甜菊糖苷检验记录-2017.01.13
高效液相色谱法测定甜叶菊中甜菊糖总苷的含量
高效液相色谱法测定甜叶菊中甜菊糖总苷的含量关键词：利用高效液相色谱法对甜叶菊干叶中甜菊糖总苷含量开发出一种新的检测方法，通过单因素试验，确立了检测方法，即样品经30%乙腈超声提取、孔径为0.45μm的有机滤膜过滤后，选择C18（250mm×4.6mm，5μm）色谱柱；以78%的0.1%磷酸水溶液+22%乙腈（体积比）为流动相，1.0mL/min的流速进行洗脱。
在210nm 波长及40℃柱温下利用DAD检测器检测，用外标法定量。
得出的图谱峰形尖锐，结果回收率高、检测结果准确、精密度高、重复性良好。
说明此方法开发具有较强的可行性。
关键词：高效液相色谱法；甜叶菊；甜菊糖总苷Determination of stevioside in stevia rebaudiana byhigh performance liquid chromatographyAuthor:Siqiao XieInstructor:Bingbing ChenAbsrtact:a new detection method for stevioside content in stevia rebaudiana dry leaves was developed by high performance liquid chromatography. through single factor test, the detection method was established, in other words,C18(250mm×4.6mm, 5μm) chromatographic column was selected after the sample was ultrasonically extracted with 30% acetonitrile and filtered by 0.45μm organic filter membrane. Elution was carried out at a flow rate of 1.0mL/min with 78% 0.1% phosphoric acid aqueous solution +22% acetonitrile (volume ratio) as mobile phase. At 210nm wavelength and 40℃ column temperature, DAD detector was used for detection and external standard method was used for quantification. The obtained chromatogram has sharp peak shape, high recovery rate, accurate test results, pinpoint accuracy and beautiful repeatability. This shows that the development of this method is feasible.Key words:high performance liquid chromatography; Stevia rebaudiana; Stevioside total glycoside1 前言食物是人类得以生存的必备保障，食物的主要成分与构成人体的基本物质相同，人类可从食物中获取人体生长的营养物质及能量。
甜菊糖甙的测定方法
甜菊糖甙的测定方法于聪敏，石岩【摘要】摘要：对目前甜菊糖甙测定方法进行了综述，并比较了容量法、重量法、流动注射化学发光法、分光光度法、毛细管电泳法、高效液相色谱法、薄层色谱法之间的差异性和优缺点。
目前应用最广泛的测定方法是高效液相色谱法。
【期刊名称】中国糖料【年(卷),期】2009(000)001【总页数】3【关键词】甜叶菊；甜菊糖甙；测定方法综述甜菊糖甙是一种具有甜味的萜烯类配糖体，分子式为C38H60O18，分子量为803，其纯度在90%以上为白色粉末，纯度在80%～90%之间为微黄色粉末。
目前，从甜叶菊中分离出来的甜菊糖甙共有8种[1]，其中占最主要的是Stevioside成分[1，2]，约占总量的60%～70%，甜度约为蔗糖的300倍，余味长而微苦如青草。
其次是Rebaudioside A，约15%～20%，甜度为蔗糖的450倍，甜味最接近蔗糖。
其他组分含量都较少。
甜菊糖甙在人体内不参与代谢，不产生热量，作为一种非糖、非营养型的甜味剂，不仅符合现代健康饮食的要求，还具有清热、利尿、调节胃酸的功效，为糖尿病、肥胖症、高血压、心脏病等患者提供了不诱发病情的甜味代糖品，因此近年来在食品和医学中得到广泛应用。
甜菊糖有着广阔的发展前景，但目前准确而又简单易行检测方法尚未建立，现阶段用于分析甜菊糖甙含量的方法主要有容量法、重量法、流动注射化学发光法、分光光度法、毛细管电泳法、高效液相色谱法、薄层色谱法，现将这些方法的基本情况综述如下。
1 测定方法1.1 高效液相色谱法高效液相色谱法是以液体作为流动相，并采用颗粒极细的高效固定相的柱色谱分离技术。
高效液相色谱对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，因而弥补了气相色谱法的不足。
在目前已知的有机化合物中，可用气相色谱分析的约占20%，而80%则需用高效液相色谱来分析。
国标8270-1999中规定高效液相色谱仪的条件选择为：色谱柱：-NH2基柱；流动相：乙腈∶水=80∶20；流速：1.2 mL/min；检测：紫外检测器、波长210 nm；进样量：15µL。
JECFA甜菊糖苷测试方法
STEVIOL GLYCOSIDESPrepared at the 73rd JECFA (2010) and published in FAO JECFAMonographs 10 (2010), superseding specifications prepared atthe 69th JECFA (2008) and published in FAO JECFA Monographs5 (2008). An ADI of 0 - 4 mg/kg bw (expressed as steviol) wasestablished at the 69th JECFA (2008).SYNONYMS INS no. 960DEFINITION The product is obtained from the leaves of Stevia rebaudianaBertoni. The leaves are extracted with hot water and the aqueousextract is passed through an adsorption resin to trap andconcentrate the component steviol glycosides. The resin iswashed with a solvent alcohol to release the glycosides and theproduct is recrystallized from methanol or aqueous ethanol. Ionexchange resins may be used in the purification process. The finalproduct may be spray-dried.Stevioside and rebaudioside A are the component glycosides ofprincipal interest for their sweetening property. Associatedglycosides include rebaudioside B, rebaudioside C, rebaudiosideD, rebaudioside F, dulcoside A, rubusoside and steviolbiosidewhich are generally present in preparations of steviol glycosidesat levels lower than stevioside or rebaudioside A.Chemical name Stevioside: 13-[(2-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosyl)oxy]kaur-16-en-18-oic acid, β-D-glucopyranosyl esterRebaudioside A: 13-[(2-O-β-D-glucopyranosyl-3-O-β-D-glucopyranosyl-β-D-glucopyranosyl)oxy]kaur-16-en-18-oic acid, β-D-glucopyranosyl esterC.A.S. number Stevioside: 57817-89-7Rebaudioside A: 58543-16-1Chemical formula Stevioside: C38H60O18Rebaudioside A: C44H70O23Structural Formula The nine named steviol glycosides:Compound name R1 R2Stevioside β-Glcβ-Glc-β-Glc(2→1)Rebaudioside A β-Glcβ-Glc-β-Glc(2→1)β-Glc(3→1)Rebaudioside B Hβ-Glc-β-Glc(2→1)⏐β-Glc(3→1)Rebaudioside C β-Glcβ-Glc-α-Rha(2→1)-Glc(3→1)Rebaudioside D β-Glc-β-Glc(2→1)β-Glc-β-Glc(2→1)⏐β-Glc(3→1)Rebaudioside F β-Glcβ-Glc-β-Xyl(2→1)⏐β-Glc(3→1)Dulcoside A β-Glcβ-Glc-α-Rha(2→1)Rubusoside β-Glcβ-GlcSteviolbioside Hβ-Glc-β-Glc(2→1)Steviol (R1 = R2 = H) is the aglycone of the steviol glycosides.Glc, Rha and Xyl represent, respectively, glucose, rhamnose andxylose sugar moieties.Formula weight Stevioside: 804.88Rebaudioside A: 967.03Assay Not less than 95% of the total of the nine named steviolglycosides on the dried basis.DESCRIPTION White to light yellow powder, odourless or having a slightcharacteristic odour. About 200 - 300 times sweeter than sucrose. FUNCTIONAL USES SweetenerCHARACTERISTICSIDENTIFICATIONSolubility (Vol. 4) Freely soluble in waterStevioside and rebaudioside A The main peak in the chromatogram obtained by following the procedure in Method of Assay corresponds to either stevioside or rebaudioside A.pH (Vol. 4) Between 4.5 and 7.0 (1 in 100 solution)PURITYTotal ash (Vol. 4) Not more than 1%Loss on drying (Vol. 4) Not more than 6% (105°, 2h)Residual solvents (Vol. 4) Not more than 200 mg/kg methanol and not more than 5000mg/kg ethanol (Method I in Vol. 4, General Methods, OrganicComponents, Residual Solvents)Arsenic (Vol. 4) Not more than 1 mg/kgDetermine by the atomic absorption hydride technique (UseMethod II to prepare the test (sample) solution)Lead (Vol. 4) Not more than 1 mg/kgDetermine using an AAS/ICP-AES technique appropriate to thespecified level. The selection of sample size and method ofsample preparation may be based on the principles of themethods described in Vol. 4 (under “General Methods, MetallicImpurities”).METHOD OF ASSAY Determine the percentages of the individual steviol glycosides byHPLC (Vol. 4) under the following conditions.ReagentsAcetonitrile: more than 95% transmittance at 210 nm.StandardsStevioside: more than 99.0% purity on the dried basis.Rebaudioside A: more than 99.0% purity on the dried basis.Mixture of nine steviol glycosides standard solution: Containingstevioside, rebaudioside A, rebaudioside B, rebaudioside C,rebaudioside D, rebaudioside F, dulcoside A, rubusoside andsteviolbioside. This solution is diluted with water-acetonitrile (7:3) accordingly and is used for the confirmation of retention times. Standards are available from Wako Pure Chemical Industries, Ltd. Japan and ChromaDex, USA.Standard solutionAccurately weigh 50 mg of stevioside and rebaudioside A standard into each of two 50-ml volumetric flasks. Dissolve and make up to volume with water-acetonitrile (7:3).Sample solutionAccurately weigh 50-100 mg of sample into a 50-ml volumetric flask. Dissolve and make up to volume with water-acetonitrile (7:3).ProcedureInject 5 μl of sample solution under the following conditions. Column: Capcell pak C18 MG II (Shiseido Co.Ltd) or Luna 5μC18(2) 100A (Phenomenex) or equivalent (length: 250 mm; inner diameter: 4.6 mm, particle size: 5μm)Mobile phase: 32:68 mixture of acetonitrile and 10 mmol/L sodium phosphate buffer (pH 2.6)Flow rate: 1.0 ml/minDetector: UV at 210 nmColumn temperature: 40°Record the chromatogram for about 30 min.Identification of the peaks and CalculationIdentify the peaks from the sample solution by comparing the retention time with the peaks from the mixture of nine steviol glycosides standard solution (see under figure). Measure the peak areas for the nine steviol glycosides from the sample solution. Measure the peak area for stevioside and rebaudioside A from their standard solutions.Calculate the percentage of each of the eight steviol glycosides except rebaudioside A in the sample from the formula:%X = [W S/W] x [f X A X/A S] x 100Calculate the percentage of rebaudioside A in the sample from the formula:%Rebaudioside A= [W R/W] x [A X/A R] x 100whereX is each steviol glycoside;W S is the amount (mg) calculated on the dried basis of stevioside in the standard solution;W R is the amount (mg) calculated on the dried basis of rebaudioside A in the standard solution;W is the amount (mg) calculated on the dried basis of sample in the sample solution;A S is the peak area for stevioside from the standard solution;A R is the peak area for rebaudioside from the standard solution;A X is the peak area of X for the sample solution; andf X is the ratio of the formula weight of X to the formula weight of stevioside: 1.00 (stevioside), 1.20 (rebaudioside A), 1.00 (rebaudioside B), 1.18 (rebaudioside C), 1.40 (rebaudioside D ), 1.16 (rebaudioside F), 0.98 (dulcoside A), 0.80 (rubusoside) and 0.80 (steviolbioside).Calculate the percentage of total steviol glycosides (sum the nine percentages).Figure. Chromatogram of mixture of nine steviol glycosides standard solutionColumn: Capcell pak C18 MG IIConcentration: 0.5 mg/ml each except rebaudioside F (about0.1 mg/ml) Time。
HPLC法测定不同产地甜叶菊中糖苷含量
口味优于 ｓ ， Ｔ 因此将 Ａ ３的含量及 Ａ ３所 占比例作为甜叶菊品
种 和甜菊糖苷质量评价 的主要指标 一 。 目前关于甜叶菊中甜菊糖昔 的测 定方法有质量 法 、 碱量
燥箱 中烘 ２ｈ 分别精 密称取 １ ｇ 用 乙腈 一水 （ ８： ２ 体 ， ０ｍ ， ７ ２， 积比） 溶液溶解并定容至 １ ， ０ｍＬ 摇匀置于棕色瓶中。即配成
表 １ 不 同产地 的甜叶菊中所 含 ５中糖苷 的量 、 总糖苷 量及 Ａ 所 占比例
３ 结论
对策 ［ ］ Ｊ ．广西蔗糖 ， ０ （ ）４ ４ ． ２ ６４ ： ０ ２— ３ ［］ ７ 韩玉林 ， 黄苏珍 ， 张坚 勇 ， 等．甜菊 良种的单株 选育 ［ ］ Ｊ ．植物 资
取上述供试样 品溶液连续进 样 ４次 ， 进样量为 ｌ ５
录峰面积 ， 计算 Ａ 、 Ｃ Ｓ 、 Ｂ Ｄ ３ Ｒ 、Ｔ Ｓ 、 Ａ的 Ｒ Ｄ值分别 为 ２ １ ％ 、 Ｓ ．３ １０ ％、 ．９ 、 ．９ 、 ． ５ ． ４ ２ ５ ％ １ ４ ％ ２ ０ ％。表 明 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ法测 定甜 菊糖
Ｌ Ｃ一１Ａ高效液相色谱仪 （日本 岛津公 司产 品） Ｓ Ｄ一 ０ ；Ｐ
１Ａ紫外检 测器 （ ０ 日本 岛津公 司 产品 ） Ｐｅｉ ９ Ｓ 一２ ２ ；ｒｃｓ ２ Ｍ ａ ０Ａ 电子天平 （ 瑞士 Ｐｅｉ ｒｃ ａ仪器有 限公 司产品 ） Ｓｔ ｕＢ ２ Ｓ电 ｓ ；ａ ｆ ｓＳ １ ｏ ｉ 子天平 （ 北京 多利斯 天平有 限公 司产 品） 儿 一７０ ； ２ Ｄ超 声波
（ Ｂ－ ） Ａ ８ 的层析柱 ， 甜菊糖苷几乎全部被树脂 吸附， 弃去滤液 。
高效液相色谱法测定甜菊糖苷中甜菊醇的含量
高效液相色谱法测定甜菊糖苷中甜菊醇的含量胡林;寇彦杰;翁永京;万小玲【摘要】建立高效液相色谱法测定甜菊糖苷中甜菊醇的含量.色谱条件:色谱柱为Phenomenex C18(4.6mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水(50∶50);流速1.0 mL/min;检测波长213nm;柱温30℃;进样量10 μL.线性范围为1.046μg/mL～52.3μg/mL(r=0.9997),加标平均回收率为96.60％,RSD为0.51％(n=6).本方法准确度高、精密度高、重复性好、简捷易操作,可以作为甜菊糖苷中甜菊醇含量的测定方法.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2014(026)010【总页数】3页(P1644-1646)【关键词】甜菊醇;甜菊糖苷;高效液相色谱法【作者】胡林;寇彦杰;翁永京;万小玲【作者单位】四川泰华堂制药有限公司,广汉618300;成都华高药业有限公司,成都610059;四川泰华堂制药有限公司,广汉618300;四川泰华堂制药有限公司,广汉618300【正文语种】中文【中图分类】TS202.3甜叶菊(Stevia rebaudiana Bertoni)为菊科(Composital)斯台比亚属(Stevia)多年生草本植物。
甜菊糖苷(steviol glycosides，SGs)是一种从甜叶菊的叶和茎中提取出来的高甜度、低热量天然甜味剂，它主要含九种不同甜味成分［1］，其中甜菊苷(Stevioside)为主要成分，甜菊醇(Steviol)为甜菊苷的苷元，分子具有对映贝壳杉烯型四环二萜骨架结构，具有广泛的生理活性，如清热解毒、抗菌消炎、抗肿瘤等作用［3，4］。
本方法采用高效液相色谱法测定甜菊糖苷中甜菊醇的含量，为甜菊糖苷产品质量控制提供科学检测依据。
1 仪器与材料1.1 仪器Agilent 1100 高效液相色谱仪(配备在线脱气机、四元梯度泵、自动进样器、柱温箱、二极管阵列检测器);CP225D 型电子分析天平(Sartorius 公司);DHG-9140 型电热恒温鼓风干燥箱;KQ-250B 型超声波清洗器。
食品中甜菊糖甙检测方法研究进展
食品中甜菊糖甙检测方法研究进展作者：尤继明等来源：《安徽农学通报》2013年第06期摘要：介绍了甜菊糖甙的分子结构和理化性质，并综述食品中甜菊糖甙的检测方法，如薄层层析法、分光光度法、毛细管电泳法、液相色谱法等，并展望了食品中甜菊糖甙检测的前景。
关键词：甜菊糖甙；食品；检测方法中图分类号 TS201.1 文献标识码 B 文章编号 1007-7731（2013）06-140-03甜菊糖甙（Stevia）又称作甜菊糖（Stevia sugar），为甜叶菊叶子提取物，不含糖分和热量；色泽白色至微黄色，口感适宜、无异味，是发展前景广阔的新糖源。
甜菊糖苷是目前世界已发现并经我国卫生部批准使用的甜味剂，其天然低热值并且非常接近蔗糖口味，是继甘蔗、甜菜糖之外第3种有开发价值和健康推崇的天然甜味剂，被国际上誉为“世界第三糖源”，其具有高甜度、低热量、安全无毒等特点，是一种可替代蔗糖的非常理想的甜味剂[1-3]。
甜叶菊糖苷的物理、化学性能稳定，无发酵性，无代谢性，长期食用不会使人发胖，特别适宜高血压、糖尿病、肥胖病、龋齿病患者使用，由此甜菊糖甙广泛应用于食品、饮料、调味料、酿酒、医药、日用化工、酿酒、化妆品等行业。
甜菊糖主要含有甜菊糖苷（stevioside，SS）、莱鲍迪苷A（rebaudioside A，RA）、莱鲍迪苷C[7]（rebaudioside C，RC）等8种成分[4]，莱鲍迪苷A 是其中品质最好的成分。
20世纪50年代人工种植甜叶菊成功后，日本、马来西亚、中国、韩国、阿根廷、巴拉圭、巴西等20多个亚洲和拉美国家开始批准使用[5]，美国食品药品管理局2008年批准使用甜叶菊提取物莱鲍迪苷A后，甜叶菊产业受到广泛关注，我国卫生部颁布的《食品安全国家标准食品添加剂使用卫生标准》（GB2760-2011） [6]规定甜菊糖甙的使用范围为蜜饯、坚果及其仔类、糖果、膨化食品、糕点、调味品、饮料等食品，最大使用量按照生产需要适量使用。
SOP-甜菊糖苷-内容
食品中甜菊糖苷的测定1目的为规范食品中甜菊糖苷的测定及测量结果的准确度，特制定本作业指导书。
2适用范围本法适用于食品中甜菊糖苷的测定。
3 岗位要求和职责检验员经培训后持证上岗，能熟练操作该仪器。
4 依据文件SN/T 3854-2014 第一法液相色谱法5 方法概述称取混合均匀的样品2g（精确至0.01g）,置于50mL具塞离心管，加入15mL石油醚，漩涡振荡3min，以4000r/min离心5min，弃去石油醚，重复该程序3次，氮吹仪吹干后，将所有内容物移出置于50mL 具塞离心管，加流动相至刻度，摇匀后，取上清液过水系0.45μm滤膜，上机。
通过具有紫外检测器的高效液相色谱仪进行测定。
以保留时间定性，外标法定量。
6 检测程序6.1方法原理样品中甜菊糖苷、糖精钠经高效液相反相C18柱分离后，以保留时间定性，峰高或峰面积定量。
6.2 仪器和设备、试剂和材料、样品制备与保存6.2.1 仪器：高效液相色谱仪带可调波长紫外或二极管检测器。
（校准周期2年，校准周期内做期间核查）不锈钢高速均质器。
粉碎机分析天平，感量0.0001g和0.01g。
数控超声波清洗器：温度、功率及时间可调色谱柱：C18 250mm×4.6mm 粒径5μm离心机：转速＞8000r/min漩涡振荡器移液器氮吹仪6.2.2所需化学试剂磷酸甲醇：HPLC级乙腈：HPLC级石油醚无水硫酸钠（Na2SO4）；于650℃灼烧4h，在干燥器中冷却至室温，储于密封瓶中备用。
磷酸溶液：0.02mol/L。
量取磷酸1.35mL，用水定容至1L。
甲醇溶液：量取50mL甲醇，用水定容至100mL。
甜菊糖苷；纯度≥97%标准储备溶液：称取25.0mg甜菊糖苷，用甲醇定容至25.0mL，质量浓度为1.00mg/mL，于0℃下储存，保存期半年。
标准使用溶液：取标准储备溶液1.00mL，用甲醇定容至100mL，质量浓度为10.0mg/L，保存期30d。
6.2.3玻璃器皿：G3耐酸漏斗、抽滤瓶及一般常用仪器清洗：首先用自来水冲洗玻璃器皿残留的溶剂。
甜叶菊糖甙的提取纯化及分离检测方法研究报告
甜叶菊(Steviarebaudiana)糖甙的提取纯化及别离检测方法的研究滕祥金摘要:随着人民生活水平的提高，现在吃得更营养，吃得更安康逐渐成为消费者关心的重点。
甜叶菊糖甙的生产不但能补充我国食糖的缺乏，更可替代糖精等不利于人体的化学合成甜味剂，因此，低热量的甜味剂甜叶菊糖营也随之热起来，长期食用甜叶菊糖普不会使人发胖，特别适宜肥胖病、糖尿病、高血压、动脉硬化、龋齿病患者使用，而且物理、化学性能稳定、无发酵性。
本论文以本实验室栽种甜叶菊叶片为原料，研究并探讨了甜叶菊糖甙的提取、纯化、别离、检测的方法。
蒸煮浸提法的最正确条件:以水为溶剂、温度100℃、时间6h、料液比1:10，浸提物中甜叶菊糖甙含量为9.28%。
甜叶菊糖甙的提纯通过比拟选择了沉淀效果比拟好的FeSO4；和Ca(0H)2，参加条件为80℃恒温水浴40min，静止4h抽滤，在通过大孔吸附树脂和阴阳离子交换吸附精制甜叶菊糖甙，冷冻枯燥后得到甜叶菊糖甙结晶粉末。
甜叶菊糖甙组分的别离方法主要有重结晶法、层析法。
重结晶法利用甜叶菊糖甙各主要组分在乙醇溶液中溶解度的不同进展结晶将主要组分别离;层析法是利用甜叶菊糖甙主要组分在装有硅胶的层析柱中被吸附和解吸速度的不同将甜叶菊糖普主要组分别离。
检测甜叶菊糖甙含量的主要方法有重量测定法、液相色谱法、薄板层析法、分光光度法(蒽酮为显色剂)、分光光度法(DNS试剂为显色剂)、化学发光法等。
采用硅胶G薄板层析法，展开体系:正丁醇:乙酸:乙醚:水(9:6:3:l)，能十分清晰将甜叶菊糖甙、葡萄糖、麦芽糖分开，可以定性检测甜叶菊糖甙的两种主要单体组分。
分光光度法(蒽酮为显色剂)和分光光度法(DNs试剂为显色剂)都可以测定甜叶菊糖甙的主要组分，方法简便，对实验设备要求不高，但准确度不高、误差大。
流动注射化学发光法测定甜叶菊糖甙是我们最近研究出来的一种新的测定方法，能够准确测定出甜叶菊糖甙的含量，与其他测定甜叶菊糖甙的测定方法相比，其准确度、灵敏度都很高，这一测定方法在国外尚属空白。
高效液相色谱法检测运动饮料中甜菊糖苷
高效液相色谱法检测运动饮料中甜菊糖苷周文清【摘要】建立一种用高效液相色谱-PDA检测法测定运动饮料中甜菊糖苷的检测方法。
样品前处理采用硅胶固相萃取小柱进行富集和净化，氮气吹干后用流动相复溶上机检测。
采用Waters RP C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5μm）分离，以乙腈∶水=30∶70（体积比）作为流动相，用PDA检测器检测，外标法峰面积定量。
结果表明，9种甜菊糖苷组分在20.0μg/mL~200.00μg/mL浓度范围内线性良好，相关系数r2为0.991~0.999，检出限在1.0μg/mL~3.0μg/mL，定量限为3.0μg/mL~9.0μg/mL，加标回收率达到81.4%~90.5%。
%A rapid and effective method was established for the determination of steviol glycosides in sports drink by high performance liquid chromatography-PDA detection method. The samples were concentrated and purified by silica gel solid phase extraction column.The elution liquid was dried under nitrogen, and detected af-ter re-dissolution with mobile phase. The separation of targeted compound was performed on a Waters RP C 18 chromatographic column (4.6 mm×250 mm, 5μm) usingacetonitrile∶water (30∶70) as mobile phase, with PDA detector and external standard method peak area quantification. The linear range of nine kinds stevioside components was in the range of 20.0μg/mL-200.0μg/mL with a correlation coefficient of 0.991-0.999. The de-tection limit was 1.0μg/mL-3.0μg/mL and the quantitative limit was 3.0μg/mL-9.0μg/mL. The recovery rate w as 81.4%-90.5%.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2017(038)001【总页数】4页(P161-164)【关键词】高效液相色谱;运动饮料;甜菊糖苷【作者】周文清【作者单位】景德镇陶瓷大学，江西景德镇333000【正文语种】中文甜菊糖苷是从甜菊叶中提取的天然甜味剂，其在人体内不参与代谢，热值仅为蔗糖的1/300，且具有清热、利尿、调节胃酸的功效，试验证明其无致癌性、遗传毒性、生殖/发育毒性，近年来在食品和医学中得到广泛应用，目前已被我国及美国、日本等20多个国家批准为食品添加剂使用，世界卫生组织食品添加剂联合专家委员会建立甜菊糖苷ADI（每日允许摄入量）值为4mg/（kg体重·d）。
食品中甜菊糖甙检测方法研究进展
性 能稳定 ， 无发酵 性 ， 无代谢性 ， 长期食 用不会使 人发胖 ， 特
ｌ 甜菊 糖甙 的理 化性 质
甜菊甙结构式为 ：
别适宜高血 压 、 糖 尿病 、 肥胖病 、 龋齿病 患者使用 ， 由此 甜菊
糖 甙广泛应用 于食 品 、 饮料 、 调 味料 、 酿酒 、 医药 、 日用化工 、
成分。
２ ０世纪 ５ ０ 年 代人 工种 植 甜叶菊 成功 后 ， 日本 、 马来西
法 、 分光光度法 、 毛细管电泳法。 、 高效液相色谱法ｕ 、
流动注射分析法 等 。
界 已发现并 经我 国卫 生部批 准使用的甜味剂 ， 其天然低 热值 并 且非常接 近蔗糖 口味 ， 是继 甘蔗 、 甜菜 糖之外第 ３ 种有 开 发 价值和健康 推崇 的天然 甜味剂 ， 被 国际上誉为 “ 世界第 三 糖 源” ， 其具 有高甜度 、 低热量 、 安全无毒等特点 ， 是 一种可替 代 蔗糖 的非常理想 的甜 味剂 。 。甜 叶菊糖 苷的物理 、 化学
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检验记录
品名甜菊糖苷包装规格
批号物料编号
代表量检验项目
检品来源产地
取样量取样日期年月日
检验依据《甜菊糖苷质量标准》检验日期年月日
检验项目及结果
1.性状：本品应为白色至浅黄色粉末或晶体。
（结论：□符合规定，□不符合规定）2.检查
2.1干燥减量（≤6%）
（干燥箱型号：101-2A，干燥箱编号：QC0101 天平型号: BS124S 天平编号：QC0201）
取本品2～10g，精确至0.0001g，置于干燥至恒重的称量瓶中，在101～105℃干燥2h，冷却，精密称定重量。
干燥前称瓶+样A重干燥前称瓶+样A重
- 干燥前称瓶重 - 干燥后称瓶及样A重
样A重(g) 样品A减失重量(g)
干燥前称瓶+样B重干燥前称瓶+样B重
-干燥前称瓶重 - 干燥后称瓶及样B重
样B重(g) 样B减失重量(g)
样A干燥减量%=样A减失重量÷样A重×100%=
样B干燥减量%=样B减失重量÷样B重×100%=
平均干燥减量%=(样A干燥减量%+样B干燥减量%)÷2＝
（结论：□符合规定，□不符合规定）
2.2灼烧残渣（≤1%）
马弗炉型号：SX24-10型,马弗炉编号：QC0103；天平型号: BS124S,天平编号：QC0201；
取供试品2～10g,精确至0.0001g，置于已炽灼至恒重的坩埚中，缓缓灼烧炭化至无烟，在550℃±25℃炽灼4h，冷却，精密称定，继续炽灼至前后两次重量差不超过0.5mg。
检验人：复核人
样1+坩埚重灰分重+坩埚重
- 坩埚重 - 坩埚重
样1重(g) 灰分重(g)
样2+坩埚重灰分重+坩埚重
- 坩埚重 - 坩埚重
样2重(g) 灰分重(g)
灼烧残渣1%=灰分重量÷样品重量×100%=
灼烧残渣2%=灰分重量÷样品重量×100%=
灼烧残渣%=(灼烧残渣1%+灼烧残渣2%)÷2＝
（结论：□符合规定，□不符合规）
检验结果: 《甜菊糖苷质量标准》规定
检验人：复核人：。