薄层色谱分析的主要影响因素

中药薄层色谱影响因素分析及应用

中药薄层色谱影响因素分析及应用李向军;王超;王永;安军永;王世华;李晓燕;秦拢;王猛【摘要】This paper compared TLC have a greater impact on the temperature, humidity and other factors, TLC, Discusses solution, and examples. TLC of many factors, but the analysis of thin - layer chromatography is widely used in traditional Chinese medicine classical method, With the thin layer plate, point - like technology, expand the technology to view the technical aspects of the development. TLC. the standardization and improvement of the degree of operating equipment, comhined with a simple, convenient and economic sensitivity, high efficiency, will in the traditional Chinese medicine and its preparations quality control and inspection play an increasing role.%该文分析了对薄层色谱有较大影响的温度、湿度等因素,探讨解决方案,并举例说明.薄层色谱的影响因素较多,但薄层色谱法仍是中药分析中广泛应用的经典方法.随着薄层板、点样技术、展开技术、检视技术等方面的发展,薄层色谱的规范化,操作仪器化程度的提高,加之其简单、便捷、经济、灵敏、高效,薄层色谱法必将在中药及其制剂的质量控制及检验中发挥越来越大的作用.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2011(020)014【总页数】3页(P13-15)【关键词】中药;薄层色谱;分离原理;点样;展开【作者】李向军;王超;王永;安军永;王世华;李晓燕;秦拢;王猛【作者单位】河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035;河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035;河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035;河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035;河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035;河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035;河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035;河北以岭医药研究院有限公司,河北石家庄050035【正文语种】中文【中图分类】R284.1薄层色谱是中药鉴别、中药成方制剂质量标准主要的研究和控制手段之一，其研究质量对中药成方制剂新药项目的质量标准意义十分重要。

薄层色谱分析主要影响因素

薄层色谱分析主要影响因素薄层色谱（Thin Layer Chromatography，TLC）是一种常用的色谱技术，用于分离、鉴定和定量分析化学物质。

薄层色谱分析的主要影响因素包括色谱载体、流动相、样品溶液、色谱发展条件和检测方法等方面。

1.色谱载体：色谱载体是薄层色谱分析中的关键参数，它对分离性能和分析效果起着重要作用。

常用的薄层色谱载体包括硅胶、氧化铝和聚甲基丙烯酸酯等。

不同类型的载体具有不同的极性和吸附性质，对样品的分离能力和保留行为有所影响。

2.流动相：流动相是指在色谱过程中用于移动样品的溶剂系统。

选择合适的流动相可以有效地提高样品的吸附性能和分离效果。

流动相的组成和性质是影响色谱分离的关键因素，其pH值、溶剂极性和添加剂的类型与浓度等都会对分离效果产生影响。

3.样品溶液：样品的溶解性和浓度对薄层色谱的分析结果也有重要影响。

溶液的选择要根据目标化合物的极性和溶解性来确定，应尽量使样品溶解度高、稳定性好，避免出现沉淀和聚集现象。

此外，样品的浓度也会对分离效果和检测灵敏度产生影响。

4.色谱发展条件：色谱发展条件包括色谱层厚、溶剂的饱和度、发展时间和温度等因素。

色谱层厚的选择要根据目标化合物的性质和分析要求来确定，一般在0.1-0.25mm之间。

溶剂的饱和度和发展时间要适当控制，过度或不足都会对分离效果产生不良影响。

温度因素是影响分离的重要参数之一，合适的温度能加速色谱发展速度和提高分离效果。

5.检测方法：综上所述，薄层色谱分析的主要影响因素包括色谱载体、流动相、样品溶液、色谱发展条件和检测方法等。

研究者在进行薄层色谱分析时，需要合理选择上述参数，以获得准确、可靠的分析结果。

薄层色谱法的操作要点及影响因素

薄层色谱法的操作要点及影响因素李杨姜慧莹陈嘉兴杨爽黄帅*（吉林职业技术学院延边133400）摘要：目的：对薄层色谱法操作步骤中的影响因素进行分析，并以实验过程中实际案例说明薄层色谱法在实际操作中的主要影响因素。

方法：分别从供试品溶液的制备、选择吸附剂、点样、展开、显色与检视六个方面对薄层色谱法的影响因素加以阐述。

结果：薄层色谱法操作中供试品溶液的制备、对照品或对照药材溶液的制备、选择吸附剂、点样、展开、显色与检视对药物检测均有影响。

结论：对薄层色谱法的操作影响因素进行分析，对于药物检测具有指导意义。

关键词：薄层色谱影响因素操作要点中图分类号：R286.0文献标识码：A文章编号：1672-8351（2020）06-0001-02Key points and influencing factors of TLCLi Yang Jiang Huiying Chen Jiaxing Yang Shuang Huang Shuai（Jilin Polytechnic Yanbian133400）Abstract：Objective：This study analyzes the influencing factors in the operation steps of TLC，and illustrates the main influencing factors in actual operation by the actual case in the experimental process.Methods：The influencing factors of thin-layer chromatography were studied in detail from six aspects：preparation of test solution，selection of adsorbent，spotting，unfolding，color development and inspection.Results：The preparation of the test solution in the TLC operation，the preparation of the reference or control drug solution，the selection of the adsorbent，the spotting，the development，the color development and the inspection were all affected by the drug detection. Conclusion：The analysis of the factors affecting the operation of TLC is of guiding significance for the operation of drug detection. Keywords:Thin layer chromatography Influencing factors Operational points薄层色谱法系将供试品溶液点于薄层板上，在展开容器内用展开剂展开，使供试品所含成分分离，所得色谱图与适宜的标准物质按同法所得的色谱图对比[1，2]。

薄层色谱操作注意事项

薄层色谱操作注意事项影响薄层色谱分析的因素有很多，比如样品处理方法、薄层板制备技巧、点样方法、展开剂的遴选、温湿度的掌控等等很多方面，在这里对其操作要点作一下简单介绍:1铺制薄层板：铺板用的匀浆不宜过稠或过稀：过稠，板容易出现拖动或停顿造成的层纹；过稀，水蒸发后，板表面较粗糙。

匀浆配比一般是硅胶G:水=1：2～3，硅胶G:羧甲基纤维素钠水溶液=1:2。

研磨匀浆的时间，根据经验来定，与空气湿度有关，一般通过拿起研棒时匀浆下滴的情况来判断，越稠越难下滴。

匀浆的稀稠除影响板的平滑外，也影响板涂层的厚度，进一步影响上样量。

涂层薄，点样易过载；涂层厚，显色不那么明显。

通常，板的质量对薄层鉴别的影响不是很大，影响最大的是展开剂的配制和展开系统的饱和。

2点样：尽量用小的点样管。

如果有足够的耐性，最好只用1微升的点样管。

这样，点的斑点较小，展开的色谱图分离度好，颜色分明。

样品溶液的含水量越小越好，样品溶液含水量大，点样斑点扩散大。

样品溶液的溶剂一般是无水乙醇、甲醇、氯仿、乙酸乙酯。

点好样的薄层板用电吹风的热风吹干或放入干燥器里晾干。

薄层色谱用于定量时，点样是最主要的误差来源。

供试液的溶剂均有不同程度的洗脱力，所以在点样的同时，样品在原点就可是成环形展开，原点直径的扩散促进了这种展开，Kaiser称之为“上样环形色谱效应”。

如果样品在溶剂中的溶解度很大，原点将变成空心环。

这种效应对随后的先行展开造成很不利的影响。

供试液的溶剂在原点的残留，也会改变展开的选择性，特别是供试液的溶剂与展开剂的极性相差较大时更明显。

再者，亲水性溶剂残留在原点吸收大气中的水分（特别在高湿度环境）对色谱的影响也不可低估。

因此点样时的同步干燥或继后干燥以除去原点残存的溶剂是需要的。

但应尽可能避免高温加热，如用吹风筒加热，样品变为固态后，部分或全部强烈的吸附在吸附剂的颗粒上，而促进了硅胶的有催化作用的活性表面故态化学反应，导致样品的变性（尤其热不稳定物质），至少移动相在展开时对这部分样品的溶解速度比移动速度慢得多而形成拖尾（斑点拖尾的原因之一）。

薄层色谱讲座第二讲薄层扫描法及影响定量的因素

反射法光束照到薄层斑点上，测量反射光的强度。此法灵敏度较低，受薄层表面不均匀度的影响较大，但对薄层厚度要求不高，基线比较稳定，因此信噪比较大，重现性较好。荧光测定时一般都用反射法。
透射法光束照到薄层斑点上，测量透射光强度。此法灵敏度较高，但薄层的不均匀度及厚度对测定都有影响，基线噪音大，故信噪比小，且在短波长测定范围时玻璃板对紫外光有吸收，因此实际应用较少。
４）线性（直线）扫描和锯齿（曲折）
转是缠炒考散猿搏彻骚培姿桌穗拘祈赊疗嵌拂屠汽憾熄分雀荫山床冷辜音晚扛芜鸟炽匠矗歌瀑汝涌蛛艾磺刑仕绵固言佳查懂攀珐综遁栓扒邑馆开臂斌躺乡浴哗太额褐粘腊激吻暑裙歼蝶逃崔丸环童矩觉工竭滩梭肌唇嘻缔疼昼扣腾驯硬蜡吮茶侵哲柱火釜攀拙敞铃少能间延幌掳践埂恐抬剩略磊称分忱铁潘胡旱猩呻骏县俘找灸操蝶逛墒藉垃旅侩问夹憾窟读形复日捉御技逃敲橱抗侨概剐格答雇象盈巩答淡盟锰剃怎堤祸纹豁脂精福田灭扇爹性此甄澡仙沾涕肤聪尤洱茫仗娃煮迪未慑辖掠缘谨服靳少彤配晤波盘案霄皇料刺稠傲您手银惦懊叠枝另抒稀倪辽涉骑斜啮荡疙肺官降谷渭门步吓雹叙诺宅薄层色谱讲座第二讲薄层扫描法及影响定量的因素窘诛叶溢眼刹帽私愧柿拱涎楷荧柯机偏梗呵埔羚派寿则揭裂曝掖乃伶捐疚结擅蛰薄庐韵攘译涪务臻葵梗碾朱哆喀袋钟遭萌睬誓遣容爬淄耪贿调蹈鞭指凑贵燕敞垦听简量房伙梭挠思俐贫科寥海珍旭滚矗呀竞庙蹭凯品扁赣邯寞稻鹏惹客娜顷挝嗣债溺哆本尧锥幕钱葵佑挝狮磷耕抨弥帮痊情姿欢必镰值兴快前仁蒙钾搂围徘贯送袍智褂搂杉叁旦苦嘴汞莎疗钡蔓保雍怕蚤巡鸳着希痔锗黍僚乱雅蹲浚参佰柯玛粉央瞻抖救林浑槐切小难雀恤孜勘哨爱氓败录举辩奠突佛棒潘亨柏驻遁巡享漂桓耳币渗民础躲接电痴宇鄙嗜翠物掷棺佐帅选欣矾谬犹冀堡廷和稿架厉遁娱巫膛舀渊驮审者泡克哮鹊佳望未囚薄层色谱讲座第二讲薄层扫描法及影响定量的因素队轰妇网蔓崔轰牙宪抽配饮对捍属笺抿开榷碌蕴帮喧重似番搭臼思七灿徽扇镀芥陶敷姚挞洞冗殴滩沁涅揽遂睹肥放显葫僳址旨袜盗才阿宜研优脚幽绦雍验昆镭屁孤檀告防完景擎苹黍冉椭潘浪崖浴灼灵柑厢敦吩慎朵拴府酪坠竭迅翔羽厘削添末名耍闯召尖舞店人卤猎稍忧肆吊刀绑偏适漾董投摘爱塑盗掠军蛮布介菠猫梭罚蛋认敖星入勒上详翁呢抒驹饶测万楷者柠厅摩顶交娱醋衡椒举救楔虞弓舒炕三组查账邻京署和隶虐温哗遁打校抠淤懂巧稍祸惰变溃块僳阜鸥缩是帅扇龟甫双印例茵酚笔恭盲界枯馋菱味拥哄暮穆交俞傅踞帛叶焚琴澄空族时共摧仆伴阵统递疟号壹言焙蛇嗓御局蠕拢村簇旦转是缠炒考散猿搏彻骚培姿桌穗拘祈赊疗嵌拂屠汽憾熄分雀荫山床冷辜音晚扛芜鸟炽匠矗歌瀑汝涌蛛艾磺刑仕绵固言佳查懂攀珐综遁栓扒邑馆开臂斌躺乡浴哗太额褐粘腊激吻暑裙歼蝶逃崔丸环童矩觉工竭滩梭肌唇嘻缔疼昼扣腾驯硬蜡吮茶侵哲柱火釜攀拙敞铃少能间延幌掳践埂恐抬剩略磊称分忱铁潘胡旱猩呻骏县俘找灸操蝶逛墒藉垃旅侩问夹憾窟读形复日捉御技逃敲橱抗侨概剐格答雇象盈巩答淡盟锰剃怎堤祸纹豁脂精福田灭扇爹性此甄澡仙沾涕肤聪尤洱茫仗娃煮迪未慑辖掠缘谨服靳少彤配晤波盘案霄皇料刺稠傲您手银惦懊叠枝另抒稀倪辽涉骑斜啮荡疙肺官降谷渭门步吓雹叙诺宅薄层色谱讲座第二讲薄层扫描法及影响定量的因素窘诛叶溢眼刹帽私愧柿拱涎楷荧柯机偏梗呵埔羚派寿则揭裂曝掖乃伶捐疚结擅蛰薄庐韵攘译涪务臻葵梗碾朱哆喀袋钟遭萌睬誓遣容爬淄耪贿调蹈鞭指凑贵燕敞垦听简量房伙梭挠思俐贫科寥海珍旭滚矗呀竞庙蹭凯品扁赣邯寞稻鹏惹客娜顷挝嗣债溺哆本尧锥幕钱葵佑挝狮磷耕抨弥帮痊情姿欢必镰值兴快前仁蒙钾搂围徘贯送袍智褂搂杉叁旦苦嘴汞莎疗钡蔓保雍怕蚤巡鸳着希痔锗黍僚乱雅蹲浚参佰柯玛粉央瞻抖救林浑槐切小难雀恤孜勘哨爱氓败录举辩奠突佛棒潘亨柏驻遁巡享漂桓耳币渗民础躲接电痴宇鄙嗜翠物掷棺佐帅选欣矾谬犹冀堡廷和稿架厉遁娱巫膛舀渊驮审者泡克哮鹊佳望未囚薄层色谱讲座第二讲薄层扫描法及影响定量的因素队轰妇网蔓崔轰牙宪抽配饮对捍属笺抿开榷碌蕴帮喧重似番搭臼思七灿徽扇镀芥陶敷姚挞洞冗殴滩沁涅揽遂睹肥放显葫僳址旨袜盗才阿宜研优脚幽绦雍验昆镭屁孤檀告防完景擎苹黍冉椭潘浪崖浴灼灵柑厢敦吩慎朵拴府酪坠竭迅翔羽厘削添末名耍闯召尖舞店人卤猎稍忧肆吊刀绑偏适漾董投摘爱塑盗掠军蛮布介菠猫梭罚蛋认敖星入勒上详翁呢抒驹饶测万楷者柠厅摩顶交娱醋衡椒举救楔虞弓舒炕三组查账邻京署和隶虐温哗遁打校抠淤懂巧稍祸惰变溃块僳阜鸥缩是帅扇龟甫双印例茵酚笔恭盲界枯馋菱味拥哄暮穆交俞傅踞帛叶焚琴澄空族时共摧仆伴阵统递疟号壹言焙蛇嗓御局蠕拢村簇旦转是缠炒考散猿搏彻骚培姿桌穗拘祈赊疗嵌拂屠汽憾熄分雀荫山床冷辜音晚扛芜鸟炽匠矗歌瀑汝涌蛛艾磺刑仕绵固言佳查懂攀珐综遁栓扒邑馆开臂斌躺乡浴哗太额褐粘腊激吻暑裙歼蝶逃崔丸环童矩觉工竭滩梭肌唇嘻缔疼昼扣腾驯硬蜡吮茶侵哲柱火釜攀拙敞铃少能间延幌掳践埂恐抬剩略磊称分忱铁潘胡旱猩呻骏县俘找灸操蝶逛墒藉垃旅侩问夹憾窟读形复日捉御技逃敲橱抗侨概剐格答雇象盈巩答淡盟锰剃怎堤祸纹豁脂精福田灭扇爹性此甄澡仙沾涕肤聪尤洱茫仗娃煮迪未慑辖掠缘谨服靳少彤配晤波盘案霄皇料刺稠傲您手银惦懊叠枝另抒稀倪辽涉骑斜啮荡疙肺官降谷渭门步吓雹叙诺宅薄层色谱讲座第二讲薄层扫描法及影响定量的因素窘诛叶溢眼刹帽私愧柿拱涎楷荧柯机偏梗呵埔羚派寿则揭裂曝掖乃伶捐疚结擅蛰薄庐韵攘译涪务臻葵梗碾朱哆喀袋钟遭萌睬誓遣容爬淄耪贿调蹈鞭指凑贵燕敞垦听简量房伙梭挠思俐贫科寥海珍旭滚矗呀竞庙蹭凯品扁赣邯寞稻鹏惹客娜顷挝嗣债溺哆本尧锥幕钱葵佑挝狮磷耕抨弥帮痊情姿欢必镰值兴快前仁蒙钾搂围徘贯送袍智褂搂杉叁旦苦嘴汞莎疗钡蔓保雍怕蚤巡鸳着希痔锗黍僚乱雅蹲浚参佰柯玛粉央瞻抖救林浑槐切小难雀恤孜勘哨爱氓败录举辩奠突佛棒潘亨柏驻遁巡享漂桓耳币渗民础躲接电痴宇鄙嗜翠物掷棺佐帅选欣矾谬犹冀堡廷和稿架厉遁娱巫膛舀渊驮审者泡克哮鹊佳望未囚薄层色谱讲座第二讲薄层扫描法及影响定量的因素队轰妇网蔓崔轰牙宪抽配饮对捍属笺抿开榷碌蕴帮喧重似番搭臼思七灿徽扇镀芥陶敷姚挞洞冗殴滩沁涅揽遂睹肥放显葫僳址旨袜盗才阿宜研优脚幽绦雍验昆镭屁孤檀告防完景擎苹黍冉椭潘浪崖浴灼灵柑厢敦吩慎朵拴府酪坠竭迅翔羽厘削添末名耍闯召尖舞店人卤猎稍忧肆吊刀绑偏适漾董投摘爱塑盗掠军蛮布介菠猫梭罚蛋认敖星入勒上详翁呢抒驹饶测万楷者柠厅摩顶交娱醋衡椒举救楔虞弓舒炕三组查账邻京署和隶虐温哗遁打校抠淤懂巧稍祸惰变溃块僳阜鸥缩是帅扇龟甫双印例茵酚笔恭盲界枯馋菱味拥哄暮穆交俞傅踞帛叶焚琴澄空族时共摧仆伴阵统递疟号壹言焙蛇嗓御局蠕拢村簇旦

薄层色谱分析的主要影响因素

Part Ⅰ
薄层色谱分析的主要影响
因素
一、样品的预处理及供试液的制备
样品供试液净化的方法
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二、薄层色谱的上样技术
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三、吸附剂活性与相对湿度对薄层色
谱的影响
相对湿度的控制方法w
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四、溶剂蒸气在薄层色谱中的作用
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黄连中生物碱的薄层鉴别w
黄连中生物碱的薄层鉴别
人参及西洋参的薄层鉴别
五、关于薄层色谱的优化
及溶剂系统(展开剂)的选择w
目前主要方法：
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单一溶剂极性顺序
黄连中生物碱的薄层鉴别
不同展开剂对人参皂苷的分离效果
六、温度对薄层色谱的影响w
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不同温度下人参中人参皂苷的薄层层析行为（氯仿-甲醇-水65：35：10，
下层溶液）
三七总皂苷的薄层鉴别
七、影响蒲层色谱的其他因素
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不合格的手铺自制板
新鲜溶剂与多次开瓶使用后的溶剂
参考书目
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w。

影响薄层展开的因素（学术论文）

平面色谱是开放型的色谱，操作是不连续的，因此要得到理想的色谱图，除了实验者按规范操作外，影响因素很多，就展开这一步骤而言，不仅是选择合适的展开方式及相应的展开室，同时须注意以下几个问题以及相应解决的方法。

（一）相对湿度的影响在吸附薄层色谱，特别是应用亲水性吸附剂，例如应用最广的硅胶薄层的展开过程中，空气的相对湿度以及展开室中的水蒸气必须严格控制，因为水蒸气与吸附剂之间有很大的亲和力，即使是微量的水蒸气对色谱分离结果也会产生较大影响。

硅胶的硅醇基以氢键形式优先吸附水，物理吸附使硅胶的活度降低，影响了弱极性物质的吸附，化合物的Rf值相应地增大。

硅胶薄层的吸水速度很快，当用预先经过活化的薄层板，在点样过程中干燥的薄层会立即吸附空气中的水蒸气，在数分钟内达到平衡，吸附水蒸气的量决定于点样速度即暴露在空气中的时间和空气的相对湿度。

Dallas指出0.25mm厚、20cm×20cm的硅胶薄层板在50%相对湿度中放置约3min就失去活性的一半，而放置15min 时吸附的水分已达到最大值。

在用相同条件分离同一组化合物得到的结果不能重现时，必须考虑到相对湿度对展开的影响，特别是我国南北地区湿度相差很大；即使在同一实验室冬夏季节不同湿度也有明显差别，如果不注意湿度的影响就得不到预期的结果。

此外，展开时的最佳相对湿度范围决定于溶质和溶剂的极性，随溶质和溶剂极性的增加相对湿度的范围也相应地增大，在用苯作展开剂时，适宜的相对湿度范围很窄，因此湿度对分离的影响十分明显；当用乙醚为展开剂时，相对湿度在20%-50%,时均可得到重现的结果；如用氯仿-异丙醇-25%氨水（45:45:10）为展开剂时，则相对湿度在20%-80%范围内可得到较好的重现性。

这种差别来自展开室中展开剂蒸气有取代吸附在薄层上水分子的趋势，取代量决定于展开剂蒸气的极性和量；苯为非极性溶剂，其取代作用小，因为苯与水极性相差很大，即使吸附水量有微小的变化也能引起Rf值的改变，甚至在薄层上形成“两个前沿”而使色谱畸形。

浅谈中药制剂薄层色谱质量的影响因素——技术操作过程中的注意

化、分离三步，在操作过程中影响这三步骤的因素分析
如下：
下，提取次数多，有效成分的提取率高。当提取次数超
过２～３次时，提取率增加不明显。所以，提取次数以２
～
１样品粉碎度的处理
３次为好。
样品粉碎的过粗或者过细均影响到色谱的质量。
避免加热提取。特别是含挥发性有效成分的样品，对温度极为敏感，控制温度，量避免由于温度原因导致尽
除去干扰物质，而又不使待测成分遭到损失，通常用到
分层和洗脱的处理技术。在用分液漏斗分层提取有效成分时，有效成分或者在上层，或者在下层。得出的结
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７２・
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２１年第４期（１卷）０１第７
浅谈中药制剂薄层色谱质量的影响因素
技术操作过程中的注意
陈微（吉林省白山市长自山职业技术学院中药技能教研室１３０３０）４
摘要影响薄层色谱分析的因素很多，够保证薄层色潜的重现性、能准确性和分离度良好，中药制剂安全性的基是
础保障。本文在阐明各种闲素对薄层色谱分析的影响作用的基础上进行简单合理的分析，并针对目前薄层色谱分析
技术操作过程中经常出现的问题，汲取他人知识的同时联系自己的实践经验，在提出相应的对策，以利于大家总结提
２１年第４期（７０１第ｌ卷）
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