苯胺蓝染色液

苯胺蓝染色液

北京雷根生物技术有限公司 https://www.360docs.net/doc/4c2109568.html,

苯胺蓝染色液

简介:

结缔组织狭义上是指其含有的三种纤维:胶原纤维、网状纤维、弹力纤维,而胶原纤维(collagen fiber)是分布最广、含量最多的一种纤维。因此Masson 染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色(淡绿)或蓝色(苯胺蓝),主要用于区分胶原纤维和肌纤维。Leagene 苯胺蓝染色液主要有苯胺蓝、弱酸等组成,呈酸性,常与丽春红品红染色液等配合使用对胶原纤维进行染色。

组成:

操作步骤(仅供参考):

1、根据实验具体要求操作。

2、一般浸染1~2min 。

注意事项:

1、 切片脱蜡应尽量干净。

2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

编号 名称 DC0031 Storage 苯胺蓝染色液 100ml RT 避光 使用说明书 1份

软骨染色液(甲苯胺蓝法)染色步骤及注意事项

软骨染色液(甲苯胺蓝法)染色步骤及注意事项 货号:G2543 规格:100ml 保存:室温,避光,12个月。 产品说明: 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料,属于醌亚胺染料类。这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团,从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色;肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色。甲苯胺蓝染色液(甲苯胺蓝法)呈强碱性,更利于组织细胞的着色。操作说明:(仅供参考) 1、常规脱钙,包埋,固定。 2、石蜡切片入二甲苯2次。 3、系列乙醇各1min。自来水洗2min。 4、入Toluidine Blue O Stain浸染30min。根据不同组织,染色时间不完全相同。 5、自来水洗2min,滤纸吸干水分。 6、丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。 7、逐级乙醇脱水。 8、二甲苯透明,中性树胶封固。 染色结果: 软骨、成骨细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。

注意事项: 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。 2、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色,浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。 3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 相关试剂: G3661甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法) G3662甲苯胺蓝染色液(0.5%,磷酸盐法) G3665甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)

甲苯胺蓝染色液(0.5%,磷酸盐法)使用说明

甲苯胺蓝染色液(0.5%,磷酸盐法)使用说明 货号:G3662 规格:100ml 保存:室温,避光,12个月。 产品说明: 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料,属于醌亚胺染料类。这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团,从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色。肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色。 操作说明:(仅供参考) (一)肥大细胞染色 1、脱蜡至蒸馏水。 2、浸染于甲苯胺蓝染色液10-15min,具体的染色时间根据切片厚度和组织的不同而定。 3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。 4、(可选)0.5%冰乙酸分化,直到细胞核和颗粒清晰可见。 5、快速95%和无水乙醇脱水。 6、二甲苯透明,封固。 染色结果:肥大细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。 (二)软骨染色 1、石蜡切片入二甲苯2次每次15min。

2、系列乙醇各1min。 3、自来水洗2min。 4、入Toluidine Blue O Stain浸染30min。 5、自来水洗2min,滤纸吸干水分。 6、丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。 7、逐级乙醇脱水。 8、二甲苯透明,中性树胶封固。 染色结果:软骨、成骨细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。 (三)细胞涂片染色 1、用20%的乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液,一般要求稀释到0.1%即可。 2、细胞涂片后,立即放入95%的乙醇中固定,取出放在纸巾上。 3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染,加盖玻片让染料渗透到细胞中。 4、将玻片竖起,稍加压力,使多余染料被纸巾吸去。 5、无需干燥,直接镜检。 染色结果:细胞核、淋巴细胞呈深蓝色;核仁呈紫红色;红细胞呈橘红;细胞质、单核细胞呈淡蓝色。 (四)原位杂交染色 1、用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度,凭经验一般稀释比例大于1:100。 2、玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。 3、在蒸馏水或去离子水浸泡数次。 4、按需求进行压片固定。 注意事项:

甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法)

甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法) 简介: 甲苯胺蓝(T oluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团,从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色。 组成: 操作步骤(仅供参考): (一)肥大细胞染色 1、脱蜡至蒸馏水。 2、根据切片厚度和组织的不同,浸染于甲苯胺蓝染色液。 3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。 4、(可选)0.5%冰乙酸分化,直到细胞核和颗粒清晰可见。 5、快速95%和无水乙醇脱水。 6、 二甲苯透明,封固。 染色结果:肥大细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。 (二)软骨染色 1、 石蜡切片入二甲苯2次每次。 2、 系列乙醇各1min 。 3、 自来水洗2min 。 4、 入Toluidine Blue O Stain 浸染。 5、 自来水洗2min ,滤纸吸干水分。 6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。 7、 逐级乙醇脱水。 8、 二甲苯透明,中性树胶封固。 染色结果:软骨、成骨细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。 (三)细胞涂片染色 编号 名称 DA0055 Storage Toluidine Blue O Stain(1%,磷酸盐法) 100ml RT 避光 使用说明书 1份

1、用20%的乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释到0.1%即可。 2、细胞涂片后,立即放入95%的乙醇中固定,取出放在纸巾上。 3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染,加盖玻片让染料渗透到细胞中。 4、将玻片竖起,稍加压力,使多余染料被纸巾吸去。 5、无需干燥,直接镜检。 染色结果:细胞核、淋巴细胞呈深蓝色;核仁呈紫红色;红细胞呈橘红;细胞质、单核细胞呈淡蓝色。 (四)原位杂交染色 1、用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度,凭经验一般稀释比例大于1:100。 2、玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。 3、在蒸馏水或去离子水浸泡数次。 4、按需求进行压片固定。 注意事项: 1、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色,浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应 相应延长。 2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

精子核蛋白染色液(苯胺蓝染色法)

精子核蛋白染色液(苯胺蓝法) 产品简介: 正常情况下,与精核DNA 结合的碱性蛋白(核蛋白)将经历从组蛋白到鱼精蛋白的自然成熟过程,这种成熟后的鱼精蛋白对精子基因(DNA )具有特殊保护作用。组蛋白被鱼精蛋白逐渐取代的过程,称之为精子核蛋白组型转换,这种组型转换具有重要的生理意义。 精子核携带着全部来自父方的遗传信息,这些基因必须在受精后才能开始表达。受精前精子基因在鱼精蛋白的特殊保护下,紧密浓集,无任何DNA 转录作用。但当核蛋白组型转换异常可引起男性不育或胚胎早期夭折流产,其机理为:①精子DNA 不稳定且易受损伤而难以受孕;②一旦受精,由于核蛋白组型异常,精子核不能正常解聚,从而影响了雌雄原核的融合;③胚胎不能正常发育,造成胚胎夭折而流产。 因此,组蛋白的多少是精子成熟度的一个重要指标,酸性条件下苯胺蓝能特异地与精子核组蛋白富含的赖氨酸残基结合生成紫蓝色化合物,根据着色的深浅来判断精子的成熟程度。 产品组成: 自备材料: 1、 蒸馏水 2、 新鲜精液样本 3、 恒温箱 4、 防脱载玻片 操作步骤(仅供参考): 1、配制洗涤工作液: 取适量的10×浓缩洗涤液,以蒸馏水10稀释后即为洗涤工作液。 2、取新鲜精液标本置于恒温箱37℃或常温放置,至完全液化。 3、取上述液化精液0.2~0.5ml 置于EP 管,再加入1-1.5ml 洗涤工作液,用吸管或移液器反复吹打数次,室温2000rpm 离心5min ,弃去上清液,保留管底精子沉淀团;重复操作 编号 名称 DA1201 20T DA1201 40T Storage 试剂(A): 10×浓缩洗涤液 10ml 20ml RT 试剂(B): 固定液 10ml 20ml 4℃ 避光 试剂(C): 苯胺蓝染色液 5ml 10ml RT 避光 使用说明书 1份

台盼蓝染色实验原理和步骤

创作编号: GB8878185555334563BT9125XW 创作者:凤呜大王* 台盼蓝染色实验原理 台盼蓝(Trypan Blue) 是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。分子式:C34H24N6O14S4Na4,分子量: 960.82,可溶于水(10mg/ml)。 实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显

微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。实验步骤: 1、配制4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4℃保存。使用时用PBS稀释至0.4 %。 2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。 3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。(终浓度0.04%) 4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞和死细胞。 5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。 6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100% 注意: 1.保存条件:室温保存。

2.有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。 创作编号: GB8878185555334563BT9125XW 创作者:凤呜大王*

甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)

甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法) 简介: 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团,从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色。另外,肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质,遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色,临床上经常用于肥大细胞染色。 Leagene 甲苯胺蓝染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性,更利于组织细胞的着色。 组成: 操作步骤(仅供参考): (一)肥大细胞染色 1、脱蜡至蒸馏水。 2、根据切片厚度和组织的不同,浸染于甲苯胺蓝染色液。 3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。 4、冰乙酸分化,直到细胞核和颗粒清晰可见。 5、快速和无水乙醇脱水。 6、 二甲苯透明,封固。 染色结果:肥大细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。 (二)软骨染色 1、 石蜡切片入二甲苯。 2、 系列乙醇各。 3、 自来水洗。 4、 入Toluidine Blue O Stain ,浸染。 5、 自来水洗,滤纸吸干水分。 6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。 7、 逐级乙醇脱水。 编号 名称 DA0059 Storage Toluidine Blue O stain (0.5%,硼酸盐法) 100ml RT 避光 使用说明书 1份

8、二甲苯透明,中性树胶封固。 染色结果:软骨、成骨细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。 (三)细胞涂片染色 1、用乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释即可。 2、细胞涂片后,立即放入乙醇中固定,取出放在纸巾上。 3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染,加盖玻片让染料渗透到细胞中。 4、将玻片竖起,稍加压力,使多余染料被纸巾吸去。 5、无需干燥,直接镜检。 染色结果:细胞核、淋巴细胞呈深蓝色;核仁呈紫红色;红细胞呈橘红;细胞质、单核细胞呈淡蓝色。 (四)原位杂交染色 1、用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度,凭经验一般稀释比例大于1:100。 2、玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。 3、在蒸馏水或去离子水浸泡数次。 4、按需求进行压片固定。 注意事项: 1、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色,浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应 相应延长。 2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期:12个月有效。 相关: 编号名称 DA0056甲苯胺蓝染色液(0.5%,磷酸盐法) DC0032Masson三色染色液 DG0005糖原PAS染色液 DH0006苏木素伊红(HE)染色液 TC0713 葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)

台盼蓝染色实验原理和步骤

台盼蓝染色实验原理和 步骤 标准化管理部编码-[99968T-6889628-J68568-1689N]

台盼蓝染色实验原理台盼蓝(TrypanBlue)是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性,还常用于检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。分子式:C34H24N6O14S4Na4,分子量:960.82,可溶于水(10mg/ml)。 实验原理:正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和。台盼蓝是组织和中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。注意也有台盼蓝拒染现象。台盼蓝染色后,通过显微镜下或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞进行比较精确的定量。台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。 实验步骤: 1、配制4%台盼蓝:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加至 100ml,用滤纸过滤,4℃保存。使用时用PBS稀释至0.4%。 2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。

3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。(终浓度0.04%) 4、计数:在3分钟内,分别计数活细胞和死细胞。 5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而拒染呈无色透明状。 6、统计细胞活力:活细胞率(%)=活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100% 注意: 1.保存条件:室温保存。 2.有潜在致癌危险,实验时穿实验服并戴一次性手套和口罩操作。

甲苯胺蓝染色液(软骨专用)使用说明书

甲苯胺蓝染色液(软骨专用)使用说明书 货号:G2493 规格:100ml 保存:室温,避光,12个月。 产品说明: 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料,属于醌亚胺染料类。这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团,从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色;肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色。甲苯胺蓝染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性,更利于组织细胞的着色。 操作说明:(仅供参考) 1、常规脱钙,包埋,固定。 2、石蜡切片入二甲苯2次,每次15min。 3、系列乙醇各1min。自来水洗2min。 4、入Toluidine Blue O Stain浸染15-20min。根据不同组织,染色时间不完全相同。 5、自来水洗2min,滤纸吸干水分。 6、丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。 7、逐级乙醇脱水。 8、二甲苯透明,中性树胶封固。 染色结果: 软骨、成骨细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。 注意事项: 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。

2、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色,浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应相应延长。 3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 相关产品: G3661甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法) G3662甲苯胺蓝染色液(0.5%,磷酸盐法) G3665甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)

甲苯胺蓝水溶液(0.1%)

甲苯胺蓝水溶液(0.1%) 简介: 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团,从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色。另外,肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质,遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色,临床上经常用于肥大细胞染色。 Leagene 甲苯胺蓝水溶液(0.1%)由甲苯胺蓝、去离子水组成,一般用于特殊细胞的染色,不推荐用于软骨、胃粘膜等难染组织的染色。 组成: 操作步骤(仅供参考): (一)肥大细胞染色 1、脱蜡至蒸馏水。 2、根据切片厚度和组织的不同,浸染于甲苯胺蓝染色液。 3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。 4、冰乙酸分化,直到细胞核和颗粒清晰可见。 5、快速和无水乙醇脱水。 6、 二甲苯透明,封固。 染色结果:肥大细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。 (二)细胞涂片染色 1、细胞涂片后,立即放入乙醇中固定,取出放在纸巾上。 2、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染,加盖玻片让染料渗透到细胞中。 3、将玻片竖起,稍加压力,使多余染料被纸巾吸去。 4、无需干燥,直接镜检。 染色结果:细胞核、淋巴细胞呈深蓝色;核仁呈紫红色;红细胞呈橘红;细胞质、单核细胞呈淡蓝色。 (三)原位杂交染色 编号 名称 DA0051 Storage 甲苯胺蓝水溶液(0.1%) 100ml RT 避光 使用说明书 1份

台盼蓝染色液(1%)

台盼蓝染色液(1%) 简介: 台盼蓝(Trypan blue)又称锥蓝或锥虫蓝等,分子式为C 34H 24N 6Na 4O 14S 4,分子量为960.81,CAS Number 72-57-1,是一种阴离子型染料。Trypan blue 不能透过活细胞正常完整的细胞膜,故活细胞不着色,即产生所谓的拒染现象,而死亡细胞的细胞膜通透性增加,可使染料通过细胞膜进入细胞内,使死细胞着色呈蓝色,是最常用的检测细胞活率的方法。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。 Leagene Trypan blue stain(1%)常用于检测细胞膜的完整性以及细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。 组成: 自备材料: 1、 PBS 2、 细胞计数板 3、 显微镜 操作步骤(仅供参考): 1、收集细胞: 如果收集贴壁细胞,应用胰蛋白酶-EDTA 溶液消化细胞,收集细胞。如果收集悬浮细胞,则可以直接收集细胞。收集好的细胞在离心,弃上清,用PBS 重新悬浮细胞沉淀。 2、台盼蓝染色: 吸取细胞悬液到离心管内, 加入Trypan blue stain(1%)轻轻混匀,静置染色 (染色时间可适当延长,但不宜超过10min)。 3、细胞计数: 吸取经过染色后的细胞,用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量,每个 编号 名称 DA0066 DA0066 Storage Trypan blue stain(1%) 10ml 50ml 4℃ 使用说明书 1份

甲苯胺蓝水溶液(1%)

甲苯胺蓝水溶液(1%) 简介: 甲苯胺蓝(T oluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团,从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色。 组成: 操作步骤(仅供参考): 甲苯胺蓝水溶液(1%)一般用于特殊用途,如果用于染色,可参考如下步骤: (一)肥大细胞染色 1、脱蜡至蒸馏水。 2、根据切片厚度和组织的不同,浸染于甲苯胺蓝染色液。 3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。 4、(可选)0.5%冰乙酸分化,直到细胞核和颗粒清晰可见。 5、快速95%和无水乙醇脱水。 6、 二甲苯透明,封固。 染色结果:肥大细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。 (二)软骨染色 1、 石蜡切片入二甲苯2次。 2、 系列乙醇各1min 。 3、 自来水洗2min 。 4、 入Toluidine Blue O Stain 浸染。 5、 自来水洗2min ,滤纸吸干水分。 6、 丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。 7、 逐级乙醇脱水。 8、 二甲苯透明,中性树胶封固。 染色结果:软骨、成骨细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。 编号 名称 DA0052 Storage 甲苯胺蓝水溶液(1%) 100ml RT 避光 使用说明书 1份

(三)细胞涂片染色 1、用20%的乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释到0.1%即可。 2、细胞涂片后,立即放入95%的乙醇中固定,取出放在纸巾上。 3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染,加盖玻片让染料渗透到细胞中。 4、后将玻片竖起,稍加压力,使多余染料被纸巾吸去。 5、无需干燥,直接镜检。 染色结果:细胞核、淋巴细胞呈深蓝色;核仁呈紫红色;红细胞呈橘红;细胞质、单核细胞呈淡蓝色。 (四)原位杂交染色 1、用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度,凭经验一般稀释比例大于1:100。 2、玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。 3、在蒸馏水或去离子水浸泡数次。 4、按需求进行压片固定。 注意事项: 1、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色,浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应 相应延长。 2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

SD大鼠甲苯胺蓝染色步骤

SD大鼠甲苯胺蓝染色步骤 1、甲苯胺蓝染色法鉴定软骨细胞表型 Ⅱ代软骨细胞以2x105/ml的密度接种到铺有多聚赖氨酸盖玻片的24孔细胞培养板中,与原代培养条件相同,制作细胞爬片,常规培养48h后行甲苯胺蓝染色。 具体操作步骤如下: (1)倾去培养液,PBS充分漂洗3次,加入10%的中性甲醛常温下固定30min。 (2)倾去10%的中性甲醛,PBS充分漂洗3次,加入70%的乙醇固定30min除去四价铵离子,以免影响染色。 (3)倾去70%的乙醇溶液,PBS充分漂洗3次,晾干,加入甲苯胺蓝乙醇液(甲苯胺蓝0.2g 溶于30%乙醇100m1)染色_20min。 (4)PBS充分漂洗3次,迅速用无水乙醇再漂洗1次。 (5)取出爬片,干燥后中性树脂封片,电子显微镜下观察、摄片。 2、型胶原免疫细胞化染色法鉴定软骨细胞表型 Ⅱ代软骨细胞以2×105/ml的密度接种到铺有多聚赖氨酸盖玻片的24孔细胞培养板中,与原代培养条件相同,制作细胞爬片,常规培养48h后行免疫细胞化学法染色。实验过程严格遵照免疫细胞化学染色试剂盒说明书进行操作,PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照组。 具体操作步骤如下: (1)倾去培养液,冰冷的PBS漂洗3x3min,加入4%多聚甲醛1ml室温固定15min。 (2)PBS清洗标本3x3min,每张标本滴加1滴新鲜配制的3%H202,室温下孵育10min。 (3)PBS清洗标本3x3min,每张标本滴加穿膜液0.5m](0.1%timton+o.1M Glycine)冰上孵育 30min。 (4)PBS清洗标本3x3min,每张标本滴加5mg/ml的动物非免疫封闭血清(BSA)0.5ml,室温 下封闭1h。 (5)滴加1:150稀释的兔抗大鼠II型胶原多克隆抗体50ul于封口膜上,使标本与一抗充分 接触,置于湿盒中4℃过夜。PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照组。 (6)PBS清洗标本3x3min,加入二抗工作液,37℃孵育20min。 (7)PBS清洗标本3x3min,每张标本滴加1滴SABC试剂,37℃孵育20min后PBS(pH7.2~7.6) 清洗标本4x5min。 (8)DAB显色:取蒸馏水1ml,加入试剂盒中A、B、C试剂各一滴,混匀后滴加至标本。 室温下显色,显微镜下观察并控制反应时间(约5-30min)。 (9)蒸馏水漂洗,苏木素轻度复染,脱水。 (10)干燥后中性树脂封片,电子显微镜下观察、拍照。 豚鼠关节软骨细胞甲苯胺蓝染色鉴定 将F1代豚鼠关节软骨细胞以1×104/ml的浓度传代至孔底铺有圆形盖玻片的24孔板 中;正常培养,制作细胞爬片,镜下观察细胞状态,取细胞状态及数量适宜(2天左右) 的爬片染色。染色步骤如下: 1取出细胞爬片,用PBS缓冲液漂洗3次,每次3min,吸弃PBS,每张爬片滴加4%多聚甲醛100 ul,铺满爬片,室温固定3h。 2 PBS漂洗3次,每次3min后吸弃PBS,每张爬片滴加70%的乙醇100 ul室温固定20min。 3 PBS漂洗3次,每次3min后吸弃PBS,晾干后每张爬片滴加0.04%的甲苯胺蓝溶液50 ul,室温下处理20min,无水乙醇迅速漂洗1次,晾干封片,观察拍照记录。

细胞染色专题之一:台盼蓝

细胞染色专题之一:台盼蓝 台盼蓝(Trypan Blue,也称Direct blue 14):一种死细胞染色用色素 化学名: 3,3'-{[3,3'-Dimethyl(1,1'-biphenyl)-4,4'-diyl]bis(azo)}bis(5-amin o-4-hydroxy-2,7-naphthalenedisulfonic acid), tetrasodium salt3,3’-{[3,3’-二甲基-(1,1’-二苯基)-4,4’-二基]双(偶氮)}-双(5-氨基-4-羟基-2,7-萘二磺酸),四钠盐分子式:C34H24N6Na4O14S4 分子量:960.81 CAS Number: 72-57-1 外观:黑褐色结晶粉末 摩尔吸光度:>69,000(在606nm附近) 染色原理: 细胞损伤或死亡时,台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA 结合,使其着色。而活细胞能阻止染料进入细胞内。故可以鉴别死细胞与活细胞。严格来说,台盼蓝染色检测的是细胞膜的完整性,通常认为细胞膜丧失完整性,即可认为细胞已经死亡。这被称为染料排除测试(dye exclusion),Erythrosin B(红色)、negrosine、eosin Y、AO和EB也用于此目的。通过显微镜很容易就能识别出死亡的被台盼蓝染色的细胞,并可使用细胞计数器进行计数。 溶于水,可以配制成10mg/ml的水溶液,水溶液呈深蓝色。 台盼蓝主要用来鉴定原代培养细胞时,细胞分离后的存活情况,用0.4%台盼蓝直接染色5-10分钟,在显微镜下观察即可。 应用于细胞凋亡: 如果细胞膜不完整、破裂,台盼蓝染料进入细胞,细胞变蓝,即为坏死。如果细胞膜完整,细胞不为台盼蓝染色,则为正常细胞或凋亡细胞。尽管在凋亡的早期到中期检测是很困难的,此方法对反映细胞膜的完整性,区别坏死细胞有一定的帮助。 储存条件:常温保存 注意事项: 1. 台盼蓝对人体有毒 2. 台盼蓝染细胞时,时间不宜过长。否则,部分活细胞也会着色,会干扰计数。 3. 台盼蓝染色法对于悬浮细胞来说,还比较方便,对贴壁细胞来说,较为繁琐。因为要消化,有时,96孔板不一定能消化干净。而且,该法是测定细胞浓度的方法,与细胞悬液的体积有关,加入的胰蛋白酶或1640要计入终体积。可以说,该法相对准确,可能有一些人为因素的干扰。 细胞染色专题之二:美蓝 美蓝 英文名:Methylene blue,Swiss blue 中文名:亚甲基蓝、次甲基蓝、品蓝、美蓝、亚甲蓝、四甲基蓝、盐基湖蓝、碱性亚甲天蓝等。 分子式:C16H18ClN3S

肥大细胞-甲苯胺蓝

肥大细胞-甲苯胺蓝 目的:此细胞广泛分布于结缔组织中。胞质含有异染性颗粒,由肝磷脂和组胺构成。原理:肥大细胞被染成红-紫色(异染质着染)和蓝色的背景(正染质着染)。异染性组织染色原理是一种染液染出不同的颜色。是因为碱性染料的PH值、染料浓度和温度。蓝色和紫色染料可显出红色,红色染料可显出黄色异染色组织原理。 对照:皮肤 固定:10%甲醛 技术:4μ石蜡切片 设备:染色,蒸馏水稍洗。 试剂: 甲苯胺蓝 原液: 甲苯胺蓝Toluidine Blue O 1.0 gm 70%酒精alcohol 100.0 ml 混合溶解,保存期6个月。 警告:避免接触和吸入。 工作液: 甲苯胺蓝Toluidine blue, Stock 5.0 ml 1%氯化钠Sodium chloride 45.0 ml 新鲜配制,用后丢弃。 警告:避免接触和吸入。 1%氯化钠: 氯化钠Sodium chloride 0.5 gm 蒸馏水Distilled water 50.0 ml 新鲜配制。 安全:穿戴手套、护目镜和白大衣。在通风场所进行。避免接触和吸入。 甲苯胺蓝O:有引起人的胃肠道和血液紊乱报导。 程序: 1. 脱蜡至蒸馏水。 2. 甲苯胺蓝工作液1-2 minutes。 3.蒸馏水稍洗×3。 4. 快速95%和无水乙醇脱水。 5. 二甲苯透明和封固。 结果: 肥大细胞紫红色 背景蓝色 参考文献: Sheehan D, Hrapchak B, Theory and practice of Histotechnology, 2nd Ed, 1980, pp282,Battelle Press, Ohio Luna L, Manual Of Histologic Staining Methods from the AFIP, 3rd Ed, 1968, pp 162-163, McGraw-Hill, NY Crookham,J, Dapson,R, Hazardous Chemicals in the Histopathology

甲苯胺蓝染液使用说明

甲苯胺蓝染液使用说明 货号:G3668 规格:100mL/500mL 保存:室温避光储存,有效期至少12个月。 产品说明: 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料,属于醌亚胺染料类,是碱性染料,甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色,可染细胞核使之呈蓝色;肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色,可用于尖锐湿疣的初筛及肥大细胞的检测。 染色方法:(仅供参考) (一)肥大细胞染色: (1)组织切片脱蜡至水: ①二甲苯(I)中脱蜡5-10min。 ②换用新鲜的二甲苯(Ⅱ),再脱蜡5-10min。 ③无水乙醇5min。 ④95%乙醇2min。 ⑤80%乙醇2min ⑥70%乙醇2min。 (2)蒸馏水浸洗2-3次。 (3)甲苯胺蓝染液染色(具体时间根据染色结果和实验要求调整)。 (4)稍水洗,洗去多余染色液。 (5)95%酒精分色,在镜下控制分色效果。

(6)用100%酒精脱水。 (7)二甲苯透明,中性树胶封片: ①二甲苯(I)1min。 ②二甲苯(Ⅱ)1min。 ③中性树胶封固,镜下观察。 染色结果:肥大细胞颗粒呈紫红色,胞核呈蓝色。 (二)细胞涂片染色 (1)用20%的乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液,一般要求稀释到0.1%即可。 (2)细胞涂片后,立即放入95%的乙醇中固定,取出放在纸巾上。 (3)滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染,加盖玻片让染料渗透到细胞中。 (4)将玻片竖起,稍加压力,使多余染料被纸巾吸去。 (5)无需干燥,直接镜检。 染色结果:细胞核、淋巴细胞呈深蓝色;核仁呈紫红色;细胞质、单核细胞呈淡蓝色。 注意事项: 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。样品数量很多时,可使用染色架和染色缸,以便于操作。 2、本产品为1%浓度水溶液,具体使用浓度可自行稀释。 3、由于温度对染料的溶解度与着色力有很大的影响,若快速染色,当室温较低时,可以适当加温。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

台盼蓝染色液(0.4%)

北京雷根生物技术有限公司 台盼蓝染色液(0.4%) 产品简介: 台盼蓝(Trypan blue)又称锥蓝或锥虫蓝等,分子式为C 34H 24N 6Na 4O 14S 4,分子量为960.81,CAS Number 72-57-1,是一种阴离子型染料。Leagene Trypan blue stain(0.4%)常用于检测细胞膜的完整性以及细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂。台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量,0.4%为最常用的浓度。 产品组成: 操作步骤(仅供参考): 1、收集细胞: 如果收集贴壁细胞,应用胰蛋白酶-EDTA 溶液消化细胞,收集细胞。如果收集悬浮细胞,则可以直接收集细胞。收集好的细胞在1000~2000g 离心1min ,弃上清,用1ml PBS 重新悬浮细胞沉淀。 2、台盼蓝染色: 吸取100μl 细胞悬液到1.5ml 或0.5ml 离心管内, 加入100μl Trypan blue stain(0.4%)轻轻混匀,静置染色3min(染色时间可适当延长,但不宜超过10min)。 3、细胞计数: 吸取经过染色后的细胞,用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量,每个细胞样品至少需要数500个细胞,数出蓝色细胞和细胞总数。细胞存活率计算公式如下: 细胞存活率=(细胞总数-蓝色细胞数)/细胞总数×100% 注意事项: 1、 Trypan blue stain 对人体有轻微毒性,请注意小心防护。 2、 注意凋亡小体偶尔也有台盼蓝拒染现象。 3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期: 6个月有效。 编号 名称 DA0065 DA0065 Storage Trypan blue stain(0.4%) 50ml 100ml 4℃ 使用说明书 1份

甲苯胺蓝染色液

甲苯胺蓝染色液(0.5%,磷酸盐法) 产品简介: 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料, 属于醌亚胺染料类, 这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团,从而成色原显色。,甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用, 组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝还含有两个助色团助色团,能促使染料产生电离成盐类, 帮助发色团对组织产生染色力, 使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色。另外,肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质,遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色。 临床上,经常用甲苯胺蓝对软骨细胞和肥大细胞进行染色。 主要成分:主要由Toluidine Blue O、磷酸盐缓冲液等组成。 操作步骤(仅供参考): (一)肥大细胞染色 1、脱蜡至蒸馏水。 2、根据切片厚度和组织的不同,浸染于甲苯胺蓝染色液5~30min。 3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗3~5min。 4、(可选)0.5%冰乙酸分化,直到细胞核和颗粒清晰可见。 5、快速95%和无水乙醇脱水。 6、 二甲苯透明。 7、封固。 染色结果:肥大细胞呈紫红色;背景呈不同程度的蓝色。 (二)细胞涂片染色 1、按要求稀释甲苯胺蓝染色液, 一般要求稀释到0.1%即可。 2、用稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染,一般细胞涂片1~2min即可。 3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗3~5min。

4、晾干。 5、镜检。 (三)原位杂交染色 1、用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度,凭经验一般稀释比例大于1:100。 2、玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。 3、在蒸馏水或去离子水浸泡数次。 4、按需求进行压片固定。 注意事项: 1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 2、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色,浸染于甲苯胺蓝染色液的时间应 相应延长。 有效期:12个月有效。 相关产品: 产品编号 产品名称 DZ0040改良苯酚品红染色液 DA0059甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法) DA0072中性红染色液(1%) DC0032Masson三色染色试剂盒 DC0095核固红染色液(0.1%) DG0005糖原PAS过碘酸雪夫染色试剂盒 DG0022淀粉样物质染色试剂盒(Highman刚果红法) DH0006苏木素伊红(HE)染色液试剂盒

台盼蓝染色方法

台盼蓝染色方法 基本性质 中英文名称:台盼蓝(Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝 分子式:C34H24N6O14S4Na4 分子量: 960.82 可溶于水(10mg/ml) 是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。还常用于细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。 机理 正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。 台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。 台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。 步骤 步骤:(来自supergama) 1、4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。(也可买Gibco的成品); 2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。 3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。(终浓度0.04%) 4、计数:在三分钟内,分别计数活细胞和死细胞。 5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。 6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100% 其他 保存条件 室温保存 说明 有潜在致癌危险 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

甲苯胺蓝染色液(1%,硼酸盐法)

甲苯胺蓝染色液(1%,硼酸盐法) 货号:G3663 规格:100ml 保存:室温,避光,12个月。 产品说明: 甲苯胺蓝(Toluidine Blue O)是一种常用的人工合成染料,属于醌亚胺染料类。这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团,从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色,可染细胞核使之呈蓝色;肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性紫红色。甲苯胺蓝染色液(Toluidine Blue,1%,硼酸盐法)由于硼酸盐缓冲液呈强碱性,更利于组织细胞的着色。 操作说明:(仅供参考) (一)肥大细胞染色 1、脱蜡至蒸馏水。 2、浸染于甲苯胺蓝染色液10-15min,具体的染色时间根据切片厚度和组织的不同而定。 3、蒸馏水或去离子水轻轻冲洗。 4、(可选)0.5%冰乙酸分化,直到细胞核和颗粒清晰可见。 5、快速95%和无水乙醇脱水。 6、二甲苯透明,封固。 染色结果:肥大细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。 (二)软骨染色 1、石蜡切片入二甲苯2次每次15min。 2、系列乙醇各1min。 3、自来水洗2min。 4、入Toluidine Blue O Stain浸染30min。

5、自来水洗2min,滤纸吸干水分。 6、丙酮分化至软骨细胞呈紫蓝色清楚可见。 7、逐级乙醇脱水。 8、二甲苯透明,中性树胶封固。 染色结果:软骨、成骨细胞呈紫红色;背景呈淡蓝色。 (三)细胞涂片染色 1、用20%的乙醇溶液稀释甲苯胺蓝染色液,一般要求稀释到0.1%即可。 2、细胞涂片后,立即放入95%的乙醇中固定,取出放在纸巾上。 3、滴加稀释后的甲苯胺蓝染色液进行滴染,加盖玻片让染料渗透到细胞中。 4、将玻片竖起,稍加压力,使多余染料被纸巾吸去。 5、无需干燥,直接镜检。 染色结果:细胞核、淋巴细胞呈深蓝色;核仁呈紫红色;红细胞呈橘红;细胞质、单核细胞呈淡蓝色。 (四)原位杂交染色 1、用蒸馏水或去离子水稀释到相应的浓度,凭经验一般稀释比例大于1:100。 2、玻片在稀释好的染色液中短暂浸泡。 3、在蒸馏水或去离子水浸泡数次。 4、按需求进行压片固定。 注意事项: 1、第一次使用本试剂时建议先取1-2个样品做预实验。 2、针对于胃粘膜组织、软骨组织等较难着色组织的染色,于甲苯胺蓝染色的时间应相应延长。 3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 相关产品: G3661甲苯胺蓝染色液(1%,磷酸盐法) G3662甲苯胺蓝染色液(0.5%,磷酸盐法) G3665甲苯胺蓝染色液(0.5%,硼酸盐法)

台盼蓝染色法

台盼蓝:细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。因此常用于检测细胞是否存活。 基本性质 中英文名称:台盼蓝(Trypan Blue)或称台盼兰、锥虫蓝、曲利苯蓝 分子式:C34H24N6O14S4Na4 分子量: 960.82 可溶于水(10mg/ml) 是细胞活性染料,常用于检测细胞膜的完整性。还常用于检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色,而死细胞会被染成淡蓝色。 台盼蓝可被巨噬细胞吞噬,故可用于巨噬细胞的活体染色剂。 机理 正常的活细胞,胞膜结构完整,能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内;而丧失活性或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色。通常认为细胞膜完整性丧失,即可认为细胞已经死亡,这与中性红作用相反。因此,借助台盼蓝染色可以非常简便、快速地区分活细胞和死细胞。台盼蓝是组织和细胞培养中最常用的死细胞鉴定染色方法之一。注意凋亡小体也有台盼蓝拒染现象。 台盼蓝染色后,通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数,就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。 台盼蓝染色只需3-5分钟即可完成,并且操作非常简单。 步骤 1、4%台盼蓝母液:称取4g台盼蓝,加少量蒸馏水研磨,加双蒸水至100ml,用滤纸过滤,4度保存。使用时。用PBS稀释至0.4%。(也可买Gibco的成品); 2、胰酶消化贴壁细胞,制备单细胞悬液,并作适当稀释。 3、染色:细胞悬液与0.4%台盼蓝溶液以9:1混合混匀。(终浓度0.04%) 4、计数:在三分钟内,分别计数活细胞和死细胞。 5、镜下观察,死细胞被染成明显的蓝色,而活细胞拒染呈无色透明状。 6、统计细胞活力:活细胞率(%)= 活细胞总数/(活细胞总数+死细胞总数)×100%

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