两种菌种保藏方法的比较
细菌保种方法

/dxyz-b109-99-t-345518非常详细各菌种保存方法的优缺点1.斜面低温保藏法将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌充分生长后,棉塞部分用油纸包扎好,移至2—8℃的冰箱中保藏。
保藏时间依微生物的种类而有不同,霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2—4个月,移种一次。
酵母菌两个月,细菌最好每月移种一次。
此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法,优点是操作简单,使用方便,不需特殊设备,能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等。
缺点是容易变异,因为培养基的物理、化学特性不是严格恒定的,屡次传代会使微生物的代谢改变,而影响微生物的性状;污染杂菌的机会亦较多。
2.液体石蜡保藏法(1)将液体石蜡分装于三角烧瓶内,塞上棉塞,并用牛皮纸包扎,1.05kg/cm2>,121.3℃灭菌30分钟,然后放在40℃温箱中,使水汽蒸发掉,备用。
(2)将需要保藏的菌种,在最适宜的斜面培养基中培养,使得到健壮的菌体或孢子。
(3)用灭菌吸管吸取灭菌的液体石蜡,注入已长好菌的斜面上,其用量以高出斜面顶端1cm为准,使菌种与空气隔绝。
(4)将试管直立,置低温或室温下保存(有的微生物在室温下比冰箱中保存的时间还要长)。
此法实用而效果好。
霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死,酵母菌可保藏1—2年,一般无芽孢细菌也可保藏1年左右,甚至用一般方法很难保藏的脑膜炎球菌,在37℃温箱内,亦可保藏3个月之久。
此法的优点是制作简单,不需特殊设备,且不需经常移种。
缺点是保存时必须直立放置,所占位置较大,同时也不便携带。
从液体石蜡下面取培养物移种后,接种环在火焰上烧灼时,培养物容易与残留的液体石蜡一起飞溅,应特别注意。
3.滤纸保藏法(1)将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条,装入0.6×8cm的安瓿管中,每管1—2张,塞以棉塞,1.05kg/cm2>,121.3℃灭菌30分钟。
(2)将需要保存的菌种,在适宜的斜面培养基上培养,使充分生长。
微生物菌种保藏方法

微生物菌种保藏方法微生物菌种保藏是指将微生物菌种保存在适宜的条件下,使其保持活力和遗传稳定性的方法。
随着微生物资源的日益减少,菌种保藏对于微生物研究和应用具有重要意义。
现今常见的微生物菌种保藏方法主要包括冷冻保存、冷冻干燥和液氮保存等。
I.冷冻保存法冷冻保存法是将微生物菌种在低温下保存,通常是在-80℃或更低的温度下。
冷冻保存的优点是简单易行,保存效果较好。
其步骤如下:1.选择合适的培养基和条件进行培养,确保菌种处于活跃状态;2.菌种分装,常用的分装方式有管内冻存和板块冻存两种。
管内冻存是将菌种转移到小试管中,加入一定的保护剂,如甘油,然后在-80℃下冷冻。
板块冻存是在无菌平板上涂布菌种,用无菌的干胶涂布,然后在-80℃下冷冻;3.将分装好的菌种保存在冷冻机或液氮罐中。
II.冷冻干燥法冷冻干燥法是将微生物菌种先进行冷冻,然后在真空条件下除去水分,最后进行密封保存。
冷冻干燥法的优点是菌种保存稳定性较好,不易失去活力。
其步骤如下:1.选择合适的培养基和条件进行培养,确保菌种处于活跃状态;2.将菌种在低温下冷冻,例如在-80℃冷冻24小时;3.将冷冻的样品放入真空干燥机中,通过极低的压力和温度,使水分从固态直接转变为气态,并在防止湿气生成的条件下除去水分;4.将干燥后的菌种用无菌胶瓶进行密封保存。
III.液氮保存法液氮保存法是将微生物菌种保存在液氮中,保证其温度处于极低的状态。
液氮保存法的优点是保存时间长,保存效果好。
其步骤如下:1.选择合适的培养基和条件进行培养;2.将菌种在低温下冷冻,例如在-80℃冷冻24小时;3.将冷冻的菌种转移到液氮罐中,确保菌种完全浸泡在液氮中;4.密封液氮罐保持其内部温度稳定。
总结起来,微生物菌种保存方法包括冷冻保存、冷冻干燥和液氮保存等多种方法。
科学选用适合的保存方法以及正确操作步骤,可以有效地保护微生物菌种的活力和遗传稳定性,为微生物研究和应用提供有力支持。
常用的菌种保藏方法及其优缺点

常用的菌种保藏方法及其优缺点
菌种保藏是微生物学研究中非常重要的一环,它能够确保菌种的长期保存和传承。
常见的菌种保藏方法包括以下几种:
1. 冷冻保存法:将菌株在-80℃的低温下保存。
这种方法操作简单,保存时间长,但是对于某些菌株来说,冷冻保存可能会对其生长和代谢产生不利影响。
2. 干燥保存法:将菌株培养在固体培养基上,然后将其晾干并保存在干燥的环境中。
这种方法保存时间长,保存成本低,但是对于某些菌株来说,干燥保存可能会导致其失活。
3. 液氮保存法:将菌株在液氮中保存。
这种方法保存时间长,保存效果好,但是液氮保存设备和运输成本较高。
4. 低温保存法:将菌株保存在4℃的低温环境中。
这种方法操作简单,保存成本低,但是保存时间相对较短。
5. 防冻蛋白保存法:将菌株培养在含有防冻蛋白的培养基中,然后在-20℃的低温下保存。
这种方法对于某些菌株来说效果很好,但是防冻蛋白的成本较高。
以上是常见的菌种保藏方法及其优缺点。
在选择菌种保藏方法时,需要根据菌株
的特性和实验需求进行选择。
同时,为了确保菌株的质量,保存前需要对菌株进行鉴定和纯化,并且在保存过程中需要注意保存条件,避免保存过程中出现污染和失活等问题。
各菌种保存方法的优缺点

各菌种保存方法的优缺点1.斜面低温保藏法(1)将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上,待菌充分生长后,棉塞部分用油纸包扎好,移至2-8℃的冰箱中保藏。
(2)保藏时间依微生物的种类而有不同,霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2-4个月,移种一次。
酵母菌两个月,细菌最好每月移种一次。
此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法,优点是操作简单,使用方便,不需特殊设备,能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等。
缺点是容易变异,因为培养基的物理、化学特性不是严格恒定的,屡次传代会使微生物的代谢改变,而影响微生物的性状;污染杂菌的机会亦较多。
2.液体石蜡保藏法(1)将液体石蜡分装于三角烧瓶内,塞上棉塞,并用牛皮纸包扎,1.05kg/cm2,121.3℃灭菌30分钟,然后放在40℃温箱中,使水汽蒸发掉,备用。
(2)将需要保藏的菌种,在最适宜的斜面培养基中培养,使得到健壮的菌体或孢子。
(3)用灭菌吸管吸取灭菌的液体石蜡,注入已长好菌的斜面上,其用量以高出斜面顶端1cm 为准,使菌种与空气隔绝。
(4)将试管直立,置低温或室温下保存(有的微生物在室温下比冰箱中保存的时间还要长)。
此法实用而效果好。
霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死,酵母菌可保藏1-2年,一般无芽孢细菌也可保藏1年左右,甚至用一般方法很难保藏的脑膜炎球菌,在37℃温箱内,亦可保藏3个月之久。
此法的优点是制作简单,不需特殊设备,且不需经常移种。
缺点是保存时必须直立放置,所占位置较大,同时也不便携带。
从液体石蜡下面取培养物移种后,接种环在火焰上烧灼时,培养物容易与残留的液体石蜡一起飞溅,应特别注意。
3.滤纸保藏法(1)将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条,装入0.6×8cm的安瓿管中,每管1—2张,塞以棉塞,1.05kg/cm2,121.3℃灭菌30分钟。
(2)将需要保存的菌种,在适宜的斜面培养基上培养,使充分生长。
(3)取灭菌脱脂牛乳1-2ml滴加在灭菌培养皿或试管内,取数环菌苔在牛乳内混匀,制成浓悬液。
论述菌种的保藏方法

论述菌种的保藏方法菌种的保藏是指将某一种菌株保存在适宜的条件下,以确保其长期存活和保持其遗传特性的一种操作。
菌种的保藏对于科学研究和应用具有重要意义,因为菌株的失活或突变可能导致实验结果的不准确性或应用价值的丧失。
本文将介绍几种常见的菌种保藏方法。
一、冷冻保藏法冷冻保藏法是将菌株保存在低温条件下,以减缓菌株的代谢和生长速率,达到延长其存活时间的目的。
常见的冷冻保藏方法有两种:液氮冷冻和低温冷冻。
1. 液氮冷冻:将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂,然后分装至冷冻管中,迅速将冷冻管浸入液氮中进行冷冻保存。
液氮的温度极低,可以有效地抑制菌株的代谢活动,保证其长期存活。
2. 低温冷冻:将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂,然后分装至冷冻管中,置于-80℃的低温冰箱中保存。
相比于液氮冷冻,低温冷冻的操作更加简便,且可以在普通实验室条件下进行。
二、干燥保藏法干燥保藏法是将菌株保存在无水条件下,通过降低菌株周围环境的水分含量,抑制菌株的代谢活动,并防止细胞内酶的活性。
常见的干燥保藏方法有两种:冷冻干燥和真空干燥。
1. 冷冻干燥:将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的保护剂,然后在真空下进行冷冻干燥。
冷冻干燥的过程中,通过降低温度和压力,使水分直接从固态转变为气态,从而达到保护菌株的目的。
2. 真空干燥:将培养基中的菌株悬浮液均匀涂布在无菌的滤纸或硅胶膜上,然后将其置于真空干燥器中进行真空干燥。
真空干燥的过程中,通过降低压力,将水分从菌株周围环境中蒸发掉,使菌株处于无水状态。
三、液氮冷冻法液氮冷冻法是将菌株保存在液氮中的一种方法。
液氮的温度极低,可以有效地抑制菌株的代谢活动,保证其长期存活。
该方法适用于多种菌株的保藏,包括细菌、真菌和酵母等。
液氮冷冻法的操作步骤如下:1. 将培养基中的菌株悬浮液加入一定比例的甘油或乙二醇等保护剂,以增加菌株的抗冻性。
2. 将菌株悬浮液分装至冷冻管中,每支约0.5-1.0 mL,然后封闭冷冻管。
常用的菌种保藏方法及其优缺点

常用的菌种保藏方法及其优缺点菌种保藏是微生物学研究中的重要环节,其目的是长期保存各类菌种以便于日后的使用和研究。
常用的菌种保藏方法有冷冻保存、制备淡防冻溶液、干燥保存、液氮冷冻保存、冷冻干燥保存等。
下面是这些方法的优缺点。
1.冷冻保存:冷冻保存是通过将菌种保存在低温下,在液氮冷冻罐中或冷冻干燥保存,常见的保存温度为-80°C或液氮温度。
其优点是保存方便,菌种保存时间相对较长;缺点是保存设备和条件要求较高,保存过程中会有一定的细胞破坏。
2.制备淡防冻溶液:制备淡防冻溶液是指制备一种富含保护物质的冻存液,然后将菌种悬浮于其中,并在-20°C或-80°C保存。
其优点是相对简单,易于操作以及相对较长的保存时间;缺点是需要特定的冻存液配方和保存温度。
3.干燥保存:干燥保存是将菌种培养物在低温和低气压下干燥,然后保存于干燥剂中。
其优点是较为简单,设备要求低,保存时间较长;缺点是保存后重新复苏的成功率较低,保存过程中可能会有一定的细胞破坏。
4.液氮冷冻保存:液氮冷冻保存是将菌种保存在极低温的液氮中,常见的保存方法是将菌种培养物按一定比例混合液氮与甘油,然后使用液氮保存。
其优点是保存时间极长,细胞破坏较小;缺点是保存设备和条件要求较高。
5.冷冻干燥保存:冷冻干燥保存是将菌种首先冷冻,然后通过真空干燥的方法去除水分,最后保存在干燥剂中。
其优点是保存效果稳定,保存时间长;缺点是设备要求较高,操控难度大。
总的来说,不同的菌种保藏方法有各自的优点和缺点。
选择合适的方法应根据菌种的特性、实验室的设备和条件、保藏期限以及实验目的等因素综合考虑。
同时,在进行菌种保藏时,应严格控制一系列的操作步骤,包括消毒、菌种的培养与保存温度的选择、保存条件的监测等,以确保菌种的质量和纯度,以及保存结果的可靠性。
菌种保藏方法

菌种保藏方法菌种保藏方法菌种保藏是指将某一种菌株或菌种保存在一定的条件下,以便长期保存并用于研究或应用。
菌种保藏的目的是为了防止菌株的变异和降低其性状的丧失,以便在需要的时候能够重新培养出相同或相似的菌株。
下面将介绍几种常见的菌种保藏方法。
一、冷冻保藏法冷冻保藏法是将菌种保存在低温条件下,一般为-80℃或液氮温度。
这种方法比较简单,操作方便,且保存效果较好。
首先,将菌株从培养基上接种到含有10%-15%甘油的液体培养基中,然后用无菌冻存管将菌液分装好,经过冷冻机或液氮罐进行冷冻保存。
在需要使用菌株时,只需将冻存管快速解冻并转移到新的培养基上即可。
二、真菌分生孢子的枯燥保存法真菌的分生孢子经过枯燥保存后,能够在相对湿度较低的条件下长期保存。
这种保存方法主要适用于真菌,特别是产生分生孢子的真菌。
首先,从培养基上接种分生孢子,培养出菌丝后进行枯燥处理。
一般采用短暂的枯燥处理,依靠菌丝中的水分进行干燥。
然后将枯燥的菌丝放置在无菌瓶中密封保存,放在相对湿度低于30%、温度介于10℃和25℃之间的干燥环境中。
三、气干法气干法是将菌株保存在干燥剂中,以保持菌株的活力。
这种方法适用于较短时间的菌种保存。
首先,将菌株从培养基上接种到含有干燥剂的培养基中,待培养基中的水分被干燥剂吸收后,将菌株封存在密封袋或密封瓶中。
干燥剂一般选择无水硅胶或干燥剂片,确保环境的干燥程度。
四、冷藏法冷藏法是将菌株保存在低温条件下,一般为4℃至10℃之间。
这种方法适用于细菌、酵母和一些真菌的保存。
菌株保存在含有15%-30%甘油的稀释培养基中,然后在低温条件下保存。
需要使用时,只需从低温保存中取出,接种到新的培养基中即可。
总结起来,菌种保藏是一项重要的科研工作,不同的菌种可以采用不同的保藏方法。
冷冻保藏法适用于大部分微生物的保存,真菌的分生孢子的枯燥保存法适用于真菌的保存,气干法适用于较短时间的保存,冷藏法适用于细菌、酵母和一些真菌的保存。
菌种的保藏方法

菌种的保藏方法菌种保藏是微生物学研究中必不可少的一环。
菌种保藏的目的是保存菌种的遗传信息、保持菌种的稳定性和纯度,为后续的研究提供保障。
本文将介绍几种常见的菌种保藏方法。
1. 冻干法冻干法是一种常用的菌种保藏方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻干管吸取菌液。
将冻干管放入液氮中,冷冻至-80℃,待冻干后,将管子密封,保存在-80℃的冰箱中。
冻干菌株可以保存多年,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
2. 静态液氮法静态液氮法是一种高效、长期保存菌株的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入液氮中,冷冻至-196℃,保存在液氮罐中。
静态液氮保存的菌株可以保存数十年,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
3. 冷藏法冷藏法是一种简单、易行的菌株保存方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将冻存管放入4℃的冰箱中保存。
冷藏法保存的菌株可以保存数个月,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
4. 活体保存法活体保存法是一种将菌株保存在活体状态下的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入冰箱中,温度为4℃-8℃。
活体保存法可以保存数个月,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
5. 长期培养法长期培养法是一种将菌株保存在活体状态下的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入冰箱中,温度为4℃-8℃。
每隔一段时间,将菌株转移到新的培养基上进行培养,以保持菌株的纯度和稳定性。
总之,菌种保藏是微生物学研究中必不可少的一环。
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临时保藏法 适应对象 适用于频繁使用的菌种
甘油冷冻管藏法
适用于需要长期保存的菌 种
方法
将菌种接种到固体斜
在3mL的甘油瓶中,装
面培养基上,在适宜的温 入1mL甘油后灭菌。将1mL
度下培养。当菌落长成以 培养的菌液转移到甘油瓶
后,将试管置于4℃的冰箱 中,与甘油充分混匀后,
中保藏。
放在-20℃的冷冻箱中保藏。
缺点
保存时间不长,菌种容易 被污染或产生变异
操作相对复杂,要求严格
相同点
菌种放在低温环境中保藏的目的是降低新陈代谢速率, 延缓菌种衰老。