溶菌酶生产工艺流程
溶菌酶的制备实验
思考题
1.讨论影响溶菌酶得率的因素？ 2.试分析提取溶菌酶所需要树脂的选择原则？ 3.树脂724是阴离子还是阳离子交换树脂？是酸性 还是碱性？ 4.溶菌酶的化学性质？ 5.溶菌酶的特点（优点）？ 6.溶菌酶的作用机理？
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溶菌酶的特点（优点）
（1）溶菌酶是很稳定的蛋白质，有较强的抗热性。蛋清溶菌酶是C型，是 已知的最耐热的酶； （2）溶菌酶不会因为有机溶剂的处理而失活，当转移到水溶液中时，溶菌 酶的活力可全部恢复； （3）溶菌酶可被冷冻或干燥处理，且活力稳定； （4）溶菌酶适宜pH5.3~6.4，可用于低酸性食品防腐； （5）溶菌酶生产成本较低； （6）溶菌酶的抗菌谱较广，不仅局限于G+ 菌，对部分G 菌也有抑制效果； （7）溶菌酶作为防腐剂安全性高。溶菌酶是一种天然蛋白质，1992年 FAO/WTO 的食品添加剂协会已经认定溶菌酶在食品中应用是安全的。
（3）仪器设备：电动搅拌器、冰箱、真空泵、 真空干燥箱
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（4）溶液配制： 1）0.15mol/L（pH6.5）磷酸缓冲液：取磷酸二氢钾6.8g,加
0.1mol/L氢氧化钠溶液152mL，用水至1定容到1L，即得； 每组150mL。 2）0.1mol/L氢氧化钠溶液：4g氢氧化钠固体放入烧杯中,用 800mL左右蒸馏水溶解，冷却后用蒸馏水定容至1L，即得； 每组160mL。 3）10%硫酸铵溶液：称取无水硫酸氨100g，用800mL水溶 解，用蒸馏水定容至1L，即得；每组200mL。 5）1mol/L氢氧化钠溶液：40g氢氧化钠固体放入烧杯中,用 800mL左右蒸馏水溶解，冷却后用蒸馏水定容至1L，即得。 6）3mol/L盐酸溶液：量取100mL浓盐酸加入300mL水中， 混合均匀即得。
溶菌酶生产实验报告
溶菌酶生产实验报告一、引言溶菌酶是一种能够溶解细菌细胞壁的酶，广泛应用于医药、食品、环境等领域。
本实验旨在通过培养溶菌酶产生菌株，探究溶菌酶的生产过程及其相关因素。
二、实验方法2.1 菌种培养1.选择适宜的溶菌酶产生菌株，如嗜溶菌酶链球菌。
2.在培养基中接种菌株，经过预培养后，进行扩大培养。
2.2 溶菌酶生产条件的优化1.pH值的调节：通过改变培养基的初始pH值，观察溶菌酶的产量变化。
2.温度的调节：将培养基置于不同温度的恒温箱中培养，比较不同温度下溶菌酶的产量。
3.液体搅拌速度的调节：通过改变培养基的搅拌速度，研究其对溶菌酶产量的影响。
4.培养时间的调节：通过监测培养时间对溶菌酶的产量影响，确定最佳的培养时间。
2.3 溶菌酶的提取和测定1.收获培养液，离心分离菌体和培养液。
2.采用适当的方法提取溶菌酶，如超声法或酶解法。
3.通过测定溶菌酶的酶活力来评估其产量。
三、结果与讨论3.1 溶菌酶生产条件的优化结果1.pH值的调节：在pH 7.0的条件下，溶菌酶的产量最高，随着pH值偏离中性，溶菌酶的产量逐渐降低。
2.温度的调节：在37℃的条件下，溶菌酶的产量最高，过高或过低的温度都会导致溶菌酶产量下降。
3.液体搅拌速度的调节：适当的搅拌速度可以增加溶菌酶的产量，过高或过低的搅拌速度都会对溶菌酶产量产生负面影响。
4.培养时间的调节：在培养72小时后，溶菌酶的产量达到最高峰，之后产量逐渐下降。
3.2 溶菌酶的提取和测定结果1.通过超声法提取溶菌酶，最终获得的溶菌酶液经过酶活力测定，其酶活力为X单位。
2.通过酶解法提取溶菌酶，最终获得的溶菌酶液经过酶活力测定，其酶活力为Y单位。
3.对比两种提取方法，发现超声法提取的溶菌酶活力更高。
四、结论本实验通过优化溶菌酶生产条件，确定了最佳的pH值、温度、液体搅拌速度和培养时间。
通过超声法提取溶菌酶的方法获得的溶菌酶活力较高。
这些结果对于溶菌酶的工业生产和应用具有重要的指导意义。
溶菌酶的制备
溶菌酶的制备[适用对象]生物工程专业[实验学时]18学时一、实验目的1、掌握：用阳离子交换树脂724树脂层析分离溶菌酶；透析的操作和盐析的操作。
2、了解：溶菌酶的制备的基本过程和溶菌酶的应用与溶菌酶的活性检测方法。
二、实验原理溶菌酶广泛存在于鸟类和家禽的蛋清里，蛋清溶菌酶含量丰富，溶菌酶是一种碱性球蛋白，在pH6.5时，带正电荷，可与阳离子交换剂进行离子交换，进行粗分离，蛋白质溶液可以盐析沉淀，蛋白质不能透过半透膜，可用透析除盐进行精纯。
三、仪器设备离心机、冷冻干燥机、低温冰箱、透析代、层析柱等。
四、相关知识点多课程知识点：蛋白质化学特点，生化提取方法：蛋白质分解方法，离子交换原理与方法。
本课程知识点综合：蛋白质制备方法。
五、实验步骤（一）724树脂的预处理1、水浸泡，浮洗市售724树脂200g用蒸馏水500ml浸泡30分钟，搅拌稍静置，将细小颗粒浮洗掉。
2、泡酸4%盐酸处理浸泡1小时，水洗中性。
3、泡碱4%氢氧化钠处理浸泡1小时，水洗中性，再用pH6.5 PBS浸泡平衡，得钠型724树脂。
（二）原料处理1、取蛋清每组打新鲜鸡蛋20个取蛋清约200ML于2000ML烧杯中。
2、除杂质新鲜蛋清除去脐带、弹壳碎片等杂质。
3、预冷新鲜蛋清置于4℃冰箱预冷。
（三）粗纯1、吸附处理的新鲜蛋清用处理好的724树脂100g ，在5-10℃搅拌吸附2小时。
2、洗涤吸附完毕，树脂用蒸馏水洗涤3次，再用0.15M, pH6.5 PBS洗涤树脂，滤干树脂，除去洗涤液。
3、洗脱洗涤完后树脂装入层析柱，用2/3体积的10%硫酸铵洗脱2次，收集洗脱液。
4、沉淀10%硫酸铵洗脱液加固体硫酸铵至总液含40%硫酸铵进行盐析沉淀，沉淀滤干得溶菌酶粗品。
（四）精纯1、溶解溶菌酶粗品用一倍量蒸馏水溶解成溶菌酶粗品液。
2、透析膜前处理市售透析膜，用蒸馏水浸泡，煮沸。
冷却，取出，用橡皮筋系紧一端。
试试漏不漏水。
3、透析溶菌酶粗品液装入透析袋，系紧于装有蒸馏水的烧杯中透析8小时，透析2-3次，即换水2-3次。
溶菌酶生产实验报告
溶菌酶生产实验报告
一、实验目的
本实验的目的是通过对溶菌酶的生产实验，探索新型溶菌酶的生产方法，提高其产量和质量。
二、实验原理
溶菌酶是一种能够分解细菌细胞壁的酶，具有广泛的应用价值。
在本实验中，我们采用培养基发酵的方式，通过添加不同的氮源、磷源和碳源，寻找最适宜的生长条件，提高溶菌酶的产量。
三、实验过程
1. 制备培养基：将适量的蛋白胨、酵母浸出物、葡萄糖和磷酸盐溶解于适量的蒸馏水中，调节pH值至7.0，加入琼脂糖，煮沸并灭菌，制备成培养基。
2. 培养菌株：选取溶菌酶生产菌株，接种于培养基中，进行预培养。
3. 调节生长条件：在预培养的基础上，分别添加不同的氮源、磷源和碳源，调节生长条件，培养一定时间后，测定溶菌酶的产量和活性。
四、实验结果
通过实验，我们发现在添加尿素、硝酸铵和酵母粉的情况下，溶菌酶的产量明显增加，其中添加尿素的效果最好。
在添加不同磷源和碳源的情况下，发现添加磷酸二氢钾和葡萄糖的效果最好。
通过优化生长条件，溶菌酶的产量得到了显著提高。
五、实验结论
本实验通过对溶菌酶的生产实验，探索了一种新型的生产方法，优化了生长条件，提高了溶菌酶的产量和质量。
这为溶菌酶的产业化生产提供了新的思路和方法，具有重要的应用价值。
溶菌酶提取——精选推荐
溶菌酶提取⽅法对⽐讲稿⽤2.1 结晶法溶菌酶具有耐热、耐酸的特性，并且易溶解在盐溶液，稳定性好，通过改变盐溶液的条件，可使溶菌酶以晶体形式析出⽽得以分离，结晶法也因此成为制备溶菌酶晶体最为传统的⽅法之⼀。
该⽅法的主要过程可简述如下，向富含溶菌酶的蛋清中加⼊(NH4)2SO4等中性盐，依据溶菌酶的等电点区，⽤氢氧化钠调节蛋清溶液的 pH，再加⼊溶菌酶晶体进⾏诱导，4℃放置⼤概2 周，即可析出⼤部分的溶菌酶晶体，⽽与其它杂蛋⽩质得以分离。
如要得到到更⾼纯度的溶菌酶，可将析出的溶菌酶晶体过滤，重新溶解，再利⽤上述同样的⽅法进⾏重结晶即可。
结晶法操作简单、成本低，是⽬前从蛋清中提取分离溶菌酶的⾸选⽅法，但它要求溶菌酶的含量要相对⾼，因此不适宜溶液中微量溶菌酶的分离。
此外，晶体的形成，蛋⽩质结晶既受到⾃⾝分⼦结构的影响，⼜受到结晶条件的影响，结晶过程中只要有细微的差别，晶体的产量和质量都将受到很⼤影响（结晶过程不好控制），所以蛋⽩质结晶是⼀个宏观看似简单⽽实际微观极为复杂的物理化学过程。
为进⼀步完善结晶法分离纯化溶菌酶，研发⼈员越来越重视膜结晶法的研究与应⽤。
相⽐于常规结晶⽅法，膜结晶法对蛋⽩质初始浓度要求低、结晶诱导时间较短、尤其是结晶过程可控，因⽽具有明显优势。
2.2 离⼦交换法离⼦交换法是借助溶液中各种蛋⽩质等粒⼦的带电差异，⽽与离⼦交换剂之间具有强弱不⼀的结合⼒，达到分离纯化物质的操作技术。
依据原料及分离纯化的不同要求，可分别选择羧甲基琼脂糖、羧酸纤维素和羧甲基纤维素等离⼦交换剂。
离⼦交换法操作简单，成本较低，可实现⾃动化连续操作，适⽤于⼤规模⽣产，是⽬前溶菌酶⽣产的常⽤⽅法。
（联⽤层析法因分离速度快、处理量⼤等优势⽽受到研发⼈员的⼴泛关注，包括膜亲和层析法、离⼦交换层析法等。
尤其是离⼦交换层析法 20 世纪 80 年代便开始⼴泛应⽤于溶菌酶地分离纯化。
此⽅法操作简便、成本低、⾼效、可实现⾃动化操作，是溶菌酶⽣产中的常⽤⽅法之⼀。
鸡蛋清中溶菌酶工艺流程中控制点
鸡蛋清中溶菌酶工艺流程中控制点下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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溶菌酶产业链
溶菌酶产业链溶菌酶产业链是指以溶菌酶为核心的生产和销售过程中所涉及的一系列环节和参与主体。
溶菌酶是一种具有溶解细菌细胞壁能力的酶类物质，广泛应用于医药、食品、农业等领域。
溶菌酶产业链包括溶菌酶的研发与生产、原材料供应、产品销售与应用等环节。
一、溶菌酶的研发与生产溶菌酶的研发与生产是溶菌酶产业链的起始环节。
研发机构和生产企业通常通过对细菌的筛选和培养，利用分离纯化技术获得溶菌酶。
研发人员通过改良菌株、调节培养条件等手段，提高溶菌酶的产量和活性。
同时，生产企业还需建立质量控制体系，确保溶菌酶的质量稳定性和安全性。
二、原材料供应溶菌酶的制备过程中需要使用多种原材料，如培养基成分、培养菌种等。
这些原材料需要从供应商处进行采购。
供应商应具备稳定的原材料供应能力，并提供符合质量标准的产品。
同时，供应商还需与生产企业保持紧密的合作，根据市场需求及时调整供货量和供货周期。
三、产品销售与应用溶菌酶的销售与应用是溶菌酶产业链的关键环节。
生产企业通过与经销商合作，将溶菌酶产品推向市场。
经销商通常通过建立销售网络、开展市场推广等方式，将溶菌酶产品介绍给潜在客户。
在销售过程中，生产企业需要充分了解客户的需求，提供符合客户要求的产品和解决方案。
溶菌酶广泛应用于医药、食品、农业等领域。
在医药领域，溶菌酶可用于治疗感染性疾病，如呼吸道感染、皮肤感染等。
在食品领域，溶菌酶可用于食品添加剂，增加食品的口感和保鲜效果。
在农业领域，溶菌酶可用于农作物的保护和增产，提高农作物的抗病能力。
溶菌酶产业链的发展离不开技术创新和市场需求的驱动。
随着生物技术的不断进步，溶菌酶的研发和生产技术也在不断提高。
同时，随着人们对健康和安全的关注度不断提高，溶菌酶在医药和食品领域的应用需求也在增加。
这为溶菌酶产业链的发展提供了良好的机遇。
然而，溶菌酶产业链也面临一些挑战。
首先，溶菌酶的研发和生产技术要求较高，需要大量的研发投入和专业人才。
其次，溶菌酶市场竞争激烈，产品同质化现象明显，企业需要通过不断创新和差异化竞争来取得竞争优势。