液相色谱-质谱联用测定抗风湿类中药中非法添加化学药物成分
液相色谱-质谱联用法检测药品中非法添加能醋酸泼尼松和布洛芬
ａ ｏｉｍ ａｅ ｔ ｓｌｔｎ ａｊｓ ｄｔ ｐ ． ｉ ｃｔ ｃｄｌ ｉ） ｃｔｎｔｌ（０： ０ 、 ｒｄｉ ｎ ｃｔｔ ａｄ ｉ ｐｏ ｎ ｉｅ ｌｇｌ ｍｍ ｎ ｃｔ ｅ ｏｕ ｏ （ｄｕｔ ｏ Ｈ ３ ０ ｗｔ ａｅｃ ａｉ ａ ａ 一ａｅ ｉｉ ５ ５ ）Ｐｅｎｓ ｅ ａｅａ ｎ ｂ ｒ ｅｍ ｘｄｉｅａｌ ｕ ａ ｉ ｅ ｈ ｉ ｇｃ１ ｏ ｒｅ ｏ ｅ ｕ ｆ ｌ ｙ
Ａ ｓ ａｔＯｂｅｔ ｅ Ｔ ｅｅ ｐ ａ ｓｅｉｃ ｍｅ ｏ ｏ ｐｅｎｓｎ ｃｔｅ ａｄ ｉ ｐｏ ｎ ｍｉ ｄ ｉｅａ ｙ ｉｔ ｄｕｓＭｅｈ ｄ ｈ ｏ ｂｎｄ ｂｔ ｃ ： ｊｃ ｖ ｏｄ ｖｌ ｐｃ ｔ ｄ ｆｒ ｒ ｉ ｅ ａｅ ｔ ｎ ｂ ｒｆ ｘ ｌ ｇｌ ｎｏ ｒｇ， ｔｏ ｓＴ ｅｃｍ ｉ ｒ ｉ ｏ ｉ ｆ ｈ ｄ ｏ ａ ｕ ｅ ｅ ｌ ｌ ｅ
者的加样 回收率分别为 ９ ． ５ ８ ９ ％和 ９ ．７ （ ６ 。 ８ ８ ％ ｎ＝ ）结论 方法选择性强、 灵敏度高， 可分析检测非法制剂中的醋酸泼尼松和布洛芬。
关 键 词 ： 酸 泼尼 松 ； 洛 芬 ； 相 色谱 一质谱 联 用 法 ； 量 测 定 ； 性 鉴 别 醋 布 液 定 定
ｌｑｕｄ ｈ ｏ ｔｇ ａ ｈ ａ ｍａ ｓ ｐ ｃｒ ｍｅｒ ｍ ｅｈ ｄ ｗｅｅ ｓ ｄ ｈ ｅ ｉ ｉ ｃ ｒ ｍａｏ ｒ ｐ ｙ ｎｄ ｓ ｓ ｅ ｔｏ ｔｙ ｔ ｏ ｒ ｕ ｅ 、Ｔ Ｖｅ ｕ ｉ ｎ ｓｌ Ｐ Ｍ Ｃ， ｏ ｕ ｓ ｓ ｄ ｗｉｈ ｈ ｍｏ ｉｅ ８ ｃ ｌ ｍｎ ｗａ ｕ ｅ ｔ ｔｅ ｂｌ ｐｈ ｓ ｏ ０ｌｍｏ ／Ｌ ａ ｅ ｆ０． ｌ
抗风湿类中成药和保健食品中非法添加化学成分的高液相色谱—质谱
抗风湿类中成药和保健食品中非法添加化学成分的高液相色谱—质谱／质谱法检测目的建立一种快速检测抗风湿类中成药和保健食品中30种非法添加化学成分的高液相色谱-质谱/质谱法。
方法色谱条件：C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色谱柱，以甲醇-0.1%乙酸溶液为流动相，梯度洗脱，质谱条件：电喷雾离子化正离子检测（ESI+），全扫描一级质谱、选择离子二级扫描质谱检测方式，扫描范围50～800 aum，对抗风湿类中成药和保健食品中非法添加的化学成分进行快速定性分析。
结果根据检测到的化合物的色谱保留时间及一级、二级质谱信息，并与对照品比较，可作为分析抗风湿类中成药和保健食品中非法添加吗啡、甲氧苄啶、对乙酰氨基酚、罗通定、氨基比林、龙胆苦苷、磺胺甲■唑、安替比林、阿司匹林、非那西丁、盐酸美沙酮、泼尼松、可的松、异丙安替比林、吡罗昔康、氢化可的松、金诺芬、地塞米松、甲基泼尼松龙、醋酸曲安奈德、酮洛芬、舒林酸、萘普生、地西泮、醋酸地塞米松、保泰松、奥沙普秦、双氯芬酸钠、吲哚美辛和丙酸倍氯米松等30种化学成分的有效手段。
在50批供试品中，检测到有10种供试品中含有非法添加的化学成分。
结论本方法专属性强、灵敏度高，可作为抗风湿类中成药和保健食品中非法添加化学成分的快速检测方法。
标签：液质联用法；快速检测；抗风湿类；非法添加我国地理纬度跨度大，高寒、高湿地区多，导致我国具有较高的风湿病发病率[1]。
风湿性及类风湿性关节炎以疼痛、麻木、关节活动不灵为主要症状，是一种致残性非常强的疾病[2-3]。
基于上述情况，不法商家为牟取暴利，突显产品疗效，在抗风湿类中成药和保健食品中非法添加化学物质[4-5]，使通常起效慢的中药和保健食品似乎具备了速效、高效的优点。
在健康产品中非法添加的化学药物，未经试验验证、临床验证和国家相关部门严格审核批准，本身质量安全难以控制保证，而且存在随意性和不确定性。
这种非法现象会给社会和消费者带来了严重的，甚至导致死亡的威胁，同时引起了国家相关监管部门的重视。
超高效液相色谱-串联质谱法快速筛查中成药中49种违法添加化学药物
第44卷第5期2404年5月分析测试学报FENXS CESHS XUEBAO(Enoal cf EWomwOl Analysis )Voe040No05722-754doi : 17. 3969/j. issn. 1704 -4957. 2221. 05. 019超高效液相色谱-串联质谱法快速筛查 中成药中49种违法添加化学药物许晓辉4,杨志敏4,吴兴强4,吴福祥4,张 文4，冯 }4,王小乔4**收稿日期：2224 -45 -04；修回日期：2222 -14 -05基金项目：甘肃省食品药品监督管理局青年科技创新项目(2713GSFDA757 )；甘肃省药品监督管理局科学技术类项目(2422GSMPAA30)*通讯作者：王小乔，高级工程师,研究方向：违法添加化学药物检测，E-mTi ： 573514575@qu. com(1.兰州市食品药品检验检测研究院，甘肃 兰州734050； 2.中国检验检疫科学研究院，北京 4047) 摘 要：建立了基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC - MS/MS )快速筛查中成药中违法添加8类42种化学药物的方法。
样品用乙睛超声提取，采用C o 柱(2. f mm x 40 mm , 4 3 pm )进行分离，以0. 1%甲酸-2mmol/P 乙酸鞍水溶液和0. 1%甲酸乙睛溶液为流动相梯度洗脱,动态多反应监测(d-MRM )采集模式进行定性和定量检测，夕卜标法定量。
结果表明，49种化学药物的线性范围为0~64ny/mL ,相关系数^5)为0. 093 2 -0. 099 5 ,检岀限为0. 220-2. 542 ng/j , 3个加标水平的回收率为36. 4% - 147% ,相对标准偏差为0. 30% -3.5%。
采用该方法测定20批实际样品,共检岀5批阳性样品,检岀的药物为二甲双A 、苯乙双A 、格列苯B 、西地那非、他达拉非和西布曲明，含量分别为0.076 97、4 153、0.0K41、69 500、2 400、770. 4 mg/kpo 该方法具有前处理操作简单、结果准确、灵敏度高等优点，适用于中成药中违法添加化学药物的快速。
LC-MS法测定中药制剂中违法添加的卡马西平
LC-MS法测定中药制剂中违法添加的卡马西平
王嘉翊;多凯;姜连阁;白政忠
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2010(023)002
【摘要】目的:目的:建立中药制剂中非法掺入的卡马西平的专属性检测方法.方法:提取液通过液相色谱质谱联用分析,利用色谱保留时间、一级质谱和二级质谱碎片信息3方面信息,对中药制剂中非法掺入的卡马西平进行定性鉴别.结果:在受试中药制剂中,有1种被检测到掺有卡马西平.结论:该方法选择性强,灵敏度高,可作为中药制剂中非法掺入卡马西平的有效检测方法.
【总页数】2页(P157-158)
【作者】王嘉翊;多凯;姜连阁;白政忠
【作者单位】黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,大庆;黑龙江省食品药品检验检测所,哈尔滨;黑龙江省食品药品检验检测所,哈尔滨;黑龙江省食品药品检验检测所,哈尔滨
【正文语种】中文
【中图分类】R927.1
【相关文献】
1.LC-MS法测定食用农产品中61种兽药残留及违法添加物 [J], 黄武平;宋洋
2.LC-MS/MS法检查抗风湿骨痛类纯中药制剂中非法添加吡罗昔康 [J], 孟军;戚颖欣
3.LC-MS法测定食用农产品中61种兽药残留及违法添加物 [J], 黄武平;宋洋;
4.LC-MS/MS法检查抗风湿骨痛类纯中药制剂中非法添加吡罗昔康 [J], 孟军; 戚颖欣
5.中药制剂及保健品中违禁添加降压药物的LC-MS/MS定性检测 [J], 高青;张喆;戴红;车宝泉;郭洪祝
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液相色谱-质谱联用测定抗风湿类中药中非法添加化学药物成分
时珍 国 医 国药 ２ １ 第 ２ 卷 第 ４期 ０ ０年 １
液 相 色 谱 一质 谱 联 用 测 定 抗 风 湿 类 中 药 中 非 法 添 加 化 学 药 物 成 分
药制 剂 中 非 法添 加 阿 司 匹 林 、 基 比林 、 洛 芬 、 氯 芬 酸钠 、 哚 美 辛 的有 效 检 测 方 法 。 氨 布 双 吲
关 键词 ： 高效液相 色谱仪 ； 超 高效液质联用仪 ； 抗风 湿类制 剂 ； 阿 司匹林 ； 氨 基 比林 ； 布洛芬 ； 双 氯芬酸钠 ；
吲哚 美 辛
中图分 类号 ： ２ ４ １ Ｒ ８ ．
文献标 识码 ： Ｂ
文章 编 号 ：０ ８０ ０ （０ ０ ０ －８ ７ ２ １ ０ －８ ５ ２ １ ）４ ４ － ０ ０
风 湿 性 及 类 风 湿 性 关 节 炎 是 常 见 病 、 发 病 ， 抗 风 湿 类 中 多 而 ２ ２ 质谱条件 电喷雾 电离 源 （ Ｓ ） 毛 细管 电压 ３ ５ｋ 孔 电 ． Ｅ Ｉ， ． Ｖ， 药 多 数 显 效 慢 ， 长 期 服 用 ， 安 全 性 高 。解 热 镇 痛 抗 炎 药 亦 称 需 但 ３ 萃 取 电 压 ２ ０Ｖ， 镜 电 压 １０ Ｖ； 温 １０ ， 溶 剂 温 度 ０Ｖ， ． 透 ． 源 ２℃ 脱 非 甾体 抗 炎 药 ， 中 除 苯胺 类 药 物 外 ， 大 多 数 药 物 兼 有 抗 风 湿 其 绝 ３０ ； ５ ％ 脱溶剂气体流速 ５０ Ｌ ｈ 孔 气体流 速 ５ ， 、 ０ ／ ， ０ｌ 正 负离子 Ｍｈ 作 用 ， 外 糖 皮 质 激 素 类 亦 具 有 抗 风 湿及 类 风 湿 作 用 。这 些 西 药 此 同时检测 ， 扫描方式采用全扫描一级质谱 、 全扫描二级质谱 （ ／ ＭＳ 的共 同特 点 是 疗 效 迅 速 ， 期 服 用 副 作 用 大 。 患 者 希 望 服 用 副 作 长 ＭＳ ， 量 采 集 范 围 １０— ０ 。 ）质 ０ ５ ０ 用小 ， 见效有快 的药 品， 造假者为迎合患者 的这一需求 ， 中成药 在 ２ ３ 对照 品溶液 的制备 精密 称取 阿 司匹林 、 ． 布洛芬 对照 品各 中非 法 添 加解 热 镇 痛 抗 炎 类 或 糖 皮 质 激 素 类 西 药 。 若 患 者 在 毫 ６ ｇ 氨 基 比林 、 氯 芬 酸 钠 、 哚 美 辛 对 照 品 各 ２ ｇ置 同 一 ０ｍ ， 双 吲 ０ｍ 不知情的情况下长期 、 大量 服 用 这 种 所 谓 的 纯 中 药 制 剂 ， 必 造 势 个 １０ｍ 量瓶 中， 甲醇至刻度 ， ０ ｌ 加 超声处理 １ ｎ 摇匀 ， ０ｍｉ， 作为对 成身体健康的损伤 。为有效打击此种制假掺伪 的不法行 为 ， 保证 照 品贮备溶液 ， 精密量 取对 照 品贮 备溶 液 １ｍ 置 １ 容 量瓶 ｌ ０ｍｌ 临床用药安全 ， 文参 考有关 文献 ， 究建立 了测 定 阿司 匹 本 研 中 ， 甲醇 至 刻 度 ， 匀 ， 得 。 加 摇 即 林 、 基 比林 、 洛 芬 、 氯 芬 酸 钠 、 哚 美 辛 的 检 验 方 法 ， 过 氨 布 双 吲 通 ２４ 供试 品溶液 的制备 若供试 品为片剂或丸剂 ， 细致研 磨粉 ． 应 Ｈ Ｌ Ｄ Ｄ、 Ｐ Ｃ ＭＳ ＭＳ 认 ， 快 速 准 确 地 判 断 中药 制 剂 中 Ｐ Ｃ— Ａ Ｕ Ｌ ／ ／ 确 可 碎 ， 取 约 ０ ３ｇ 置 具 塞 锥 形 瓶 中 ， 密加 入 甲醇 ５ ｌ称 重 ， 称 ． ， 精 Ｏｍ ， 超 是否非法掺入上述化学药物 ， 可供 药监 、 药检 部 门开展工作 时参 声处理 ２ ｉ， ０ ｍ ｎ 放冷 ， 甲醇 补足减失重量 ； 用 若供 试品为胶囊 ， 取 考。 、 出内容物 ， 细致研磨粉碎 ， 称取约 ０ ３ｇ置具塞锥形瓶 中， 密加 ． ， 精 １ 仪 器 与 试 药 入 甲醇 ５ ｌ称 重 ， ０ｍ ， 超声处 理 ２ ｉ， ０ ｍ ｎ 放冷 ， 甲醇补 足减失 重 用 Ａ ｉ ｎ １０ ｇｅｔ １０高 效 液 相 色 谱 仪 ， 特 世 （ ｔ ｓ Ａ Ｑ ＩＹ ｌ 沃 Ｗａｅ ） Ｃ ＵＴ ｒ 量； 若供试品为液体 ， 量取 ５ｍ 于 ５ ｌ ｌ Ｏｍ 容量 瓶 中， 甲醇 至刻 加 Ｕ Ｌ ｕｔｏＭｉ ｏ Ｐ Ｃ Ｑ ａ ｒ ｃ 超高效液相 色谱 串联 三重 四极杆 质谱 联用 ｔ ｒ 度 ， 匀 。取 上 述 样 品 溶 液 适 量 ， ０ ４ ｍ 滤 膜 滤 过 ， 续 滤 摇 用 ．５ Ｉ ｘ 取 仪 ， ｓＬｎ ４ １质谱 工作站 软件 ； Ｌ ０ Ｍａｓｙ ｘ ． Ａ ２４型 电子 天平 （ ｔｅ Ｍｅ ｌ ｔｒ 液， 得。 即 Ｔｌｄ ） ｕ ｏ ｏ 。 Ｐ超 纯 水 制 备 系 统 。 流 动 相 所 用 甲 醇 、 腈 为 色 谱 ｅ 乙 ２ ５ 线 性 关 系 考 察 精 密 称 取 阿 司 匹林 ６ ．７ｍｇ布 洛芬 ３ ． １ ． １４ ， ８４ 纯 ， 为 超 纯 水 ， 余 所 用 试 剂 为 分 析 纯 。 阿 司 匹 林 、 基 比林 、 水 其 氨 ｍｇ氨 基 比林 ２ ．５ ｍ ， 氯 芬 酸 钠 ２ ． ７ｍ ， 哚 美 辛 ２ ．９ ， ０ ２ ｇ 双 ０ ０ ｇ 吲 ０ Ｏ 布 洛 芬 、 氯 芬 酸 钠 、 哚 美 辛 对 照 品 由 中 国 药 品生 物 制 品 检 定 双 吲 ｍｇ １０ｍｌ 瓶 中 ， 甲 醇 至 刻 度 ， 声 处 理 １ ｉ， 匀 ， 为 置 ０ 量 加 超 ０ｍ ｎ摇 作 所 提 供 ， 风 湿 类 中药 样 品 为市 场 监督 抽 样 。 抗 对照 品储备溶液 ， 精密量取对照 品储备溶液适量稀释成系列浓度 ２ 方 法 与 结 果 的溶液 ， 作为对照品溶液 ， 分别 精密 吸取系列对 照 品溶 液 １ ｌ Ｏ ， ２ １ 色谱条件 色谱柱 为 Ｗａｒ ｕｆｅＣ８ ４ ６ｍ ． ｔ ｓＳ ｎ ｒ １ ． ｍ×１０ｍ ｅ ｉ （ ５ ｍ， 注入液相色谱仪 ， 定 ， 测 即得 。见 表 ２ 。 ５ ｍ） 以 乙腈 为 流动 相 （ ） 以 ０ ０ ｏ ＬＮ ４ ｃ一 ．５ Ｈ ｃ ； Ａ ， ．２ｍ ｌ Ｈ Ａ ００ ％ Ａ ／ 溶 液 为 流 动 相 （ ） 按 下 表 中 的 规定 进 行 梯 度 洗 脱 ； 测 波 长 ２０ Ｂ ， 检 ３ 表 ２ 对 照 品标 准 曲线 ｎ 体 积 流 量 １ ０ｍ／ ｉ； 样 量 １ ｌ柱 温 ３ ％ ； 论 板 数 按 ５ ｍ； ． ｌｍｎ 进 ０ ， ０ 理 个 峰 计 均 不低 于 ３００； 离 度 应 大 于 ３ ０ 分 。梯 度 洗 脱 表 见 表 １ 。
液相色谱-质谱联用法对非法制剂中的布洛芬检测分析
布洛芬进行了准确 、 快速 的检测 ， 现报告如下 ： １仪 器 和 试 验 药 品
表 １加样 回收率试验的测定结果 ｎ ６ ＝
的临床用 药安全 ， 本文采用液相色谱 一 质谱联用法对非法制剂 中的 含量 ， 计算 出回收率 ， 回收率详见表 ｌ 。
２５样品检测 。将对照品溶液以及供试品溶液分别 １ ， ． ０ Ｌ 加入 液相色谱检测仪中进行测定 ， 测得要检测供试 品的溶液 内含有布洛 使用的液相色谱仪 为 日本岛津生产 的 Ｌ 一０ Ｔ 质谱 联用仪为 芬 的含量为 ２ 毫克每粒 ；再分别精密量取供试 品溶液 以及对照品 Ｃ ２Ａ ； １ 美国 Ａ Ｂ生产 的 Ａ Ｉ３ ０ ； Ｐ 一 ２ ０ 对照品为中国药 品生物制 品检定所生产 溶液各 ｌ 毫升 ， 放置到．０ １０毫升的量瓶 内 ， 加人流动相至量瓶 刻度 ， 布洛芬… 检验对象为一种河南省 生产 的标有 “ 中药 一风湿病 的克 摇晃均 匀 ， ； 纯 再取 照品溶液 以及供试 品溶液 各 ５ Ｌ 用液相色谱 一质 ， 星” 等字样 的非法生产药品 ； 色谱纯 为乙腈 ； 使用用水为 自制 的超纯 谱联用仪进行正离子检测 ， 对对照品的溶液进行多分应监测和质谱 水 ； 它 的试 剂 全 部 为 分 析 纯 。 其 分析 ， 结果发现 ， 品的溶液产生了和对照品溶液一致 的离 子碎 供试 ２方 法 与 结 果 片。 所以可 以通过 以上信息和结论得 出， 检测对象“ 中药 一风湿病 纯 ２１色谱 条件 。使用 的色谱柱为 Ｖ ｎ ｓ １ 柱 ，规格为 的克星” ． ｅ ｕｉ ＭＰ Ｃ ８ ｌ 等字样 的非法生产药品中含有非法添加 的布洛芬。 １０毫米 ４６毫米 ； ５ ． 流动相为醋酸铵 一乙腈 ， 酷酸铵浓 度为 ０ １ ｏ ．ｔ ｌ ０ｏ ３讨 论 每升 ， 含有 百分 之一的三 乙胺 ， 使用 冰醋酸调节 Ｐ Ｈ值到 ３５ 流速 ． ； 目前 市面上 出现 的这 些添加西药成 分的非法药物 制剂多为复 为１ ． ０毫升 每分钟 ； 柱温 为三十摄氏度 ； 检测 的波长为 ２ ３纳米 ； 杂 的多种成分药物 ， ６ 进 所以在进行监督检测时 ， 存在很大 的困难 ， 以 所
抗风湿类中成药批准件编号：2009025抗风湿类中成药中非法添加化学药品补充检验方法
批准件编号：2009025国家食品药品监督管理局二〇〇九年十二月七日抗风湿类中成药中非法添加化学药品补充检验方法本补充检验方法适用于抗风湿类中成药中非法添加氢化可的松，地塞米松、醋酸泼尼松、阿司匹林、氨基比林、布洛芬、双氯芬酸钠、吲哚美辛、对乙酰氨基酚、甲氧苄啶、吡罗昔康、萘普生、保泰松等13种化学药品的快速筛查和确证。
该方法中，薄层色谱法用于快速筛查;高效液相色谱法用于定性检查;经快速筛查或定性检查结果为阳性的样品，需经液——质联用方法验证后出具检验报告。
我局已批复的药品补充检验方法和检验项目批准件(批准件编号2006006)也可同时使用。
一、薄层色谱法[检查](1)阿司匹林、吲哚美辛、布洛芬、双氯芬酸钠、萘普生、对乙酰氨基酚、保泰松、吡罗昔康取供试品一次服用量(片剂除去包衣;胶囊剂取内容物:大蜜丸剪碎，加适量硅藻土)，研细，加甲醇10ml，超声处理20分钟，放至室温，滤过；或取液体制剂，水浴蒸干，加甲醇10ml超声外理20分钟，放至室温。
滤过作为供试品溶液。
分别取阿司匹林、吲哚美辛、布洛芬、双氯芬酸钠、萘普生、对乙酰氨基酚、保泰松和吡罗昔康对照品，加甲醇制成每ml含1mg的溶液作为对照品溶液。
照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，分别取供试品与对照品溶液各10ul点于同一硅胶GF254薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯-冰乙酸(15:5:1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，应不得显相应的荧光淬灭斑点。
(2)氨基比林、甲氧苄啶、地塞米松、氢化可的松、醋酸波尼松分别取氨基比林、甲氧苄啶、地塞米松、氢化可的松、醋酸波尼松对照品，加甲醇制成每 ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB试验，分别取[检查](1)项下供试品溶液和上述对照品溶液各10ul点于同一硅胶 GF254薄层板上，以三氯甲烷-丙酮-甲醇-浓氨(9:3:1:0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(254nm)下检视。
抗风湿类中成药中非法加入尼美舒利的检测
ｎｍ ｓｌ ｅ ａ １００ ｉ ｅｕｉ ｗ ｓ ０ ．４—６０ ２ ￣ ／ Ｌ， ＝ ． ９ （ ６ ． ｈ ｖｒｇ ｅｏｅ ａ ｗ ｓ ９ ． ９ ａｄ Ｓ ａ １９ ％ （ ６ ． ｄ ０ ．４ ｇ ｍ ｒ ０ ９ ９９ ｎ＝ ） Ｔ ｅ ａｅａｅ ｒｃｖｒ ｒ ｅ ａ ９４ ％ ｎ Ｒ Ｄ ｗ ｓ ．４ ｙ ｔ ｎ＝ ）
Ｄｅ ｅ ｍ ｉ ａ ｉ ｎ ｆ Ｎｉ ｅ ｕ ｉ ｅ Ｉｌ ｇ ｌｙ ｔ ｒ ｎ ｔｏ ｏ ｍ ｓ ｌｄ ｌ ａ ｌ Ａｄ ｄ ｉ ｔｒ ｕ ａ ｉ ａ ｉｉ ｎ ｌ ｅ ｄｅ ｎ Ａｎ ｉｈｅ ｍ ｔｃ Ｔｒ ｄ ｔｏ ａ Ｃｈ ｎｅ ｅ ｉ ｓ
Ｐａ ｅ ｔ Ｍ ｅ ｃｎｅ ｂ ＨＰＬＣ ｔｎ ｄｉｉ ｓ ｙ
Ａｂｓｒ ｃ ： ｔ ａ ｔ ０ ｅ ｔｖ Ｔｏ ｓａ ｌｓ ａ ｃ ｉｅ ｅ ｔ ｂｉｈ ｍｅｈ ｄ ｏ ｔ ｅ ｅｅ ｍｉ ｔ ｎ ｆ ｍｅ ｕ ｉｅ ｌｅ ａｌ ａ ｄ ｄ ｎ ｎｉｈ ｕ ｔｅ ｒ ｄ ｔ ｎ ｌ ｔｏ ｆｒ ｈ ｄ ｔｒ ｎａｉ ｏ ｎｉ ｓ ｌｄ ｉ ｇ ｌｙ ｄ ｅ ｉ ａ ｔｒ ｅ ｍａｉ ｔａ ｉｉ ａ Ｃｈ ｎ ｓ ｐａｅ ｏ ｌ ｏ ｉｅｅ ｔｎｔ
操 作 简便 、 确 ， 准 可用 于定性 和 定 量检 测抗 风 湿 类 中成 药 中非 法添 加 的化 学物 质 尼 美舒 利 。
关键词 ： 高效 液 相 色谱 法 ； 风 湿 类 中成 药 ； 法添 加 ； 美舒 利 抗 非 尼 中 图分 类 号 ： ９ ７ １Ｒ ７ １ Ｒ ２ ． ； ９ １ ． 文献 标 识 码 ： Ａ 文章 编 号 ：０ ６— ９ １２ １ ）０— ０６— ２ １ ０ ４ ３ （０ ０２ ０ ４ ０
ＣＭ ｎ ，Ｇｕ Ｆｅｙ ｏ ｉｕ
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时珍国医国药 ２０１０ 年第 ２１ 卷第 ４ 期
液 相 色 谱 －质 谱 联 用 测定抗风湿类中药中非法添加化学药物成分
来国防１ ， 程 宾１ ， 鲁 静２
（１．云南省食品药品检验所，云南 昆明 ６５００１１； ２．中国药品生物制品检定所，北京 １０００５０）
表 ２ 对照品标准曲线
对照品
回归方程
ｒ
线性范围 ／μｇ· ｍｌ －１
阿司匹林 氨基比林
布洛芬 双氯芬酸钠
吲哚美辛
Ｙ ＝２．９２ｅ ＋００４Ｘ ＋ １．３５ｅ ＋００５ Ｙ ＝９．００ｅ ＋００３ Ｘ － ２．４５ｅ ＋００２ Ｙ ＝５．２０ｅ ＋００４ Ｘ ＋ １．１０ｅ ＋００４ Ｙ ＝１．８３ｅ ＋００４ Ｘ ＋ ５．５７ｅ ＋００３ Ｙ ＝１．８２ｅ ＋００４ Ｘ ＋ ５．２４ｅ ＋００３
［ ４ ］ 周 艳，胡 琳，张宏祥，等．检查天麻胶囊中添加吲哚美辛的方法 研究［ Ｊ］ ．中国药事，２００６，２０（１０） ：６１２．
［ ５ ］ 马春燕，许 啸，冯益明，等．天麻胶囊中非法掺入西药吲哚美辛的 检出方法［ Ｊ］ ．中国药品标准，２００７，８（２） ：６６．
· ８４８· 万方数据
摘要：目的 建立快速、准确、高灵敏度的测定抗风湿类中药制剂中非法添加阿司匹林、氨基比林、布洛芬、双氯芬酸钠、吲
哚美辛分析方法。 方法 采用 ＨＰＬＣ －ＤＡＤ、ＵＰＬＣ ／ＭＳ ／ＭＳ 法对非法掺入的化学药物进行定性鉴别，并以 ＨＰＬＣ 测定含 量。 结果 受试制剂中检测到掺有氨基比林、布洛芬、双氯芬酸钠、吲哚美辛。 结论 此方法灵敏准确，可作为抗风湿类中 药制剂中非法添加阿司匹林、氨基比林、布洛芬、双氯芬酸钠、吲哚美辛的有效检测方法。
万方数据
２．２ 质谱条件 电喷雾电离源（ ＥＳＩ），毛细管电压 ３．５ ｋＶ，孔电 ３０ Ｖ，萃取电压 ２．０ Ｖ，透镜电压 １．０ Ｖ；源温 １２０℃，脱溶剂温度 ３５０℃；脱溶剂气体流速 ５００ Ｌ ／ｈ，孔气体流速 ５０ Ｌ ／ｈ，正、负离子 同时检测，扫描方式采用全扫描一级质谱、全扫描二级质谱（ ＭＳ ／ ＭＳ），质量采集范围 １００ ～５００。 ２．３ 对照品溶液的制备 精密称取阿司匹林、布洛芬对照品各 ６０ ｍｇ，氨基比林、双氯芬酸钠、吲哚美辛对照品各 ２０ ｍｇ 置同一 个 １００ ｍｌ 量瓶中，加甲醇至刻度，超声处理 １０ ｍｉｎ，摇匀，作为对 照品贮备溶液，精密量取对照品贮备溶液 １ ｍｌ 置 １０ ｍｌ 容量瓶 中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。 ２．４ 供试品溶液的制备 若供试品为片剂或丸剂，应细致研磨粉 碎，称取约 ０．３ ｇ，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 ５０ ｍｌ，称重，超 声处理 ２０ ｍｉｎ，放冷，用甲醇补足减失重量；若供试品为胶囊，取 出内容物，细致研磨粉碎，称取约 ０．３ ｇ，置具塞锥形瓶中，精密加 入甲醇 ５０ ｍｌ，称重，超声处理 ２０ ｍｉｎ，放冷，用甲醇补足减失重 量；若供试品为液体，量取 ５ ｍｌ 于 ５０ ｍｌ 容量瓶中，加甲醇至刻 度，摇匀。 取上述样品溶液适量，用 ０．４５ μｍ 滤膜滤过，取续滤 液，即得。 ２．５ 线性关系考察 精密称取阿司匹林 ６１．４７ ｍｇ，布洛芬 ３８．４１ ｍｇ，氨基比林 ２０．２５ ｍｇ，双氯芬酸钠 ２０．０７ ｍｇ，吲哚美辛 ２０．０９ ｍｇ 置 １００ ｍｌ 量瓶中，加甲醇至刻度，超声处理 １０ ｍｉｎ，摇匀，作为 对照品储备溶液，精密量取对照品储备溶液适量稀释成系列浓度 的溶液，作为对照品溶液，分别精密吸取系列对照品溶液 １０ μｌ， 注入液相色谱仪，测定，即得。 见表 ２。
从左单至右据依浊次是（阿Ｐ 司Ｔ｛匹）林蚪（ ａ谶 ｓｐｌ）晋、氨ｎ基Ａ比果林爆（ ａｊｂ国ｌ） 、
双氯芬酸钠（ ｓｌｆｓｎ） 、吲哚美辛（ ｙｄｍｘ） 、布洛芬（ ｂｌｆ） 图 １ 对照品色谱图
图 ３ 对照品质谱图
３ 结论 由于中药组分的复杂性，所以有必要采用高选择性的分析手
段。 本法可快速、准确地对中药制剂中非法添加阿司匹林、氨基 比林、布洛芬、双氯芬酸钠、吲哚美辛同时进行检测，专属性强，５ 种化学药物可达基线分离。 本法同时提供对照品和样品分子离 子峰、二级质谱碎片和液相色谱保留时间及 ＵＶ 光谱信息，对化 学物质达到准确定性、定量检测，先进可行，可作为抗风湿类中药 制剂中质量和安全用药的控制。
关键词：高效液相色谱仪； 超高效液质联用仪； 抗风湿类制剂； 阿司匹林； 氨基比林； 布洛芬； 双氯芬酸钠；
吲哚美辛
中图分类号：Ｒ２８４．１ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００８－０８０５（２０１０）０４－０８４７－０２
风湿性及类风湿性关节炎是常见病、多发病，而抗风湿类中 药多数显效慢，需长期服用，但安全性高。 解热镇痛抗炎药亦称 非甾体抗炎药，其中除苯胺类药物外，绝大多数药物兼有抗风湿 作用，此外糖皮质激素类亦具有抗风湿及类风湿作用。 这些西药 的共同特点是疗效迅速，长期服用副作用大。 患者希望服用副作 用小，见效有快的药品，造假者为迎合患者的这一需求，在中成药 中非法添加解热镇痛抗炎类或糖皮质激素类西药。 若患者在毫 不知情的情况下长期、大量服用这种所谓的纯中药制剂，势必造 成身体健康的损伤。 为有效打击此种制假掺伪的不法行为，保证 临床用药安全，本文参考有关文献［１ ～５］ ，研究建立了测定阿司匹 林、氨基比林、布洛芬、双氯芬酸钠、吲哚美辛的检验方法，通过 ＨＰＬＣ －ＤＡＤ、ＵＰＬＣ ／ＭＳ ／ＭＳ 确认，可快速准确地判断中药制剂中 是否非法掺入上述化学药物，可供药监、药检部门开展工作时参 考。 １ 仪器与试药
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时珍口国Ｈ医皓国荨药毒２０（１０１ｑ年ｍ第ｘ）２蚪１ 卷谶第晋４Ｆ期ＩＡ果爆国ＬＩＳＨＩＺＨＥＮ
ＭＥＤＩＣＩＮＥ
Ⅻ智浊睇钾（ａ Ｔ｛ａＵ）蚪谶晋ＦＩＡ果爆国
ＡＮＤ ＭＡＴＥＲＩＡ ＭＥＤＩＣＡ ＲＥＳＥＡＲＣＨ ２０１０ＶＯＬ．２１ ＮＯ．４
依法测定，当信噪比（Ｓ ／Ｎ）为 ３ 时，阿司匹林、氨基比林、布洛芬、 双氯芬酸钠、吲哚美辛检测限分别为 ９１ ｎｇ，２５２ ｎｇ，１．０５６μｇ，５５８
时间 ｔ ／ｍｉｎ ０ ８ ２０
表 １ 梯度洗脱Βιβλιοθήκη 流动相 Ａ（％） １０ ６０ ３０
流动相 Ｂ（％） ９０ ４０ ７０
收 稿 日 期 ：２００９ －０７ －１８ ； 修 订 日 期 ：２００９ －１０ －２９ 基金项目：国家科技支撑计划项目（ Ｎｏ．２００６ＢＡＩ１４Ｂ０３ －２） 作者简介：来国防（１９７３－） ，男（ 汉族） ，河南 柘城人，现任云 南省食 品药品 检验 所 副 主 任 药 师，博 士 学 位 ，主 要 从 事 中 草 药 活 性 成 分 及 中 药 质 量 标 准 研究工作．
参考文献：
咀骂匝＃（。ａｂ Ｔ）蚪谶晋ｎＡ果爆国
图 ２ 对照品 ＵＶ 光谱图
２．９ 质谱确证 为保证检验结果准确无误，对可疑阳性样品进行 了质谱确证，供试品中在与氨基比林、布洛芬、双氯芬酸钠、吲哚 美辛对照品色谱保留时间及光谱图都相一致的样品进行质谱分
［ １ ］ 刘起中，李慧义，杭太俊．中药制 剂中非法掺 入化学药物 成 分 的 测
０．９９５ ６ ０．９９９ ８ ０．９９９ ５ ０．９９９ ６ ０．９９９ ５
３０．７３５ ～３０７．３５ １０．１２５ ～１０１．２５ １９．２０５ ～１９２．０５ １０．３５ ～１００．３５ １０．４５ ～１００．４５
２．６ 回收率实验 取抗风湿中药样品 ０．１５ ｇ，各 ６ 份，精密称定， 置 ２５ ｍｌ 量瓶中，分别加上述对照储备溶液 ６，７．５，９ ｍｌ 分别加甲 醇至刻度，超声处理 ２０ ｍｉｎ，放冷，摇匀，滤过， 进行测定，计算加 样回收率，阿司匹林、氨基比林、布洛芬、双氯芬酸钠、吲哚美辛的 平 均 回 收 率 分 别 为 ９４．２５％， ９９．６７％， ９５．３１％， ９７．６８％， ９８．０９％，ＲＳＤ 分别为 ３．１２％，１．４５％，１．９９％，１．１９％，１．３８％。 ２．７ 检测限 取“２．５” 项下低浓度混合对照品溶液，逐渐稀释，
ｎｇ，１．０９２ μｇ。 ２．８ 样品测定 经对多批次对抗风湿类中药制剂进行检测，结果 在风湿灵胶囊、风痛宁片及某私人诊所配制的抗风湿制剂供试品 溶液的液相色谱中呈现与对照品色谱图保留时间有相一致的色 谱峰，同时对与对照品色谱保留时间一致的色谱峰，利用 ＤＡＤ 分 析紫外光谱图，结果光谱图也与对照品一致，对检测到的成分进 行了定量，结果是：风湿 灵 胶囊 含 布 洛 芬 ２．０８％、双 氯 芬 酸 钠 １．９４％、吲哚美辛 １．０５％；风痛宁片含双氯芬酸钠 １．２７％；某私 人诊所配制的抗风湿制剂含氨基比林 ０．８９％。 对照品色谱图及 ＵＶ 光谱图见图 １ ～２。
析，结果供试品中一级质谱分子离子峰及二级质谱主要碎片离子 都与对照品的一级质谱分子离子峰及二级质谱主要碎片离子相 一致，即氨基比林（ ２３２．１、１５９．１ 、１１３．１） 、布洛芬（ ２０５．２、１６１．２ ） 、 双氯芬酸钠（ ２９４．０、２５０．０、２１４．０ ）、吲 哚美 辛 （３５６．０；３１２．１、 ２９７．１、２７０．１）。 对照品质谱图见图 ３。
Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ 高 效 液 相 色 谱 仪， 沃 特 世 （ Ｗａｔｅｒｓ） ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ Ｑｕａｔｔｒｏ ＭｉｃｒｏＴＭ 超高效液相色谱串联三重四极杆质谱联用 仪，ＭａｓｓＬｙｎｘＴＭ ４．１ 质谱工作站软件；ＡＬ２０４ 型电子天平（ Ｍｅｔｔｌｅｒ Ｔｏｌｅｄｏ）。 ＵＰ 超纯水制备系统。 流动相所用甲醇、乙腈为色谱 纯，水为超纯水，其余所用试剂为分析纯。 阿司匹林、氨基比林、 布洛芬、双氯芬酸钠、吲哚美辛对照品由中国药品生物制品检定 所提供，抗风湿类中药样品为市场监督抽样。 ２ 方法与结果 ２．１ 色谱条件 色谱柱为 Ｗａｔｒｅｓ Ｓｕｎｆｉｒｅ Ｃ１８ （４．６ ｍｍ ×１５０ ｍｍ， ５ μｍ）；以乙腈为流动相（Ａ），以 ０．０２ ｍｏｌ ／Ｌ ＮＨ４ Ａｃ －０．０５％ＨＡｃ 溶液为流动相（ Ｂ），按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长 ２３０ ｎｍ；体积流量 １．０ ｍｌ ／ｍｉｎ；进样量 １０ μｌ，柱温 ３０℃；理论板数按 ５ 个峰计均不低于 ３ ０００；分离度应大于 ３。 梯度洗脱表见表 １。