HLA-B27

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HLA-B27检测操作程序

一、目的：保证流式细胞仪检测外周血淋巴细胞上HLA-B27表达量检验的工作质量，旨在保证HLA-B27检测的正确操作程序和控制检测结果的精确度。

二、修改程序：本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任），方可改动。

三、适用范围：外周血中T淋巴细胞HLA-B27表达量检测。

四、溯源：Anti-HLA-B27 Kit(美国BD Biosciences公司；CAT:340183)。

五、实验原理：HLA-B27属于1型MHC基因。

基本上表达在机体所有有核细胞上，特别是淋巴细胞表面有丰富的含量。

使用荧光定量标准微球，校正HLA-B27实验条件后，测定样本中T淋巴细胞HLA-B27表达水平。

若HLA-B27表达水平大于标准微球设定MARK，则为阳性结果；若HLA-B27表达水平低于标准微球设定MARK，则为阴性结果。

六、主要试剂：Anti-HLA-B27 Kit(美国BD Biosciences公司；CAT:340183)，其中包括：1、Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE2、HLA-B27 Calibration beads3、FACS Lysing Solution七、实验操作：抗凝真空采血管，抽取静脉血2ml。

1、标本采集：使用EDTA-K22、染色和固定细胞：（1）标本管编号A，取一只流式专用管A1。

（2） A1管加入Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE 30ul。

（3） A1管中再加入全血50Ul，混均。

（4）置室温，避光孵育15min。

（5）加入FACSLysing溶血液2.0ml，置室温，避光孵育10min。

（6） 300g离心5min，弃上清液。

（7） PBS洗涤细胞两次，300g离心5min，弃上清液。

（8） 1%多聚甲醛0.5mL。

3、上机检测；分析结果；打印实验报告。

八、参考值：HLA-B27:阴性九、临床意义：HLA-B27抗原表达与强直性脊椎炎发病具有高度的疾病相关性。

HLA-B27基因检测试剂注册审查指导原则2024年

HLA-B27基因检测试剂注册审查指导原则123本指导原则旨在指导注册申请人对人类白细胞抗原B27 4（HLA-B27）基因检测试剂注册申报资料的准备及撰写，5同时也为技术审评部门提供参考。

6本指导原则是对HLA-B27基因检测试剂的一般要求，7申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用。

若8不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品9的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。

10本指导原则为注册申请人和技术审评人员使用的指导11性文件，但不包括审评审批所涉及的行政事项，亦不作为12法规强制执行，应在遵循相关法规的前提下使用本指导原13则。

如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可以采14用，但是需要提供详细的研究资料和验证资料。

15本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水16平下制定，随着法规和标准的不断完善，以及科学技术的17不断发展，相关内容也将适时进行调整。

1819一、适用范围20强直性脊柱炎是一种慢性炎性疾病，本病常发于青壮21年男性，主要侵犯骶髂关节、脊柱骨突、脊柱旁软组织和22外周关节，可伴发前葡萄膜炎等关节外表现，严重者发生23脊柱畸形和强直。

24HLA-B27基因位于人类第6号染色体短臂HLA基因B 25座，具有高度基因多态性，其表达产物为HLA-B27抗原。

26HLA-B27 抗原表达与强直性脊柱炎高度相关，超过90%的27强直性脊柱炎患者的HLA⁃B27 抗原表达为阳性，而普通人28群中仅5% ~10% 为阳性。

HLA-B27在其他脊柱关节炎疾病29中也有不同的检出，在反应性关节炎中阳性率可达60%-3090%，在银屑病关节炎和炎性肠病关节炎中阳性率均可达3150%-60%。

32HLA-B27约有167个基因亚型，各亚型分布存在地域33和人种差异。

HLA-B*2705是全球分布最广的亚型，被认为34是其他基因亚型的祖基因。

在中国汉族人群中，HLA-35B*2704和HLA-B*2705是主要优势亚型，同时还存在36HLA-B*2702、HLA-B*2703、HLA-B*2706、HLA-B*2707、37HLA-B*2709。

hla-b27遗传方式

hla-b27遗传方式
HLA-B27是人类白细胞抗原系统中的一种基因，它编码了一种
蛋白质，这种蛋白质存在于细胞表面，对免疫系统起着重要作用。

HLA-B27基因的遗传方式是通过遗传物质DNA传递给后代。

具体来说，HLA-B27基因是位于人类染色体6号上的一个基因，因此它是
通过遗传物质DNA在染色体上的传递来遗传给后代的。

在遗传学上，HLA-B27基因是一种显性遗传方式，这意味着只要一个父母携带有HLA-B27基因，他们的后代就有可能携带这一基因。

当一个父母中
至少有一个人携带有HLA-B27基因时，子代有50%的几率携带这一
基因。

同时，HLA-B27基因也可能会通过突变而在家族中传递。

总
的来说，HLA-B27基因的遗传方式是通过DNA在染色体上的传递，
具有显性遗传的特点。

这一遗传方式对于了解特定疾病和遗传疾病
的发病机制具有重要意义。

HLA B27

HLA –B27
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八）HLA-B27的发病机制 — HLA-B27
1、HLA-B27错误折叠
免疫生物学新发现
通过对新合成的B27HCS的进一步观察,发现它是含有更多的高相对分子质量的二硫键连接的复合体,这种复合体主要由 HC-HC同源二聚体和连接着 BiP的HC组成。 BiP是一种ER蛋白伴侣,它主要防止错误折叠的蛋白聚集。更为重要的是， BiP也是细胞用来发现蛋白错误折叠的一个关键感受器。
HLA –B27
--- 相关文献复习
六）HLA-B27的检测方法
3、多聚酶链反应检测法（PCR）优点：实验快捷、特异性高、灵敏度高；缺点：实验条件要求高，易交叉污染。 4、磁珠酶链免疫检测法（IMS-ELISA）优点：标本少、时间短、影响因素少；缺点：新近推出，有待更进一步评价
HLA –B27
HLA –B27
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二）什么是HLA-B27
HLA：Human Leucocyte Antigen 人类白细胞抗原
HLA-B27由两条多肽链组成：一条α链或重链，分子量约44x103 ；另一条链是β链或轻链即β2微球蛋白，分子量约12x103 。其相对分子量约 56kda。 HLA-B27是由HLA-B27基因编码产生的。
综合这些结果提示，内质网和细胞表面二聚体的形成是明显不同的过程，并且具有不同的含义。
HLA –B27
--- 相关文献复习
八）HLA-B27的发病机制 — HLA-B27
3、分子模拟和关节源性肽
免疫生物学新发现
为了解释革兰阴性肠道致病菌与反应性关节炎这样的B27相关疾病的发病机制之间的联系,人们提出了分子模拟假说。 HLA-B27或结合B27的肽被认为是类似于细菌的肽,这样它们就变成了交叉反应抗体和或CD8+T细胞的靶。

HLAB27检测及其临床应用详解

2～4％ 9～50％
AS患病率 0.3% 1％很低
6～12％
AS患者B27阳性率 90～95% 80～100% 22% 57% 80～100%
8
HLA-B27检测方法及评价
➢ 抗原水平
微量细胞毒法 ELISA IMS-ELISA 流式细胞术法
➢ 基因水平
PCR-SSP
9
微量细胞毒法（microlymphocytotoxic test，MLCT）
4
血清阴性脊柱关节病共同特点
➢ 临床上有很多共同或重叠之处：
眼炎，尿道炎，前列腺炎，口腔、肠道和生殖器溃疡结节性红斑，银屑病样皮疹坏死性脓皮病，血栓性静脉炎
➢ 基本病理变化以肌腱端周围和韧带附着于骨的部位为主(附着端炎)而
非滑膜，也可发生在眼、主动脉瓣、肺实质和皮肤，而不同于以滑膜病变为主的类风湿性关节炎，而且无类风湿皮下结节。
5
HLA-B27相关疾病：强直性脊柱炎
Ankylosing Spondylitis，AS
➢ 患病率：0.3%，20-30岁，男女比例 10:1，有家族倾向； ➢ 主要侵犯：中轴关节（骶髂关节、脊柱骨突、脊柱旁软组织）
可伴发外周关节及关节外表现，严重者发生脊柱畸形和关节强直
➢ B27检测可作为有相关症状或高危人群AS早期的筛选方法！ ➢ AS不是RA的一种特殊类型！
12
流式细胞术法
➢ 利用荧光标记的HLA-B27单克隆抗体，与细胞表面的B27抗原结合，使
结合后的淋巴细胞具有一定的荧光强度，这种荧光强度可由流式细胞仪测得的通道值来反映，以其值的高低判断HLA-B27抗原表达百分比，从而判断HLA-B27是否阳性。
➢ 优点：全自动仪器检测，减少了人为因素的影响，重复性高，结果判

HLA-B27

HLA-B27与流式细胞术一、检测HLA-B27的意义HLA抗原是人类主要组织相容性复合体（Major Histocompatibity Complex，MHC）的表达产物，在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应，调节免疫应答的功能。

根据HLA抗原结构，功能与组织分布的不同，可分为三类：Ⅰ类分子为HLA-A、-B、-C系列抗原，广泛分布于各组织有核细胞表面，包括血小板和网织红细胞，成熟的红细胞一般不含HLA抗原；Ⅱ类分子为HLA-D/DR、-DP、-DQ系列抗原，主要在B细胞和抗原提呈细胞上表达，这两类抗原都与移植有关，其中Ⅱ类抗原更为重要；Ⅲ类分子为补体成分。

近年来研究HLA与疾病相关性的资料表明，某些疾病的发生率与一些特殊型别的HLA检出率有关，这些病大多是发病机理不明并伴有免疫功能异常和有遗传倾向性的疾病，因此，分析HLA抗原表达情况不仅有助于了解发病机理，对于疾病的诊断、预防和预后判断都有重要意义。

HLA-B27基因属于Ⅰ型MHC基因，基本上表达在机体中所有含核的细胞上，尤其是淋巴细胞的表面有丰富的含量。

早在二十多年前，人们就已发现HLA-B27抗原的表达与强直性脊椎炎有着高度相关性，超过90%的强直性脊椎炎患者其HLA-B27抗原表达为阳性，普通人群中仅5-10%的为阳性，而强直性脊椎炎由于其症状与许多疾病相似而难以确诊，因此HLA-B27的检测在病情的诊断中有着重要意义。

在脊椎性关节病这一类的疾病中除了强直性脊椎炎以外，还有许多其它的疾病与HLA-B27抗原的表达有着或多或少的相关性，比如说Reiter，s综和症，HLA-B27阳性率为70-90%；银屑病性关节炎，HLA-B27阳性率为50-60%；葡萄膜炎（眼色素层炎），HLA-B27阳性率为40-50%；溃疡性结肠炎伴有关节病，HLA-B27阳性率为5-10%等等，因此HLA-B27的检测在这些疾病的诊断中是一个非常有价值的指标。

HLA-B27检测SOP

HLA-B27检测操作程序一、目的：保证流式细胞仪检测外周血淋巴细胞上HLA-B27表达量检验的工作量，旨在保证HLA-B27检测的正确操作程序和控制检测结果的精确度。

二、修改程序：本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任），方可改动。

三、适用范围：外周血中T淋巴细胞HLA-B27表达量检测。

四、溯源：Anti-HLA-B27 kit(美国BD Biosciences 公司；CA T:340183)五、试验原理：HLA-B27属于1型MHC基因。

基本上表达在机体所有有核细胞上，特别是淋巴细胞表面有丰富的含量。

使用荧光定量标准微球，校正HLA-B27试验条件后，测定样本中T淋巴细胞HLA-B27表达水平。

若HLA-B27表达水平大于标准微球设定MARK,则为阳性结果；若HLA-B27表达水平低于标准微球设定的MARK，则为阴性结果。

六、主要试剂：Anti-HLA-B27 kit(美国BD Biosciences 公司；CA T:340183)其中包括：1、Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE2、HLA-B27 Calibration beads3、FACS Lysing Solution七、试验操作：1、标本采集：使用EDTA-K2抗凝真空管，抽取静脉血2ml。

2、染色和固定细胞：(1)取一只流式专用管，标本管编号A(2)A管加入Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE 10ul(3)再加入全血18ul,混匀。

(4)置室温，避光孵育15min.。

(5)加入FACSLysing溶血液2.0ml,置室温，避光孵育10min。

(6)3000r离心10min，弃上清液。

(7)PBS洗涤细胞两次，3000r离心10min,弃上清液。

(8)PBS或鞘液200ul。

3、上机检测：分析结果：打印试验报告。

八、参考值：HLA-B27：阴性九、临床意义：HLA-B27抗原表达与强直性脊柱炎发病具有高度的疾病相关性。

人白细胞抗原B27HLAB27试剂盒利用方式

人白细胞抗原B27(HLA-B27)试剂盒利用方式检测范围： 96TL-20pmol/L利用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本白细胞抗原B27(HLA-B27)含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞抗原B27(HLA-B27)水平。

用纯化的人白细胞B27(HLA-B27)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞抗原B27(HLA-B27)，再与HRP标记的白细胞B27(HLA-B27)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，通过完全洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的白细胞抗原B27(HLA-B27)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞抗原B27(HLA-B27)浓度。

试剂盒组成标本要求1．标本搜集后及早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

假设不能马上进行实验，可将标本放于-20℃保留，但应幸免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可依照以下图表在小试管中进行稀2.加样：别离设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。

在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。

加样将样品加于酶标板孔底部，尽可能不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤：警惕揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。

7.温育：操作同3。

8.洗涤：操作同5。

HLA-B27磁性酶联免疫检测试剂盒说明书

注意：磁性微珠和血液样本必须混合均匀。
7. 于室温下反应 10 分钟，期间轻拍框架边缘数次，使试剂和样本维持均匀混合。
8. 反应时制备洗液，底物液。洗涤按每孔 1500ul，用去离子水 20 倍稀释。
9. 将板架放于磁板上 2 分钟，用加样枪吸出孔内液体。
10. 每孔加入 250ul 洗液。利用加入时的冲击力使磁性微珠分散，如发现有聚团，请用加样
枪吹散。将板架放于磁板上，2 分钟。
11. 用八道加样枪在远离磁体的微孔侧壁吸弃上清，将液体全部吸干，不留任何液体，但应
注意不能吸到磁性微珠。
12. 重复 9、10 步骤共 5-6 次。
13. 每孔加入底物 A 液、B 液各 50uL。轻拍框架边缘使之充分混合后，室温，避光，10 分
钟观察结果。
14. 如需测量 OD 值，每孔加入 50uL 终止液。
HLA-B27 磁性酶联免疫检测试剂盒说明书
用途 HLA-B27 磁性酶免检测试剂盒是一种定性的免疫酶测定方法，该方法利用磁性分离原理，快速检测人外周血白细胞上是否具有 HLA-B27 抗原。简介 HLA-B27 与强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis,AS）强相关。AS 在我国的患病率为 0.3%，其中 90%-98%的患者 HLA-B27 阳性。所以，B27 的检测对排除 AS 的诊断有辅助作用。本试剂盒提供含有抗 HLA-B27 抗体的磁性微珠，特异性针对人白细胞抗原 B27。原理病人全血样本（EDTA-K3 抗凝）与 HRP 标记的抗细胞抗体同时加入含有 HLA-B27 磁性微珠的微孔中。若白细胞上有 HLA-B27 抗原，经短时孵育，磁性微珠与白细胞结合，此时 HRP 标记的抗体连接到细胞上。洗涤后，微珠、细胞和酶被保留下来。若白细胞上没有 B27 抗原，通过洗涤，细胞和酶均被清洗掉。之后加入酶底物液显色，450nm 读取光密度值。试剂

B27综述

HLA-B27基因亚型及其相关疾病综述1 HLA-B27分子及其基因亚型1.1 HLA-B27分子结构HLA抗原是人类主要组织相容性复合体(Major histocompatibility Complex．MHC)的表达产物，在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应，调节免疫应答的功能[1]。

HLA—B27分子，属于主要组织相容性复合体I(MHC I)类分子，结构类同其他MHC 1分子，由两条多肽链组成，一条α链或重链，分子量约为44×103，包括αl、α2、和α3三个结构域；另一条β链或轻链即αp2微球蛋白(分子量约12×103)，二者结合共同组成B27分子，其相对分子量约56×103。

HLA一B27重链分子为一种穿膜蛋白[2]，分为三部分：①胞外区，含α1、α2和α3三个结构域，分别由1—90、90一182、182—274位氨基酸组成；②跨膜区，由274—313位氨基酸组成；③胞内区，有B*313—338位氨基酸组成，起信号传导作用。

α1和α2构成一个抗原结构凹槽，在凹槽中有A、B、C、D、E、F共6个袋状结构，分别容纳结合抗原肽的P2、P3、P7、P8位氨基酸残基和两个末端残基深入的侧链，从而固定抗原肽与B27分子的结合。

1.2 HLA-B27基因及其亚型分布HLA—B27基因是HLA—I类分子B位点上的等位基因，，相对分子量约56 kda，位于人的第六号染色体的短臂上，6P21，31，由6个外显子和7个内含子组成，编码分子量为44×103的糖蛋白。

HLA—B27等位基因呈多态性，它们之间仅是一个或数个氨基酸的差别，且主要集中在αl、α2结构区内。

近年随着HLA一B27分型技术提高，不断有新的HLA—B27等位基因发现。

到2002年WHO正式命名的HLA—B27等位基因达到了24个，即B*2701一B*2725，其中不包括B*2722等位基因在内(研究表明，B*2722与B*2706亚型具有相同的基因序列，因此在2002年4月B*2722作为一个正式的WHO等位基因被删除，以致在B*2701到B*2725这一组等位基因中出现了裂孔现象) [2,3]。

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ＲＯＮＧＱｉ－ｊｉ，ＳＵＮＷｅｉ — ｈａｏ，ＸＵＲａｎ — ｘｉｎｇ，ＩＵＤｏｎｇ — ｈａｌ
（＊ＰＰｅｏｐｌｅＳＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＣｉｘｉ，Ｃｉｘｉ，Ｚｅｊｉａｎｇ３１５３００，Ｃｈｉｎａ）
ｐａｒｅｄｗｉｔｈｍｕｌｔｉｐｌｅｍｅｔｈｏｄｓ，ａｎｄｔｈｅａｎｋｙｌｏｓｉｎｇｓｐｏｎｄｙｌｉｔｉｓａｎｄｒｅｌａｔｅｄｄｉｓｅａｓｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄ；１００ｈｅａｌｔｈｙｐｅｏ — ｐｉｅｗｈｏｒｅｃｅｉｖｅｄｔｈｅｐｈｙｓｉｃａｌｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎｄｕｒｉｎｇｔｈｅｓａｍｅｐｅｒｉｏｄｗｅｒｅｃｈｏｓｅｎａｓｔｈｅｎｅｇａｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌｓ，ａｎｄｔｈｅＳＹＢＲｍｅｔｈｏｄａｎｄＴａｑｍａｎｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｏｂｅｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｗｅｒｅｅｍｐｌｏｙｅｄ．ＲＥＳＵＬＴＳ
ｆｏｒｒｏｕｔｉｎｅｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｎｋｙｌｏｓｉｎｇｓｐｏｎｄｙｌｉｔｉｓｇｅｎｅ（ＨＬＡ－Ｂ２７）ｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｐｒｉｍａｒｙｂａｓｉｓｏｆｒｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆ
ＴａｑｍａｎｐｒｏｂｅＳＯａｓｔｏｐｒｏｖｉｄｅｇｕｉｄａｎｃｅｆｏｒｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｅａｔｍｅｎｔ．ＭＥＴＨＯＤＳＦｒｏｍＪａｎ２０１２ｔｏＮｏｖ２０１２，ａｔｏｔａｌｏｆ
ＰＣＲ（ＦＱ－ＰＣＲ）方法，为临床治疗提供参考依据。方法
２０１２年１一ｌ１月收集的医院强直性脊柱炎２８２例，优化
各种ＰＣＲ条件，并与多种方法比较，检测强直性脊柱炎及相关的各类疾病，同期选择１００名健康体检人群作为阴性对照，采用ＳＹＢＲ法和Ｔａｑｍａｎ特异性探针荧光定量检测法。结果ＦＱ＿ＰＣＲ生成动力学有关的ＰＣＲ扩增曲线由荧光信号强度周期数，ＨＬＡ－Ｂ２７的标准曲线是循环阚值之间线性关系（ｃｔ）和起始拷贝数；高度相关（Ｏ．９９９）
２８２ｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈａｎｋｙｌｏｓｉｎｇｓｐｏｎｄｙｌｉｔｉｓｗｅｒｅｅｎｒｏｌｌｅｄｉｎｔｈｅｓｔｕｄｙ．ＴｈｅＰＣＲｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅｏｐｔｉｍｉｚｅｄａｎｄｅｏｍ—
中华医院感染学杂志２０１５年第２５卷第１６期ＣｈｉｎＪＮｏｓｏｃｏｍｉｏｌＶｏ１．２５Ｎｏ．１６２０１５
・３６Ｏ１・
ｄｏｉ：１０．１１８１６／ｃｎ．ｎｉ．２０１５－１４０５４７
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯＢＪＥＣＴＩＶＥＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｎｏｖｅｌｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ－ｃｈａｉｎ－ｒｅａｃｔｉｏｎ（ＦＱ－ＰＣＲ）ｍｅｔｈｏｄ
文献标识码：Ａ文章编号：１００５ — ４５２９（２０１５）１６－３６０１－０４
关键词：ＨＬＡ＿Ｂ２７基因；荧光定量；聚合酶链反应；流式细胞
Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ‘ ｃｈａｉｎ。。ｒｅａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｔｏｑｕａｎｔｉｆｙＨＬＡ－Ｂ２７ｇｅｎｅ：ａｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｓｔｕｄｙｏｆｍｕｌｔｉｐｌｅｍｅｔｈｏｄｓ
浙江湖州３１３０００；３．宁波市第六医院检验科，浙江宁波３１５０１０）
摘要：目的在原研究的基础上，重新合成Ｔａｑｍａｎ探针，建立一种新的强直性脊柱炎基因ＨＬＡ－Ｂ２７荧光定量
揭示ＦＱ＿ＰＣＲ的可靠性；确立的Ｔａｑｍａｎ法有良好的线性和精度并与流式细胞和ＳＹＢＲ法比较，具有良好的相关
性（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论
中图分类号：Ｒ４４６
新确立的荧光定量ＰＣＲ（Ｔａｑｍａｎ）比其他方法更可靠准确，并有很好的应用价值。
・论著
ＨＬＢ２７基因荧光定量方法的确立与多种方法比较研究
戎奇吉，孙讳浩，徐冉行。，刘东海。
（１．慈溪市人民医院检验科，浙江慈溪３１５３００；２．中国科学院上海生命科学研究院湖州营养与健产业创新中心，