生物胁迫试验方案

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逆境胁迫对植物生理生化指标的影响

逆境胁迫对植物生理生化指标的影响
3.实验结论
从实验数据的计算结果对比能够知道Pro、MDA、 的积累在干旱条件下均比正常条件下的高,即逆境胁迫对植物影响上述几项生理生化指标的增加。
1.结合旱生植物的抗旱机制,抗旱植物应具有下列特征:
(1)发达的根系,可吸收土壤深层的水分,在干旱时保证充足的水分供应;
(2)灵敏的气孔调节能力和特殊的气孔结构,如气孔内陷,发达的角质层,减少蒸腾失水;
【2】张志良、瞿伟菁.植物生理学实验指导:第3版[M].北京:高等教育出版社,2003.
【3】潘瑞炽主编.植物生理学(第五版).北京:高教出版社,2004.
【4】潘瑞炽主编.植物生理学(第五版).北京:高教出版社,2004.
二.实验报告
1.实验现象及结果
(1)结果记录表:
条件
重量
体积
OD值
现象
Pro
/(μmol/L)=6.45 -0.56
式中, 为可溶性糖的浓度; 为MDA的浓度
(3)逆境胁迫与 的积累
①记录 提取及测定时的现象
②测定OD410计算: content = /ε.L.W× × (mmol.g-1FW)
4.参考文献
【1】李合生主编.《植物生理学学习指导与题解》.武汉:华中科技大学出版社,2003
③计算: content = /ε.L.W× × (mmol.g-1FW)
2.试验注意事项:
①研磨要充分,注意材料不要溅出,用提取液洗研钵时要尽量充分;
②正确离心并且正确取舍液体或沉淀;
③ 的积累测定时,实验组添加的试剂是5% 对照组使用的试剂是20% 取(由于5% 是使用 配制而成的);
3.实验数据处理方法
(3)逆境胁迫与 的积累
① 提取:分别取0.5 g实验组和对照组→加入3ml50mMPBS (pH=6.8,内含1mM HA)和少许石英砂→充分研磨→用2mlPBS洗研钵→5000 rpm离心10 min→上清液定容至5ml。

干旱胁迫生态实验报告

干旱胁迫生态实验报告

干旱胁迫生态实验报告标题:干旱胁迫生态实验报告摘要:本文是关于干旱胁迫生态实验的深度探讨,旨在揭示干旱对生态系统的不良影响以及可能的适应性响应。

我们通过综合分析各类实验数据和观察结果,探讨了干旱胁迫对植物、动物和土壤微生物的影响,深入剖析了各种适应策略和生态系统的回复机制。

最后,我们分享了对于干旱胁迫管理和保护生态系统的观点和理解。

1. 引言1.1 背景介绍1.2 目的和意义2. 干旱对植物的影响2.1 植物的表型和生理适应2.2 植物根系和水分吸收2.3 蒸腾作用和水分利用效率2.4 干旱耐受性基因的表达3. 干旱对动物的影响3.1 动物饮水和食物资源3.2 动物行为和人口密度3.3 干旱引发的迁徙和竞争3.4 动物适应性和生殖策略4. 干旱对土壤微生物的影响4.1 土壤水分和微生物生态系统4.2 土壤酶活性和有机物分解4.3 微生物多样性和功能群变化4.4 干旱对土壤氮循环和碳存储的影响5. 生态系统的适应和回复机制5.1 干旱适应策略的分类和特征5.2 生态系统的稳定性和弹性5.3 土壤水分保持和植物群落重建5.4 生态系统服务和人类干预的作用6. 结论6.1 干旱胁迫生态实验的总结6.2 对干旱管理和生态系统保护的启示 6.3 未来研究的展望和建议7. 附录:实验数据和图表展示总结和观点:干旱胁迫对生态系统的影响是多方面的。

植物、动物和土壤微生物都受到了干旱的直接或间接冲击。

植物通过表型和生理适应来应对干旱,如改变根系结构和增加水分利用效率。

动物则往往依赖水源和食物资源的变化来调整行为和生活习性。

土壤微生物受干旱影响后,会导致土壤的生物学和化学过程发生变化。

生态系统通过各种适应策略和回复机制来保持稳定性和弹性。

维持土壤水分和植物群落的重建是保护生态系统的重点。

通过合理管理和人类干预,我们可以为生态系统提供更好的保护和恢复。

在未来的研究中,需要更加关注干旱适应和保护策略的实施效果以及生态系统服务的评估方法。

《植物生物学实验》逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析

《植物生物学实验》逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析

《植物生物学实验》逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析植物生物学实验是通过一系列的实验操作和分析,来研究植物的生理、生态和分子生物学等方面的知识。

本实验主要通过逆境胁迫处理水稻幼苗,分析逆境胁迫对水稻幼苗生长和生理指标的影响。

实验材料和设备:1.水稻(水稻研究中心提供);2.生理盐水(NaCl)、二氧化硫(SO2)处理液;3.导电仪、光合仪等生理分析仪器;4.显微镜、离心机等常规实验设备。

实验步骤:1.准备水稻幼苗:从生长良好的水稻幼苗中挑选均匀的幼苗作为实验材料。

2.处理逆境胁迫:将水稻幼苗分为3组,每组包含相同数量的幼苗。

第一组为对照组,用生理盐水处理;第二组为盐胁迫组,用不同浓度的NaCl溶液处理;第三组为二氧化硫胁迫组,用不同浓度的SO2气体处理。

将幼苗放置于适当的处理液或腔室中,进行逆境胁迫处理。

3.观察幼苗生长:每天记录幼苗的外观和生长情况,包括株高、根长、叶片颜色变化等。

4.分析生理指标:适当时间点采集幼苗组织,进行一系列的生理指标分析。

例如,测定叶片的相对含水量、叶绿素含量、叶绿素荧光参数、导电率等指标,来评估幼苗的耐逆性。

5.统计和分析数据:将采集到的数据进行统计和分析,比较不同处理组的差异性,探讨逆境胁迫对水稻幼苗生长和生理指标的影响。

实验结果分析:通过观察和分析数据,可以得出逆境胁迫对水稻幼苗生长和生理指标的影响。

在盐胁迫组中,幼苗的株高和根长可能显著减少,叶片可能出现褪绿现象,并且各项生理指标可能发生异常变化;而在二氧化硫胁迫组中,幼苗的生长可能受到抑制,且可能出现叶片黄化和脱落等症状。

实验结论:通过逆境胁迫处理水稻幼苗,可以发现逆境胁迫对水稻幼苗生长和生理指标有一定的负面影响。

这些实验结果有助于我们深入了解植物在逆境环境下的生理适应机制,为进一步的研究提供理论和实验基础。

总结:本实验通过逆境胁迫处理水稻幼苗,分析逆境胁迫对水稻幼苗生长和生理指标的影响。

在实验过程中,我们需要仔细观察和记录幼苗的生长情况,并进行相应的生理指标分析。

低温胁迫实验报告

低温胁迫实验报告

一、实验背景低温胁迫是植物生长过程中常见的非生物胁迫之一,对植物的生长发育、产量和品质等产生严重影响。

为了研究低温胁迫对植物的影响及植物的抗逆性,本实验以某植物品种为研究对象,通过模拟低温环境,探讨低温胁迫对植物生理指标、形态指标及分子生物学水平的影响。

二、实验材料与方法1. 实验材料实验材料为某植物品种的幼苗,共分为对照组和低温胁迫组。

2. 实验方法(1)低温胁迫处理将实验材料分为对照组和低温胁迫组,低温胁迫组置于4℃低温环境下处理,对照组置于室温(25℃)条件下。

每组设置3个重复,每个重复20株植物。

(2)生理指标测定在低温胁迫处理0d、3d、6d、9d、12d时,分别采集植物叶片,测定以下生理指标:- 叶绿素含量:采用丙酮法测定;- 可溶性糖含量:采用蒽酮法测定;- 可溶性蛋白含量:采用考马斯亮蓝G-250法测定;- 丙二醛(MDA)含量:采用硫代巴比妥酸法测定;- 脯氨酸含量:采用酸性茚三酮法测定。

(3)形态指标观察在低温胁迫处理0d、3d、6d、9d、12d时,观察植物叶片的形态变化,记录叶片颜色、叶片厚度、叶片伸展度等指标。

(4)分子生物学水平研究在低温胁迫处理0d、3d、6d、9d、12d时,采集植物叶片,提取总RNA,进行Real-time PCR检测低温胁迫对关键基因表达的影响。

三、实验结果与分析1. 生理指标变化(1)叶绿素含量:随着低温胁迫时间的延长,低温胁迫组叶绿素含量呈下降趋势,与对照组相比,差异显著(P<0.05)。

(2)可溶性糖含量:低温胁迫处理初期,可溶性糖含量有所上升,随后逐渐下降,与对照组相比,差异显著(P<0.05)。

(3)可溶性蛋白含量:低温胁迫处理初期,可溶性蛋白含量有所上升,随后逐渐下降,与对照组相比,差异显著(P<0.05)。

(4)丙二醛(MDA)含量:低温胁迫处理初期,MDA含量呈上升趋势,随后逐渐下降,与对照组相比,差异显著(P<0.05)。

生物胁迫生理指标检测实验流程

生物胁迫生理指标检测实验流程

生物胁迫生理指标检测实验流程下面以更口语化的方式解释生物胁迫生理指标检测实验的流程:第一步:计划实验确定研究啥:想清楚你要研究哪种逆境对植物的影响,比如盐水泡、重金属污染、高温炙烤等,还有你想了解的生理表现(如抗氧化能力、体内盐分、光合作用好坏等)。

选好实验对象:挑个对这种逆境敏感、有代表性的植物,比如水稻、小白菜、小麦等,再决定在它哪个生长阶段做实验(比如刚长出小芽的时候、长大了的时候)。

设定逆境条件:参考书本或先试试看,定好逆境的“剂量”(如盐水有多咸、重金属有多少、温度有多高),还要有个正常生长的对照组做对比。

安排实验时间:想好逆境要持续多久,以及在什么时候取样,看看短时间、长时间的逆境对植物有什么不同影响。

第二步:动手做实验养植物:在温室或实验室里给植物提供稳定的温度、光照和湿度,让对照组和实验组的植物都长得差不多。

给逆境:按照之前设定的条件,给实验组植物“喂”盐水、重金属溶液,或者放到高温环境中。

观察记录:在逆境过程中,常常去看看植物有没有啥变化(比如叶子颜色变深、长得慢了、叶子卷起来了),把这些都记下来。

收集样本:到了取样时间,从对照组和实验组的植物上摘叶子、挖根,迅速冻起来或者用专门的液体泡着,保持它们的“生命力”。

第三步:检测生理指标测酶活性:像抗氧化酶这种,可以通过一些实验室里的常用方法,看看它们在逆境下工作得怎么样。

测离子浓度:看看植物体内盐分、钙、镁等离子多了还是少了,用专门的仪器测。

测光合作用:用光合仪看看植物吸二氧化碳、释放氧气的能力有没有变,还有气孔开闭的情况。

测水分情况:看看植物保水能力怎么样,膜有没有破损,用一些专门的指标衡量。

测代谢产物:像脯氨酸、糖分、MDA这些,能反映植物怎么应对逆境压力。

第四步:分析结果数理统计:用电脑软件把数据整理好,算算平均值、方差啥的,再看看对照组和实验组的数据差别有多大,是不是真的显著。

找关联:看看这些生理指标之间有啥关系,跟逆境的严重程度、持续时间又有啥关系,这样能更好地理解植物是怎么应对逆境的。

生物专业植物生理实验论文低温胁迫对菠菜叶片抗寒性的影响颖(可编辑).

生物专业植物生理实验论文低温胁迫对菠菜叶片抗寒性的影响颖(可编辑).

生物专业植物生理实验论文低温胁迫对菠菜叶片抗寒性的影响颖低温胁迫对菠菜叶片抗寒性的影响王新颖王文岩(东北农业大学、农学院、哈尔滨市、150030)【摘要】:植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。

在正常的情况下,细胞膜对物质具有选择性能力。

植物组织受到逆境伤害时,由于膜的功能受损或结构破坏,而使其透性增大,细胞内的盐类或有机物将有不同程度渗出,从而引起组织浸泡液电导率发生变化,通过测定外渗液电导率的变化,就可以反映出质膜的受害程度和所测材料抗逆性的大小。

伤害越重,外渗越多,电导率的增加也越大;在过氧化物酶催化下,过氧化氢将愈创木酚氧化成棕褐色产物,此产物在470nm处有最大吸收峰值,故可通过测470nm下的吸光值变化测定过氧化物酶的活性。

过氧化物酶活性以每毫克蛋白质每分钟内的活性单位来表示。

本次实验主要是通过菠菜在低温胁迫条件下,细胞膜遭到破坏,膜透性增大,通过实验使我们了解低温胁迫对菠菜叶片抗寒性的影响。

【关键词】:菠菜、低温、抗逆性、外渗电导率、过氧化物酶活性0 前言菠菜Spinach是人们经常食用的主要蔬菜。

它属于藜科菠菜属的1、2 a生草本植物。

在华北的大部分地区,耐寒性较强的尖叶菠菜可以安全越冬,因此了解低温胁迫对菠菜的生理影响,探索菠菜的抗寒生理机制,对于通过基因工程手段提高冷敏感植物的抗寒能力,选育抗寒性强的品种及其栽培管理都有重要的意义。

为此,研究了菠菜在秋、冬季节随着温度的降低,叶片与根的可溶性糖、游离脯氨酸Pro、丙二醛MDA的含量、超氧化物歧化酶SOD的活性,以期了解菠菜在自然环境低温的冷驯化过程中,这些抗性指标的变化及其与抗寒性之间的关系。

[1]虽然植物本身具有一定的抗寒性, 可是不同植物种类和品种有不同的抗寒性,不同器官的抗寒性也不一样。

植物抗寒性也能通过一些途径提高, 这对于避免和减少寒害损失有重要意义。

近年来, 许多植物的抗寒性研究取得了可喜的进展, 主要就抗寒性的生理基础, 提高植物抗寒能力的研究以及抗寒育种途径等方面进行阐述[2]。

植物胁迫生物学探究植物受到的各类胁迫及其应对策略

植物胁迫生物学探究植物受到的各类胁迫及其应对策略植物胁迫生物学探究植物是地球上生命链上至关重要的一环,它们起着氧气生成、碳循环和环境保护等重要作用。

然而,植物在自然环境中常受到各种胁迫,包括生理胁迫、生化胁迫和生态胁迫等。

本文将探究植物所面临的各类胁迫及其应对策略,以揭示植物的生物学适应机制。

一、温度胁迫温度是植物生长发育的重要因素之一,但过高或过低的温度都会对植物产生不良影响。

高温胁迫会导致植物光合作用受抑制、蛋白质失活、细胞膜脂质过氧化等,进而影响植物生长与发育。

而低温胁迫则会造成植物细胞质液冻结、酶活性下降、生长抑制等。

植物通过一系列机制来适应温度胁迫。

例如,植物会合成特定的保护性蛋白,在高温下维持核酸和蛋白质的稳定性。

此外,植物对低温胁迫的适应策略包括合成冷害蛋白、调节细胞膜脂质组成和改变细胞壁结构等。

二、盐害胁迫盐害胁迫是指植物在土壤中高浓度盐分的影响下受到的压力。

在过高盐浓度环境中,植物根系吸收水分能力下降,导致植物缺水,同时盐分还会干扰离子平衡,阻断植物正常的代谢过程。

这些都会导致植物生长停滞、叶片枯黄、甚至死亡。

植物应对盐害胁迫的策略包括盐腺排泄、渗透调节和细胞修复等。

一些盐生植物还具有耐盐基因,能够在高盐环境中生长繁殖。

此外,一些植物还通过共生菌根形成共生关系,增强植物对盐害的抵抗能力。

三、水分胁迫水分胁迫是植物最常面临的一种胁迫情况,既包括缺水胁迫,也包括过度湿润的情况。

在缺水条件下,植物会出现水分亏缺、气孔关闭、细胞失水等现象,而过度湿润则导致植物根系缺氧,根部受到腐败。

植物通过多种方式来适应水分胁迫。

例如,植物通过开启或关闭气孔来调节水分蒸腾速率,减少水分流失。

此外,植物还能调控根系的生长角度、增加根系毛细管系统的密度,以增强吸水能力和水分储存能力。

四、光照胁迫光照是植物进行光合作用的重要因素,但光照过强或过弱都会对植物产生一定程度的胁迫。

强光照胁迫会导致光氧化损伤和叶绿素过量积累,而弱光照胁迫则会影响植物的光合效率和生长发育。

《植物生物学实验》逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析

《植物生物学实验》逆境胁迫水稻幼苗及其生理指标分析植物生物学实验是研究植物的各个方面的生理和生态特性的实验。

本实验主要研究逆境胁迫对水稻幼苗的影响及其生理指标分析。

一、实验目的1.了解逆境胁迫对水稻幼苗生长发育的影响;2.比较正常生长条件下和逆境胁迫条件下水稻幼苗的生理指标差异。

二、实验材料和方法1.材料-水稻种子;-培养基;-高温胁迫设备;-蚕豆细菌物质(ABA);-叶绿素测定试剂盒;-盐溶液。

2.方法1)水稻种子发芽:将水稻种子在培养皿中用纱布覆盖并加入适量的蒸馏水,放置于暗处,保持湿润,等待种子发芽;2)分别将发芽的水稻种子均匀撒在含有培养基的培养皿中;3)正常生长条件下:将培养皿放置在温度适宜、光照强度合适的环境下进行培养;4)逆境胁迫条件下:在高温胁迫设备中将培养皿放置在高温胁迫条件下进行培养;5)取出生长一定时间后的水稻幼苗,测量其生长指标,包括根长、茎长、叶片数量等;6)取幼苗叶片进行叶绿素含量测定:将若干鲜叶片取出,放入离心管中,加入适量乙醇,用电子天平称量叶片重量,并记录下来;7)使用叶绿素测定试剂盒按照说明书进行测定,并记录下结果;8)构建高盐胁迫实验组:将一部分水稻幼苗放入含有一定浓度盐溶液的培养皿中,对比正常生长条件下的水稻幼苗。

三、预期结果及讨论1.高温胁迫对水稻幼苗生长发育的影响:预期结果:高温胁迫条件下,水稻幼苗的生长速度将减慢,叶片数量明显减少。

讨论:高温胁迫会破坏水稻幼苗的细胞结构,导致生长发育受到抑制。

温度过高会影响光合作用,导致光合产物减少,从而影响生长速度。

2.叶绿素含量测定结果:预期结果:高温胁迫条件下,水稻幼苗叶绿素含量将下降。

讨论:高温胁迫会破坏叶绿素分子结构,降低光合作用的效率,从而导致叶绿素含量下降。

3.盐胁迫对水稻幼苗生长发育的影响:预期结果:高盐胁迫条件下,水稻幼苗的根系生长受到抑制,茎长也将减慢。

讨论:高盐浓度会破坏水稻幼苗的细胞结构,导致水分和营养的吸收受到限制,从而影响生长发育。

植物的生物胁迫与生物防治

类型
包括病害、虫害、杂草等。其中 ,病害又可分为由真菌、细菌、 病毒等引起的传染性病害和由生 理因素引起的非传染性病害。
植物受生物胁迫影响
生长受阻
生物胁迫会导致植物生长缓慢、矮化、叶片 黄化等症状。
产量下降
受生物胁迫影响的植物,其果实数量减少、 品质下降,最终导致产量降低。
生态失衡
生物胁迫可能破坏植物群落的生态平衡,导 致其他生物种类的数量变化。
生物多样性原理
增加农田生态系统中的生 物多样性,提高生态系统 的稳定性和抗性。
害虫综合治理原理
采取多种措施,包括生物 防治、农业防治、物理防 治和化学防治等,将害虫 控制在允许水平。
常见虫害及防治方法
蚜虫类
利用瓢虫、草蛉等天敌进行自然控制 ,或采用生物农药如苦参碱、鱼藤酮 等进行防治。
介壳虫类
采用生物农药如噻嗪酮、吡虫啉等进 行防治,或利用天敌如瓢虫、方头甲 等进行自然控制。
植物抗逆性提高途径
选育抗逆性强的品种
传统育种
通过选择自然条件下抗逆性强的植物进行杂交育种,获得具有优 良抗逆性的新品种。
基因工程育种
利用基因工程技术,将抗逆性相关基因导入植物体内,培育出转 基因抗逆植物。
诱变育种
利用物理、化学等因素诱导植物基因突变,从突变体中筛选出具 有抗逆性的新品种。Fra bibliotek高植物自身免疫力
04
02
植物病害生物防治
病害生物防治原理
利用有益生物或其代谢产物
01
通过引入或培养对病原物有拮抗作用的有益微生物,或利用微
生物的代谢产物来抑制或消灭病原物。
诱导植物抗性
02
通过生物诱导剂激发植物自身的防御机制,提高植物对病害的

植物的生物胁迫响应

植物的生物胁迫响应生物胁迫是指植物在面临各种外界环境压力或内部病理因素的影响时,通过一系列的生理和分子机制来应对并适应这些压力。

这些生物胁迫响应是植物为了生存和繁衍的适应策略,使其能够在恶劣环境中继续生长和发育。

本文将介绍植物在生物胁迫下的响应机制以及相关的适应策略。

一、光胁迫响应光照是植物生长中的重要环境因素,但过强或过弱的光照都会对植物产生胁迫。

在光照不足的情况下,植物会通过增加叶绿素含量、提高光合酶活性等措施来增强光合作用,以增加对有限光能的利用率。

而在光照过强的情况下,植物会通过调节光保护机制来减轻光对叶绿素和光合功能的破坏。

二、温度胁迫响应温度是植物生长发育的重要环境因素,但过高或过低的温度都会对植物产生胁迫。

在高温胁迫下,植物会通过调节保护酶的活性、合成热休克蛋白等方式来保护细胞膜的完整性和稳定性,以减轻高温对植物的伤害。

而在低温胁迫下,植物会通过积累低温胁迫相关基因产物、增强保护酶的活性等方式来提高耐寒性。

三、水分胁迫响应水分是植物生长发育的关键因素之一,但过干或过湿的土壤都会对植物产生胁迫。

在干旱胁迫下,植物会通过闭气孔、减少水分散失、积累保护性蛋白等方式来减少水分损失。

而在过湿胁迫下,植物会通过增加气孔开放度、增强呼吸作用等方式来促进水分的排泄和兑换。

四、盐胁迫响应盐胁迫是指土壤中含有过量的盐分,对植物生长发育造成的不良影响。

在盐胁迫下,植物会通过积累抗盐相关基因产物、调节离子吸收和运输等方式来降低盐的毒性。

同时,植物还能够通过调节渗透调节物和保护酶的活性等措施来维持细胞渗透平衡和稳定。

五、病原菌胁迫响应病原菌是植物生长发育的重要病理因素之一,会导致植物发生病害。

在病原菌胁迫下,植物会通过识别和激活相关的病害抗性基因、合成抗菌物质等方式来抵御病原菌的侵袭。

同时,植物还能够通过调节免疫反应和产生抗菌蛋白等策略来增强对病原菌的抵抗力。

综上所述,植物在面临生物胁迫时会通过一系列的生理和分子机制来应对和适应这些压力。

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生物胁迫试验方案
1、试验内容
二倍体和三倍体枇杷抗病性研究
2、试验原理
植物受到生物胁迫后,内部的生理活动和外观的生长发育都可能发生异常变化。

首先是细胞水平的变化,包括各种代谢活动和酶活性,然后是组织水平和器官水平的变化,组织或器官水平出现的变化,肉眼可以识别。

肉眼可识别的组织、器官变化叫做“症状”,它是人们诊断植物是否已遭遇生物胁迫,鉴定植物受胁迫的主要指标和依据。

3、试验设备、仪器和材料
3.1试验设备、仪器
……
3.2试验材料
二倍体枇杷和三倍体枇杷各?个品种,分别是二倍体??和三倍体??,采用4月中旬树势基本一致的枇杷植株,取染病的叶片、果实分离病菌,以健康幼苗做为试材。

4.生物胁迫类型选择
选择枇杷常见的6种病害作为试验目标,分别是圆斑病、灰斑病、轮斑病、枯斑病、胡麻叶斑病和轮纹病。

5.常用试验方法介绍
植物抗病性鉴定方法常用的共有三种,分别是田间自然鉴定法、田间或温室接种鉴定法、离体接种鉴定法。

5.1田间自然鉴定法
对树体大,多年生的果树及观赏植物进行田间鉴定,可将待鉴定的材料按一定的株行距定植于大田,全年不使用任何杀菌剂,并于发病盛期,每份材料调查100-300个果实或叶片的发病程度。

5.2田间或温室接种鉴定法
该方法是将病原菌孢子或病毒直接接种到田间植物的叶片、果实或根上,它适合对所有植物进行抗病性鉴定。

接种鉴定的技术规程包括育种、接种体的制备(病菌的分离、保存与孢子诱发)及接种三个环节。

叶片及果实接种真菌或细菌,宜选用点滴法或喷雾法;接种病毒采用感病植株的叶片摩擦要鉴定的植株或用在病株上取食的蚜虫笼养接种待鉴定植株。

5.3离体接种鉴定法
从植株上取下子叶、叶片或果实进行离体接种鉴定。

如水稻稻瘟病抗性叶片离体接种鉴定,取水稻幼苗尚未完全展开的第5叶中部5㎝左右的叶段,置于保湿的培养皿中,每个培养皿放4-5个叶段,用0.025%的Tween20水溶液均匀喷雾。

用微量移液器取稻瘟病病菌孢子悬浮液(浓度调到2*105个孢子/ml)点接
于叶段上,每叶段点接4-5滴孢子悬浮液,每滴约3-5微升,盖上培养皿盖。

接种叶段的培养皿在28℃全光照条件下培养,随时观察病斑的搞感反应型。

6.试验方法选择及步骤
本实验选择室内接种鉴定法。

具体步骤如下:
6.1菌种准备
取具有游动孢子囊的幼苗或叶片,迅速放入盛有无菌水的瓶内,振荡,使孢子囊悬浮到水溶液中,然后用滤网将叶片等滤去,悬浮液用于接种。

为保证发病的均一性,每1ml菌液至少有25000个活的孢子囊体。

接种和诱导游动孢子萌发需要黑暗和相对湿度(RH100%)。

6.2幼苗准备
将种子播于装有细砂的盘,砂深1.3cm,株距2.5cm,喷水保湿,保证苗齐,子叶展开后接种。

6.3接种
将孢子囊体悬浮液喷到幼苗上,然后覆盖保湿(RH100%),在暗中(25℃),培养至少12h(过夜),然后打开覆盖物,在5000-10000lux光照、20℃下培养6d,诱导菌丝体生长,并且拔除接种之后所出的所有幼苗(未接种)。

6.4诱导产生孢子囊
接种后第6天,再覆盖植株,保湿(RH100%),20℃暗中培养12-16h,过夜生,诱导产生孢子囊,在覆盖前不能浇水。

6.5鉴定
第二天开始鉴定发病情况。

一般统计未发生孢子囊单株的百分比,抗病对照植物至少在15%以上,室内鉴定一般每个品种重复4次,每重复50个单株。

7.抗性分级
抗性分级有定性分级和定量分级两种。

7.1定性分级。

主要根据侵染点及其周围枯死反应的有无或强弱、病斑大小、色泽及其产孢的有无、多少,把寄主分为免疫、高抗到高感等级别。

7.1.1免疫
寄主对病原物侵染的反应表现为完全不发病,或观察不到可见的症状。

也就是说,即使在适合的条件下,寄主与寄生物之间未发生任何病害作用的结果。

7.1.2抗病
寄主受病原物侵染后发病轻微的称抗病。

可以用高抗、中抗、低抗等词来描述。

因为抗病性是绝对抗病到绝对感病之间任何一个过渡的量值。

7.1.3感病
寄主受到侵染后能发病的都称为感病,发病严重的称为高度感病。

7.1.4耐病
植物的耐病性是指植物忍受病害的能力。

在外观上,类似感病品种也发病,但是病害对产量的影响比感病品种小,衡量耐病的标准是测定产量或品质。

7.2定量分级
通常用普遍率(局部病害侵染植株或叶片的百分率)、严重度(平均每一病叶或每一病株上的病斑面积占体表面积的百分比,或病斑的密集程度)和病情指数(由普遍率和严重程度综合成的数值)来区分抗病等级。

病情指数=∑xa/n∑x=x1a1+x2a2+……+xnan/nT*100%
式中,x0,x1,x2,……xn为各级病情的频率,即普遍率;a0,a1,……an,为各级病情等级,其中0级为不发病,n级为最高级,T为调查总数。

作定量鉴定时,必须设抗病对照和感病对照,每个鉴定材料必须具有较多的植株或叶数,同时病情指数并不能直接反映出抗感的定性差别,因此,也用相对病情指数(RDI)或相对抗病指数(RRI)来表示。

RDI=KX,鉴定品种的病情指数
式中,K(校正指数)=标准品种DI/当年标准品种DI
其中,RRI=ln[DIm/(100-DIm)]*ln[DIck/(100- DIck)]
式中,DIm为鉴定品种的病情指数。

DIck为对照品种的病情指数。

8、试验日程安排
1.试验从2011年4月下旬开始,4月25日-4月30日,取材。

2.2011年5月1日-5月15日,病菌孢子分离。

3.2011年5月15日-5月20日,病菌侵染试验。

4.2011年5月20日-5月22日,抗性分级测定。

4.2011年5月23日-5月31日,试验数据处理及数据分析。

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