预先静脉注射维生素C 对家兔肠系膜上动脉—最新版
维生素对兔子及仓鼠的作用及日粮添加方法

维生素对兔子及仓鼠的作用及日粮添加方法维生素对兔子的作用维生素在兔子的生长和健康中起着重要的作用。
以下是几种主要维生素对兔子的作用:1. 维生素A:维生素A有助于维持兔子的视力和皮肤健康。
它还起着维护呼吸道和消化系统健康的作用。
2. 维生素D:维生素D有助于兔子吸收和利用钙和磷,维持骨骼的健康。
3. 维生素E:维生素E是一种强效的抗氧化剂,有助于保护兔子的细胞免受氧化应激的损伤。
4. 维生素B群:维生素B群是多种维生素的组合,包括维生素B1、维生素B2、维生素B6和维生素B12等。
这些维生素有助于兔子的能量代谢和神经系统的正常功能。
5. 维生素C:维生素C对兔子来说很重要,因为它们无法自行合成。
维生素C有助于保护兔子免受感染和疾病的影响。
维生素日粮添加方法日粮中添加适量的维生素可以确保兔子和仓鼠获得足够的营养。
以下是添加维生素的方法:1. 饲料添加剂:市场上有许多维生素的饲料添加剂可供选择。
选择合适的饲料添加剂,按照产品说明添加到兔子和仓鼠的日粮中。
2. 饲料混合:如果你不喜欢使用饲料添加剂,你也可以选择购买已经添加了维生素的饲料混合。
这确保了兔子和仓鼠每天摄取所需的维生素量。
3. 天然食物补充:除了添加维生素到日粮中,你还可以通过提供充足的新鲜水果、蔬菜和草料来补充兔子和仓鼠所需的维生素。
某些食物如胡萝卜和菠菜富含维生素A,而柑橘类水果则是维生素C的良好来源。
请注意,为了确保兔子和仓鼠获得适当的维生素摄取量,建议咨询兽医或饲养专家的意见,并根据不同动物的需求进行维生素的添加。
以上是关于维生素对兔子及仓鼠的作用及日粮添加方法的简要介绍。
如有其他疑问,请与相关专家咨询。
血管升压素对家兔动脉血压、呼吸运动和尿量的调节

血管升压素对家兔动脉血压、呼吸运动和尿量的调节xxx(xxxxxxxx xxxxxxxx xxxxxxxxxxxxxxx)摘要目的:本实验通过设置对照,观察血管升压素对家兔动脉血压、呼吸运动和尿量的影响,并探究其作用机制。
方法:给家兔施行膀胱插管、动脉插管、气管插管,先后注射0.3ml0.9%NaCl溶液与6U/ml0.3ml血管升压素,观察处理前后动脉血压、呼吸运动和尿量的变化。
结果:与0.9%NaCl溶液组对比,血管升压素组平均动脉血压降低幅度减小、呼吸流量最大值降低幅度减小、呼吸频率加快、尿量减少。
结论:血管升压素可以升高动脉血压,加强呼吸运动,减少尿量。
关键字血管升压素;血压;呼吸;尿量Abstract Objective:By setting the control in this experiment, observation of vasopressin effects on rabbit arterial blood pressure, respiratory movement and the amount of urine, and explore its mechanism of action. Methods:Give the rabbit bladder intubation, artery intubation, endotracheal intubation, successively injected with 0.3ml0.9%NaCl solution and 6U/ml0.3ml vasopressin, changes in arterial blood pressure, respiratory movement and the amount of urine were observed before and after treatment. Result:With 0.9%NaCl solution group contrast, vasopressin group mean arterial blood pressure decreased amplitude decreases, respiratory flow maximum amplitude decreases, reducing the increase of respiratory rate, reduce the amount of urine. Conclusion:Vasopressin can be elevated arterial blood pressure, strengthen the respiratory movement, reduce the amount of urine.Key words vasopressin;blood pressure;breath;urine volume引言血管升压素(vasopressin,VP)也称抗利尿激素,是在下丘脑的视上核和室旁核合成的一种肽类激素,主要兴奋V1、V2和Oxytox-in受体(OTRs)。
米力农对肠系膜上动脉闭塞性休克兔肠道氧代谢的影响

米力农对肠系膜上动脉闭塞性休克兔肠道氧代谢的影响陈雷;张自云;戴云【期刊名称】《云南医药》【年(卷),期】2006(27)4【摘要】目的米力农是磷酸二酯酶Ⅲ抑制剂,许多研究认为能改善休克患者的血流动力学及全身的氧供、氧耗,但对肠道的氧供、氧耗的影响研究甚少.本研究旨在探讨米力农对肠系膜上动脉闭塞性(SMAO)休克兔肠道氧代谢的影响.方法 16只健康家兔随机分为对照组和治疗组,经腹分离肠系膜上动脉复制SMAO休克模型.对照组静脉泵入米力农0.1ml·kg-1·min-1,治疗组静脉注入负荷量米力农50μg·kg-1,随后持续泵入米力农0.5ug·kg-1·min-1,液体总量和A组相同.实验期间于夹闭前-1h、松夹后休克时0h、松夹后1h、2h、定时观察MAP,HR,SMAF;测定肠系膜上静脉、颈内动脉血气,并根据公式计算出氧供(DO2)、和氧耗(VO2).结果松夹后1-2h期间,治疗组较对照组MAP,HR,SMAF,肠道DO2及VO2明显升高(P<0.05或<0.01).结论米力农能显著增加SMAO休克兔肠系膜上动脉血流量,提高肠道的氧供、氧耗、及全身血压,改善了缺血脏器的血供和氧合状态.【总页数】4页(P323-326)【作者】陈雷;张自云;戴云【作者单位】昆明医学院第二附属医院,麻醉科,云南,昆明,65101;昆明医学院第二附属医院,麻醉科,云南,昆明,65101;昆明医学院第二附属医院,麻醉科,云南,昆明,65101【正文语种】中文【中图分类】R9【相关文献】1.米力农对肠系膜上动脉夹闭休克兔氧自由基的影响 [J], 戴转云;张自云2.兔肠系膜上动脉闭塞性休克时血小板激活因子活性增高及其来源 [J], 陈清;张力3.复方麝香注射液对兔肠系膜上动脉闭塞性休克和小鼠缺氧的影响 [J], 叶启智;覃玉智;莫少珍4.HAD对创伤失血性休克兔肝脏血液灌注及氧代谢的影响 [J], 林秀来;胡德耀;刘良明;卢儒权;徐光辉;王淑青5.黄芪注射液对兔肠系膜上动脉闭塞性休克脂质过氧化损伤的防治及其机制 [J], 王艳蕾;景友玲;李宏杰;张一兵;段国贤;王小君;张伟;赵春秀因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
远程缺血预适应对心肌保护作用的研究进展

优势 。
多 , 从而产生对缺血/ 再灌 注损 伤的保 护作 用 , 提示 N O在肢
体缺血预处理 的早 期心肌保护 中起重要作用 ,
( ) 肌细胞凋亡 三 心
H uely asno 等 研究 5 7例 接受冠 状动 脉搭 桥手术 的患 者 。 患者被 随机 分为对照组( 3 ) n= 0 和远程缺 血预处理 组 ( 2 ) n= 7 , 对远程缺血预处理组进 行 4个 缺血再 灌注循环 , 每次 5rn诱导 i a 右上肢缺血发作 ( 自动血压计飙 升到 2 0m g 和 5mi 用 0 m H ) n的 袖带松开再灌 注。分别测定术 前和术后 6~7 2 h血清肌 钙蛋 白 T浓度 。缺血 预处 理使 血清肌钙蛋 白 T从对照组 的3 gL 6 / 降至
中华 临床医师杂志 ( 电子版 )02年 2月第 6卷第 3期 21
C i l ias EetncE io )F bur , 1 . o. N . hnJCi c n ( l r i dt n ,eray12 2 V 1 o3 ni co i 0 6,
・
综 述 ・
远 程 缺血 预 适 应 对 心肌 保 护作 用 的研 究进 展
进 行预处理时 , 现其 对之后 左前 降支 的梗死 也 能减少 其梗 死 发
面积。从而极大地 拓展 了对早 期缺 血预 适应 的认识 , 被称 为 这 “ 内远程预适应 ” 心 。之后又发现远程预适应并 非局 限于一 个特 定的脏器 , 它被称为“ 器官 间预适应 ” 远程预适应 ” IC的 或“ 。R P
研究证实缺血 预适应对 心肌的保护作 用: 制心肌细胞 凋 和抑 亡关系密切 。发现心 肌梗 死 高峰 时凋 亡细 胞数 比坏 死 细胞 数高七倍 , 且梗死灶周 边 区域 的心肌 细胞 凋亡 扩大 了梗死 面 并 积和促进 了心室重构 , 对心肌产生不 利影响 , 因此 心肌细胞 凋亡 是心肌梗死面积大小 的主要决定 因素 。但 R P IC对心 肌缺血/ 再 灌 注损伤引起心肌细胞凋亡 的保 护作 用机 制 尚未 完全清楚 。心 肌凋亡的多 种 调 控 机 制 包 括 : c 2家 族 、 a 【] 热 休 克 蛋 白 Bl - Fs1 、 9 ( et hc poe ,H P) ha sok rt n S 、半 胱 氨 酸 天 冬 氨 酸 蛋 白 酶 i
大剂量维生素C对急性肺损伤的保护作用

第26卷第4期2005年8月西安交通大学学报(医学版)J o u r n a l o fX i 'a n J i a o t o n g U n i v e r s i t y(M e d i c a l S c i e n c e s )V o l .26N o .4A u g.2005大剂量维生素C 对急性肺损伤的保护作用孙秀珍,张德信,刘 昀(西安交通大学第二医院呼吸内科,陕西西安 710004)摘要:目的 观察大剂量维生素C (500m g /k g )对油酸诱导的家兔急性肺损伤的预防和治疗效果。
方法 30只家兔分为4组:对照组(C G ),油酸组(O G ),预防组(P G )及治疗组(T G )。
于油酸注入前(0)及后30、90、150m i n 采各组动物颈总动脉血测P a O 2、超氧化物歧化酶(S O D )活力、血浆丙二醛(M D A )。
实验末右肺测湿质量,取支气管肺泡灌洗液(B A L F )后烤箱烘干得湿干质量比值,留少许左肺标本甲醛固定做切片。
结果 油酸注入30m i n 后,P G 组和T G 组P a O 2及S O D 明显高于O G 组(P <0.01);而M D A 明显低于O G 组(P <0.01)。
实验末P G 组和T G 组B A L F 中总蛋白、肺湿干质量比较O G 组低(P <0.05);肺组织病理切片显示损伤较轻。
结论 大剂量维生素C 对油酸所致的家兔急性肺损伤,通过清除氧自由基而发挥保护作用。
关键词:大量维生素C ;肺损伤;氧自由基中图分类号:R 563.8 文献标识码:A 文章编号:1671-825(2005)04-0345-04P r o t e c t i v e e f f e c t o f l a r g e d o s e s o f v i t a m i nCo na c u t e l u n g i n j u r yS u nX i u z h e n ,Z h a n g De x i n ,L i uY u n (D e p a r t m e n t o fR e s p i r a t i o n ,S e c o n dH o s p i t a l o fX i 'a n J i a o t o n g U n i v e r s i t y ,X i 'a n710004,C h i n a )A B S T R A C T :O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e p r o t e c t i v ea n d t h e r a p e u t i c ef f e c t o f l a rg ed o s e s o f v i t a m i nCo nth e a c u t e l u n gi n X u r y i n t h em o d e l o f r a b b i t s i n d u c e db y ol e i ca c i d .M e t h o d s At o t a l o f 18r a b b i t sw e r ed i v i d e d i n t o f o u r g r o u p r a n d o m l y :c o n t r o l g r o u p (C G );o l e i c a c i d g r o u p (O G );p r e v e n t i v e g r o u p (P G )a n d t r e a t m e n t g r o u p(T G ).O x y g e n p r e s s u r e i na r t e r i a l b l o o d (P a O 2),s u p e r o x i d ed i s m u t a s e (S O D )a n dm a l o n d i a l d e h y d e (MD A )i nb l o o dw e r e m e a s u r e d i n 0,30,90a n d 150m i n ,r e s p e c t i v e l y .A l l t h ea n i m a l sw e r ek i l l e di n 150m i nl a t e r .T o t a l p r o t e i ni n b r o n c h o -a l v e o l a r l a v a ge f l u i d (B A L F )a n dw e t d r y w e i g h t r a t i oo f t h e r i g h t l u n g w e r em e a s u r e d ,a n d t h e l e f t l u n g s a m p l ew a s t r e a t e db y f o r m a l d e h y d e f o r p a t h o l o g i c a l t e s t .R e s u I t s P a O 2,S O Di nP G g r o u p a n dT G g r o u p we r e s i g n if i c a n t l y h igh e r t h a nt h a ti n O G g r o u p (1<0.01),a n d MD As i g n i f i c a n t l y de c r e a s e d (1<0.01)30m i naf t e r o l e i c a c i d i n X e c t i o n ;B A L Fa n d l u ng w e t -d r y w e i gh t r a ti o i nP G g r o u p a n dT G g r o u p s i g n i f i c a n t l y d e c r e a s e d (1<0.05)c o m p a r e d w i t hi n O G g r o u p ;H Es t a i n i n g s h o w e dt h a tt h el u n g i n X u r y i n P G g r o u p a n d T G g r o u p w a s i m p r o v e d .C o n c I u s i o n L a r g ed o s e s o f v i t a m i nC (500m g /k g )h a s p r e v e n t i v e e f f e c t o na c u t e l u n g i n X u r y.K E Y W O R D S :v i t a m i nC ;a c u t e l u n g i n X u r y ;o x y g e n f r e e r a d i c a l 收稿日期:2004-12-29 修回日期:2005-05-07作者简介:孙秀珍(1951-),女(汉族),教授,硕士生导师.E -m a i l:b o c -l y.s o h u .c o m 急性肺损伤(a c u t e l u n g i n j u r y ,A L I )是急性呼吸窘迫综合征(a c u t e r e s p i r a t o r y d i s t r e s s s y n d r o m e ,A R D S)的早期阶段,是由于多种原因引起的肺毛细血管炎症性损伤;通透性增加,继发急性高通透性肺水肿和进行性缺氧性呼吸衰竭。
家兔常用药物及使用

家兔常用药物及使用家兔常用药物及使用2010年11月03日来源:《中国畜牧兽医报》责任编辑:caitian养殖户饲养家兔,除了搞好饲养管理外,还必须把疾病防治放在重要的位置上。
现将家兔常用的药物及使用方法介绍如下:1、青霉素针剂,分为20万单位、40万单位、80万单位,对葡萄球菌病、巴氏杆菌等有效,与链霉素合用可增强效力。
口服大部分被胃酸破坏,故不宜内服。
用量:成年兔每千克体重5万~10万单位,肌肉注射,每天2次,连用3~5天,疗效显著。
2、链霉素针剂,每支100万单位,用于家兔传染性鼻炎、肠道感染等。
用量:成年兔每千克体重10万~20万单位,肌肉注射,每天2次,连用3~5天。
幼兔用量减半。
3、庆大霉素针剂,分为4万单位、8万单位、10万单位、20万单位,为广谱抗菌素。
对大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌等有效。
用量:成年兔每只1万~2万单位,肌肉注射,每天1~2次,连用3~5天,幼兔用量酌减。
4、土霉素片剂,每片0.25克,广谱抗菌,但兔不宜长期使用。
用量:每千克体重40毫克,内服,每天2次,连用3~5天。
5、复方敌菌净片剂,每片30毫克或100毫克。
可用于预防和治疗兔球虫病、沙门氏菌病及消化道的感染。
用量:成年兔(预防)每千克体重10毫克,1次内服,每天1次,连用3~5天。
治疗量每千克体重25毫克,1次内服,每天1次,连用3~5天,疗效明显。
喂兔子六大要素2012年10月24日来源:农民日报责任编辑:chendanmin三农直通车综合报道:许多人喜欢都喜欢白绒绒的兔子,也有不少人把它当成宠物来养,但是养兔子也有许多要注意的地方。
一、饲料要合理搭配,不要喂单一品种。
兔日粮中的营养成分为:粗蛋白、粗纤维各10%,脂肪5%,每公斤日粮含消化能2800大卡,氨基酸10%。
如无条件饲喂配合饲料,应适当添加黄豆、豆饼、麸皮、玉米等精饲料和胡萝卜等多汁饲料。
二、要重视喂夜料。
兔有较强的夜食性,夜间采食量可占全天采食量的75%以上。
实验一维生素C对布洛芬在家兔体内药物动力学影响

现场实践报告现场实践报告范包含7篇文章。
在日常生活和工作中,报告不再少见,写报告时要注意内容的完整性。
那么报告应该怎么写才合适呢?以下是边肖精心整理的7份现场实习报告,仅供参考,希望对大家有所帮助。
现场实习报告1:我第一次去现场实习。
刚到的时候很紧张,不知道怎么和别人相处。
实习了几天,发现和同事相处并不难。
当你遇到你不理解的事情时,你必须问更多的问题。
当你提问时,你会有更多的机会与同事交流。
这样,你不仅能解决问题,还能很快融入团队。
在这里,我们要努力学习,多问问题,多与人交流,坦诚待人。
作为大学生,社会实践是我们大学生活中的一个重要环节。
这个暑假真的过得很快。
我不仅去了工地,还去了公司。
在近一个半月的实习中,接触到了一些建筑学的基础知识,积累了很多社会经验。
实习不仅仅是学习,更是体验生活。
实习开始前,我想:这次实习,不仅仅是学习实习,更重要的是观察住在工地上的人,不管是农民工、建筑工人还是老板。
虽然他们的称呼不同,但我相信他们每个人都有值得学习的地方。
刚去工地实习的时候,很期待,也很好奇。
我还在考虑如何和别人相处。
我很早就到了工地的项目部。
老板给我指定了一个师傅。
之后,一切都要靠自己。
师傅在做材料,不知道怎么办。
师傅给了我一套图纸让我看,说有什么不懂的可以问,拿一套图纸,我按一下。
描述、构造和应用以及应用仍然可以理解。
然而,节点结构的一些细节仍然不对应。
第一次* *是在看图纸中度过的,独自一人,我明白无论做什么,基本功一定要扎实。
遇到不懂的事情,一定要多问。
当你提问时,你会有更多的机会和你的主人交流。
这样,你不仅能解决问题,还能很快融入集体。
当今社会很现实。
一定要努力学习,多提问,多与人交流,诚实待人。
在工地实习期间,我踏入工地,在师傅的悉心指导下,熟悉了很多工地的基础知识。
师傅结合我在* *学的知识跟我讲解钢筋的知识,梁、柱的箍筋是加密和不加密的。
当柱高不超过1.2m时,箍筋加密或单独加密,可以说全部加密。
家兔常用的给药方法

家兔常用的给药方法作者:薛剑来源:《兽医导刊》 2015年第6期薛剑/ 山东省莒南县畜牧局家兔给药途径和方法的不同,会直接影响到药物作用和疗效,也有可能改变药物的基本作用。
临床上,根据不同疾病、病情程度及药物性质不同,需要采取不同的给药途径和给药方法。
(一)内服给药优点是:操作简单,使用方便,适用于多种药物,尤其是治疗消化道疾病;缺点是:药物易受胃、肠内环境的影响,药量难以掌握,药效慢,吸收不完全,有些药还会对家兔胃肠道有强烈的刺激作用,容易造成家兔的不适。
内服给药的方法有自行采食、口服、灌服等。
1. 自行采食。
适用于毒性小、适口性好、无不良异味的药物,主要用于大规模兔群预防性给药或驱虫。
按要求的添加比例将药物均匀地拌入饲料或饮水中(混水药必须易溶于水),让兔自由采食或自由饮水。
2. 口服。
口服法适用于患兔食欲废绝及使用药物剂量小、有异昧的片、丸剂药物。
分为三种:一是直接喂给家兔吃;二是混合在食物中,让其自行采食;三是碾碎后用水稀释,再用注射器直接给兔子灌饲。
3. 灌服。
灌服给药(图1)适用于患兔食欲废绝及药量小、有异味的药物及液体性药剂。
把药物碾碎加入少量水混匀,将汤匙倒执喂药,也可用注射器或滴管吸取药液,从口角缓缓灌入。
(二)注射给药注射给药药量准、吸收快、起效快、安全、节省药物,但需要掌握一定的操作技巧,把握好药品用量及做好注射器、针头、注射部位等的消毒工作。
常用的注射给药方法因注射部位不同分为肌内注射、皮下注射、静脉注射、腹腔注射、气管内注射等几种。
1. 肌内注射。
肌内注射(图2)适用于多种药物的注射,但强刺激剂(如氯化钙等)不能肌内注射,通常选在肌肉丰满的臀肌和大腿内、外侧部位,局部剪毛消毒后,针头垂直于皮肤迅速刺入一定深度,回抽无回血后,缓缓注入药液,注意不要损伤血管、骨骼和神经。
2. 皮下注射。
皮下注射(图3)主要用于疫苗和无刺激性药物的注射,一般选择颈部、股内侧或股下皮肤松弛、易移位的部位,局部剪毛后,用70% 酒精棉球或2% 碘酒(碘酊)棉球消毒,左手拇指、食指和中指捏起皮肤呈三角形,右手如执笔状持注射器斜向刺入,不能垂直刺入,慢慢注入药液。
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机能学设计性实验福建医科大学2012级临床医学8中班邱凉凉陈志龙尹哲黄国堡汪声祺预先静脉注射维生素C对家兔肠系膜上动脉缺血-再灌注损伤的保护作用【目的和原理】根据休克的缺血-再灌注损伤理论,通过静脉注射环磷酰胺封闭家兔肝脏网状内皮吞噬系统功能,24h后夹闭肠系膜上动脉若干时间,然后恢复血流灌注可造成小肠缺血-再灌注损伤,肠源性内毒素入血而发生休克[1]。
研究表明,对组织造成损伤的主要因素,不是缺血本身,而是恢复血液供应后,产生大量的自由基攻击这部分重新获得血液供应的组织内细胞,造成肠内皮细胞保护屏障的损伤,肠道毛细血管通透性增高,肠粘膜损伤加重,并出现广泛上皮和绒毛分离,上皮坏死,引起肠道内细菌毒素入血,从而产生类似感染性休克的结果[2]。
已有实验表明,维生素C具有很强的抗氧化(清除氧自由基)和降低肠道细菌易位发生率和易位量的作用,因此预先静脉注射维生素C可使超氧化物歧化酶(SOD)活性增高、血清丙二醛(MDA)含量下降[3],起到保护肠粘膜屏障的作用。
基于以上原理,本实验旨在学习肠系膜上动脉闭塞性休克动物模型复制的方法,探讨维生素C对缺血—再灌注损伤休克的保护作用,从而进一步拓展维生素C的临床应用价值。
【实验动物】家兔9只,体重2 kg以上,雌雄不拘。
【实验器材与药品】RM6240多道生理信号采集处理系统或BL-420生物机能实验系统、压力换能器;手术台、急性动物实验动物手术器械、动脉夹、气管插管、三通管、30ml注射器、玻璃试管、可调节移液枪(100μl和1000μl)、滴管、秒表、纱布、细丝线;0.5%肝素钠生理盐水(625U/ml)、环磷酰胺、20%氨基甲酸乙酯溶液(或3%戊巴比妥钠溶液)、1%普鲁卡因溶液、显色基质鲎试剂盒、无热原的真空采血管、无热原试管等。
【实验步骤与观察项目】1、手术操作(1)术前动物处理:取家兔9只,随机分为三组,分别编号A、B、C,实验前24h各耳缘静脉注射环磷酰胺60mg/kg,禁食,自由饮水。
(2)麻醉与固定:家兔称重,耳缘静脉缓慢注射20%氨基甲酸乙酯溶液5ml/kg或3%戊巴比妥钠溶液1ml/kg麻醉动物,注射时应密切观察动物的肌张力、心跳、呼吸、瞳孔大小、角膜反射和皮肤夹捏的疼痛反映等。
麻醉后将动物仰卧固定于手术台上,注意颈部要放正。
(3)气管插管:剪去颈部的毛,自甲状软骨到胸骨上方沿正中线切开皮肤及皮下组织(切口长约5cm),分离皮下组织和肌肉,暴露气管,气管下方穿一根丝线,在甲状软骨下方的气管上做一倒“T”形切口,插入气管插管后结扎固定。
(4)颈总动脉插管:分离左侧颈总动脉2~3cm,近心端用动脉夹夹闭,远心端(尽量靠近头端)用线结扎,在结扎下方剪一切口,向心脏方向插入注满0.5%肝素钠生理盐水的动脉插管,用另一丝线结扎固定。
打开动脉夹,用注射器经三通管向动脉内注入0.5-1cm的0.5%肝素钠生理盐水,再旋转三通管的开关,使动脉插管与压力换能器相通,即可记录动脉血压。
(5)右颈总静脉插管:颈总静脉位置较浅,位于颈部肌肉外缘,用血管钳轻轻钝性分离并在下方穿两根丝线,结扎远心端,以结扎线作为牵引线提起颈总静脉,并将一手指垫在颈总静脉下。
用眼科剪在近心端血管壁上呈45°角剪一小口,插入带三通开关、已充满生理盐水的静脉导管并深入至相当右心房位置(5~7cm,该长度需在插管前在导管上做标记),遇有阻力应往回退一小段,切不可硬插(易插破静脉进入胸腔)。
此时旋动三通管开关,使静脉插管与压力换能器相通,即可测得中心静脉压,观察插管是否成功。
若导管插管成功,则可见中心静脉压数值在0~12cmH2O范围并随呼吸而上下波动,结扎固定。
三通管连上输液瓶,不测压时使导管与输液管相通,缓慢输入生理盐水(5~10滴/分),保持静脉通畅。
(6)暴露肠系膜上动脉:自剑突下1.5cm起沿腹正中线向下做一个正中切口,切口长约8cm,打开腹腔后,用温生理盐水纱布将内脏轻轻推向左前方,暴露出脊柱和腹膜后组织、在脊柱稍右可见黄色的右肾上腺,于右肾上腺右上方可见肠系膜上动脉,用血管钳钝性分离周围组织,然后在肠系膜上动脉穿线备用。
(7)B组轻轻提起肠系膜上动脉的穿线,用动脉夹夹闭肠系膜上动脉60min 后,除去动脉夹,分别在松开动脉夹后0min、5min、15min、30min、60min、90min、120min于家兔耳中央动脉采血2ml置于含肝素钠抗凝剂的无热原试管中待用,并描记颈动脉血压曲线同时观察血压变化;A组仅暴露但不夹闭肠系膜上动脉,取血与描记颈动脉血压曲线操作与B组同;C组于动脉夹松开前15min(即夹闭后的第45min)由三通管注射维生素C 0.500g/kg(浓度为0.300mg/L)[4],接下来的操作与B组同。
2、系统连接和参数设置(1)实验装置连接:与颈总动脉插管相连的压力换能器置于家兔心脏同一水平面,其输出线接RM6240(或BL-420)系统输入通道1。
(2)参数设置:打开仪器电源,启动计算机,进入RM6240(或BL-420)操作相应界面,预热20分钟。
RM6240系统:采样频率800Hz,扫描速度500ms/div,时间常数选直流,高频滤波30Hz。
模式为压力,灵敏度2.5cmH2O/div。
BL-420F系统:采样频率50Hz,时间常数选直流,高频滤波20Hz。
扫描速度1.0s/div。
通道1选压力,增益50mV。
3、观察项目(1)测定血液内毒素含量分别从各无热原试管取血1ml,在显色基质鲎试剂试剂盒按其使用说明书提供的方法(见附录),测定各血浆内毒素水平并比较A、B、C三组内毒素水平的不同。
(2)描记颈动脉血压曲线轻轻提起肠系膜上动脉的穿线,用动脉夹夹闭肠系膜上动脉,同时观察并描记血压曲线。
然后分别在松开动脉夹后0min、5min、15min、30min、60min、90min、120min观察并描记血压曲线。
将上面的结果记录于记录于表1(见附录)【预期结果】1、三组家兔内毒素测定的平均值分别为:A组:0.008μg/ml; B组:6μg/ml C组:0.05μg/ml可见,实验组(C组)注射维生素C后,家兔血液中的内毒素含量较对照组(B组)明显减少,较空白组(A组)增加不明显。
2、三组家兔的血压变化曲线可见,对照组(B组)的血压较正常组(A组)明显下降,实验组(C组)的血压较正常组(A组)无明显变化。
由上述结果可知,通过预先给家兔注射维生素C,可以在肠系膜上动脉缺血-再灌注休克动物模型中起到减少内毒素释放入血的作用,大大减轻休克损伤,从而起到预防作用。
【实验研究意义】实验创新与临床应用近年来,随着休克治疗的进步以及溶栓治疗、心脏外科体外循环、心肺脑复苏、断肢再植、器官移植等方法的建立和应用,使组织器官的血液循环重建,功能得到恢复。
由于受损组织结构的修复,患者的病情得以好转或康复;但是有时缺血后再灌注,不仅未能使组织、器官功能恢复,反而加重组织、器官的功能障碍和结构损伤。
现已证实,心、脑、肝、肾、肺、胃肠道、肢体及皮肤等多种组织器官存在缺血再灌注损伤的现象。
本实验通过探究维生素C对家兔肠系膜上动脉缺血再灌注损伤的保护作用,将维生素C的抗氧化(清除氧自由基)和降低肠道细菌易位发生率和易位量的作用类推于存在缺血再灌注损伤现象的上述组织器官中,保护组织器官,老药新用。
而且维生素C价格便宜,能够大范围推广使用。
【注意事项】1、剪开腹膜时,如动物仍有疼痛反应,可再用少量的1%普鲁卡因溶液进行腹膜麻醉;2、移动内脏动作轻柔,以免过度牵拉损伤肠管,造成血压下降;3、分离肠系膜上动脉时,动作要轻,不要使用锐器,夹闭时不能用力过猛造成血管大出血;4、正确使用动脉夹,确保夹紧肠系膜上动脉;5、动脉夹夹闭过紧,松夹后动脉仍未被复流的血液冲开,需用食指深入夹闭处搓揉几下。
【附录】显色基质鲎试剂盒使用说明1、材料和设备1.1 试剂鲎试剂、细菌内毒素工作品、显色基质、偶氮化试剂1 、偶氮化试剂2 、偶氮化试剂3、HC l ( 反应终止剂) 、细菌内毒素检查用水。
1.2 器材无热原试管、无热原吸头。
旋涡混合仪、移液器、多道移液器、封口膜、试管架。
恒温水浴箱(37〒1℃)、分光光度计。
注意:接触试剂及供试品的所有器皿必须是无热原的(出产公司提供无热原耗材)。
玻璃器皿可经250℃干烤至少60 分钟去除热原。
2、供试品的贮存与预处理备注:若供试品为血液类,请参照厂家配套血液相关处理试剂使用说明书。
2.1 供试品的pH 值应在6 - 8 之间,若超出此范围,需用无热原缓冲液、0.1N 氢氧化钠或0.1N 盐酸调节。
2.2 若供试品中可能存在鲎实验的干扰物质,处理参见【供试品的干扰试验】。
2.3 若供试品中可能含有β-葡聚糖(β-葡聚糖会产生G 因子旁路反应,干扰内毒素检测),需选用特异性鲎试剂(出产公司提供)。
2.4 若供试品为一些抗菌素如头孢类抗菌素和磺胺制剂会对偶氮染色剂产生偶联反应而干扰偶氮化显色,需要选用不含偶氮化试剂的试剂盒(出产公司提供)。
2.5 若供试品的本底吸光度值大于0.5,必须对供试品进行稀释后再检测。
2.6 若供试品颜色较深(例如溶血),或在酸性条件下颜色加深(例如一些组织培养介质),必须设置供试品空白管以扣除供试品自身的颜色本底。
供试品空白管不加入鲎试剂,以等体积鲎试剂的溶剂(该处为细菌内毒素检查用水)代替。
其余操作同供试品管。
3、实验操作3.1 细菌内毒素标准溶液配制标准曲线所采用的内毒素浓度可以为0.01, 0.025, 0.05, 0.1 EU/ml 或0.1, 0.25, 0.5,1.0EU/ml。
稀释方法如下(以0.1, 0.25, 0.5, 1.0 EU/ml 为例):取细菌内毒素工作品1支,按细菌内毒素工作品使用说明书稀释为10EU/ml 的内毒素溶液,再稀释为1.0EU/ml 的内毒素溶液,以1.0EU/ml 的内毒素溶液为母液按下表稀释成0.1,0.25, 0.5, 1.0 EU/ml 的浓度梯度。
配制好的内毒素标准溶液应在4 小时内用完。
表1 内毒素标准溶液配制内毒素浓度(EU/ml) 1 0.5 0.25 0.1加细菌内毒素检查用水(ml) 0 0.5 0.75 0.9加1EU/ml内毒素溶液(ml) 1 0.5 0.25 0.13.2 阴性对照为细菌内毒素检查用水。
3.3 鲎试剂、显色基质、偶氮化试剂等的溶解显色基质特异性鲎试剂盒使用说明书 (终点显色法,含偶氮化试剂)鲎试剂:按标示量加细菌内毒素检查用水于鲎试剂中,轻轻振摇使鲎试剂完全溶解, 注意不要用旋涡混匀仪激烈振摇。
溶解的鲎试剂应在10 分钟内用完。
显色基质:按标示量加细菌内毒素检查用水于显色基质中,轻轻振摇使显色基质完全溶解。