组织与细胞化学考试重点

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动物组织学复习题及答案

动物组织学复习题及答案
3.组织异染性的含义是
A.染色快速B.染色困难
C.染色鲜明D.染色需加还原剂
E.以上都不对
4.观察体外培养细胞首选的显微镜是
A.—般光镜B.倒置相关显微镜
C.相差显微镜D.暗视野显微镜
E.偏光显微镜
5.PAS反应是检测组织内的
A.核酸B.脂类
C.蛋白水解酶D.多糖类
E.抗原
6.细胞的表现型是指
A.细胞结构和功能的特点
A.只见于上皮细胞的表面
B.光镜下均能看到
C.内有纵向配布的微管
D.可伸长或缩短
E•上皮细胞表面的微绒毛数量和长短相同
7.单层柱状上皮细胞间连接结构由浅至深一般依次是
A.桥粒,紧密连接,中间连接
B.紧密连接,中间连接,桥粒
C.中间连接,桥粒,紧密连接
D.紧密连接,桥粒,中间连接
E.桥粒,中间连接,紧密连接
C.单层立方上皮和假复层纤毛柱状上皮
D.假复层纤毛柱状上皮和复层扁平上皮
E.单层柱状上皮和假复层纤毛柱状上皮
5.关于基膜的下列描述哪项是错误的
A.不同部位的上皮的基膜厚薄不一
B.也见于骨骼肌纤维的表面
C.主要由胶原纤维构成
D.厚基膜光镜下可见,薄基膜光镜下不能见
E.是支持膜和半透膜
6.关于微绒毛以下哪项是正确的
8.醋酸铀,电子密度高,电子密度低
9.图像分析仪,流式细胞仪,共焦激光扫描显微镜
四、判断题
1.错误2.正确3.错误4.错误5.正确6.正确7.正确
第二章 上皮组织
一、单项选择题
1.关于上皮组织的特点以下哪项是不正确的
A.细胞排列密集,细胞间质少
B.细胞排列和结构有极性
C.细胞基部均附着于基膜上

病理考试名词解释与简答题最全

病理考试名词解释与简答题最全

1举例说明病理学在医学中的地位①桥梁作用;②以其他基础学科如解剖学、组织胚胎学、生理学、生物化学、寄生虫学、微生物学等为基础;③为临床医学提供学习疾病的必要理论。

2 简述病理学常用研究方法的应用及其目的①尸体解剖:查明病因,提高临床工作质量,减少同种疾病的漏诊与误诊率;通过尸体解剖,积累教学、科研素材;帮助解决法律纠纷等;②活检:及时准确诊断疾病,判断疗效,并能利用活检组织进行特染、超微结构观察、免疫组织化学染色、组织细胞培养等对疾病进行深入研究;③动物实验:复制疾病的模型,了解疾病的病因、发病机制、病变过程的动态变化及外来因素如药物对疾病的影响等;④组织培养和细胞培养:可以观察细胞和组织病变的发生发展过程,了解外来因子对组织细胞的影响等。

3简述病理学的发展史①病理学的发展大致分四个阶段;②来源于古希腊哲学的病理学:古希腊名医Hippocrates的液体病理学和Asclepiades的固体病理学,都对疾病的来源作了阐述,但未对医疗实践起到理论指导作用;③器官病理学的建立:1761年,意大利医学家Morgagni发表了《疾病的部位和病因》一书,从而创立了器官病理学,标志着病理形态学的开端;④细胞病理学的建立:1858年,德国病理学家Virchow根据对大量尸检材料的显微镜改变,提出了细胞病理学的理论,认为细胞的改变和细胞的功能是一切疾病的基础,并指出了形态学改变与疾病过程和临床表现之间的关系;⑤现代病理学的发展:a 超微结构病理学—从亚细胞(即细胞器)水平观察病变;b 组织化学和细胞化学—能显示细胞内的化学成分;c 免疫病理学—用免疫学的基本原理和方法来阐述疾病的病因和发病机制;d 遗传病理学—从染色体畸变和基因突变的角度进行疾病的探讨;e 分子病理学—从分子水平研究疾病的病因和发病机制;f 免疫组织化学—免疫学与组织化学相结合的方法去探讨疾病的病因、发病机制、组织发生。

2 试以肾盂积水为例,说明萎缩的发生常是综合性因素所致,并简述肾盂积水的病理变化。

细胞生物学复习要点(期末考试复习)

细胞生物学复习要点(期末考试复习)

在16级基础上更新的重点,水印没有去掉。

绪论1.细胞生物学:是研究和揭示细胞基本生命活动规律的科学,它从显微、亚显微与分子水平上研究细胞结构与功能,细胞增殖、分化、代谢、运动、衰老、死亡,以及细胞信号转导,细胞基因表达与调控,细胞起源与进化等重大生命过程。

2.细胞学说提出者:施旺和施莱登。

3.细胞学说:一切植物、动物都是由细胞组成的,细胞是一切动植物体的基本单位。

细胞质膜:1、细胞质膜:围绕在细胞最外层,由脂质、蛋白质和糖类组成的生物膜。

利用血影进行研究2、膜脂:甘油磷脂、固醇、鞘脂;甘油磷脂:卵磷脂以及磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺和磷脂酰肌醇①具有一个与磷酸基团相结合的极性头和两个非极尾。

1、膜蛋白的类型:①周边膜蛋白(外在膜蛋白):水溶性蛋白质,非共价键的形式;②整合膜蛋白(内在膜蛋白);③脂锚定膜蛋白:通过共价键插入脂双分子中。

2、去垢剂:一端亲水,一端疏水,是分离与研究膜蛋白的常用试剂3、胞质膜的基本特征:流动性(温度)和不对称性。

4、膜的运动方式:①沿膜平面的侧向运动;②脂分子围绕轴心的自旋运动;③脂分子尾部的摆动;④双层脂分子之间的翻转运动(上下翻转)。

5、成斑现象:在某些细胞中,当荧光抗体标记时间继续延长,已均匀分布在细胞表面的标记荧光会重新排布,聚集在细胞表面的某些部位,即所谓成斑现象。

(……聚集在细胞的一段,即成帽现象。

)16.细胞质膜的基本功能:①为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境;②选择性的物质运输,包括代谢底物的输入与代谢产物的排除,其中伴随着能量物质的传递;③提供细胞识别位点,并完成细胞内外信息跨膜传导;病原微生物识别和侵染特异的宿主细胞的受体也存在于质膜上;④为多种酶提供结合位点,使酶促反应高效而有序地进行;⑤介导细胞与细胞、细胞与胞外基质之间的连接;⑥质膜参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构;⑦膜蛋白的异常与某些疾病相关,很多膜蛋白可作为疾病治疗的药物靶标。

跨膜运输:1、离子通道的特征:①具有极高的转运速率;②非连续性开放而是门控的。

生物显微技术 第三章 细胞化学和组织化学

生物显微技术  第三章  细胞化学和组织化学
❖ 显示脂类的基本原理 :用易溶于脂类的染料, 使之溶于所检的脂质(如脂滴)中,使组织内的 脂类着色.
❖ 常用方法: 苏丹黑B法、油红O法、硫酸尼 罗蓝法 、苏丹Ⅲ染色法等
❖ 基本要求 ⑴ 不用石蜡切片. ⑵ 固定剂一般用Formalin保存磷脂较好. ⑶ 方法: ① 物理法:脂溶性染料,不溶于水,属 偶 氮染料.常用苏丹Ⅲ,Ⅳ,苏 丹黑 ,油红O等. ② 化学方法:硫酸尼罗蓝显示脂肪酸. ③ 选择 性提取法(对照)
❖ 差不多与此同时(1900-1935年),发现疾病组织中出 现的物质变化,更促进了化学技术在病理学染色方法 中的应用,也丰富了在显微镜下显示无机物、色素、 脂类、糖类、蛋白质、核酸等物质的组织化学内容, 此后又出现了酶的组织化学等。由此可见,“组织化 学”一词的含意是随时代而变化的,由定位趋向于与 定量相结合的研究。
❖ 3、灌注固定法:从心血管途径将固定剂灌注到全 身或某一个器官,使细胞保持生活时的状态而不发 生移位,固定后再迅速取材。
三、制 片
❖ 涂片法、石蜡切片法、冰冻切片法 ❖ 最常使用的为恒冷箱冰冻切片法。
四、注意事项
❖ 1、实验所用的器械、器皿都必须清洁无污染。 ❖ 2、配制试剂时应使用双蒸馏水。 ❖ 3、固定、取材都应在冷的环境下进行。 ❖ 4、各种试剂的pH值都要调准,否则影响反应结果。 ❖ 5、所用试剂要纯,都必须达到分析纯(A·R级)。 ❖ 6、同时、同条件情况下做阴性和阳性对照。 ❖ 7、了解和掌握被检组织中所要测定的化学物质或
❖ 以下介绍McGee-Ruseell核固红法。 ❖ 1、操作步骤 ❖ (1) 石蜡切片常规脱蜡至水。 ❖ (2)核固红染液染色2一10分钟。 ❖ 核固红染液的配制:核固红2g,蒸馏水100ml洗涤2次,剩

免疫组织细胞化学技术题库10-1-8

免疫组织细胞化学技术题库10-1-8

免疫组织细胞化学技术题库10-1-8问题:[单选,A2型题,A1A2型题]下列关于异硫氰酸荧光素的叙述,哪项正确?()A.呈现红色荧光B.最大吸收波长是520~560nmC.呈现黄绿色荧光D.最大发射光谱为490mmE.性质不稳定问题:[单选,A2型题,A1A2型题]下列哪项不是免疫组织化学染色失败的原因?()A.抗原没有暴露B.第一抗体为多克隆抗体C.未灭活内源性酶D.抗体浓度过高E.洗涤不充分问题:[单选,A2型题,A1A2型题]免疫细胞化学技术中关于抗体的标记哪项正确?()A.在用辣根过氧化物酶标记的抗体进行染色时,要用过氧化氢阻断内源性过氧化酶,避免假阳性B.异硫氰酸荧光素是橙红色荧光C.免疫电镜中主要用荧光素标记抗体D.四甲基异硫氰酸罗丹明是黄绿色荧光E.碱性磷酸酶标记的抗体不适合用于骨髓涂片的免疫组织化学染色/ 王者荣耀吧问题:[单选,A2型题,A1A2型题]关于内源性生物素活性的说法哪项正确?()A.预先用生物素作用可增强敏感性B.生物素是一种消化酶C.在用ABC法染色时可引起非特异性染色D.肝、肾等组织内生物素含量最少E.内源性生物素丰富的组织不适合进行PAP法染色问题:[单选,A2型题,A1A2型题]下列哪种物质是免疫荧光细胞化学的封固剂?()A.多聚赖氨酸B.中性树胶C.缓冲甘油D.PBS缓冲液E.甘油问题:[单选,A2型题,A1A2型题]下列哪项是荧光补体法的原理?()A.大多数抗体能与补体结合B.抗原-抗体复合物无法与补体结合C.大多数抗原能与补体结合D.大多数抗原-抗体复合物都能与补体结合E.补体间相互作用问题:[单选,A2型题,A1A2型题]关于非特异性染色的说法不正确的是()。

A.切片中的刀痕及皱褶区域也容易出现非特异性染色B.表现为弥漫均匀的背景染色C.一片细胞内染色强度较一致,无深浅及多少之分D.出现在组织边缘、胶原纤维及血浆渗出处,坏死组织及固定不良的组织中心处E.着色细胞数量极少时,多为非特异性染色。

初中全科考点归纳与总结

初中全科考点归纳与总结

初中全科考点归纳与总结在初中阶段,学生需要学习多科目的知识和技能,其中包括语文、数学、英语、物理、化学、生物、历史、地理等全科目。

全科目的考试是对学生知识储备和能力的综合考核。

为了帮助同学们更好地备战中考,本文将对初中全科的考点进行归纳与总结。

一、语文考点1.词汇与短语:重点掌握常见的词汇和短语,包括近义词、反义词、词组、成语等。

2.阅读理解:培养良好的阅读习惯,提高理解能力和阅读速度。

3.作文写作:学会合理组织文章结构,运用丰富的词汇和语言表达能力,培养批判性思维和逻辑思维能力。

二、数学考点1.四则运算:掌握加减乘除的基本运算规则,能够灵活运用。

2.代数与方程:理解代数中的字母和符号表示,学会解方程和运用代数方法解决实际问题。

3.几何与图形:熟悉各种几何图形的属性和计算方法,能够进行图形的变换和计算。

三、英语考点1.词汇与语法:掌握常见单词和词组,了解英语语法的基本规则,能够正确运用。

2.听力与口语:提高听力理解能力,培养口语表达能力,积极参与英语口语交流。

3.阅读与写作:培养良好的阅读习惯,提高阅读理解能力,学会写作不同类型的文章。

四、物理考点1.力与运动:了解力的基本概念和运动的规律,能够解决与力和运动相关的实际问题。

2.能量与功率:理解能量转化和功率的概念,熟悉常见能量的转化过程。

3.电学基础:学习基本电路和电器的知识,能够进行简单的电路分析和计算。

五、化学考点1.物质与反应:了解常见物质的性质和常见化学反应,能够进行有关物质和反应的实验和观察。

2.元素与化合物:掌握元素和化合物的基本概念,熟悉常见元素和化合物的性质。

3.化学方程式:学会书写化学方程式,理解化学反应的平衡和速率。

六、生物考点1.细胞与组织:了解细胞的基本结构和组成,学习有关细胞和组织的知识。

2.生物多样性:熟悉不同物种的分类和特征,了解生态系统的基本原理。

3.人体结构与功能:学习人体各个系统的结构和功能,掌握基本的生理和生态知识。

病理与免疫组化复习重点

病理与免疫组化复习重点

A:闭卷内容:1、CSC(肿瘤干细胞)与正常干细胞的共性是什么?答:①、相对静止—休眠。

②、抗药性。

③、抗凋亡。

④、具有更高的促血管生产能力。

⑤、表达某些趋化因子受体(XCR4),有利于细胞归巢。

2、肿瘤标志的概念、分类?答:肿瘤标志物是指由肿瘤细胞由肿瘤组织和细胞产生的与肿瘤的形成、发生相关的物质,这些物质存在于肿瘤细胞的胞核、胞质、胞膜上或体液中,进入到血液或其他体液或组织中,或是宿主对体内新生物反应而产生并进入到血液或体液或组织中而含量明显高于正常参考值的一类生物活性物质。

不存在于正常成人组织而见于胚胎组织,或在肿瘤组织中含量超过正常含量。

肿瘤标志物分类:(1)肿瘤抗原(2)糖类抗原(3)酶和同工酶(4)激素和异位激素(5)蛋白类角蛋白(Keratin上皮来源肿瘤)(6)肿瘤相关病毒(7)癌基因、抑癌基因及其产物3、几种重要的肿瘤标志物有哪些?答:(1)甲胎蛋白(AFP)(2)癌胚抗原(CEA)(3)血清β2微球蛋白(β2 -MG)(4)血清铁蛋白(SF)(5)前列腺酸性磷酸酶(PAP)和前列腺特异抗原(PSA)(6)人绒毛膜促性腺激素(HCG)(7)神经特异性烯醇化酶(NSE)(8)细胞角蛋白相关TM (9)鳞状上皮癌相关抗原(SCCA)(10)胃蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ(PGI、II)(11)糖类抗原(CA)(12)生长激素(HGH)(13)其他组织多肽抗原(TPA)、组织多肽特异性抗原(TPS)、膀胱癌抗原(UBC)4、肿瘤标志物检测方法有哪些?答:(1)、血清学水平。

(除传统的放射免疫分析(RIA)和酶联免疫分析(ELISA)外,目前在国内主要有三类全自动免疫化学分析系统(化学发光免疫分析系统;荧光免疫分析系统和电化学发光免疫分析系统)广泛的应用于临床,对血清肿瘤标记物检测具有快速、准确、半定量。

可检测AFP、CEA、CA19-9、CA72-4、CA125、CA15-3、NSE、Cyfra21-1、PSA、f- PSA等。

细胞生物学考试重点

细胞生物学考试重点

细胞生物学考试重点一、名词解释:1、拟核:在细胞质内含有DNA区域,但无被膜包围,该区域一般称为拟核。

2、基因组:细胞或生物体的一套完整的单倍体遗传物质称为基因组,它是所有染色体上全部基因和基因间的DNA的总和。

3、复合糖:细胞中寡糖或多糖存在的主要形式有糖蛋白、蛋白聚糖、糖脂和脂多糖等,这些复合产物也成为复合糖。

4、被动扩散:转运是由高浓度向低浓度方向进行,所需要的能量来自高浓度本身所包含的势能,不需要细胞提供能量,故也称为被动扩散。

5、被动运输:多种载体蛋白和通道蛋白介导溶质穿膜转运时不消耗能量,称其为被动运输。

6、主动运输:细胞也需要逆电化学梯度转运一些溶质,这时不但需要运输蛋白的参与,还需要消耗能量,这种细胞膜利用代谢产生的能量来驱动物质的逆浓度梯度的转运称为主动运输。

7、内膜系统:是细胞之中那些在结构、功能及其发生上相互密切关联的膜性结构细胞器之总称。

主要包括:内质网、高尔基复合体、溶酶体、各种转运小泡以及核膜等功能结构。

还有过氧化物酶体。

8、细胞呼吸:在细胞内特定的细胞器(主要是线粒体)内,在O2的参与下,分解各种大分子物质,产生CO2;与此同时,分解代谢所释放的能量储存于ATP中,这一过程称为细胞呼吸。

9、网质蛋白:是普遍存在于内质网网腔中的一类蛋白质。

驻留信号可通过与内质网膜上相应受体的识别结合而驻留于内质网腔不被转运。

10、肌质网:在肌细胞中,十分发达的光面内质网特化为一种特殊的结构——肌质网。

11、核型:是指一个体细胞中的全部染色体,按其大小、形态特征顺序排列所构成的图像。

12、核型分析:将待测细胞的核型进行染色体数目、形态特征的分析,称为核型分析。

13、转录:是将遗传信息从DNA传递给RNA分子的过程,是细胞合成蛋白质所必需的重要环节。

14、基因:是DNA分子中含有特定遗传信息的核苷酸序列。

15、基因组:实质细胞或生物体的一套完整的单倍体遗传物质,是所有染色体上全部基因和基因间的DNA的总和,它含有一个生物体进行各种生命活动所需要的全部遗传信息。

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1.异染现象:染料离子以某种方式使它对所吸收的波长有所改变,因而观察到被染的组织显示与该染料本身颜色不一样,此现象为异染现象。

2.自发荧光:由于紫外线的照射,标本中的荧光物质吸收光能后,呈现出不同颜色的荧光,这是自发荧光。

3.诱发荧光:细胞内的某些成分只有与荧光素结合后,在紫外线的激发下,始可呈现一定颜色的荧光,称为诱发荧光。

4.点计数:计数落于所测图像(轮廓面)内的测点数。

5.交叉点计数:计数侧线与所测图像的周界线之间形成的交叉点的数目。

6.DAB:是3,3ˊ-二氨基联苯胺(DAB),HRP使DAB氧化形成棕黄色产物,可在光镜和电镜下观察。

7.形态计量术(morphometry):是运用数学和统计学原理对组织和细胞内各种成分的数量、体积、表面积等的相对值与绝对值的测量。

8.各向同性:是指特征物在各个方向上都分布均匀的特性。

9.各向异性:是指特征物在各个方向上分布不均匀的特性。

10.饲养细胞:在体外的细胞培养中,单个的或数量很少的细胞不易生存与繁殖,必须加入其他活的细胞才能使其生长繁殖,加人的细胞称为饲养细胞(feeder cell)。

11.不完全抗原:只有反应原性而无免疫原性的物质称半抗原或不完全抗原,绝大多数低分子量的多糖和所有的类脂均属半抗原。

12.生物素标记法:将生物素用酶学方法或化学方法连接在核酸探针上,分子杂交后利用抗生物素对生物素具有高度亲和力的特性,用标记的生物素蛋白或链酶抗生素蛋白进行检测。

13.灰度:是指一个像素色泽的深浅,它以整数值的形式表示,可表示为K=0,1,2…K个级别,称量化级别。

灰度值越小,表示染色深度越强,物质含量越高。

14.特征物:就是指要定量研究的形态结构,即感兴趣的某种组织结构,它具有一定的形状和分界,在肉眼或显微镜下可以识别或分辨。

15.荧光免疫组化:采用荧光素标记已知抗体,在适合的情况下,与组织细胞中的靶抗原(或抗体)反应,可在荧光显微镜下观察结果。

16.原位杂交组化:是应用已知碱基顺序并带有标记物核酸按碱基配对的原则进行特异性结合,形成杂交体,然后再应用与标记物相应的检测系统通过组织化学或免疫组织化学在核酸原有的位置进行细胞内定位。

二、简答题1、试述荧光显微镜的原理、结构及生物学应用答:①原理:由于紫外线的照射,标本中的荧光物质吸收光能后,呈现出不同颜色的荧光,这是自发荧光,如维生素A呈绿色荧光、心肌细胞内脂褐素呈棕黄色~金黄色荧光。

但是,细胞内的某些成分只有与荧光素结合后,在紫外线的激发下,始可呈现一定颜色的荧光;如应吖啶橙(荧光素)处理细胞后,细胞核内的DNA 呈绿~黄绿色荧光,细胞质及核仁内的RNA呈桔黄~桔红色荧光。

②结构:它是装有、能产生紫外线(短波长)的光源及系列滤片装置的显微镜。

③应用:是用以观察细胞及组织内荧光物质的分布。

利用荧光染色法及荧光显微镜可以观察组织、细胞的结构、细胞内某些成分含量的变化,并探讨细胞的功能状态。

或用荧光素标记免疫球蛋白,进行免疫荧光细胞化学研究。

2、免疫组织化学中如何进行抗原修复,其方法有哪些?答:①蛋白酶消化:a、胰蛋白酶:一般使用浓度为0.05%~0.1%,消化时间为37℃、10~40分钟,主要用于细胞内抗原的显示。

b、胃蛋白酶:一般使用浓度为0.4%,消化时间为37℃、30~180分钟,主要用于细胞间质抗原的显示。

②抗原热修复:可根据实验室的具有条件,选用微波炉抗原修复、高压锅抗原修复或水浴高温抗原。

(例:石蜡切片微波炉抗原修复的具体步骤)3、酶组织化学的方法通常有哪些,注意事项,举例说明细胞色素氧化酶的原理。

(不全)答:免疫酶组织化学法是抗原抗体的特异性与酶的高效催化作用相结合的一种免疫标记法。

通过用酶标记抗原或抗体的示踪,对呈色反应后的有色化合物进行分光光密度的测定,可对免疫阳性产物做半定量的分析。

①标记酶法:1)辣根过氧化物酶(HRP)易获得,分子小,易穿透到细胞内;2)碱性磷酸酶(ALP);3)葡萄糖氧化酶②非标记抗体免疫酶法:1)PAP法;2)双桥PAP法;3)APAAP法③亲和免疫组织化学技术④放射自显影标记法⑤胶体金法酶组织化学技术的注意事项:①选择最适温度、ph值及缓冲液;②为保持酶活性,最好使用冰冻切片,固定时间不能过长;③有些物质能提高或抑制酶的活性,故要选择合适的捕捉剂;④进行对照试验:用酶的抑制剂、用去底物的孵育液、用已确定含该酶的组织细胞进行对照。

细胞色素氧化酶显示法的原理:细胞色素氧化酶被认为是线粒体膜固有的酶,在含有大量线粒体的细胞内都具有高度活性。

此酶活性往往作为细胞内氧化代谢的指标,亦作为线粒体的标志酶之一。

细胞色素氧化酶的抑制剂是氰化物和叠氮化物。

此酶对固定剂敏感,故需使用新鲜切片。

本实验用N-苯基-对-苯二胺为底物,在有氧存在的情况下,经酶作用可与萘酚生成靛酚,称为Nadi反应。

4、什么是单克隆抗体与多克隆抗体,试比较它们的优缺点。

答:①由识别一种抗原决定簇的细胞克隆所产生的均一性抗体,称为单克隆抗体,具有特异性强、纯度高的特点。

②将一种天然抗原经各种途径免疫动物,由于抗原性物质具有多种决定簇,故可刺激产生多种抗体形成细胞克隆,合成和分泌抗各种决定簇的抗体分泌到血清中,故在其血清中实际上是含多种抗体的混合物,称这种用体内免疫法所获得的免疫血清为多克隆抗体。

③比较:单克隆抗体结构均一,纯度高,特异性强、效价高,而且一旦制备成功就可以永续生产完全一致的抗体。

多克隆抗体在特异性方面无法与单克隆抗体相比,易出现交叉反应,而且是即便是用相同抗原制备的不同批次的多抗也不能保证其一致性,因而多抗在特异性、一致性方面有很大局限。

但多抗有制备时间短、首次制备成本低的优点。

5、免疫酶组织技术常用于标记物的酶有哪些,试比较其优缺点。

答:①常用的标记酶:1)辣根过氧化物酶(HRP)易获得,分子小,易穿透到细胞内;2)碱性磷酸酶(ALP);3)葡萄糖氧化酶②比较(百度去吧)6、免疫组织化学中实验结果的判断如何进行答:免疫组化的呈色深浅可反映抗原存在的数量,可作为定性、定位和定量的依据。

①阳性反应的染色特征:1)阳性细胞分布呈灶性和弥漫性;2)阳性细胞染色定位于单个细胞,且与阴性细胞相互交杂分布;而非特异性染色常不限于单个细胞,而是累及一片细胞。

②假阳性及其处理:1)所用的抗体与其它无关的抗原有交叉反应,特异性差,特别是使用多克隆抗血清时较易出现;2)组织细胞内含有DAB沉淀相类似的色素;3)假过氧化物酶活性:组织中存在红细胞时,即不加过氧化物酶,也可出现阳性结果。

③非特异性染色特征:1)组织中非抗原抗体反应出现的阳性染色称非特异性背景染色;2)常出现在切片边缘、刀痕或皱褶区域,坏死或挤压的细胞区,表现为无一定的分布规律,常呈现某一部位成片的均匀着色。

7、简述体视学中抽样设计时应该注意的事项。

(书P.110)答:①确定总体或参照空间,样本要取自整个参照空间;②样本含量不是由参照空间的大小确定的,是由特征物在参照空间内的分布情况、抽样方法和拟获得的一定的准确性确定的;③样本的抽取应该是随机的,应排除主观影响;④抽取切片、视野等研究一定条件下的某种生物器官时,实际用于计算平均估计值、标准差等的样本是生物器官构成的样本,样本含量就是生物的数目。

切片仅是估计某一生物器官的样本,视野仅是某一切片的样本;⑤阶段抽样的重点是较初级阶段的抽样,阶段抽样的原则是:宁多而粗,勿少而精;⑥若最终计数的测点数已达100—200个,则样本含量已足够;⑦注意选择适当的显微放大倍数;⑧做一试点研究或实际考察对于抽样设计是很有用的,尤其对于一项新开始的研究。

8、简述细胞凋亡研究在免疫学中的重要意义,细胞凋亡的检测方法和原理。

答:①在免疫学中的意义:细胞凋亡对于淋巴细胞的成熟和维持免疫系统的功能至关重要。

在淋巴细胞的发育分化过程中,自身反应性B细胞克隆的清除以及通过一系列阳性选择和阴性选择,形成CD4+辅助性T淋巴细胞和CD8+抑制性T 淋巴细胞的过程,都是通过细胞凋亡来实现的;LAK等免疫活性细胞可以通过诱导细胞凋亡来杀伤靶细胞;为了防止过高的免疫应答,受抗原刺激而活化的T 淋巴细胞自身可以通过诱导细胞死亡过程走向凋亡。

②检测方法:1)形态学方法,包括光学显微镜观察、视频时差显微技术、电子显微镜观察等。

原理:凋亡细胞的主要特征为核染色质致密深染,细胞体积缩小,胞质致密、嗜酸性染色增强,并可形成凋亡小体;在组织中凋亡细胞常以分散单个形式存在,与周围细胞分离,不引起炎症反应。

2)生物化学方法,测定染色体DNA断裂及其细胞形态。

原理:细胞凋亡时,在内源性核酸内切酶的作用下,染色质DNA在核小体间被切割成50—300kb的片段,或180—200bp整数倍的单或寡核苷酸片段。

细胞经处理后,采用常规方法分离提纯DNA,进行琼脂糖凝胶电泳和溴化乙啶染色,在凋亡细胞群中可观察到典型的连续的梯形DNA图谱。

3)免疫化学方法。

原理:细胞凋亡时,细胞染色体DNA断裂,断裂的DNA与组蛋白H2A、H2B、H3和H4,形成复合物,保护其DNA不被核酸内切酶降解。

采用抗组蛋白和抗DNA 的单克隆抗体酶联免疫分析法进行测定,即可显示细胞凋亡。

4)分子生物学方法。

原理:细胞凋亡时,由于DNA的裂解,形成单或寡核小体的双链相对分子质量小的片段及在相对分子质量大的DNA上形成单的断裂。

此类断裂可用生物素、地高辛或荧光素标记的核苷酸3,-OH端予以显示。

9、实验设计:碱性蛋白酶在细胞中的分布,定位的原理、方法及结果显示。

另四道题1、组织化学技术的基本要求。

答:①尽可能地保持组织和细胞生前的形态结构、化学成分和酶的活性。

为此必须选择适当的固定液和恰当的处理方法,如冷冻干燥、冰冻替代、恒冷箱切片、振动切片等。

②化学反应要求在细胞或组织内进行,须有定位的准确性。

为此必须控制反应的时间和条件,使反应的产物不移位,不弥散。

③反应物须有显色性和定量的可能性,即必须是有色的沉淀或结晶,沉淀颗粒细小连续、色深、不溶,并能保留在原位上。

颜色深度要与物质含量或酶的活性具有一定的比例关系。

④反应物要有稳定性和重复性,以利于观察研究和验证。

⑤反应物有灵敏性和特异性,以利于对比观察。

⑥反应产物有对照,否则难以判断其结果的可靠性。

2、免疫组织化学技术包括哪些?(或参照书P.15)答:①根据标记物是否与特异性第一抗体结合分类:1)直接法将标记物与第一抗体结合后,直接加到细胞或组织上,在适当条件下,抗体与抗原反应。

2)间接法与(待检物)抗原特异性结合的第一抗体未被标记,而第二抗体以荧光素、酶或胶体金等标记。

②根据标记物或呈色物的不同分类:1)免疫荧光法2)免疫酶组织化学法3、荧光标记/抗体标记中,其主要作用是消除或降低非特异性荧光和交叉荧光染色的影响,其方法和步骤是什么?(书P.61)答:①用于标记的抗体应该特异性强并且效价高,标记后通过层析或透析的方法去除游离的荧光素。

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