大鼠脊髓横断
大鼠完全脊髓横断损伤膀胱功能障碍模型的建立及评价
住提起来时就开始排尿 ， 可能是压力性尿失禁现象。 ５ 通过膀胱 内压评估大鼠膀胱活动状况 ． ２ 分别 对健康 大 鼠和 Ｓ Ｉ 鼠进行 膀胱灌 注实 Ｃ大 验， 记录膀胱压力 曲线图 ， 比较健康大 鼠和 Ｓ Ｉ 鼠 Ｃ大 膀胱压力反射活动状况。先用 １％水合氯醛 （５— ０ ３０ ４０ ｇ ｇ对大 鼠进行全身麻醉 ， ０ｍ ／ ） ｋ 在下腹部 中间剪开
次 ， 周后降低到每天 １ 。由于大 鼠术后疼痛 ， １ 次 在 按 压 腹 部 过程 中会 激烈 挣 扎 ， 操 作 方便 和 安 全 角 从
度 考 虑 ， 在 按 压 腹 部 排 尿 前 采 用 １％水 合 氯 醛 故 ０ （５－ ４０ ／ｇ对大 鼠进行 麻 醉 ， ３ ０－ ０ｍｇｋ） 这样 不仅 防止 了 大 鼠挣 扎过 程 中对 操 作 者 造成 伤 害 ， 同时 麻 醉状 况 下膀 胱 的尿 道括 约肌 松 弛更利 于按 压腹 部排 尿 。开 始按 摩 时用 力要 轻 ， 防挤爆 膀胱 ， 以 等排 出尿 后 可适
Ｒｅ ｕ ｔ Ｍｏ ｔ ｆ ｔ ｅ ｏ ｌ ａｉｎ ｏ ｌ ｅ ｒ ｌ ｖ ｄ ｗ ｔ ｏ ｔ ｓ ｒ ｅ ｙ ｃ ｒ ．Ｔ ｅ ｗｅｇ ｔ ｏ ｒ ｅ ｎ ｒ ａ ｅ ｎｔ ｌ ｓ ｌ： ｓ ｏ ｈ ｃ ｍｐ ｉ ｔ ｓ ｃ ｕ ｄ ｂ ｅｉ ｅ ｉｈ ｐ ｓ— ｕ ｇ ｒ ａ ｅ ｈ ｉｈ ｆ ｕ ｎ ｉｃ ｅ ｓ ｄ ｉ ｉ ａ — ｃ ｏ ｅ ｉ ｉ ｌ ｎ ｒ ａ ｈ ｄ ｔ ｅ ｋ ｔ － ｅ ｏ ｔ ｓ ｉａ — ｒ ｎ ｅ ｔ ｎ ｆ ｌ ｗｅ ｂ ｒ ｄ ａｌ ｄ ｃ ｉｉ ｇ ｄ ｒ ｃ ｎ ｉ ｕ ｕ ｎ ｙ ａ ｄ ｅ ｃ ｅ ｏ ａ ｐ ａ ａ １ ｗｅ ｋ ｐ ｓ— ｐ ｎ ｌ ｔａ ｓ ｃ ｉ ｏ ｌ ｄ ｙ ｇ ａ ｕ ｌ ０ ｏ ｙ ｅ ｌ ｎ ．Ｕｎ ｅ ｏ ｔ ｏ ｓ ｉ — ｎ ｎ ｆ ｓｏ ｆ ｓ ｌ ｅ ｎ ｏ ｈ ｂ ａ ｄ ｒ ｗｉ ｃ ｎ ｔｎ ａ ｅ ｈ ｂ ａ ｄ ｒ ｆ ｉ ｔｃ ｒ ｔ ｎｔ ｔ ｄ ｅ ｏ ｉ ｖ ｉ ｉ ｇ ｏ ｔａ － ｕ ｉ ｎ ｏ ａｉ ｉ ｔ ｔ ｅ ｌｄ ｅ ｔ ｎ ｈ ｏ ｓａ ｔ ｒ ｔ ，ｔ ｅ ｌ ｄ ｅ ｏ ｎ ａ ｔ ａｓ ｉ ａ ｅ ｐ ｒ ｄ ｃ ｏｄ ｎ ｃ ｎ ｒ ｃ ｉ ｉ ｉ ｔ ｎ ．Ｉ ｏ ｔａ ｔ ｈ ｌ ｄ ｅ ｆ ｓ ｉ ａ — ｒ ｎ ｅ ｔ ｎ ｒ ｔ ｈ ｗ ｄ ｕ ｉ ｈ ｂ ｔｄ ｎ ｎ ｖ ｉ ｉ ｇ ｃ ｎ ｒ ｃｉ ｎ ｗ ｔ ｉ ｃ ｅ ｓｎ ｉ ｓ ｎ ｃ ｎ ｒ ｓ， ｅ ｂ ａ ｄ ｒ ｏ ｐ ｎ ｌ ｔａ ｓ ｃｉ ａ ｓ ｏ ｅ ｎ ｎ ｉ ｉ ｏ — ｏ ｄ ｎ ｏ ｔａ ｔ ｓ ｉ ｏ ｔ ｏ ｓ ｅ ｏ ｈ ｎ ｒａ ｉｇ
大鼠脊髓横断及半横断模型的制备
大鼠脊髓横断及半横断模型的复制动物脊髓损伤模型既可用来研究脊髓损伤的病理生理学机制，又可用来筛选有助于脊髓损伤恢复的治疗措施。
损伤模型包括以下几类：①机械损伤；②电损伤；③激光损伤；④缺血性脊髓损伤以及化学损伤。
复制机械性脊髓损伤模型的关键点，是如何使脊髓损伤客观化、定量化，并具有较高的可重复性。
脊髓横断或半横断模型最常见，方法较为简便。
1、实验准备（1）动物：SD大鼠，体重180～220g。
（2）器械：大鼠固定木板1块医用酒精棉球若干5ml一次性注射器1支弯头手术剪1把（14#，备皮用）双面保险刀片1片尖端圆钝的细钢丝钩形探针1根（可用回形针自己制作，尖端尽量磨圆）手术显微镜1架（条件允许时）直尺1把缝线及缝针（3）试剂：3%戊巴比妥钠（30mg/kg），冰冻生理盐水，温热生理盐水2、实验步骤（1）观察大鼠在脊髓损伤前的行走行为，并用针刺其后肢脚趾，观察反应情况。
（2）选择体重180～220g的雌性大白鼠，经腹腔注射3%异戊巴比妥钠（30mg/kg）麻醉后，腹位固定于手术台上，剪除胸腰断背部毛发，于T5~T13中线切开皮肤，钝性分离浅筋膜，剪开棘突两侧筋膜及肌肉，于T8~T9进行椎板切除术。
暴露脊髓，用温热生理盐水冲洗伤口。
（3）脊髓横断：将双面保险刀片打磨成适当的形状，尖端呈锐角，便于切断脊髓。
将一尖端圆钝的细钢丝钩形探针，沿硬脊膜外由椎管的一侧导致另一侧，轻轻提起脊髓，运用刀片往返运动（如锯木头般）切断脊髓。
此时，如脊髓完全横断，则探针可由脊髓断端取出。
用冰冻生理盐水反复冲洗伤口止血。
（4）脊髓半横断：将打磨好的尖端锐利的保险刀片沿脊髓中线（尽量避开脊髓中央动脉）垂直插入至椎管底，并向椎管一侧划开脊髓，重复一次，保证一侧脊髓完全横断。
用冰冻生理盐水反复冲洗。
（5）手术效果观察：在手术显微镜下观察伤口出血情况和脊髓断端损伤程度。
断端回缩，测量断端间隙，检查脊髓横断或半横断是否完全。
（1）脊髓损伤手术完成后，用细缝线缝合深层肌肉，逐层缝合伤口。
脊髓横切实验报告
实验目的：1. 观察脊髓横切后的生理变化。
2. 研究脊髓横切对机体运动和感觉功能的影响。
3. 探讨脊髓横切在神经科学研究和临床治疗中的应用价值。
实验材料：1. 实验动物：成年大鼠（体重200-250g）。
2. 实验仪器：手术显微镜、手术器械、解剖显微镜、电子天平、电生理记录仪等。
3. 实验试剂：生理盐水、碘伏、酒精、10%福尔马林等。
实验方法：1. 实验动物处死后，打开胸腔，暴露心脏，用生理盐水心脏灌流。
2. 暴露脊髓，用手术显微镜观察脊髓横切位置。
3. 在脊髓横切位置上方和下方分别标记，并记录脊髓横切长度。
4. 分别记录脊髓横切前后的动物活动情况、体温、呼吸等生理指标。
5. 通过电生理记录仪观察脊髓横切前后神经传导功能的变化。
6. 将脊髓横切后的动物进行病理学检查，观察脊髓横切对脊髓组织的影响。
实验结果：1. 脊髓横切后，动物活动明显减少，表现出瘫痪状态。
2. 脊髓横切后，动物体温和呼吸基本稳定，无明显异常。
3. 电生理记录显示，脊髓横切后神经传导功能显著下降，部分神经传导完全消失。
4. 病理学检查发现，脊髓横切部位脊髓组织出现明显的病理改变，包括神经细胞变性、坏死等。
实验分析：1. 脊髓横切后，动物活动明显减少，表现出瘫痪状态，说明脊髓横切破坏了脊髓的完整性，导致神经传导功能受损。
2. 脊髓横切后，动物体温和呼吸基本稳定，说明脊髓横切对动物的生命体征影响较小。
3. 电生理记录显示，脊髓横切后神经传导功能显著下降，部分神经传导完全消失，进一步证实了脊髓横切对神经传导功能的影响。
4. 病理学检查发现，脊髓横切部位脊髓组织出现明显的病理改变，说明脊髓横切对脊髓组织造成了严重损伤。
结论：1. 脊髓横切实验成功模拟了脊髓损伤的病理过程，为研究脊髓损伤的机制和治疗方法提供了实验依据。
2. 脊髓横切实验表明，脊髓横切对神经传导功能有显著影响，可能导致瘫痪等严重后果。
3. 脊髓横切实验为神经科学研究和临床治疗提供了新的思路和方法。
脊髓横切的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 观察脊髓横切后的生理现象。
2. 了解脊髓横切对机体运动和感觉功能的影响。
3. 掌握脊髓横切实验的操作步骤。
二、实验原理脊髓是中枢神经系统的重要组成部分，具有传导神经冲动、调节运动和感觉的功能。
脊髓横切实验可以模拟脊髓损伤，观察脊髓横切后机体运动和感觉功能的改变，从而了解脊髓的生理功能。
三、实验材料1. 实验动物：小鼠（体重20-25g）2. 实验仪器：手术显微镜、手术刀、剪刀、镊子、缝针、缝线、生理盐水、酒精、碘伏等3. 实验试剂：0.9%氯化钠溶液、2%戊巴比妥钠溶液、2%碘伏溶液四、实验步骤1. 实验动物准备：选取健康小鼠，用2%戊巴比妥钠溶液进行麻醉，待动物完全麻醉后，固定于手术台上。
2. 背部皮肤消毒：用碘伏对实验动物背部皮肤进行消毒。
3. 背部皮肤切开：用手术刀在实验动物背部正中切开皮肤，长度约为2-3cm。
4. 分离肌肉组织：用剪刀剪开肌肉组织，暴露脊髓。
5. 脊髓横切：用手术刀在脊髓正中横切脊髓，注意避免损伤脊髓周围的神经和血管。
6. 缝合伤口：用缝针和缝线将皮肤和肌肉组织缝合，确保缝合牢固。
7. 观察脊髓横切后的生理现象：观察实验动物的运动和感觉功能改变，包括行走、肢体活动、疼痛反应等。
8. 实验动物恢复：待实验动物清醒后，观察其恢复情况。
五、实验结果与分析1. 脊髓横切后，实验动物的运动功能受到影响，表现为肢体活动不协调、步态不稳等。
2. 脊髓横切后，实验动物的感觉功能受到影响，表现为对疼痛反应减弱或消失。
3. 随着时间的推移，实验动物的运动和感觉功能逐渐恢复，但恢复程度因个体差异而异。
六、实验结论1. 脊髓横切实验可以模拟脊髓损伤，观察脊髓横切后机体运动和感觉功能的改变。
2. 脊髓横切对机体运动和感觉功能有显著影响，但具有可恢复性。
3. 脊髓横切实验为研究脊髓生理功能和损伤修复提供了实验依据。
七、实验讨论1. 脊髓横切实验中，实验动物的运动和感觉功能受到不同程度的影响，这与脊髓横切损伤的程度有关。
大鼠脊髓横断后不同时期膀胱顺应性和形态学变化要点
１．一般情况：脊髓横断组大鼠术后均出现运动和 排尿功能障碍。至行尿动力学检查时，Ｂ组死亡７只； Ｄ组死亡６只，另有１只尿路感染伴发膀胱结石，亦不 计人统计；Ａ组和Ｃ组全部存活。所有死亡大鼠均发 生于脊髓横断术后２周内，大鼠死亡原因包括：泌尿系 感染、膀胱破裂及其他部位感染等。 ２．大鼠体重与膀胱重量：脊髓横断组大鼠体重在 ６周［（２１８．４±５．５）ｇ］和１２周［（２４３．５ ４－８．５）ｇ］时 间点上均较对照组轻［（２３４．９ ４－４．７）ｇ和（２５４．０
表１术后各组不同时期尿流动力学变化（孟±ｓ）
力学检查。给予大鼠１０％水合氯醛溶液（３ ｍｌ／ｋｇ）腹 腔注射麻醉后暴露膀胱，于膀胱顶处穿刺１孔，置人 ５Ｆｒ双腔测压管，３－０线荷包缝合并固定测压管，检查 确保不漏尿，抽去膀胱内尿液，将双腔测压管分别与压 力换能器及微量灌注泵相连，标定零点，用微量灌注泵 将温生理盐水以１２ ｍｌ／ｈ的速度行膀胱灌注，当大鼠 有排尿反射或漏尿时停止灌注，保留膀胱压力与容量 曲线。膀胱顺应性＝ＡＶ／△Ｐ，ＡＶ为从开始到漏尿 发生时的灌人量，△Ｐ为膀胱发生漏尿时与灌人开始 时膀胱压的差值。 ４．苏木素．伊红（ＨＥ）染色、Ｖｅｒｈｏｅｆｆ－Ｖａｎ Ｇｉｅｓｏｎ染 色及荧光染色：自膀胱颈剪下大鼠膀胱，剔除膀胱壁周 围结缔组织，制作石蜡标本并切片，每张切片标本厚
Ｖｅｒｈｏｅｆｆ－Ｖａｎ
Ｇｉｅｓｏｎ染色，分别观察膀胱壁平滑肌、胶原纤维及弹性纤维比例的变化。结果与对照
组比较，脊髓横断组大鼠出现运动和排尿功能障碍，Ｂ组膀胱顺应性较对照组升高，Ｄ组顺应性较对照 组降低，差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５），脊髓横断组肌纤维走行紊乱与胶原纤维比例增加均随损伤 时间延长逐渐加重；Ｄ组与Ｂ组比较，膀胱顺应性降低［（０．０４６±０．０２３）ｍｌ／ｃｍＨ２０比（０．１４６± ０．１０７）ｍｌ／ｃｍＨ：０（１
脊髓半横断实验报告
实验目的：通过脊髓半横断实验，观察和记录损伤对脊髓功能的影响，分析脊髓损伤后的神经传导障碍及其对肢体运动和感觉功能的影响。
实验材料：1. 实验动物（如大鼠）2. 微型手术器械3. 显微镜4. 神经生理记录仪5. 脱水和染色试剂6. 光学显微镜实验方法：1. 动物准备：选取健康成年大鼠，雌雄不限，体重约200-250克。
在实验前禁食12小时，自由饮水。
2. 脊髓半横断操作：- 将大鼠麻醉后固定于手术台上。
- 沿背部正中线切开皮肤，暴露T10-T12脊髓节段。
- 在脊髓表面铺以消毒的手术膜，以保护脊髓表面。
- 在脊髓的中央用手术刀片进行半横断损伤，确保损伤深度不超过脊髓的全层。
3. 观察指标：- 损伤后立即观察损伤侧和对侧肢体运动和感觉功能的变化。
- 使用神经生理记录仪记录损伤前后脊髓的电生理活动。
4. 组织学观察：- 损伤后24小时，处死大鼠，取出损伤节段的脊髓。
- 进行脱水、透明化处理。
- 染色后，在光学显微镜下观察脊髓损伤的形态学变化。
实验结果：1. 行为学观察：- 损伤后，损伤侧肢体出现明显的运动障碍，表现为肢体无力、肌肉萎缩、关节活动受限等。
- 损伤侧肢体感觉功能减退，表现为触觉、痛觉和温度觉的减退或丧失。
2. 神经生理学观察：- 损伤后，脊髓的电生理活动出现明显异常，表现为兴奋性降低、动作电位幅度减小等。
3. 组织学观察：- 光学显微镜下可见损伤节段脊髓的神经元细胞核固缩、细胞质减少，部分神经元出现变性、坏死。
- 损伤节段脊髓的白质出现不同程度的脱髓鞘改变。
讨论：脊髓半横断实验结果表明，脊髓损伤会导致损伤侧肢体运动和感觉功能的障碍。
损伤后，脊髓的电生理活动和组织学结构发生改变，这可能是导致功能障碍的原因。
1. 神经传导障碍：脊髓半横断损伤导致损伤侧脊髓的神经元细胞和神经纤维受损，神经传导通路受阻，从而引起肢体运动和感觉功能的障碍。
2. 神经再生：脊髓损伤后，受损的神经元和神经纤维有可能发生再生。
大鼠脊髓横断伤后护理对生存质量及功能评分的影响
度 。 日应 解 除 悬 吊 ２次 ， 次 ２ ３ｈ 每 天 一 次 给 于 按 摩 后肢 ． 每 每 ～ 。
保持关节的灵活被动活动。
１ ． 统 计 学 处 理 ４
Ａ、 Ｂ两 组 实 验 数 据 采 用 ｘ 检 验 ， 行 比较分 析 。 进
１２ 动 物 模 型 ．
２ ％戊 巴 比妥 钠 腹 腔 内注 射 麻 醉 （ ０ ｍ ／ｇ ， Ｔ一 棘 突 ３ ｇｋ ） 以 ８Ｔ。 中心 作 背 部 正 中切 口 ，剥 离 椎 旁 肌 肉 ，显 微 咬骨 钳 咬 除 Ｔ 一 ８ 。 Ｔ 棘 突 和椎 板 ， 暴露 待 损 伤 脊 髓 ． 长 ４ ５ ｍ 用 锋 利 的 刀 片 将 约 ～ ｍ，
往 导 致 关 节 活 动 受 限 或 变 形 ， 而 影 响 术 后 运 动 功 能 从
时间 （） ｄ
图 １ 生 存 率 分 析
出 现 时 间 ， 用 Ｃ Ｘ 回归 后 退 法 逐 步 筛 选 变 量 ， 两 组 大 鼠 的 应 Ｏ 对 生存 期 影 响 因素 进行 筛 选 与分 析 。 在处 理 措 施 中 ， 伤 后 Ａ组 对 损 大 鼠生 存 时 间的 影 响大 。对 生 存状 况 的 七 症 状 进 行分 析 ， 中 个 其 尿 路感 染 和下 肢 肿 胀是 影 响 大 鼠生 存 质量 的 主要 凼 素 ， 见表 １ 。
ｌ 材 料 与 方 法
１１ 实验 动 物 ．
雄性成年 Ｓ Ｄ大 鼠 ４ Ｏ只 ， 重 （５ ￣ ５ ｇ 由福 建 医 科 大 学 体 ２０２ ）， 实 验 动 物 中心 提 供 。随 机 分 成 脊 髓 损 伤 非 护 理 组 （ 组 ） 脊 髓 Ａ 、 损 伤 护 理组 （ Ｂ组 ） 每组 ２ ， Ｏ只 。
大 鼠脊髓 横 断伤 后 护 理 对 生存 质 量及 功能 评分 的影 响
大鼠脊髓全横断后脊髓内NGF、NT3表达的变化
ｓ ｏ ｄ ｔ ａ （ ） ｅ ｎ ｍｂ ｒ ｏ ｈ ｗｅ ｈ ｔ １ Ｔｈ ｕ ｅ ｆＮＧＦ， ＮＴ３ ｐ ｓｔ ｅ ｃ ｌ ｔｄｆｅ ｅ ｔｔｍｅ ｏ ｎ ｆｅ ｐ ｒ ｔ ｎ ｉ — ｏ ｉｉ ｅｌ ａ ｉ ｒ ｎ ｉ ｐ ｉｔａ ｔｒ ｏ ｅ ａ ｉ ｎ ｖ ｓ ｆ ｏ ｃ ｅ ｓ ｄ ｃ ｍｐ ｒ ｄ ｗｉｈ ｎ ｒ １ｇ ｏ ｐ， ｉｎ ｆ ａ ｔｙ ｉ ｄ ｇ ｏ ｐ（ ｒ ａ ｅ ｏ ａ ｅ ｔ ｏ ｍａ ｒ ｕ ｓｇ ｉ ｃ ｎ ｌ ７ ｒ ｕ Ｐ＜ Ｏ Ｏ ） ｏ ｃｕ ｉｎ Ｔｈｅｒ ｓ ｌｓ ｉ ｎ ． １ ．Ｃ ｎ ｌｓｏ ｅ ｕ ｔ
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自 １５ ９２年 Ｌ ｖ－ ｎａｃ ｉ 现 ＮＧＦ至 今 已 ｅｉ Ｍｏ ｔｌｉ 发 ｎＬ １ 半个 世 纪 。ＮＴ ３由 Ｅ ｎｏｓ］ 于 １ ９ ＿ ｒｆｒ［ 等 。 ９０年 发 现 ， 根 据来 源及 生 物 活性 首先 命 名 为海 马源 性 神 经 营养 因
．
Ｔｈ ｔＮＧＦ ｎ ａ ａ ｄ ＮＴ－ ｏ ｉ ｖ ｅｌ ｕ ｅ ｓ ｉ ｉ ｅ ｅ ｔ ｉｔｒ ａ ａ ｓ ａ ｔｒ ｔａ ｓ ｃ ｉｎ ｏ ｅ ａ ｉｎ ３ ｐ ｓｔ ｅ ｃ ｌ ｎ ｍｂ ｒ ｎ ｄ ｆ ｒ ｎ ｎ ｅ ｖ ｌｄ ｙ ｆｅ ｒ ｎ ｅ ｔ ｐ ｒ ｔ ｉ ｓ ｆ ｏ ｏ
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三、脊髓横断模型构建:将一尖端圆钝 的细钢丝钩型探针，沿硬脊膜外由锥管的一 侧导致另一侧，轻轻提起脊髓，运用刀片往 返运动切断脊髓。此时，如脊髓完全横断， 则探针可由脊髓断端取出。用冰冻生理盐水 反复冲洗伤口止血。
脊髓损伤手术完成后，用细丝线缝合深 层肌肉，逐层缝合伤口。术后1周，观察大 鼠后肢爬行运动，并比较脊髓横断后的差别 及对针刺两侧后肢的反应。
【目的和内容】
动物脊髓损伤模型既可用来研究脊髓损伤的 病理生理学机制，又可用来筛选有助于脊髓损伤 恢复的治疗措施。损伤模型包括以下几类：①机 械损伤；②电损伤；③激光损伤；④缺血性脊髓 损伤以及化学损伤。复制机械性脊髓损伤模型的 关键点，是如何使脊髓损伤客观化、定量化，并 具有较高的可重复性。
了解脊髓损伤模型的意义及应用。 掌握有关手术方法及实验技术。 比较损伤前后切面水平以下两侧肢体的运动 功能和感觉功能的不同
【材料和用具】
大鼠、手术器械一套、双面保险刀片、解 剖台、缝合针、缝合线、烧杯、滴管、止血钳、 玻璃分针、棉花、乙醚、75%酒精、戊巴比妥 钠、生理盐水等。
【操作步骤】
一、观察大鼠在脊髓损伤前的行走行为， 并用针刺其后肢脚趾，观察反应情况。
二、选择体重180-220g的大白鼠，经腹腔 注射40mg/ml戊巴比妥钠(4Omg/kg)麻醉后，腹 位固定于手术台上，剪除胸腰段背部毛发，于 T5-T13，中线切开皮肤，钝性分离浅筋膜，剪 开棘突两侧筋膜及肌肉，于T8-T9伤口。