实验一 紫外吸收光谱法测定双组分混合物
紫外分光光度法测定混合物中非那西汀和咖啡因的含量11
实验方法及步骤
1．标准溶液配制 非那西汀标准溶液（ 100μgml 非那西汀标准溶液 （ 100μgml-1 ） ：准确称量 非那西汀0 0500g于小烧杯中，加少许乙醇溶解， 非那西汀0.0500g于小烧杯中，加少许乙醇溶解，转移 到500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀备用。 500ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀备用。 咖 啡 因 标 准 溶 液 （ 150μgml-1 ） ： 准 确 称 量 150μgml 0.0750g咖啡因于小烧杯中，加蒸馏水溶解后，转移到 0750g咖啡因于小烧杯中，加蒸馏水溶解后， 500ml容量瓶中，定容备用。 500ml容量瓶中，定容备用。
在非那西汀（ 在非那西汀 （a） 和咖啡因(b) 和咖啡因(b) 的二组分混合物中， 的二组分混合物中，二组分的分别 测定就属上面这种情况。 测定就属上面外-可见分光光度计 UV-2450紫外石英比色皿（1cm） 石英比色皿（1cm） 容量瓶（50ml，500ml） 容量瓶（50ml，500ml） 移液管（5ml、10ml） 移液管（5ml、10ml） 未知样品液。 吸耳球，洗瓶，胶头滴管，玻璃棒 烧杯（100ml） 烧杯（100ml） 非那西汀，咖啡因，乙醇
实验原理
-----多组分的同时测定 -----多组分的同时测定 1. 若两组分的吸收曲线互不重叠，则可在 若两组分的吸收曲线互不重叠， 各自最大吸收波长处分别进行测定。 各自最大吸收波长处分别进行测定。即本质上 与单组分测定没有区别。 与单组分测定没有区别。
2. 若两组分的吸收曲线相互重叠，只要两种 若两组分的吸收曲线相互重叠，只要两种 组分没有相互作用， 组分没有相互作用，则溶液的吸光度等于两种组 分各自吸光度之和，这就是吸光度加合原理。 分各自吸光度之和，这就是吸光度加合原理。可 求解联立方程组得出各组分的含量。 求解联立方程组得出各组分的含量。
紫外光谱重叠的多组分混合物体系的同时定量测定
紫外光谱重叠的多组分混合物体系的同时定量测定
刘慧;胡仰栋;卢彦越
【期刊名称】《光谱学与光谱分析》
【年(卷),期】2007(27)7
【摘要】提出一种可将紫外吸收光谱严重重叠的混合物体系准确定量分析的方法.该方法利用系统聚类结合加和性检验而得的优化波长集合有效地降低了混合物光谱的相关性.通过选取优化波长集合内的波长点的信息,把吸光系数和待测浓度同时作为自变量,建立非线性优化模型,对于组分间浓度差较小的混合物体系经一次优化分析计算可得待测浓度;混合物中组分浓度差较大的体系经四次左右优化迭代,逐步降低误差的分析结果,相对误差可控制在3.63%之内.分析结果表明该法稳定、准确、简便快速,可对多组分混合物体系进行定量测定.
【总页数】4页(P1416-1419)
【作者】刘慧;胡仰栋;卢彦越
【作者单位】中国海洋大学化学化工学院,山东,青岛,266003;中国海洋大学化学化工学院,山东,青岛,266003;中国海洋大学化学化工学院,山东,青岛,266003
【正文语种】中文
【中图分类】O657.3
【相关文献】
1.紫外分光光度法同时定量测定多组分混合物-喹啉吡啶吲哚苯酚 [J], 李亚新;赵晨红
2.用离散变换主组分回归法处理重叠紫外吸收光谱 [J], 高玲;任守信
3.小波软阈值核心偏最小二乘法同时定量分析光谱严重重叠的四组分混合物 [J], 高玲;任守信
4.肉桂醛-苯甲醛双组分体系的紫外光谱特性研究 [J], 秦荣欢
5.紫外光谱法测定双组分体系设计性实验的教学实践 [J], 闻俊;周婷婷;范国荣因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
紫外可见分光光度法实验
紫外可见分光 光度法实验
实验2 鉴定和识别有机化合 物中的电子跃迁类型
实验3 紫外分光光度法同时测 定维生素C和维生素E
指导老师：马少妹
实验4 三氯苯酚存在时苯 酚含量的紫外分光 光度法测定
实验5 紫外可见吸收光谱法 测定双组分混合物
2020/9/30
仪器分析实验报告写法
1.每个实验于下个实验之前交，每人交一份。报告要书写整齐清楚。 2.报告不可剽窃或抄袭他人之作，更不可造假数据。 3.报告以A4大小纸张撰写，格式如下: 封面 : 记载实验序号、实验项目、实验日期及报告人姓名。 內容 : 按“前言→实验方法及步骤→实验結果→ 讨论→结语→参考文献→ 附录”等。 (I)在“前言”(或“绪论”)部份，扼要敘述实验目的，所使用之仪器的特 性，分析的基本原理，理论背景等，并用几句话归纳所作的实验项目及所 获得的结果。
2020/9/30
（6）气态苯和溶液中苯的吸收曲线有何个同？为什么？ （7）助色团—NH2将如何影响苯胺？质子化作用后，产高等教育出版社 赵文宽等编，《仪器分析实验》）
2020/9/30
实验3 同时测定维生素C和维生素E 2．实验目的 掌握在紫外区中同时测定—个双组分体系[抗坏血酸(维生素C) 和α-生育酚(维生索E)的实验方法。 2．仪器和试剂 916型紫外-可见分光光度计； ，石英比色皿2只，容量瓶移和 液管若干。抗坏血酸（AR）：0.0132g／L在无水乙醇中(7.50 ×l0-5mol/L)；α-生育酚(维生素E)：0.0488g/L在无水乙醇中； 无水乙醇；未知溶液：在无水乙醇中含有抗杯血酸和α-生育酚 溶液。
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为292nm)，以吸光度对浓度作图。
（2）计算抗坏血酸和α-生育酚在最大吸收波长（246nm和 292nm）时的摩尔吸光系数：即标准曲线图的斜率。
紫外可见吸收光谱法测定双组分混合物
三、实验内容
2.标准曲线的绘制
(1) K2Cr2O7标准曲线（λ1=
浓度/ mol· L-1 吸光度A（λ1） 吸光度A（λ2） 回归方程（λ1） 回归方程（λ2） 0.0002
nm，λ2=
nm，b=1cm，蒸馏水作参比）
0.0001
A
2
三、实验内容
2.标准曲线的绘制
B A B AA bc ( A ) 1 1 bc( B) 1
c( A) c( B)
6.紫外可见吸收光谱法测定双 组分混合物
一、实验目的
• 1.了解紫外可见分光光度计的结构及使用方 法； • 2.学会用解联立方程组的方法定量测定吸收 曲线相互重叠的双组分混合物。
二、实验原理
1.双组分混合物吸收曲线（相互重叠情况）
1.00 0.80
吸光度A
0.60 0.40 0.20 0.00 300 350 400 组分A 450 500 组分B 550 600 650 波长/nm 组分A+B
(2) KMnO4标准曲线（λ1=
浓度/ mol· L-1
nm，λ2=
0.0001
nm，b=1cm，蒸馏水作参比）
0.0002 0.0004 0.0006
吸光度A（λ1）
吸光度A（λ2） 回归方程（λ1） 回归方程（λ2）
B
1
B
2
四、实验结果处理
3. 未知样的测定( )号
AB A B A bc ( A ) 2 2 bc( B) 2
2.吸光度的加和性
A B A B A bc ( A ) 1 1 bc( B) 1
AB A B A bc ( A ) 2 2 bc( B) 2
实验一 紫外可见吸收光谱的绘制及双组分混合物
实验一紫外可见吸收光谱的绘制及双组分混合物（KMnO4和K2CrO7）的测定实验类型：验证性实验实验学时：3每组人数：4-5人（分两小组，每小组2-3人，分别扫描KMnO4和K2CrO7）实验目的：掌握紫外-可见吸收光谱基本原理和基础知识；掌握分光光度计的工作原理、基本构造和使用方法；熟悉紫外-可见吸收光谱的绘制方法；掌握吸收曲线相互重叠的二元混合物的测量。
实验原理：有机化合物紫外-可见吸收光谱是由分子中价电子（σ、π）或未成键电子（n）的跃迁产生的。
电子跃迁主要有σ—σ*、n—σ*、n—π*、π—π*四种类型。
根据跃迁类型，吸收带可分为K带、B带、R带等。
而一些无机化合物则是由于电荷跃迁或配位体场跃迁产生吸收光谱。
在一定波长范围内，可以通过波长扫描的方法测定化合物的紫外-可见吸收光谱。
根据朗伯-比尔定律，用紫外-可见分光光度法很容易定量测定在此光谱区内有吸收的单一成分。
由两种组分组成的混合物中，若彼此都不影响另一种物质的光吸收性质，可根据相互间光谱重叠的程度，采用相对应的方法来进行定量测定。
有如下三种情况：（a，b为两物质简称）①两组分光谱不重叠，a，b不相互干扰，即可认为干扰组分对待测物测定没有影响，则可以选择适当的波长（分别选λ1、λ2测定），按测定单一组分的方法处理；②两组分光谱部分重叠，a的测定不受干扰，而b的测定受到干扰，a按照单一组分测定方法处理（选λ1测定），b在λ2处测定，减去a的含量；③当两组分吸收峰大部分重叠时，a，b相互干扰，则可采用双波长法联立方程组进行测定。
无论哪种情况，都是依据吸光度值的加和性来测定的。
可以用如下通式来表示（参考图③）：混合组分在λ1的吸光度等于a组分和b组分分别在λ1处的吸光度之和Aλ1a+b，即Aλ1 a+b = ελ1a bC a + ελ1b bC b（1）同理，混合组分在λ2的吸光度等于a 组分和b 组分分别在λ2处的吸光度之和A λ2a+b ，即 A λ2 a+b = ελ2a bC a + ελ2b bC b （2）因为摩尔吸光系数是某一波长下，某物质单位浓度、单位吸收光程的吸光度，其实质是吸光度-浓度线性回归方程的斜率。
仪器分析实验思考题
仪器分析实验思考题
1. 开启气相色谱仪热导池桥电流开关时应注意什么事项？
2. 如果增加柱温，线速度将增加还是降低？
3. 从仪器构造和应用范围上简要比较气相色谱与液相色谱的异同点。
4. 简述原子吸收分光光度分析的基本原理及应用范围。
5. 实验42（用反相色谱法分离芳香烃）中，所用的流动相为80%甲醇+ 20% 水，如果将流动相的配比换成50%甲醇+ 50%水，被分离组分的保留时间会发生什么变化？
6. 请阐述在“紫外吸收光谱法测定双组分混合物”的实验中，三大操作模式（定性、定量、定波长）的测量目的各是什么？如何才能更可靠的获取R2为1的回归曲线？
7. 请论述影响“分子荧光光度法测定二氯荧光素”的实验分析结果准确性的各种因素和分子荧光光谱定量操作步骤、注意事项。
8. 请写出布拉格方程，并用该方程计算2θ = 27.03650处的面间距d值，c铜靶辐射波长λ= 1.5406?。
9. 红外光谱实验中，固体粉末样品有几种常用的制样方法？实验中应如何应用？
10. 根据红外光谱分析和核磁共振波谱分析的实验原理，试比较两种实验方法在有机结构分析中的应用。
11．二次导数示波极谱法测定水中的镉离子时，你除去氧的干扰了吗？为什么？
12．为什么原子发射光谱定性分析要用哈特曼光栏？
13．在原子发射光谱分析摄谱时为什么要采用先小电流后大电流的方法？
14．粒子的大小与形状、以及其有效电荷的差异，是构成电泳分离的基础。
有同学用10mmol的磷酸盐缓冲溶液(pH 7.2) 和石英毛细管，得到如下图所示的邻-、间-、对-硝基苯酚的毛细管电泳分离图。
请指明各电泳峰所对应的化合物（已知邻-、间-、对-硝基苯酚的pka分别为7.22 8.50 7.15）。
(实验)吸收光谱法测定双组分混合物
编辑者-格子衫实验：吸收光谱法测定双组分混合物实验目的：掌握用解联立方程组的方法，同时测定吸收光谱互相重叠的双组分体系的实验方法实验原理：各组分的吸收曲线互有重叠，可根据朗伯-比尔定律及吸光度的加合性原则，通过适当的数学处理来进行测定。
具体方法：在a 和b的最大吸收波长λ1及λ2处，分别测定混合物的吸光度Aλ1、Aλ2，然后解联立方程组，求得出各组分的含量。
如下图：在λ1处：在λ2处：式中：Aλ1、Aλ2为混合液a+b在λ1、λ2处吸光度；Aλ1a、Aλ2a是混合溶液中组分a在λ1、λ2处吸光度；Aλ1b、Aλ2b是混合溶液中组分b在λ1、λ2处吸光度。
首先要从已知浓度的各单独组分吸收光谱中获得：联立求解式（1）和（2）组成的方程组可求得Ca、Cb。
采用此法可求得两种以上组分的含量。
仪器和试剂：916型紫外-可见分光光度计（澳大利亚GBC公司）；石英比色皿2只（1cm）；容量瓶（50ml）和移液管若干。
0.020mol/L KMnO4 、0.020mol/L K2Cr2O7 的贮备溶液（其中都含有H2SO4 0.5mol/L、KIO4 2g/L）操作步骤：1．分别取一定量的0.020 mol/LKMnO 溶液，稀释配制成浓度为0.0004 mol/L，0.0008 mol/L，0.0012 mol/L，0.0016 mol/L和0.0020 mol/L的标准系列溶液。
2．分别取一定量的0.020 mol/LK 2Cr2 O7 溶液，稀释配制成浓度为0.0008 mol/L，0.0016 mol/L，0.0024 mol/L，0.0032 mol/L和0.0040 mol/L的标准系列溶液。
3．在教师的指导下，开启分光光度计。
4．绘制上述10 中溶液在375~625nm 范围内的吸收光谱图，并测定它们在440nm和545nm 处的吸光度。
5．测定教师给定的试样在440nm 和545nm 处的吸光度。
实验二 紫外吸收光谱法测定双组分混合物
实验二紫外吸收光谱法测定双组分混合物一、实验目的1. 掌握单波长紫外—可见分光光度计的使用。
2. 学会用解联立方程组的方法，定量测定吸收曲线相互重叠的二元混合物。
二、方法原理根据朗伯比耳定律，用紫外可见分光光度法很容易定量测定在此光谱区域内有吸收的单一组分。
由两种组分组成的混合物中，若彼此都不影响另一种物质的光吸收性质，可根据相互间光谱重叠的程度，采用相对应的方法来进行定量测定。
如：当两组分吸收峰部分重叠时如图（a）和（b），选择适当的波长，仍可按测定单一组分的方法处理；当两组分吸收峰大部分重叠时如图（c），则宜采用解联立方程组或双波长法等方法进行测定。
解联立方程组的方法是以吸光度的加和性为基础，同时测定吸收光谱曲线相互重叠的二元组分的一种方法。
从图中可以看出，混合物在的吸光度等于A组分和B组分分别在的吸光度之和，即同理，混合组分在的吸光度之和应为若首先用A，B组分的标样，分别测得A，B两组分在和处的摩尔吸收系数、和、，当测得未知试样在和的吸光度和后，解下列二元一次方程组：即可求得A，B两组分各自的浓度和。
一般来说，为了提高检测的灵敏度，和宜分别选择在A，B两组分最大吸收峰处或其附近。
三、仪器和试剂1. 记录式分光光度计（375~625nm）。
2. 0.020 mol·L-1 KMnO4溶液（其中含H2SO4 0.5mol·L-1，含KIO4 2g·L-1）3. 0.020mol·L-1 K2Cr2O7溶液（其中含H2SO4 0.5mol·L-1，含KIO4 2g·L-1）4. 容量瓶、移液管、烧杯、比色皿四、实验步骤需要把母液稀释10倍后，变为0.0020 M再用1. 分别取一定量的0.0020mol·L-1 KMnO4溶液，分别稀释配制成0.00008 mol·L-1，0.00016 mol·L-1，0.00024 mol·L-1，0.00032 mol·L-1和0.00040 mol·L-1的标准系列溶液。
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图1高锰酸钾、重铬酸钾标准溶液吸收曲线
解联立方程组的方法是以朗伯--比尔定律及吸光度的加和性为基础，同时测定吸收光谱曲线相互重叠的二元组分的一种方法。
从图2可看出，混合组分在λ
1处的吸收等于A组分和B组分分别在λ
1处的吸光度之和Aλ1A+B，即：
AA+B
λ1=κAຫໍສະໝຸດ λ1bc+κA B
λ1bcB
同理，混合组分在λ
2处吸光度之和A
AA+B
λ2应为：
Aλ2
A+B
λ2=κbc+κ
A B
λ2bcB
若先用
A、B组分的标样，分别测得
A、B两组分在λ
1和λ
2处的摩尔吸收系数κ
2．容量瓶、移液管、烧杯；
3．0.0200mol/L KMnO
4标准溶液（其中含H
2SO
40.5mol/L，含KIO
42g/L）；
4．0.0200mol/L K
2Cr
2O
7标准溶液（其中含H
2SO
40.5mol/L，含KIO
42g/L）。
四、实验步骤
1．分别吸取一定量的0.0200mol/LK
2Cr
1Aλ1、κA
λ2和κB
λ、κB
λ2；当测得未知试样在λ
1和λ
2的吸光度A
AA+B
λ1A+B
λ1
A和AA+B
λ2后，解下列二元一次方程组：
B=κA
λ1b c+κB
λ1b c
AA+B
λ2
A=κ
BA
λ2b c+κ
A B
λ2b cB
即可求得
A、B两组分各自的浓度c和c。
c= (A
c= (ABAA+B
λ1
A+B
1=545nm）；
C．放入K
2Cr
2O
7标准溶液，在375～625nm范围内进行扫描，得到吸收光谱曲线2，在光谱图上标出最大吸收波长（λ
2=440nm）；
D．放入试样溶液，在375～625nm范围内进行扫描，得到吸收光谱曲线3；
E．将标准样品及试样的吸收曲线(1～3)叠在一张图上打印出来。见图2。
4.2固定波长(定量)
3．按照分光光度计操作规程，开启仪器。
4．绘制标准溶液在375～625nm范围内的吸收光谱图，找到最大吸收波长（λ
1和λ
2）。并测定它们在最大吸收波长（λ
1和λ
2）处的吸光度。
操作步骤：
4.1波长扫描(定性)
A．用去离子水作为空白，做基线；
B．放入KMnO
4标准溶液，在375～625nm范围内进行扫描，得到吸收光谱曲线1，在光谱图上标出最大吸收波长（λ
λ1·κ
-κAB
λ2- AA+B
λ2
A·κ
BB
λ1)/(κA
λ1·κB
λ2-κA
λ2·κB
λ1)
λ1· c)/κ
λ1
一般来说，为了提高检测的灵敏度，λ
1和λ
2宜分别选择在
A、B两组分最大吸收峰处或其附近。
图2高锰酸钾、重铬酸钾标准溶液及混合溶液的吸收曲线
三、仪器和试剂
1．紫外可见分光光度计（UV/VIS 916型）；1cm比色皿；
F．输入波长545和440，并以逗号隔开，用去离子水作为空白，调零；
G．分别放入待测溶液，读取吸光度的值并填入下表。
表1标准溶液及混合液在两个波长处的吸光度（ABS）
波长/nm
545
440
五、数据处理
1．由标准溶液测定的吸光度，分别求得KMnO
4和K
2Cr
2O
7在545nm和440nm处的摩尔吸收系数κκA
440A
545标准溶液1标准溶液2……混合液
、和κB
545、κB
440。
A+B
545
2．由试样测定的吸光度A
六、问题讨论和AA+B
440，列出二元一次方程组，求得c和c的浓度。
AB
1、今有吸收光谱曲线相互重叠的三元体系混合物，能否用解联立方程组的方法测定它们各自的含量？
2、设计一个用双波长法测定本实验内容的实验方案。
2O
7标准溶液，稀释配制成浓度为0.0008 mol/L、0.0016mol/L、0.0024 mol/L、0.0032 mol/L、0.0040 mol/L的系列标准溶液。编号1~5。
2．分别吸取一定量的0.0200mol/L KMnO
4标准溶液，稀释配制成浓度为0.0008 mol/L、0.0016mol/L、0.0024 mol/L、0.0032 mol/L、0.0040 mol/L的系列标准溶液。编号6~10。
实验一紫外吸收光谱法测定双组分混合物
一、实验目的
1、掌握单波长双光束紫外可见分光光度计的使用。
2、学会用解联立方程组的方法，定量测定吸收曲线相互重叠的二元混合物。
二、方法原理
根据朗伯—比尔定律，用紫外--可见分光光度法很容易定量测定在此光谱区内有吸收的单一成分。由两种组分组成的混合物中，若彼此都不影响另一种物质的光吸收性质，可根据相互间光谱重叠的程度，采用相对的方法来进行定量测定。如：