DE测定(还原糖含量测定)
食品中还原糖含量的测定-直接滴定法
• 3.试剂：
– 硫酸铜（CuSO4 · 5H2O） – 次甲基蓝 -碱性酒石酸铜甲液（费林试剂甲液） – 酒石酸钾钠 – 亚铁氰化钾 -碱性酒石酸铜乙液（费林试剂乙液） – 乙酸锌 – 冰乙酸 -乙酸锌溶液 – 葡萄糖 -葡萄糖标准溶液（1mg/ mL） – 氢氧化钠 -氢氧化钠溶液 – 盐酸
四、实验步骤
• 2. 碱性酒石酸铜溶液的标定 – 吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置 于150mL锥形瓶中（甲液、乙液混合后生成氧 化亚铜沉淀，因此，应将甲液加入到乙液，使 生成的氧化亚铜沉淀重溶），加水10mL、玻璃 珠2粒，从滴定管中滴加9mL葡萄糖标准溶液， 控制在2min内加热至沸，趁沸以每两秒1滴的速 度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚 好褪去为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总 体积。同法平行操作三份，取其平均值，计算 每10mL（甲液、乙液各5mL）碱性酒石酸铜溶 液相当于葡萄糖的质量（mg）。
• 4. 样品溶液的测定
– 吸取5.0mL碱性酒石酸铜溶液甲液及5.0mL乙 液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL、玻璃 珠2粒，从滴定管中滴加比预测体积少1mL的 样品溶液，使在2min内加热至沸，趁沸以以每 两秒1滴的速度滴定至终点。记录样液消耗的 体积，同法平行操作三份，得出平均消耗体积。
• 1. 样品处理
– 汽水等含CO2的饮料-雪碧
• 吸取10mL样品置于蒸发皿中，在水浴上除去CO2后， 移入250mL容量瓶，并用水洗涤蒸发皿，洗液并入 容量瓶中，加水至刻度，混匀后备用。
– 酒精饮料-啤酒
• 吸取10mL样品，置于蒸发皿中，用1mol/L氢氧化钠 溶液中和至中性，在水浴上蒸发至原体积的1/4后， 移入100 mL容量瓶中，加入50 mL水，摇匀后慢慢 加入5 mL乙酸锌溶液和5 mL 10.6%亚铁氰化钾溶液， 加水至刻度，摇匀。静置30min，用干燥滤纸过滤， 滤液备用。
奥氏试剂滴定法测还原糖_概述及解释说明
奥氏试剂滴定法测还原糖概述及解释说明1. 引言1.1 概述奥氏试剂滴定法是一种常用的化学分析方法，用以测定还原糖的含量。
在食品、农业、药物等领域，对于还原糖的测定十分重要。
本文将对奥氏试剂滴定法测定还原糖的概述进行详细介绍和解释说明。
1.2 文章结构本篇文章主要分为五个部分：引言、奥氏试剂滴定法测还原糖概述、奥氏试剂滴定法测还原糖的具体操作步骤、结果分析和数据处理方法以及结论及展望。
每个部分涵盖了不同的内容，以全面阐述奥氏试剂滴定法在测定还原糖方面所起到的作用。
1.3 目的本文旨在详细介绍奥氏试剂滴定法在测定还原糖方面的基本原理和步骤，同时指导读者进行实验操作，并进一步解释结果分析和数据处理方法。
通过本文的学习，读者将能够更好地理解并掌握奥氏试剂滴定法在测量还原糖含量中的应用，从而为相关研究和实验提供有力支持。
2. 奥氏试剂滴定法测还原糖概述2.1 奥氏试剂简介:奥氏试剂是一种常用的化学试剂，也称为费林试剂。
它由甲酸、硫酸和硫酸铜等成分混合而成。
在还原性物质存在时，奥氏试剂会发生颜色变化，可以用于测定还原糖的含量。
2.2 还原糖的定义与作用:还原糖是指具有还原性的碳水化合物，其分子结构中含有可被氧化的羟基、醛基或开环部分。
还原糖在生物体内起着重要的能量供应和储存功能。
常见的还原糖包括葡萄糖、果糖等。
2.3 滴定法的基本原理和步骤:奥氏试剂滴定法是一种定量测定还原糖含量的方法。
其基本原理是：当样品中存在可被氧化反应的还原糖时，与奥氏试剂发生反应产生紫色络合物；通过向样品溶液中滴加奥氏试剂，并观察颜色变化来确定滴定终点，从而计算出还原糖的含量。
具体步骤如下：1. 准备工作和实验器材清洗：确保实验室环境清洁整齐，并清洗所需的试剂瓶、容量瓶等实验器材。
2. 样品溶液的制备和稀释方法：将待测样品溶解于适当的溶剂中，并根据需要进行适当的稀释。
注意，样品溶液要充分混合均匀。
3. 实验过程中注意事项和技巧：在进行滴定之前，应先进行预滴定，确定滴定终点和消耗的奥氏试剂体积。
斐林试剂配制,标定以及还原糖测定
斐林试剂配制，标定以及还原糖测定糊精溶液中还原糖含量测定(DE值测定)A斐林试剂(碱性酒石酸铜溶液)的制备1)斐林试剂甲液称取69.28g的硫酸铜(CSO.5HO)溶于水中并稀释至1000ml，静置48h，用滤纸过U42滤2)斐林实际乙液分别称取酒石酸钾钠346g和氢氧化钠100g，溶于水中并稀释至1000ml，静置48h，用滤纸过滤B斐林试剂标定精确称取已在105?下干燥至恒重的分析纯葡萄糖0.8g，用蒸馏水稀释，移入250ml容量瓶并稀释至刻度，摇匀。
用移液管分别吸取斐林试剂甲，乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中(预备数份)，于电炉上煮沸，用上述葡萄糖溶液(置于25ml滴定管中)滴定至蓝色消失时，加入1%的亚甲基蓝指示剂两滴，继续用糖液滴定至蓝色刚好消失。
此操作在1min内完成。
再重复操作第二次标定过程，取两次葡萄糖溶液消耗体积的平均值(允许误差不大于0.1ml)，按下式计算斐林试剂常数(10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量)。
R=WG/V式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量，g;W——葡萄糖溶液消耗的体积，mlG——葡萄糖的质量，gV——葡萄糖定容体积，250mlC测定步骤称取糊精溶液(液化)15g，移入250ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。
用移液管分别吸取斐林试剂甲，乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中。
其余步骤同斐林试剂标定法，即以样品稀释液代替葡萄糖溶液滴定斐林试剂。
计算还原糖含量按下式计算还原糖(%)=100RV/WG式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量，g;W——葡萄糖溶液消耗的体积，ml;G——样品质量，g;V——葡萄糖定容体积，250ml。
还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]
![还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]](https://img.taocdn.com/s3/m/73e5e828cec789eb172ded630b1c59eef8c79ab9.png)
还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]实验一糖类的性质实验〔一〕糖类的颜色反响一、实验目的1、了解糖类某些颜色反响的原理。
2、学习应用糖的颜色反响鉴别糖类的方法。
二、颜色反响〔一〕α-萘酚反响1、原理糖在浓无机酸〔硫酸、盐酸〕作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者能与α-萘酚生成紫红色物质。
因为糠醛及糠醛衍生物对此反响均呈阳性，故此反响不是糖类的特异反响。
2、器材试管及试管架，滴管3、试剂莫氏试剂：5％α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g，溶于95％酒精中，总体积达100mL，贮于棕色瓶内。
用前配制。
1％葡萄糖溶液100mL1％果糖溶液100mL1％蔗糖溶液100mL1％淀粉溶液100mL0.1％糠醛溶液100mL浓硫酸500mL4、实验操作取5支试管，分别参加1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液、1％淀粉溶液、0.1％糠醛溶液各1mL。
再向5支试管中各参加2滴莫氏试剂，充分混合。
倾斜试管，小心地沿试管壁参加浓硫酸1mL，慢慢立起试管，切勿摇动。
观察记录各管颜色。
〔二〕间苯二酚反响1、原理在酸作用下，酮醣脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。
此反响是酮醣的特异反响。
醛糖在同样条件下呈色反响缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反响。
实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反响。
2、器材试管及试管架，滴管3、试剂塞氏试剂：0.05％间苯二酚－盐酸溶液1000mL，称取间苯二酚0.05g 溶于30mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀至1000mL。
1％葡萄糖溶液100mL1％果糖溶液100mL1％蔗糖溶液100mL4、实验操作取3试管，分别参加1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液各0.5mL。
再向3支试管中各参加塞氏试剂5mL，充分混合。
将试管同时放入沸水浴中，观察记录各管颜色。
(二)糖类的复原作用一、实验目的1、理解并掌握糖类的复原性质；2、学习常用的鉴定糖类复原性的方法。
斐林试剂配制,标定以及还原糖测定
斐林试剂配制，标定以及还原糖测定糊精溶液中还原糖含量测定(DE值测定)A斐林试剂(碱性酒石酸铜溶液)的制备1)斐林试剂甲液称取69.28g的硫酸铜(CSO.5HO)溶于水中并稀释至1000ml，静置48h，用滤纸过U42滤2)斐林实际乙液分别称取酒石酸钾钠346g和氢氧化钠100g，溶于水中并稀释至1000ml，静置48h，用滤纸过滤B斐林试剂标定精确称取已在105?下干燥至恒重的分析纯葡萄糖0.8g，用蒸馏水稀释，移入250ml容量瓶并稀释至刻度，摇匀。
用移液管分别吸取斐林试剂甲，乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中(预备数份)，于电炉上煮沸，用上述葡萄糖溶液(置于25ml滴定管中)滴定至蓝色消失时，加入1%的亚甲基蓝指示剂两滴，继续用糖液滴定至蓝色刚好消失。
此操作在1min内完成。
再重复操作第二次标定过程，取两次葡萄糖溶液消耗体积的平均值(允许误差不大于0.1ml)，按下式计算斐林试剂常数(10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量)。
R=WG/V式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量，g;W——葡萄糖溶液消耗的体积，mlG——葡萄糖的质量，gV——葡萄糖定容体积，250mlC测定步骤称取糊精溶液(液化)15g，移入250ml容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度。
用移液管分别吸取斐林试剂甲，乙液各5ml和蒸馏水20ml于150ml锥形瓶中。
其余步骤同斐林试剂标定法，即以样品稀释液代替葡萄糖溶液滴定斐林试剂。
计算还原糖含量按下式计算还原糖(%)=100RV/WG式中R——10ml斐林试剂相当于葡萄糖的质量，g;W——葡萄糖溶液消耗的体积，ml;G——样品质量，g;V——葡萄糖定容体积，250ml。
实验一 直接滴定法测定食品中还原糖含量讲义
实验一直接滴定法测定食品中还原糖含量一、目的与要求1、学习直接滴定法测定还原糖的原理，并掌握其测定的操作技术2、通过对实验结果的分析，了解影响测定准确性的因素二、实验原理将等量的碱性酒石酸铜甲液、乙液混合时，立即生成天蓝色的氢氧化铜沉淀，这种沉淀立即与酒石酸钾钠反应，生成深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物。
此络合物与还原糖共热时，二价铜即被还原为一价的氧化亚铜沉淀，氧化亚铜与亚铁氰化钾反应，生成可溶性化合物，达到终点时，稍微过量的还原糖将蓝色的次甲基蓝还原成无色，溶液呈淡黄色时为滴定终点。
根据还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量，以及测定样品液所消耗的体积，计算还原糖含量。
三、仪器与试剂1、仪器酸式滴定管（25mL），锥形瓶，电炉，石棉网，容量瓶250ml，移液管，洗耳球，水浴锅，玻璃珠，烧杯，玻璃棒2、试剂碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜（CuSO4·5H2O）及0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释到1000 ml。
碱性酒石酸铜乙液:取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，在加4g亚铁氰化钾，完全溶解后，再用水稀到1000 ml，储存于橡胶塞玻璃瓶内。
葡萄糖标准液：准确称取1.000g干燥至恒量的纯葡萄糖，加水溶解后加入5 ml盐酸，并以水稀释至1000 ml。
雪碧四、实验步骤1、样品处理汽水等含二氧化碳的样品，吸取100 ml试样在水浴上除去二氧化碳后，移入250mL容量瓶中，并用蒸馏水洗涤烧杯，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀后备用。
2、标定碱性酒石酸铜溶液吸取5.0 mL 碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于锥形瓶中，加水20 mL, 加玻璃珠2粒，从滴定管中加约9 mL葡萄糖或其他还原糖标准溶液，摇匀，置于电炉上加热至沸，然后保持沸腾时以每2s 1 滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去，显示淡黄色为为终点，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。
DE值检测方法的探讨
DE值检测方法的探讨孔玉萍;夏怀翔【摘要】本法是通过对比干物的不同检测方法进行分析，明确DE值定义并找出各环节最佳的DE值的检测方法，以指导生产。
【期刊名称】《当代化工研究》【年(卷),期】2017(000)003【总页数】2页(P27-28)【关键词】粉浆;液化液;还原糖;干物;DE值【作者】孔玉萍;夏怀翔【作者单位】[1]安徽宏远职业卫生技术服务有限公司,安徽233000;;[1]安徽宏远职业卫生技术服务有限公司,安徽233000【正文语种】中文【中图分类】TDE值是酒精生产中重要的检测指标之一。
DE值也称为葡萄糖值，是指糖化液中还原糖全部以葡萄糖计所占淀粉水解液中干物质的百分比。
工业上常用DE值来表示淀粉糖的含量，可以反映出淀粉的水解程度或糖化程度。
DE值越高，表示淀粉水解出的还原端越多，也即水解程度越高，其分子链越短。
还原糖含量：用费林法或碘量法测定，指100mL糖液中含还原糖质量（g），g/100mL。
干物质含量：用阿贝折光仪测定，指100g糖液中含有干物质的质量，g/100g。
在食品行业中，干物质含量是指去掉水分后的质量占原物质的含量，如蔬菜烘干后的质量占新鲜蔬菜的含量。
固形物含量是指固液混合物中固体物质的含量，如水果罐头中块状水果就是固形物，它占整个罐头的质量比就是固形物含量。
如果将水果罐头中的水果烘干，变成果干（包含糖分、纤维、淀粉等物质），这个果干就是干物质了，它占罐头的质量比就是干物质含量了。
二者之间的区别就在于，干物质含量一定不包含水分，而固形物含量可能包含水分。
在酒精生产过程中，DE值是还原糖（以葡萄糖计）占干物质的百分比，这里的干物质实际上所指的是可溶性固形物，通常是用折光法进行检测得到的。
而通常用烘箱法所检测得到的干物质实际上指的是总固形物，包括可溶性和不可溶性固形物。
在目前的DE值检测过程中，还原糖的检测方法是统一的，采用费林氏法，不同的主要是针对各阶段干物（可溶性固形物）的检测方法的选择。
费林试剂法测定DE值原理解析
费林试剂法测定DE值原理解析费林试剂法测定DE值原理解析牛司锋，山东公司品管部糖类包括多糖、双糖、单糖，其中单糖和某些双糖具有游离的羰基，称为还原糖，多糖和淀粉没有还原性。
费林试剂法测量DE值的原理是还原糖可以将费林试剂中的Cu2+还原为Cu1+，反应终点可由次甲基蓝指示，根据一定量的费林试剂完全还原所需的还原糖量，可计算样品中还原糖的含量。
一、实验试剂1．费林试剂甲液：称取69.4g硫酸铜（CuSO4·5H2O）溶解并定容至1000mL容量瓶；2．费林试剂乙液：称取350g酒石酸钾钠与100g氢氧化钠溶解并定容至1000mL容量瓶；3．1%次甲基蓝溶液：称取1g次甲基蓝溶解于100ml蒸馏水中，于棕色瓶中储存；4．标准葡萄糖溶液：准确称取0.5g无水葡萄糖（分析纯，预先于105℃烘箱中烘2小时左右至恒重），加水溶解，定容至250ml。
此为0.2%的标准葡萄糖液。
二、实验步骤及相关原理1．费林试剂的标定预备实验：吸取费林试剂甲、乙液各5ml（将甲液加入乙液中），置于150ml三角瓶中，加入20ml蒸馏水，振荡摇匀，从滴定管中加入0.2%标准葡萄糖液若干毫升，于电炉上加热并在约2min时达到微沸状态，滴加2~3滴1%次甲基蓝指示剂，以2s/滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液至蓝色消失、有红棕色沉淀、溶液清亮为终点止。
此滴定操作在1min内完成，记录耗用的0.2%标准葡萄糖溶液体积为V0 mL。
标定实验：吸取费林试剂甲、乙液各5ml，置于250ml三角瓶中，加入20ml蒸馏水，振荡摇匀，从滴定管中加入0.2%标准葡萄糖液（V0-1）mL，于电炉上加热并在约2min时达到微沸状态，滴加2~3滴1%次甲基蓝指示剂，以2s/滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液至蓝色消失为止。
记录耗用的0.2%标准葡萄糖溶液体积为V1 mL。
根据结果计算费林试剂的RP值。
2．样品中还原糖的测定预备实验：吸取费林试剂甲、乙液各5ml，置于250ml三角瓶中，加入20ml蒸馏水，振荡摇匀，从滴定管中加入样品溶液若干毫升，于电炉上加热并在约2min时达到微沸状态，滴加2~3滴1%次甲基蓝指示剂，以2s/滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液至蓝色消失为止，记录耗用的样品溶液体积为V2 mL。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
6.2.2 DE值
6.2.2.1 试剂
a) 次甲基蓝指示液10g/L：称取1.0 g次甲基蓝(C16H18ClN3S·2H2O)，溶解于水并稀释至100ml；
b) 葡萄糖标准溶液2g/L：称取于100±2℃烘干至恒重的无
水葡萄糖0.5000g，称准至0.0001g,加水溶解，洗入250 ml容量
瓶中并稀释至刻度，摇匀，备用。
C)费林溶液：按GB603配制。
标定：预滴定时，先吸取费林试剂Ⅱ，再吸取费林试剂Ⅰ各5.0ml于150ml三角瓶中，加水20ml，加入玻璃珠3粒，用50ml 滴定管预先加入24ml葡萄糖标准溶液(b)，摇匀，置于铺有石棉网的电炉上加热，控制瓶中液体在120s±15s内沸腾，并保持微沸，加2滴次甲基蓝指示液(a)，继续以葡萄糖标准溶液滴定，
直至蓝色刚好消失为其终点，整个滴定操作应在3min内完成。
正式滴定时，预加入比上述滴定消耗的葡萄糖标准溶液少1ml，作平行试验，记录消耗葡萄糖标准溶液的总体积。
取其算术平均值。
RP=m1×v1/250
式中：RP——斐林溶液Ⅱ、Ⅰ各5ml相当于葡萄糖的质量，g；
m1——称取基准无水葡萄糖的量，g
v1 ——消耗葡萄糖标准溶液的总体积，mL
250——配制葡萄糖标准溶液的总体积，mL。
6.2.2.2 测定
a) 样液的制备
称取一定量的样品，称准至0.0001g（取样量以每100ml样液中含有还原糖量125-200mg为宜），置于50ml小烧杯中，加热水溶解后全部移入250ml容量瓶中，冷却至室温，加水稀释至刻度，摇匀，备用。
b) 预滴定
按标定费林溶液操作，先吸取费林试剂Ⅱ，再吸取费林试剂Ⅰ各5.0ml于150ml三角瓶中，加水20ml，加入玻璃珠3粒，用50ml滴定管预先加入一定量的样液(a)，将锥形瓶置于铺有石棉网的电炉上加热至沸，控制在120s±15s内沸腾，并保持微沸，以样液继续滴定（滴加样液的速度约为每两秒1滴），至溶液蓝色即将消失时，加入2滴次甲基蓝指示液，再继续滴加样液直至蓝色刚好消失为其终点，记录消耗样液的总体积。
C) 正式滴定
按上述操作吸取费林试剂Ⅱ和Ⅰ各5.0ml于150ml三角瓶中，可加入玻璃珠2粒，用滴定管加入比预测时耗用量少1ml的样液于锥形瓶内，加热，使溶液在120s±15s内沸腾，并保持沸腾状态，与预滴定同样操作，继续以样液滴定至终点。
整个滴定操作必须在3min内完成，记录消耗样液的总体积。
6.2.2.3 计算
RP
DE值＝×100
m2×V2×(1－X1)
250
式中：DE值------------样品葡萄糖当量值(样品中还原糖占干物质的百分数)%；
RP--------------费林溶液Ⅱ、Ⅰ各5ml相当于还原糖的质量，g；
m2 --------------取样量，g；
250----------配制样液的总体积，ml；
V2 -------------滴定时，消耗样液的体积，ml；
X1----------样品的水分，％。