Waters LCMS液质联用培训讲义
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液质联用安装培训电子版
液质联用现场安装培训一、关机：先卸掉真空再停电1、退出软件→打开网页（http:192.168.254.101）→Servic e→Vacuumcontrol→Vent vacuum System（10-20min中放完）→关总电源二、开机：打开电源抽真空（大约4-5个小时），若有异常情况，打开网页，点击Star vacuum system（氦气不关）三、Tracontrol（质谱控制软件）查看真空情况：options→vacuum system：Fore：3-7+00，High：至少达到1.0*10-5.四、氦气出口压力：保持在0.6Mpa。
Notice：换氦气后，要对氦气进行充管：Options→vacuum system→Flush Helium Line （至少3-5遍）Helium后面的方框打钩。
五、仪器的三种状态1、Operate：运行状态：进样及看谱图时点击。
2、Standby：待机状态：不用时可将Nebulizer设为2.0psi以下，以节省氮气。
3、Shutdown：关机状态：为保证气体管路电磁阀关闭，换液氮时需将仪器处于该状态下，加液氮后再点击Stangby。
4、Standby参数的设置：Options→Standby前面显示的是设定值，后面显示的是实测值，平时不做实验的时候可将气质设小一点，如：Nebulizer：2.0；ry Gas：2.0；Dry Temp：220，设置好参数后，点击Apply→Close→Yes生效。
六、进样部分参数设置在operate状态下，选择手动进样。
1、Source □方框打钩，Sying pump灯变绿是正常状态。
一般情况下，参数设置如下：Flow rate 240.00 ul/h,点击Fast forward，进样针：Hamilton。
2、标准校正液的配制：95%质谱纯的乙腈（Acetonitrile）与超纯水1:50或者1:100的比例配制。
Waters LC MS培训讲义
Waters 四极杆质谱培训
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碰撞压力 3×10-3mbar
定性实验 调谐仪器
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定性实验 调谐仪器
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50
Waters 四极杆质谱培训
仪器质量校正
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2. 在质量分析器页面（Analyzer）设定以下的数值，括 号内的数值即为设定值：
• LM Resolution 1（15.0） HM Resolution 1（15.0） Ion Energy 1（0.5） • Entrance（50） Collision（2） Exit（50） • LM Resolution 2（15.0） HM Resolution 2（15.0） Ion Energy 2（0.5）
:609 (CV=45)
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定性实验 调谐仪器
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2．子离子扫描 daughter scan
Argon gas
Collision
MS1
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仪器质量校正
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5. 从下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯，从 下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯校正质 量范围两千以内可选择 Naics2 。确认后按开始键。
waters液相色谱质谱联用的原理应用课件ppt
影响分子量测定的因素
1）pH的影响：正离子方式 pH要低些，负离子方式pH要高些，
除对离子化有影响外，还影响LC的峰形。 2）气流和温度：当水含量高及流量大时要相应增加。 3）溶剂和缓冲液流量：流速适当高可以提高出峰的灵敏度。 4）溶剂和缓冲液的类型：通常正离子用甲醇好，负离子乙腈 好些 5）选择合适的液相色谱类型：正相、反相、选择合适的色谱 柱 6）合适的电压：DP电压高时，样品在源内分解或碎裂；高 DP 电压时回使多电荷离子比例低，多聚体也减少 7）样品结构和性质 8）杂质的影响：溶剂的纯度、水的纯净程度等。当成分复杂， 杂质太多时，竞争使被测物离子化不好，同时使LC分离不好 9）样品浓度不够，有时需要浓缩
m/z149, 管路中邻苯二甲酸酯的酸酐, C8H4O3H+,149.0233 m/z 288, 2mm 离心管的产生的特征离子
m/z 279, 管路中邻苯二甲酸二丁酯 C16H22O4H+, 279.1591
m/z 316, 2mm 离心管的产生的特征离子 m/z 384, 瓶的光稳定剂产生的离子
d) 样品浓度不够
e）pH值不合适 f）样品在源内分解或碎裂
目标化合物分析
（1）选择离子监测（SIM）
SIM 用于检测已知或目标化合物，比全扫 描方式能得到更高的灵敏度。这种数据采集的 方式一般用在定量目标化合物之前，而且往往 需要已知化合物的性质。 若几种目标化合物用同样的数据采集方式 监测，那么可以同时测定几种离子.
m/z391, 管路中邻苯二甲酸二辛酯, C24H38O4H+, 391.2843
m/z413, 邻苯二甲酸二辛酯+钠, C24H38O4Na+, 413.2668 m/z 538, 乙酸+氧 +铁（喷雾管）, Fe3O(O2CCH3)6,
lcms液质联用方法开发_沃特斯培训教材_
pH 值的影响
pH 值的影响
溶剂
水 乙腈 甲醇 异丙醇
一般所用溶剂和缓冲盐
缓冲盐
甲酸 乙酸 氢氧化胺 乙酸胺*
* 缓冲盐浓度应不超过10 mM 。
溶剂和添加剂的选择
• TFA（三氟乙酸）- 用于分析蛋白和多肽
– 它能抑制ESI+电离至少 0.1%。 – 它将很大程度上抑制ESI-电离。
• TEA（三乙胺）
NH
O
N
CH3
Cl
H3C
O
Cl
Linuron 利谷隆+ve ion
(M+H)+ (M-H)-
CH3 H3C
CH3 O
OH
Ibuprofen布洛芬 -ve ion
正离子方式 – 分析碱性化合物
用有机酸调整 pH 值 如：甲酸或乙酸
负离子方式 – 分析酸性化合物
用碱调整 pH 值 如：氢氧化铵/氨水
pH 值的影响
– 有丰富的m/z 102离子存在（三乙胺加质子的峰）。 – 抑制弱碱性化合物的ESI+电离，但能提高弱碱性化合物的
ESI-电离。
• THF（四氢呋喃）
– 100% 的四氢呋喃可能会着火。 – 当喷雾气是空气时，在APCI电离方式，不能用四氢呋喃。 – 腐蚀PEEK管
不恰当的溶剂和缓冲盐
• 不挥发性缓冲盐 (磷酸盐、硼酸盐、柠檬酸 盐等)－堵塞管路和探头
LC流速一般根据色谱柱规格和电离方式来确定
0.5-2 ml/min
3.9-4.6 mm i.d.
0.1-0.3 ml/min
2.1 mm i.d.
40-50 µl/min
1 mm i.d.
< 10 µl/min
WatersLCMS液质联用培训讲义
• 此为第一段和第二段扫描模式参数。这是因为在进行质量
校正的时候必须同时校正两个质量分析器的三种模式（静 态扫描、动态扫描、扫描速率补偿）的缘故。
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仪器质量校正
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6. 混合扫描
• 样品：对羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸丙酯/对羟
基苯甲酸丁酯与氨基酸混合液。
• 要求：一次实验同时完成多种扫描组合方式 • 羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸丙酯/对羟基苯甲酸
丁酯采用母离子扫描
• 氨基酸采用中性丢失扫描
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5. 从下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯，从 下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯校正质 量范围两千以内可选择 Naics2 。确认后按开始键。
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实验要点:通过调谐仪器各项参数,不同化合物ESI/APCI的响应,毛细管电压,锥 孔电压,RF lens,离子能量,去溶剂化气温度,去溶剂化气流量,反吹气流量等参 数,找出目标化合物最佳响应参数,发挥最佳仪器检测灵敏度.
1．全扫描 full scan
Collision
MS1
Cell
MS2
Scanning (m/z M)
:609 (CV=45)
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校正的时候必须同时校正两个质量分析器的三种模式（静 态扫描、动态扫描、扫描速率补偿）的缘故。
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6. 混合扫描
• 样品：对羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸丙酯/对羟
基苯甲酸丁酯与氨基酸混合液。
• 要求：一次实验同时完成多种扫描组合方式 • 羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸丙酯/对羟基苯甲酸
丁酯采用母离子扫描
• 氨基酸采用中性丢失扫描
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5. 从下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯，从 下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯校正质 量范围两千以内可选择 Naics2 。确认后按开始键。
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实验要点:通过调谐仪器各项参数,不同化合物ESI/APCI的响应,毛细管电压,锥 孔电压,RF lens,离子能量,去溶剂化气温度,去溶剂化气流量,反吹气流量等参 数,找出目标化合物最佳响应参数,发挥最佳仪器检测灵敏度.
1．全扫描 full scan
Collision
MS1
Cell
MS2
Scanning (m/z M)
:609 (CV=45)
Waters 四极杆质谱培训
液相色谱质谱联用PPT课件
4、有机溶剂
基本匹配
5、色谱柱
离子交换柱（高离子强度）、蔬水相互作用色谱（盐浓度梯度） 17
6、 柱后修饰 作用： 调节pH值以优化正负离子检测；
添加异丙醇以利于含水溶剂的去溶剂化、稀释缓冲盐； 添加醋酸钠（50mol/L)使缺乏或只有弱质子化位点的样品阳离子化(Ｍ＋Ｎa+) 填充毛细管柱色谱或毛细管电泳，需在柱后添加适当溶剂（补足液流）以达到稳定的喷
6
ESI 实验条件优化 １、待测物质在溶液中的状态（溶液化学）
待测物质在供试品溶液中以离子状态存在，可提高生成气相离子的效率，提高检测灵敏度。
B + RCOOH
BH++RCOO-
HA + NH3
A- +NH4+
2、 溶剂的表面张力
纯水，因表面张力高，所需起始电位Uon高，易产生放电现象； 常用水－甲醇（50:50)溶剂，同时黏度也下降，有利于雾化．
物(包括蛋白、多肽、多糖、多聚物等)，分析范围广。 LC/MS 联用的主要困难
2
LC-MS 接口 (Interface)类型
ESI (electrospray ionization) API (atmosphere pressure ionization)
APCI(atmospheric chemical ionization)
中等流速：
气动辅助 （离子喷雾）
50-100 m
1 ~200L/min
微柱液相色谱与MS在线联用； 适合于既要高灵敏度又需要较大柱容量的工作：如药物代谢定性定量分析（1~２.1mm)
15
高流速：
气动辅助＋热辅助
500℃ 200 ~ 2m不超过 50℃，所以有机化合物不会热降解．
基本匹配
5、色谱柱
离子交换柱（高离子强度）、蔬水相互作用色谱（盐浓度梯度） 17
6、 柱后修饰 作用： 调节pH值以优化正负离子检测；
添加异丙醇以利于含水溶剂的去溶剂化、稀释缓冲盐； 添加醋酸钠（50mol/L)使缺乏或只有弱质子化位点的样品阳离子化(Ｍ＋Ｎa+) 填充毛细管柱色谱或毛细管电泳，需在柱后添加适当溶剂（补足液流）以达到稳定的喷
6
ESI 实验条件优化 １、待测物质在溶液中的状态（溶液化学）
待测物质在供试品溶液中以离子状态存在，可提高生成气相离子的效率，提高检测灵敏度。
B + RCOOH
BH++RCOO-
HA + NH3
A- +NH4+
2、 溶剂的表面张力
纯水，因表面张力高，所需起始电位Uon高，易产生放电现象； 常用水－甲醇（50:50)溶剂，同时黏度也下降，有利于雾化．
物(包括蛋白、多肽、多糖、多聚物等)，分析范围广。 LC/MS 联用的主要困难
2
LC-MS 接口 (Interface)类型
ESI (electrospray ionization) API (atmosphere pressure ionization)
APCI(atmospheric chemical ionization)
中等流速：
气动辅助 （离子喷雾）
50-100 m
1 ~200L/min
微柱液相色谱与MS在线联用； 适合于既要高灵敏度又需要较大柱容量的工作：如药物代谢定性定量分析（1~２.1mm)
15
高流速：
气动辅助＋热辅助
500℃ 200 ~ 2m不超过 50℃，所以有机化合物不会热降解．
《LCMS基础》课件
1 安全操作规程和实验室注意事项
操作过程中需要注意的安全细节和实验室规章制度，易犯的错误和解决方案。
2 常见问题解答和故障排除
常见问题的解答和故障排除对于实验的顺利进行很重要。
实验案例分享
LCMS的应用实例
实验结果和分析
通过以下样品研究案例来展示LCMS技术的实际 应用领域，涵盖医学、环境、农业和食品等方面。
质谱仪器参数设置
掌握质谱参数设置，可优化谱图分辨率，提高 质谱信号响应和信噪比。
结果解读和数据处理
1
质谱数据的分析和解释掌握质谱数据分析方法，对图的解释、分离结果的评估十分重要。
2
数据处理软件的使用和技巧
使用数据处理软件可以提高实验效率和分析结果的可靠性，需要掌握基本的软件 使用技巧。
实验操作和注意事项
《LCMS基础》PPT课件
这份PPT课件将为您介绍液质联用技术的基础知识，以及如何正确操作仪器、 解析结果和了解实验案例。
什么是LCMS？
定义
液质联用技术是将高效液相色谱和质谱联用的一种分析技术。它可以用于定性和定量分析， 检测样品中微量的化合物。
优势
LCMS技术能够提供更准确、更灵敏和更快速的实验结果，其应用领域广泛，涵盖从生物医 药到环境科学的各种研究领域。
介绍不同类型的分析结果，以及如何分析和解释 实验数据以提高实验结果的可靠性。
总结与展望
1
LCMS的发展趋势
总结当前LCMS技术的最新进展和未来发展趋势。
组成
LCMS系统通常包括前处理模块、液相色谱仪和质谱仪三个组成部分。在LCMS分析中，样 品被分离、纯化和检测。
LCMS操作
样品准备和进样
样品制备和加样过程对实验结果影响很大。需 要掌握常见样品制备方法和注意事项。
操作过程中需要注意的安全细节和实验室规章制度，易犯的错误和解决方案。
2 常见问题解答和故障排除
常见问题的解答和故障排除对于实验的顺利进行很重要。
实验案例分享
LCMS的应用实例
实验结果和分析
通过以下样品研究案例来展示LCMS技术的实际 应用领域，涵盖医学、环境、农业和食品等方面。
质谱仪器参数设置
掌握质谱参数设置，可优化谱图分辨率，提高 质谱信号响应和信噪比。
结果解读和数据处理
1
质谱数据的分析和解释掌握质谱数据分析方法，对图的解释、分离结果的评估十分重要。
2
数据处理软件的使用和技巧
使用数据处理软件可以提高实验效率和分析结果的可靠性，需要掌握基本的软件 使用技巧。
实验操作和注意事项
《LCMS基础》PPT课件
这份PPT课件将为您介绍液质联用技术的基础知识，以及如何正确操作仪器、 解析结果和了解实验案例。
什么是LCMS？
定义
液质联用技术是将高效液相色谱和质谱联用的一种分析技术。它可以用于定性和定量分析， 检测样品中微量的化合物。
优势
LCMS技术能够提供更准确、更灵敏和更快速的实验结果，其应用领域广泛，涵盖从生物医 药到环境科学的各种研究领域。
介绍不同类型的分析结果，以及如何分析和解释 实验数据以提高实验结果的可靠性。
总结与展望
1
LCMS的发展趋势
总结当前LCMS技术的最新进展和未来发展趋势。
组成
LCMS系统通常包括前处理模块、液相色谱仪和质谱仪三个组成部分。在LCMS分析中，样 品被分离、纯化和检测。
LCMS操作
样品准备和进样
样品制备和加样过程对实验结果影响很大。需 要掌握常见样品制备方法和注意事项。
lcms液质联用方法开发_沃特斯培训教材_
– 有丰富的m/z 102离子存在（三乙胺加质子的峰）。 – 抑制弱碱性化合物的ESI+电离，但能提高弱碱性化合物的
ESI-电离。
• THF（四氢呋喃）
– 100% 的四氢呋喃可能会着火。 – 当喷雾气是空气时，在APCI电离方式，不能用四氢呋喃。 – 腐蚀PEEK管
不恰当的溶剂和缓冲盐
• 不挥发性缓冲盐 (磷酸盐、硼酸盐、柠檬酸 盐等)－堵塞管路和探头
• 表面活性剂－抑制电离 • 无机酸 (硫酸、磷酸等)－腐蚀
• 腐蚀 PEEK
– HNO3 – H2SO4
用PEEK管时注意溶剂的使用
• 溶胀 PEEK
– DMSO – THF – CH2Cl2
溶样的溶剂 – 乙腈／水
利谷隆
溶样的溶剂 –甲醇／水
溶剂的选择
用同位素模型算同位素峰
两种不同有机溶剂的比较
NH
O
N
CH3
Cl
H3C
O
Cl
Linuron 利谷隆+ve ion
(M+H)+ (M-H)-
CH3 H3C
CH3 O
OH
Ibuprofen布洛芬 -ve ion
正离子方式 – 分析碱性化合物
用有机酸调整 pH 值 如：甲酸或乙酸
负离子方式 – 分析酸性化合物
用碱调整 pH 值 如：氢氧化铵/氨水
pH 值的影响
流动相配比的影响
等度 LC
HPLC等度和梯度方法比较
梯度 LC
样品全溶解于水中
分析物溶解
样品溶解于流动相中
流速对大气压电离的影响
Relative intensity
100 50
0
0.5
ESI-电离。
• THF（四氢呋喃）
– 100% 的四氢呋喃可能会着火。 – 当喷雾气是空气时，在APCI电离方式，不能用四氢呋喃。 – 腐蚀PEEK管
不恰当的溶剂和缓冲盐
• 不挥发性缓冲盐 (磷酸盐、硼酸盐、柠檬酸 盐等)－堵塞管路和探头
• 表面活性剂－抑制电离 • 无机酸 (硫酸、磷酸等)－腐蚀
• 腐蚀 PEEK
– HNO3 – H2SO4
用PEEK管时注意溶剂的使用
• 溶胀 PEEK
– DMSO – THF – CH2Cl2
溶样的溶剂 – 乙腈／水
利谷隆
溶样的溶剂 –甲醇／水
溶剂的选择
用同位素模型算同位素峰
两种不同有机溶剂的比较
NH
O
N
CH3
Cl
H3C
O
Cl
Linuron 利谷隆+ve ion
(M+H)+ (M-H)-
CH3 H3C
CH3 O
OH
Ibuprofen布洛芬 -ve ion
正离子方式 – 分析碱性化合物
用有机酸调整 pH 值 如：甲酸或乙酸
负离子方式 – 分析酸性化合物
用碱调整 pH 值 如：氢氧化铵/氨水
pH 值的影响
流动相配比的影响
等度 LC
HPLC等度和梯度方法比较
梯度 LC
样品全溶解于水中
分析物溶解
样品溶解于流动相中
流速对大气压电离的影响
Relative intensity
100 50
0
0.5
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仪器质量校正
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10. 输入所欲储存之文件名称后按存盘即可，确认所 有的扫描模式都已经被校正。
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4．母离子扫描
MS1
定性实验 调谐仪器
Collision Cell
Argon gas MS2
PPrreeccuurrssoorr
PPrroodduuccttss
Scanning
Static m/z 92
样品：对羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸丙酯/对羟基苯甲酸丁酯实验 与氨基酸混合液。 调谐最佳实验锥孔电压（CV）/碰撞能量（CE），对羟基苯甲酸甲 酯/对羟基苯甲酸乙酯/对羟基苯甲酸丁酯三种化合物有共同碎片92， 可进行母离子扫描将其与氨基酸区别开。
仪器质量校正
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仪器质量校正
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8. 按OK键后会跳出步骤6的自动校正选单，此时 按此页面OK键就会开始进行质量校正。
9. 当所有的校正都完成后，将校正的结果储存起 来，从质量校正页面的档案（File）选取另存新 档（Save As）。输入所欲储存之文件名称后按 OK即可。
Cell
MS2
Products
Scanning (m/z M-46Da)
样品：混合氨基酸实验 中性丢失46(甲酸) 中性丢失63(甲酸+NH3)
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• 常见17种混合氨基酸m/z • 天门冬氨酸(Asp或D) • 丝氨酸(Ser或S) • 谷氨酸(Glu或E) • 甘氨酸(Gly或G) • *组氨酸(His或H) • *精氨酸(Arg或R) • 苏氨酸(Thr或T) • 丙氨酸(Ala或A) • ●脯氨酸(Pro或P) • 半胱氨酸(Cys或C) • ▼酪氨酸(Tyr或Y) • 缬氨酸(Val或V) • 蛋氨酸(Met或M) • *赖氨酸(Lys或K) • 异亮氨酸(Ile或I) • 亮氨酸(Leu或L) • ▼苯丙氨酸(Phe或F)
:609 (CV=45)
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定性实验 调谐仪器
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2．子离子扫描 daughter scan
Argon gas
Collision
MS1
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6. 混合扫描
• 样品：对羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸丙酯/对羟
基苯甲酸丁酯与氨基酸混合液。
• 要求：一次实验同时完成多种扫描组合方式 • 羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸丙酯/对羟基苯甲酸
丁酯采用母离子扫描
• 氨基酸采用中性丢失扫描
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MRM(MS /MS)
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parent scan(MS/MS),neutral loss scan(MS/MS) 实验参数设置建议如下：
parent scan(MS/MS)
neutral loss scan(MS/MS)
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碰撞压力 3×10-3mbar
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RF only
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• 样品： 利血平标样,调谐最佳实验锥孔cone
voltage(CV)、毛细管电压、RF lens、离子能量等参数 ，进行全扫描获最大分子离子峰609。
• 样品：利血平1ppm (乙腈：水=1:1配置) ESI + scan
在质谱调机页面（MS Tune）监看四个扫描质量： 172.9 ,622.6 ,1072.2 , 1971.6
确认讯号良好及注射针内样品量充足!
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实验要点:通过调谐仪器各项参数,不同化合物ESI/APCI的响应,毛细管电压,锥 孔电压,RF lens,离子能量,去溶剂化气温度,去溶剂化气流量,反吹气流量等参 数,找出目标化合物最佳响应参数,发挥最佳仪器检测灵敏度.
1．全扫描 full scan
Collision
MS1
Cell
MS2
Scanning (m/z M)
• 此为第一段和第二段扫描模式参数。这是因为在进行质量
校正的时候必须同时校正两个质量分析器的三种模式（静 态扫描、动态扫描、扫描速率补偿）的缘故。
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仪器质量校正
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定性实验 调谐仪器
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Full scan(MS),daughter scan(MS/MS),MRM 实验参数设置建议如下：
Full scan(MS)
daughter scan(MS/MS)
Quattro LC/Micro 液质联用培训讲义
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• 仪器质量校正 • 定性实验 调谐仪器 • 定量实验 • 维护及故障排除 • 常用备件号
内容
Waters 四极杆质谱培训
仪器质量校正
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1. 注射泵注入校正溶液，以碘化钠铯（异丙醇/水 = 1：1, NaI 2ug/L , CsI 50ng/L）溶液为例，流速5ul/min
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定性实验 调谐仪器
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定性实验 调谐仪器
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5. 中性丢失扫描neutral loss：
MS1
Precursor
Scanning (m/z M)
Argon gas Collision
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5. 从下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯，从 下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯校正质 量范围两千以内可选择 Naics2 。确认后按开始键。
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Cell
MS2
Precursor
Products
Static (m/z 609.1)
Scanning
利血平标样,根据全扫描获得最佳实验锥孔CV、毛细管电压、RF lens、 离子能量等参数，调谐碰撞能量collision energy (CE)、碰撞压力，进行
子离子扫描实验准备。 Daughter scan：609/195，448，397，174
3. 在质谱调机页面（MS Tune）选择校正仪器以开启 的质量校正页面。
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仪器质量校正
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4. 开启质量校正页面后，质量校正前请先确定目前仪器处 于未校正的状态，所有六种校正都为未校正（No Calibration），若不然则开启一个未校正（Uncal.cal）的 档案。
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11. 根据实验要求，分别按上述步骤实验LM/HM=15 ，LM/HM=14，LM/HM=13三条校正曲线。
用途:根据实验需求分别调用不同分辨率的校正曲线.
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定性实验 调谐仪器
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50
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2. 在质量分析器页面（Analyzer）设定以下的数值，括 号内的数值即为设定值：
• LM Resolution 1（15.0） HM Resolution 1（15.0） Ion Energy 1（0.5） • Entrance（50） Collision（2） Exit（50） • LM Resolution 2（15.0） HM Resolution 2（15.0） Ion Energy 2（0.5）
3. 多反应监控MRM
MS1
Argon gas Collision
Cell
MS2
Precursors
Static m/z 609.1
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10. 输入所欲储存之文件名称后按存盘即可，确认所 有的扫描模式都已经被校正。
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4．母离子扫描
MS1
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Collision Cell
Argon gas MS2
PPrreeccuurrssoorr
PPrroodduuccttss
Scanning
Static m/z 92
样品：对羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸丙酯/对羟基苯甲酸丁酯实验 与氨基酸混合液。 调谐最佳实验锥孔电压（CV）/碰撞能量（CE），对羟基苯甲酸甲 酯/对羟基苯甲酸乙酯/对羟基苯甲酸丁酯三种化合物有共同碎片92， 可进行母离子扫描将其与氨基酸区别开。
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8. 按OK键后会跳出步骤6的自动校正选单，此时 按此页面OK键就会开始进行质量校正。
9. 当所有的校正都完成后，将校正的结果储存起 来，从质量校正页面的档案（File）选取另存新 档（Save As）。输入所欲储存之文件名称后按 OK即可。
Cell
MS2
Products
Scanning (m/z M-46Da)
样品：混合氨基酸实验 中性丢失46(甲酸) 中性丢失63(甲酸+NH3)
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• 常见17种混合氨基酸m/z • 天门冬氨酸(Asp或D) • 丝氨酸(Ser或S) • 谷氨酸(Glu或E) • 甘氨酸(Gly或G) • *组氨酸(His或H) • *精氨酸(Arg或R) • 苏氨酸(Thr或T) • 丙氨酸(Ala或A) • ●脯氨酸(Pro或P) • 半胱氨酸(Cys或C) • ▼酪氨酸(Tyr或Y) • 缬氨酸(Val或V) • 蛋氨酸(Met或M) • *赖氨酸(Lys或K) • 异亮氨酸(Ile或I) • 亮氨酸(Leu或L) • ▼苯丙氨酸(Phe或F)
:609 (CV=45)
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2．子离子扫描 daughter scan
Argon gas
Collision
MS1
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6. 混合扫描
• 样品：对羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸丙酯/对羟
基苯甲酸丁酯与氨基酸混合液。
• 要求：一次实验同时完成多种扫描组合方式 • 羟基苯甲酸甲酯/对羟基苯甲酸丙酯/对羟基苯甲酸
丁酯采用母离子扫描
• 氨基酸采用中性丢失扫描
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MRM(MS /MS)
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parent scan(MS/MS),neutral loss scan(MS/MS) 实验参数设置建议如下：
parent scan(MS/MS)
neutral loss scan(MS/MS)
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碰撞压力 3×10-3mbar
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RF only
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• 样品： 利血平标样,调谐最佳实验锥孔cone
voltage(CV)、毛细管电压、RF lens、离子能量等参数 ，进行全扫描获最大分子离子峰609。
• 样品：利血平1ppm (乙腈：水=1:1配置) ESI + scan
在质谱调机页面（MS Tune）监看四个扫描质量： 172.9 ,622.6 ,1072.2 , 1971.6
确认讯号良好及注射针内样品量充足!
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实验要点:通过调谐仪器各项参数,不同化合物ESI/APCI的响应,毛细管电压,锥 孔电压,RF lens,离子能量,去溶剂化气温度,去溶剂化气流量,反吹气流量等参 数,找出目标化合物最佳响应参数,发挥最佳仪器检测灵敏度.
1．全扫描 full scan
Collision
MS1
Cell
MS2
Scanning (m/z M)
• 此为第一段和第二段扫描模式参数。这是因为在进行质量
校正的时候必须同时校正两个质量分析器的三种模式（静 态扫描、动态扫描、扫描速率补偿）的缘故。
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Full scan(MS),daughter scan(MS/MS),MRM 实验参数设置建议如下：
Full scan(MS)
daughter scan(MS/MS)
Quattro LC/Micro 液质联用培训讲义
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• 仪器质量校正 • 定性实验 调谐仪器 • 定量实验 • 维护及故障排除 • 常用备件号
内容
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1. 注射泵注入校正溶液，以碘化钠铯（异丙醇/水 = 1：1, NaI 2ug/L , CsI 50ng/L）溶液为例，流速5ul/min
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5. 中性丢失扫描neutral loss：
MS1
Precursor
Scanning (m/z M)
Argon gas Collision
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5. 从下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯，从 下拉式选单选择适当的参考档案，如以碘化钠铯校正质 量范围两千以内可选择 Naics2 。确认后按开始键。
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Cell
MS2
Precursor
Products
Static (m/z 609.1)
Scanning
利血平标样,根据全扫描获得最佳实验锥孔CV、毛细管电压、RF lens、 离子能量等参数，调谐碰撞能量collision energy (CE)、碰撞压力，进行
子离子扫描实验准备。 Daughter scan：609/195，448，397，174
3. 在质谱调机页面（MS Tune）选择校正仪器以开启 的质量校正页面。
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2. 在质量分析器页面（Analyzer）设定以下的数值，括 号内的数值即为设定值：
• LM Resolution 1（15.0） HM Resolution 1（15.0） Ion Energy 1（0.5） • Entrance（50） Collision（2） Exit（50） • LM Resolution 2（15.0） HM Resolution 2（15.0） Ion Energy 2（0.5）
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