细胞支原体污染的图片、危害、表现和怎么办
细胞培养中支原体污染
细胞培养中的支原体污染的预防及处理Mycoplasma国内主要有三种译名，医学文献译为“支原体”（分枝原体，枝原体，类菌质体），动物医学文献译为“霉形体”或“支原体”，台湾、香港则译为微浆菌。
支原体是目前已知一类能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞型微生物。
自然界分布广泛，种类多，有80余种，分为两个属：一为支原体属（Mycoplasma），有几十个种；另一为脲原体属（Ureaplasma），仅有一种。
与人类感染有关的主要是肺炎支原体和解脲脲原体。
支原体无细胞壁，多呈不规则球状、长丝状，可分枝，营寄生共生或腐生。
一般侵害对象为动植物，可造成多种疾病。
细胞培养（特别是传代细胞）被支原体污染是个世界性问题。
国内外研究表明，95%以上是以下四种支原体：口腔支原体（M.orale）、精氨酸支原体（M.arginini）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）和菜氏无胆甾原体（idlawii），为牛源性。
国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。
支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染（某些支原体在人体是正常菌群）、培养基的污染、被污染细胞造成的交叉污染、实验器材的污染、制备细胞的原始组织或器官的污染，等等。
体外生长的细胞对微生物及一些有害有毒物质没有抵抗能力，因此培养基应达到无化学物质污染、无微生物污染（如细菌、真菌、支原体、病毒等）、无其他对细胞产生损伤作用的生物活性物质污染（如抗体、补体）。
对于天然培养基，污染主要来源于取材过程及生物材料本身，应当严格选材，严格操作。
对于合成培养基，污染主要来源于配制过程，配制所用的水，器皿应十分洁净，配制后应严格过滤除菌。
由于体外培养细胞自身没有抵抗污染的能力，而且培养基中的抗生素抗污染能力有限，因而培养细胞一旦发生污染多数将无法挽回。
支原体污染后，因为它们不会使细胞死亡可以与细胞长期共存，培养基一般不发生浑浊，细胞无明显变化，外观上给人以正常感觉，实则细胞手到多方面潜在影响，如引起细胞变形，影响DNA合成，抑制细胞生长等。
细胞支原体污染怎么办？该怎么处理？
甲：细胞里突然出现小黑点，问君能有几多愁?乙：珍贵的细胞萎靡不振，扔了重买?相顾无言，惟有泪千行。
丙：细胞转染效率极低，实验结果遥遥无期，我的课题前功尽弃!但见泪恨湿，不知心恨谁!细胞培养中，最怕的就是生物污染，支原体污染就是其中的一种。
支原体这种微小的微生物，是细胞培养中令人头疼的大问题。
支原体结构也比较简单，多数呈球形，没有细胞壁，只有三层结构的细胞膜，故具有较大的可变性。
支原体污染可能来自培养基、血清或实验操作者，会影响细胞生长率、细胞形态、基因表达、细胞代谢和细胞活力。
支原体感染不易察觉，因此对培养细胞定期进行支原体检测就非常重要。
污染实验室培养细胞的支原体主要有八种，但还没有哪种检测方法能够单枪匹马把这八种支原体都检测出来。
支原体非常顽强，通常用于细胞培养的绝大多数抗生素都对其无效。
例如青霉素主要作用于细菌细胞壁，但支原体没有细胞壁因此就不受影响。
无懈可击的细胞培养技术始终是预防支原体感染的最佳方式，另外及时找出受到支原体感染的培养物也很重要，这样才能在感染扩散前快速采取有效措施。
支原体污染在细胞培养中实际上是比较常见的，可达30%甚至更高。
支原体污染时细胞表现为长得不好，也不死亡，同时，培养基又是清亮的，时间长达一周也没有什么变化，这时基本上可以判断出是支原体污染了。
定期检测支原体感染会使培养细胞慢慢枯萎，因此对培养细胞定期进行支原体检测非常重要。
一般来说每1至3个月就应该进行一次支原体检测。
将定期支原体检测常规化坚持下去，是细胞培养实验室应对支原体感染的关键。
预防支原体污染的建议：细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。
支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有：抗生素处理抗血清处理抗生素加抗血清和补体联合处理支原体最突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如内酰胺类、万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。
支原体感染危害及预防措施
支原体感染危害及预防措施支原体感染是一种常见的细菌感染疾病，可引起多种疾病，包括肺炎、气管支气管炎和生殖道感染等。
具有很高的传染性，容易通过空气飞沫和密切接触传播。
本文将介绍支原体感染的危害及预防措施。
一、支原体感染的危害支原体感染的危害主要体现在以下几个方面：1. 呼吸道感染：支原体感染可引起呼吸道疾病，如肺炎、支气管炎等。
在感染后，患者常常出现咳嗽、咳痰、咽痛等症状，严重时可导致呼吸困难，严重影响日常生活。
2. 生殖道感染：支原体感染还可引起生殖道疾病，如尿道炎、宫颈炎等。
女性患者可能会出现白带异常增多、异味以及阴道瘙痒等症状，严重时可引起盆腔炎症。
3. 眼部感染：支原体感染还可导致结膜炎，患者可能会出现眼红、眼痒、流泪等症状，严重时可影响视力。
4. 关节炎：一些支原体感染还可引起关节炎，患者可能会出现关节红、肿、疼痛等症状，影响关节活动能力。
二、支原体感染的预防措施对于支原体感染，我们可以采取以下措施进行预防：1. 加强个人卫生：保持良好的个人卫生习惯，包括勤洗手、勤换洗衣物、保持室内空气流通等，有助于减少病菌的传播。
2. 避免密切接触：尽量避免与已经感染支原体的人密切接触，特别是在其症状明显时。
避免使用他人的个人物品，并注意避免与呼吸道有感染的人分享餐具和杯子。
3. 良好的饮食习惯：保持良好的饮食习惯，注意均衡饮食，增加对抵抗力的养护。
多食用富含维生素和矿物质的新鲜蔬菜水果，同时远离辛辣刺激性食物，有助于提高免疫力。
4. 健康生活方式：保持良好的生活习惯，适度运动，保证充足的睡眠，提高身体素质和免疫力，降低感染的风险。
5. 定期健康检查：定期进行健康体检，如定期进行妇科、泌尿科等相关检查，早期发现和治疗感染，有助于避免并发症的发展。
总结起来，支原体感染是一种常见的细菌感染疾病，具有较高的传染性。
为了预防该疾病的发生，我们应该加强个人卫生意识，避免与感染者密切接触，保持良好的饮食习惯和生活方式，定期进行健康体检等。
细胞培养中的支原体污染
生物特性：
无细胞壁，形态呈高度多形性，可为圆形、丝状或梨形，其直径仅有 0.13～0.18μm，是目前发现的最小细胞，并且变形能力大，故能通过滤菌 器。 革兰氏染色不易着色或呈阴性。 胞膜中含有胆固醇或其他甾醇，这种特性使支原体膜更具柔顺性，对于物 理因素，如压力、渗透压、脱水的抵抗力很大。 多数支原体适合在偏碱性条件下生存（pH值7.6~8.0），对酸耐受性差。
原体是没有作用的。
支原体污染应对策略
新一代支原体抗生素M-Plasmocin 其含有两种杀菌成分,一种成分通过干扰核糖体的翻译功能而使蛋白合 成受阻。另一种成分则通过干扰复制叉的形成而阻止DNA的复制。 可以强效对抗支原体及相关的无胞前对抗支原体最理想的 方法。
支原体污染来源
工作环境的污染
操作者本身的污染（包括操作者操作不当以及某些支原 体在人体是正常菌群） 实验器材的污染 培养基等试剂的污染
被污染细胞造成的交叉污染
制备细胞的原始组织或器官的污染
支原体污染的类型
口腔支原体(M.orale) 精氨酸支原体(M.arginini) 猪鼻支原体(M. hyorhinis) 发酵支原体(M.fermentans)
梨支原体(M. pirum)
莱氏无胆甾原体(idlawi）
支原体污染有时易被忽视！
1.培养液可不发生混浊
2.细胞病理变化轻微或不显著
3.细微变化也可由于传代，换液而缓解。 4.个别严重者，可致细胞增殖缓慢，甚至从 培养器皿脱落
但支原体污染对细胞的影响却是极大的！！！
1、影响细胞的生长状态及形态 支原体可使培液中支持细胞生长的营养物质含量减少，造成细胞生长缓慢甚至 停止；另外还会导致细胞微管解聚，引起细胞一系列病变，表现为细胞收缩、 贴壁细胞脱落、裂解等。
细胞污染 图片
白色念珠菌污染革兰氏染色阳性中间长梭型的是正在分裂的念珠菌生命经纬网友布兰卡的观点为：我个人感觉，操作之前酒精擦手消毒非常重要，因为环境再差，无菌台里一般是没问题的，但是，污染往往在这里操作时发生，因此，个人手的卫生非常重要，白色念珠菌是人体霉菌感染的常见霉菌种类（尽管我们有时感觉不到，但它就在你我的身边甚至身上存在着），我认为绝大多数污染是我们自己带进去的，因此，如果环境不是太差，那就找找自身的原因。
生命经纬网友dsh1205的观点为：灭菌水,是否有必要我也不太肯定。
其实这一点是很容易办到的，有总比没有好。
多注意一些可能的因素，对细胞总是有力的。
被污染总是很麻烦的，细胞长得不好不说，还影响实验进程。
我认为有两个环节很重要，操作台及温相。
我们操作前、后都要紫外杀菌30min，而且保持操作台通风设施正常。
我们的温相好像从来没有用酒精擦过，更没用紫外照射。
我们开温相时，先清洁剂洗手，在酒精擦手，范围与手术洗手差不多，时间一般在几秒内。
另外，我自己将瓶放回相中时，还对瓶体进行酒精擦洗。
当然还有给细胞换液也要注意了，吸管尽量不要深入瓶内，要深入瓶内的最好先在酒精灯上烧一烧等等。
HepG2细胞，荧光染色检测支原体支原体污染检测在上面的支原体检测图片里没大片的针状点，但不敢肯定个别细胞核外的小点是不是支原体，可是要有也不应该就这么几个啊？（细胞一共培养了40小时）生命经纬网友bianmin8024认为：这么大面积的污染，你可以看看是不是做这批细胞时操作上出了问题，要不然就是培养基的问题。
其实我觉得在每次试验前，最好简略写一下操作步骤做到心中有数。
这样可以避免实验中的忙乱。
既然现在已经污染了，就全部更换你的器皿。
培养箱的水没有必要用无菌水，但最起码要是蒸馏水。
以上图片细胞系念珠菌污染处理办法：扔掉，善后办法，养成良好的无菌操作的习惯，拿70％酒精擦手，擦超净台，擦培养瓶，擦培养基瓶，各种瓶子的口多拿火焰烧灼。
支原体感染的危害
支原体感染的危害支原体是一类寄生病原体，主要通过呼吸道传播，引起支原体感染。
该病原体可以感染人类的多个器官和系统，对人体健康产生严重的危害。
本文将详细介绍支原体感染的危害，并提出预防和治疗建议。
一、呼吸系统危害支原体感染最常见的危害之一是对人体呼吸系统的侵害。
感染可引起呼吸道炎症，包括喉炎、气管炎、支气管炎和肺炎等。
患者常常出现咳嗽、咳痰、呼吸困难等症状。
严重的支原体感染可导致肺部感染并引发肺炎，对老年人、婴儿和免疫功能较弱的患者尤为危险。
二、生殖系统危害除了呼吸系统，支原体感染也可危害人体的生殖系统。
在女性中，支原体感染可以引起宫颈炎、子宫内膜炎和盆腔炎等疾病。
这些炎症可能导致不孕、流产和早产等问题，对生育能力造成严重威胁。
而在男性中，支原体感染与前列腺炎和尿道炎等疾病相关，也会对生育能力造成不利影响。
三、关节和心血管系统危害支原体感染还可对关节和心血管系统造成危害。
一些研究发现，支原体感染与风湿性关节炎、类风湿性关节炎和心内膜炎等疾病相关。
这些病症会导致关节疼痛、关节肿胀和心脏功能异常等症状，给患者的生活和健康带来极大困扰。
四、眼部感染危害支原体感染亦可危害人体的眼部。
结膜炎是常见的眼部疾病，由支原体引起的结膜炎常伴有眼结膜充血、眼痛、畏光等症状。
此外，支原体感染还与角膜炎和泪鼻管炎等病症相关。
五、其他系统危害除了以上列举的系统，支原体感染还可能对消化系统、中枢神经系统和循环系统等带来一定危害。
消化系统可能出现腹痛、腹泻等问题，中枢神经系统可能表现为头痛、乏力等症状，而循环系统可能出现心悸、胸痛等异常。
预防和治疗建议针对支原体感染的危害，以下是一些预防和治疗建议：1. 提高个人卫生意识，保持良好的生活习惯，勤洗手、多通风，避免接触患者的呼吸道分泌物。
2. 加强呼吸道感染的防范，避免密集场所和人群，尽量佩戴口罩。
3. 在性生活中使用安全套，并与长期性伴侣进行性病筛查。
4. 如出现上述危害的症状，及时就医并告知医生病史，接受相关检查和治疗。
细胞污染及处理方法
（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）
若细胞状态极差，尽早处理掉细胞，并找出污染源，对培养箱，生物安全柜，细胞房进行消毒处理。
2、真菌污染
培养基：有的培养液清亮，不变色；
成像：
处理方法：
在操作的过程中，一定要小心操作动作，轻柔缓慢，切忌大动作鲁莽。防止细胞脱落。这个拯救细胞还是主要针对无路可退的时候。污染还是重在预防！！！！！
细胞房
培养箱每两周更换一次水（高压过的双蒸水），条件允许的每两周可以用酒精擦洗一遍培养箱；
地面每两到三天用新洁尔灭拖洗一遍，桌面等同样用新洁尔灭擦洗一遍；
细胞污染及处理方法总结
洁净区，并不是没有细菌，而是细菌的数量非常少，国家标准100级的洁净标准是浮游菌数不得超过5个每立方米，沉降菌数不得超过1个每培养皿.而国外的标准比我国的还要高一点，要求的数量更少。
所以在我们的洁净操作台里，并不是真正一个细菌都没有的，所以在操作的时候还是要尽量利索迅速地完成操作。尽量减少进入培养体系细菌的数量。
霉菌污染多来自空气,所以做实验时说话聊天,或瓶口敞开时间太长,还有培养箱开关频繁是主要原因,还是多找自身原因.
4、支原体污染
支原体污染后，不会立即使细胞死亡，可以与细胞长期共存，培养基一般不发生浑浊，细胞无明显变化，外观上给人以正常感觉，实则细胞收到多方面潜在影响，如引起细胞变形，影响DNA合成，抑Байду номын сангаас细胞生长等。
9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。
细胞污染图片解析
白色念珠菌污染革兰氏染色阳性中间长梭型的是正在分裂的念珠菌生命经纬网友布兰卡的观点为：我个人感觉，操作之前酒精擦手消毒非常重要，因为环境再差，无菌台里一般是没问题的，但是，污染往往在这里操作时发生，因此，个人手的卫生非常重要，白色念珠菌是人体霉菌感染的常见霉菌种类（尽管我们有时感觉不到，但它就在你我的身边甚至身上存在着），我认为绝大多数污染是我们自己带进去的，因此，如果环境不是太差，那就找找自身的原因。
生命经纬网友dsh1205的观点为：灭菌水,是否有必要我也不太肯定。
其实这一点是很容易办到的，有总比没有好。
多注意一些可能的因素，对细胞总是有力的。
被污染总是很麻烦的，细胞长得不好不说，还影响实验进程。
我认为有两个环节很重要，操作台及温相。
我们操作前、后都要紫外杀菌30min，而且保持操作台通风设施正常。
我们的温相好像从来没有用酒精擦过，更没用紫外照射。
我们开温相时，先清洁剂洗手，在酒精擦手，范围与手术洗手差不多，时间一般在几秒内。
另外，我自己将瓶放回相中时，还对瓶体进行酒精擦洗。
当然还有给细胞换液也要注意了，吸管尽量不要深入瓶内，要深入瓶内的最好先在酒精灯上烧一烧等等。
HepG2细胞，荧光染色检测支原体支原体污染检测在上面的支原体检测图片里没大片的针状点，但不敢肯定个别细胞核外的小点是不是支原体，可是要有也不应该就这么几个啊？（细胞一共培养了40小时）生命经纬网友bianmin8024认为：这么大面积的污染，你可以看看是不是做这批细胞时操作上出了问题，要不然就是培养基的问题。
其实我觉得在每次试验前，最好简略写一下操作步骤做到心中有数。
这样可以避免实验中的忙乱。
既然现在已经污染了，就全部更换你的器皿。
培养箱的水没有必要用无菌水，但最起码要是蒸馏水。
以上图片细胞系念珠菌污染处理办法：扔掉，善后办法，养成良好的无菌操作的习惯，拿70％酒精擦手，擦超净台，擦培养瓶，擦培养基瓶，各种瓶子的口多拿火焰烧灼。
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细胞支原体污染的图片、危害、表现和怎么办（2016年10月16日）一、细胞支原体污染的图片我们首先来认识一下，细胞支原体污染与非污染的图片有什么区别。
如上图所示，左侧为未经支原体清除试剂处理的人Hela细胞,经DAPI染色后，除了细胞核为蓝色外，细胞质也有大量的絮状核酸物质被染成蓝色，这些处于细胞质的核酸物质就是支原体DNA，说明细胞支原体污染非常严重。
而右侧为经过本公司的支原体清除试剂2处理7天的Hela细胞，经DAPI 染色后，除了细胞核为蓝色外，细胞质没有任何絮状核酸物质被染成蓝色，说明支原体已经被清除。
（版权声明：上图来自上海易色医疗科技有限公司网站。
）二、细胞支原体污染的危害和表现细胞支原体污染的危害（1）培养的细胞被支原体污染后，几乎可以改变细胞的所有功能，其可以导致细胞染色体的异常和损伤，改变细胞的代谢、生长、形状、附着，影响病毒的扩增能力和产量等等。
例如，Miller CJ等人通过Microarray的研究表明：支原体污染严重改变被污染细胞的基因表达谱 [1, 2]，支原体污染后与无污染的同一细胞系相比，表达差异达2倍以上的基因就有200多个！！！（详细数据请见参考文献1）。
Edward Burnett 和 Liz Penn认为：被支原体污染的细胞系已经不是原来的细胞系，而是另外一个细胞系了 [3]！此外，严重的支原体污染将彻底摧毁一株细胞系。
从2013年开始，《Nature》期刊已正式要求投稿的文章，如涉及细胞培养都要进行支原体检测。
相信会有越来越多的高水平期刊将做出同样的支原体检测要求。
总之，在细胞系上进行生物医学方面的科学研究，如果不能保证所用的细胞系无支原体污染（Mycoplasma-free），则所得出的结论是极端不可靠甚至是完全错误的！可以想象：全球范围内，每年因支原体污染导致白白浪费的科研经费的数量是多么的巨大，有人估计至少高达数十亿美金！细胞支原体污染的危害（2）1. 细胞生物学：支原体污染将直接导致最常用的MTT细胞毒性实验结果的严重错误！●结果：由于支原体对MTT的额外还原作用，对阿霉素（Doxorubicin, 一种抗肿瘤药物）的抗性，支原体污染和非污染的细胞二者相差15倍！（Due to an additional reduction of tetrazolium by mycoplasmas, contaminated cells appeared up to 15 fold resistant to doxorubicin.）●参考文献：Falsification of tetrazolium dye (MTT) based cytotoxicity assayresults due to mycoplasma contamination of cell cultures. Anticancer Res. 1999 Mar-Apr; 19(2A):1245-8.2. 免疫学：支原体污染本身将可以直接诱导树突状细胞的成熟！这对于目前国内外普遍开展的人体免疫细胞的肿瘤治疗将是灾难性的。
●结果：（1）The capacity of these cell lines to induce DC maturation was due totheir contamination by mycoplasma. Our results reveal that DC are able to sense mycoplasma infection and mature as they do in response to most viruses and bacteria.（2）Further investigation demonstrated that the changes in DC phenotype and functions were due to the presence of mycoplasmas in these two cell lines;eradication of mycoplasmas completely abolished the observed effects, and importantly, pure mycoplasmas in the absence of tumor cell supernatants were able to produce the same effects.●参考文献：（1）Dendritic cell maturation is induced by mycoplasma infection butnot by necrotic cells. Eur. J. Immunol. 2000.30: 705–708。
（2）Mycoplasma-mediated alterations of in vitro generation and functions of human dendritic cells. J Biomed Sci. 2005;12(1):31-46.3. 神经生物学：支原体污染本身可以直接降解淀粉样多肽Amyloid-beta (Abeta)！●结果：These data show that mycoplasmas degrade Abeta and thus may represent asignificant source of variability when comparing extracellular Abeta levels in different cell lines.●参考文献：（1）Amyloid-beta peptide degradation in cell cultures by mycoplasmacontaminants. BMC Res Notes. 2008 Jun 30;1:38.（2）Neuroprotective effects of Mycoplasma hyorhinis against amyloid-β-peptide toxicity in SH-SY5Y human neuroblastoma cells are mediated by calpastatinupregulation in the mycoplasma-infected cells. Neurochem Int. 2011 Mar;58(4):497-503.4. 生物化学：支原体污染可以直接影响L-arginine的代谢！●结果：This demonstrates that infection with M. hyorhinis leads to different effectson gene regulation of the murine and human iNOS gene. Our study underlines the importance of routine checking of cell cultures for mycoplasma contamination, particularly in studies on NO-mediated effects or inflammatory processes.●参考文献: Impact of Mycoplasma hyorhinis infection on L-arginine metabolism:differential regulation of the human and murine iNOS gene. Biol Chem. 2005 Oct;386(10):1055-63.5. 病理学：支原体污染可以直接刺激前列腺素E2（Prostaglandin E2）的产生！●结果：Mycoplasma fermentans (MF) also stimulated PGE(2) production. Theco-infection of mycoplasma and Chlamydia resulted in an additive effect in the production of PGE(2). Thus it is important to use host cells and Chlamydia free of mycoplasma contamination for the analysis of Chlamydia-induced prostaglandin production.●参考文献:Production of prostaglandin E2 in monocytes stimulated in vitro byChlamydia trachomatis, Chlamydophilapneumoniae, and Mycoplasma fermentans. MicrobPathog. 2004 Sep;37(3):155-61.三、细胞支原体污染的比例据Corning公司报道，世界各国的细胞系都有不同程度的支原体污染,可以说支原体污染是细胞培养领域的一个世界性问题 [4]。
表1是美国ATCC、FDA、以及其他两家细胞检测机构的支原体污染统计数据。
表2是世界各国的细胞系污染比例。
目前，世界各国细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。
表1，细胞支原体污染统计结果，数据来自参考文献 [4]参考文献：1. Miller CJ, Kassem HS, Pepper SD, Hey Y, Ward TH, Margison GP.Mycoplasma infection significantly alters microarray gene expression profiles.Biotechniques. 2003 Oct;35(4):812-4.2. Aldecoa-Otalora E, Langdon W, Cunningham P, Arno MJ. Unexpected presenceof mycoplasma probes on human microarrays. Biotechniques. 2009 Dec;47(6):1013-5.3. Edward Burnett and Liz Penn, European Collection of Cell Culture(ECACC®). Mycoplasma Detection and Elimination. Don Finley, Market Segment Manager, Sigma® Life Science. Biofiles, Vol. 8, No. 184. John Ryan (2008). "Understanding and Managing Cell Culture Contamination".Corning Incorporated. p. 24.四、细胞支原体污染怎么处理发现培养的细胞被支原体污染，将污染的细胞高压蒸汽灭菌，然后丢弃是最好的选择，这样可以避免细胞的交叉污染。