马齿苋黄酮有效部位改善胰岛素抵抗的作用机理研究
马齿苋的医学效用
马齿苋的医学效用马齿苋是一种常见的野菜，也是中药。
在中国，马齿苋的历史可以追溯到唐代。
在传统医学中，马齿苋被认为具有多种功效。
此外，现代科学研究也证实了马齿苋的一些医学效用。
1. 消炎解毒中医认为，马齿苋有解毒的作用。
现代科学研究也证实了这一点。
实验发现，马齿苋具有抗氧化、抗炎和抗菌作用。
此外，马齿苋主要成分为配糖体和黄酮类化合物等，这些化合物具有明显的抗氧化和抗炎作用。
2. 降血糖现代研究表明，马齿苋还具有降血糖作用。
实验发现，马齿苋中的黄酮类化合物能够降低血糖和胰岛素水平，从而具有治疗糖尿病的潜力。
3. 降血脂马齿苋还具有降血脂作用。
实验发现，马齿苋中的黄酮类化合物能够调节胆固醇代谢，降低血脂和三酰甘油水平。
这些作用对于预防心血管疾病具有重要意义。
4. 抗肿瘤马齿苋还具有一定的抗肿瘤作用。
实验发现，马齿苋中的黄酮类化合物能够抑制肿瘤细胞生长。
此外，马齿苋中的多糖类化合物也具有抗肿瘤作用，能够刺激免疫系统，增强机体的抗肿瘤能力。
5. 其他功效此外，马齿苋还具有多种其他功效。
例如，马齿苋可以调节免疫系统，增强机体免疫力。
同时，马齿苋还可以保护肝脏、降压、缓解疲劳等。
总体来看，马齿苋具有多种医学效用，包括消炎解毒、降血糖、降血脂、抗肿瘤及其他功效。
然而，需要注意的是，马齿苋作为一种野菜和中药，其功效的确切性和安全性还需要进一步研究和验证。
故在医学应用中，应慎重对待，应遵循专业人员的指导，不要盲目使用。
马齿苋黄酮类化合物的提取及活性研究综述
马齿苋黄酮类化合物的提取及活性研究综述马齿苋属于苋科植物，其叶片富含黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等生物活性，因而备受关注。
黄酮类化合物是一类具有芳香环结构的生物活性化合物，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗菌、抗病毒、抗血小板聚集等多种生理活性。
本文将对马齿苋黄酮类化合物的提取及其活性研究进行综述。
一、马齿苋黄酮类化合物的提取方法1. 传统提取方法传统的提取方法包括水提取、乙醇提取、超临界流体萃取等。
水提取方法简单易操作，但提取效率较低；乙醇提取方法提取效率高，但可能对其中活性成分造成损伤；超临界流体萃取方法提取效率高，但设备成本高，操作复杂。
2. 现代提取方法现代提取方法包括超声波提取、微波辅助提取、超临界流体萃取等。
超声波提取方法能够加速提取过程，提高提取效率；微波辅助提取方法快速高效；超临界流体萃取方法提取效率高。
3. 技术改进目前，针对马齿苋黄酮类化合物的提取方法，研究人员还在不断尝试新的技术改进，以提高提取效率和降低成本，例如采用复合酶法、纳米技术等手段。
二、马齿苋黄酮类化合物的活性研究1. 抗氧化活性马齿苋黄酮类化合物具有很强的抗氧化活性，能够清除自由基和抑制氧化应激反应，有助于减缓细胞老化和疾病进程。
2. 抗炎活性研究表明，马齿苋黄酮类化合物能够抑制炎症介质的释放，对炎症反应具有明显的抑制作用，有望成为治疗炎症性疾病的新药物。
3. 抗肿瘤活性马齿苋黄酮类化合物对多种肿瘤细胞具有抑制作用，能够诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖和转移，对多种肿瘤具有显著的抑制作用。
4. 抗菌活性研究发现，马齿苋黄酮类化合物对多种细菌具有抑制作用，包括金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链霉菌等，具有很好的抗菌活性。
5. 其他活性马齿苋黄酮类化合物还具有抗病毒、抗血小板聚集、抗过敏等多种生理活性，有望成为开发多功能健康食品和药物的重要原料。
三、展望马齿苋黄酮类化合物作为具有广泛生物活性的天然产物，具有很大的药用和开发潜力。
马齿苋黄酮类化合物的提取及活性研究综述
马齿苋黄酮类化合物的提取及活性研究综述马齿苋（Portulaca oleracea）是一种常见的野菜，被广泛应用于药用和食用领域。
黄酮类化合物是马齿苋具有药用价值的重要成分之一。
黄酮类化合物具有多种药理活性，包括抗氧化、抗炎、抗癌、抗菌等作用。
提取马齿苋中的黄酮类化合物并研究其活性具有重要意义。
目前，提取马齿苋黄酮类化合物的方法主要有溶剂提取、超声波辅助提取、微波辅助提取、超临界流体提取等。
超声波辅助提取是一种高效、快速的提取方法，具有较高的提取率和较短的提取时间。
超临界流体提取也是一种新兴的提取方法，能够提高提取效率并降低有机溶剂的使用量。
提取马齿苋黄酮类化合物后，常通过色谱技术进行分离纯化。
常用的色谱技术包括硅胶柱层析、高效液相色谱、逆相高效液相色谱等。
逆相高效液相色谱具有分离效率高、分离时间短等优点。
研究表明，马齿苋黄酮类化合物具有多种药理活性。
马齿苋黄酮类化合物具有较强的抗氧化活性。
这是由于马齿苋黄酮类化合物具有多酚结构，能够捕捉和中和自由基，从而减少氧化反应的发生。
马齿苋黄酮类化合物具有良好的抗炎活性。
这是由于马齿苋黄酮类化合物能够抑制炎症因子的产生和释放，从而减轻炎症反应。
马齿苋黄酮类化合物还具有一定的抗癌活性。
研究表明，马齿苋黄酮类化合物能够诱导肿瘤细胞凋亡、抑制肿瘤细胞增殖和迁移，从而发挥抗癌作用。
马齿苋黄酮类化合物的提取及活性研究在药用和食用领域具有重要意义。
进一步研究可以从以下几个方面展开：优化提取工艺，提高提取效率；研究马齿苋黄酮类化合物的结构与活性之间的关系；探索马齿苋黄酮类化合物在药物开发和食品工业中的应用前景。
希望本综述可以为相关研究提供参考和借鉴。
马齿苋药理作用及临床应用的研究进展
马齿苋药理作用及临床应用的研究进展引言马齿苋是一种生长在热带和亚热带地区的多年生藤本植物，也是一种传统的中药材。
近年来，针对马齿苋的药理作用及临床应用进行了大量的研究，取得了一定的成果。
本文将分别介绍马齿苋的化学成分和药理作用，以及其在临床应用中的研究进展。
马齿苋的化学成分马齿苋是一种含有丰富生物活性成分的药材，其中主要化学成分包括黄酮类化合物、三萜类化合物、四环素类化合物、生物碱等。
其中，黄酮类化合物是马齿苋最具代表性的化学成分。
常见的黄酮类化合物有石柱花素、木犀草素、芒柄芩素等。
马齿苋的药理作用抗菌作用马齿苋中含有多种黄酮类化合物，具有很强的抗菌作用。
多项研究表明，马齿苋提取物对多种细菌、真菌和病毒均具有抑制作用，包括金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌、甲型流感病毒等。
抗炎作用马齿苋中的黄酮类化合物具有明显的抗炎作用，能够抑制炎症介质的合成和释放，并减轻免疫细胞的趋化作用。
研究发现，马齿苋可通过抑制花生四烯酸代谢和细胞因子的释放，缓解过敏性疾病和肺部炎症。
抗肿瘤作用马齿苋的黄酮类化合物还表现出抗肿瘤作用，能够抑制癌细胞的增殖、诱导其凋亡，并阻断其向周围组织和淋巴结的转移。
研究还显示，马齿苋提取物对多种肿瘤细胞系均具有明显的细胞毒性，包括肝癌、乳腺癌、肺癌、结直肠癌等。
保护心脑血管作用马齿苋的黄酮类化合物可改善心脏的微循环和血管的弹性，减少血液黏稠度，降低血压和血脂，并增强心脏的抗氧化能力。
此外，马齿苋还具有减轻中风后的神经功能缺陷和改善记忆力的作用。
马齿苋在临床应用中的研究进展目前，马齿苋已经在多个方面得到了临床应用。
抗炎治疗针对马齿苋具有的抗炎作用，已有多项临床研究将其应用于炎症性疾病的治疗中，包括过敏性皮肤炎、慢性咳嗽、支气管炎等。
其中，一项针对150例慢性支气管炎患者的研究显示，口服马齿苋提取物可显著改善患者的临床症状和肺功能，并减少急性加重的发生率。
抗癌治疗近年来，越来越多的研究着眼于马齿苋在肿瘤治疗中的应用。
马齿苋黄酮类化合物的提取及活性研究综述
马齿苋黄酮类化合物的提取及活性研究综述马齿苋（Portulaca oleracea）是一种常见的野菜，含有丰富的黄酮类化合物，具有多种生物活性。
黄酮类化合物是一类具有特殊结构的天然物质，广泛存在于植物中，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗菌等多种生物活性。
马齿苋黄酮类化合物的提取方法可以使用传统的水提、醇提、超声波提取等方法。
超声波提取是一种常用且效果较好的方法，能够提高提取效率和提取速度。
不同的提取方法对黄酮类化合物的提取效果有差异，因此需要根据实际情况选择合适的提取方法。
1. 抗氧化活性：黄酮类化合物具有很强的抗氧化活性，能够清除自由基，延缓衰老，保护细胞免受氧化损伤。
马齿苋黄酮类化合物的抗氧化活性主要通过清除ROS（活性氧自由基）和提高SOD（超氧化物歧化酶）等方式发挥作用。
2. 抗炎活性：黄酮类化合物具有很好的抗炎作用，能够抑制炎症反应、减少炎症介质的释放。
马齿苋黄酮类化合物可以抑制肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）等炎症因子的产生，发挥抗炎作用。
3. 抗肿瘤活性：黄酮类化合物具有很好的抗肿瘤活性，能够抑制肿瘤细胞的增殖、诱导肿瘤细胞凋亡。
马齿苋黄酮类化合物可以抑制肿瘤细胞的增殖和迁移，促进肿瘤细胞凋亡，对多种肿瘤具有显著的抑制作用。
4. 抗菌活性：黄酮类化合物具有很好的抗菌活性，能够抑制多种病原微生物的生长。
马齿苋黄酮类化合物可以抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等致病菌的生长，具有很好的抗菌作用。
马齿苋黄酮类化合物具有多种生物活性，包括抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗菌等活性。
黄酮类化合物的提取方法需要根据实际情况选择合适的方法。
在活性研究中，需要进一步明确马齿苋黄酮类化合物的作用机制，以及其在药物开发和食品保健品等方面的应用前景。
马齿苋药理作用和应用研究进展
马齿苋药理作用和应用研究进展【摘要】马齿苋是一种常见的草本植物，具有多种药理作用和广泛的应用价值。
本文对马齿苋药理作用和应用研究进行了概述，包括其在治疗心血管疾病、抗肿瘤和抗炎症、调节免疫系统、抗氧化和抗衰老等方面的作用。
通过对马齿苋在药理作用和应用研究中的意义、未来研究方向和应用前景的探讨，揭示了马齿苋在现代医学中的潜在价值和发展前景，为马齿苋的进一步研究和应用提供了新的视角和思路。
【关键词】马齿苋、药理作用、心血管疾病、抗肿瘤、抗炎症、免疫系统、抗氧化、抗衰老、意义、未来研究方向、应用前景1. 引言1.1 马齿苋药理作用和应用研究进展概述马齿苋是一种常见的草本植物，被人们广泛用于食用和药用。
近年来，对马齿苋的药理作用和应用进行了深入研究，取得了一系列重要的进展。
马齿苋被发现具有抗氧化、抗炎症、抗肿瘤、调节免疫系统等多种药理作用，对心血管疾病、肿瘤、炎症等疾病具有一定的预防和治疗作用。
马齿苋还被广泛应用于抗衰老和保健领域，受到人们的高度关注和青睐。
2. 正文2.1 马齿苋药理作用研究马齿苋是一种常见的野生草药，具有多种药理作用。
对马齿苋药理作用的研究表明，其主要成分包括多糖、有机酸、挥发油、硫化物等。
马齿苋具有增强机体免疫功能、抗氧化、抗肿瘤、抗炎以及调节心血管功能等作用。
马齿苋提取物对多种肿瘤细胞具有明显的抑制作用，可以抑制肿瘤细胞的生长和扩散，同时还能诱导肿瘤细胞凋亡。
马齿苋还被发现对抗炎有明显效果，可以抑制促炎细胞因子的释放，减轻炎症反应。
研究还发现马齿苋具有调节心血管功能的作用，可以降低血压、抑制血小板聚集、改善微循环等。
马齿苋还被发现对调节免疫系统有益，可以增强机体的免疫力，提高抵抗力。
综合以上研究结果可以看出，马齿苋具有广泛的药理作用，对人体健康具有积极的影响。
还需要进一步深入研究其具体机制和临床应用价值，以更好地推动其在医药领域的应用和发展。
2.2 马齿苋在治疗心血管疾病中的应用近年来，越来越多的研究表明马齿苋具有显著的心血管保护作用，被广泛用于治疗心血管疾病。
马齿苋抗糖尿病活性成分的研究
马齿苋抗糖尿病活性成分的研究金妍;徐华影;陈琛【期刊名称】《中成药》【年(卷),期】2015(037)001【摘要】目的研究马齿苋抗糖尿病的活性成分.方法马齿苋全草用75％乙醇提取,利用硅胶、凝胶等柱色谱及制备液相色谱进行分离,并根据有机波谱技术鉴定了化合物结构,进一步通过测定各个化合物对胰岛素抵抗的HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响以及黄酮苷类化合物对Akt磷酸化水平的影响来评价其抗糖尿病活性.结果从马齿苋中分离鉴定了9个化合物,分别为芹菜素-4'-O-α-L-鼠李糖苷(1),橙皮苷(2),山柰酚(3),木栓酮(4),6,7-二羟基香豆素(5),反式-对香豆酸(6),金莲花碱(7),咖啡酸(8),二十八烷酸(9),此外化合物1～4能够显著提高胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗,其中化合物1的效果最为显著并能降低该细胞Akt的磷酸化水平.结论化合物1为首次从该植物中分离得到并且具有较强的抗糖尿病活性.【总页数】5页(P124-128)【作者】金妍;徐华影;陈琛【作者单位】天津医科大学第二医院,天津300211;天津医科大学第二医院,天津300211;天津医科大学第二医院,天津300211【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.玉米须抗糖尿病活性成分的分离及其作用机制研究 [J], 陈琛;徐华影2.桑叶抗糖尿病活性成分研究 [J], 王娅;李嘉盈3.影响肝糖代谢的中药活性成分抗糖尿病研究进展 [J], 岳颖;周珺;贾正平;李茂星;张汝学4.马齿苋多糖抗糖尿病作用的实验研究 [J], 李玉萍;刘志勇;谢国秀;苏虎;周春丽;王德解5.西红花抗糖尿病活性成分及作用机制研究进展 [J], 江石平;朱婉萍因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
马齿苋药理作用和应用研究进展
马齿苋药理作用和应用研究进展马齿苋是一种常见的野生草本植物，又名伞形科马齿苋属，具有丰富的药用价值。
它常生长在田边、路旁、草地和田间地头等地方，是一种十分常见的野生植物。
其药用部位为全草，具有消炎、止血、利尿、消肿等作用，是一种药食两用的植物。
据相关文献报道，马齿苋在中医药中被用来治疗各种疾病，包括感冒、发热、咳嗽、喉痛、眩晕、高血压、糖尿病等。
马齿苋的药理作用主要集中在以下几个方面：1. 抗炎作用马齿苋含有大量的生物活性成分，具有一定的抗炎作用。
相关研究表明，马齿苋提取物对小鼠和大鼠的炎症反应有显著的抑制作用，可以降低炎症细胞的浸润，减轻炎症反应。
2. 抗菌作用马齿苋中含有多种生物碱和黄酮类化合物，具有一定的抗菌作用。
实验研究表明，马齿苋提取物可以对多种致病菌产生抑制作用，包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌等，对一些耐药菌也具有一定的抑制效果。
3. 利尿作用马齿苋在中医药中被广泛应用于利尿作用，可以增加尿量，排除体内多余的水分和废物，有助于清热解毒，消肿止痛。
4. 抗氧化作用马齿苋中所含的多种生物活性成分，如黄酮类化合物、生物碱等，具有一定的抗氧化作用，可以减少体内的自由基对细胞的损害，延缓衰老，有助于维护身体的健康。
除了以上的药理作用外，近年来有越来越多的研究证实，马齿苋还具有一定的抗肿瘤、抗糖尿病、降血压、改善心血管功能等作用。
针对这些作用，科研人员进行了大量的应用研究，积极探讨其在临床上的应用前景。
1. 抗肿瘤作用研究近年来的研究表明，马齿苋具有一定的抗肿瘤作用。
其提取物中的生物碱成分对多种肿瘤细胞具有明显的抑制作用，可能通过抑制肿瘤细胞增殖、诱导细胞凋亡等途径发挥抗肿瘤作用。
一些临床研究也表明，马齿苋对某些肿瘤具有一定的治疗效果，如肺癌、胃癌等。
2. 抗糖尿病作用研究研究发现，马齿苋中的多种生物活性成分具有一定的降血糖作用，可以促进胰岛素分泌，提高组织对葡萄糖的利用，减少血糖的生成和释放，有助于控制血糖水平，改善胰岛素抵抗。
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华中科技大学博士学位论文马齿苋黄酮有效部位改善胰岛素抵抗的作用机理研究姓名：雷红伟申请学位级别：博士专业：中西结合基础指导教师：陆付耳2010-05华中科技大学博士学位论文中文摘要第一部分马齿苋总黄酮的提取和其含量及相关成分染料木苷含量的测定【目的】：在前期研究的基础上,本实验主要提取和制备马齿苋黄酮有效部位，同时利用高效液相鉴定马齿苋黄酮的相关成分，用RP-HPLC对相关成分的含量进行测定。
【方法】：每公斤马齿苋全草用含3%（g/ml）氢氧化钠和60%（ml/ml）乙醇碱性醇液煎煮三次，时间分别为2 h 、1h、0.5h，收集三次提取液，蒸发其中的乙醇至无醇味。
将浓缩提取液上1m×10cm的聚酰胺柱，柱高40cm，吸咐2h,倒掉滤液，再用双蒸水反复洗脱至洗脱液无色为止，弃此洗脱液；最后用95%（ml/ml）乙醇洗脱，至洗脱液为淡黄色时停止，收集此洗脱液，进一步用旋转蒸发仪蒸发得含生药6 kg.L-1的马齿苋黄酮提取液。
利用黄酮与亚硝酸钠－硝酸铝－氢氧化钠形成络合物，用分光光度计在510nm可见光处测定其吸收度，进行总黄酮含量的测定。
用RP-HPLC鉴定马齿苋黄酮的相关成分并进行含量测定。
【结果】：马齿苋总黄酮的含量占其全草总重量的7.67%，该产品可用于制备胰岛素增敏剂。
马齿苋黄酮部位中染料木苷与标准品中染料木苷保留时间一致，染料木苷在 6.25 µg.L-1～200.00 µg.L-1线性关系良好，r=0.9999。
含生药6 kg.L-1的马齿苋黄酮提取液中染料木苷含量为1.68mg.L-1。
华中科技大学博士学位论文【结论】：马齿苋全草中含7.67%黄酮，染料木苷为本总黄酮的相关成分，含生药6 kg.L-1的马齿苋黄酮提取液中染料木苷含量为1.68mg.L-1。
【关键词】：马齿苋黄酮分光光度法HPLC染料木苷华中科技大学博士学位论文第二部分染料木苷改善HepG2细胞中FFAs诱导的胰岛素抵抗【目的】：在前期实验的基础上，本实验采用软脂酸诱导HepG2细胞产生胰岛素抵抗，同时观察染料木苷对HepG2胰岛素抵抗细胞培养基中葡萄糖消耗的影响以及染料木苷影响葡萄糖消耗的初步机理。
【方法】：体外培养HepG2细胞，用0.5mmol/L软脂酸诱导HepG2细胞造胰岛素抵抗模型，同时使用不同浓度的染料木苷(1、2、4µmol/L)以及作为阳性对照的罗格列酮(1µmol/L)干预24 h，用MTT法检测药物对细胞增殖能力的影响，用葡萄糖氧化酶法测定培养基中葡萄糖的含量，用免疫印迹的方法测定葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)的表达水平。
【结果】：与正常对照组比较，1-4µmol/L的染料木苷对HepG2细胞增殖的影响无明显差异(P>0.05)，葡萄糖消耗量随着染料木苷的浓度增加而明显提高，各组与模型组比较差异明显(P<0.05 or P<0.01)，葡萄糖消耗量最大增多0.35mM；治疗各组中HepG2细胞GLUT1蛋白表达水平与模型组比较明显增强。
【结论】：染料木苷能改善软脂酸诱导HepG2细胞的胰岛素抵抗，作用随剂量增加而增强。
【关键词】染料木苷；软脂酸；HepG2；胰岛素抵抗；GLUT-1华中科技大学博士学位论文第三部分染料木素通过抑制JNK信号转导通路改善HepG2细胞中胰岛素抵抗的实验研究【目的】：本实验重点研究染料木素对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用。
通过观察各组HepG2细胞培养基中葡萄糖含量在用药前后的变化，测定J NK信号通路各级信号转导蛋白的表达情况，对染料木素逆转胰岛素抵抗的作用和分子机理做进一步的研究。
【方法】：模型组用含0.5 mmol/L PA/0.2% BSA无血清的高糖（22.2mmol/L）DMEM培养HepG2细胞，建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型；正常组用含或不含1nmol/L胰岛素、0.2% BSA无血清的高糖（22.2mmol/L）DMEM培养HepG2细胞；模型组用含或不含1nmol/L胰岛素造模液造模；阳性对照组用含或不含1nmol/L胰岛素造模液培养，同时加入1µmol/L罗格列酮干预；不同剂量染料木素组用含或不含1nmol/L胰岛素造模液培养，分别同时加入1µmol/L、2µmol/L、4µmol/L染料木素。
干预24小时后，取出各组培养液用葡萄糖氧化酶法检测葡萄糖含量。
用MTT法检测药物对细胞增殖能力的影响，用免疫印迹的方法测定JNK信号转导通路中T-JNK、P-JNK、IRS-1、IRS-1Ser307、PI-3K p85、GLUT1的蛋白的表达。
【结果】：与正常组比较，含胰岛素的模型组葡萄糖消耗明显降低（P＜0.01）；与模型组比较，含胰岛素的罗格列酮组和不同剂量染料木素组葡萄糖消耗明显增加（P＜0.05 or 0.01），无胰岛素各组葡萄糖消耗无明显区别。
免疫印迹结果表明，与正常组比较，模型组中T-JNK、P-JNK、IRS-1Ser307蛋白表达显著增加，IRS-1、PI-3K p85、GLUT1表达明显减少；与模型组比较罗格列酮组和不同剂量染料木素组中T-JNK、P-JNK、IRS-1Ser307蛋白表达显著减少，IRS-1、PI-3K p85、GLUT1表达明显增加。
华中科技大学博士学位论文【结论】：染料木素与罗格列酮相似能改善HepG2细胞中软脂酸诱导产生的胰岛素抵抗，具有胰岛素依赖性。
染料木素逆转HepG2细胞胰岛素抵抗的机制可能与改善JNK信号转导通路中信号分子的表达有关。
【关键词】：染料木素胰岛素抵抗JNK游离脂肪酸HepG2华中科技大学博士学位论文ABSTRACTPart Ⅰ Extraction with Polyamide and Determination of Content of Total Flavone and Genistin from Portulaca Olerace L【Objective】：On the basis of previous investigations, in the present study，to extract total flavones from Portulaca Olerace L and determine its content by UV-spectrophotometry and to develop RP-HPLC method for the determination of genistin in flavone extractive from Portulaca Olerace L.【Methods】：Using NaNO2-Al（NO3）3-NaOH spectrophotometry to determine the total flavones in Portulaca Olerace L with a detection wavelength at 510nm. Developping RP-HPLC method for the determination of genistin in flavone extractive from Portulaca Olerace L.The chromatographic separation was performed on a Sunfire C18column (250 mm ×4.0 mm，5.0µm)and eluted with a mobile phase of MeOH- HAC- H2O(45:1:55). The detection wavelength was set at 259 nm and column temperature was set at 25℃. The flow rate was 0.8 mL.min-1.【Results】：Good linear relationship with absorbability occurred when the concentration range of rutin was 8～48mg/L(r=0.9999). The content of total flavones was 7.67%, callback was 97.6%, RSD was 1.43%(n=5).Stable linear relation between the peak area and injected amount existed when the amount was within 6.25 ng.mL-1～200.00 ng.mL-1 for genistin, r=0.9999. The average华中科技大学博士学位论文recovery was 98.3％and the RSD was 0.57％(n=5).【Conclusion】：The UV-spectrophotometry can be used for the determination of the total flavones in portulaca olerace L. It is a convenient and simple method with high accuracy.The HPLC method was accurate and sensitive for the determination of genistin in flavone extractive from Portulaca Olerace L.【Key words】：Total Flavone Genistin UV-spectrophotometry HPLC Portulaca Oleracea L华中科技大学博士学位论文Part Ⅱ Genistin attenuates free-fatty-acid-induced insulinresistance in HepG2hepatocytes【Objective】：To investigate the effects of genistin on improving insulin resistance induced by free fatty acids (FFAs) in HepG2 hepatocytes.【Methods】：The model of insulin resistance in HepG2 cells was established by adding palmitic acid (0.5 mmol/L) to the culture medium.Various concentration genistin(1、2、4µmol/L) or rosiglitazone(1µmol/L) treatment was performed at the same time. The MTT assay was used to determine the effect of the drugs used on cell growth. Glucose comsumption (GC) was determined by glucose oxidase method. The level of glucose transporter1(GLUT-1) proteins was detected by Western blotting.【Results】：After the intervention of palmitic acid for 24 h, the insulin-stimulated glucose transport in HepG2 cells was inhibited, the glucose comsuption was reduced greatly, meanwhile, GLUT1 was obviously reduced, as compared with those in normal control. However, the above indexes, which indicated the existence of insulin resistance, were reversed by genistin 1-4µmol/L in a dose-dependent manner. GC of HepG2 cells was increased in every group compared with model group(P<0.05 or P<0.01), the maximal GC was 0.35mM in presence of 4µmol/L genistin.【Conclusion】：Insulin resistance induced by FFAs in HepG2 hepatocytes can be improved by华中科技大学博士学位论文Genistin.【Key words】：Genistin Insulin Resistance HepG2 Palmitic Acid GLUT1华中科技大学博士学位论文Part Ⅲ Genistein reverses free-fatty-acid-induced insulinresistance in HepG2hepatocytes through JNK pathway【Objective】：To investigate the effects and molecular mechanisms of genistein on improving free-fatty-acid-induced insulin resistance in HepG2 hepatocytes.【Methods】：Insulin resistance in HepG2 cells was induced by exposure to 0.5 mmol/L palmitic acid for 24 hours. Genistein supplementation to the culture medium at various concentrations was in progress at the same time. Then the changes of glucose consumption and expressions of proteins involved in c-jun N-terminal kinase(JNK) signaling pathway in HepG2 cells were observed. Glucose consumption was determined by glucose oxidase method. The expressions of c-jun N-terminal kinase(JNK) phosphorylation, insulin receptor substrate-1(IRS-1) Ser307 phosphorylation, JNK, IRS-1, phosphatidylinositol-3- kinase p85 (PI-3K p85) and glucose transporter 1(GLUT1) proteins were detected by Western blot assay.【Results】：After the intervention of palmitic acid for 24 hours the insulin-stimulated glucose transport in HepG2 cells was inhibited as well as the glucose consumption was reduced significantly. Meanwhile, the expressions of IRS-1, PI-3K p85 and GLUT 1 proteins were obviously reduced but the expressions of JNK phosphorylation, IRS-1Ser307 phosphorylation and JNK proteins were significantly increased compared with those in normal control. However, genistein, at the concentration between 1 to 4µmol/L, reverses华中科技大学博士学位论文the above alterations of HepG2 cells in a dose-dependent manner.【Conclusion】：Free-fatty-acid -induced insulin resistance in HepG2 hepatocytes could be improved by genistein. The molecular mechanisms might be associated with modulating the expressions of relevant proteins involved in JNK signaling pathway.【Key word】：Genistein Insulin Resistance c-jun N-terminal kinase Free Fatty Acids华中科技大学博士学位论文英文缩略词表英文缩写英文全称中文名称HPLC high performance liquid chromatography高效液相色谱法T2DM Type 2 Diabtetes Mellitus2型糖尿病GEN genistein 染料木素IRS-1 insulin receptor substrate-1 胰岛素受体底物1FBS fetal bovine serum 胎牛血清BSA bovine serum albumin 牛血清白蛋白IR insulin resistance 胰岛素抵抗FFA free fatty acid 游离脂肪酸MOD model 模型NOR normal 正常JNK c-Jun N-terminal Kinase c-Jun 氨基末端激酶HRP horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶PI-3K Phosphatidylinositol-3-kinase 磷脂酰肌醇-3激酶TC Total Cholesterol 总胆固醇HDL-C High Density lipoprotein-C高密度脂蛋白-CTNF-α Tumor Necrosis Factor-α肿瘤坏死因子-αSer serine 丝氨酸MAPK mitogen-activated protein kinase 促分裂原活化蛋白激酶GLUT1 glucose transporter 1 葡萄糖转运蛋白1 DMEM Dulbecco’s modified Eagle’s medium 达尔伯克(氏)必需基本培养基ROS rosiglitazone 罗格列酮PA palmitic acid 软脂酸PPAR peroxisome proliferator activated receptor 过氧化物酶体增生物激活受体ECL enhanced chemiluminescent 增强化学发光法独创性声明本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果的总结。