食物中还原型维生素C的测定----2, 6-二氯酚靛酚滴定法
生物化学实验：维生素C定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)
ʺ目的要求
学习并掌握定量测定维生素C的原理和方法
ʺ实验原理
还原性Vc + 氧化性染料
氧化性Vc + 还原性染料
粉红色 (中性和碱性)
无色
•Vc放在滴定瓶中 •2,6-二氯酚靛酚放在微量滴定管中 •终点前, 2,6-二氯酚靛酚全部被还原为无色
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
•终点时, 剩下有2,6-二氯酚靛酚.呈现粉红色
【取10ml 1%草酸作空白对照 【用微量滴定管以0.01% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色，并 保持15s不褪色即达终点，得到V2
V1 - V2相当于0.1mg抗坏血酸
四、 样品抗坏血酸液的滴定V3
【取滤液10ml(相当于样品Vc的1/10)置100ml锥形瓶中
【 用微量滴定管以0.01% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡红色，并 保持15s不褪色即达终点，得到V3。
ʺ试剂和器材
一、试剂
•2%草酸溶液: 草酸2g溶于100ml蒸馏水中。 •1%草酸溶液: 草酸1g溶于100ml蒸馏水中。 •标准抗坏血酸溶液（0.1mg/ml）: 准确称取50mg纯抗坏血
酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用）溶于1%草酸溶 液中，并稀释至100ml，贮于棕色瓶中，冷藏。最好临用 前配制。
ʺ操作方法
一、提取 •水洗干净整株新鲜蔬菜或整个新鲜水果，用纱布或吸水纸
吸干表面水分
•称取5g蔬菜或水果，剪碎,加入少量(1-3ml) 2%草酸，用研 钵研磨至浆状，倒入至100ml的容量瓶中，往研钵中加入少 量多次2%草酸，把研磨后的样品完全转移，并定容至100ml 容量瓶中（研磨，转移，定容）。
五、2%草酸的滴定V4
食品中维生素C含量的测定实验
实验3 食品中维生素C含量的测定（2，6-二氯酚靛酚滴定法）一、实验原理维生素C又称抗坏血酸，还原型抗坏血酸能还原染料2，6-二氯酚靛酚钠盐，本身则氧化成脱氢抗坏血酸。
2，6-二氯酚靛酚的钠盐水溶液呈蓝色，在酸性溶液中呈玫瑰红色，当其被还原时就变为无色，因此，可用2，6-二氯酚靛酚滴定样品中的还原型抗坏血酸。
当抗坏血酸完全被氧化后，稍多加一点染料，使滴定液呈淡红色，即为终点。
如无其他杂质干扰，样品提取液所还原的标准染料量与样品中所含的还原型抗坏血酸量成正比。
二、试剂和器材偏磷酸醋酸溶液：取15g（用时研细）溶于40mL醋酸及20mL水的混合液中，然后用水稀释至500mL，过滤后储入试剂瓶中。
标准2，6-二氯酚靛酚溶液：取0.25g2，6-二氯酚靛酚溶于700mL蒸馏水中（用力搅动），加入300mL磷酸缓冲液（预先配制9.078g/L KH2PO4-11.867g/LNa2HPO4·2H2O水溶液，用时以KH2PO4：Na2HPO4·2H2O=4：6的比率将其混合，pH值为6.9-7.0），翌日过滤，滤液储于棕色瓶中，临用时，以抗坏血酸溶液标定。
标准维生素C溶液：以少量偏磷酸醋酸溶液溶解0.1g维生素C于100mL容量瓶中，再以该液稀释至刻度。
2，6-二氯酚靛酚液的标定：在3个100mL锥形瓶中，各置5mL偏磷酸醋酸液，再各加2mL标准维生素C溶液，摇匀。
用上面所制的标准2，6-二氯酚靛酚液滴定，呈玫瑰红色保持30s不褪色为止。
记下所用2，6-二氯酚靛酚溶液体积平均值，再以同样方法做一空白实验，取7mL偏磷酸醋酸液加水若干毫升（相当于以上所用的2，6-二氯酚靛酚溶液的低定量），仍用2，6-二氯酚靛酚溶液滴定。
将第一次滴定的量减去空白实验的量，即为标准维生素的反应量，求出1mL 2，6-二氯酚靛酚对应于维生素C的质量（mg）。
研钵、容量瓶、剪刀、锥形瓶、微量滴定管三、实验步骤1、用自来水冲洗果蔬样品，再以蒸馏水清洗，用纱布或吸水纸吸干表面水分，然后称取25g，剪碎，在研钵中研呈浆状。
维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)
维生素C的定量测定（2, 6-二氯酚靛酚滴定法）维生素C的定量测定（2, 6-二氯酚靛酚滴定法）一、目的要求：（1）学习并掌握用2, 6-二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中维生素C含量的原理和方法。
（2）了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。
（3）熟悉微量滴定法的基本操作过程。
二、实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，它与体内其它还原剂共同维持细胞正常的氧化还原电势和有关酶系统的活性。
维生素C能促进细胞间质的合成，如果人体缺乏维生素C时则会出现坏血病，因而维生素C乂称为抗坏血酸。
水果和蔬菜是人体抗坏血酸的主要来源。
不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法，都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。
测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。
维生素C具有很强的还原性。
它可分为还原性和脱氢型。
金属铜和酶（抗坏血酸氧化酶）可以催化维生素C氧化为脱氢型。
2, 6-二氯酚靛酚（DCPIP）是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈 红色。
抗坏血酸具有强还原性, 能使2, 6-二氯酚靛酚还原褪 色，其反应如图：当用2, 6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时， 滴下的2, 6-二氯酚靛酚被还原 成无色；当溶液中的抗坏血酸 全部被氧化成脱氢抗坏血酸 时，滴入的2, 6-一.氯酚靛酚立抗坏血酸 （蓝色） Cl o HO —CH CH 2O H CF 2.6•二氮（•红色）HO —CHO 一CIH —C脫氢抗坏血酸 还原型2,&二氨酚靛蜀（无色）即使溶液呈现红色。
因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。
三、实验材料、主要仪器和试剂：1(实验材料：多种蔬果(西红柿、尖椒、绿豆芽等)2(主要仪器：(1)天平(2)研钵1(3)容量瓶(50mL) (7)漏斗(4)刻度吸管(5mL, 10mL) (8)脱脂纱布(9)滤纸(5)锥形瓶(lOOmL)(6)微量滴定管(3mL)3(试剂:(1)2, HC1)标准抗坏血酸溶液精确称量抗坏血酸(应为洁白色，如变为黃色则不能用)(225mg,溶于25ml 4,HC1中，移入50ml容量瓶中，用蒸憎水稀释至刻度，贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用前配制，此溶液每ml中含抗坏血酸O.omg, o(3)0. 01M 2, 6,二氯酚靛酚准确称0. 25g氧化型2, 6,二氯酚靛酚、0. 21g碳酸氢钠溶于250ml热蒸镭水中，稀释至1000ml,充分振摇，装入棕色瓶内，置冰箱内过夜，临用前过滤，用标准Vc标定其浓度。
食物中还原型维生素C的测定-26-二氯酚靛酚滴定法
准确性和可靠性。
03
根据测定结果，评估食物中维生素C的含量是否符合
营养学标准。
误差分析
01
分析实验过程中可能产生的误差来源，如试剂质量、 操作方法、环境条件等。
02
评估不同误差来源对测定结果的影响程度。
03
提出减小误差的措施，提高测定方法的准
01
实验原理
26-二氯酚靛酚滴定法是一种常用的测定食物中还原型维生素C的方法。
滴定方法
取一定量的食物样品，加入适量的 26-二氯酚靛酚溶液，在一定温度下 保持一段时间，使还原型维生素C完 全还原26-二氯酚靛酚。
然后用标准氢氧化钠溶液滴定过量的 26-二氯酚靛酚，根据消耗的氢氧化钠 量计算出还原型维生素C的含量。
计算公式
根据滴定过程中消耗的氢氧化钠量，结合反应原理中的化学方程式，可以计算出食物中还原 型维生素C的含量。
04
结果分析
数据对比
1
将实验组与对照组的数据进行对比，观察维生素 C含量的差异。
2
将实验组在不同时间点的数据进行对比，分析维 生素C含量的变化趋势。
3
将实验组与标准值进行对比，判断测定结果的准 确性。
结果解读
01
根据滴定法测定的数据，计算食物中还原型维生素C
的含量。
02
分析测定结果与标准值之间的差异，判断测定方法的
数据记录
详细记录实验过程中所获得的所有数据，包括样品处理过程中提取液的体积、滴定操作中滴定的体积 等。
数据处理
根据实验数据计算还原型维生素C的含量。通过对比滴定终点时所需的26-二氯酚靛酚溶液体积与标定 时的体积，计算出提取液中还原型维生素C的浓度。再根据提取液的体积和样品质量，计算出食物中 还原型维生素C的含量。
食物中还原型维生素C的测定-2, 6-二氯酚靛酚滴定法课件
二、原理及步骤
1、实验原理
该染料在酸性溶液中 呈现红色，被还原后 为无色。在没有杂质 干扰时，一定量的食 物溶液还原标准染料 的量与其中的抗坏血酸 成正比。
2、实验步骤
用2, 6-二氯酚靛酚染料滴定标准维生素C溶液 （计算1ml二氯酚靛酚相当于多少mg抗坏血酸）
用2, 6-二氯酚靛酚染料滴定样品，测得其还原 型维生素C的浓度。
食物中还原型维生素C的测定 ----2, 6-二氯酚靛酚滴定法
一、目的
了解营养评价中实验室检查的意义 了解食物中还原型VitC测定方法
营养调查
目的: 了解不同生理状况、生活环境、劳动条件
下各种人群营养是否合理，针对具体情况对个 人（包括各种疾病患者）、家庭和集体按照合 理营养要求，提出改善措施以确保人群健康。
操作步骤
配制抗坏血酸应用液：用移液管取1ml 0.1%抗坏血酸标准液于50ml容 量瓶，加1%草酸至刻度，摇匀，留用。（1mg/50ml）
空白试验：在三角烧瓶中加入10ml 1%草酸，用二氯酚靛酚染料滴定 至粉红色，能保持15秒不褪色为终点。记录结果Cml。（两次）
标定二氯酚靛酚染料：在三角烧瓶中加入5ml抗坏血酸应用液、5ml 1%草酸，混匀，用二氯酚靛酚染料滴定至粉红色，能保持15秒不褪 色为终点。记录所用染料Aml (两次)。
5 C样
=
1ml染料
B-C
A: 滴定标准维生素C溶液(5ml)+草酸（5ml，1%）的染料量
C: 滴定空白组为草酸（10ml，1%）的染料量
B: 滴定稀释后的样品（5ml）+草酸（5ml，1%）的染料量
四、注意事项
测定过程要迅速，因还原型维生素C易被氧化，一般 不超过2min;
实验十六 维生素C的定量测定(2,6-二氯酚靛酚滴定法)
维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）一、目的要求：（1）学习并掌握用2,6-二氯酚靛酚滴定法测定植物材料中维生素C含量的原理和方法。
（2）了解蔬菜、水果中维生素C含量情况。
（3）熟悉微量滴定法的基本操作过程。
二、实验原理：维生素C是人类营养中最重要的维生素之一，它与体内其它还原剂共同维持细胞正常的氧化还原电势和有关酶系统的活性。
维生素C能促进细胞间质的合成，如果人体缺乏维生素C时则会出现坏血病，因而维生素C又称为抗坏血酸。
水果和蔬菜是人体抗坏血酸的主要来源。
不同栽培条件、不同成熟度和不同的加工贮藏方法，都可以影响水果、蔬菜的抗坏血酸含量。
测定抗坏血酸含量是了解果蔬品质高低及其加工工艺成效的重要指标。
维生素C具有很强的还原性。
它可分为还原性和脱氢型。
金属铜和酶（抗坏血酸氧化酶）可以催化维生素C氧化为脱氢型。
2,6-二氯酚靛酚（DCPIP）是一种染料，在碱性溶液中呈蓝色，在酸性溶液中呈红色。
抗坏血酸具有强还原性，能使2,6-二氯酚靛酚还原褪色，其反应如图：当用2,6-二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时，滴下的2,6-二氯酚靛酚被还原成无色；当溶液中的抗坏血酸全部被氧化成脱氢抗坏血酸时，滴入的2,6-二氯酚靛酚立即使溶液呈现红色。
因此用这种染料滴定抗坏血酸至溶液呈淡红色即为滴定终点，根据染料消耗量即可计算出样品中还原型抗坏血酸的含量。
三、实验材料、主要仪器和试剂：1．实验材料：多种蔬果（西红柿、尖椒、绿豆芽等）2．主要仪器：（1）天平（2）研钵（3）容量瓶（50mL）（4）刻度吸管（5mL，10mL）（5）锥形瓶（100mL）（6）微量滴定管（3mL）（7）漏斗（8）脱脂纱布（9）滤纸3．试剂：（1）2％ HCl（2）标准抗坏血酸溶液精确称量抗坏血酸（应为洁白色，如变为黄色则不能用）25mg，溶于25ml 4％HCl中，移入50ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，贮于棕色瓶中，冷藏，最好临用前配制，此溶液每ml 中含抗坏血酸0.5mg，。
实验七_维生素C的定量测定-2_6-二氯酚靛酚法
实验七_维生素C的定量测定-2_6-二氯酚靛酚法一、实验目的2. 掌握 2,6-二氯酚靛酚法的实验操作方法。
3. 提高实验操作技能，培养实验习惯。
二、实验原理2,6-二氯酚靛酚法是一种常用于测定维生素 C 的定量分析方法，其原理是利用维生素 C 对氧化剂的还原能力，在酸性条件下，与氧化剂溶液中的氧气直接发生反应，生成2,6-二氯酚靛酚，这是一种带有天蓝色色素的化合物。
其反应方程式为：C6H8O6 + 2C12H6Cl2O2 → C12H5Cl2O2（indophenol）+ 2HCl在测定中，利用紫外-可见光谱（UV-Vis）分析法，通过测量反应产物（2，6-二氯酚靛酚）的吸收光谱进行维生素 C 的浓度计算。
维生素 C 含量的测定范围为 0.1-2.0mg/mL。
三、实验操作A. 试剂和仪器1. 空白维生素 C 溶液：将 0.1 g 维生素 C 溶于 100 mL 的 0.05 M 磷酸缓冲液（pH=2.0），称取 1 mL 溶液，加入 10 mL 的 0.05 M 磷酸缓冲液当作空白维生素 C 溶液。
3. 柠檬酸铁铵溶液：称取 1 g 柠檬酸铁铵，加入 100 mL 的去离子水溶解得到 1% 的柠檬酸铁铵溶液。
4. 改良液：将5.5 g 的硫酸钾加入 100 mL 的 85% 磷酸（V/V），搅拌至溶解，加入 1 g 2,6-二氯酚靛酚，摇匀后吸入液面，加入水至 1 L。
B. 实验步骤1. 分别取 6 个试管，标号：1，2，3 为空白对比组，4，5，6 为实验组。
2. 将实验组试管中加入不同浓度的维生素 C 标准溶液（10 μg/mL，20 μg/mL，30 μg/mL），各加 2 mL，加入 2 mL 的柠檬酸铁铵溶液。
3. 将实验组试管加到热浴肢中，调节温度至37℃。
4. 在 1 分钟内，向实验组试管中加入 0.5 mL 的改良液，同时加入 1 mL 的硫酸（V/V = 4:1）。
5. 摇匀实验组试管，放置于常温下 20 分钟，直至颜色稳定。
食物中还原型维生素C的测定----2, 6-二氯酚靛酚滴定法
三、实验步骤
样品前处理
1. 2. 3. 4.
蔬菜摘、洗、沥干； 小棵整体取样，大棵对称均分取样； 切条、片、块等状； 白萝卜 若样品颜色较深用白陶土脱色
生样 100g
2%草酸 100g 捣碎，匀浆 分别称5g 1% 草酸定容至50ml 过滤取上清 熟样沥干称重 2%草酸 等量
白 萝 卜
生样 100g 加入煮沸的水中 煮5min
标准维生素C 溶液 标定: 2, 6-二氯酚靛 酚染料
标定: 标准维生素C 溶液
3、用标定后的2, 6-二氯酚靛酚染料滴 定样品，测得其还原型维生素C的浓度
（1）操作
2, 6-二氯酚靛酚染液（0.2mg/ml）
无色变为淡红色
15s内不褪色
滴定
匀浆后的样品（5ml） 空白组为草酸（5ml，1%）
（2）样品中原型维生素C浓度
GB 6195—86 水果、蔬菜维生素C含 量测定法 (2,6－二氯酚靛酚滴定法) 本标准适用于果品、蔬菜及其加工制 品中还原型抗坏血酸的测定（不含二 价铁、二价锡、一价铜、二氧化硫、 亚硫酸盐或硫代硫酸盐），不适用于
深色样品。
总结
• 优点：
简便快速，不需特殊仪器和试剂
• 缺点
• 非Vit C的专一反应，其它还原性物质对测定也有干扰。
举例含量丰富的食物。
蔬菜：辣椒、油菜、卷心菜、 菜花、芥菜； 水果：猕猴桃、酸枣、柑橘、 柠檬、柚子、草莓、沙棘。
结构与性质
抗坏血酸/维生素C
分子式：C6H8O6 相对分子质量：176 结构：
六个碳原子的α-酮基内酯 酸性多羟化合物
手性C 旋光性
CH OH 2 6 H C5 OH O
4 3 2 1
配制保存试剂时应注意的事项
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（V1 － V2）× T
m
× 100
• V1：样品滴定时所用染料量（ml） • V2：空白滴定时所用染料量（ml） • m：滴定时所用样品的量（g）
四、实验结果
• • • 1. 样品Vit C的浓度 2. 烹调前后Vit C的损失率 生熟比=
Vit C 损失率
五、注意事项
还原型和氧化型维生素C有一定的生理作用， 水解为2,3-二酮古乐糖酸，失去生理作用。 总抗坏血酸包括还原型、氧化型抗坏血酸和2,3-二酮古乐糖酸。
一、目的
• 加深对2，6-二氯酚靛酚滴定法测定果 蔬中维生素C的原理的理解，掌握其操 作要点，熟练基本操作技术。
•
了解烹调加工对维生素C的影响。
二、实验原理
（1）操作
2, 6-二氯酚靛酚染液（0.2mg/ml）
无色变为淡红色 15s内不褪色
滴定
标准维生素C溶液(5ml，C标) 草酸（5ml，1%）
（2）1ml染料相当于还原型维生素C的mg
T=
C标（mg/ml）× V标（ml） V染料（ml）
T = 0.089
步骤一 标准KIO3溶液
步骤二
步骤三
2, 6-二氯酚 靛酚染料 标定: 样品
（2）操作
KIO3（0.000167M）
白色变为淡蓝色 滴定
维生素C标准品溶液（5ml，0.02mg/ml） 草酸（5ml，1%） KI（0.5ml，6%） 淀粉（3滴，1%）(KIO3) ×V(KIO3) ×M(VitC)
W标 （mg/ml）=
n×M =
V(Vit C)
滴 定
步骤一
标准KIO3溶液
步骤二
步骤三
标定:
标准维生素 C溶液
标准维生素C 溶液 标定: 2, 6-二氯酚靛 酚染料
2, 6-二氯酚 靛酚染料 标定: 样品
1、标准KIO3溶液标定标准维生素C溶液
（1）原理
• KIO3 + 3H2C2O4 + 5KI = 3I2 + 3K2C2O4
• j
n(KIO3):n(VC)=1:3 n(VC)=3n(KIO3)
标准维生素C 溶液 标定: 2, 6-二氯酚靛 酚染料
标定: 标准维生素C 溶液
3、用标定后的2, 6-二氯酚靛酚染料滴 定样品，测得其还原型维生素C的浓度
（1）操作
2, 6-二氯酚靛酚染液（0.2mg/ml）
无色变为淡红色
15s内不褪色
滴定
匀浆后的样品（5ml） 空白组为草酸（5ml，1%）
（2）样品中原型维生素C浓度
消耗0.000167M KIO3的ml数 × 0.088
W标 （mg/ml）= 所取维生素C的ml数
步骤一
步骤二
标准维生素C 溶液 标定: 2, 6-二氯酚靛 酚染料
步骤三
标准KIO3溶液
2, 6-二氯酚 靛酚染料 标定: 样品
标定: 标准维生素C 溶液
2、标准维生素C溶液标定2, 6-二氯酚靛酚染料
配制保存试剂时应注意的事项
① 6%KI溶液:现用现配、棕色瓶盛装；
② KIO3溶液：短期、棕色瓶、冷藏；
③ 维生素C标准品粉末：棕色干燥皿内保存； ④ 维生素C标准品溶液：短期、棕色瓶、冷藏； ⑤ 2, 6-二氯酚靛酚溶液：50mg溶解于NaHCO3(0.2g/ml) 热溶液中，冷却后4℃过夜，过滤后用蒸馏水定容 250ml，然后短期、棕色瓶、冷藏； ⑥ 1%的淀粉：先加少量凉水搅拌成糊状，再加沸水溶解， 短期冷藏。
分子式：C6H8O6 相对分子质量：176 结构：
六个碳原子的α-酮基内酯 酸性多羟化合物
手性C 旋光性
CH OH 2 6 H C5 OH O
4 3 2 1
水解性
O
还原性
性质：
还原性 不稳定性
碱性环境、加热或铜铁共存
HO
弱酸性
OH
弱酸性条件下稳定——草酸
测定还原型维生素C 可粗略了解食品中维 生素C浓度
1. 因要计算烹调后原型维生素C的损失率，故要计算烹 调前后食物的生熟比；故要记录食物烹调前后的质量； 2. 测定过程要迅速，因还原型维生素C易被氧化，一般 不超过2min; 3. 样品中可能有其他杂质也能还原2, 6-二氯酚靛酚，但 还原速度比还原型维生素C慢，故滴定时以15s内粉红 色不褪去为止； 4. 样品匀浆稀释定容及脱色时若产生泡沫可用异戊醇除 沫； 5. 白陶土应选择脱色力强且不吸附维生素C的品种，在 实验前一天置于烘箱中105℃ 2h，并立即放入干燥皿 中存放； 6. 样品匀浆稀释液过滤时若存在困难，可离心后再取上 清测定；
• 2，4-二硝基苯肼法
• 原理：样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，再与2，4-二硝基苯肼 作用生成红色脎，脎的含量与总抗坏血酸含量成正比，进行比色测定。
• HPLC法——目前HPLC应该是比较好的，但是对
操作者的技能以及实验室经济能力有要求。
• 碘量法 • 电位滴定法等
三、实验步骤
样品前处理
1. 2. 3. 4.
蔬菜摘、洗、沥干； 小棵整体取样，大棵对称均分取样； 切条、片、块等状； 白萝卜 若样品颜色较深用白陶土脱色
生样 100g
2%草酸 100g 捣碎，匀浆 分别称5g 1% 草酸定容至50ml 过滤取上清 熟样沥干称重 2%草酸 等量
白 萝 卜
生样 100g 加入煮沸的水中 煮5min
但由于Vit C的氧化速度远比干扰物质的快，故快速滴定可 减少干扰物质的影响。
•
• •
2，6-二氯靛酚滴定液不够稳定，贮存时易缓缓分解，需 经常标定，贮存液不宜超过一周；
色素对测定干扰大； 测定的只是含量较高的还原性维生素C，不是总维生素C。
其他检测方法
• 荧光法
• 原理：样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化成脱氢型抗坏血酸后，与邻苯二胺（ OPDA）反应生成具有荧光的喹喔啉，其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件 下成正比，以此测定食物中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
食物中还原型维生素C的测定
----2, 6-二氯酚靛酚滴定法 营养学系 李忠霞
理论知识
• 生理作用 • 缺乏和过量 • 需要量 RNI;UL • 食物来源
举例含量丰富的食物。
蔬菜：辣椒、油菜、卷心菜、 菜花、芥菜； 水果：猕猴桃、酸枣、柑橘、 柠檬、柚子、草莓、沙棘。
结构与性质
抗坏血酸/维生素C
GB 6195—86 水果、蔬菜维生素C含 量测定法 (2,6－二氯酚靛酚滴定法) 本标准适用于果品、蔬菜及其加工制 品中还原型抗坏血酸的测定（不含二 价铁、二价锡、一价铜、二氧化硫、 亚硫酸盐或硫代硫酸盐），不适用于
深色样品。
总结
• 优点：
简便快速，不需特殊仪器和试剂
• 缺点
• 非Vit C的专一反应，其它还原性物质对测定也有干扰。
—2,6 二氯酚靛酚滴定法
• 染料2，6-二氯酚靛酚的颜色反应表现两种特性，一是取 决于其氧化还原状态，氧化态为深蓝色，还原态变为无 色；二是受其介质的酸度影响，在碱性溶液中呈深蓝色 ，在酸性介质中呈浅红色。 • 用蓝色的碱性染料标准溶液，对含维生素C的酸性浸出 液进行氧化还原滴定，染料被还原为无色，当到达 滴定 终点时，多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色。 • 在没有杂质干扰时，一定量的样品提取液还原标准2，6二氯靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。所以可 以由染料用量计算样品中还原型抗坏血酸的含量。