价值和一定的防腐作用,因而被广泛地应用于食品工业。
红曲是由红曲霉经发酵分泌到胞外的一种色素,发酵的主要原料是淀粉类如大米、薯类等。
红曲霉发酵合成色素同时对有害菌产生抑制作用。
本实验分为两个部分,前一部分为红曲的发酵实验,后一部分为红曲的抑菌试验。
(Ⅰ)红曲的发酵实验1.菌种本实验室保藏的红曲霉菌种monascus purpureus。
用本实验室自主设计的保藏方法,在短梗霉多糖膜片中封存,置于冰箱中保藏。
使用时每取出一片,进行活化,然后作为种子扩大培养。
2.培养基①斜面试管和平板培养基:饴糖培养基:6~8。
Bx饴糖100 mL,可溶淀粉5 g,蛋白胨3 g,琼脂2 g,121℃灭菌30。
每大组制备200ml用于制作平皿用于菌种活化则不加琼脂,100ml饴糖培养基装入500ml三角瓶中(加入一定数量的玻璃珠)121℃灭菌30分钟备用*饴糖(麦芽汁)的制备:大麦芽50克,粉碎后加入4倍于麦芽重量的水,搅拌均匀,在55℃至60℃的保温箱中糖化4小时,取出过滤得麦芽汁,测波美度,灭菌备用。
以上麦芽汁的制备分为四个大组进行实验,每大组做2瓶试样,②种子培养基为:大米粉3% ,硝酸钠O.5% ,KH2PO40.15% , MgSO40.1% , 250ml三角瓶中装量100ml,pH6.0乳酸调(加入一定数量的玻璃珠),121℃灭菌30分钟备用(或可溶性淀粉3g,硝酸钠0.3g,黄豆饼粉0.5g,水100ml “微生物学实验”胡开辉)每小组做一瓶③发酵培养基为:a.大米粉9% ,硝酸钠O.2% ,KH2PO40.1%, MgSO40.2% ,pH6.0乳酸调b.小麦粉9% ,硝酸钠O.2% ,KH2PO40.1%, MgSO40.2% ,pH6.0乳酸调c.玉米粉9% ,硝酸钠O.2% ,KH2PO40.1%, MgSO40.2% ,pH6.0乳酸调d.木薯粉9% ,硝酸钠O.2% ,KH2PO40.1%, MgSO40.2% ,pH6.0乳酸调e.土豆粉9% ,硝酸钠O.2% ,KH2PO40.1%, MgSO40.2% ,pH6.0乳酸调f.称取100g籼米热水浸泡1小时,沥干,入玻杯中,灭菌锅中蒸30分钟,冷却后接入种子液,摇匀,培养3~5天,米粒呈紫红色(胡开辉)*分为四大组,每组一个配方进行实验,配方e.、f.作为自选项3.菌种活化在净化操作台上操作。
保藏于短梗霉多糖薄膜的保藏片,用灭过菌的剪刀将其外包装塑料膜剪开,再用灭过菌的镊子将里面的短梗霉多糖膜片夹出,置于装有100ml饴糖培养基的500ml三角瓶中,在恒温摇床上(28士1)℃,以200转速度震荡培养3天左右至瓶中浑浊有颜色变化有孢子生成(以上有教师作预备试验)4.平板单菌落超净工作台擦拭干净,打开紫外灯提前灭菌15分钟至20分钟。
准备9个平皿、玻棒、推棒、1ml移液吸管头1包、9只试管分别装9ml生理盐水,包扎灭菌(121℃,30分钟)好,放入净化操作台备用。
(2人一组)配制加有琼脂的饴糖培养基200ml,三角瓶中灭菌好(121℃,30分钟),放入净化操作台,待培养基冷却至50℃左右,将其分别平均倒入9个平皿中,待其冷却凝固。
(操作前先点燃酒精灯,开启微风,倒平皿时要在酒精火焰的下风口进行操作,倒平皿速度要较快,否则琼脂凝固就会倒不出来)将三角瓶中活化好的红曲孢子,用移液枪吸取1ml,放入其中1只装有9ml 生理盐水的试管中,玻棒搅打均匀。
再用移液枪吸取上述试管中的液体1ml放入装有9ml净化水的试管2中,依此类推,逐步稀释,至第9只试管。
将上述试管中的第3、第4、第5、第6、第7,五只试管中稀释的孢子各吸取0.2ml,涂布在已经凝固好的平板上。
从最稀的第7只开始涂布,到较浓的第3只。
以玻棒推平,同样也是从最稀的开始逐个推平。
置于恒温培养箱中28℃培养至明显的单个菌落出现且能观察到孢子生成。
5.种子培养配制种子培养基②(加入一定数量的玻璃珠)121℃灭菌30分钟(2人一组),放入无菌操作台,待其冷却至常温,将上述平皿上长出的单个菌落上的红曲孢子挑取一环接入三角瓶种子培养基中(250ml三角瓶装量100ml,每组2瓶,其中一瓶用于取样观察,另一瓶则不取样留作种子),放置培养摇床上28℃~30℃,200rpm转速培养,每日在超净工作台上取样观察,至有较多的菌丝生成,将转速调整到160rpm,待有孢子生成即可作为种子。
6.发酵培养(事先将1ml吸管头包扎灭菌备用)分为4大组(每大组做4瓶),分别配制大米粉培养基、小麦粉培养基、玉米粉培养基、木薯粉培养基,500ml三角瓶装量100ml,121℃灭菌30分钟,放入无菌操作台待冷却至常温。
在超净工作台上将上述培养好的种子培养液用移液枪吸取2ml,接种于已灭菌好的发酵培养基中,置于培养摇床上28℃~30℃,200rpm转速进行培养,每日取样观察。
7.取样检测①将三角瓶从摇床中取出,置于超净工作台上(超净工作台事先擦拭干净,紫外灭菌15分钟),点燃酒精灯,开微风,用事先灭过菌的移液枪头吸取1ml发酵液,置于1ml的离心管中;(接种后也要立即取样,作为第一天的检测数据)②在离心机中以3000rpm离心10min,离心机停止转动后立即将上清液倒入一只试管中,加入10ml去离子水稀释;③上述稀释液进一步适当稀释后,用紫外可见分光光度计505纳米处测其吸光值(去离子水作为空白对照),吸光度=测定值×稀释倍数,作好记录;④离心管下部沉淀物置于真空干燥箱中,抽真空,60℃干燥3小时,电子天平称重,作好记录⑤5天后停止取样,记录每天取样检测结果8.整理每天观察和检测得到的数据①以时间数据为横坐标,离心沉淀物干重为纵坐标作红曲的生长曲线;②以时间数据为横坐标,相应每天得到的红曲吸光度为纵坐标,做红曲色素的生成曲线。
(Ⅱ)红曲的抑菌作用实验1.大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的培养①菌种:大肠杆菌E.coli和金黄色葡萄球菌S.aureus 斜面菌种各一只,本实验室保藏,从冰箱中取出备用。
②培养基:LB培养基:蛋白胨10 g,酵母膏5 g,NaC1 10g,自来水1000 mL,pH 7.2。
配制50ml装于250ml三角瓶中,各2瓶,121℃灭菌20分钟,冷却至常温备用。
(或蛋白胨10 g,牛肉膏10 g,葡萄糖10g,NaC1 5g,自来水1000 mL,pH 7.0 中国工业微生物菌种目录培养基32)③种子培养:将大肠杆菌和金黄色葡萄球菌斜面菌种分别接种于上述LB培养液中,37 ℃培养36 ,去上清液,用无菌水洗涤3次,将所得菌体加10 mL的无菌水稀释。
以无菌水做空白对照用可见分光光度计分别在600 nm和640 nm处测菌悬液的比浊度,除以不含红曲色素培养液培养的菌悬液的比浊度,计算抑菌率。
抑菌率=(空白培养液浊度-含红曲培养液浊度)÷空白培养液浊度c.以红曲的添加量为横坐标,抑菌率为纵坐标,作红曲的抑菌曲线图。
注:以上实验作两轮,直到得到满意结果,大约需15天左右,为使实验保持连续性,星期六和星期天可能不休息。
(二)丁醇的发酵实验及其气相色谱检测丁醇是由淀粉质原料经丙酮丁醇梭状芽胞杆菌发酵转化得到的一种有广泛用途的化工原料。
它可以作各种涂料的溶剂,比如飞机涂料的最理想溶剂。
生物丁醇与乙醇相似,是生物加工的醇类燃料。
汽油中的主要组成是C6 ~C8 ,因此丁醇比乙醇更类似于"油" , 丁醇与乙醇相比也具有较高的能量密度,它与燃料添加剂和润滑油配伍性更好。
同时,因其类似烃类的结构,丁醇不易于与水相混合,可在炼油厂调合和用管道运送, 无须在分销终端进行调合,同时可调入更高浓度,无需改造汽车。