基因工程期末高分复习题

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基因工程期末试题及答案

基因工程期末试题及答案

基因工程期末试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 基因工程是指利用现代生物技术手段对DNA进行操作和控制的一种技术。

2. 基因工程的主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。

3. DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。

4. 在基因工程中,限制性内切酶用于切割DNA分子,产生特定片段。

5. 基因工程可以产生转基因生物,通过对生物基因进行改造,使其具有特定的特性。

6. CRISPR/Cas9是一种常用的基因编辑工具,可以精确地修改基因组中的特定片段。

7. 基因工程在医学领域可以用于基因治疗,通过修复或替换异常基因,治疗遗传性疾病。

8. 在农业领域,基因工程可以用于改良作物,提高产量和抗病虫害能力。

9. PCR是一种常用的基因扩增技术,可以通过复制DNA片段来放大特定基因。

10. DNA梯度离心是基因工程中常用的分离DNA片段的方法。

二、问答题(每题10分,共30分)1. 请简要介绍基因工程的基本原理和主要方法。

基因工程的基本原理是通过对DNA进行操作和控制来改变生物的遗传性状。

其主要方法包括基因克隆、PCR、DNA测序等。

基因克隆是通过将特定DNA片段放入载体中,然后转化到宿主细胞中,使重组DNA在宿主细胞中大量复制。

PCR是一种基因扩增技术,通过在DNA复制过程中加入特定引物,使特定基因片段在体外大量扩增。

DNA测序是通过测定DNA序列来确定一个基因的具体结构。

2. 什么是转基因生物?请举例说明。

转基因生物是指经过基因工程改造,将外源基因导入到目标生物体中,使其具有新的遗传性状的生物。

例如,将耐旱基因导入水稻,使其具有抗旱能力;将Bt毒素基因导入棉花,使其具有抗虫能力。

3. 基因工程在医学领域有哪些应用?举例说明。

基因工程在医学领域可以用于基因治疗、疫苗研发等。

例如,利用基因工程技术可以修复或替换患者体内异常基因,治疗遗传性疾病。

另外,基因工程也可以用于疫苗研发,通过基因工程技术将病原体的基因导入宿主细胞,产生病原体的抗原蛋白,从而刺激免疫系统产生抗体,用于预防传染病。

基因工程期末考试试题及答案

基因工程期末考试试题及答案

基因工程期末考试试题及答案一、选择题1. 基因工程是指:A. 基因的自然突变B. 基因的人工重组C. 基因的自然选择D. 基因的自然淘汰答案:B2. 下列哪项不是基因工程常用的工具酶?A. 限制性内切酶B. DNA连接酶C. 反转录酶D. 聚合酶链反应酶答案:C3. 基因枪技术主要用于:A. 植物基因转化B. 动物基因转化C. 微生物基因转化D. 病毒基因转化答案:A二、填空题1. 基因工程中,常用的载体有________、________和________。

答案:质粒、病毒、人工染色体2. 基因工程中,________是基因表达的调控元件。

答案:启动子三、简答题1. 请简述基因工程的基本步骤。

答案:基因工程的基本步骤包括:目标基因的获取、目标基因与载体的连接、转化宿主细胞、筛选含有重组DNA的宿主细胞、目的基因的表达和检测。

2. 基因工程在医学领域的应用有哪些?答案:基因工程在医学领域的应用包括:生产重组蛋白质药物、基因治疗、疾病诊断、疫苗开发等。

四、论述题1. 论述基因工程对农业生产的影响。

答案:基因工程对农业生产的影响主要体现在以下几个方面:提高作物的抗病虫能力、增强作物的抗逆性、改善作物的营养价值、提高作物的产量和质量、促进农业可持续发展。

2. 基因工程在环境保护中的应用。

答案:基因工程在环境保护中的应用主要包括:开发生物修复技术,用于污染土壤和水体的净化;利用基因工程改造微生物,用于处理工业废水和废气;通过基因工程改良植物,用于重金属污染土壤的修复等。

五、案例分析题1. 某公司利用基因工程技术成功开发了一种抗虫棉,该抗虫棉能够减少农药的使用,降低农业生产成本。

请分析该技术可能带来的社会、经济和环境效益。

答案:该技术可能带来的社会效益包括提高农民的生活质量,减少因农药使用带来的健康风险。

经济效益包括降低农药成本,提高作物产量,增加农民收入。

环境效益包括减少农药对环境的污染,保护生态平衡,促进农业的可持续发展。

基因工程复习题及答案

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基因工程复习题及答案一、选择题1. 基因工程是指:A. 基因的自然突变B. 基因的人工重组C. 基因的自然选择D. 基因的自然进化答案:B2. 基因工程中常用的载体是:A. 噬菌体B. 质粒C. 病毒D. 所有以上选项答案:D3. 以下哪个不是基因工程中常用的受体细胞?A. 细菌B. 酵母C. 植物D. 动物答案:C4. 基因枪法属于哪种基因转移技术?A. 化学介导法B. 电穿孔法C. 微注射法D. 粒子轰击法答案:D5. 基因编辑技术CRISPR-Cas9中,Cas9蛋白的主要作用是:A. 识别目标DNA序列B. 切割目标DNA序列C. 连接DNA片段D. 转录mRNA答案:B二、填空题6. 基因工程的基本操作步骤包括:目的基因的________、________、检测与表达。

答案:提取、重组7. 基因工程在医学领域的应用包括________、________和基因治疗。

答案:基因诊断、基因疫苗8. 在基因工程中,________技术可以用于快速繁殖转基因植物。

答案:组织培养9. 基因工程中,________是将目的基因导入植物细胞的常用方法。

答案:农杆菌介导法10. 基因工程在农业上的应用包括提高作物的________、________和改良品质。

答案:抗病性、抗虫性三、简答题11. 简述基因工程在环境保护方面的应用。

答案:基因工程在环境保护方面的应用主要包括:- 利用基因工程改造微生物,以降解环境中的有毒物质,如石油污染物。

- 通过基因工程改良植物,使其能够耐受重金属污染,从而净化土壤。

- 利用基因工程改造的微生物处理工业废水,减少水体污染。

12. 阐述基因工程在生物制药领域的主要应用。

答案:基因工程在生物制药领域的主要应用包括:- 生产重组蛋白质药物,如胰岛素、干扰素等。

- 利用转基因动物生产药物,如转基因羊产生的抗凝血酶。

- 利用基因工程改造的微生物生产抗生素等药物。

- 开发基因治疗药物,用于治疗遗传性疾病。

基因工程期末考试题及答案

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基因工程期末考试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 基因工程中常用的工具酶是:A. 纤维素酶B. 限制性内切酶C. 淀粉酶D. 过氧化氢酶答案:B2. 下列哪项不是基因工程的基本步骤?A. 目的基因的获取B. 基因的表达C. 基因的克隆D. 基因的测序答案:D3. 基因枪法是一种:A. 植物转基因方法B. 动物转基因方法C. 微生物转基因方法D. 所有生物的转基因方法答案:A4. 重组DNA技术中,通常使用哪种质粒作为载体?A. 质粒DNAB. 线粒体DNAC. 核糖体RNAD. 染色体DNA答案:A5. 基因工程中,目的基因的表达通常需要:A. 启动子B. 终止子C. 增强子D. 所有选项答案:D二、填空题(每空2分,共20分)1. 基因工程是指按照人们的意愿,将不同来源的基因在体外构建杂合DNA分子,然后导入到活细胞和生物体内,以改变生物的遗传特性并取得新品种或新产品。

2. 基因工程中常用的宿主细胞有大肠杆菌、酵母菌和________。

答案:哺乳动物细胞3. 基因工程中,________是连接目的基因和载体DNA的关键酶。

答案:DNA连接酶4. 目的基因的表达需要________和________的协同作用。

答案:启动子;终止子5. 基因工程产品在医学领域的应用包括生产________、________和基因治疗等。

答案:重组蛋白;单克隆抗体三、简答题(每题10分,共30分)1. 请简述基因工程在农业中的应用。

答案:基因工程在农业中的应用主要包括提高作物的抗病性、抗虫性、抗旱性和提高作物的产量和品质。

例如,通过基因工程培育的抗虫棉可以减少农药的使用,提高棉花的产量和质量。

2. 基因工程在医学领域有哪些应用?答案:基因工程在医学领域的应用包括生产重组蛋白药物、单克隆抗体、基因治疗和疫苗开发等。

例如,利用基因工程技术生产的胰岛素可以治疗糖尿病,单克隆抗体用于治疗癌症和自身免疫性疾病。

3. 请解释什么是转基因生物,并简述其潜在的风险。

高考生物专题复习《基因工程》含答案

高考生物专题复习《基因工程》含答案

高考生物专题复习《基因工程》一、单选题1.(2023·山东青岛·高三期末)自然界中很少出现蓝色的花,天然蓝色花产生的主要原因是花瓣细胞液泡中花青素在碱性条件下显蓝色。

我国科学家利用链霉菌的靛蓝合成酶基因(idgS)及其激活基因(sfp)构建基因表达载体(如下图),通过农杆菌转化法导入白玫瑰中,在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝。

下列叙述错误的是()A.上述获得蓝色玫瑰的方案中需要转入能调控液泡pH的基因B.将idgS基因插入Ti质粒时使用的限制酶是SpeI和SacIC.sfp和idgS基因具有各自的启动子,前者调控后者的表达D.农杆菌可将Ti质粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色体DNA上【答案】A【详解】A、分析题意,用农杆菌转化法将链霉菌的靛蓝合成酶基因(idgS)及其激活基因(sfp)导入白玫瑰后,在细胞质基质中形成稳定显色的靛蓝,所以无需转入能调控pH的基因,A错误;B、分析题图可知,将idgS基因插入Ti质粒时可用SpeI和SacI以避免产生的黏性末端环化,增加构建成功的概率,B正确;C、分析题图可知,sfp和idgS基因具有各自的启动子,sfp可激活idgS的表达,C正确;D、将目的基因导入植物细胞可用农杆菌转化法,故农杆菌可将Ti质粒上的T—DNA整合到白玫瑰染色体DNA上,D正确。

故选A。

2.(2023春·江苏徐州·高二统考期中)土壤农杆菌侵染植物细胞时,Ti质粒上的T-DNA片段转入植物的基因组。

利用农杆菌以Ti质粒作为载体进行转基因,下列相关叙述正确的是()A.T-DNA片段有利于介导外源DNA整合到植物的染色体DNA上B.用Ca2+处理农杆菌,以利于其侵染植物细胞C.Ti质粒是一种环状DNA分子,属于细菌的拟核DNAD.目的基因应插入T-DNA片段外,以防止破坏T-DNA【答案】A【详解】A、Ti质粒上的T-DNA片段能转入植物的基因组中,因此T-DNA片段利于介导外源DNA整合到植物的染色体,A正确;B、农杆菌转化法中不需要用Ca2+处理农杆菌,应直接利用土壤农杆菌感染植物细胞,B错误;C、Ti质粒是一种环状DNA分子,是存在于细菌细胞质中的DNA,C错误;D、在农杆菌转化法中,需要将目的基因插入到T﹣DNA片段上,D错误。

基因工程期末考试试题及答案

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基因工程期末考试试题及答案卷型:A考试时间:90分钟满分:100分一、名词解释(3X5)限制性内切酶(或其它工具酶):能在特异位点上催化双联DNA 分子断裂,产生相应的限制性DNA片段荧光定量PCR所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法(半定量PCR 是近年来常用的一种简捷、特异的定量RNA测定方法,通过mRNA 反转录成cDNA再进行PCR扩增,并测定PCR产物的数量,可以推测样品中特异mRNA勺相对数量)星活性:非标准条件下切割相似序列,产生非特异性片段同裂酶(或同尾酶):来源不同但具有相同识别序列,产生相同或不同末端转基因技术(或转基因动植物等)就是将人工分离和修饰过的基因导入到目的生物体的基因组中,从而达到改造生物的目的。

二、填空(1X15)1.Cosmid实际上是由cos位点和质粒构成的杂合载体,也可以说是带有cos序列的质粒。

2.超螺旋质粒DNA开环质粒DNA线状质粒DNA在琼脂糖凝胶电泳的特点是:电泳的泳动速度由大到小分别是:超螺旋质粒>线状质粒>开环质粒。

3.质粒DNA的提取方法有碱裂解法、煮沸法、去污法。

4.基因工程中常用载体是质粒、噬菌体、动植物病毒。

5.设计引物是一般要求C+G的比例在40%-60%,长度在17-30bp。

6.BAC载体与常规载体的区别在于复制单元的特殊性。

三、选择题(2X15,实卷应是1X35)1.基因工程创始人(D)A A.KornbergB W.GilbertC P.BergD S.Cohen2.迄今为止所发现的限制性内切核酸酶可以作用于(C)A.既可以作用于双链DNA,又可以作用于单链DNAB.只能作用于单链DNAC.只能作用于双链DNAD.只能作用于RNA3.氨苄青霉素的工作原理为(A)A.可以抑制细胞壁肽聚糖的合成B.可以抑制核糖体的转位C.可以与核糖体50S亚基结合并抑制蛋白质合成D.可以与核糖体30S亚基结合并抑制蛋白质合成4.反转录酶是一种(C)A.依赖DNA的DNA聚合酶B.依赖DNA的RNA聚合酶C.依赖RNA的DNA聚合酶D.依赖RNA的RNA聚合酶5.11类限制性内切核酸酶(A)A.仅有内切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供B.限制性识别非甲基化的核苷酸序列C.有外切核酸酶和甲基化酶活性D.仅有外切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供6.下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是II类酶的识别序列(C)A.GAATCGB.AACCTTC.GATATCD.ACGGCA7.(多选)在基因工程中,可用碱性磷酸酶(AB)。

基因工程复习(含答案)

基因工程复习(含答案)

基因工程复习题一、名词解释: (10~20%)基因工程基因工程工具酶限制性内切酶限制性内切酶得Star活性PCR引物PCR扩增平台期DNA芯片基因组文库cDNA文库转化限制与修饰系统原位杂交: 将细胞或组织得核酸固定保持在原来得位置上, 然后用探针与之杂交得一种核酸分子杂交技术, 该方法可较好地反映目得基因在细胞或组织中得分布与表达变化。

粘性末端: 双链DNA被限制性内切酶切割后, 形成得两条链错开几个碱基, 而不就是平齐得末端。

Northern印迹杂交: 将RNA进行变性电泳后, 再转移到固相支持物上与探针杂交得一种核酸分子杂交技术, 可用于检测目得基因得转录水平。

转位: 一个或一组基因片段从基因组得一个位置转移到另一个位置得现象。

基因工程: 在体外, 用酶学方法将各种来源得DNA与载体DNA连接成为重组DNA, 继而通过转化与筛选得到含有目得基因得宿主细胞, 最后进行扩增得到大量相同重组DNA分子得过程称为基因工程, 又称基因克隆、DNA克隆与重组DNA等。

目得基因:基因工程中, 那些被感兴趣得、被选作研究对象得基因就叫作目得基因。

连接器: 人工合成得一段含有某些酶切位点寡核苷酸片段, 连接到目得基因得两端, 便于基因重组中得切割与连接。

转化: 受体细胞被导入外源DNA并使其生物性状发生改变得过程。

停滞效应: PCR中后期, 随着目得DNA扩展产物逐渐积累, 酶得催化反应趋于饱与, DNA扩增产物得增加减慢, 进入相对稳定状态, 即为停滞效应, 又称平台期。

逆转录PCR: 以mRNA为原始模板进行得PCR反应。

PCR: 即聚合酶链式反应。

在模板, 引物, 4种dNTP与耐热DNA聚合酶存在得条件下, 特异性地扩增位于两段已知序列之间得DNA区段地酶促合成反应。

α-互补(α-complementation):指在M13噬菌体DNA或PUC质粒序列中, 插入了lac 启动子-操纵子基因序列以及编码β-半乳糖苷酶N-端145个氨基酸得核苷酸序列(又称α-肽), 该序列不能产生有活性得β-半乳糖苷酶。

基因工程复习题及参考答案

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【基因工程复习题及参考答案】绪论、基因工程基础一、填空题1. 基因工程是20 世纪70 年代发展起来的遗传学的一个分支学科。

基因工程技术的诞生使人们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等传统的生物技术时代,走向按人们的需要定向地改造和创造具有新的遗传性品种的时代。

2.Cohen 等在1973 年构建了第一个有功能的重组DNA 分子。

3.基因工程的两个基本特点是:(1)分子水平上的操作,(2)细胞水平上的表达。

4.基因克隆中三个基本要点是:克隆基因的类型、受体的选择和载体的选择。

5.克隆基因的主要目的有四个:①扩增DNA ;②获得基因产物;③研究基因的表达调控;④改造生物的遗传特性。

6.基因工程的基本程序包括DNA 制备、体外DNA 重组、遗传转化、转化细胞的筛选等方面。

7.基因工程又称重组DNA 技术/基因操作技术/基因克隆/分子克隆/遗传修饰/新遗传学。

8.克隆的进行依赖于各种参与DNA 新陈代谢的酶的使用,它们主要是从原核细胞中分离的。

限制性内切核酸酶能够将DNA 切割成特定大小的片段。

各种各样的DNA 聚合酶也是克隆所必需的,包括将RNA 转录出单链DNA 的反转录酶。

DNA 连接酶用于连接限制性片段。

克隆也需要来源于微生物的DNA 序列,包括用来运载被被克隆DNA 的克隆载体。

质粒载体来源于天然细菌质粒,通常携带有抗生素抗性基因。

其他载体来源于噬菌体,如λ噬菌体,它们经过修饰后可以运输外源DNA。

要想克隆一个感兴趣的真核生物的基因就必须先制作一个能与该基因杂交的探针。

人们已经发展了很多有效而精细的技术来分析克隆的DNA。

例如,极微量的DNA 片段可以通过PCR 得到扩增。

在感兴趣基因的启动子上连接,如CAT 或LacZ 之类的报告基因能够定量检测基因的活性。

二、选项题(单选或多选)1.因研究重组DNA 技术而获得诺贝尔奖的科学家是(C )。

A. Kornberg AB. Gilbert WC. Berg PD. McClintock2.第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是(A )。

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基因工程复习题一、名词解释:(10~20%)基因工程基因工程工具酶限制性内切酶限制性内切酶的Star活性PCR引物PCR扩增平台期DNA芯片基因组文库cDNA文库转化限制与修饰系统原位杂交:将细胞或组织的核酸固定保持在原来的位置上,然后用探针与之杂交的一种核酸分子杂交技术,该方法可较好地反映目的基因在细胞或组织中的分布和表达变化。

粘性末端:双链DNA被限制性内切酶切割后,形成的两条链错开几个碱基,而不是平齐的末端。

转化:受体细胞被导入外源DNA并使其生物性状发生改变的过程。

停滞效应:PCR中后期,随着目的DNA扩展产物逐渐积累,酶的催化反应趋于饱和,DNA 扩增产物的增加减慢,进入相对稳定状态,即为停滞效应,又称平台期。

逆转录PCR:以mRNA为原始模板进行的PCR反应。

PCR: 即聚合酶链式反应。

在模板,引物,4种dNTP和耐热DNA聚合酶存在的条件下,特异性地扩增位于两段已知序列之间的DNA区段地酶促合成反应。

α-互补(α-complementation):指在M13噬菌体DNA或PUC质粒序列中,插入了lac启动子-操纵子基因序列以及编码β-半乳糖苷酶N-端145个氨基酸的核苷酸序列(又称α-肽),该序列不能产生有活性的β-半乳糖苷酶。

感染(infection)特指以λ噬菌体、粘粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增。

其中,由噬菌体和细胞病毒介导的遗传信息的转移过程又称为转导(transduction)。

47、转染(transformation)指真核细胞主动摄取或被动导入外源DNA片段而获得新的表型的过程。

二、填空题(20%)1、DNA片段重组连接的方法主要有平端连接、粘端连接、同聚尾连接、加接头连接。

2、感受态细胞是指具有摄取外源DNA分子能力的细胞。

3、λ噬菌体蛋白对重组DNA体外包装时,包装长度为野生型λDNA的75~105%。

5、PCR反应体系含有耐热的T aqDNA聚合酶,化学合成的寡核苷酸引物,四种dNTP,合适的缓冲液体系。

6、核酸探针包括:cDNA探针;基因组DNA探针;寡核苷酸探针和RNA探针。

7、部分酶切可采取的措施有:(1)____________(2)___________ (3)___________等。

(1)减少酶量;(2)缩短反应时间;(3)增大反应体积8、DNA聚合酶I的Klenow大片段是用_____________切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段,具有两种酶活性:(1)____________;(2)________________的活性。

枯草杆菌蛋白酶;(1)5'-3'合成酶的活性;(2)3'-5'外切核酸酶9、为了防止DNA的自身环化,可用_____________去双链DNA__________________。

碱性磷酸酶;5’端的磷酸基团10、基因工程中有3种主要类型的载体:_______________、_____________、______________。

质粒DNA;病毒DNA;质粒和病毒DNA杂合体11、pBR322是一种改造型的质粒,它的复制子来源于,它的四环素抗性基因来自于,它的氨苄青霉素抗性基因来自于。

pMBl;pSCl01;pSF2124(R质粒)13、DNA重组连接的方法大致分为四种:(1)_________________(2)_______________ (3) _____________(4)_ ______________________。

(1)黏性末端连接;(2)平末端连接;(3)同聚物接尾连接;(4)接头连接法14、差示杂交(differential hybridization)技术需要__________________________。

两种不同的细胞群体能够表达不同的基因,即在一个群体中能够表达一些基因,而在另一个细胞群体中不能表达这些基因16、将含有外源基因组一个酶切片段的质粒称之为含有一个___________,各种此类质粒的集合体称之为构建了一个_________________。

基因组DNA克隆;基因组DNA文库17、根据Northern杂交的结果可以说明:_____________________________。

外源基因是否进行了转录18、在________________技术中,DNA限制性片段经凝胶电泳分离后,被转移到硝酸纤维素膜(或尼龙膜)上,然后与放射性的DNA探针杂交。

Southern印迹19、可用T4 DNA聚合酶进行平末端的DNA标记,因为这种酶具有____________和_______的活性。

5’→3’合成酶;3’ →5’外切核酸酶20、根据外源片段提供的遗传表型筛选重组体,必需考虑三种因素:(1)_______________ (2)__________________(3)_________________。

(1)克隆的是完整的基因;(2)使用的是表达载体;(3)不含内含子21、放射免疫筛选的原理基于以下三点:(1)抗体能够被吸附到固体支持物上;(2)同一个抗原可以同几种抗体结合;(3)抗体能够被标记22、黏粒(cosmid)是质粒—噬菌体杂合载体,它的复制子来自、COS位点序列来自,最大的克隆片段达到kb。

质粒;λ噬菌体;4523、限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的,第一个大写字母取自_______,第二、三两个字母取自_________,第四个字母则用___________表示。

属名的第一个字母;种名的前两个字母;株名24、第一个分离的限制性内切核酸酶是___________;而第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是_____________。

EcoK;EcoRl25、切口移位(nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用_________的_______和______的作用。

DNA聚合酶I:5'一3'外切核酸酶;5'一3'合成酶26、就克隆一个基因(DNA片段)来说,最简单的质粒载体也必需包括三个部分:_______________、_____________、______________。

另外,一个理想的质粒载体必须具有低分子量。

复制区:含有复制起点;选择标记:主要是抗性基因;克隆位点:便于外源DNA的插入27、pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体。

pUC系列的载体是通过和两种质粒改造而来。

它的复制子来自,Amp 抗性基因则是来自。

pBR322和M13;pMBl;转座子28、噬菌体之所以被选为基因工程载体,主要有两方面的原因:一是;二是。

它在细菌中能够大量繁殖,这样有利于外源DNA的扩增;对某些噬菌体(如λ噬菌)的遗传结构和功能研究得比较清楚,其大肠杆菌宿主系统的遗传也研究得比较详尽29、Northern印迹和Southern印迹有两点根本的区别:(1)__________________________________________________________________(2)_________________________________________________________________。

(1)印迹的对象不同:Northern是RNA,Southern是DNA;(2)电泳条件不同,前者是变性条件,后者是非变性条件30、限制与修饰是宿主的一种保护体系,它是通过对外源DNA的限制和对自身DNA的修饰来实现的。

31、II型限制酶既具有识别位点的专一性,也具有切割位点的专一性。

它作用时需要Mg2+ 离子作辅助因子。

32、个体之间DNA限制酶片段长度存在差异称限制性片段长度多态性(RFLP)。

33、人工感受态的大肠杆菌细胞在温度为___________时吸附DNA, ___________时摄人DNA。

0︒C;42︒C34、野生型的λ噬菌体DNA不宜作为基因工程载体,原因是:(1)(2) (3) 。

(1)分子量大,(2)酶的多切点,(3)无选择标记35、形成平末端的方法有:用产生平末端的限制酶切,用S1核酸酶切除粘末端,用DNA 聚合酶填平粘末端。

36、回收DNA片段时,在确定DNA条带位置时,应使用长波长紫外灯,以最大限度减少对DNA的照射损伤。

37、基因工程受体菌的基因型常为r-m-rec-, r-表示限制缺陷型,m-表示修饰缺陷型,rec-表示重组缺陷型。

38、CaCl2法制备感受态细胞转化DNA时,DNA以DNA-Ca2+ 复合物形式吸附于细胞表面。

39、TaqDNA聚合酶具有,缺乏因此无。

5‘→3‘聚合酶活性,3’→5‘外切酶活性,校正功能40、PCR循环次数一般设定为,过多的循环次数会导致的出现。

25-30次,PCR 反应“平台效应”。

41、如果用限制性内切核酸酶切割双链DNA产生5’突出的黏性末端,则可以用__________进行3’末端标记。

如果用限制性内切核酸酶切割DNA产生的是3’突出的黏性末端,可以用__________________进行3’末端标记。

Klenow酶填补的方法;T4DNA聚合酶42、限制酶是一类专门切割DNA的酶,它能特异性识别切割双链DNA。

43、需要部分酶切时可采取的方法有:减少酶的用量;缩短反应时间;增大反应体积。

45、重组DNA技术的基本过程:①目的基因的制备;②载体的选择和制备;③DNA分子的体外连接;④将重组DNA导入宿主细胞;⑤重组体的筛选和鉴定;⑥重组体的扩增、表达和其他研究。

46、在分离质粒DNA的菌体培养过程中,加入氯霉素有两个好处:可以扩增质粒DNA;抑制了菌体的数量,有利于裂解。

48、II型限制酶既具有识别位点的专一性,也具有切割位点的专一性。

它作用时需要Mg2+离子作辅助因子。

50、基因工程受体菌的基因型常为r-m-rec-, r-表示限制缺陷型,m-表示修饰缺陷型,rec-表示重组缺陷型。

52、核酸的体外标记法分为和。

化学法;酶法53、核酸的体外标记法中的酶法最常用的是和标记。

125I;光敏生物素标记。

54、影响核酸分子杂交的因素有:(1)核酸分子的浓度与长度;(2)温度;(3)离子强度;(4)甲酰胺;(5)核酸分子的复杂性;(6)非特异性杂交反应等。

三、选择题(20%)1、下列有关基因工程技术的叙述,正确的是()CA.重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B.所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C.选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D.只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达2、下列不属于获取目的基因的方法是()BA.“鸟枪法”B.转录法C.反转录法D.根据已知氨基酸序列合成法3、以下说法正确的是() AA. 在真核细胞的基因结构中,编码区也含有不能编码蛋白质的序列B. 终止子是转录终止的信号,因此它的DNA序列与终止密码TAA相同C. 基因的非编码区通常不起什么作用D. 启动子的作用是阻碍RNA聚合酶的移动,并使其从DNA模板链上脱离下来4、Ⅱ型限制性内切核酸酶:( ) B(A)有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列(B)仅有内切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供(C)限制性识别非甲基化的核苷酸序列(D)有外切核酸酶和甲基化酶活性(E)仅有外切核酸酶活性,甲基化酶活性由另外一种酶提供5、关于宿主控制的限制修饰现象的本质,下列描述中只有( )不太恰当。

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