实验三 细菌分离培养与培养性状观察
细菌的分离培养及培养性状的观察
实验四 细菌的分离培养及培养性状的观察在细菌学检验中，细菌的分离培养是重要的基本技术之一。
从混杂微生物中获得单一菌株纯培养的方法称为分离；纯培养是指一株菌种或一个培养物中所有的细菌都是由一个细胞分裂、繁殖而产生的后代。
分离培养的目的在于从被检材料中，或者从污染的众多杂菌中分离出纯的病原菌。
细菌分离培养应先从被检材料或病料中分离培养单个菌落，然后钓取可疑菌落进行纯培养，再将纯培养物移植培养。
目的要求1．学习、掌握需氧菌和厌氧菌分离培养的基本要领和技术。
2．了解细菌的菌落形态及其在各种培养基上的培养性状。
3．了解培养性状对细菌鉴别的重要意义。
4．掌握钓菌、纯培养及移植技术。
操作步骤一．需氧性细菌分离培养法1. 平板划线分离法菌种被其他杂菌污染时或混合菌悬液常用平板划线法进行纯种分离，此法是借助将蘸有混合菌悬液的接种环在平板表面多方向连续划线，使混杂的微生物细胞在平板表面分散，经培养得到分散的由单个微生物细胞繁殖而成的菌落，从而达到纯化目的。
但划线分离的培养基必须事先倾倒好，需充分冷凝待平板稍干后才可使用；为便于划线，一般培养基不宜太薄，每皿约倾倒20 ml 培养基，培养基应厚薄均匀，平板表面光滑。
划线分离主要有连续划线法（图4-1）和分区划线法（图4-2）两种。
划线法示意图见图4-3。
（1）连续划线法以无菌操作用接种环直接取平板上待分离纯化的菌落。
将菌种点种在平板边缘一处，取出接种环，烧去多余菌体。
将接种环再次通过稍打开皿盖的缝隙伸入平板，在平板边缘空白处接触一下使接种环冷却，然后从接种细菌的部位在平板上自左向右轻轻划线，划线时平板面与接种环面成30～40度角，以手腕力量在平板表面轻巧滑动划线，接种环不要嵌入培养基内划破培养基，线条要平行密集，充分利用平板表面积，注意勿使前后两条线重叠。
划线完毕，关上皿盖。
灼烧接种环，待冷却后放置接种架上。
培 养皿倒置于适宜的恒温箱内培养。
培养后在划线平板上观察沿划线处长出的菌落形态，涂片镜检为纯种后再接种斜面。
细菌分离培养实验报告
一、实验目的1. 了解细菌的生长特性。
2. 掌握细菌分离培养的方法。
3. 培养出单一菌株，为后续的鉴定和研究提供基础。
二、实验原理细菌分离培养是指将混合菌落中的单一细菌分离出来，使其在无竞争的环境中独立生长。
常用的方法有均匀涂布法、斜坡涂布法和点式涂布法。
本实验采用均匀涂布法进行细菌分离培养。
三、实验材料1. 培养基：营养琼脂平板2. 细菌样本：土壤样本3. 仪器：无菌操作台、无菌镊子、无菌移液器、无菌接种环、酒精灯、培养箱等四、实验步骤1. 无菌操作：在无菌操作台中，将培养基平板倒置放置，待平板凝固。
2. 取样：用无菌镊子取少量土壤样本，放入无菌试管中。
3. 制备土壤悬液：向试管中加入适量无菌生理盐水，用无菌移液器充分振荡，使土壤样本充分悬浮。
4. 稀释：取适量土壤悬液，加入无菌生理盐水进行稀释，制备不同浓度的土壤悬液。
5. 接种：用无菌接种环蘸取稀释后的土壤悬液，均匀涂布在营养琼脂平板表面。
6. 培养：将涂布好的平板倒置放入培养箱，在适宜的温度下培养。
7. 观察结果：定期观察平板上的菌落生长情况，记录菌落特征。
五、实验结果与分析1. 观察到平板上有不同形态的菌落生长，说明土壤样本中存在多种细菌。
2. 通过观察菌落特征，如菌落大小、形状、颜色、边缘等，初步判断部分菌落可能为同一种细菌。
3. 对疑似同种细菌的菌落进行挑取，进行纯培养。
六、实验讨论1. 本实验采用均匀涂布法进行细菌分离培养，操作简单，易于观察菌落特征。
2. 在实验过程中，无菌操作至关重要，以免污染样本和培养基。
3. 细菌分离培养结果受多种因素影响，如培养基成分、培养条件等，需严格控制实验条件。
4. 通过本实验，掌握了细菌分离培养的基本方法，为后续的细菌鉴定和研究奠定了基础。
七、实验总结通过本次实验，我们了解了细菌的生长特性，掌握了细菌分离培养的方法，为后续的细菌鉴定和研究提供了基础。
在实验过程中，我们认识到无菌操作的重要性，以及实验条件对实验结果的影响。
细菌分离培养及培养特性观察
四、实验方法与步骤
2.平板划线分离 最常用的平板接种法是划线法。先将 接种环用火焰灭菌，待冷却后挑取检查 材料，涂于平板的上端，随即向下连续 平行划线至平板的底部，划线时接种环 与平板表面所成的角度要小，以免划破 琼脂。划线要密而不重复，充分利用平 板的表面。划线完毕，先盖好平板，再 将接种环上残留的细菌用火焰灭菌。
菌落形态
五、注意事项
观察菌落时，不要将空气中落入培养基 而生长的杂菌误认为目的细菌。 杂菌一般生长于划线痕迹外，或为个别 的形状异常的孤立菌落。 保护好平板，勿使再落入杂菌。
六、实验作业
1、细菌分离培养的原理？ 2、细菌分离培养及移植应注意哪些事项？ 3、将细菌菌落观察结果绘图记录。 4、完成实验报告。
微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落，通常 是由一个细胞繁殖而成的集合体。因此可通过挑取 单菌落而获得一种纯培养。获取单个菌落的方法可 通过稀释涂布平板或平板划线等技术完成。 将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养 基上的操作技术称之为接种。接种的关键是要严格 的进行无菌操作。 细菌的培养特性包括细菌的生长条件和生长表现， 单个细菌或单种细菌在固体培养基表面生长繁殖， 形成肉眼可见的菌落，各种细菌所形成的菌落特征 是不同的，按照各种细菌所形成的菌落特征，可以 在鉴别细菌中作为依据。
三、实验器材
牛肉膏蛋白胨培养基、接种环、酒精 灯、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、接种 环、无菌培养皿、涂布器、恒温培养箱 等。
四、实验方法与步骤
倒平板 划线 培养 挑单菌落 接种移植 保存
四、实验方法与步骤
1.倒平板
右手持盛培养基的三角瓶置火焰 旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻轻地 拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然 后左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近 打开一缝，迅速倒人培养基约15ml， 加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均 匀分布在培养皿底部，然后平置于桌 面上，待凝后即为平板。
细菌的分离培养与培养性状观察
冷至约 ５ ０ ￣ Ｃ， 用接 种 环取 一环 培 养物 于 第 一管 内 ， 随
即用两手掌心搓转振荡 ， 由第一管取入第二管 ， 搓匀 又从第二管取出一环至第三管振荡后 ，分别倒入 ３ 个 灭 菌 空平 板 内 ， 摇 匀待 凝 固后 ， 倒 置于 ３ ７ ℃温箱 内 ‘ 培养 ， ２ ４小时后观察结果 。第一个平板菌落最多 ， 第 二个 、 第三个递减 ， 可得到单个菌落 。
约５ ０克置于密封容器内与接种的厌氧菌共 同培养。 焦 性 没食 子 酸 法是 利 用 焦 性 没食 子 酸与 碱作 用
板盖使 之 成 １ 条狭 缝 ， 并靠 近火 焰 旁 。右 手持 接种 环
克， １ ０ ％氢氧化钠或氢氧化钾 １ ０ 毫升。 常用方法有试 管培 养 法 ， 干 板 培养 法 ， 干燥器 培养 法 。 二 氧 化 碳 培 养 法 利 用 少 数 细 菌 如 牛 型 布 氏 杆
菌 ，在含 有 ５ ％～ １ ０ ％的二 氧化碳 环境 下生 长 良好 ， 常 用 的方 法 为 烛缸 法 。取 干燥 器 （ 盖 口抹 上 凡上 林 ） ， 将 接种 好 的平板 或 斜 面放 入 器 内 ，点 燃 燃烛 直 立 于 缸 的隔 板 上 ， 盖上盖子 ， 因器 内氧 气 耗 尽 蜡 烛 自灭 ，
１ ～ ２ 毫米者为小菌落 ； ２ ～ ４ 毫米者为 中等大菌落 ； ４ 毫 米或 更 大者 为大 菌 落或 巨大 菌落 。菌落外 形 有 圆形 、 不 规则 形 、 卷毛状 、 根 状 等 。隆 起 度呈 扩 散 、 台状 、 凸
起、 乳头 状 、 突脐 状 、 覆轮 状 等 。边缘 如整 齐 、 缺刻 状 、 圆锯齿 形 、 波 状 裂 片状 、 镀 边 等 。观察 菌 落 表 面是 否 光滑 、 皱褶 、 颗 粒状 、 同心环 状 、 龟 裂状 等 。表 面光 泽
实验三菌种保存及细菌形态观察分解
二、革兰氏染色法
1.制片：取菌种培养液（大肠杆菌、金黄色葡萄球 菌）常规涂片，干燥，固定（涂片不宜过厚； 火焰固定不宜过热）
2.初染：滴加结晶紫，染色1－2min，水洗 3.媒染：用碘液冲去残水，并用碘液覆盖约1min，
水洗 4.乙醇脱色：滤纸吸去残水，倾斜玻片用95％乙醇
洗涤脱色至无色，立即水洗（20s－30s） 5.复染：番红液复染约2min，水洗 6.镜检：革兰氏阳性菌（蓝紫色），革兰氏阴性菌
一．液体培养基接种
二．穿刺接种
1.细菌
形态观察主要包括群体的形态和个体的形态观察。 细菌的基本形态主要分为球菌、杆菌、螺旋菌三大类， 近年还发现星状和四方形细菌等。细菌形态受培养时 间、培养基成分、浓度、培养温度、培养时间等发生 变化。 细菌菌落大多表面光滑湿润，有光泽，一般菌落较小， 质地颜色均匀，同培养基结合不紧密。 细菌个体微小，较透明，必须染色方可呈现。根据细 菌个体形态观察的不同要求，可将染色分为3种类型： 简单染色、鉴别染色、特殊染色。
实验内容
一.菌种保存 二.简单染色法 三.革兰氏染色法 四.芽孢染色法
菌种保培养基上。
配制牛肉膏蛋白胨培养基每班配制500ml，每组分装2支试管，摆斜面。 1.接种前用记号笔在距试管口2－3cm位置上，注明菌名、接种日期等。 2.将试管放于手掌中，并用手指夹住，使两支试管呈“V”字形。 3.用火焰将接种环烧红，然后将接种环来回通过火焰数次。 4.用小指、无名指和手掌拔下试管塞，并持于手中。 5.将试管口在火焰上微烧一周。 6.将烧过的接种环伸入菌种管内，先将环接触一下没有长菌的培养基 部分，使其冷却， 以免烫死菌体，然后用环在菌苔上轻轻地接 触，刮下少许培养物，并将接种环慢慢的从试管中抽出，并迅速 地伸入另一试管中，在斜面上划线（波浪或直线），使菌体沾附 在培养基上。 7.将接种环抽出，灼烧管口。 8.塞上棉塞。 9.将接种环经火焰灼烧灭菌。
实训三细菌的分离培养及培养特性观察教案.
实训三细菌的分离培养及培养特性观察
设备材料：恒温箱、病料、普通营养琼脂培养基、接种环、酒精灯、烙刀、剪刀、镊子等。
讲授与示教病料中细菌的分离培养：用灭菌的烙刀（趁热）对病料的表面进行灭菌→→用灭菌的剪刀在病料上灭过菌的地方剪一切口→→接种环灭菌，从切口取细菌→→无菌操作进行平板分区划线→→用过的剪刀、镊子、烙刀、接种环等烧灼灭菌→→平板放入恒温箱中18-24小时→→观察结果：菌落特征
实训三细菌的分离培养及培养特性观察教案
授课内容
细菌的分离培养及培养特性观察
授课时数
1
授课教师
授课班级
授课类型
技能课
授课场地
教学做一体化实验室
教学材料
PPT、病料、营养琼脂平板等
教学方法
现场教学法
教学重点
病料中细菌的分离培养方法
教学难点
使学生牢固树立无菌操作的观念和做法
教学目标
能从病料中分离培养细菌
教学内容及过程
注：标记★的内容为重点，标记◎的内容为难点。
导入新课：（约2min）
第一步：陈述本次课要学习的项目及实践应用：细菌生长特性鉴定
第二步：分析完成该项目要解决的问题：
问题一：如何观察细菌的生长特性导入任务：细菌的人工培养
问题二：用什么培养细菌导入技能：培养基的制备
问题三：怎样培养细菌导入技能：细菌的分离培养
说明本次课的教学目的（约1min）
目的：掌握从固体病料中分离培养细菌的方法。
强调注意事项：
（1）无菌操作要严格
（2）用过的接种环要灭菌处理，以免造成污染
学生操作整个实验过程
总结、考核和布置实习报告（约2min）实习报告的书写要求习题作业源自1.病料中细菌分离培养的目的？
实验三 病原菌的分离培养
注：试管加棉塞(最好)
培养基分装完毕以后，在管口
上加一个棉塞。棉塞能防止杂菌污染，保证通气良好。
加棉塞时，应使棉塞长度的2/3在试管口内，如下图所示。
（五）病原真菌的分离培养
1．组织分离法 按照以下步骤进行：
(1) 取灭菌培养皿一个，在皿盖上用玻璃铅笔注明分离日期、材料 和分离人的姓名。 提示：为了保证无菌操作，应注意下面几点：工作前最好将 所需的物品都放在超净工作台内，工作中临时去取容易带来杂菌； 保证工作人员自身的洁净，工作前用肥皂洗手；无菌操作前还要 用70％酒精擦拭双手；工作中，特别在使用无菌操作间时，呼吸 要轻，不要说话。 (2) 取真菌叶斑病的新鲜病叶(或其他分离材料)，选择典型的单个 病斑，用解剖刀从病斑边缘(病健交界处)切取小块(边长3--4mm)病 组织数块。 提示：选择新患病的组织作为分离的材料，可以减少腐生菌 混入的机会。腐生菌一般在发病很久而已经枯死或腐败的部分滋 生，因此，一般斑点病害应在临近健全组织的部分分离。
4. 在空试管内倒入2～3mL已经溶解好的培养基，
【注意尽量不要让培养基沾到试管口】塞好硅胶
塞. 5.放入烧杯中,高压蒸汽灭菌. 6.摆斜面,凝固后放冰箱备用.
用于活化菌种， 或培养菌种的斜面
用于保存菌种的斜面
搁置斜面
当培养基冷却至50℃左右时，将试管带棉塞的一
端搁在一根木棒上。搁置的长度要合适，使培养基形成的 斜面的长度不超过试管总长的一半。
（二）灭菌与消毒
任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌，以备纯培 养用。一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。 常用的灭菌的方法有：干热灭菌、高压蒸汽灭菌、常压 蒸汽灭菌、常压间歇式灭菌超高温灭菌、过滤除菌、辐源自射灭菌、化学药品灭菌等方法。
细菌的分离与培养实验报告
细菌的分离与培养实验报告一、实验目的1、掌握细菌分离与培养的基本原理和方法。
2、学习并熟悉无菌操作技术。
3、观察细菌在不同培养基上的生长特性。
二、实验原理细菌在自然界中广泛存在，通常以混合群体的形式存在。
为了研究某一种细菌的特性，需要将其从混合菌群中分离出来，并在适宜的条件下进行培养。
本实验采用平板划线法和稀释涂布平板法进行细菌的分离，利用不同的培养基为细菌提供生长所需的营养物质，使其能够生长繁殖形成单个菌落，从而达到分离和纯化的目的。
三、实验材料与设备1、样品：土壤、污水等。
2、培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、高氏一号培养基、马丁氏培养基等。
3、试剂：无菌水、75%酒精、碘酒等。
4、仪器设备：超净工作台、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、移液器、接种环、酒精灯等。
四、实验步骤（一）无菌操作准备1、开启超净工作台的紫外灯，照射 20 30 分钟，关闭紫外灯，打开风机，通风 10 分钟左右。
2、用 75%酒精擦拭超净工作台台面和双手。
（二）样品处理1、称取 10g 土壤样品，放入装有 90ml 无菌水的三角瓶中，充分振荡，制成 10⁻¹浓度的土壤悬液。
2、用移液器吸取 1ml 10⁻¹浓度的土壤悬液，加入装有 9ml 无菌水的试管中，充分混匀，制成 10⁻²浓度的土壤悬液。
依次类推，制成10⁻³、10⁻⁴、10⁻⁵等不同浓度的土壤悬液。
（三）平板划线法分离细菌1、点燃酒精灯，在酒精灯旁将接种环在火焰上灼烧灭菌，冷却后蘸取 10⁻³浓度的土壤悬液，在牛肉膏蛋白胨培养基平板上进行划线。
2、划线的方式可以采用连续划线法或分区划线法。
连续划线法是从平板的一端开始，连续作紧密的波浪式划线，直至平板的另一端；分区划线法是将平板分成四个区域，每次划线都从上次划线的末端开始，使细菌逐渐被分散和稀释。
3、划线完成后，将平板倒置，放入 37℃恒温培养箱中培养 24 48 小时。
细菌检验技术—细菌的培养技术及培养现象的观察(微生物检验课件)
5.进行培养基的分装、细菌接种都要在生物安全柜中进 行，注意生物安全，防止污染。 6.无菌吸管头上应塞有棉花，不用口吹或吸液体。 7.实验室的所有感染性物品未经消毒灭菌不能拿出实验 室，应经消毒处理。 8.操作者要注意个人防护，穿好工作服，必要时戴好帽 子、口罩、手套等，离开时要更衣、消毒、洗手。 9.桌面、操作台需及时用消毒液擦干净。
❖ (三)接种与分离技术 ❖ 1.平板划线法：⑴分区划线法
❖ (二)连续划线法
❖ 2.斜面接5.倾注法
7 涂布接种法
三、细菌的培养方法
❖ 1.普通培养法 ❖ 2.CO2培养法 ❖ 3.微需氧培养法 ❖ 4.厌氧培养法
❖ 四、细菌的生长现象 ❖ (一)菌落
细菌的人工培养
一、无菌操作技术 二、接种方法 ❖ (一)接种针和接种环
取细菌的用具。 ❖ (二)无菌室
提供无菌环境。
二、无菌技术
1.无菌室使用前的消毒：打开紫外灯照射 30min-1小时，或用5%的石炭酸喷雾消毒。
2.所用物品均应在使用前严格灭菌。使用时不 得触摸、碰撞未经灭菌的物品。
3.无菌的试管、瓶子打开后应在火焰上通过 2-3次，尽快盖好，或尽量靠近火焰；管、瓶 口切忌朝上暴露于空气下。
(二)细菌在液体中的生长现象 ❖ 1.均匀混浊 ❖ 2.沉淀生长 ❖ 3.表面生长 (三)细菌在半固体中的生长现象 ❖ 沿穿刺线生长。 ❖ 穿刺线两侧云雾状混浊。
细菌在液体培养基中的生长现象
细菌在半固体培养基中的生长现象
无动力 现象
有动力 现象
细菌的分离培养实验报告
一、实验目的1. 掌握细菌分离培养的基本原理和方法。
2. 学会使用平板划线法分离纯种细菌。
3. 了解细菌在固体培养基上的生长特征。
二、实验原理细菌分离培养是指从含有多种细菌的混合物中，通过特定的方法将所需细菌分离出来，形成纯培养的过程。
常用的分离方法有平板划线法、稀释涂布平板法等。
平板划线法是一种简便、常用的分离方法，其原理是通过接种环在琼脂平板上划线，使菌液逐渐稀释，从而使单个细菌生长成单个菌落，便于分离纯种细菌。
三、实验材料1. 菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等。
2. 培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、普通琼脂平板、肉汤培养基、半固体培养基、斜面培养基。
3. 工具：接种环、接种针、酒精灯、无菌镊子、无菌移液器、无菌吸管、无菌培养皿、恒温培养箱等。
四、实验方法1. 平板划线法分离纯种细菌（1）将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基平板上，用接种环在平板上划线。
（2）将划线平板倒置，放入恒温培养箱中培养。
（3）观察菌落生长情况，挑取单个菌落，接种于新的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基平板上，重复划线分离。
2. 细菌在固体培养基上的生长特征观察（1）将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基平板上，用接种环在平板上划线。
（2）将划线平板倒置，放入恒温培养箱中培养。
（3）观察菌落生长情况，记录菌落特征，如菌落大小、形状、颜色、边缘等。
五、实验结果与分析1. 平板划线法分离纯种细菌经过平板划线分离，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均成功分离出纯种细菌。
2. 细菌在固体培养基上的生长特征观察金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色，边缘整齐，表面光滑；大肠杆菌菌落呈无色或淡黄色，边缘整齐，表面光滑；枯草芽孢杆菌菌落呈白色，边缘不整齐，表面有皱纹。
六、实验讨论1. 平板划线法是一种常用的分离纯种细菌的方法，其原理是利用接种环在琼脂平板上划线，使菌液逐渐稀释，从而使单个细菌生长成单个菌落。
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பைடு நூலகம்
无动力 现象
有动力 现象
思 考？
1、细菌分离培养的目的是什么？何谓纯培养？ 2、培养皿培养时为什么要倒置？ 3、分别描述大肠杆菌、混合菌种在液体培养基、 固体培养基中的生长表现。
接种环境
VS-1300VS-1300-U型洁净工作台
接种的基本程序
灭菌接种环 沾取标本 杀灭接种环沾染的细菌， 杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本
接种
灭菌接种环
杀灭接种环沾染的细菌， 杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境
一、目的要求 （一）常用的细菌培养方法
1、需氧菌分离培养法
（1）平板划线分离法
菌落
菌苔
菌落与菌苔
、目的要求 一（三）细菌在培养基上的生长表现
2、细菌在液体培养基中的生长现象 、
混浊 沉淀：多见于链状排列的细菌。 沉淀：多见于链状排列的细菌。 菌膜：多见于厌氧菌。 菌膜：多见于厌氧菌。
菌膜
对照
菌沉淀
均匀浑浊
、目的要求 一（三）细菌在培养基上的生长表现
3、细菌在半固体培养基中的生长现象 、
方法： 分区划线法：适用于含菌量较多的标本。
分区划线法
第一区划线 灭菌接种环 第二区划线 灭菌接种环 第三区划线 灭菌接种环
连续划线法
一、目的要求 （一）常用的细菌培养方法
2、厌氧菌分离培养法
（1）肝片肉汤培养法 ） （2）焦性没食子酸法 ）
一、目的要求 （一）常用的细菌培养方法
3、兼性厌氧菌分离培养法
、目的要求 一（二）钓菌、纯培养及细菌移植技术
细菌移植
斜面培养基接种法：用于培养，保存菌种及其它实验用。 液体培养基接种法：用于增菌及鉴定细菌生长特点，如表面 生长，沉淀生长，均匀混浊生长等。
二、材料
1. 器材：接种环、酒精灯、打火机。 2. 培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基及其培 养液，试管斜面培养基。 3. 菌种：大肠杆菌、未知混合菌种各1支。
实验三 细菌分离培养与培养性状观察
一、目的要求 从混杂微生物中获得单一菌株纯培养的方法成为分离； 纯培养是指一株菌种或一个培养物中所有的细菌都是由 一个细菌分裂、繁殖而产生的后代； 分离培养的目的在于从被检材料中、或者从污染的众 多杂菌中分离出纯的病原菌。
一、目的要求被检材料或病料
分离
单个菌落
纯培养
纯培养物
移植培养
。。。。。。
一、目的要求 1、掌握细菌（需氧菌、厌氧菌）分离培养的基本要领 2、掌握钓菌、纯培养及移植技术 3、了解细菌在固体、液体培养基中的生长表现 4、了解培养性状对细菌鉴别的重要意义
接种工具
接种针和接种环：由三部分组组成，即环（针）、金 属柄和绝缘柄。接种前后都要过火灭菌。接种针用于 穿刺接种细菌，接种环用于固体、液体培养基的细菌 接种。
、目的要求 一（三）细菌在培养基上的生长表现
1、细菌在固体培养基中的生长现象 、
菌落 – 定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖，形成单 定义：指单个细菌在平板培养基上生长繁殖， 一肉眼可见的细菌集团。 一肉眼可见的细菌集团。 – 菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、 菌落特征：大小、形状、边缘、颜色、表面、透明度、 湿润度、黏度、溶血性。 湿润度、黏度、溶血性。 菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。 菌苔：指多个菌落融合在一起形成的细菌堆积物。
目的：使混合的细菌呈单个分散生长，形成单个菌落，以便获得 纯菌。
一、目的要求 一、常用的细菌培养方法
1、需氧菌分离培养法
（1） 平板划线分离法
方法： 分区划线法：适用于含菌量较多的标本。 连续划线法：适用于含菌量较少的标本。
一、目的要求 1、常用的细菌培养方法
（1）需氧菌分离培养法
1. 平板划线分离法