肾活检病理组织染色
肾组织masson染色实验步骤
肾组织masson染色实验步骤一、实验前准备1.准备工作台和必要的实验用具。
2.准备好嵌入的组织切片。
3.将切片浸泡在脱水、透明化、蜡包埋、切片、脱蜡等溶液中进行处理。
二、固定和脱水1.将组织切片置于4的多聚甲醛中，固定时间约为24小时。
2.取出固定后的组织切片，先放入70的乙醇中脱水，随后放入95的乙醇中进行脱水处理。
三、透明化1.将脱水后的组织切片放入甲醇中透明化。
2.从甲醇转移到二甲苯中进行透明化处理。
四、蜡包埋1.将透明化后的组织切片置于液态石蜡中，进行蜡包埋处理。
2.在包埋前，确保石蜡的温度适中。
五、切片1.将包埋后的组织切片切割成4-6微米的薄切片，准备进行染色。
2.使用切片机进行切割，注意切片的厚度要一致。
六、脱蜡1.将薄切片放入脱蜡热盒中进行脱蜡处理。
2.确保脱蜡的时间和温度控制得当，以保证切片中的蜡全部被脱除。
七、染色1.准备好Masson染色试剂盒，按照说明书中的配方将试剂配置好。
2.将脱蜡后的切片浸泡在甲醇中5分钟，以去除残留的蜡质。
3.将切片放入伊红染液中浸泡5分钟，随后用蒸馏水洗净。
4.将切片放入酸性橙G染液中浸泡5分钟，随后用蒸馏水洗净。
5.将切片放入甲苯中进行脱水处理，然后覆盖玻片，施加封片剂，完成Masson染色。
八、镜检1.将染好色的切片放置在显微镜下进行观察。
2.检查切片中的细胞核、细胞质、胶原纤维等成分的染色情况。
九、结果分析1.根据观察结果，分析肾组织中的胶原纤维、细胞核、细胞质的染色情况。
2.对比正常组织和异常组织的染色情况，进行结果分析和总结。
十、实验总结1.总结本次实验的操作步骤和所得结果。
2.对实验中可能存在的问题和改进方法进行总结和反思。
以上就是对肾组织Masson染色实验步骤的详细介绍，希望可以帮助到需要进行此项实验的科研工作者。
对于肾组织Masson染色实验步骤的详细介绍，实验中的每一步都至关重要，它们共同构成了一项完整的实验流程。
接下来，我们将对每一步进行更详细的讲解，以便读者更好地理解和掌握实验的操作技巧和要点。
微波在肾活检组织染色中的应用
微波在肾活检组织染色中的应用
肾活检组织病理(光镜)检查在肾活检病理诊断中具有重要价值，通过特殊染色可以显现标本中特殊的物质如基底膜、免疫复合物等，然而，常规的特殊染色制作比较费时，尤其是过碘酸六胺银（Periodic Acid-Silver Methenamine，PASM）染色，控制不好往往失败。
我们将微波辐射技术应用于肾活检组织的过碘酸Schiff反应（Periodic Acid-Schiff Reaction，PAS）及PASM染色中，证明具有快速省时，染色效果好，不易脱片等优点，现介绍如下：
1 材料和方法
1．1 材料肾组织(肾穿刺获得)，58℃纯净石蜡；松下NN-5208型微波炉（输出功率600W）。
1．2 试剂
1．2．1 Schiff液：同常规Schiff液配制。
1．2．2 环六亚甲基四胺-硝酸银液(贮备液)：
5%硝酸银20.0ml
3%环六亚甲基四胺液400.0ml
环六亚甲基四胺-硝酸银液(工作液)：
环六亚甲基四胺-硝酸银液(贮备液)45.0ml，5%硼砂液5.0ml 1．2．3 混合红染液：
变色酸2R（chicmolocps 2R）0.6g
亮绿SF 0.3g
蒸馏水100ml
磷钨酸0.8g
冰醋酸 1.0ml
1%酸性品红少许(需染片后确定)
1．3 方法
1．3．1 制片肾穿刺组织经升汞-苦味酸混合固定液固定后，常规酒精脱水、氯仿透明、石蜡浸透、包埋，切片厚2μm。
masson 染色肾组织的描述
尊敬的客户：在本文中，我将为您撰写一篇关于“masson 染色肾组织的描述”的文章。
我将以从简到繁、由浅入深的方式来探讨这一主题，以便您能更深入地理解。
1. masson 染色肾组织的描述让我们来了解一下什么是masson染色以及它在肾组织中的应用。
masson染色是一种组织染色方法，主要用于分辨胶原纤维和肌纤维，并且可用于观察肾小球间质的纤维化情况。
在肾脏疾病的诊断中，masson染色可以帮助医生准确评估患者的肾脏病变程度，对疾病的诊断和治疗具有重要的指导意义。
2. masson 染色肾组织的应用在肾脏病变的研究中，masson染色被广泛应用于观察肾小球间质的纤维化程度。
肾小球间质的纤维化是很多肾脏疾病的共同表现，包括慢性肾炎、糖尿病肾病等。
通过masson染色，可以清晰地观察到肾小球周围的胶原纤维沉积情况，以及肾小管间质的纤维化情况，从而评估肾脏病变的程度和类型。
3. masson 染色肾组织的意义根据masson染色结果，医生可以更准确地判断患者肾脏病变的类型和程度，为后续的治疗方案提供重要参考。
通过观察纤维化程度，可以及时采取有效的治疗措施，延缓疾病的进展，保护肾功能。
masson 染色在肾脏疾病的诊断和治疗中具有非常重要的意义。
4. 个人观点和理解在我看来，masson染色对于肾脏疾病的诊断和治疗具有重要的意义。
通过对肾组织进行染色观察，可以从纤维化的角度全面评估病变情况，为医生制定个性化的治疗方案提供重要依据。
masson染色的应用也为科学研究提供了重要的技术支持，有助于深入了解肾脏疾病的发病机制和进展规律。
总结回顾通过本文的介绍和解释，相信您已经对masson染色肾组织的描述有了更深入的了解。
这种染色方法在肾脏疾病的诊断和治疗中扮演着重要角色，帮助医生更准确地评估病变情况，制定有效的治疗方案。
也为科学研究提供重要的技术支持，推动肾脏疾病的深入研究和治疗进展。
希望本文能够帮助您更全面、深刻和灵活地理解masson染色肾组织的描述。
肾活检的病理方法和注意事项
肾活检的病理方法和注意事项北京大学医学部病理学系 北京大学人民医院肾内科 邹万忠 董葆肾活检病理诊断有赖于多种方法的综合分析，不同的病理诊断结合临床有助于肾脏疾病的诊断。
肾脏活体组织检查基本属于组织病理学的范畴，但有其独特的特点。
一、免疫病理学、光学显微镜和透射电子显微镜检查并举很多肾脏疾病是由于变态反应引起的， 因此， 必须应用免疫病理学方法区分肾小球肾炎还是非免疫介导的肾病。
常用的免疫病理学方法有免疫荧光法和免疫组织化学法。
如一位肾病综合征患者的肾活检病理显示膜性肾病，肾组织中查到免疫复合物中的抗原为乙型肝炎病毒抗原，则可确诊为乙肝病毒相关性肾炎（图1）。
图1，乙肝病毒相关性肾炎，乙型肝炎病毒核心抗原沉积于肾小球基底膜和系膜区（免疫组化图2，HE染色，狼疮性肾炎，各种细胞清晰可见（HE×400）图3，PAS染色，系膜增生性肾小球肾炎，肾小球基底膜、肾小管基底膜和系膜间质呈粉红色（PAS×400）2008.05.10肾脏泌尿专业讨论版gub70725数字签名者：gub70725DN：cn=gub70725, o=www.dxy.cn, ou, email=gub70725@yahoo., c=<无>日期：2008.05.10 18:56:22 +08'00'×200）光学显微镜检查是肾活检病理检查的基本方法，但要求切片要薄，应薄于3μ，染色方法应包括HE、PAS、PASM和Masson等多种染色，以便观察肾脏的细胞成份、基底膜的状态和特殊的蛋白沉积（图2－5）。
图4，PASM染色，膜性肾病，肾小球基底膜、肾小管基底膜和系膜间质呈黑色，对基底膜的显示尤为精细（PAS×400）图5，Masson染色，膜性肾病，肾小球基底膜、肾小管基底膜和系膜间质呈兰绿色，上皮下可见嗜复红蛋白沉积（PAS×400） 透射电镜可以观察到细胞和组织的微细结构，而且可以显示免疫复合物沉积的精确定位（图6，7）。
肾活检光镜制片、切片、染色技术规范
肾活检光镜制片、切片、染色技术规范一、取材快速取材，取皮质（小红点，相对较粗）或皮质-髓质组织，一般大于10个肾小球。
二、制片1.固定：A. Bouin液固定4小时。
B.福尔马林液固定1-2小时。
2.随常规组织脱水，透明，浸蜡，包埋。
3.切片①恒温恒湿：温度20℃-22℃，相对湿度60°（温度计和湿度计控制）。
②连续切片，厚1微米。
③贴片：每张玻片保持2-3条组织。
④烤片温度60度，30分钟左右，PASM再90度烤40分钟以上。
注意事项：1.取材要快，避免挤压。
2.定期更换试剂。
3.包埋平整。
三、染色（一）HE 染色1.切片常规脱蜡至水。
2.苏木素染细胞核10分钟，水洗。
3.1%盐酸分化1秒，水洗，蓝化液促蓝。
4.0.5%伊红染细胞浆5分钟。
5.逐级酒精脱水，TO透明，中性树胶封片。
（苏木素2.5克+纯酒精10毫升+硫酸铝钾25克+蒸馏水330毫升+碘酸钠0.25克+甘油150毫升+冰醋酸5毫升）（二）PAS染色1. 切片常规脱蜡至水。
2.1%高碘酸氧化15分钟，水洗。
3. Schiff 氏液37℃10分钟（镜下控制），水洗。
4. 1%偏重亚硫酸钠分化1分钟，水洗。
5. 苏木素染核，盐酸分化，水洗。
6. 脱水，透明，封片。
（碱性品红1克+1N盐酸20毫升+偏重亚硫酸钠2克+蒸馏水200毫升+活性炭2克）（三）PASM-Masson染色1.切片常规脱蜡至水。
2.Bouin液微波2分钟，水洗。
3.1%高碘酸氧化20分钟，水洗，蒸馏水洗。
4.1%偏重亚硫酸钠1分钟，水洗，蒸馏水洗。
5.六胺银液10-20分钟（根据病变镜下观察确定时间）。
6.2%硫代硫酸钠2分钟，水洗（必要时氯化金分化2秒），吹干。
7.Masson复染。
8.快速脱水，透明，封片。
（预温六胺银储备液20毫升+蒸馏水10毫升+5%四硼酸钠5毫升）（四）Masson-Trichrome染色1.切片常规脱蜡至水。
2.Bouin液微波2分钟，水洗。
肾穿刺活检病理结果报告描述
肾穿刺活检病理结果报告描述
肾穿刺活检是一种常见的临床检查方法，用于诊断肾脏疾病。
根据病理结果报告描述，通常会包括以下几个方面的内容：
1. 标本信息，报告会包括标本的采集日期、送检单位、病人姓
名等基本信息。
2. 标本镜检结果，这部分会详细描述镜下所见的情况，包括肾
小球、肾小管、间质等结构的病变情况，比如是否有炎症细胞浸润、坏死、纤维化等情况。
3. 免疫荧光结果，如果进行了免疫荧光染色，报告会描述各种
免疫球蛋白、补体和其他免疫反应物质在肾脏组织中的沉积情况，
这对于一些免疫性肾病的诊断非常重要。
4. 电镜结果，电镜检查可以更加详细地观察肾小球基底膜、足
细胞等超微结构的变化，报告会描述这些结构的情况，有助于诊断
一些特殊类型的肾小球疾病。
5. 最后诊断，报告最后会根据镜检、免疫荧光和电镜的结果，
给出对肾脏病变的最终诊断，比如肾小球肾炎的类型、病变的严重程度等。
总的来说，肾穿刺活检病理结果报告会从组织学、免疫学和超微结构学等多个方面全面描述肾脏病变的情况，有助于临床医生制定合理的治疗方案。
当然，具体的报告内容会根据具体的病理学检查方法和病变情况而有所不同。
实用文库汇编之肾活检病理组织染色
*作者：座殿角*作品编号48877446331144215458创作日期：2020年12月20日实用文库汇编之一、常规染色技术（HE 染色）苏木素-伊红染色简称HE 染色，是最常用的染色方法，苏木素是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，伊红是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色。
HE 染色可以显示肾小球的细胞增生、炎细胞浸润。
还能很好的显示肾小管上皮细胞的损伤和肾间质水肿情况。
（一）需要试剂①苏木素染液；② 1% 盐酸乙醇液；③氨水；④ 1% 伊红液。
（二）具体染色步骤1.切片常规脱蜡入水。
2.苏木素染细胞核1 ～2 min，水洗。
3.入1% 盐酸乙醇分化数秒，水洗。
4.氨水返蓝数秒。
5.流水冲洗，镜下观察细胞核成蓝色。
6.1% 伊红染数秒，水洗。
7.梯度乙醇脱水，二甲苯透明，树胶封片。
染色结果：胞核呈蓝色，胞浆呈红色，红细胞呈橘红色，其他成分呈深浅不同红色。
（三）注意事项1.组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色，影响观察。
2.伊红染色的时间需严格控制。
过长胞浆染色红色过深。
3.染色后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
二、特殊染色技术（一）过碘酸- 希夫氏染色（PAS 染色）PAS 染色可以显示肾小球内的细胞增生、浸润和系膜基质等，并能很好地显示基底膜，是显示糖原和糖蛋白的基本染色。
1.需要试剂① 1% 过碘酸；② schiff 氏液染；③苏木素染液；④氨水。
2.具体染色步骤（1）切片常规脱蜡入水。
（2）入1% 过碘酸氧化10 ～15 min，水洗。
（3）入schiff 氏液染10 ～30 min，水洗。
（4）苏木素染细胞核1 ～2 min，水洗。
（5）入1% 盐酸乙醇分化数秒，水洗。
（6）氨水返蓝数秒。
（7）流水冲洗，镜下观察细胞核成蓝色，基底膜染成粉红色。
（8）梯度乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3.染色结果PAS 阳性物质（多糖和糖原）呈红色，核呈蓝色。
4.注意事项（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色。
肾活检病理染色技巧探讨
伊红染色时间不足
适当延长伊红染色时间
PAS染色的常见问题
常见问题
解决办法
Schiff染液失效或染色 时间不足
配制新鲜染液，适当延长染 色时间，肉眼观察至切片 变 淡粉红色、立即入水。
冷配Schiff染液改良
称取碱性品红６ｇ入蒸馏水４２０ｍｌ，用磁力搅 拌器搅拌２．５－３ｈ至完全溶解，继续加入Ｎ盐 酸８０ｍｌ和偏重亚硫酸钠１０ｇ混合，搅拌２． ５－３ｈ至草黄色，避光室温静置１２ｈ后再加入 ５ｇ活性炭，搅拌后过滤至无色透明，置于４℃避 光保存。
脱片的常见问题
常见问题
解决办法
① 载玻片洗涤不洁、有油脂 ① 新鲜配制泡酸液，保证泡酸
② 捞片时，切片未摊平
时间
③ 烤片时间不足
② 将组织切片周围水份吸干
④ 温度不够，急于染色
③ 适当延长时间，升温
⑤ 染色过程中，水洗速度过快。④ 缓缓漂洗
⑤ 涂PLL（防脱片剂）
HE染色的常见问题
常见问题
解决办法
75%（10min × 2）~ 80% （10min × 2）~ 90%（10min ×2） ~ 95% (30min × 2)~ 100%（60min× 3）
脱水的常见问题
常见问题
解决办法
PASM
PASM
脱水时间过长 脱水梯度过大
根据室内温，适当缩短脱水时间 降低脱水梯度，避免梯度过大
组织透明
PASM染色的常见问题
常见问题
解决办法
银染过度 先目测，后在镜下严格控制染色时间
六氨银染液改良
3%六次甲基四胺水溶液25ml，加入2%四硼酸钠5ml ，加入5%硝酸银水溶液2.5ml，震荡至乳白色悬浊 液变为清亮透明，加入30ml蒸馏水，最后加入4% 硼酸5-7滴，混匀后过滤立即使用，如果不立即使 用放入4度冰箱避光储存（一般不能超过3天）。
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一、常规染色技术（HE 染色）
苏木素-伊红染色简称HE 染色，是最常用的染色方法，苏木素是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，伊红是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色。
HE 染色可以显示肾小球的细胞增生、炎细胞浸润。
还能很好的显示肾小管上皮细胞的损伤和肾间质水肿情况。
（一）需要试剂
①苏木素染液；② 1% 盐酸乙醇液；③氨水；④ 1% 伊红液。
（二）具体染色步骤
1.切片常规脱蜡入水。
2.苏木素染细胞核1 ～2 min，水洗。
3.入1% 盐酸乙醇分化数秒，水洗。
4.氨水返蓝数秒。
5.流水冲洗，镜下观察细胞核成蓝色。
6.1% 伊红染数秒，水洗。
7.梯度乙醇脱水，二甲苯透明，树胶封片。
染色结果：胞核呈蓝色，胞浆呈红色，红细胞呈橘红色，其他成分呈深浅不同红色。
（三）注意事项
1.组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色，影响观察。
2.伊红染色的时间需严格控制。
过长胞浆染色红色过深。
3.染色后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
二、特殊染色技术
（一）过碘酸- 希夫氏染色（PAS 染色）
PAS 染色可以显示肾小球内的细胞增生、浸润和系膜基质等，并能很好地显示基底膜，是显示糖原和糖蛋白的基本染色。
1.需要试剂① 1% 过碘酸；② schiff 氏液染；③苏木素染液；④氨水。
2.具体染色步骤
（1）切片常规脱蜡入水。
（2）入1% 过碘酸氧化10 ～15 min，水洗。
（3）入schiff 氏液染10 ～30 min，水洗。
（4）苏木素染细胞核1 ～2 min，水洗。
（5）入1% 盐酸乙醇分化数秒，水洗。
（6）氨水返蓝数秒。
（7）流水冲洗，镜下观察细胞核成蓝色，基底膜染成粉红色。
（8）梯度乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3.染色结果PAS 阳性物质（多糖和糖原）呈红色，核呈蓝色。
4.注意事项
（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色。
（2）Schiff 氏液染色的时间需严格控制。
时间过长标本基底膜着色过深，时间过短标本基底膜着色淡。
（3）入1% 盐酸乙醇分化时间要短，时间长容易使标本退色。
（4）染色后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
（二）六胺银- 马松染色（PAM-Masson 染色）
PAM-Masson 染色能更清晰地显示基底膜、免疫复合物和胶原纤维，免疫复合物的定位更为精确。
1.需要试剂
① 1% 过碘酸；②六胺银液；③苏木素染液；④氨水；⑤ Masson 液；⑥ 1% 亮绿液。
2.具体染色步骤
（1）切片常规脱蜡入水。
（2）入1% 过碘酸氧化10 ～15 min，水洗5 min。
（3）入六胺银液72℃染30 ～50 min，以显微镜下见基底膜呈黑色即可。
（4）加2% 氯化金数滴于组织，5% 硫代硫酸钠洗。
（5）苏木素染细胞核1 ～2 min，1% 盐酸乙醇分化，氨水返蓝。
（6）入Masson 液约10 min，1% 醋酸洗。
（7）入1% 亮绿5 ～8 min，1% 醋酸洗。
（8）梯度乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3.染色结果基底膜及系膜基质黑色，免疫复合物红色。
4.注意事项
（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色。
（2）染色时间与室温和切片厚度有关，室温低、切片厚需染色时间长，反则需染色时间短。
入六胺银液染色的时间需严格控制。
时间过长基底膜着色过深，时间过短基底膜着色淡。
（3）2% 氯化金分化时间要短，时间长容易使银染退色。
（4）染色后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
（三）马松染色（Masson 染色）
Masson 染色能显示各部位的免疫复合物，肾小球硬化和肾间质纤维化程度。
1.需要试剂①苏木素染液；②氨水；③ Masson 液；④ 1% 亮绿液。
2.具体染色步骤
（1）切片常规脱蜡入水。
（2）媒染剂（10% 重铬酸钾、10% 三氯醋酸等量混合）染10 ～30 min，水洗。
（3）苏木素染细胞核1 ～2 min，水洗。
（4）入1% 盐酸乙醇分化数秒，水洗，氨水返蓝数秒，水洗。
（5）入Masson 液约10 min，水洗，1% 醋酸洗。
（6）入2.5% 磷钨酸约30 s，水洗，1% 醋酸洗。
（7）入2% 橘黄G 约2 min，水洗，1% 醋酸洗。
（8）入1% 亮绿5 ～8 min，1% 醋酸洗。
（9）入100% 乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3.染色结果细胞核红色，胶原纤维绿色，免疫复合物红色。
4.注意事项
（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色。
（2）入Masson 液染色的时间需严格控制。
时间过长着色过深，时间过短着色淡。
（3）入1% 亮绿染色时间需要镜下控制，时间长容易覆盖Masson 液红色。
（4）染色后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。
（四）刚果红染色
在肾脏病理染色中，刚果红染色能够将淀粉样物质染成砖红色，是诊断淀粉样变肾病的常用染色方法之一。
1．需要试剂①高锰酸钾—硫酸液；②苏木素染液；③氨水；④碱性刚果红液。
2．具体染色步骤
（1）切片常规脱蜡入水。
（2）高锰酸钾- 硫酸混合处理3 min，水洗。
（3）5% 草酸处理3 min，水洗。
（4）苏木素染核2 min，水洗，蓝化。
（5）碱性刚果红液染10 ～30 min。
（6）入100% 乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。
3．染色结果细胞核蓝色，淀粉样物质呈砖红色（图3-12）。
4．注意事项
（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色。
（2）碱性刚果红液染色时间应该镜下控制，染色液现配现用着色好。
（4）染色后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。