κ受体参与羟考酮后处理对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护

摘要目的通过以往的研究证明表示如果想缓解由于心肌受损时血量减少为避免其的二次损伤要对它进行缺血（Iscemia Postconditioning)处理。

本文章就具体论述了时当给受伤缺血时的家兔注入盐酸羟考酮注射液（Oxycodone Hydrochloride Injection）后家兔的反应。

本实验就是要具体探明该注射液起到的保护作用，和分析了解κ受体在经过羟考酮后处理中能够产生的作用。

方法四肢灵动，活泼康健的雄性家兔，2.5～4月龄，体重2.1～3.0k g，将家兔调整到心肌缺血并需再灌注的状态，给家兔进行开胸，并在30分钟后对左前肢进行结扎并在180分钟后进行再注射，把它们任意分成五组：1）非进行手术组（ sham组，n=8）只给左前肢穿线，并不进行结扎；2)缺血再灌注组（ I/R组，n=9）：左前降支结扎心肌缺血 30 min，再灌注 180 min；3）缺血后处理组（ Ipoc组，n=9）：等再进行灌注的时候重复做三次，使得保证每次至少有30s的缺血和30s的注射； 4）羟考酮后处理组（Oxpoc组，n=9）：可以在下一次注射前的五分钟左右给家兔的静脉缓慢注射羟考酮(0.3mg／kg)；5）nor-binaltorphimne +羟考酮后处理组（BNI+Oxpoc组，n=10）：于再灌注起始前10min给予κ受体拮抗剂nor-binaltorphimne （3mg/kg），余处理同Oxpoc 组。

最后再统计数据并测出此时家兔的血清浓度，通过相关法则测出家兔已经坏死的心肌面积，并计算出所占总体面积的百分比。

取一些心肌组织部分，并使用免疫组化染色法的原理来检测出存在细胞缝隙中的蛋白成分，从而推导出它的平均光密度OD值是多少。

结果与 Sham组比较，其余四组血清CK-MB、cTn-I 浓度升高（ P<0.05），I/R组、Oxpoc 组、IPOC组、 BNI+Oxpoc 组Cx43 OD 值降低（ P<0.05）；与I/R组进行比较，发现 Ipoc 组和Oxpoc 组的心肌梗死面积减少，所占比例也降低了（ P<0.01），Ipoc组、 Oxpoc 组血清 CK-MB、cTn-I浓度降低（ P<0.05），Ipoc组、 Oxpoc组 Cx43 OD 值升高（ P<0.05）；与 Ipoc组或Oxpoc 组比较， BNI+ Oxpoc组心肌梗死面积百分比和血清CK-MB、 cTn-I 浓度升高（ P<0.05）， Cx43 OD 值降低（ P<0.05）。

结论1. 羟考酮在经过处理后能在一定程度上减轻心肌缺血的症状，它与缺血后进行心肌在注射有等同的功效。

而根据κ受体拮抗剂nor-binaltorphimne 消除羟考酮后产生的效果可以得出，经过羟考酮的处理后，产生的保护作用的机制与κ受体是否激活有关。

2.通过激活κ阿片受体并调节 Cx43 的表达机制就有可能是羟考酮产生作用的途径。

关键词：羟考酮；缺血后处理；再灌注损伤；心肌；κ受体；缝隙连接蛋白43AbstractObjective：To evaluate the effect of oxycodone postconditioninging on myocardial Ischemia-reperfusion injury induced by myocardial ischemia-reperfusion in rabbits and the role of κopioid receptors．Methods：Male rabbits ，aged 2～3 months,weighing 2.2～2.8 kg, establishing the model of myocardial ischemia-reperfusion injury by occlusion of the left anterior descending branch of coronary artery for 30 min followed by 180min reperfusion, were randomly divided into 5 groups using a random number table：1)sham operation group(group Sham,n=8): left anterior descending branch thread only, not ligated；2)ischemia-reperfusion group (group I／R,n=9): 30min ischemia and 180 min reperfusion only without other intervention; 3)Ischemia Post-conditioning group (group Ipoc,n=9)：At the first three minutes of reperfusion ,three cycles of a 10s reperfusion interspersed with a 10s ischemia preceded 180min reperfusion；oxycodone postconditioning(group Oxpoc,n=9): oxycodone ,0.3mg/kg ,was injected intravenously at 5 min before reperfusion.；κreceptor antagonist nor-binaltorphimne+oxycodone postconditioning group(group BNI+ Oxpoc, n=10): BNI was given 10min prior to reperfusion and the rest of treatments as the same as Oxpoc group. Venous blood samples were collected at the end of reperfusion for measurement of the plasma cTnI and CK-MB concentrations. The rabbits were then sacrificed and the heart tissue was adopted for the later determination. TTC staining was used to detect the myocardial infarct size and immunohistochemical staining was used to detect the expression of Cx43 protein in myocardial cells.Results：Compared with Sham group, the plasma cTn-I and CK-MB concentrations in the other four groups were increased（P<0.05）and the value of Cx43 OD were decreased （P<0.05）;Compared with I/R group, Ipoc, Oxpoc area percentage reduce myocardial infarction group (P < 0.01), Ipoc, concentration of serum cTn -i Oxpoc group reduced (P < 0.05), Ipoc, Oxpoc Cx43 OD value (P < 0.05); Compared with I/R group, the infarct areas inIpoc group and Oxpoc group were decreased（P<0.01）,the plasma cTn-I and CK-MB concentrations in Ipoc group and Oxpoc group were decreased （P<0.05）, the value of Cx43 OD and the expression of Cx43 mRNA in Ipoc group and Oxpoc group were increased （P<0.05）; Compared with Ipoc group or Oxpoc group , the infarct areas, the plasma cTn-I and CK-MB concentrations were increased and the value of Cx43 OD were decreased in BNI+Oxpoc group（P<0.05）.Conclusions：1. Oxycodone can protect the heart from myocardial ischemia／reperfusion injury when administered at the onset of reperfusion and just as effective as ischemia post-conditioning and thc mechanism may be associated with the activation of κreceptors．2. The myocardial protection of oxycodone postconditioning may regulated the expression of Cx43 through activated κopioid receptors.Keywords ：Oxycodone；Ischemic postconditioninging；reperfusion injury；myocardial；Connexin 43；kappa opioid receptors中英文缩略词表缩略词英文全称中文全称I/R Ischemia reperfusion injury 缺血再灌注损伤PCI Percutaneous coronary intervention 经皮冠状动脉介入术TTC 2,3,5,-Triphenyl Tetrazolium chloride 氯化三苯基四氮唑IPOC Iscemia Postconditioning 缺血后处理PPOC Phannacologic post-conditioning 药物后处理MAP Mean arterial press 平均动脉压HR Heart Rate 心率CX43 Connexin43 细胞缝隙连接蛋白43 MIRI Myocardial ischemia-reperfusion injury 心肌缺血再灌注损伤序言 (1)第1章实验材料与方法 (2)1.1 实验材料 (2)1.1.1主要仪器与设备 (2)1.1.2 主要试剂与药物 (3)1.1.3实验动物 (3)1.2实验方法 (3)1.2.1 实验动物分组 (3)1.2.2实验步骤 (4)1.2.2.1实验动物模型制备与监测 (4)第2章实验结果 (7)第3章讨论 (9)3.1 家兔心肌缺血再灌注模型的制备 (9)3.2心肌再灌注损伤与缺血后处理 (10)3.3 κ阿片受体在羟考酮后处理中的角色 (11)3.4 Cx43 与心肌缺血再灌注损伤 (11)第4章结论 (12)参考文献 (12)综述 (16)致谢 (28)攻读学位期间取得的科研成果 (30)目录序言 (1)第1章实验材料与方法 (2)1.1 实验材料 (2)1.1.1主要仪器与设备 (2)1.1.2 主要试剂与药物 (3)1.1.3实验动物 (3)1.2实验方法 (3)1.2.1 实验动物分组 (3)1.2.2实验步骤 (4)1.2.2.1实验动物模型制备与监测 (4)第2章实验结果 (7)第3章讨论 (9)3.1 家兔心肌缺血再灌注模型的制备 (9)3.2心肌再灌注损伤与缺血后处理 (10)3.3 κ阿片受体在羟考酮后处理中的角色 (11)3.4 Cx43 与心肌缺血再灌注损伤 (11)第4章结论 (12)参考文献 (12)综述 (16)致谢 (28)攻读学位期间取得的科研成果 (30)序言随着21世纪人们生活水平质量的普遍提升，餐桌上的肉类食物也频频出现，身体健康的安全问题成为人们意识中的关键。