菌种保存方法介绍
菌种保藏方法

菌种保藏方法
菌种保藏方法,如下:
1、传代保藏,传代保藏菌种是微生物保存中最常用的方法之一。
很多微生物在低温或者干燥处理时,会很快死亡,为了保存菌种的活性,就要定期不断的进行菌种转接、培养后再保存。
2、斜面低温保藏,将待保藏的菌种接种在合适的斜面培养基上,在相应的条件下培养至得到充足的菌体或者孢子,随后密封试管置于4℃左右保存,具体保存温度按照保存菌种设定。
保藏时间依微生物的种类从1个月到4个月不等。
3、冷冻干燥保藏,冷冻干燥保藏法为菌种保藏方法中最有效的方法之一,对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用,这种方法适用于菌种长期保存,一般可保存数年至十余年。
我国大多数生物制品菌种都是采用该法保藏。
4、半固体穿刺保藏,配制半固体培养基,高压湿热灭菌后倒于无菌试管中至约1/3,待培养基凝固,用接种环从平面培养基上挑取单菌落,穿入培养基若干次。
在合适的条件下进行培养至菌体旺盛生长,之后密封试管,根据菌种特点在4 ℃左右或者凉爽干燥处保存。
保存时间至少可以达到
1 年,对于有些菌种甚至能达到20 年之久。
5、液氮超低温保藏,液氮超低温保藏法是菌种长期保藏的最有效最可靠的方法。
液超低温保藏法是把菌种装在含有冷冻保护剂的安瓶瓶内,将该安瓶瓶放人液氮(-196℃)中保藏。
几种食用菌菌种保藏方法

几种食用菌菌种保藏方法食用菌菌种是指用于食用或驯化培养的真菌种类。
在保藏食用菌菌种时,主要有以下几种方法:1.冷冻保藏:将菌种置于-80℃的低温环境中。
首先,将菌种种植在琼脂平板上的单独菌落。
然后,将单独的菌落切下并置于含有30%甘油的琼脂平板上。
最后将含有菌落的琼脂平板置于-80℃的低温冷冻库中进行保存。
这种方法适合于长时间保存,但对设备和电力有一定需求。
2.雪贮法:将菌种置于冷藏室的冷湿源物质上。
首先,将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。
然后,将菌落保留在琼脂平板上并将其置于冷藏室中。
这种方法适用于一般食用菌的保存,在适宜的湿度和温度下,可以保存数月至一年。
3.干燥保藏:将菌种置于干燥环境中。
首先,将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。
然后将菌落切下并置于无菌的滤纸或多孔塑料袋中。
最后将菌种放置于干燥通风良好的地方,等待其自然干燥。
这种方法适用于一些干货类食用菌种,如香菇、平菇等。
4.培养罐保藏:将菌种保藏于培养罐中。
首先,将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。
然后将菌落切下并置于无菌培养罐中,加入适宜的培养基,并密封培养罐。
最后将培养罐保存在适宜的温度和湿度下。
这种方法适用于菌种的短期保藏。
5.低温干燥保藏:将菌种保藏于低温干燥器中。
首先,将菌种培养在含有菌落的琼脂平板上。
然后将菌落切下并置于低温干燥器中,通过低温干燥将其保存起来。
这种方法适用于一些低温耐受性较强的食用菌。
总结起来,以上是几种食用菌菌种保藏的方法。
选择合适的方法可根据菌种的特性、用途和预期保藏时间来确定。
在进行菌种保藏时,要注意无菌操作,避免菌种的污染或变异,并在适宜的环境条件下保存。
这将有助于保持菌种的营养价值和生物特性,以及保证其在后续使用中的质量。
论述菌种的保藏方法

论述菌种的保藏方法菌种的保藏是指将某一种菌株保存在适宜的条件下,以确保其长期存活和保持其遗传特性的一种操作。
菌种的保藏对于科学研究和应用具有重要意义,因为菌株的失活或突变可能导致实验结果的不准确性或应用价值的丧失。
本文将介绍几种常见的菌种保藏方法。
一、冷冻保藏法冷冻保藏法是将菌株保存在低温条件下,以减缓菌株的代谢和生长速率,达到延长其存活时间的目的。
常见的冷冻保藏方法有两种:液氮冷冻和低温冷冻。
1. 液氮冷冻:将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂,然后分装至冷冻管中,迅速将冷冻管浸入液氮中进行冷冻保存。
液氮的温度极低,可以有效地抑制菌株的代谢活动,保证其长期存活。
2. 低温冷冻:将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂,然后分装至冷冻管中,置于-80℃的低温冰箱中保存。
相比于液氮冷冻,低温冷冻的操作更加简便,且可以在普通实验室条件下进行。
二、干燥保藏法干燥保藏法是将菌株保存在无水条件下,通过降低菌株周围环境的水分含量,抑制菌株的代谢活动,并防止细胞内酶的活性。
常见的干燥保藏方法有两种:冷冻干燥和真空干燥。
1. 冷冻干燥:将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的保护剂,然后在真空下进行冷冻干燥。
冷冻干燥的过程中,通过降低温度和压力,使水分直接从固态转变为气态,从而达到保护菌株的目的。
2. 真空干燥:将培养基中的菌株悬浮液均匀涂布在无菌的滤纸或硅胶膜上,然后将其置于真空干燥器中进行真空干燥。
真空干燥的过程中,通过降低压力,将水分从菌株周围环境中蒸发掉,使菌株处于无水状态。
三、液氮冷冻法液氮冷冻法是将菌株保存在液氮中的一种方法。
液氮的温度极低,可以有效地抑制菌株的代谢活动,保证其长期存活。
该方法适用于多种菌株的保藏,包括细菌、真菌和酵母等。
液氮冷冻法的操作步骤如下:1. 将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂,以增加菌株的抗冻性。
2. 将菌株悬浮液分装至冷冻管中,每支约0.5-1.0 mL,然后封闭冷冻管。
菌种保藏方法

菌种保藏方法菌种保藏方法菌种保藏是指将某一种菌株或菌种保存在一定的条件下,以便长期保存并用于研究或应用。
菌种保藏的目的是为了防止菌株的变异和降低其性状的丧失,以便在需要的时候能够重新培养出相同或相似的菌株。
下面将介绍几种常见的菌种保藏方法。
一、冷冻保藏法冷冻保藏法是将菌种保存在低温条件下,一般为-80℃或液氮温度。
这种方法比较简单,操作方便,且保存效果较好。
首先,将菌株从培养基上接种到含有10%-15%甘油的液体培养基中,然后用无菌冻存管将菌液分装好,经过冷冻机或液氮罐进行冷冻保存。
在需要使用菌株时,只需将冻存管快速解冻并转移到新的培养基上即可。
二、真菌分生孢子的枯燥保存法真菌的分生孢子经过枯燥保存后,能够在相对湿度较低的条件下长期保存。
这种保存方法主要适用于真菌,特别是产生分生孢子的真菌。
首先,从培养基上接种分生孢子,培养出菌丝后进行枯燥处理。
一般采用短暂的枯燥处理,依靠菌丝中的水分进行干燥。
然后将枯燥的菌丝放置在无菌瓶中密封保存,放在相对湿度低于30%、温度介于10℃和25℃之间的干燥环境中。
三、气干法气干法是将菌株保存在干燥剂中,以保持菌株的活力。
这种方法适用于较短时间的菌种保存。
首先,将菌株从培养基上接种到含有干燥剂的培养基中,待培养基中的水分被干燥剂吸收后,将菌株封存在密封袋或密封瓶中。
干燥剂一般选择无水硅胶或干燥剂片,确保环境的干燥程度。
四、冷藏法冷藏法是将菌株保存在低温条件下,一般为4℃至10℃之间。
这种方法适用于细菌、酵母和一些真菌的保存。
菌株保存在含有15%-30%甘油的稀释培养基中,然后在低温条件下保存。
需要使用时,只需从低温保存中取出,接种到新的培养基中即可。
总结起来,菌种保藏是一项重要的科研工作,不同的菌种可以采用不同的保藏方法。
冷冻保藏法适用于大部分微生物的保存,真菌的分生孢子的枯燥保存法适用于真菌的保存,气干法适用于较短时间的保存,冷藏法适用于细菌、酵母和一些真菌的保存。
菌种保种方法

菌种保种方法一、引言菌种保种是指为了保持菌种的纯度和活力,采取一系列措施来保存和繁殖菌种的方法。
菌种是微生物学研究和应用的基础,保种工作的重要性不言而喻。
本文将介绍几种常用的菌种保种方法。
二、冷冻保存法冷冻保存法是一种常见且有效的菌种保种方法。
其原理是将菌种培养液或菌落用冷冻保藏液冷冻储存。
冷冻保藏液通常是由含有保护剂的培养基和甘油或其他冷冻保护剂组成的。
操作时,首先制备含有保护剂的培养基,然后将菌种培养液或菌落和冷冻保护剂混合,分装入冷冻管中,迅速冷冻至-80摄氏度或更低温度保存。
三、干燥保存法干燥保存法是一种常用的菌种保种方法,适用于许多细菌和真菌。
其原理是将菌种培养液或菌落迅速干燥至低水分状态下保存。
操作时,可以将菌种培养液或菌落均匀涂布在无菌的滤纸或玻璃片上,然后放置于无菌条件下自然干燥或使用干燥器进行加速干燥。
干燥后的菌种可以直接保存在常温下,也可以放置在密封容器中保存。
四、液氮保存法液氮保存法是一种常用的长期保存菌种的方法。
其原理是将菌种培养液或菌落迅速冷冻至液氮温度(-196摄氏度)保存。
液氮保存法能够有效地保持菌种的生物特性和遗传稳定性。
操作时,可以使用液氮罐将菌种冷冻保存,也可以采用液氮冷冻干燥的方法进行保存。
五、连续传代法连续传代法是一种常用的菌种保种方法,适用于某些需要经常传代的菌种。
其原理是将菌种定期传代至新的培养基中,以保持菌种的活力和纯度。
操作时,首先准备新的培养基,然后将菌种从原有培养基中取出,接种到新的培养基上,并进行连续传代。
六、冷冻干燥法冷冻干燥法是一种较为复杂但有效的菌种保种方法。
其原理是先将菌种冷冻至低温,然后进行干燥处理,最后封存于干燥剂中保存。
冷冻干燥法能够有效地保持菌种的生物特性和遗传稳定性,并能够较长时间地保存。
操作时,首先将菌种培养液或菌落冷冻至低温,然后迅速进行干燥处理,最后将干燥的菌种封存于密封容器中。
七、细胞冻存法细胞冻存法是一种高效且可靠的菌种保种方法,适用于细胞类型的菌种。
菌种储藏说明范文

菌种储藏说明范文朋友!如果你手里有菌种需要储藏,那可得好好看看这份说明啦,这可是保证菌种能好好保存,日后还能活力满满发挥作用的秘籍呢!一、短期储藏(1 2周)1. 常温储藏(如果菌种比较耐折腾的话)首先呢,要找个干净、干燥的地方。
你可别把菌种随手扔在厨房水槽边那种湿漉漉的地方,那可不行。
把装有菌种的容器(像小试管或者小瓶子之类的)放在一个纸盒里,就像给它安个小房子,避免阳光直射。
阳光要是一直照着菌种,就像一直给它烤火,它可受不了,会被热坏的。
2. 冰箱冷藏(适合大多数菌种)如果你的菌种比较娇弱,那冰箱冷藏层就是个不错的选择。
温度大概设置在4 8℃就好。
在把菌种放进去之前,一定要确保容器密封得严严实实的。
要是密封不好,冰箱里那些怪味就会钻进菌种里,而且冰箱里的水汽也会让菌种受潮,就像给它洗了个冷水澡,这对它可不好。
二、中期储藏(1 6个月)1. 甘油冷冻保存。
这个方法稍微复杂一点,不过很有效哦。
先准备好甘油溶液。
一般来说,甘油和培养基(或者水)按照1:1或者1:2的比例混合就可以了。
就像调一杯特别的饮料,不过这杯饮料是给菌种喝的,能让它在低温下过得舒服点。
然后把菌种小心地混到甘油溶液里,轻轻晃一晃,让它们充分接触。
接着把混合好的菌种甘油溶液放到小离心管里,标记好菌种的名字和日期。
这就像给菌种做个小身份证,以后找它的时候就方便多了。
最后把小离心管放到 -20℃的冰箱里。
这个温度对菌种来说就像进入了一个冰爽的小世界,它可以在里面安安静静地待上好几个月呢。
1. 液氮冷冻保存。
这可是个很厉害的方法,不过需要一些特殊的设备哦。
要把菌种处理一下,让它处于合适的状态。
这就像给它穿上一层特殊的防护服,具体的处理方法根据不同的菌种会有所不同,你得查一查对应的资料或者请教一下专家。
然后把处理好的菌种放到专门的液氮保存管里,标记清楚。
最后把保存管放到液氮罐里。
液氮的温度超级低,大概 -196℃呢,菌种在里面就像被施了魔法一样,时间好像都停止了,能保存很长很长时间。
关于菌种的保存方法

关于菌种的保存方法导言菌种的保存是保障微生物研究的重要环节。
微生物资源的丧失对生物科技研究以及工业发展都会带来严重的影响。
因此,科学有效地保存菌种对于保护和利用微生物资源至关重要。
本文将介绍常见的菌种保存方法和技术,旨在帮助科学家和研究人员更好地保存和利用菌种资源。
常见菌种保存方法常温冷冻保存法常温冷冻保存是一种方便简单、成本低廉的菌种保存方法。
常见的常温冷冻保存方法有以下几种:1. 菌种液体冷冻保存:将菌种培养物添加到一定浓度的甘油或乙二醇溶液中,并将其储存于-80的冷冻库中。
这种方法可使菌种长期保存,并保持较高的存活率。
2. 菌种冻干保存:将菌种培养物培养到稳定的菌落状态后,直接将其放入真空冷冻干燥机中,去除菌种中的水分,然后存放于常温下。
这种方法适用于一些耐冷冻干燥的菌种。
3. 菌种在琼脂平板上保存:将菌种制备成沉淀后,均匀涂布在琼脂平板上,经过一定的处理后存放于室温下。
这种方法适用于一些菌种,如革兰氏阳性菌。
低温冷冻保存法低温冷冻保存是较为常用的一种菌种保存方法。
常见的低温冷冻保存方法有以下几种:1. 液氮冷冻保存:将菌种培养物中的菌液通过快速冷冻的方法将其冻结成冷冻物,并储存在液氮罐中。
这种保存方式可以确保菌种较好地保存,并且存活率较高。
2. 低温保存箱保存:将菌种培养物制备成菌种沉淀后,将其存放于-20或-80的低温保存箱中。
这种方法适用于一些需要长期保存的菌种。
菌种保存技术无菌操作在菌种保存的过程中,无菌操作是非常重要的。
无菌操作可以有效避免细菌污染,确保保存的菌种的纯度和保存质量。
1. 工作台的消毒:在进行菌种保存操作之前,需要将工作台表面进行消毒处理,如用75%的酒精擦拭表面。
2. 实验器具的灭菌:将实验器具在高温或高压条件下进行灭菌处理,以确保无菌操作的进行。
3. 空气的灭菌:在无菌操作的环境下,可以通过紫外线灭菌等方法来净化空气,避免空气中的微生物污染。
菌种保存记录在菌种保存的过程中,正确记录菌种保存的相关信息非常重要。
保存菌种的方法

保存菌种的方法
保存菌种是微生物学研究中非常重要的一项工作。
菌种可以通过不同的方法进行保存,以保证其长期的存活和保持其特性。
以下是几种常见的保存菌种的方法:
1. 冷冻保存:将菌株培养在富含营养物的培养基上,然后将细菌悬液添加到含有冷冻保护剂的离心管中,将其置于-80℃的冰箱中冷冻保存。
这种方法可以长期保存菌株,但需要注意冻存液的配制以及冷冻和解冻的操作。
2. 干燥保存:将菌株在富含营养物的培养基上生长,将其转移到无菌纸片上,然后在室温下晾干并密封保存。
这种方法不需要低温保护,但需要在干燥的条件下保存,并且菌株的保存时间较短。
3. 防冻干保存:将菌株培养在富含营养物的培养基上,然后将其转移到无菌滤纸片上,在防冻干剂的条件下进行干燥处理,并在干燥后密封保存。
这种方法可以在室温下保存菌株,并且可以长期保存,但需要注意干燥和密封的条件。
4. 长期冷藏保存:将菌株培养在富含营养物的培养基上,然后在4℃的冰箱中长期保存。
这种方法简便易行,但保存时间较短,通常不超过6个月。
需要注意的是,保存菌株的方法应根据不同的菌株和实验需求来选择。
保存菌株时也需要注意无菌操作,选择适当的保存容器和保存条件,并及时更新保存记录,以保证菌株保存的质量和可靠性。
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根据不同菌种的营养要求分类
•纸片、半固体琼脂培养基、琼脂平板 注意:常温、低温、超低温均可
• 假单胞菌:冷冻干燥、肉汤、血浆、 10%甘油、滤 纸片、半固体琼脂培养基、琼脂平板 注意:常温、超低温均可
• 苛养菌株:平板传代保存、推荐冷冻干燥 • 厌氧菌:平板传代保存、室温厌氧湿盒法、-30℃~-
长期保存的菌种
• 采用脱脂牛奶冷冻干燥方法进行保存,其 复溶效果及细菌存活率较用肉汤、血浆等 附形物要好,
• 10%甘油或甘油肉汤 • 注意:均为低温冷冻
3.厌氧菌的保存
• 冷冻真空干燥是最好的保存方法,但不 易做到。
• 平皿传代是较简单且实用的方法。将需 要保存的菌株接种于布氏血琼脂平板上, 放入厌氧罐(或袋)中于孵箱中培养48小 时后,放室温阴凉处可保存两个月。
临床菌库组成
参考菌株:
ATCC:美国典型菌株保存中心。 NCTC:英国国家典型菌株保存中心。 CMCC(B):中国医学细菌保藏管理中心。 质控菌株:WHO及各级临检中心发放的室间质控菌株。
临床分离菌:
实验中用标准方法鉴定,鉴定值>95%典型菌株,并 经多次传代,特征衡定的菌株。不同耐药机制的菌株。
80℃冷冻保存 注意:常温、超低温均可
根据保存菌种所期望的时限分类
• 长期保存的菌种,采用脱脂牛奶冷冻干燥方法进 行保存,其复溶效果及细菌存活率较用肉汤、血 浆等附形物要好,10%甘油;
• 中短期保存的菌种,根据菌种的不同采用脱脂牛 奶、血浆、全血、滤纸片、半固体琼脂培养基及 琼脂平板传代等方法进行保存;
菌种保存方法介绍
卫生部北京医院--艾效曼
菌种保存的目的:
1. 临床诊断和治疗需要,以备复查及补充药敏试验 2. 实验室质量控制所必需。 3. 卫生学监测用菌种,特别是院内感染(包括消毒
剂)监测、 4. 教学(包括实习)、院内(外)培训(包括进修) 5. 科研及对外交流等工作,承担和完成各级科研课
题及新药临床验证。
菌库建立的硬件条件
• 保存条件: 低温保存、 厌氧保存、 冻干保存、
• 可以保存的菌株
菌库保存的软件条件
• 完善安全的管理制度 双人双锁制度、各类登记制度(入库登记、 出库登记、菌种去向登记、销毁记录)
• 菌库管理人员的责任心 • 生物安全相关文件
根据菌种保存介质分类
• 脱脂牛奶保存 • 甘油保存 • 肉汤保存 • 血浆保存 • 纸片保存 • 琼脂平板保存 • 高层斜面保存 • 半固体保存
• 现用菌株,琼脂斜面、半固体、平板保存
短期保存的菌种:
• 半固体过夜培养覆盖石蜡油(1cm厚)后, 于4℃保存(假单胞菌于室温保存),
• 微生物自动鉴定仪可将鉴定卡片放低温冰 箱保存。
• 苛养性细菌和厌氧菌,可采用平皿传代的 方法保存。
中期保存的菌种
• 脱脂牛奶-冷冻、 • 血浆-冷冻、 • 全血-冷冻、 • 滤纸片-冷冻、 • 半固体琼脂培养基-冷藏或室温、 • 高层斜面保存-冷藏或室温、 • 琼脂平板传代-冷藏或室温;