《生物化学》核酸的结构与功能
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生物化学 Biochemistry
第二章
核酸的结构和功能
Structure and Function of Nucleic Acid
内容提要：
生物化学 Biochemistry
概述 第一节 核酸的种类与分布 第二节 核苷酸 第三节 DNA的分子结构 第四节 核酸与蛋白质的复合体 第五节 RNA的分子结构 第六节 核酸的理化性质
生物化学 Biochemistry
DNA的结构，发 表于《自然》 171卷 (1953)737-738 页上的插图
DNA的双螺旋结构
右手螺旋
• 右手性的定义示意图。大姆指指向轴向，其他 四指由掌根向指尖方向表示螺旋转动方向。
生物化学 Biochemistry
（一）DNA双螺旋结构的实验依据
1. Chargaff 规则：
二、 DNA的二级结构(secondary structure) ——双螺旋(double helix)结构
生物化学 Biochemistry
DNA的二级结构（secondary structure） 是指构成DNA的多聚脱氧核苷酸链之间 通过链间氢键卷曲而成的构象。
1953年，Watson-Crick提出的双螺旋模型。
生物化学 Biochemistry
四、核苷酸
➢ 核苷（脱氧核苷）和磷酸以酯键连接形成核苷酸（脱氧
核苷酸）。
NH2
酯键 N
N
1.核苷一磷酸
HO
➢ 核苷酸：
AMP, GMP, UMP, CMP
➢ 脱氧核苷酸：
O
PO O-
5' CH2
HH
9
N
N
O 2'H1'H
dAMP, dGMP, dTMP, dCMP
Sanger双脱氧链终止法
• Sanger法：
– 在PCR时分别加入ddA,ddT,ddC,ddG（相 应于4种碱基）
– ddX的两个作用：
• 可以当作正常碱基参与复制 • 一旦链入DNA中，其后就不能再继续连接
– 电泳 – 谁终止，碱基就是谁 – 此方法获1974年的Nobel奖
氧脱 核氧 甘核 酸甘 结酸 构与 比双 较脱
N
N
9
NN
HOCH2 O
H
H 1′
H2N N N HOCH2 O
HH
H
H
H
H
OH OH
OH OH
腺嘌呤核苷 鸟嘌呤核苷
1
HO N
HO N
HOCH2 O
HOCH2 O
H
H 1′
HH
H
H
H
H
OH OH
OH OH
胞嘧啶核苷
尿嘧啶核苷
核糖核苷：AR, GR, CR, UR 脱氧核苷：dAR, dGR, dCR, dTR
OH OH
腺苷酸
糖苷键
2.核苷多磷酸
➢ 5′核苷酸的磷酸基团可与另一磷酸分子缩合形成核苷二磷酸 （NDP），核苷二磷酸还可进一步与磷酸缩合形成核苷三磷 酸（NTP）。
N=A/U/G/C
腺嘌呤
腺苷
生物化学 Biochemistry
核苷多磷酸的生物学功能
➢ ATP分子的最显著特点是含有两个高能磷酸键。水 解时, ATP可以释放出大量自由能，用于推动生物体 内各种需能的生化反应。
生物化学 Biochemistry
第一节
核酸的种类与分布
生物化学 Biochemistry
一、核酸的种类
脱氧核糖核酸（DNA）
核
酸
转运核糖核酸（tRNA） 10-
15%
核糖核酸（RNA） 信使核糖核酸（mRNA） 5%
核糖体核糖核酸（rRNA） 80%
二、核酸的分布
生物化学 Biochemistry
一、碱基
生物化学 Biochemistry
碱基
嘌呤 嘧啶
腺嘌呤（A）
鸟嘌呤（G） DNA、RNA均 有
胞嘧啶（C）
胸腺嘧啶（T） 尿嘧啶（U）
DNA有（某些RNA
中有 少量存在）
RNA有
生物化学 Biochemistry
嘌呤
腺嘌呤(6-氨基嘌呤) 鸟嘌呤（2-氨基-6-氧嘌呤）
胞 嘧 啶
2-氧-4-氨基嘧啶
3. DNA的X-线衍射图谱分析
生物化学 Biochemistry
已知的核酸化学数据
（二） DNA双螺旋结构模型要点
1. 两条链反向平行，围绕同 一中心轴构成右手双螺旋 (double helix)。表面有 大沟和小沟。
2. 磷酸-脱氧核糖形成DNA 的骨架，位于双螺旋外侧 与中轴平行，碱基垂直于 螺旋轴而伸入内侧。
碱基堆积力是维持DNA双螺旋结构稳定的主 要作用力。
互补碱基之间的氢键：
生物化学 Biochemistry
• G-C间有3个氢键，A-T之间仅有2个氢键。 • 故前者较稳定。
离子键：
• 带负电荷磷酸之间的静电斥力——会造成不稳定， 但带负电荷磷酸可与阳离子结合有助于结构的稳定。
• Na+、K+、Mg2+、Mn2+ 或是真核细胞内的组蛋白之 间形成的离子键，中和了负电荷，降低了DNA链本 身不同部位之间的斥力。
• cAMP属于放大激素作用信号，cGMP属于缩小激素作用 信号。这两种环核苷酸在细胞代谢过程中其重要的调节作 用。
• 目前已知，许多激素（第一信使）是通过cAMP (第二信 使)而发挥其功能的。
• 另外，cAMP也参与大肠杆菌中DNA转录的调控。
生物化学 Biochemistry
第三节
DNA的分子结构 Molecular Structure of DNA
生物化学 Biochemistry
核酸的基本元素组成：
C、H、O、N、P(9-10%)
核酸的基本构成单位 —核苷酸(nucleotide)
➢ DNA的基本组成单位是脱氧核糖核苷酸； ➢ RNA的基本组成单位是核糖核苷酸。
生物化学 Biochemistry
核酸
核苷酸
核苷 磷酸
戊糖 碱基
核酸的酸性水解过程
概述
生物化学 Biochemistry
一、什么是核酸？
核酸(nucleic acid)是一种生物大分子； 是活细胞中最关键的组分，它携带着遗传信息， 是遗传的物质基础；它决定蛋白质和酶的结构， 它决定每一种生物体的代谢类型和形态。
生物化学 Biochemistry
二、核酸的发现和研究工作进展
1868年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” 20年后 R.Altmann分离到不含蛋白质的核酸 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构 1968年 Nirenberg发现遗传密码 1975年 Temin和Baltimore发现逆转录酶 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA测序方法 1985年 Mullis发明PCR技术 1990年 美国启动人类基因组计划(HGP) 1994年 中国人类基因组计划启动 2001年 美、英等国完成人类基因组计划基本框架
• 碱基堆积力是最主要的稳定因素
生物化学 Biochemistry
DNA分子中的碱基堆积力（base stacking forces）：
嘌呤与嘧啶形状扁平，成疏水性，分布于双螺旋结构 的内侧。大量碱基层层堆积，两相邻碱基的平面十分贴 近，于是使DNA双螺旋结构内部形成一个强大的疏水区， 与介质中的水分隔开，在DNA分子内部形成疏水核心， 核心内几乎没有游离的水分子，免遭水溶性活性小分子 的攻击，保证碱基在化学上的稳定性。
➢ 不同物种的DNA碱基组成不同，而同一生物的DNA组成 是一样的，即有种属特异性，无组织特异性；
➢ DNA碱基组成不随年龄、营养状况和环境因素而改变； ➢ 在同一生物体中[A] = [T]，[G] = [C]，即A+G=T+C。
生物化学 Biochemistry
2. Norweger、Furbug研究证实，戊糖 糖环与DNA分子纵轴平行，而碱基平面与 纵轴垂直。
几乎所有的生物体（包括细菌、病毒等）内都含有核酸。大多数生物 既含有DNA又含有RNA，在病毒分子中，只含有一种核酸（DNA或 RNA）。
生物化学 Biochemistry
第二节 核苷酸 (nucleotide)
核酸的化学组成
The Chemical Component of Nucleic Acid
生物化学 Biochemistry
如果人体有1014个细胞，每个体细胞的DNA量为 6.4×109对核苷酸。试计算人体DNA的总长度是多 少？这个长度与太阳-地球之间的距离（1.5×108 km）相比如何？ • ①每个体细胞内DNA的总长度： 6.4×109×0.34=2.176×109nm • ②人体DNA的总长度： 2.176×109×1014=2.176×1023nm=2.176×101 1 km • ③这个长度与太阳—地球之间的距离之比为 2.176×1011/1.5×108≈1451(倍)
生物化学 Biochemistry
DNA的分子结构可分为一级结构、二级结构和三级结
一构。、DNA的一级结构
➢ 一级结构是指核酸分子中核苷酸的排列顺序及连接方式。
1. 排列顺序：不同的DNA分子具有不同的核苷酸排列顺 序，因此携带不同的遗传信息。
2. 连接方式：以3 ,5 -磷酸二酯键连接形成多核苷酸链， 即核酸
嘧啶
尿 嘧 啶
2，4-二氧嘧啶
胸腺嘧啶（5-甲基-2，4-二氧嘧啶）
稀 有 碱 基
二、戊糖
生物化学 Biochemistry
生物化学 Biochemistry
三、核苷(nucleoside)
➢ 碱基和核糖（或脱氧核糖）通过C-N 糖苷键连接形成 核苷（或脱氧核苷）。
NH2
OH
NH2
OH
N
N
N
N
3. 书写方法：结构式、线条式、文字式。 5ˊ端→3ˊ端(由 左至右)
Fra Baidu bibliotek
结构式
线条式 文字式
DNA的一级结构测序
经典方法
✓ Maxam-Gilbert DNA化学降解 法(Maxam 和Gilbert,1977)
✓ Sanger双脱氧链终止法(Sanger 和Coulson1977)
生物化学 Biochemistry
碱基平面与纵轴垂直，糖环平面与纵轴平行
3. 双螺旋直径2nm，顺轴 方向每隔0.34nm有一个 核苷酸，每圈螺旋含10 个核苷酸，相邻两个核 苷酸间的夹角为36°,螺 距为3.4nm。
4. 两条链通过碱基间的氢 键相连，A对T有两个氢 键，C对G有三个氢键， 这种A-T、C-G配对的规 律，称为碱基互补规则。
碱基互补配对
A
T
C
G
碱基对（base pair）：是一对相互匹配的碱基（即A：T， G： C，A：U相互作用）被氢键连接起来，简写作bp。然而，它 常被用来衡量DNA和RNA的长度（尽管RNA是单链）。
配对碱基的氢键
生物化学 Biochemistry
（三）双螺旋结构的稳定的因素
• 1. 碱基堆积力 • 2. 配对碱基形成的氢键 • 3. 离子键
生物化学 Biochemistry
DNA双螺旋结构提出的生物学意义
该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特征， 最有价值的是确认了碱基配对原则，这是DNA复制、 转录和反转录的分子基础，亦是遗传信息传递和表达 的分子基础。该模型的提出是20世纪生命科学的重大 突破之一，它奠定了生物化学和分子生物学乃至整个 生命科学飞速发展的基石。
➢ 环核苷酸是由核苷酸分子中的磷酸与核糖的3’,5’-二 羟基形成磷酸二酯键环化而成。
NH2
N
N
N
N
O CH2 O
HH
HH
HO P O
OH
O
cAMP
生物化学 Biochemistry
环核苷酸的生物学功能
• cAMP和cGMP是最普通的第二信使，它们广泛存在于动 物、植物和微生物中，虽然在细胞内的含量很低，但有极 重要的生理功能。
少一个 －OH
技术路线与要求
制备单链模板 ↓
将单链模板与一小段引物退火 ↓
加入DNA聚合酶（Klenow）+ 4种dNTP + 引物
分别加入少量4种ddNTP ↓
将4种反应产物分别在4条泳道电泳 ↓
根据4个碱基在4条泳道的终止位置读出基因序列
测双 序脱 基氧 本链 原末 理端 示终 意止 图法
生物化学 Biochemistry
Maxam-Gilbert DNA化学降解法
一个末端标记的DNA片段在4组互相独立的的化 学反应分别得到部分降解，其中每一组反应特异地 针对某于种或某一类碱基。因此生成4组放射性标记 的分子，从共同起点（放射性标记末端）延续到发 生化学降解的位点。每组混合物中均含有长短不一 的DNA分子，其长度取决于该组反应所针对的碱基 在原DNA全片段上的位置。此后，各组均通过聚丙 烯酰胺凝胶电泳进行分离，再通过放射自显影来检 测末端标记的分子。
➢ GTP、CTP、UTP在某些生化反应中也具有传递能 量的作用。
➢ UDP、ADP、GDP在多糖合成中，可作为携带葡 萄糖基的载体；CDP在磷脂合成中可作为携带胆碱的 载体。
➢ NTP和dNTP分别是RNA和DNA的直接前体。
生物化学 Biochemistry
3.环核苷酸（cAMP & cGMP）
第二章
核酸的结构和功能
Structure and Function of Nucleic Acid
内容提要：
生物化学 Biochemistry
概述 第一节 核酸的种类与分布 第二节 核苷酸 第三节 DNA的分子结构 第四节 核酸与蛋白质的复合体 第五节 RNA的分子结构 第六节 核酸的理化性质
生物化学 Biochemistry
DNA的结构，发 表于《自然》 171卷 (1953)737-738 页上的插图
DNA的双螺旋结构
右手螺旋
• 右手性的定义示意图。大姆指指向轴向，其他 四指由掌根向指尖方向表示螺旋转动方向。
生物化学 Biochemistry
（一）DNA双螺旋结构的实验依据
1. Chargaff 规则：
二、 DNA的二级结构(secondary structure) ——双螺旋(double helix)结构
生物化学 Biochemistry
DNA的二级结构（secondary structure） 是指构成DNA的多聚脱氧核苷酸链之间 通过链间氢键卷曲而成的构象。
1953年，Watson-Crick提出的双螺旋模型。
生物化学 Biochemistry
四、核苷酸
➢ 核苷（脱氧核苷）和磷酸以酯键连接形成核苷酸（脱氧
核苷酸）。
NH2
酯键 N
N
1.核苷一磷酸
HO
➢ 核苷酸：
AMP, GMP, UMP, CMP
➢ 脱氧核苷酸：
O
PO O-
5' CH2
HH
9
N
N
O 2'H1'H
dAMP, dGMP, dTMP, dCMP
Sanger双脱氧链终止法
• Sanger法：
– 在PCR时分别加入ddA,ddT,ddC,ddG（相 应于4种碱基）
– ddX的两个作用：
• 可以当作正常碱基参与复制 • 一旦链入DNA中，其后就不能再继续连接
– 电泳 – 谁终止，碱基就是谁 – 此方法获1974年的Nobel奖
氧脱 核氧 甘核 酸甘 结酸 构与 比双 较脱
N
N
9
NN
HOCH2 O
H
H 1′
H2N N N HOCH2 O
HH
H
H
H
H
OH OH
OH OH
腺嘌呤核苷 鸟嘌呤核苷
1
HO N
HO N
HOCH2 O
HOCH2 O
H
H 1′
HH
H
H
H
H
OH OH
OH OH
胞嘧啶核苷
尿嘧啶核苷
核糖核苷：AR, GR, CR, UR 脱氧核苷：dAR, dGR, dCR, dTR
OH OH
腺苷酸
糖苷键
2.核苷多磷酸
➢ 5′核苷酸的磷酸基团可与另一磷酸分子缩合形成核苷二磷酸 （NDP），核苷二磷酸还可进一步与磷酸缩合形成核苷三磷 酸（NTP）。
N=A/U/G/C
腺嘌呤
腺苷
生物化学 Biochemistry
核苷多磷酸的生物学功能
➢ ATP分子的最显著特点是含有两个高能磷酸键。水 解时, ATP可以释放出大量自由能，用于推动生物体 内各种需能的生化反应。
生物化学 Biochemistry
第一节
核酸的种类与分布
生物化学 Biochemistry
一、核酸的种类
脱氧核糖核酸（DNA）
核
酸
转运核糖核酸（tRNA） 10-
15%
核糖核酸（RNA） 信使核糖核酸（mRNA） 5%
核糖体核糖核酸（rRNA） 80%
二、核酸的分布
生物化学 Biochemistry
一、碱基
生物化学 Biochemistry
碱基
嘌呤 嘧啶
腺嘌呤（A）
鸟嘌呤（G） DNA、RNA均 有
胞嘧啶（C）
胸腺嘧啶（T） 尿嘧啶（U）
DNA有（某些RNA
中有 少量存在）
RNA有
生物化学 Biochemistry
嘌呤
腺嘌呤(6-氨基嘌呤) 鸟嘌呤（2-氨基-6-氧嘌呤）
胞 嘧 啶
2-氧-4-氨基嘧啶
3. DNA的X-线衍射图谱分析
生物化学 Biochemistry
已知的核酸化学数据
（二） DNA双螺旋结构模型要点
1. 两条链反向平行，围绕同 一中心轴构成右手双螺旋 (double helix)。表面有 大沟和小沟。
2. 磷酸-脱氧核糖形成DNA 的骨架，位于双螺旋外侧 与中轴平行，碱基垂直于 螺旋轴而伸入内侧。
碱基堆积力是维持DNA双螺旋结构稳定的主 要作用力。
互补碱基之间的氢键：
生物化学 Biochemistry
• G-C间有3个氢键，A-T之间仅有2个氢键。 • 故前者较稳定。
离子键：
• 带负电荷磷酸之间的静电斥力——会造成不稳定， 但带负电荷磷酸可与阳离子结合有助于结构的稳定。
• Na+、K+、Mg2+、Mn2+ 或是真核细胞内的组蛋白之 间形成的离子键，中和了负电荷，降低了DNA链本 身不同部位之间的斥力。
• cAMP属于放大激素作用信号，cGMP属于缩小激素作用 信号。这两种环核苷酸在细胞代谢过程中其重要的调节作 用。
• 目前已知，许多激素（第一信使）是通过cAMP (第二信 使)而发挥其功能的。
• 另外，cAMP也参与大肠杆菌中DNA转录的调控。
生物化学 Biochemistry
第三节
DNA的分子结构 Molecular Structure of DNA
生物化学 Biochemistry
核酸的基本元素组成：
C、H、O、N、P(9-10%)
核酸的基本构成单位 —核苷酸(nucleotide)
➢ DNA的基本组成单位是脱氧核糖核苷酸； ➢ RNA的基本组成单位是核糖核苷酸。
生物化学 Biochemistry
核酸
核苷酸
核苷 磷酸
戊糖 碱基
核酸的酸性水解过程
概述
生物化学 Biochemistry
一、什么是核酸？
核酸(nucleic acid)是一种生物大分子； 是活细胞中最关键的组分，它携带着遗传信息， 是遗传的物质基础；它决定蛋白质和酶的结构， 它决定每一种生物体的代谢类型和形态。
生物化学 Biochemistry
二、核酸的发现和研究工作进展
1868年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” 20年后 R.Altmann分离到不含蛋白质的核酸 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构 1968年 Nirenberg发现遗传密码 1975年 Temin和Baltimore发现逆转录酶 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA测序方法 1985年 Mullis发明PCR技术 1990年 美国启动人类基因组计划(HGP) 1994年 中国人类基因组计划启动 2001年 美、英等国完成人类基因组计划基本框架
• 碱基堆积力是最主要的稳定因素
生物化学 Biochemistry
DNA分子中的碱基堆积力（base stacking forces）：
嘌呤与嘧啶形状扁平，成疏水性，分布于双螺旋结构 的内侧。大量碱基层层堆积，两相邻碱基的平面十分贴 近，于是使DNA双螺旋结构内部形成一个强大的疏水区， 与介质中的水分隔开，在DNA分子内部形成疏水核心， 核心内几乎没有游离的水分子，免遭水溶性活性小分子 的攻击，保证碱基在化学上的稳定性。
➢ 不同物种的DNA碱基组成不同，而同一生物的DNA组成 是一样的，即有种属特异性，无组织特异性；
➢ DNA碱基组成不随年龄、营养状况和环境因素而改变； ➢ 在同一生物体中[A] = [T]，[G] = [C]，即A+G=T+C。
生物化学 Biochemistry
2. Norweger、Furbug研究证实，戊糖 糖环与DNA分子纵轴平行，而碱基平面与 纵轴垂直。
几乎所有的生物体（包括细菌、病毒等）内都含有核酸。大多数生物 既含有DNA又含有RNA，在病毒分子中，只含有一种核酸（DNA或 RNA）。
生物化学 Biochemistry
第二节 核苷酸 (nucleotide)
核酸的化学组成
The Chemical Component of Nucleic Acid
生物化学 Biochemistry
如果人体有1014个细胞，每个体细胞的DNA量为 6.4×109对核苷酸。试计算人体DNA的总长度是多 少？这个长度与太阳-地球之间的距离（1.5×108 km）相比如何？ • ①每个体细胞内DNA的总长度： 6.4×109×0.34=2.176×109nm • ②人体DNA的总长度： 2.176×109×1014=2.176×1023nm=2.176×101 1 km • ③这个长度与太阳—地球之间的距离之比为 2.176×1011/1.5×108≈1451(倍)
生物化学 Biochemistry
DNA的分子结构可分为一级结构、二级结构和三级结
一构。、DNA的一级结构
➢ 一级结构是指核酸分子中核苷酸的排列顺序及连接方式。
1. 排列顺序：不同的DNA分子具有不同的核苷酸排列顺 序，因此携带不同的遗传信息。
2. 连接方式：以3 ,5 -磷酸二酯键连接形成多核苷酸链， 即核酸
嘧啶
尿 嘧 啶
2，4-二氧嘧啶
胸腺嘧啶（5-甲基-2，4-二氧嘧啶）
稀 有 碱 基
二、戊糖
生物化学 Biochemistry
生物化学 Biochemistry
三、核苷(nucleoside)
➢ 碱基和核糖（或脱氧核糖）通过C-N 糖苷键连接形成 核苷（或脱氧核苷）。
NH2
OH
NH2
OH
N
N
N
N
3. 书写方法：结构式、线条式、文字式。 5ˊ端→3ˊ端(由 左至右)
Fra Baidu bibliotek
结构式
线条式 文字式
DNA的一级结构测序
经典方法
✓ Maxam-Gilbert DNA化学降解 法(Maxam 和Gilbert,1977)
✓ Sanger双脱氧链终止法(Sanger 和Coulson1977)
生物化学 Biochemistry
碱基平面与纵轴垂直，糖环平面与纵轴平行
3. 双螺旋直径2nm，顺轴 方向每隔0.34nm有一个 核苷酸，每圈螺旋含10 个核苷酸，相邻两个核 苷酸间的夹角为36°,螺 距为3.4nm。
4. 两条链通过碱基间的氢 键相连，A对T有两个氢 键，C对G有三个氢键， 这种A-T、C-G配对的规 律，称为碱基互补规则。
碱基互补配对
A
T
C
G
碱基对（base pair）：是一对相互匹配的碱基（即A：T， G： C，A：U相互作用）被氢键连接起来，简写作bp。然而，它 常被用来衡量DNA和RNA的长度（尽管RNA是单链）。
配对碱基的氢键
生物化学 Biochemistry
（三）双螺旋结构的稳定的因素
• 1. 碱基堆积力 • 2. 配对碱基形成的氢键 • 3. 离子键
生物化学 Biochemistry
DNA双螺旋结构提出的生物学意义
该模型揭示了DNA作为遗传物质的稳定性特征， 最有价值的是确认了碱基配对原则，这是DNA复制、 转录和反转录的分子基础，亦是遗传信息传递和表达 的分子基础。该模型的提出是20世纪生命科学的重大 突破之一，它奠定了生物化学和分子生物学乃至整个 生命科学飞速发展的基石。
➢ 环核苷酸是由核苷酸分子中的磷酸与核糖的3’,5’-二 羟基形成磷酸二酯键环化而成。
NH2
N
N
N
N
O CH2 O
HH
HH
HO P O
OH
O
cAMP
生物化学 Biochemistry
环核苷酸的生物学功能
• cAMP和cGMP是最普通的第二信使，它们广泛存在于动 物、植物和微生物中，虽然在细胞内的含量很低，但有极 重要的生理功能。
少一个 －OH
技术路线与要求
制备单链模板 ↓
将单链模板与一小段引物退火 ↓
加入DNA聚合酶（Klenow）+ 4种dNTP + 引物
分别加入少量4种ddNTP ↓
将4种反应产物分别在4条泳道电泳 ↓
根据4个碱基在4条泳道的终止位置读出基因序列
测双 序脱 基氧 本链 原末 理端 示终 意止 图法
生物化学 Biochemistry
Maxam-Gilbert DNA化学降解法
一个末端标记的DNA片段在4组互相独立的的化 学反应分别得到部分降解，其中每一组反应特异地 针对某于种或某一类碱基。因此生成4组放射性标记 的分子，从共同起点（放射性标记末端）延续到发 生化学降解的位点。每组混合物中均含有长短不一 的DNA分子，其长度取决于该组反应所针对的碱基 在原DNA全片段上的位置。此后，各组均通过聚丙 烯酰胺凝胶电泳进行分离，再通过放射自显影来检 测末端标记的分子。
➢ GTP、CTP、UTP在某些生化反应中也具有传递能 量的作用。
➢ UDP、ADP、GDP在多糖合成中，可作为携带葡 萄糖基的载体；CDP在磷脂合成中可作为携带胆碱的 载体。
➢ NTP和dNTP分别是RNA和DNA的直接前体。
生物化学 Biochemistry
3.环核苷酸（cAMP & cGMP）