2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C含量

2,6-二氯酚靛酚法测定维生素C 含量

一、目的要求

掌握法测定Vc 的方法。

二、实验原理

食品中Vc 包括还原型和氧化型两种类型，当食品放置时间长时或经过烹调处理后，其中有相当一部分维生素C 转化为氧化型，食品中的Vc 氧化酶也可以使还原型Vc 转化为氧化型，氧化型Vc 仍具有部分的活性，新鲜食物中的Vc 主要以还原型的形式存在，测定还原型Vc 可粗略了解食品中Vc 的浓度。

还原型Vc 能使染料2,6-二氯酚靛酚还原，而本身被氧化，在酸性条件下2,6-二氯酚靛酚酸呈红色，因此，当碱性氧化型的蓝色染料2,6-二氯酚靛酚滴定含Vc 的酸性溶液时，刚开始滴下染料立即被样品中的还原型Vc 还原成无色，随着样品溶液中的Vc 被氧化，再滴下的染料就渐渐使溶液变为粉红色，当样品从无色变成微红色且15s 不退色，表明样品中还原型Vc 全部被氧化，即此时已达到滴定终点。反应式见指导书。

三、试剂器材

① 2% 草酸溶液 ，1% 草酸溶液

② 0.05mg/ml 标准Vc 溶液

③ 0.2mg/ml 2,6-二氯酚靛酚溶液（染料）

四、实验步骤

1、维生素C 提取液（1份/班）

称取凉瓜200g ， 切碎，加入2% 草酸200ml ，匀浆机30S （分两次进行，

防止过热）

2、标准Vc 溶液与空白的滴定

微量滴定管中装好0.2mg/ml 2,6-二氯酚靛酚溶液，准确吸取标准Vc 溶液1ml,置于三角瓶中，加入1% 草酸9ml ，滴定至微红色，15S 不退色，由所用染料体积计算1ml 染料相当于多少mg Vc

3、Vc 样品提取液的滴定

准确提取滤液，各取1ml ，加入1% 草酸溶液9ml ，置于三角瓶中滴定。

五、结果处理 100m m g 100/mg c 0

1⨯⨯⨯⨯-=D C B A V V V V V ）（样品）含量（

A V :：为滴定样品所耗用染料的平均体积（ml ）；

B V ：为滴定空白对照所耗用染料的平均体积（ml ）；

C V ：为样品提取液的总体积（ml ）（本实验500ml ）

D V ：为滴定时所取样品提取液体积（ml ）；

1m ：为1ml 染料能氧化Vc 的质量（mg ）；

B V V -⨯=

01105.0m ,0V 为滴定标准C V 所耗用染料体积（ml)； 0m ：待测样品质量（g ）（本实验为200g ）

六、实验原始数据

以下数据均为所耗用染料的体积（ml ）：

七、数据处理

由公式100m m g 100/mg c 01⨯⨯⨯⨯-=D C B A V V V V V ）（样品）含量（，可以求得： ）（）（样品）常温（g mg V 100/5.8100200

14.0-2.3105.05004.03.2g 100/mg c =⨯⨯⨯⨯⨯-=

同理：

）（样品）冷冻（g mg V 100/9.4g 100/mg c =

）（样品）加热（g mg V 100/2.6g 100/mg c =

八、结论

由实验数据处理结果可以得到：常温下新鲜的凉瓜维生素C 最多，而加热和冷冻都会对维生素C 有破坏作用，其中冷冻尤为严重.