浑源黄芪地上部分与地下部分中黄酮类成分比较

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不同产地黄芪药材质量的差异性分析

不同产地黄芪药材质量的差异性分析段琦梅;梁宗锁;杨东风;聂小妮;刘婷;兰晓继【摘要】[目的]结合<中国药典>(2005年版)规定指标及HPLC指纹图谱,对不同来源黄芪药材质量进行综合评价.[方法]测定来源于甘肃渭源、吉林舒兰、陕西凤县、甘肃陇西、山西浑源、陕西旬邑和陕西杨凌7个产区黄芪的总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物及黄芪甲苷的含量;建立黄芪药材样品的HPLC指纹图谱;对不同产地黄芪药材的质量指标和指纹图谱进行比较分析.[结果]不同产地黄芪样品的总灰分和水溶性浸出物均符合<中国药典>标准;醇溶性浸出物存在一定差异性;黄芪甲苷含量差异较大;不同样品HPLC指纹图谱共有15个共有峰,图谱间相似性较高.[结论]不同产地黄芪药材质量存在差异,多个指标综合评价能够更准确地反映黄芪药材的质量.【期刊名称】《西北农林科技大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2010(038)010【总页数】6页(P187-191,198)【关键词】黄芪;药材质量;HPLC指纹图谱【作者】段琦梅;梁宗锁;杨东风;聂小妮;刘婷;兰晓继【作者单位】西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100;陕西省中药指纹图谱与天然产物库研究中心,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100;陕西省中药指纹图谱与天然产物库研究中心,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100;陕西省中药指纹图谱与天然产物库研究中心,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100;陕西省中药指纹图谱与天然产物库研究中心,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西,杨凌,712100【正文语种】中文【中图分类】R282.710.5黄芪为豆科植物蒙古黄芪（Astragalus membranaceus （Fisch.）Bge.var.mongholicus（Bge.）Hisao）或膜荚黄芪（Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.）的干燥根，为常用大宗药材，主要功能为补气固表，利尿脱毒，排脓，敛疮生肌［1］。

【免费】不同产地黄芪中总黄酮含量的比较

底烧瓶中，比例固液比（／为１０加入浓度为宁、按ｍｍ）：３河北和内蒙古等地Ｊ尽管不同产地黄芪所含化学，
９％乙醇溶液，７Ｃ５在５ｑ水浴锅中浸提１ｈ冷却，，过滤，成分大致相同，由于生长环境不同，但各成分的含量并收集滤液，备用。
黄酮含量从高到低依次为河北、山西、吉林、甘肃、内蒙、陕西、青海。
关键词黄芪，酮，量测定，黄含紫外分光光度法文献标识码：Ａ文章编号：０６５８《０８０－１－１０－７２０）６０１２６００中图分类号：９７２Ｒ２．
１实验材料
１１仪器Ｔ．６新世纪分光光度计（北京普析通用公司）ＳＺ—Ｄ（ｌ），Ｈ１循环水式真空泵（义市英峪予华Ｉ巩
根据所得数据制作散点图，４４２．４ｍ／在．４～６６ｇＬ范围内线性关系良好，回归方程Ｃ＝３．７一得７２６Ａ
ｍｅｓｅｙｔｔｏｆｕｔａｉｌｔｓｅｔｏｈｔａｕｒｄｂｈｅｍｅｈｄｏｌｒｖｏｅｐｃｒｐｏｏｍｅｒｔｙ。ｒｉｓｕｓｄａｎｅｏｈｍ．ＲＥＳＵＬＴｕｔｗａｅｓｉｄｘｆｒｔｅｎＳｒｅｃｎｔｎｓｏｏａｌ— ｈｏｅｔｆｔｔｌｆａ
ｍｇｇＮｉｅｇ４７７ｍ／。ｈａｘ：．０／，ｉｈｉ３４２ｍ／．ＯＣＵＩＮＴｅｃｎｅｔｏｔｔａｏｉｎＡ — ／，ｅｍｎ：．３ｇｇＳａｎｉ４４ｍｇｇＱｎａ：．７ｇｇＣＮＬＳＯｈｏｔｓｆｏｌｖｎｓｉｓ４ｇｎａｆｌｄ

不同产地黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的比较

不同产地黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量的比较摘要：通过高效液相色谱法（HPLC测定不同产地黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量，以期为黄芪药材质量评定提供依据。

采用Waters Symmetry C18色谱柱（250 mm x4.6mm , 5卩m ）,流动相为乙腈-水（81 : 19），流速：1.0 mL/min，柱温：30 C,进样量10卩L,检测波长260 nm。

结果表明：毛蕊异黄酮葡萄糖苷的浓度在0.145 6〜0.698 7 mg/mL 范围内与峰面积呈良好的线性关系，r=0.999 7，平均加样回收率为100.35%, RSD为1.98%,所建方法快速、简便、重现性好。

4 个省份16 个产地药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量差异较大,其中内蒙古自治区包头市所产黄芪中其含量最高。

从各地平均值看,内蒙古自治区＞山西省＞甘肃省＞黑龙江省,且内蒙古自治区与其他3 个省份药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量差异显著。

省内之间的差异显著性结果表明, 内蒙自治区和山西省产地之间差异较大,甘肃省和黑龙江省产地之间差异较小。

关键词：黄芪；毛蕊异黄酮葡萄糖苷；HPLC中图分类号：S567.01文献标志码：A文章编号：1002-1302（2016）04-0226-03黄芪为著名滋补中药，是豆科植物蒙古黄芪[Astragalus membranaceus （Fisch.）Bge. var. mongholicus（Bge.）Hsiao] 或膜荚黄芪[Astragalus membranaceus （Fisch.）Bge.]的干燥根。

现代药理研究表明：黄芪具有敛疮生肌、延缓衰老、增强机体免疫等功能[1]。

诸多研究证明，黄酮类作为黄芪中的主要成分之一，其抗炎、抗病毒、调节免疫等多方面的药理作用非常显著[2-6] 。

毛蕊异黄酮葡萄糖苷作为黄芪药材中黄酮类的主要成分，已被2010 版《中国药典》作为黄芪药材的指标性成分[1]。

黄芪分布于华北、东北及西北地区。

不同产地黄芪中重金属及有害元素的比较研究

摘要：比较不同产地பைடு நூலகம்芪药材所含重金属及有害元素含量，以此作为指导黄芪药材的出口指标。选取９个不同产区黄芪
药材，采用原子吸收光谱仪检测铅、镉、铜的含量，用原子荧光光度计检测砷、汞的含量。样品中重金属及有害元素含量均低于《中国药典》（２０１５版）黄芪药材项下规定。不同产地黄芪药材重金属及有害元素含量有差异；甘肃陇西产地相对偏低。
３ＡｎｈｕｉＸｉｅｈｅｃｈｅｎｇＣｏ．，Ｌｔｄ．，ＡｎｈｕｉＢｏｚｈｏｕ２３６８００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｈｅａｖｙｍｅｔａｌｓａｎｄｈａｒｍｆｕｌｅｌｅｍｅｎｔｓｉｎＡｓｔｒａｇｌｕａｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｈａｂｉｔａｔｓｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄ，ｗｈｉｃｈｃａｎｂｅｕｓｅｄａｓａｎｉｎｄｅｘｔｏｇｕｉｄｅｔｈｅｅｘｐｏｒｔｏｆＡｓｔｒａｇａｌｕｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ．Ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｓｏｆｌｅａｄ，
ｅｌｅｍｅｎｔｓｉｎＡｓｔｒａｇｌｕａｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓｒｏｆｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｈａｂｉｔａｔｓｗｅｒｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔ．ＴｈｅＬｏｎｇｘｉａｒｅａｏｆＧａｎｓｕｗａｓｒｅｌａｔｉｖｅｌｙｌｏｗ．

黄芪道地产区与非道地产区药材质量比较研究

第32卷第2期唐山师范学院学报 2010年3月 Vol. 32 No. 2 Journal of Tangshan Teachers College Mar. 2010 ──────────基金项目：唐山市重点实验室项目（04360701B-12）收稿日期：2009-04-07作者简介：刘冬莲（1971-），女，河北滦南人，硕士，唐山师范学院化学系副教授，研究方向为光谱分析。

-24-黄芪道地产区与非道地产区药材质量比较研究刘冬莲（唐山师范学院化学系，河北唐山 063000）摘要：选取同一品种黄芪，比较研究了不同产地的黄芪质量。

黄芪多糖采用硫酸-苯酚法测定，总灰分、浸出物的含量按2005年《中国药典》一部附录方法测定。

结果表明，不同产地的黄芪中浸出物、总灰分、多糖、微量元素含量不同，山东黄芪中浸出物、总灰分含量均为最高，山西道地产区黄芪中多糖含量高。

山西黄芪中微量元素铁、锰、铜、锌含量明显高于其他产地黄芪。

关键词：黄芪；浸出物；总灰分；多糖；微量元素中图分类号： O 657.3文献标识码：A文章编号：1009-9115(2010)02-0024-03Comparision of Quality of Astragalus between Geo-Authentic andNon-Authentic Producing AreasLIU Dong-lian(Department of Chemistry, Tangshan Teachers College, Tangshan 063000, China)Abstract: The quality of the same variety of astragalus from different producing areas was analyzed. The polysaccharide was measured by phenol-sulfuric acid colorimetric method. According to the method from <Chinese pharmacopoeia >, the contents of extraction and total ashes were measured. The result showed that the contents of polysaccharide, extraction,total ashes and trace elements were different in astragalus from different producing areas. The contents of extraction and total ashes in Shandong astragalus were the highest and the content of polysaccharide in shanxi geo-authentic astragalus was the highest among all the areas tested. Trace elements were the highest of Shanxi geo-authentic astragalus .Key words: astragalus; extraction; total ash; polysaccharide; trace element中药材的疗效与产地有关，“离其本土，则质同而效异”，故而有药材道地性之说[1]。

黄芪地下部分地上部分化学成分比较论文

黄芪地下部分与地上部分化学成分的比较【中图分类号】r917 【文献标识码】 a【文章编号】1672-3873（2011）03-0321-01中药常用的黄芪为豆科植物黄芪和蒙古黄芪的干燥根，具有补气、升阳、固表、止汗、抗疮、生肌、利尿、消肿、降压、强心和提高免疫功能、抗衰老等功能。

临床用于脾肺气虚或中气下陷症，表汗自虚等症状。

近几年，临床上还用于治疗乙肝肝炎和心血管疾病。

由于对黄芪作用的不断认识，用量逐年加大，除供药用外，还用于饮料、补品、化妆品、茶类等行业。

黑龙江省为重要的黄芪产地，大量的黄芪叶弃而不用，因此本文研究比较黄芪的地上和地下部分的化学成分，为开发利用黄芪新的自然资源，系统的研究化学成分及药理具有重要意义。

一仪器与试剂1.1仪器三用紫外分析仪层析缸层析皿1.2试剂与样品黄芪（东宁县野生黄芪）、黄芪叶（东宁县野生黄芪）、硅胶g （青岛海洋化工厂）、冰醋酸、氯仿、乙酸乙酯、乙醇精氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、苏氨酸、酪氨酸、黄芪甲甙（均购自中国药品生物制品检定所）二实验2.1 成分提取2.1.1 将黄芪粉碎成粗粉，加水回流30min，过滤，得到的水溶液浓缩，得到样品溶液i1。

2.1.2将黄芪粉碎成粗粉，加5倍量的70%乙醇加热回流2h，过滤，将滤液回收乙醇后得到水溶液，用乙酸乙酯萃取，分离得到的乙酸乙酯层，回收乙酸乙酯得到残渣，残渣溶于无水乙醇溶液得到乙醇液为样品溶液iii1。

萃取后分离得到的水层，用正丁醇萃取，分离正丁醇层，减压浓缩，得到的浓缩液为样品溶液ii1。

将70%乙醇溶液提取后的药渣用5倍量的水加热回流2h，过滤，得到的水提取液浓缩后得到样品溶液iv1。

2.1.3将黄芪叶粉碎成粗粉，同上法操作，得到样品溶液i2、ii2、iii2、iv2。

2.2成分预试2.2.1 茚三酮试验：取样品分别点在滤纸上，喷以0.2%茚三酮乙醇溶液，100℃加热2min。

2.2.2 氯仿-浓硫酸反应：取样品少许，加入1ml氯仿，沿管壁滴加1ml浓硫酸后，在氯仿层呈现红色，浓硫酸层有绿色荧光。

不同产地黄芪黄酮含量比较

ｖｉｏｕｓｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｇｒｏｗｔｈｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ，ｃａｌｙｃｏｓｉｎ一７一Ｏ —Ｂ —Ｄ —ｇｌｕｃｏｓｉｄｅｃｏｎｔｅｎｔ
ＲＥＮＷｅｉ—ｃｈａｏ，ＹＡＮＳｏｎｇ，ＬＩＵＸｉｕ—ｂｏ，ＭＡＬｉｎｇ，ＭＡＷｅｉ
（１．ＨｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈａｒｂｉｎ１５００４０，Ｃｈｉｎａ；２．ＮｏｒｔｈｅａｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｈａｒｂｉｎ１５００４０，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｆｉｘｅｄｎｕｍｂｅｒｏｆｙｅａｒｓｏｆｔｈｅｏｒｉｇｉｎ，ｇｒｏｗｔｈ，ｇｒｏｗｔｈｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ
ｆｒｏｍａｓｔｒａｇａｌｕｓｈａｖｅａｎｏｂｖｉｏｕｓｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ａｓｔｒａｇａｌｕｓ；Ｃａｌｙｃｏｓｉｎ一７一Ｏ —Ｂ—Ｄ — ｇｌｕｃｏｓｉｄｅ；ＨＰＬＣ—ＵＶ

不同产地黄芪药材中黄酮类成分含量分析

关键词：黄芪药材；黄酮类成分；高效液相色谱法中图分类号：Ｒ２８５５文献标识码：Ａ文章编号：（）１０００－７１５６２０１８０６－００５９－０２
ＣｏｎｔｅｎｔａｎａｌｙｓｉｓｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｒａｄｉｘａｓｔｒａｇａｌｉｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｈａｂｉｔａｔｓＷＵＧｕｏｘｕｅ
ｆｅｒｅｎｔｈａｂｉｔａｔｓｃａｎａｆｆｅｃｔｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｏｆｒａｄｉｘａｓｔｒａｇａｌｉ．
：，，Ｋｅｙｗｏｒｄｓｒａｄｉｘａｓｔｒａｇａｌｉｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ ห้องสมุดไป่ตู้ＰＬＣ
黄芪属于豆科植物，是中医大量使用的滋补类药材，国内市场的需求量非常高，由于野生黄芪数量较少，目前大多以人工栽培为主［１］。相关研究表明，黄芪药材中含黄酮类成分，这也使得黄芪药材具有抗病毒、抗菌、降血脂等作用。为了探讨不同产地对黄芪药材中黄酮类成分含量的影响，本研究使用了高效液相色谱对黄芪药材中含量较高的几种黄酮类成分含量进行分析，现报道如下。１资料与方法１１一般资料：本次研究选取的黄芪药材样品来自我国多个省份，样品总共为２２批次，包括野生样品与栽培样品，经鉴定所有药材均为真品。１２检测仪器：本次检测所使用的仪器主要包括：２６９０型
（，，，）ＺｈｅｎｇｚｈｏｕＰｅｏｐｌｅ＇ｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＨｅｎａｎＰｒｏｖｉｎｃｅＺｈｅｎｇｚｈｏｕ４５００００Ｃｈｉｎａ
：：ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏａｐｐｒｏａｃｈｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆｃｏｎｔｅｎｔｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｒａｄｉｘａｓｔｒａｇａｌｉｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｈａｂｉｔａｔｓ．：，，Ｍｅｔｈｏｄｓ２２ｂａｔｃｈｅｓｏｆｓｅｌｅｃｔｅｄｒａｄｉｘａｓｔｒａｇａｌｉｗｈｉｃｈｗｅｒｅｐｕｒｃｈａｓｅｄｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｒｅｇｉｏｎｓｏｆＣｈｉｎａｗｅｒｅｔａｋｅｎ，ａｓｍａｉｎｒｅｓｅａｒｃｈｅｄｍａｔｅｒｉａｌｓ．ＴｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｒａｄｉｘａｓｔｒａｇａｌｉｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＨＰＬＣ．Ｉｎｔｈｅｔｅｓｔｔｈｅ，，，ｍａｉｎｌｙｓｅｌｅｃｔｅｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｗｅｒｅ４ｋｉｎｄｓｉ．ｅ．ｃａｌｙｃｏｓｉｎ７ＯβＤｇｌｕｃｏｓｉｄｅｏｎｏｎｉｎｃａｌｙｃｏｓｉｎａｎｄ，，ｆｏｒｍｏｎｏｎｅｔｉｎ．Ａｎｄｔｈｅｙｗｅｒｅｐｅｒｆｏｒｍｅｄｐｒｅｃｉｓｉｏｎｔｅｓｔｓｔａｂｉｌｉｔｙｔｅｓｔａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｔｅｓｔｅｔｃ．ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ．：ＲｅｓｕｌｔｓＡｌｌＲＳＤｖａｌｕｅｓｏｆｄｅｔｅｃｔｅｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｐｅａｋａｒｅａｓｉｎｐｒｅｃｉｓｉｏｎｔｅｓｔａｎｄｓｔａｂｉｌｉｔｙｔｅｓｔｗｅｒｅｌｅｓｓｔｈａｎ，１％ｗｈｉｃｈｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓａｎｄｏｐｅｒａｔｉｏｎｓｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｔｈｅｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓｏｆｐｒｅｃｉｓｉｏｎ．Ｉｎｔｈｅｄｅ，ｔｅｃｔｉｏｎｏｆｃｏｎｔｅｎｔｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｒａｄｉｘａｓｔｒａｇａｌｉｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｈａｂｉｔａｔｓｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｔｏｔａｌｃｏｎｔｅｎｔｏｆ，，，ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｒａｄｉｘａｓｔｒａｇａｌｉｆｒｏｍＳｈａｎｘｉａｎｄＩｎｎｅｒＭｏｎｇｏｌｉａｗａｓｈｉｇｈｅｓｔｆｏｌｌｏｗｅｄｂｙｔｈａｔｆｒｏｍＧａｎｓｕＪｉｌｉｎＡｎ：ｈｕｉａｎｄＳｈａａｎｘｉ．ＴｈｅｔｏｔａｌｃｏｎｔｅｎｔｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｒａｄｉｘａｓｔｒａｇａｌｉｆｒｏｍＳｈａｎｄｏｎｇｗａｓｌｏｗｅｓｔ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＨＰＬＣ，，ｈａｓａｄｖａｎｔａｇｅｓｏｆｅａｓｙｏｐｅｒａｔｉｏｎｇｕｔｓｔａｂｉｌｉｔｙａｎｄｇｕｔｒｅｐｅａｔａｂｉｌｉｔｙｃａｎｄｅｔｅｒｍｉｎｅｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｒａｄｉｘ，ａｓｔｒａｇａｌｉａｎｄｄｅｔｅｃｔｔｈｅｔｏｔａｌｃｏｎｔｅｎｔｏｆｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｉｎｒａｄｉｘａｓｔｒａｇａｌｉｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｈａｂｉｔａｔｓｗｈｉｃｈｓｈｏｗｔｈａｔｔｈｅｄｉｆ

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浑源黄芪地上部分与地下部分中黄酮类成分比较徐珍;李倩;刘亮亮;郭爱华【摘要】目的:通过对山西道地药材浑源黄芪地上与地下部分黄酮类成分比较,为黄芪药材地上部分合理应用提供依据.方法:采取HPLC梯度洗脱技术,对黄芪中6种黄酮类成分同时进行分离、定量分析.结果:浑源黄芪地上部分与地下部分均含有6种黄酮类成分,只是含量上略有差异.地上部分总黄酮含量为0.7450 mg/g,地下部分为0.8859 mg/g,其中7,2′-二羟基-3′,4′-二甲氧基异黄烷、毛蕊异黄酮、芒柄花苷在地上部分含量高于地下部分.结论:该结果为黄芪地上部分资源的开发利用提供参考依据.【期刊名称】《山西中医学院学报》【年(卷),期】2017(018)006【总页数】4页(P27-30)【关键词】浑源黄芪;地上部分;黄酮类成分;定性分析;定量分析【作者】徐珍;李倩;刘亮亮;郭爱华【作者单位】山西职工医学院,山西晋中030619;山西职工医学院,山西晋中030619;山西职工医学院,山西晋中030619;山西职工医学院,山西晋中030619【正文语种】中文【中图分类】R285.5黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根［1］。

黄芪中含有多种重要的活性成分，其中黄酮类成分具有免疫调节、抗损伤、抗突变、抗肿瘤、抑制动脉粥样硬化等活性［2］。

随着对黄芪深入研究，它不仅可供药用，还被开发为保健品、食品及化妆品等广泛使用，使得黄芪市场出现了供不应求的局面。

黄芪种植地域性广，但其中山西黄芪的种植方式和生长年限最接近传统野生资源，商品药材的性状几乎与野生黄芪无区别，但占用土地年限长，因根深采刨困难，提高了生长成本，故产量有限［3］。

黄芪根入药时，大量地上部分被丢弃或焚烧，造成很大的药源资源浪费。

山西省浑源县是黄芪道地产品“正北芪”的原产地，素有“中国黄芪之乡”“正北芪之乡”的美誉。

课题组以浑源黄芪地上部分（茎、叶、种、秆）作为研究对象，以地下部分作为对比，对其中黄酮类成分进行定性、定量研究，旨在开发黄芪药材新的药用部位，为浑源黄芪地上部分科学合理的应用提供依据，进一步扩大黄芪药用资源的利用价值。

1 实验材料1.1 实验仪器Agilent 1200高效液相色谱系统（Agilent Chemstation色谱工作站、VDW 1314B紫外可见检测器、G1311A四元泵、G1316A柱温箱，美国安捷伦公司）；B-220型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）、XB120A型电子分析天平（上海精密化学仪器制造厂）、TCQ-250型超声波清洗机（北京医疗设备生产二厂）。

1.2 实验试剂芒柄花素、毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品（购于上海永恒生物科技有限公司，批号为20120528、20120428）；芒柄花苷、毛蕊异黄酮对照品（购于成都曼斯特生物科技有限公司，批号为13021808、13021808）；3-羟基-9，10-二甲基紫檀烷、7，2′-二羟基-3′，4′-二甲氧基异黄烷对照品（购于江苏永健医药科技有限公司，批号为YJ150718、YJ150717），各对照品质量分数均大于98%。

乙腈（美国Fisher公司，色谱纯）、纯净水（娃哈哈牌），甲醇等其余试剂均为分析纯。

1.3 实验药材本实验所用药材由山西省道地药材——浑源黄芪药材种植基地提供，经山西医科大学药学院白云娥教授鉴定为豆科植物蒙古黄芪的干燥根及地上部分（茎、叶、种、秆）。

2 方法与结果2.1 色谱条件流动相为乙腈（A）-水（B），体积流量 1.0 mL/min，Kromasil C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），紫外检测波长 230 nm，柱温25 ℃，进样量20 μL ［4］。

梯度洗脱条件见表1。

表1 梯度洗脱条件时间（m i n）流动相A（%）流动相B（%）0～8 2 0 8 0 8～1 5 2 0→3 0 8 0→7 0 1 5～3 0 3 0→4 3 7 0→5 7 3 0～4 0 4 3→6 0 57→4 0 4 0～5 0 6 0→1 0 0 5 7→4 0 5 0～6 0 1 0 0 4 0→02.2 配制对照品溶液本实验采用多指标定量法对黄芪中6种黄酮类成分进行同时测定，故对照品应配制成混合对照品溶液，即该溶液中含有含量已知的6种黄酮类对照品。

具体配制方法如下：精密称取对照品适量置于10 mL容量瓶中，用甲醇定容，由此，可得到6种黄酮化合物各自的对照品储备液。

然后每种储备液取适量，置于25 mL容量瓶中，甲醇定容，即制得混合对照品溶液（A）。

各储备液浓度及混合对照品溶液中各成分浓度见表2。

表2 混合对照品溶液各成分浓度表编号名称对照品浓度（μ g/m L）混合对照品中浓度（μ g/m L）1 芒柄花素 6 1 0.0 1 2.2 2 毛蕊异黄酮葡萄糖苷 1 0 3 0.0 2 0 6.0 3 芒柄花苷 6 5 0.0 7 8.0 4 毛蕊异黄酮 6 7 0.0 2 6.8 5 3-羟基-9,1 0-二甲基紫檀烷9 8 0.0 1 1 7.6 6 7,2′-二羟基-3′,4′-二甲氧基异黄烷 9 9 0.0 5 9.42.3 供试品溶液的制备刘宗彬等［5］通过单因素实验考察黄芪黄酮最佳提取工艺条件为：颗粒细度0.075～0.25 mm之间，超声20 min，料液比达到1∶15，乙醇浓度为80%。

取黄芪药材，粉碎，过80目筛，备用。

精密称取黄芪地上部分、地下部分粉末各5 g，放入锥形瓶（具塞）中，加15倍量的80%乙醇，超声20 min，提取2次，合并滤液，滤过，置于水浴锅上蒸馏浓缩至干，用甲醇将残渣溶解后定容至10mL容量瓶中，振摇、混匀，即可。

2.4 标准曲线的制备以对照品的浓度为横坐标（X），峰面积积分值为纵坐标（Y），绘制标准曲线，可得线性回归方程。

本实验中作为横坐标的一系列对照品的浓度是将“对照品溶液的配置”中制备的6种对照品的储备液按照原溶液浓度的1倍、1/2倍、1/4倍、1/8倍、1/16倍、1/32倍、1/64倍稀释，每个对照品制成7种不同浓度的溶液，分别用0.45 μm的滤膜过滤，进样量20 μL，记录峰面积的积分值。

6种对照品的线性回归方程结果见表3。

表3 对照品线性回归方程及其线性范围成分回归方程线性范围（μ g） r 2芒柄花苷 Y=4 1 2 3 7 0 5 X+2 0 0 8 3 9 0.2 0～1 2.8 0 0.9 9 9 9毛蕊异黄酮葡萄糖苷 Y=2 4 1 6 9 5 6 X+3 0 0 3 1 2 0.6 0～1 9.2 0 0.9 9 9 0毛蕊异黄酮 Y=4 8 2 9 3 3 9 X+5 2 1 9 9 0 0.0 5～1.6 0 0.9 9 9 1芒柄花素 Y=6 2 8 5 8 9 0 X+5 8 1 3 2 2 0.6 0～1 9.2 0 0.9 9 9 3 3-羟基-9,1 0-二甲氧基紫檀烷 Y=1 3 2 9 0 7 2 4X+1 2 1 5 1 8 4 0.1 0～3.2 0 0.9 9 9 3 7,2′-二羟基-3′,4′-二甲氧基异黄烷 Y=1 1 8 3 5 9 9 3 X+2 4 6 2 0 0 8 0.1 0～3.2 0 0.9 9 9 16种对照品在各自的线性范围内都表现出良好的线性关系。

2.5 方法学考察2.5.1 精密度实验取混合对照品溶液（A）10μL，采用2.1项下的色谱条件，连续进样，共6次，依据峰面积积分值分别计算其RSD值。

结果见表4。

6种黄酮类成分RSD值都小于2.0%，提示该方法符合实验要求。

混合对照品（A）HPLC色谱图见图1。

2.5.2 稳定性实验依据“2.3供试品溶液制备方法”制作黄芪地上、地下部分的供试品溶液，每隔2 h进样检测，12 h内共检测6次。

针对不同成分的峰面积积分值计算其RSD值。

结果见表4。

RSD值均小于3.0%，表明各供试品溶液在12 h内稳定性良好。

2.5.3 重复性实验精密称取黄芪地上部分药材样品6份，每份1 g，按本实验方法制备成供试品溶液，进行HPLC检测。

结果见表4。

RSD值都低于2.5%，表明该实验方法具有良好的重复性。

2.5.4 加样回收实验准备黄芪地上、地下部分药材样品6份（要求已知药材中药物含量），制成供试品溶液，量取供试品溶液2 mL，将其置于5mL棕色容量瓶中，加入2.2项下制备的对照品储备液1 mL，再加甲醇定容至满刻度，振摇，混匀。

再进行HPLC检测，测定各成分的峰面积，进而计算平均加样回收率。

结果见表4。

图1 混合对照品（A）HPLC色谱图经以上方法学考察，所建立的含量测定条件其精密度、稳定性、重复性、回收率等均符合规定，可用于黄芪中黄酮类化学成分的含量测定。

2.6 含量测定将供试品溶液稀释至适宜浓度并进行HPLC含量检测，进样量为20 μL。

结果见表5和图2。

图2 黄芪地上、地下部分中黄酮类成分种类与含量的比较黄芪地上部分与地下部分均含有6种黄酮类成分：7，2′-二羟基-3′，4′-二甲氧基异黄烷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、3-羟基-9，10-二甲氧基紫檀烷。

经比较可以发现，黄芪地上部分中毛蕊异黄酮含量为地下部分的4倍，芒柄花苷含量为地下部分的2倍，7，2′-二羟基-3′，4′-二甲氧基异黄烷的含量约为地下部分的1.1倍，芒柄花素和3-羟基-9，10-二甲氧基紫檀烷含量差别不明显，但地下部分中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量高于地上部分，约为2.5倍。

黄芪地下部分总黄酮含量略高于地上部分。

3 讨论中药黄芪中有多个有效部位，包括总黄酮、总皂苷、多糖类等，具有多种生物活性，其中黄酮类化合物是黄芪中分离的抗氧化、清除自由基的主要活性成分，具有明显的抗肿瘤、抗损伤和抗突变的作用［6］。

表4 方法学考察结果稳定性R S D（%）重复性R S D（%）加样回收R S D（%）地上部分地下部分地上部分地上部分地下部分芒柄花苷 0.5 2 1.4 5 1.2 6 2.3 1 1.0 3 1.2 8毛蕊异黄酮葡萄糖苷 0.4 3 0.7 6 1.0 8 1.7 5 2.1 2 0.7 1毛蕊异黄酮0.4 7 0.8 9 1.3 9 0.8 9 1.0 5 1.3 5芒柄花素 0.9 1 1.2 8 0.6 8 1.2 3 1.3 2 2.3 33-羟基-9,1 0-二甲氧基紫檀烷0.3 6 1.4 1 0.9 5 1.1 6 0.9 3 1.9 6 7,2′-二羟基-3′,4′-二甲氧基异黄烷 0.5 0 1.1 2 1.4 1 1.8 1 1.2 8 2.1 1成分精密度R S D（%）本文对山西道地药材——浑源黄芪地上部分与地下部分中黄酮类化合物进行比较，结果发现黄芪地上部分与地下部分所含黄酮类化合物种类相同，只是在含量上存有差别，除了毛蕊异黄酮葡萄糖苷（B）外，地上部分的芒柄花苷（A）、毛蕊异黄酮（C）、7，2′-二羟基-3′，4′-二甲氧基异黄烷（F）的含量明显高于地下部分，而芒柄花素（D）和3-羟基-9，10-二甲氧基紫檀烷（E）的含量不低于地下部分，但就总黄酮含量来说，地下部分略高于地上部分。