苏教版高中生物选修1-1.1.1 大肠杆菌的接种与分离培养-教案设计
苏教版高中生物选修一 边做边学 大肠杆菌的接种与分离培养 (共20张PPT)
2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养 基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使 培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖 上的水珠落入培养基，造成污染。 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖 与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？ 为什么？
3．尝试说说天然培养基和合成培养基的优缺点？ 二者共有 水 、 碳源 、 氮源 、无机盐 四类
营养成分。此外需要根据拟培养的微生物的不同需 要，有时要加入 维生素 等特殊营养物质，并调 节 PH 。
【开拓视野】有机营养成分及其作用
（1）碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等含碳有机物， 构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。 （2）氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋 白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢 物等。 （3）生长因子：某些微生物正常生长代谢中必 须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨 基酸、碱基、维生素等。 （4）琼脂：是从红藻中提取的多糖，在配制培 养基中用作为凝固剂。 其中，含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源， 又可以作为氮源，如氨基酸等。
划线结束后仍然要灼烧接种环，能及时杀死接种环上 残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。
2.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行 划线？
以免接种环温度太高，杀死菌种。 3.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是 从上一次划线的末端开始划线？
划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少， 每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着 划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌 繁殖而来的菌落。
高二生物《大肠杆菌培养和分离》教案
高二生物《大肠杆菌培养和分离》教案一、教学目标•了解大肠杆菌的形态、生理功能和培养条件；•掌握培养大肠杆菌的方法；•学会分离与鉴定大肠杆菌。
二、教学重点•培养大肠杆菌的方法；•分离与鉴定大肠杆菌的技巧。
三、教学难点•有效分离和鉴定大肠杆菌。
四、教学内容1. 大肠杆菌基本介绍大肠杆菌（Escherichia coli）是一种革兰氏阴性、无芽孢的棒状细菌。
它是人类和其他动物的肠道中常见的微生物之一，也是生物学研究中最常用的细菌之一。
大肠杆菌具有以下特征：•形态：革兰氏阴性杆菌，单株长度大约为2-3微米，直径约为0.5微米；•生理功能：大肠杆菌是一种嗜氧菌，可以利用葡萄糖进行发酵，并产生酸性代谢产物；•培养条件：大肠杆菌在37℃下生长最佳，pH值在6.5-7.5之间。
2. 培养大肠杆菌的方法大肠杆菌的培养方法主要包括液体培养和固体培养两种。
2.1 液体培养液体培养是将大肠杆菌悬浮于含有营养物质的液体培养基中进行培养的方法。
步骤如下：1.准备培养基：选用适当的液体培养基，如LB培养基；2.取少量大肠杆菌菌液接种于培养基中；3.震荡培养：将接种好的培养基放置于恒温摇床中，在37℃条件下震荡培养一定时间。
2.2 固体培养固体培养是将大肠杆菌悬浮于含有琼脂的固体培养基中进行培养的方法。
步骤如下：1.准备培养基：选用适当的固体培养基，如LB琼脂培养基；2.取少量大肠杆菌菌液接种于培养基中；3.均匀涂布：将接种好的培养基倒入培养皿中，用棉签均匀涂布；4.孵育：将培养皿倒置放置于37℃恒温培养箱中孵育一定时间。
3. 分离与鉴定大肠杆菌的技巧为了分离与鉴定大肠杆菌，可以采用以下技巧：1.纯培养：将大肠杆菌培养于LB琼脂培养基上，筛选出纯种菌落；2.形态特征：观察菌落形态特征，如形状、颜色等；3.革兰氏染色：对菌液进行革兰氏染色，观察细菌颗粒的染色情况；4.代谢特征：利用生化试剂进行代谢特征测试，如产气性、产酸性等。
五、教学过程1. 导入（5分钟）教师简要介绍大肠杆菌的基本特征和在生物学研究中的重要性。
苏教版高中生物选修1-1.1 微生物的分离和培养-学案设计无答案
微生物的分离和培养【学习目标】了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。
【学习重点】无菌技术的操作【学习难点】无菌技术的操作【学习过程】一、培养基1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。
可分为培养基和培养基。
2．营养构成：各种培养基一般都含有、、和，此外还要满足微生物生长对、以及的要求。
3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。
〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？【补充1】碳源：如CO2．糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：如N2．氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。
含有C．H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
二、无菌技术：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：（一）获得纯净培养物的关键是，具体操作如下：1．对实验操作的、操作者的和进行。
2．将用于微生物培养的、和等器具进行。
3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。
4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
（二）消毒和灭菌1．消毒是指。
常用的方法有、、消毒法。
2．灭菌是指。
常用的方法有：、、灭菌。
分别适用于那些用具？〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持 min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目的是防止。
实验操作----大肠杆菌的纯化培养：本实验所用的培养基是，本实验可分成和两个阶段进行。
一、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是、、、、。
高中生物苏教版选修1第一单元第1课《微生物的分离和培养》优质课公开课教案教师资格证面试试讲教案
高中生物苏教版选修1第一单元第1课《微生物的分离和培养》优质课公开课教案教师资格证面试试讲教案
1教学目标
(一)知识与技能
了解有关培养基的基础知识;掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术
(二)过程与方法
分析实验思路的确定和形成的原因,分析实验流程,对比前面的实验设计,归纳共性,分析差异,增加印象
(三)情感、态度与价值观
形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神
2学情分析
“微生物的实验室培养”是人教版高中生物选修1中的内容。
教材专题1介绍了传统发酵技术的应用,专题2是学习微生物培养的基础知识和基本操作技术,是为后续学习微生物的应用奠定基础。
本专题内容包括培养基基础、无菌技术、制备培养基的基本技术和微生物接种技术等。
其中无菌技术、培养基的制备方法、倒平板操作、平板划线操作和稀释涂布平板法操作等是教学重点;而无菌操作技术要求很高,微生物个体很小,对人类可能有危险,因此本节的难点是无菌技术操作
3重点难点
课题重点无菌技术的操作
课题难点无菌技术的操作
4教学过程
教学活动
1【导入】引入新课
在传统发酵技术的应用中,都利用了微生物的发酵作用,其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。
而在工业化生产中,为了提高发酵的质量,需要获得优良菌种,并保持发酵菌种的纯度。
这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。
现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。
2【讲授】基础知识
1.1 培养基的种类包括固体培养基和液体培养基等。
〖思考1〗琼脂是从红藻中提取的多糖 ,在配制培养基中用作为凝固剂。
苏教版高中生物选修1-1.1 微生物的分离和培养-教案设计
微生物的分离和培养【教学目标】1.知识与技能了解微生物的分离和培养发展的历史。
2.过程与方法举例说明微生物的分离和培养的基本过程。
3.情感、态度与价值观：关注与微生物的分离和培养有关的社会问题，培养学生的社会责任感。
【教学重难点】重点：了解微生物的分离和培养的意义。
难点：了解微生物的分离和培养对于人类生活和社会生产的价值。
【教学过程】一、引入微生物种类繁多，在自然界分布广泛，为了深入地研究它们的特性，首先要对其进行分离与培养。
掌握无菌操作的技能（如使用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌）是进行微生物分离与培养的基础；掌握微生物培养基的配制技术（如配制细菌培养基），学习微生物接种和培养的方法等，是实现微生物分离和培养的必要条件。
二、讲授新课1.微生物的分离和培养的基本过程高压蒸汽灭菌锅实验室常利用高温处理达到灭菌效果，包括采用干热灭菌或湿热灭菌等方法。
干热灭菌方法是将准备灭菌的物品放在干热灭菌箱内，在160〜170℃下加热1〜2h以达到灭菌的目的。
湿热灭菌方法常采用高压蒸汽灭菌锅进行，如手提式高压蒸汽灭菌锅就是实验室常用的灭菌仪器之一。
高压蒸汽灭菌锅的使用包括加水、装锅、加热排气、保温保压、出锅等步骤。
加水是指使用前在锅内加入适量的水。
加水不可过少，以防将灭菌锅烧干。
装锅是指将待灭菌物品放在灭菌桶中（不要装得过满），盖好锅盖，按对称方法旋紧四周固定螺栓，打开排气阀。
加热排气是指加热后，锅内水沸腾并有大量蒸汽自排气阀冒出时，维持2〜3min以排出冷空气。
如待灭菌物品较大或不易透气，应适当延长排气时间，务必使空气充分排出，然后将排气阀关闭。
保温保压是指当气压升至100kPa、温度达到121℃时控制热源，保持压力，维持20-30min后，关闭电源。
出锅是指当压力表中指针降至“0”点，并待温度下降后，打开排气阀，旋开固定螺栓，开盖，取出灭菌物品。
若当压力表指针尚在“0”点以上、温度也在100丈以上时开启排气阀，会因压力骤然降低而造成培养基剧烈沸腾，并冲出管口或瓶口，污染棉塞，以致培养微生物时引起杂菌污染。
实验1,大肠杆菌的培养和分离
实验1,大肠杆菌的培养和分离篇一：实验1 大肠杆菌的培养和分离实验教学提纲实验1 大肠杆菌的培养和分离教学提纲实验目的1. 进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。
2. 进行大肠杆菌的分离，用固体培养基进行细菌的划线培养。
3. 说明大肠杆菌的培养条件和操作要求的原理。
实验材料1. 配制LB液体培养基，蛋白胨0.5g，酵母提取液0.25g，氯化钠0.5g，加水50mL溶解。
2. 配制LB固体培养基，蛋白胨0.5g，酵母提取液0.25g，氯化钠0.5g，琼脂1g，加水50mL溶解（配制LB固体培养基是用来倒平板和倒试管斜面）。
实验步骤1. 培养基灭菌。
在两个150mL的三角瓶中分别装入50mL LB液体培养基和50mL LB 固体培养基（刚配好，尚未凝固），加上封口膜(一种塑料薄膜，中间有小孔的滤膜。
既可以通气，又不使细菌进入。
)。
将培养皿用牛皮纸包好，放入高压灭菌锅中，1kg压力灭菌15min（有压力时开始计时）。
同时将需要灭菌使用的培养皿、试管、三角瓶等和所用器械（接种环、镊子等）等一块灭菌。
2. 倒平板，倒斜面。
灭菌后。
待高压锅压力与大气压相同时，打开锅盖，将有培养基的三角瓶、试管、培养皿等放在灭菌后的超净工作台上。
超净工作台操作：打超净工作台的紫外灯（注意：打开紫外灯后人必须离开），持续30min，关闭紫外灯，打开过滤风和白炽灯。
将有培养基的三角瓶和培养皿放在灭菌后的超净工作台上后，点燃酒精灯，用镊子夹出酒精棉球擦拭桌面，并用酒精棉球擦手。
待固体培养基冷却到60℃时（手放上还有些热的时候），在酒精灯火焰旁，以右手无名指及小指夹持含有固体培养基的三角瓶的封口膜，右手其他三个手指拿着三角瓶；左手拿着培养皿，并打开上盖的一边，将三角瓶的培养基约10～20mL倒入1 个培养皿中。
倒入后立即置于水平位置上，轻轻摇晃，使培养基铺满培养皿底，待凝，使之形成平面。
倒斜面（试管内空白斜面），用玻璃漏斗倒入试管内，每试管2mL。
大肠杆菌的分离与培养教案
大肠杆菌的分离与培养教案高中生物实验生物实验技能考核教案题目《大肠杆菌的分离和培养》教案学院___ 化学和生命科学学院班级___ 生物科学102班__ _ _ 姓名___ 杜艳花__ ___ _ _ 学号联系电话_ ___（__）指导老师张萍华日期：2022年年7月4 日高中生物实验《大肠杆菌的分离与培养》教案一、实验教材分析本节内容选自浙科版生物选修1第1部分实验1大肠杆菌的分离和培养。
本次课程主要包括了本次实验的目的、大肠杆菌的特点、无菌操作和灭菌的方法、仪器设备和实验材料、实验步骤等内容。
在前一节介绍了实验室规则和生物技术概况的基础上，进行具体的实验操作。
并且经过生物必修三册书本的学习，学生已经掌握了一定的细菌的相关知识，并对一些特殊细菌的筛选和鉴别有了一定的了解。
故本次实验教学既是对学生前面学的理论知识的深化，同时也为学生将要学到的分离以尿素为氮源的微生物等内容奠定了比较重要的基础。
因此，本节课起着承前启后的重要作用。
二、学情分析本节课的教授对象是选了选修1这门课的高二学生，在实验前，学生已经学习过了革兰氏阳性菌与阴性菌的相关知识，本次实验主要是学生在掌握细菌的相关知识后学习大肠杆菌的分离与鉴定，很好地实现了将所学知识与实践相联系，易引起学生的兴趣，学生的积极性较高，从而有利于实验教学的展开。
但学生对于实验原理、实验方法和实验技术等方面还不熟悉，需要教师对此进行详细的讲解，在讲解过程中注意运用适宜的教学方法，引导学生将所学知识运用到具体的实验实践中。
同时，教师需严格要求学生在操作上符合实验室规范，将实验操作过程中的注意事项对学生进行逐一说明，保证实验的有序性与安全性。
三、实验教学目标【知识目标】：1.描述大肠杆菌的特征；2.说出细菌培养和分离的方法及灭菌的过程；3.说明大肠杆菌分离和培养的条件和操作要求的原理。
【能力目标】：1.通过大肠杆菌分离培养，学会划线分离的原理和方法；2.通过描述大肠杆菌的扩大培养的实验过程，分析实验结果，初步体验实验设计；3.通过实际操作实验过程，解决遇到的实际问题，提升问题分析能力。
大肠杆菌的分离与培养教案
大肠杆菌的分离与培养教案一、教学目标1. 理解大肠杆菌的形态、结构和生长条件。
2. 学会使用无菌技术进行大肠杆菌的分离与培养。
3. 掌握大肠杆菌的鉴别方法。
二、教学重点与难点1. 教学重点：大肠杆菌的形态、结构和生长条件，无菌技术的操作要点，大肠杆菌的鉴别方法。
2. 教学难点：无菌技术的操作要点，大肠杆菌的鉴别方法。
三、教学准备1. 实验室设备：显微镜、培养皿、接种环、试管、试剂等。
2. 实验材料：大肠杆菌菌株、培养基等。
3. 教学课件：大肠杆菌的形态、结构和生长条件，无菌技术操作流程，大肠杆菌鉴别方法。
四、教学过程1. 导入：介绍大肠杆菌的背景知识，激发学生兴趣。
2. 理论讲解：讲解大肠杆菌的形态、结构和生长条件，无菌技术的操作要点，大肠杆菌的鉴别方法。
3. 实验操作：引导学生分组进行大肠杆菌的分离与培养实验，讲解并演示无菌技术的操作流程，解答学生疑问。
4. 结果观察与分析：学生观察实验结果，分析大肠杆菌的生长特点，讨论鉴别方法的正确性。
5. 总结与评价：总结本节课的主要内容，对学生的实验操作进行评价，提出改进意见。
五、教学反思本节课通过讲解和实验操作，使学生掌握了大肠杆菌的分离与培养方法，无菌技术的操作要点和大肠杆菌的鉴别方法。
在实验过程中，学生积极参与，动手操作能力得到提高。
但部分学生在无菌技术操作中仍存在不足，需要在今后的教学中加强练习。
对实验结果的观察与分析能力也需要加强培养。
六、教学评价1. 知识掌握：评估学生对大肠杆菌的形态、结构和生长条件的理解程度。
2. 技能操作：评价学生无菌技术操作的准确性和熟练度。
3. 实验报告：评估学生的实验观察结果、分析能力和鉴别方法的掌握情况。
七、教学拓展1. 介绍其他常见细菌的分离与培养方法。
2. 探讨细菌在自然界中的作用和与人类生活的关系。
3. 简介大肠杆菌在生物技术中的应用，如基因工程、疫苗研发等。
八、教学实践活动1. 组织学生参观实验室，了解实验室设备和细菌培养的基本流程。
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大肠杆菌的接种与分离培养
【教材分析】
本次课程主要包括了本次实验的目的、大肠杆菌的特点、无菌操作和灭菌的方法、仪器设备和实验材料、实验步骤等内容。
在前一节介绍了实验室规则和生物技术概况的基础上，进行具体的实验操作。
并且经过生物的学习，学生已经掌握了一定的细菌的相关知识，并对一些特殊细菌的筛选和鉴别有了一定的了解。
故本次实验教学既是对学生前面学的理论知识的深化，同时也为学生将要学到的分离以尿素为氮源的微生物等内容奠定了比较重要的基础。
因此，本节课起着承前启后的重要作用。
【教学分析】
在实验前，学生已经学习过了革兰氏阳性菌与阴性菌的相关知识，本次实验主要是学生在掌握细菌的相关知识后学习大肠杆菌的分离与鉴定，很好地实现了将所学知识与实践相联系，易引起学生的兴趣，学生的积极性较高，从而有利于实验教学的展开。
但学生对于实验原理、实验方法和实验技术等方面还不熟悉，需要教师对此进行详细的讲解，在讲解过程中注意运用适宜的教学方法，引导学生将所学知识运用到具体的实验实践中。
同时，教师需严格要求学生在操作上符合实验室规范，将实验操作过程中的注意事项对学生进行逐一说明，保证实验的有序性与安全性。
【教学目标】
一、知识目标
1．描述大肠杆菌的特征；
2．说出细菌培养和分离的方法及灭菌的过程；
3．说明大肠杆菌分离和培养的条件和操作要求的原理。
二、能力目标
1．通过大肠杆菌分离培养，学会划线分离的原理和方法；
2．通过描述大肠杆菌的扩大培养的实验过程，分析实验结果，初步体验实验设计；
3．通过实际操作实验过程，解决遇到的实际问题，提升问题分析能力。
三、情感态度与价值观目标
1．在实验操作的过程中，初步形成严谨的实验精神；
2．在分析实验结果的过程中，体会生物体的奥妙；
3．在小组合作讨论的过程中，体验团队合作精神。
【教学重点】
1．大肠杆菌的划线分离；
2．大肠杆菌的无菌操作和灭菌技术；
3．大肠杆菌的特点及实验室应注意的安全事项。
【教学难点】
1．大肠杆菌实验的无菌操作技术及实验室安全事项的解读；
2．大肠杆菌的划线分离。
【教学方法】
通过前面的学习，学生对大肠杆菌及无菌操作有了一定的认识，我主要采用对话法，演示教学等，并预测分析实验结果，一步步引导学生进行大肠杆菌的扩大培养与划线分离的实验操作。
同时用多媒体辅助教学，这些教学方法的使用层层深入，从而突出教学重点，突破教学难点。
【教学过程】
（一）创设情境，导入新知
教师活动：教师展示饮用水净化、消毒灭菌、检测、出品的简略过程，抛出在检测这一过程中主要是以某一微生物作为指标来进行检测，从而引出本次实验的材料—大肠杆菌（展示图片）。
饮用水这一素材与我们的实际生活相联系，有利于吸引学生的兴趣。
学生活动：观看，听讲
（二）师生对话，构建新知
教师活动：抛出“为什么大肠杆菌能够作为饮用水是否合格的指标呢？”“大肠杆菌是如何被分离的呢？”三个问题，请学生就此三个问题进行思考讨论。
本环节有利于学生明确本实验材料的特点，明确实验目的。
学生活动：思考，并查看书本，回答：大肠杆菌是革兰氏阴性菌，兼性厌氧。
教师活动：总结学生的答案，并对学生的表现做出形成性评价，随后呈现大肠杆菌的有关信息，进行讲解。
大肠杆菌是革兰氏阴性菌，兼性厌氧。
是人和动物肠道中的正常栖居菌，与人终身相伴。
其代谢活动能抑制肠道内分解蛋白质的微生物生长，减少蛋白质分解产物对人体的危害，还能合成维生素B和K，以及有杀菌作用的大肠杆菌素。
正常栖居条件下不致病，但若进入胆囊、膀胱等处可引起炎症。
在环境卫生不良的情况下，常随粪便散布在周围环境中。
若在水和食品中检出此菌，可认为是被粪便污染的指标，从而可能有肠道病原菌的存在。
因此，大肠菌群数大肠菌值常作为饮水和食物（或药物）的卫生学标准。
设疑：同学们，如果我们检验自来水大肠杆菌有没有超标，应该怎么做呢？
今天，我们先学习大肠杆菌的扩大培养、分离。
教师活动：讲解实验目的：
1．进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。
2．进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基进行细菌的划线培养。
3．说明大肠杆菌培养的条件和操作要求的原理。
学生活动：认真听讲，明确实验目的，了解本节课主要的内容。
教师活动：为了达到本次实验的目的，同学们觉得应该如何做呢？我们应该先做什么，后做什么呢？同学们来设计下实验流程。
我请同学起来回答。
结合学生的回答，给出以下流程图：
扩大培养划线分离伊红-美兰鉴别培养基涂布鉴别：带有金属光泽的深紫色菌落
学生活动：认真听讲，分组进行思考讨论并设计实验流程，学生代表回答老师问题。
（三）运用新知，步骤讲解
教师活动：根据大肠杆菌的相关知识，进行实验步骤的讲解
1培养基的选择
同学们来思考下，我们培养细菌通常采用什么培养基？
根据学生的回答指出，本实验主要采用的是LB培养基进行培养，伊红-美蓝鉴别培养基进行分离和鉴定。
LB培养基的基本配方：蛋白胨 1g，酵母提取物0.5g，氯化钠1g，琼脂粉2g，蒸馏水100mL 伊红-美蓝鉴别培养基：蛋白胨1g，乳糖1g，磷酸氢二钾0.2g，琼脂粉2g，蒸馏水100mL，pH7．0-7．4 ，2%伊红水溶液2mL ，0.5%美蓝水溶液1．3mL。
2．大肠杆菌的扩大培养
我们首先选择LB液体培养基，进行大肠杆
菌的扩大培养：首先，挑取1环大肠杆菌菌种，
接种到装有的三角烧瓶内，包扎后置于37℃摇
床内振荡培养12h。
3.大肠杆菌的划线分离
大肠杆菌的分离，主要采用伊红-美蓝鉴别
培养基。
在伊红-美兰鉴别培养基上产生的带有
金属光泽的深紫色的大肠杆菌菌落。
（1）倒平板：培养基加热熔化，待冷至55-60℃时倒平板，每皿约15ml，水平放置，凝固成平板。
注意：A．无菌操作，在酒精灯火焰旁。
B．培养基加热熔化，待冷至55-60℃时倒平板，温度过高，会烫伤手或拿不稳倒出而造成污染，温度太低容易重新凝固。
（2）划线分离：采用平板划线分离法进行分离，用接种环挑取少量的菌液在
伊红-美蓝培养基平板上进行划线分离，将平板置于37℃培养箱培养12-24h。
主要采用三区划线法，形成的菌落由多到少，
最后形成单菌落
也可采用稀释涂布平板法，以获得单菌落。
注意：（1）接种环要在酒精灯外焰进行灼烧灭菌。
（2）划线时要让平板充分冷却，以防培养基破裂。
（3）划线时，动作要轻，以防割裂培养基。
（4）观察结果：在伊红-美兰鉴别培养基上产生的带有金属光
泽的深紫色菌落为大肠杆菌，挑取少量菌种进行简单染色，镜检并
画出显微结构图。
观察菌落特征，是否符合下列特征：
①深紫黑色、有金属光泽；
②紫黑色、不带或略带金属光泽；
③淡紫红色、中心颜色较深。
4.斜面接种和菌种保存
在酒精灯火焰旁，挑取大肠杆菌单菌落，接种于斜面培养基上，保存下来。
注意：在酒精灯旁操作，先对试管口进行操作。
学生活动：有些同学通过预习和课外知识积累，回答：牛肉膏蛋白胨培养基。
认真听老师的讲解，同时做好相关笔记。
思考步骤中为什么这么做，明白操作的原理。
（四）课外延伸，小结新知
教师活动：在上完实验课呢，同学们有没有什么问题？解决学生还没有明白的问题，同时提出以下问题，让同学们思考。
1．在接种操作结束后是否需要灼烧接种环？
2．操作过程中如何避免被杂菌污染？
3．如何判断培养物是否有杂菌污染？
4．实验结束后，接种过微生物的器皿应该如何处理？
学生活动：思考实验中自己的困惑，并提出来。
七、实验结果
教师与学生一起讨论、总结、评价本次实验中同学们表现的优缺点，提出改进意见。
最后要求学生上交一份实验报告，并在实验报告中写明在本次实验操作过程的小感想或小体会。