细胞组分的分级分离
翟中和细胞生物学各章习题及答案
《细胞生物学》习题及解答第一章绪论本章要点：本章重点阐述细胞生物学的形成、发展及目前的现状和前景展望。
要求重点掌握细胞生物学研究的主要内容和当前的研究热点或重点研究领域，重点掌握细胞生物学形成与发展过程中的主要重大事件及代表人物，了解细胞生物学发展过程的不同阶段及其特点。
二、填空题1、细胞生物学是研究细胞基本规律的科学，是在、和三个不同层次上，以研究细胞的、、、和等为主要内容的一门科学。
2、年英国学者第一次观察到细胞并命名为cell；后来第一次真正观察到活细胞有机体的科学家是。
3、1838—1839年，和共同提出：一切植物、动物都是由细胞组成的，细胞是一切动植物的。
4、19世纪自然科学的三大发现是、和。
5、1858年德国病理学家魏尔肖提出的观点，通常被认为是对细胞学说的一个重要补充。
6、人们通常将1838—1839年和确立的；1859年确立的；1866年确立的，称为现代生物学的三大基石。
7、细胞生物学的发展历史大致可分为、、、和分子细胞生物学几个时期。
三、选择题1、第一个观察到活细胞有机体的是（）。
a、Robert Hookeb、Leeuwen Hoekc、Grewd、Virchow2、细胞学说是由（）提出来的。
a、Robert Hooke和Leeuwen Hoekb、Crick和Watsonc、Schleiden和Schwannd、Sichold和Virchow3、细胞学的经典时期是指（）。
a、1665年以后的25年b、1838—1858细胞学说的建立c、19世纪的最后25年d、20世纪50年代电子显微镜的发明4、（）技术为细胞生物学学科早期的形成奠定了良好的基础。
a、组织培养b、高速离心c、光学显微镜d、电子显微镜四、判断题1、细胞生物学是研究细胞基本结构的科学。
（）2、细胞的亚显微结构是指在光学显微镜下观察到的结构。
（）3、细胞是生命体的结构和生命活动的基本单位。
（）4、英国学者Robert Hooke第一次观察到活细胞有机体。
东南大学农学院2021级《细胞生物学》考试试卷(621)
东南大学农学院2021级《细胞生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（40分，每题5分）1. 细胞外被是指与细胞膜中的蛋白质或脂类分子共价结合的糖链。
（）答案：正确解析：细胞之外被又称糖萼，它是细胞膜的正常结构组分，不仅对膜蛋白起保护调节作用，作用而且在细胞识别中起重要作用。
2. M6P受体蛋白是高尔基体反面网络上特有的受体蛋白，主要起到分拣溶酶体的酶的作用。
（）答案：错误解析：M6P受体蛋白不是高尔基体反面网络上特有的受体蛋白，质膜上也有M6P受体蛋白。
3. 有丝分裂中核膜变为碎片，因此能像内质网和高尔基体等膜被细胞器一样在两个子细胞间分配。
（）答案：正确解析：事实上，核膜与内质网膜之间是连续糖蛋白的，四个因此某些区段含有突显两个来源的膜。
4. 细胞壁可以看作是高等植物细胞的胞外基质，但它仅仅起支持与保护作用。
（）答案：错误解析：基质不仅起支持与动物细胞保护作用，而且其中的某些寡糖具有信号分子的接收器作用。
5. 核小体的核心蛋白由H1、H2A、H2B、H3各两分子组成的八聚体。
（）答案：错误解析：H1不是核小体的核心蛋白，应该是H4。
6. 高尔基体和内质网上所有与糖基化有关的蛋白都是可溶性蛋白。
（）答案：错误解析：都是整合蛋白。
7. 水孔蛋白除容许水分子通过细胞质膜之外，还可跨膜转运脂溶性分子和不带电荷的有机小分子。
（）答案：错误解析：水孔蛋白只容许水分子通过。
这种严格的选择性首先源于通道内高度倾斜度保守的氨基酸残基侧链（Arg、His以及Asp）与通过的水分子形成肽键，其实是非常平坦的孔径，仅0.28nm。
8. 细胞坏死往往会引起炎症，而程序性细胞死亡不会引起炎症，根本原因是细胞是否破裂。
（）答案：正确解析：程序性细胞死亡不会导致细胞破裂，因而不会有伤口，也就不会已引起感染。
复习题选修课细胞生物学
细胞生物学复习题一、填空题1、细胞生物学是研究真核细胞、和的一门学科，它是一门正在发展形成中的学科，其发展经历从经典的研究、研究到目前的究三个阶段。
2、年英国学者第一次观察到细胞并命名为cell；后来第一次真正观察到活细胞有机体的科学家是。
3、1838—1839年，和共同提出：一切植物、动物都是由细胞组成的，细胞是一切动植物的。
4、1858年德国病理学家魏尔肖提出的观点，通常被认为是对细胞学说的一个重要补充。
5、目前发现的最小最简单的细胞是，其直径只有。
6、真核细胞亚显微水平的三大基本结构体系是、和。
7、光学显微镜的组成主要分为、和三大部分，光学显微镜的分辨率由、和三个因素决定。
8、荧光显微镜是以为光源，电子显微镜则是以为光源。
9、细胞组分的分级分离方法有、和。
10、离心分离技术分离细胞组分的常用方法有和。
11、杂交瘤是通过和两种细胞的融合实现的，由此所分泌的抗体称为。
12、观察活细胞的内部结构可选用显微镜，而观察细胞的形态和运动可选用显微镜。
13、体外培养的细胞，不论是原代细胞还是传代细胞，一般不保持体内原有的细胞形态，而呈现出两种基本形态即和。
14、细胞膜的最显著特性是和。
15、细胞膜的膜脂主要包括、和，其中以为主。
16、门控的离子通道对离子的通透有高度的，根据控制门开关的调控因子的不同，门控离子通道可分为门通道、门通道及门通道。
17、Ca2+泵主要存在于膜和膜上，其功能是将Ca2+输出或泵入中储存起来，维持内低浓度的Ca2+。
18、小分子物质通过、或等方式进入细胞内，而大分子物质则通过或作用等方式进入细胞内。
19、根据物质运输方向及离子沿梯度的转移方向，协同转运又可分为协同转运与协同转运。
20、糙面内质网上合成的蛋白质主要去向有、及等。
21、蛋白质的糖基化修饰主要分为和；其中主要在内质网中进行，而则主要在中进行。
22、真核细胞中，是合成脂类分子的细胞器。
23、细胞质中合成的蛋白质如果存在，该蛋白质将转移到内质网上继续合成。
细胞生物学题库
3、如果用匀浆法破裂肝细胞，将破裂的细胞膜（颗粒状）和细胞质分离，在细胞质中加入肾上腺素，其结果是（ D ）A、产生cAMPB、肾上腺素与其受体结合B、激活腺苷酸环化酶D、以上均不对4、相差显微镜可用来观察活细胞和未经染色的标本。
对6、在G蛋白中，α亚基的活性状态是（ A ）。
A、与GTP结合，与βγ分离B、与GTP结合，与βγ聚合C、与GDP结合，与βγ分离D、与GTP结合，与βγ聚合11、硝酸甘油治疗心绞痛的作用原理是：硝酸甘油在体内转化成NO，从而可舒张血管，减轻心脏负荷和心肌的需氧量。
对13、Feulgen反应是一种经典的细胞化学染色方法，常用于细胞内（ C ）。
A、蛋白质的分布与定位B、脂肪的分布与定位C、DNA的分布与定位D、RNA的分布与定位18、以下哪一类药物可以抑制胞质分裂？( D )A. 紫杉酚B. 秋水仙素C. 长春花碱D. 细胞松弛素22、从结构上高尔基体主要由单层扁平囊组成。
27、目前认为核定位信号是存在于亲核蛋白内的一些短的氨基酸序列片段，富含水量碱性氨基酸残基，如Lys、Arg，此外还常常含有Pro。
对29、信号假说中，要完成含信号肽的蛋白质从细胞质中向内质网的转移需要细胞质中的信号识别颗粒和内质网膜上的信号识别颗粒受体的参与协助。
32、小肠上皮细胞表面的指状突起是微绒毛，其中含有微丝细胞质骨架成分。
47、分子伴侶是高尔基器的驻留蛋白。
错48、蛋白质的糖基化修饰N-连接主要在内质网进行，指的是蛋白质上的天冬酰胺残基与N-乙酰葡萄糖胺直接连接，而O－连接则是蛋白质上的酪氨酸、丝氨酸或苏氨酸残基与N-乙酰半乳糖胺直接连接。
2、真核细胞中核糖体的基本类型可分为游离核糖体、附着核糖体。
3、指导分泌性蛋白到糙面内质网上合成的决定因素是信号识别颗粒。
错正确应为蛋白质N端的信号肽。
5、在高尔基体的顺面膜囊上存在M6P的受体，这样溶酶体的酶与其他蛋白区分开来，并得以浓缩，最后以出芽的方式转运到溶酶体中。
简要说明细胞组分的分级分离原理及其意义
简要说明细胞组分的分级分离原理及其意义细胞是构成生命体的基本单位，由多种不同的细胞组分组成，包括细胞膜、细胞核、线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等等。
有时需要对这些组分进行分级分离，以便对它们进行更加准确的研究。
本文将简要介绍细胞组分的分级分离原理及其意义。
一、细胞组分的分级分离原理1.离心分离离心分离是指通过离心机对样品进行高速离心，从而分离出不同密度的细胞组分。
在离心分离过程中，样品中的组分会随着转速增加而沉淀到不同的位置。
例如，通过离心可以将细胞核和线粒体分离出来。
2.凝胶电泳分离凝胶电泳是指将样品注入到聚丙烯酰胺凝胶中，然后通过电泳将不同大小的分子分离出来。
较大的分子会被凝胶阻滞，不能通过凝胶移动，而较小的分子则会迅速通过凝胶。
这种方法可以将蛋白质、DNA和RNA等分离出来。
3.峰值分离峰值分离是指将样品通过柱层析分离出来。
柱层析是一种利用不同分子的大小、形状、电荷和亲和性的差异分离化合物的方法。
例如，通过柱层析可以将核糖体不同组分分离出来。
二、细胞组分的分级分离意义1.提高细胞学研究的精度通过分级分离细胞组分，可以更加准确地研究细胞生物学。
例如，分离出核糖体的不同组分可以研究它们在蛋白质合成过程中的作用，从而更好地了解细胞代谢的机制。
2.提高疾病诊断的准确性某些疾病的诊断需要分离出细胞组分，例如，癌症诊断需要分离出癌细胞。
分级分离细胞组分可以提高疾病诊断的准确性，从而更好地治疗和预防疾病。
3.推动药物研发许多药物是从天然产物中提取出来的，例如植物中的药物。
通过分离出植物中不同的化合物，可以研究它们的结构和功能，从而更好地开发出新的药物。
总之，分级分离细胞组分可以提高细胞学研究的精度，提高疾病诊断的准确性，推动药物研发。
这种方法对相关领域的研究和发展非常重要。
细胞组分的分级分离
离心机机型 低速离心机 高速离心机 超速离心机
转速 8 000转/分 8 000~25 000转/分 25 000 ~ 80 000转/分
分离方法
❖ 差速离心分离法：利用不同离心速度产生的不同离 心力，将各种亚细胞组分和各种颗粒分开。
❖ 密度梯度离心分离法：将要分离的细胞组分铺放在密 度逐渐增加的介质表面，在超速离心力的作用下， 不同的组分以不同的沉降速率沉降，形成不同的 沉降带。
❖ 离心技术：
1. 是分离细胞器（如细胞核、线粒体、高尔基体）及各种大分子基 本手段。
2. 转速为10-25kr/min的离心机称为高速离心机。
3. 转速>25kr/min，离心力>89Kｇ者称为超速离心机。
4. 目前超速离心机的最高转速可达100000r/min，离心力超过500Kg。
颗粒直径 103nm 102~104nm 102nm
线粒体含量较多；长度适合观察，约5μm；肝脏较软，易 于破碎，并且适于快速提取，因而利于保持线粒体活性。
细胞器沉降先后顺序先后是细胞核、线粒体、溶酶体和其 他微体、核糖体和大分子。
詹纳斯绿B可专一性地对线粒体进行超活染色，这是由于线 粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使詹纳斯绿B染料始终保持 氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色；而线粒体周围的细胞质中詹 纳斯绿B被还原成无色的化合物。
差速离心法differential centrifugation
匀浆
离心
1 000G20分钟
细
胞
细胞骨架
细胞骨架
核
离 心 10 000G
20
分 钟
核 糖 体 等
离心0.26%脱氧胆酸钠 微
离心
15 000G20分钟
海南大学生物工程学院2021年《细胞生物学》考试试卷(36)
海南大学生物工程学院2021年《细胞生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（35分，每题5分）1. 肌肉的收缩是细肌丝收缩的结果。
（）答案：错误解析：肌肉的收缩是粗肌丝和细肌丝相对滑动的结果。
2. 来源于质膜的不同信号能通过细胞内不同信号途径间的相互作用而被整合。
（）答案：正确解析：3. 通常未分化细胞的核质比高而衰老细胞的核质比低。
（）答案：错误解析：衰老细胞内水分减少，致使蛋白质脱水收缩，体积变小，染色质固化，核膜内折，所以核质比高。
4. G蛋白偶联受体中，霍乱毒素使G蛋白α亚基不能活化，百日咳毒素使G蛋白α亚基持续活化。
（）答案：错误解析：霍乱毒素，使α亚基丧失GTP酶的活性并处于持续活化状态；百日咳毒素抑制Gi的活性。
5. 大多数真核基因是不连续基因，在RNA中出现的部分称为外显子。
（）答案：错误解析：外显子是指由在成熟的RNA上的序列。
在基因中外显子被内含子隔开，转录后经过加工被连接核糖体在一起，生成成熟的RNA分子。
6. 微管在着丝粒处成核然后连接至动粒。
（）答案：错误解析：微管在中心体处成核组装，然后连接到动粒。
7. 正常细胞发生癌变时游离的核糖体增多，而附着的核糖体和内质网的数目相应减少。
（）答案：错误解析：正常细胞发生癌变后，与癌细胞恶性增殖、扩散等过程相关的蛋白成分会过表达，从而使得增大粗面内质网的数目增多，附着核糖体的数目增多。
2、名词解释（40分，每题5分）1. DNA合成期答案：DNA合成期指细胞周期中合成DNA的时期，也称S期。
核内的DNA以至于都在这一时期合成，使核内DNA的量倍增。
在S期中，由各条染色体（或染色体的不同部分）所进行的DNA合成是有快有慢的。
另外新的组蛋白也在S期合成。
解析：空2. 灯刷染色体答案：灯刷染色体是指在两栖类卵母细胞进行减数分裂第一次分裂开展时，停留在两线期的染色体，它是一个二价体，包含4条染色单体，每条染料单体由一条染色质纤维构成，每条纤维分化为主轴半圆形以及主轴两侧数以万计的侧环，而且双线期同源染色体尚未完全解除，因此可以见到交叉，其形状如灯刷，故名灯刷染色体。
某大学生物工程学院《细胞生物学》考试试卷(23)
某大学生物工程学院《细胞生物学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（45分，每题5分）1. G蛋白偶联受体被激活后，使相应的G蛋白解离成α、β、γ三个亚基，以进行信号传递。
（）答案：错误解析：G蛋白三聚体结合GTP后解离出成α亚基和βγ亚基复合物，β与γ亚基并未解离。
2. 有丝分裂中核膜变为碎片，因此能像内质网和高尔基体等膜被细胞器一样在两个子细胞间分配。
（）答案：正确解析：事实上，核膜与内质网膜之间是连续的，因此某些区段含有具两个来源的膜。
3. 微管存在于所有真核生物细胞中。
（）答案：错误解析：人的红细胞中没有微管，另外，原核生物中没有微管。
4. 单一核糖体只能合成一种类型的蛋白质。
（）答案：错误解析：细胞质所有的核糖体都是相同的，可以合成任何由特定mRNA 翻译的特定蛋白质。
翻译后，核糖体从mRNA上释放出来，再开始翻译新的mRNA。
5. NLS是亲核蛋白入核的充分必要条件。
（）答案：错误解析：NLS只是亲核蛋白入核的一个必要条件，其入核转运还需要其他蛋白质因子的帮助，同时还受到其他因素的影响。
6. 癌的发生涉及两类基因：原癌基因和肿瘤抑制基因，这两类基因中的任何一个拷贝突变都会导致癌变。
（）答案：错误解析：只有当肿瘤抑制基因两个拷贝都丢失了或两个拷贝都失活了才会使细胞失去增殖的控制，只要肿瘤抑制基因有一个拷贝是正常的，就能够正常调节细胞的周期。
7. 凋亡小体中的染色质块外一般包有核膜来源的双层膜结构。
（）答案：错误解析：凋亡起始时骨架杂乱，细胞间接触消失，细胞间黏附力下降；细胞质和核浓缩，显微镜下观察可发现细胞膜发泡，染色质凝集，沿着核膜形成新月形帽状结构；随着细胞膜内折，染色质断裂成片段，染色质片段及线粒体等细胞器反折的细胞膜包围并逐渐分开，形成单个的凋亡小体。
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作业： 1. 比较分离细胞核的3张涂片有何不同，为什么？ 2. 比较分离线粒体的2张涂片有何不同，为什么？
1、为什么要饥饿小鼠？ 2、为什么使用肝细胞？ 3、细胞器沉降顺序？ 4、詹纳斯绿B染色原理？
线粒体正常情况下一般呈圆形，饥饿时，缺乏供能营养物质， 线粒体会数目减少，大量的嵴会消失，会使线粒体形状变得细 长，因而易于观察。
细胞组分的分级分离
主要过程：匀浆、差速离心、分析。
匀 浆：低温条件下，在等渗介质中，制成各种细胞
器的混合液。
差速离心：在均一介质中，由低速到高速逐级离心，使
细胞器按照比重从大到小逐渐沉降的方法。
分 析：用细胞化学和生物化学方法进行定量和定性
检测。
小白鼠脱臼处死，迅速开腹，取出肝脏，剪成大块，冲洗 一半肝组织，0.25M蔗糖洗3次，加3ml 0.25M蔗糖，剪碎 匀浆（5-8次），6层纱布过滤至10ml离心管 取出1ml至dorf管（A），3000rpm，10min 沉淀加至1ml 1M蔗糖，悬 3800rpm,10min 上清入dorf管(B)
线粒体含量较多；长度适合观察，约5μ m；肝脏较软，易 于破碎，并且适于快速提取，因而利于保持线粒体活性。
细胞器沉降先后顺序先后是细胞核、线粒体、溶酶体和其 他微体、核糖体和大分子。 詹纳斯绿B可专一性地对线粒体进行超活染色，这是由于线 粒体内的细胞色素氧化酶系的作用，使詹纳斯绿B染料始终保持 氧化状态(即有色状态)呈蓝绿色；而线粒体周围的细胞质中詹 纳斯绿B被还原成无色的化合物。
加至1ml
涂片1
涂片2
12000rpm,20min
弃上清，沉淀加少量 0.25M蔗糖，悬
涂片3 涂片5
加0.25M蔗糖，悬
沉淀
上清
涂片4
1.染核酸
涂片1，2，3
2.染线粒体
涂片4，5
95%乙醇固定5min，晾干
甲基绿-哌罗宁染色15min，冲洗 丙酮分色，沾2-3次 冲洗，晾干