特发性卵巢早衰患者AMH,AMHR—Ⅱ基因多态性分析
卵巢早衰预测指标的研究进展

卵巢早衰预测指标的研究进展吴妍;姚蕾;盛文丽;刘明娟【摘要】卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)发病率逐年上升,病因繁杂,缺乏有效的治疗手段。
POF早期准确预测和干预是改善妇女生活质量和生育缺憾的有效途径之一。
目前,越来越多的研究表明,难以通过单一指标对卵巢早衰进行有效预测。
那么,筛选出便捷、无创的预测指标,通过数学模型构建一个高效的卵巢早衰预警系统显得尤为重要。
危险因素、INH-B、AMH、AFC、CCCT、自身抗体、BMP-15基因突变、卵巢间质血流等可作为POF预测性参数;FSH/LH、FSH等可作为POF验证性参数。
【期刊名称】《长江大学学报(自然版)理工卷》【年(卷),期】2015(000)036【总页数】5页(P34-38)【关键词】卵巢早衰;预测性参数;验证性参数【作者】吴妍;姚蕾;盛文丽;刘明娟【作者单位】华润武钢二医院妇产科,湖北武汉430085;华润武钢二医院妇产科,湖北武汉 430085;华润武钢二医院妇产科,湖北武汉 430085;华润武钢二医院妇产科,湖北武汉 430085【正文语种】中文【中图分类】R711.75卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)是指女性在40岁之前出现卵巢功能衰竭,主要表现为闭经、雌激素水平下降和促卵泡激素水平上升。
随着生活质量的提高和二胎政策的放开,越来越多的女性更加关注卵巢早衰所带来的生育问题和相关并发症,如神经系统、骨骼系统、代谢系统和心血管系统等不良改变。
尽管有学者提出5%~10%POF患者经过积极治疗后在短期内有望恢复卵巢功能,甚至重获生育能力[1],但若能在卵巢功能健全之时准确预测卵巢早衰的发生时间,采取相应治疗策略和生育安排,则可让更多患者获益,避免人生缺憾和推迟绝经所致的机体变化。
鉴于此,寻求灵敏、便捷、高效的预测指标显得迫在眉睫。
现将卵巢早衰的预测指标研究进展做一综述。
AMH及性激素对卵巢储备功能的预测价值和人工周期治疗对卵巢储备功能的影响

AMH及性激素对卵巢储备功能的预测价值和人工周期治疗对卵巢储备功能的影响苏比努尔·买买提;阿比达·阿布都卡德尔【摘要】目的:研究抗苗勒管激素(AMH)及性激素对卵巢储备功能的预测价值及了解人工周期治疗对卵巢早衰(POF)及卵巢功能减退(DOS)患者卵巢储备功能的影响.方法:选取2016年6月至2017年10月就诊于妇科门诊及生殖助孕门诊的妇女100例,其中卵巢功能正常者34例,POF患者33例,DOS患者33例,比较3组研究对象的AMH及性激素水平.对POF组、DOS组患者给予人工周期治疗,并比较和分析卵巢储备功能异常人群治疗前后AMH及性激素水平变化.结果:3组研究对象孕酮(P)、促卵泡生成素(FSH)、睾酮(T)、促黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)、AMH 水平比较差异有统计学意义(P<0.05),其中POF组AMH、T、E2水平明显低于正常组和DOS组,P水平明显低于对照组,LH、FSH明显高于正常组和DOS组(P<0.05).相关性分析显示AMH和P、T、E2呈正相关(r=0.235、0.405、0.458,P<0.01或0.05),与FSH、LH呈负相关(r=-0.502、-0.357,P<0.01).人工周期治疗后卵巢储备功能异常患者的性激素水平较治疗前有所改善(P<0.05),但AMH 水平在治疗前后差异无统计学意义(P>0.05).结论:AMH联合性激素可以作为卵巢储备功能评价的客观预测指标,此外发现人工周期治疗卵巢储备功能异常患者可以治疗低雌激素症状,但不能改善卵巢储备功能.【期刊名称】《沈阳医学院学报》【年(卷),期】2018(020)005【总页数】4页(P410-412,415)【关键词】卵巢储备功能;AMH;性激素;卵巢早衰【作者】苏比努尔·买买提;阿比达·阿布都卡德尔【作者单位】新疆医科大学第一附属医院妇科,新疆乌鲁木齐 830054;新疆医科大学第一附属医院妇科,新疆乌鲁木齐 830054【正文语种】中文【中图分类】R711.75卵巢储备功能是指卵巢的皮质区卵泡生长、发育形成可受精卵母细胞的能力,即为卵巢内所剩的卵子的数量和质量[1],是反映女性生育能力的重要标志。
抗缪勒氏管激素与性激素水平在卵巢储备功能评估中的价值

DOI:10.19368/ki.2096-1782.2024.05.009抗缪勒氏管激素与性激素水平在卵巢储备功能评估中的价值方闰,谈王蓉,匡宁,蒋华春宜兴市中医医院检验科,江苏宜兴214200[摘要]目的分析在卵巢储备功能中抗缪勒氏管激素(Anti-mullerian Hormone, AMH)与性激素水平的评估价值。
方法选取2022年3—8月宜兴市中医医院收治的100例妇科患者为研究对象,依据卵巢储备功能的不同将患者分成3组,甲组33例(卵巢储备功能正常),乙组33例(卵巢储备功能减退),丙组34例(卵巢储备功能早衰),检测所有患者AMH、卵泡刺激素(Follicle Stimulating Hormone, FSH)、黄体生成素(Luteinizing Hor⁃mone, LH)及雌二醇(Estradiol, E2)指标水平。
对比3组患者上述指标检测水平、AMH分别和FSH、LH、E2联合检测的预估值。
结果甲组AMH、E2高于乙组、丙组,FSH、LH低于乙组、丙组,差异有统计学意义(P均< 0.05)。
乙组AMH、E2高于丙组,FSH、LH低于丙组,差异有统计学意义(P均<0.05)。
对乙组和丙组患者进行检测,AMH的血浆浓度时间曲线下面积(Area Under the Curve, AUC)、灵敏度、特异度大于FSH、LH、E2;AMH+FSH、AMH+LH、AMH+E2的AUC、灵敏度、特异度分别大于FSH、LH、E2。
结论 AMH与性激素指标可以作为临床评估卵巢储备功能参考指标,联合检测后预估价值更高。
[关键词]抗缪勒氏管激素;性激素;卵巢储备功能;评估价值[中图分类号]R246 [文献标识码]A [文章编号]2096-1782(2024)03(a)-0009-04Value of Anti-mullerian Hormone and Sex Hormone Levels in the Assess⁃ment of Ovarian Reserve FunctionFANG Run, TAN Wangrong, KUANG Ning, JIANG HuachunDepartment of Laboratory, Yixing Hospital of Traditional Chinese Medicine, Yixing, Jiangsu Province, 214200 China[Abstract] Objective To evaluate the value of anti-mullerian hormone (AMH) and sex hormone levels in ovarian re⁃serve function. Methods A total of 100 gynecological patients admitted to Yixing Hospital of Traditional Chinese Medicine from March to August 2022 were selected as the study objects. According to different ovarian reserve func⁃tions, the patients were divided into 3 groups: Group A (33 cases) (normal ovarian reserve function), group B (33 cases) (decreased ovarian reserve function), and group C (34 cases) (premature ovarian reserve function). The levels of AMH, follicle stimulating hormone (FSH), luteinizing hormone (LH) and estradiol (E2) were detected in all patients. The detection levels of the above indicators and the estimated values of AMH combined with FSH, LH and E2 were compared among the 3 groups. Results AMH and E2 in group A were higher than those in groups B and C, and FSH and LH were lower than those in groups B and C, the differences were statistically significant (all P<0.05). AMH and E2 in group B were higher than those in group C, FSH and LH were lower than those in group C, and the differences were statistically significant (all P<0.05). The Area Under the Curve (AUC), sensitivity and specificity of AMH were higher than those of FSH, LH and E2. The AUC, sensitivity and specificity of AMH+FSH, AMH+LH and AMH+E2 [作者简介] 方闰(1990-),女,本科,主管检验师,研究方向为临床检验。
卵巢早衰患者卵巢功能评估及护理

卵巢早衰患者卵巢功能评估及护理游红霞;张静宇;张玉蕊【期刊名称】《护理实践与研究》【年(卷),期】2016(013)017【摘要】目的:探讨血清抗苗勒管激素(AMH)水平对于卵巢早衰(POF)患者卵巢功能评估的作用和意义,同时探索针对该类患者进行护理的方法。
方法:应用酶联免疫法对我院收治的 POF 患者以及围 POF 患者血清 AMH 水平进行测定,应用电化学发光法检测卵泡刺激素(FSH)及雌二醇(E2),同时将正常妇女作为正常组也进行性激素检测。
对3组研究对象 AMH,FSH,E2检测指标数据进行对比。
结果:正常组的血清 AMH 水平最高,围 POF 组 AMH 明显下降,POF 组 AMH 最低(P <0.05);POF 组的 FSH 水平高于正常组,于围 POF 组也略有升高;POF 组 E2水平最低,与正常组比较具有统计学意义(P <0.05),围POF 组及正常组差异无统计学意义(P >0.05)。
结论:AMH 可用于作为判断卵巢功能是否正常的参考指标,该指标联合 FSH 以及 E2水平检测,可以有效评估卵巢功能,以便早期预测 POF。
针对该类患者进行精心护理,有利于患者预后。
【总页数】2页(P92-93)【作者】游红霞;张静宇;张玉蕊【作者单位】518122 深圳市广东省深圳市坪山新区妇幼保健院护理部;518122 深圳市广东省深圳市坪山新区妇幼保健院护理部;518122 深圳市广东省深圳市坪山新区妇幼保健院护理部【正文语种】中文【相关文献】1.卵巢早衰患者卵巢功能评估及护理对策2.研究并分析心理护理在卵巢早衰患者护理中的重要性3.心理护理在卵巢早衰患者临床护理中的作用分析4.心理护理在卵巢早衰患者护理中的意义5.心理护理在卵巢早衰患者护理中的价值因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
特发性卵巢早衰患者AMH,AMHR—Ⅱ基因多态性分析

特发性卵巢早衰患者AMH,AMHR—Ⅱ基因多态性分析目的探讨特发性卵巢早衰与AMH,AMHR-Ⅱ的基因多态性。
方法选择2015年6月~2017年3月在我院诊断的特发性卵巢早衰患者50例为POF组。
另选择健康体检者100例为对照组。
PCR方法测定两组AMH,AMHR-Ⅱ基因多态性。
结果POF组AMH基因突变位点基因型及等位基因频率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。
POF组AMHR-Ⅱ c.49+10T>G 基因位点GG基因型比例显著高于对照组,G等位基因频率显著高于对照组,c.622-2C>T基因位点TT基因型比例显著高于对照组,T等位基因频率显著高于对照组,c.622-24C>A 基因位点AA基因型比例显著高于对照组,A等位基因频率显著高于对照组,c.1038G>T基因位点TT基因型比例显著高于对照组,T等位基因频率显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论AMHR-Ⅱ基因多态性可能是特发性卵巢早衰的重要的发病机制。
[Abstract] Objective To discuss polymorphism analysis of AMH,AMHR-Ⅱgene in patients with idiopathic premature ovarian failure. Methods 50 cases with idiopathic premature ovarian failure from Jun 2015 to Mar 2017 were selected as POF group. And 100 cases for physical examination were selected as control group. Polymorphismof AMH,AMHR- II gene of two groups was detected by PCR. Results Genotype and allele frequency of AMH gene mutation sites of POF group showed no significant difference with the control group(P>0.05). The proportion of GG genotype in AMHR- loci II,c.49+10T>G of POF group was higher than that of the control group,and G allele frequency was higher than that of the control group;The proportion ofTTgenotype inc.622-2C>Tof POF group was higher than that of the control group,and Tallele frequency was higher than that of the control group;The proportion ofAAgenotype inc.622-24C>Aof POF group was higher than that of the control group,and Aallele frequency was higher than that of the control group;The proportion ofTTgenotype inc.1038G>Tof POF group was higher than that of the control group,and Tallele frequency was higher than that of the control group;The difference showed significant difference(P<0.05). Conclusion Polymorphism of AMHR-Ⅱgene may be an important pathogenesis of idiopathic premature ovarian failure.[Key words] Idiopathic premature ovarian failure;AMH;AMHR-Ⅱ;Gene polymorphism特發性卵巢早衰是指無精确原因的,自身免疫抗体正常的,染色体核型正常的女性在40周岁之前出现的性器官萎缩、持续性闭经,伴有卵泡雌激素、黄体生成素升高,雌激素下降的一种综合征[1-2]。
卵巢早衰候选基因的突变研究进展

卵巢早衰候选基因的突变研究进展
谭跃球;程德华;卢光琇
【期刊名称】《遗传》
【年(卷),期】2006(28)11
【摘要】卵巢早衰病因复杂, 多数病例病因不明.在已知的病因中, 遗传因素非常重要.卵巢早衰不但可导致不孕症, 患者的低雌激素水平还增加了患骨质疏松症和冠心病的危险.目前临床上的主要治疗措施包括激素替代治疗和供卵治疗不孕症等, 但效果都不理想.鉴定卵巢早衰的致病基因是从根本上治疗和预防该病的基础.目前已发现在X染色体上和常染色体上多个基因与之相关, 文章综述了近年来对卵巢早衰候选基因的突变分析情况, 旨在从分子水平分析研究卵巢早衰的发病机制提供基础.【总页数】5页(P1467-1471)
【作者】谭跃球;程德华;卢光琇
【作者单位】中南大学生殖与干细胞研究所,长沙410078;中南大学生殖与干细胞研究所,长沙410078;中南大学生殖与干细胞研究所,长沙410078
【正文语种】中文
【中图分类】R3
【相关文献】
1.水稻叶尖黄化突变体8272的候选基因筛选 [J], 肖恩星;曾文静;曾彦达;张启军;冯昊
2.水稻粒宽突变体gw87的基因定位及候选基因分析 [J], 张翔宇;郭佳;王三;陈聪
萍;孙昌辉;邓晓建;王平荣
3.水稻早抽穗突变体zc1的表型分析及候选基因鉴定 [J], 郝宏姣;栾维江;王鑫;田瑶;兰志鹏;周诗晨;刘晓男;郑瑞;王馨翊;张泗举
4.棉花花器官突变体的鉴定及候选基因的克隆 [J], 杨琴莉;高梦涛;严孙艺;张天真;胡艳;杨多凤;丁林云;赵汀;张军;梅欢;黄楚珺;高阳;叶莉
5.甘蓝型油菜角果数突变体基因的定位及候选基因分析 [J], 赵改会;李书宇;詹杰鹏;李晏斌;师家勤;王新发;王汉中
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
卵巢早衰患者联合测定血清FSH、LH和E2的临床应用价值

卵巢早衰患者联合测定血清FSH、LH和E2的临床应用价值摘要】目的了解卵巢早衰患者血清FSH、LH和E2的水平,为临床治疗提供科学依据。
方法检测51例卵巢早衰患者的血清FSH、LH和E2的水平,同时检测180例月经周期规律的正常育龄期妇女作为正常对照组,比较两组性激素水平,并对结果进行分析。
结果卵巢早衰组血清FSH、LH水平明显高于正常对照组,血清E2的水平明显低于正常对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。
结论大部分卵巢早衰患者性激素水平紊乱,早期进行血清FSH、LH和E2的水平检测,及时进行激素替代治疗,阻止卵巢早衰进一步发展甚至恢复卵巢功能至关重要。
【关键词】卵巢早衰 FSH LH E2卵巢早衰(premature ovarian failure, POF)是指卵巢功能衰竭所导致的40岁之前即闭经的现象。
特点是原发或继发闭经伴随血促性腺激素水平升高和雌激素水平降低,并伴有不同程度的一系列低雌激素症状如:潮热多汗、面部潮红、性欲低下等。
可分为卵泡数量的缺失(卵泡耗竭型) 和卵泡功能的消失(卵泡数目正常型) 两类。
前者又分为初始卵泡的数目不足和卵泡闭锁加速;后者包括酶缺乏、自身免疫、信号缺失、医源性(如放化疗)、特发性五种。
目前,大部分病例不明确。
近年来其发病率有逐渐上升趋势,严重影响了中、青年女性的生活质量和生理健康。
因此本文检测51例POF患者血清FSH、LH、E2的水平,并与正常育龄妇女和绝经妇女进行对比分析,旨在探讨POF患者性激素水平的变化特点及临床意义,为临床治疗提供科学依据,现将结果报告如下。
1 资料与方法1.1 临床资料51例病例均为2009年6月至2012年6月来我院妇产科门诊体检卵巢早衰患者,年龄17~39岁,其中<20岁5例,23~30岁21例。
>30岁25例。
临床表现为月经稀少渐至闭经者、紊乱、或突然闭经。
通过临床表现和连续动态监测性激素水平,最终经临床诊断为POF患者。
说说:amh值多少为卵巢早衰?卵巢早衰应该怎么办?科学解答

说说:amh值多少为卵巢早衰?卵巢早衰应该怎么办?科学解答amh值多少为卵巢早衰?卵巢早衰应该怎么办?amh值是卵巢功能的一个检测指标,卵巢正常情况下, amh值是2到7之内,这个是正常的,一般小于2提示有卵巢早衰的迹象,这个值越低,反应卵巢功能是越差的,值大于七的话,一般是提示有多囊卵巢综合症的可能性比较大。
所以,要是小于2为卵巢早衰,小于0.86,这种情况就属于绝经了,所以, amh值越低,那么就反映了卵巢功能衰退的程度越明显。
卵巢早衰(竭)和卵巢早衰老应该怎么办?女性一旦确诊" 卵巢早衰(竭)",即原发性卵巢功能不全,要理性接受无法再自然怀孕生子的现实。
至于卵巢早衰所导致的一些症状,像潮热、盗汗、阴道干燥、烦恼或难以集中注意力、性欲减少等,可以通过激素替代疗法(不建议长期服用),在欧美国家医生会建议以及ENlivEN21定制营养来稳定体内的激素平衡。
卵巢保养的误区一、保养卵巢抗早衰,到底有用没用?卵巢保养并不是在腹部涂抹保养卵巢的产品,进行腹部按摩。
无论是从医学角度、从解剖学角度、从皮肤吸收学的角度都是行不通的,专家学者表示不会有任何效果。
首先卵巢保养30岁就可以开始,最晚不过40岁,(W HI)实验的第一批数据公布,绝经后面临的一个重大的转折-激素治疗,事实上(W HI),不支持绝经后再使用激素。
早期可口服植物来源ENlivEN21(BNSWHO)定制营养中其雪莲培养物等营养平衡雌激素,修复神经中枢系统、治疗皮肤衰老、乳房和生殖器官萎缩、血管舒缩症状,睡眠障碍、提高骨密度,修复妇科等附件生殖炎症。
二、保养卵巢的目的?我们要思考保养卵巢是为了解决什么问题?早衰不孕,延迟绝经?平衡激素?美容抗衰?生殖保养?睡眠情绪?心脏血管?骨胳质量?所以我们真正解决的是通过什么手段来,避免绝经后带给我们身体的种种不适,一定在正确面对:卵巢迟早会失去工作能力,绝经迟早都会到来,所以对症下药就可以轻松达到目的。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
特发性卵巢早衰患者AMH,AMHR—Ⅱ基因多态性分析目的探讨特发性卵巢早衰与AMH,AMHR-Ⅱ的基因多态性。
方法选择2015年6月~2017年3月在我院诊断的特发性卵巢早衰患者50例为POF组。
另选择健康体检者100例为对照组。
PCR方法测定两组AMH,AMHR-Ⅱ基因多态性。
结果POF组AMH基因突变位点基因型及等位基因频率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。
POF组AMHR-Ⅱ c.49+10T>G 基因位点GG基因型比例显著高于对照组,G等位基因频率显著高于对照组,c.622-2C>T基因位点TT基因型比例显著高于对照组,T等位基因频率显著高于对照组,c.622-24C>A 基因位点AA基因型比例显著高于对照组,A等位基因频率显著高于对照组,c.1038G>T基因位点TT基因型比例显著高于对照组,T等位基因频率显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。
结论AMHR-Ⅱ基因多态性可能是特发性卵巢早衰的重要的发病机制。
[Abstract] Objective To discuss polymorphism analysis of AMH,AMHR-Ⅱgene in patients with idiopathic premature ovarian failure. Methods 50 cases with idiopathic premature ovarian failure from Jun 2015 to Mar 2017 were selected as POF group. And 100 cases for physical examination were selected as control group. Polymorphismof AMH,AMHR- II gene of two groups was detected by PCR. Results Genotype and allele frequency of AMH gene mutation sites of POF group showed no significant difference with the control group(P>0.05). The proportion of GG genotype in AMHR- loci II,c.49+10T>G of POF group was higher than that of the control group,and G allele frequency was higher than that of the control group;The proportion ofTTgenotype inc.622-2C>Tof POF group was higher than that of the control group,and Tallele frequency was higher than that of the control group;The proportion ofAAgenotype inc.622-24C>Aof POF group was higher than that of the control group,and Aallele frequency was higher than that of the control group;The proportion ofTTgenotype inc.1038G>Tof POF group was higher than that of the control group,and Tallele frequency was higher than that of the control group;The difference showed significant difference(P<0.05). Conclusion Polymorphism of AMHR-Ⅱgene may be an important pathogenesis of idiopathic premature ovarian failure.[Key words] Idiopathic premature ovarian failure;AMH;AMHR-Ⅱ;Gene polymorphism特發性卵巢早衰是指無精确原因的,自身免疫抗体正常的,染色体核型正常的女性在40周岁之前出现的性器官萎缩、持续性闭经,伴有卵泡雌激素、黄体生成素升高,雌激素下降的一种综合征[1-2]。
我国卵巢早衰的发病率相对较高,而其中有80%为特发性卵巢早衰,患者主要表现为月经紊乱,血管舒缩功能不稳定,容易出汗、潮热、情绪波动等。
目前特发性卵巢早衰的发病机制还不十分明确,可能与遗传、自身免疫因素、感染、代谢异常、环境等有关[3-4]。
特发性卵巢早衰尚无明确有效的治疗方法。
抗苗勒激素(AMH)属于转化生长因子超家族成员,与人类生殖系统的发育及功能密切相关[5-6]。
其与抗苗勒激素Ⅱ型受体(AMHR-Ⅱ)结合而发挥作用。
本研究分析特发性卵巢早衰患者AMH以及AMHR-Ⅱ基因多态性,现将结果报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选择2015年6月~2017年3月在我院诊断的特发性卵巢早衰患者50例为POF组。
纳入标准:年龄18~39岁,汉族,无月经来潮≥4个月;超声检查显示内生殖器萎缩;两次间隔1个月以上检测空腹血清FSH>40IU/L;排除有明确病因的卵巢早衰。
排除标准:既往腮腺炎病史,盆腔结核病史,卵巢手术,盆腔内放疗、化疗者。
所有患者对本次研究知情同意,本研究经过医院医学伦理委员会同意。
另选择健康体检者100例为对照组。
POF组年龄18 ~39岁,平均(35.1±7.5)岁。
对照组年龄21~39岁,平均(35.5±7.1)岁。
两组平均年龄比较差异无统计学意义(P>0.05)。
1.2 方法POF组患者与对照组均于月经来潮第三天采集晨起空腹静脉血10mL用于检测,POF组中无月经来潮的患者,B超观察双侧卵巢无优势卵泡形成时采集晨起空腹静脉血标本。
-75℃保存待测。
血标本提取DNA:采用饱和酚/氯仿法提取目的基因DNA片段;血标本解冻,取2mL置于离心管中,加10mL灭菌蒸馏水,颠倒混匀,静止10min;4000转/min离心10分钟,弃上清,重复离心3次,至上清液澄清;沉淀物种加STE700μL,SDS 1~2滴,蛋白裂解酶K 10μL,摇匀,37℃温浴过夜,至沉淀完全消失,室温下离心,弃上清,将细胞沉淀转至1.5mL 试管;试管内加入饱和酚至试管加满,摇匀,静置5min,16000转/min离心10分钟,提取上清液至另一个1.5mL试管,加等体积氯仿,摇匀,静置5min,16000转/min离心10min,取上清,加入1.5mL试管,加入95%冰冻酒精,醋酸钠1滴,摇匀;16000转/min离心10min,弃上清,75%冰冻酒精萃洗沉淀,16000转/min离心5min,弃上清,自然干燥,得DNA。
AMH、AMHR-Ⅱ基因检测:自数据库中获得AMH、AMHR-Ⅱ基因相关序列,采用引物设计软件设计正向及反向引物。
配制引物。
PCR反应体系:模板DNA 1μL,正向引物1μL,反向引物1μL,MgCl2 3μL,10×Buffer 3μL,dNTPs 3μL,Tag酶0.3μL,H2O 17.7μL。
PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳。
PCR扩增产物进行纯化及序列测定。
1.3 统计学处理采用SPSS17.0统计学软件对数据进行分析,计数资料采用χ2检验,计量资料以()表示,采用t检验。
P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果2.1 兩组AMH基因突变位点基因型及等位基因频率比较见表1。
POF组AMH基因突变位点基因型及等位基因频率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。
2.2 两组AMHR-Ⅱ基因位点基因型及等位基因频率比较见表2。
POF组AMHR-Ⅱ c.49+10T>G 基因位点GG基因型比例显著高于对照组,G等位基因频率显著高于对照组,c.622-2C>T基因位点TT基因型比例显著高于对照组,T等位基因频率显著高于对照组,c.622-24C>A 基因位点AA基因型比例显著高于对照组,A等位基因频率显著高于对照组,c.1038G>T基因位点TT基因型比例显著高于对照组,T等位基因频率显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。
3 讨论卵巢早衰是指卵巢功能衰竭所导致的40岁之前即闭经的现象。
其特点是原发或继发闭经伴随血促性腺激素水平升高和雌激素水平降低,并伴有不同程度的一系列低雌激素症状,如潮热多汗、面部潮红、性欲低下等。
卵巢早衰是一种异质性疾病,与自身免疫、遗传因素、代谢异常、感染、环境等有关。
卵巢早衰是一种有多种病因的综合征,在大部分的病例中病因还不明确。
患者表现为闭经、不孕、低雌激素症状、伴发的自身免疫性疾病等。
特发性卵巢早衰最常见,患者原因不明,患者可无明确的诱因,自身免疫抗体正常,染色体核型正常。
特发性卵巢早衰患者大部分染色体核型分析正常,提示遗传性治病因素可能发生在单基因或者核苷酸分子水平。
随着分子生物学计数的发展,越来越多的特发性POF 易感基因被发现[7-8]。
特发性POF患者表现为先天性卵子数量减少,正常卵泡闭锁过程加速,或者出生后卵子被不同机制破坏导致卵泡过早耗竭。
卵泡发生及发育受下丘脑-垂体-卵巢轴调控,也与卵泡刺激素有关,还受到卵巢内自分泌、旁分泌的影响。
近年来卵巢局部的微调节在卵泡生长发育过程中的作用逐渐受到关注。
卵巢内合成局部调节因子有转化生长因子超家族、胰岛素生长因子系统,颗粒细胞、卵泡膜细胞来源的抑制素、激活素等。
抗苗勒管激素(AMH)属于转化生长因子超家族成员,与生殖系统发育及功能有密切的相关性,在女性生殖功能活动中发挥重要的作用。
AMH异常可导致内在卵泡生长发育异常,卵巢颗粒细胞分泌异常[9-10]。
AMH抑制始基卵泡。
AMH由两个相同的70kb亚基通过二硫键链接组成,属于二聚糖蛋白,相对分子量140×103,人类AMH编码基因位于19号染色体短臂。
女性AMH主要由卵巢颗粒细胞分泌。
AMH抑制始基卵泡的启动,抑制窦卵泡对FSH的敏感性,抑制卵泡的发育及成熟[11-12]。
AMH是评估卵巢储备功能的客观准确的指标,能够更敏感更准确地反应年龄相关卵巢储备功能下降;其不受月经周期的影响,具有较强的稳定性;AMH不受激素避孕药的影响,便于临床使用[13-14]。