促红细胞生成素EPO
浅析促红细胞生成素——兴奋剂摘要：促红细胞生成素是由肾脏分泌产生的一种特异性糖蛋白，能够促进骨髓红细胞的增殖与成熟。
其最早用来治疗遗传、癌症、慢性肾衰以及其他一些炎症引起的的贫血症，但是随着经济的发展和技术的更新，促红细胞生成素被作为一种兴奋剂逐渐应用于竞技比赛中，造成运动员身体的损伤以及比赛的不公平。
笔者通过查阅相关文献，从促红细胞生成素的起源，解剖，功能及检测几个方面系统的整合促红细胞生成素的相关知识，为后续读者提供一个较为全面而清晰地学习框架。
关键词：EPO；兴奋剂；运动医学EPO是促红细胞生成素（Erythropoietin）的英文简称，自从发现以来被广泛应用于耐力运动项目中。
人体中的促红细胞生成素能够促进红细胞生成，明显提高人体的红细胞数量及血红蛋白的含量, 从而提高人体运输氧气的能力,提高人体的最大摄氧量, 所以EPO 与运动尤其是耐力运动关系十分密切。
应用基因重组技术成功制造人重组促红细胞生成素( rhEPO) 后, 有些运动员试图通过服用rhEPO提高运动成绩, 但却忽略了服用rhEPO 的副作用,服用红细胞生成素可以使患肾病贫血的病人增加血流比溶度（即增加血液中红细胞百分比）。
人体缺氧时，此种激素生成增加，并导致红细胞增生。
EPO兴奋剂正是根据促红细胞生成素的原理人工合成，它能促进肌肉中氧气生成，从而使肌肉更有劲、工作时间更长。
一、EPO历史来源（一）EPO简介促红细胞生成素(EPO，Erythropoietin)也称为红细胞集落形成刺激物(ECSA)和红细胞生成刺激因子(ESF)，为哺乳动物调节红细胞生成的主要调控因子，1948 年Bonsdor 与Jalsvisto 首次发现，并于1977年由Migake从尿中分离纯化出来的。
人体内的EPO 为一种糖蛋白激素，大部分是肾脏中的酶样物质红细胞生成酶(Erythrogenin)作用于肝脏所生成的促红细胞生成素原(Erythropoietinogen)在血浆中转变而成的。
一方面经血液运输到骨髓造血组织，可促进A LA 合成酶的生成。
( r—酮基—8—氨基戊酸) ，促进血红素的合成，血红素生成后迅即与球蛋白结合成为血红蛋白( Hb) ，并释放到血液中，以维持血液中红细胞和血红蛋白数量。
另一方面，在肝脏代谢，只有极少量从尿液排出。
影响EPO生成的因素有缺氧、贫血、激素水平、嗜烟习惯、PH值、昼夜节律等。
缺氧是EPO的主要影响因素，急性缺氧1-2小时，循环中EPO即显著升高，同时红细胞血红蛋白也会增加。
雄性激素，甲状腺素，生长激素可加强EPO的分泌，而雌性激素，糖皮质激素则相反。
PH值下降，抑制EPO的分泌，嗜烟习惯者EPO高。
EPO接受两种反馈调节。
机体缺氧时，肾脏反应性地分泌红细胞生成酶，促进EPO 生成，EPO增多一方面刺激骨髓造血组织，使周围血液中红细胞增加，另一方面又反馈性地抑制肝脏中的促红细胞生成素原的生成，使血浆中的EPO水平不致过高。
（二）EPO与运动增加血液的携氧能力是耐力运动员提高运动能力极其有效的一种手段。
相应的方法和药物大致有三种，分别是血液兴奋剂、高原训练法和促红细胞生成素注射法。
1、血液兴奋剂即血液回输与EPO血液回输又称红细胞回授，它是用输血的方法将已作分离处理的浓缩红细胞悬液在冷藏保存一段时间后，再输回到受血者身上，以提高受血者血红蛋白浓度，改善受血者的摄氧能力。
在竞技体育中，多数项目均对参赛者的需氧量有很高的要求，尤其是在以耐力为主的竞技项目上。
运动员有氧能力的提高可进一步满足肌肉舒缩对氧的需求量。
肌肉舒缩的直接能源是三磷酸腺苷( ATP) ，而在无氧代谢下，ATP 的生成是非常低下的。
因此，有氧代谢是最为适合产生ATP 的代谢途径。
人机体的氧气输送是以氧合白红蛋白的形式将氧气输送到作功肌产生ATP。
血液回输的意义意味着可人为增加全血中的血红蛋白的含量，这就表明，以血液成份回输的辅助方法可提高人机体的输氧能力。
另言之，如回输500mL 的全血或是275mL 的红细胞悬液，则意味着在已有携氧量的全血中额外又增加了100mL 的氧。
在极限运动时，运动员体内全部血量可每分钟经心脏循环5—6遍。
由于血红蛋白浓度的增加，运动员可获得额外的溶氧量500mLmin。
试验证实，在血液回输调控得当的前提下，可使参赛者在激烈的比赛时每分钟心率有所下降，心输出量增加，乳酸堆积延缓，疲劳产生推后，所获得效果近似于经过高原训练的作用。
血液回输分为异体血和自体血的回输两种，同型血回输是指从同型血的别人或自己身体内抽取一定量的新鲜血液，在赛前较近的一段时间内再输入运动员体内，以达到增加总血容量、红细胞数量和血红蛋白含量的目的；异体同型输血存在着发生肝炎、细菌感染、血液亚型和其他血型不相配等潜在危险，自体血回输法面临保存血液困难的难题。
2、高原训练①与EPO促红细胞生成素是一种调节红细胞生成的激素，其血清浓度随血氧含量的变化而发生相应的改变，以维持机体在低氧或高氧环境中正常的生理功能，但当它的血氧浓度过高或过低时，会引起红细胞增多或红细胞生成不足。
研究表明，只要血氧浓度下降持续 4 h以上，就会刺激体内EPO合成的数量增加，继之血液中EPO浓度会急剧上升，甚至超过正常基线1000倍以上。
因此各国据此普遍对运动员进行高原训练以达到提高运动成绩的目的。
目前高原训练主要包括高住低练法、间歇性低氧训练法、低压氧仓训练法、呼吸低氧混合气体训练法和模似高原训练场馆等方法。
其中高住低练法( High Live- Low train hypothesis)是由美国学者莱文提出并倡导的一种高原训练方法。
其特点是：让运动员在较高的高度上居住，以充分调动机体适应高地缺氧而挖掘本身的机能潜力；在较低的高度上训练又可达到相当大的训练量和强度。
这种异地住练的结合，可以扬高原训练挖掘潜力之长，又可避免在高原上难提高训练量之短。
它可以促进骨髓干细胞分化为原始红细胞并加速原始红细胞以进化为红细胞，并提早释放网织细胞进入血液循环，使红细胞总体的携氧能力增加；还可以有改善心脏功能的作用。
高原训练法的实质是高原训练对人体的影响最主要是通过高原低氧和运动缺氧双重刺激促进体内EPO的分泌。
利用缺氧的环境促进促红细胞生成素的产生，从而达到增加红细胞生成的作用，但高原训练法十分麻烦和艰苦。
3、EPO注射EPO注射主要是指将重组人红细胞生成素(rHuEPO) 注射入人体内。
1985年人类首次利用基因工程技术合成了，1989年美国Amgen公司的重组人红细胞生成素(rHuEPO)，获得了美国FDA的批准文号，其在临床上应用于慢性血透患者，对肾性贫血和非肾性贫血有良好的治疗效果。
但由于rhEPO 可提高最大摄氧量、通气阈、血红蛋白、红细胞压积、红细胞和力竭时间等，还可使心率下降。
在使用rhEPO 4~ 7天后，rhEPO 已恢复正常水平，应用常规检测的色谱学方法无法查出，通过一般尿检也不易查出，而其功效还可持续①每克血红蛋白的最大氧合量为1.34mL，如充分氧化180g 肝糖的需氧量为192g或为134.4mL 氧气。
假设在海平面状态时，每100mL 血含15g 分子的血红蛋白，这就意味着100mL 全血可输送20mL 的氧，在血红蛋白浓度为16g分子每100mL全血时，可携氧21.44mL，输氧能力的改善则意味着可使更多的A T P 生成。
①上高原后，EPO分泌增加。
1972年Peter报道5名男性运动员进入4300米高原血浆EPO15~39小时达到峰值，4~11天红细胞、血红蛋白显著升高。
四周之久，所以导致rhEPO在运动场上的滥用。
长期注射rhEPO 会对内源性EPO 产生反馈性抑制，剂量越大，抑制效果越明显。
短期影响在于红细胞数量的增多加大了血粘滞度，导致微循环缺氧，心脏负担加重，易出现休克，甚至死亡。
1989年国际奥委会医学委员会将rhEPO 等4 种人工合成的肽类激素正式列为违禁药物。
二、EPO的结构与功能（一）EPO的结构EPO是肾脏分泌的一种活性糖蛋白，含165~166个氨基酸残基的肽类激素。
血浆中存在的EPO其肽链是由165个氨基酸组成，在其24、38、83号为点分别为天冬氨酸，糖链以及N糖肽键与天冬酰胺相连-GlcNAC-Asn-X-Thr/Ser，在其肽键165位点的氨基酸以O 糖肽链相连，为-GalNAC-O-Thr/Ser-。
糖链占其糖蛋白相对分子质量的40%左右，其N肽糖链主要由10-15个单糖单位构成，有一共同核心五糖区域，其余糖链主要以四天线复杂型为主，有部分三天线型与二天线型。
不同的糖链构型使其糖蛋白具有不同的生物活性，四天线复杂性的活性最高，后来发现四天线复杂型与肾脏过滤减少与EPO的归巢有关。
其糖链末端唾液酸残基能被唾液酸酶（又称神经氨酸酶）水解，进而使暴露的半乳糖残基与肝脏内的半乳糖特异性识别受体结合被水解。
根据碳水化合物含量不同，天然存在的EPO 分成两种类型：α型与β型。
α型碳水化合物含量占34%，β型碳水化合物含有26%类。
两种类别在生物学特性、抗原性以及临床效果上均相同。
控制人体EPO产生的基因位于7号染色体长臂22区，EPO基因的定位使得EPO的大量生产成为可能。
正常人体血浆中EPO 水平相对比较稳定，一般为4*10-3~24*10-3U/ml，在缺氧及贫血时EPO可高达10U/ml。
（二）EPO的功能EPO是肾脏产生的糖蛋白，主要作用于红系祖细胞，促进其增殖与成熟。
在红细胞生成的过程中EPO主要与其它生长因子，如肝细胞生长因子（SCF）、胰岛素生长因子（CIGF-1）共同协同作用于未成熟的红系祖细胞的增殖期与分化期，通过刺激其有丝分裂、激活红细胞特异基因，进而使红细胞大量增殖与分化。
EPO还能特性型阻断红系祖细胞从红细胞集落形成单位细胞（CFU-E）到早幼红细胞阶段的正常细胞凋亡，促使红系祖细胞的生长与繁殖。
EPO对巨核细胞的生长也具有一定的作用，实验中单独或与血小板生成素（TPO）一起均可以刺激巨核细胞集落成单位细胞以及胞质裂解形成血小板。
EPO产生受到氧气、多种体液与一些免疫调节的细胞因子等因素影响，其中以机体供氧状况研究最多。
当体液中供氧不足时，就会造成机体氧气分压下降，相应的肾小管间质细胞周围的氧气分压下降造成胞浆中氧化还原状态改变，最终造成EPO合成增加。
Franrey 等用肝细胞癌HepG2进行体外实验时发现：体内缺少过氧化氢酶或者过氧化物酶的患者往往会发现其体内的EPO相应的减少。
EPO的合成亦受到多种体液因素的影响，如：甲状腺素、ACTH、肾上腺皮质激素、催乳素等的影响均会增加机体氧内养的利用进而促使EPO 的合成。
当机体相应的甲状腺功能低下时，造成EPO的生成减少，机体代谢过慢，神经系统兴奋性降低，消化吸收功能减弱。
人促红细胞生成素说明书用法
人促红细胞生成素说明书用法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：人促红细胞生成素（EPO）是一种由肾脏分泌的激素，它在人体内起着促进红细胞生成的重要作用。
在正常情况下，EPO的分泌受到血红蛋白水平的调节，当血红蛋白水平下降时，肾脏会释放更多的EPO 来刺激骨髓产生红细胞。
有些疾病或治疗可能会导致血红蛋白水平下降，从而需要通过外部补充EPO来促进红细胞生成。
人促红细胞生成素通常用于治疗贫血，特别是那些由慢性肾脏疾病或化疗引起的贫血。
在这些情况下，患者的肾脏可能无法产生足够的EPO来促进红细胞生成，因此需要通过注射外源性的EPO来提高血红蛋白水平。
EPO也被一些运动员滥用，以提高氧气输送和增强运动表现。
使用人促红细胞生成素的方法主要是通过注射的方式，通常由专业医务人员在医院或诊所内进行。
在接受治疗之前，患者需要接受全面的身体检查，包括血液测试和肾功能检查，以确保安全性和有效性。
对于患有贫血的患者，通常每周注射一次EPO，并根据患者的具体情况和病情严重程度来调整剂量。
在化疗期间的患者可能需要更频繁的注射，以帮助恢复红细胞数量和提高体能。
注射EPO的方法是将药物注射到皮下或静脉内，注射部位通常是在手臂或腹部，注射前需要做好消毒和穿刺操作。
在使用人促红细胞生成素时，患者需要密切注意自己的体征和症状，如头痛、恶心、呕吐、腹痛、注射部位疼痛等不良反应。
如果出现这些不良反应或其他不适症状，应及时告知医务人员，并在医务人员的指导下调整治疗方案。
在接受EPO治疗期间，患者还需要定期进行血液检查和肾功能监测，以确保药物的安全性和疗效。
如果出现不良反应或药物副作用，如高血压、血栓形成、过敏反应等，患者应立即就医并停止使用EPO。
人促红细胞生成素是一种有效的治疗贫血的药物，但在使用过程中仍需密切监测患者的反应和病情变化，并严格遵守医生的处方和建议。
通过正确的使用和管理，可以最大限度地发挥EPO的治疗作用，帮助患者恢复健康。
肾移植术后促红细胞生成素监测临床
简介
促红细胞生成素（erythropoietin , EPO）是机体 内调节红细胞生成的主要体液因子，胚胎时期， 主要来源于肝脏，出生后则85%-90%来源于肾 脏。终末期肾病患者分泌内源性EPO减少，导 致肾性贫血，往往需要注射外源性EPO来纠正 贫血，肾移植术后随着移植肾功能的恢复，血 红蛋白逐渐恢复正常，期间EPO起着重要的作 用。我们回顾总结了我院23例肾移植病例，动 态测定其手术前后血浆EPO水平，观察其与肾 功能恢复及血象变化情况之间的关系。
Group
DGF组(5 例)
HB（g/L）
HCT(%)
RBC(*1012 /L)
正常组 （18例） HB（g/L）
HCT(%)
RBC(*1012 /L)
表2. 肾移植前后血象改术后5d
术后9d 术后14d
术后 21d
100.4±1 2.1
30.6±4. 5
3.7±0.4
图1. DGF组EPO与血象关系曲线图
结果(六)
各值平均值
180
160
140
120
100
EPO
80
HB
60
HCT
RBC 40
20
0 0d
3d
5d
9d
14d 21d 30d 检测时间点
图2. 正常组EPO与血象关系曲线图
讨论
EPO是体内主要促进红细胞生成的激素， 主要由肾脏的氧感受器受缺氧刺激后皮 质肾单位的肾小管周围毛细血管内皮细 胞或纤维细胞合成，其合成受血氧含量 的影响，同时也受Hb和Hct的负反馈调节 [1]。肾移植术后早期由于机体内环境的不 稳定，EPO的合成有其特殊性，下面就 肾移植术后短期内EPO水平的变化及其 临床意义进行分析讨论。
促红细胞生成素引起高血压的机制
促红细胞生成素（Erythropoietin，EPO）是一种重要的蛋白质激素，主要在肾脏中合成，其作用是促进骨髓中红细胞的生成。
然而，近年来的研究发现，促红细胞生成素可能与高血压存在一定的关联，其引起高血压的机制备受学术界的关注。
我们来了解一下促红细胞生成素引起高血压的机制。
研究表明，促红细胞生成素可以通过促进红细胞生成的也会引起血管紧张素II的生成，从而导致血管收缩和血压升高。
促红细胞生成素还可以通过激活内皮细胞的内皮素系统，促进血管收缩，增加外周阻力，进而导致高血压的发生。
在实际生活中，一些患有慢性肾脏疾病的患者由于肾脏功能受损，导致促红细胞生成素的过度分泌，从而引起高血压。
一些使用合成型促红细胞生成素的患者也会出现高血压的症状。
了解促红细胞生成素引起高血压的机制，对于预防和治疗高血压具有一定的临床指导意义。
结合以上机制，我们可以看到促红细胞生成素与高血压之间的关系并不简单。
不仅在疾病发生的机制上存在着相互作用，而且在治疗上也需要从多个角度进行综合考虑。
临床医生在对患有高血压的患者进行治疗时，需要综合考虑患者的肾脏功能、血液检测指标以及药物治疗等方面的因素，在精准化治疗上下更大的功夫。
在我个人看来，研究促红细胞生成素引起高血压的机制，不仅可以增进对慢性肾脏疾病和高血压等疾病之间相互关系的理解，而且可以为相关疾病的早期筛查和干预提供更为全面的依据。
希望未来可以有更多的研究能够揭开促红细胞生成素与高血压之间更为深入的机制，为临床治疗提供更多的可能性和希望。
通过以上的深入探讨，相信读者对于促红细胞生成素引起高血压的机制有了更清晰、更全面的理解。
让我们一起关注这一重要的研究领域，为人类健康做出更多的贡献！促红细胞生成素（Erythropoietin，EPO）作为一种重要的蛋白质激素，在促进红细胞生成的也可能与高血压存在一定的关联。
近年来的研究表明，EPO可能通过多种机制引起高血压，包括促进血管紧张素II的生成、激活内皮细胞的内皮素系统等。
促红细胞生成素正常值范围
促红细胞生成素正常值范围
促红细胞生成素，简称EPO，是一种促进红细胞生成的激素，由肾脏产生。
它的正常值范围是指成人血清中的EPO浓度，通常在4-
24mU/ml之间。
如果EPO的浓度低于正常范围，可能代表着贫血或其他健康问题。
EPO在人体中的作用非常重要。
它可以促进红细胞的生成，使得血液中的氧气输送效率更高。
这对于运动员和登山者等需要大量耗氧的人来说尤其重要。
此外，EPO还可以改善肾脏疾病引起的贫血，提升免疫功能和预防神经系统疾病等方面也具有一定的作用。
然而，过度摄入EPO会导致负面影响。
在一些竞技体育中，为了提高运动成绩，一些人会滥用EPO。
这种行为被认为是非法和危险的，因为它会增加心脏病发生的风险，并导致血栓的形成。
另外，过量使用EPO还可能导致运动员出现脱水等现象，影响身体健康。
为了保持健康，我们应该尽量通过健康的饮食和锻炼来促进红细胞的生成。
对运动员而言，不应滥用EPO等禁药物质，否则会受到惩罚，也会损害身体健康。
在治疗疾病时，如果我们的EPO浓度太低，应该按照医生的指导使用EPO替代治疗。
同时，定期进行血液检查，以及保持健康的生活方式也是能够帮助我们促进红细胞生成和维持健康状态的有效措施。
总之，促红细胞生成素在人体健康中起着非常重要的作用。
了解其正常值范围，并采取合适的措施，可以帮助我们促进健康的红细胞
生成。
但同时，需要注意不要滥用EPO等药物，以免对身体造成伤害。
保持健康的生活方式、饮食和锻炼同样是达到红细胞生成目标的重要
手段。
促红细胞生成素EPO
浅析促红细胞生成素——兴奋剂摘要：促红细胞生成素是由肾脏分泌产生的一种特异性糖蛋白，能够促进骨髓红细胞的增殖与成熟。
其最早用来治疗遗传、癌症、慢性肾衰以及其他一些炎症引起的的贫血症，但是随着经济的发展和技术的更新，促红细胞生成素被作为一种兴奋剂逐渐应用于竞技比赛中，造成运动员身体的损伤以及比赛的不公平。
笔者通过查阅相关文献，从促红细胞生成素的起源，解剖，功能及检测几个方面系统的整合促红细胞生成素的相关知识，为后续读者提供一个较为全面而清晰地学习框架。
关键词：EPO；兴奋剂；运动医学EPO是促红细胞生成素（Erythropoietin）的英文简称，自从发现以来被广泛应用于耐力运动项目中。
人体中的促红细胞生成素能够促进红细胞生成，明显提高人体的红细胞数量及血红蛋白的含量, 从而提高人体运输氧气的能力,提高人体的最大摄氧量, 所以EPO 与运动尤其是耐力运动关系十分密切。
应用基因重组技术成功制造人重组促红细胞生成素( rhEPO) 后, 有些运动员试图通过服用rhEPO提高运动成绩, 但却忽略了服用rhEPO 的副作用,服用红细胞生成素可以使患肾病贫血的病人增加血流比溶度（即增加血液中红细胞百分比）。
人体缺氧时，此种激素生成增加，并导致红细胞增生。
EPO兴奋剂正是根据促红细胞生成素的原理人工合成，它能促进肌肉中氧气生成，从而使肌肉更有劲、工作时间更长。
一、EPO历史来源（一）EPO简介促红细胞生成素(EPO，Erythropoietin)也称为红细胞集落形成刺激物(ECSA)和红细胞生成刺激因子(ESF)，为哺乳动物调节红细胞生成的主要调控因子，1948 年Bonsdor 与Jalsvisto 首次发现，并于1977年由Migake从尿中分离纯化出来的。
人体内的EPO 为一种糖蛋白激素，大部分是肾脏中的酶样物质红细胞生成酶(Erythrogenin)作用于肝脏所生成的促红细胞生成素原(Erythropoietinogen)在血浆中转变而成的。
重组人促红细胞生成素的纯化【精品-PPT】
EPO纯化历史
Miyake的七步法：纯化步骤太多,对设备及 操作要求也较高,不适合工业生产的特点
Spivik利用凝集素亲和层析纯化EPO：由于 凝集素亲和层析凝胶易被杂蛋白不可逆吸 附,使得分离效果降低,成本增高,也不利于大 规模生产
疏水层析,凝胶柱层析等
三步层析法
1. 染料配基亲和层析→反相疏水层析→离 子交换层析;
尿液，血浆，胎盘浸出液 80年代后期编码人EPO基因被克隆 重组人EPO（recombinant human EPO,
rhEPO）在哺乳动物细胞中成功表达
rhEPO的应用
临床应用重组人促红细胞生成素可治疗慢 性肾衰竭合并贫血症，慢性肾功能衰竭 （CRF）贫血，骨髓增生异常综合症贫血 （Myelodys-plastic Syndrom ,MDS）， AIDS病人的伴生贫血，（非髓性）肿瘤伴 生贫血及肿瘤化疗贫血，β地中海贫血,镰刀 形贫血,早产儿贫血等.也可用于外科手术中 的自体输血、骨髓移植等。
为什么第一步先用反相色谱？
综合国外和国内文献，大多数使用的是阴 离子交换柱或亲和柱作为第一步纯化，在 这种方案里，必须先对样品进行超滤，透 析及冻干等以达到浓缩和脱盐目的。
缺点？
低效耗时
糖蛋白对机械作用力敏感，长时间超滤等 处理可能对蛋白造成不可逆损伤，丧失活 性
EPO易吸附在容器表面，处理步骤增多会引 起蛋白回收率下降
而且使用可以用于临床的柠檬酸缓冲液做 流动相，不需另作临床使用溶剂置换处理。
关于三步法的缺点
反相作为起始步骤？ 反相色谱是以高分辨率的纯化方法，将其 作为起始步骤，不能及时处理大量样品， 而且起始物质成分复杂，可能并不能达到 良好的分离效果，还有可能会影响反相介 质的再生作用。
促红素
重组人促红细胞生成素对肾脏移植 后贫血的治疗观点
肾脏移植后早期重组人促红细胞生成素的 应用
重组人促红细胞生成素可有效纠正移植后 早期的贫血，但所需剂量可能高于移植前 用量。
重组人促红细胞生成素对肾脏移植 后贫血的治疗观点
肾脏移植后期重组人促红细胞生成素的应 用
重组人促红细胞生成素对纠正移植后期的 贫血仍然有效，积极纠正移植后期的贫血 可以延缓慢性肾移植物肾病的进展
对于非透析患者或残存肾功能较好的透析患者， 可适当减少初始计量。
对于血压偏高，伴有严重心血管事件，糖尿病 的患者应尽可能的从小剂量开始使用促红素。
重组人促红细胞生成素的剂量调整
促红细胞生成素治疗期间应定期检测Hb水平：诱导治 疗阶段应每2~4周检测一次Hb水平：维持治疗阶段应每 1~2月检测一次Hb水平。
Hb以0.5~1.0g/dl/w的速度快速下降，或需要输红细胞维持Hb水
平。
血小板和包细胞计数正常，且网织红细胞绝对计数小于10000/ul。
PRCA的处理
因为抗体存在交叉作用且继续接触可能导致过敏反应，所以谨慎
起见，在疑诊或确诊的患者中停用任何重组人促红细胞生成素制
剂。患者可能需要输血支持，免疫抑制治疗可能有效，肾脏移植
是有效治疗方法。
PRCA的预防
EPO需要低温保存与皮下注射比较，静脉注射可能减少发生率。
贫血检查内容
贫血检查应包括： 血红蛋白/红细胞压积，红细胞指标（红
细胞计数，平均红细胞体积，平均红细胞 血红蛋白量，平均红细胞血红蛋白浓度 等），网织红细胞计数（有条件提倡检测 网织红细胞血红蛋白量），铁参数（血清 铁，总铁结合力，转铁蛋白饱和度，血清 铁蛋白），大便隐血等。
促红细胞生成素(EPO)与临床
• 影响EPO生成的因素
• EPO的作用
• EPO受体
• EPO与临床
促红细胞生成素（EPO）是一种耐热的糖蛋白， 分子量为34kD，由166个氨基酸组成。胚胎期肝脏是 合成EPO主要的场所，出生后主要由肾脏肾皮质层
间质细胞产生，约占85~90%，此时肝脏仍分泌少量
当受体结构发生变化或由于受体与配基结合不正
常，都会出现由于受体变化而导致的疾病。有人将小 鼠EPOR基因进行点突变，部分缺失，结果发现由于 EPOR结构变化，而造成造血系统发生改变。又如真 性红细胞增多症患者，血内EPOR低于正常或正常，
红系祖细胞对EPO非常敏感，估计这类病人与EPOR，多数学者认为：
①可能与缺氧促使肾组织前列腺素的合成和释放有关。 ②前列腺素激活腺苷酸环化酶增加环磷酸腺苷 (cAMP) 的合成。 ③细胞内 cAMP 浓度增高可使 EPO 基因得以表达，从而促使 EPO产生。
有关低氧促进 EPO 基因表达机制新近有了突破，现已发现 EPO基因的3 / 端存在低氧诱导增强子，5 / 端旁侧序列上含有多 个转录因子的结合位点。在低氧情况下，这些顺式调节元件和 细胞核内反式作用因子特异性结合，从而增强EPO基因表达。
EPOR除了存在红细胞表面外，在非红系的细胞上也有， 国内外研究已证明。采用同位素标记 EPO，可以看到 EPO通 过EPOR的转运，EPO是通过EPOR调节红系的增殖。研究发 现重组人红细胞生成素(rhEPO)可特异性的与睾丸间质细胞上 EPOR 结合，并对睾丸酮分泌有刺激作用，若加入抗 rhEPO 血清可以完全阻断刺激睾丸酮的作用。
二、EPO的作用
EPO基因剔除(EPO-／-)小鼠严重贫血，死于胚胎阶段，由 此可见EPO是一个生命必需的造血因子。 EPO主要的作用是促进红系祖细胞(CFU-E)的增殖、分化及 幼红细胞的成熟、加速网织红细胞的释放及提高红细胞膜的抗
重组人促红细胞生成素的纯化
Sephacryl S-200 色谱分析
流程：
上样体积 80ml 流速 2ml/min 流动相 20mmol/L 柠檬酸钠- 100mmol/L NaCl 缓冲液
结果：收集的rHuEPO保留时间约为45min
比活性约为1.5*108U/g蛋白；纯度 〉98%（SDSPAGE检测） 免疫原性检测：Western blot
重组人促红细胞生成素的纯化
什么是促红细胞生成素？
促红细胞生成素(Erythropoietin，EPO)是一 种促进红系造血前体细胞分化，繁殖的细 胞因子。 EPO产生于人的肾及胎儿的肝脏。
EPO的研究历史
1977年 Miyake 等人首先经过7步纯化从 在障性贫血患者尿中获得毫克量级尿EPO （urine EPO，uEPo） 尿液，血浆，胎盘浸出液 80年代后期编码人EPO基因被克隆 重组人EPO（recombinant human EPO, rhEPO）在哺乳动物细胞中成功表达
分析
分子筛，也就是凝胶层析，主要依赖分子量大小 分离蛋白质，EPO粗制品中分子量接近的蛋白质 较多，且该法上样量小，故一般不用于前期纯化 步骤。 凝胶层析除纯化分离作用外，还可起脱盐和置换 缓冲液作用。 在该方案中纯化的最后一步使用Sephacryl S-200 柱层析，在进一步分离纯化的同时，使终产品溶 液换为可直接临床使用的柠檬酸钠缓冲液。
结果： ELISA检测盒表明75mmol/L洗脱峰中含
EPO
分析
Epo的pI偏低，所以多采用阴离子交换柱层 析，尤其是DEAE离子柱层析如DEAEsephacel,DEAE-sephadex,DEAE-agarose。 离子交换柱结合量大，洗脱体积小，纯化， 浓缩倍数较高。 天然，重组EPO原始粗制品中均含有一定浓 度的盐分，直接上柱层析往往不能很好吸 附，需要预处理。
011重组人促红细胞生成素在肾性贫血中
rHuEPO 在慢性肾脏病患者治疗中的意义
众多国内外资料显示：合理应用 rHuEPO，不仅能有效纠正慢性肾脏病患 者贫血，减少慢性肾脏病患者的左心室 肥大等心血管合并症发生，改善患者脑 功能和认知能力，提高生活质量和机体 活动能力；而且能降低慢性肾脏病患者 的住院率和死亡率。因此，rHuEPO 在慢 性肾脏病治疗中，目前是不可缺少和替 代的。
肾性贫血是慢性肾脏病的重要临床表 现，是慢性肾脏病患者合并心血管并发症 的独立危险因素，有效治疗肾性贫血是慢 性肾脏病一体化治疗的重要组成部分。
重组人促红细胞生成素（rHuEPO）是临 床上治疗肾性贫血的主要药物，在我国临 床应用已经10余年，不仅应用于血液净化 维持透析治疗的患者，而且也应用于非透 析的慢性肾脏病患者。
铁状态评估应对铁储备、用于红细胞生成的铁 充足性、血红蛋白和rHuEPO治疗剂量综合考虑。
铁剂治疗的靶目标值
rHuEPO治疗期间，应该补充足够的铁剂以维持 铁状态的以下参数：
血液透析患者：血清铁蛋白＞200ng/ml，且 TSAT＞20%或CHr＞29pg/红细胞。
非透析患者或腹膜透析患者：血清铁蛋白＞ 100ng/ml，且TSAT＞20%。
PRCA 的处理：因为抗体存在交叉
作用且继续接触可能导致过敏反应，所以 谨慎起见，在疑诊或确诊的患者中停用任 何 rHuEPO 制剂。
患者可能需要输血支持，免疫抑制治疗 可能有效，肾脏移植是有效治疗方法。
PRCA 的预防：EPO需要低温保
存。与皮下注射比较，静脉注射可能 减少发生率。