氨基色谱柱

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氨基柱的使用和保养

氨基柱的使用和保养

氨基柱的使用和保养氨基柱是同时可以用于正相和反相条件的一种色谱柱。

但正相溶剂和反相溶剂是不互溶的,这一点不能忽略。

对于新购柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。

如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。

过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速。

如果流动相中还有缓冲盐类,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,避免缓冲盐的析出。

柱效检测:我用于判断一个用户是否有经验的指标之一,是用户是否习惯配制一些柱效检测标准溶液。

说到柱效检测,我可以向大家提供一个方法,而且很通用,你也可以用同样的标准溶液和流动相来检测硅胶柱和氰基柱。

流动相:10%乙酸乙酯+90%正己烷流速1.0标准溶液:乙苯(或甲苯)+苯甲酸甲酯检测波长254nm这个方法特别适用于新购柱子(新购柱子往往保存在正相溶剂中)时即进行检测,如有问题,可及时与供应商沟通。

也适合柱子在准备放置相当长一段时间之前,进行充分清洗后进行检测作为记录留档。

在平常的使用过程中,如果分析物是固定重复的,我们当然可以从对分析物的分离分析情况来作出判断;但如果分析物和分析条件不同时,定期检测柱效可以避免柱效下降导致分离不佳再分析查找原因这样浪费人力物力的过程。

特别要注意的是,当氨基柱(或氰基柱)在反相条件中使用时,如用该条件检测,请注意流动相的换相过渡问题。

氨基柱的使用:氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。

反相条件使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。

所以,在使用后以及准备长时间放置时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是必需的。

当使用氨基柱进行酸性物质如果汁中糖份的分析时,酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,使用一段时间后对于某类的分析物保留性质有所改变或表现为柱效下降。

c18、c8、氨基、苯基、氰基色谱柱的区别

c18、c8、氨基、苯基、氰基色谱柱的区别

c18、c8、氨基、苯基、氰基色谱柱的区别
c18色谱柱是一种常用的反相色谱柱,它具有较高的碳链长度(18个碳原子),适用于分离疏水性化合物,特别是有机化合物。

它在常见的官能团和它们的聚合物上进行表面修饰,以提供良好的分离性能。

c8色谱柱也是一种反相色谱柱,和c18色谱柱类似,但其碳链长度较短(8个碳原子),因此适用于分离相对疏水性较低的化合物。

氨基色谱柱是一种亲和色谱柱,属于极性色谱柱的一种。

它通过具有氨基官能团的化合物进行表面修饰,能够与一些带有酸性或碱性官能团的化合物进行特异性相互作用,实现对这些化合物的选择性分离。

苯基色谱柱是一种反相色谱柱,具有苯基官能团的表面修饰。

它适用于分离芳香族化合物,因为芳香族化合物和苯基官能团之间有相互作用。

氰基色谱柱是一种亲和色谱柱,通过氰基官能团对化合物进行表面修饰。

它适用于分离带有羧基、酮基、酰胺基等官能团的化合物,能够与这些化合物进行选择性相互作用。

氨基柱分离糖先后顺序

氨基柱分离糖先后顺序

氨基柱分离糖先后顺序氨基柱是一种常用的色谱柱,用于糖类物质的分离。

糖是生物体内最重要的能量供应物质之一,具有广泛的生理功能。

糖类物质的分离对于研究其结构和功能具有重要意义。

本文将以氨基柱分离糖的先后顺序为标题,介绍氨基柱在糖类物质分离中的应用。

一、氨基柱的基本原理氨基柱是一种通过亲水作用分离糖类物质的色谱柱。

其基本原理是利用氨基官能团与糖分子中的羟基之间的氢键作用,实现糖类物质的分离。

由于糖类物质中的羟基数量和位置的不同,使得不同的糖类物质在氨基柱上具有不同的保留时间,从而实现分离。

二、单糖的分离单糖是糖类物质中的基本单位,包括葡萄糖、果糖、半乳糖等。

在氨基柱上,单糖的分离通常通过调节流动相的pH值、离子强度和有机溶剂含量来实现。

例如,在弱酸性条件下,将流动相的pH值调节到适当的范围,可以实现对单糖的有效分离。

此外,还可以通过梯度洗脱的方式,根据不同单糖的亲和力来实现它们的分离。

三、二糖的分离二糖是由两个单糖分子通过糖苷键连接而成的糖类物质,包括蔗糖、乳糖、麦芽糖等。

在氨基柱上,二糖的分离通常需要调节流动相的pH值、离子强度、有机溶剂含量以及洗脱梯度等参数。

通过这些参数的调节,可以实现对不同二糖的有效分离。

同时,根据二糖的结构特点,还可以采用亲水性降低的有机溶剂作为流动相,以增强分离效果。

四、寡糖的分离寡糖是由若干个单糖分子通过糖苷键连接而成的糖类物质,包括麦芽三糖、低聚果糖等。

在氨基柱上,寡糖的分离通常需要更加复杂的条件。

除了调节流动相的pH值、离子强度、有机溶剂含量以及洗脱梯度等参数外,还需要根据寡糖分子的大小和结构特点来选择合适的分离条件。

此外,还可以采用亲水性降低的有机溶剂作为流动相,并采用温度梯度的方法来增强分离效果。

五、多糖的分离多糖是由大量单糖分子通过糖苷键连接而成的糖类物质,包括淀粉、纤维素等。

在氨基柱上,多糖的分离需要更加复杂的条件。

通常需要采用多种分离技术的组合,如尺寸排阻色谱、亲和色谱等。

氨基柱清洗与使用

氨基柱清洗与使用

氨基柱的使用注意事项:
首先氨基柱的使用寿命肯定会比我们最常使用的C18、C8等色谱柱使用寿命短,这是氨基柱本身容易发生柱流失引起的,是色谱柱生产厂家普遍存在的问题,和哪个品牌没有关系。

使用时的注意事项如下:
新柱启用:由于氨基柱是保存在95%正己烷—5%异丙醇中的,做糖分析用乙腈+水流动相,所以首先要:不接色谱柱(即用两通代替色谱柱),用异丙醇冲洗仪器系统,0.5ml/min,冲洗0.5h左右
-----接上新的色谱柱,进口端先接上,流速由0.1ml/min升到0.3ml/min左右,出口端待有液体流出再接到检测器上,过渡4h----换成乙腈+水流动相,特别注意如果水中含有盐,先用乙腈+不含盐的水相过渡,而后再换成流动相。

使用后的冲洗:用完之后用分析时的乙腈+水同样比例冲洗40min左右----换成100%乙腈冲洗30min,并保存。

氨基柱清洗:
建议先用含0.5-1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液冲洗该柱, 30倍柱体积---再用50%水-50乙腈冲洗10倍柱体积----纯乙腈冲洗30倍柱体积---纯异丙醇冲洗30倍柱体积(流速降到0.3ml/min左右)----纯乙腈冲洗5min---72:28乙腈:水平衡------分析
现在做糖的分析我们推荐的是更耐用的氨基柱:InertSustain NH2 ,这款氨基柱相对于传统氨基柱,寿命会更长,具体如下。

氨基键合硅胶色谱柱(3篇)

氨基键合硅胶色谱柱(3篇)

第1篇一、氨基键合硅胶色谱柱的原理1. 色谱原理色谱法是一种分离混合物中各组分的分析方法。

根据色谱原理,混合物在色谱柱中经过两个相的作用:固定相和流动相。

固定相通常填充在色谱柱中,而流动相则通过色谱柱流动。

当混合物进入色谱柱时,各组分在固定相和流动相之间发生相互作用,从而实现分离。

2. 氨基键合硅胶色谱柱的原理氨基键合硅胶色谱柱是一种以氨基键合硅胶为固定相的色谱柱。

氨基键合硅胶是通过化学键合法将氨基基团键合到硅胶表面得到的。

在色谱过程中,氨基基团与被分析物分子发生相互作用,从而实现分离。

二、氨基键合硅胶色谱柱的结构1. 色谱柱材料氨基键合硅胶色谱柱的柱材料主要有以下几种:(1)硅胶:作为基体材料,具有高比表面积、良好的热稳定性和化学稳定性。

(2)键合相:氨基键合硅胶,具有特定的官能团,如氨基、羧基、氰基等。

(3)填料:如硅藻土、氧化铝等,用于填充色谱柱。

2. 色谱柱结构氨基键合硅胶色谱柱的结构主要包括以下几个部分:(1)柱壳:用于容纳色谱柱填料,通常由不锈钢、玻璃或聚四氟乙烯等材料制成。

(2)柱头:用于连接色谱柱和检测器,通常由不锈钢或玻璃制成。

(3)柱尾:用于连接色谱柱和流动相输送系统,通常由不锈钢或玻璃制成。

(4)填料:填充在色谱柱中,起到分离作用。

三、氨基键合硅胶色谱柱的应用1. 药物分析氨基键合硅胶色谱柱在药物分析中具有广泛的应用,如药物含量测定、药物纯度检测、药物代谢产物分析等。

2. 生物化学分析氨基键合硅胶色谱柱在生物化学分析中具有重要作用,如蛋白质、肽、核酸等生物大分子的分离纯化。

3. 环境监测氨基键合硅胶色谱柱在环境监测领域具有广泛应用,如有机污染物、重金属离子、生物标志物等的检测。

4. 其他领域氨基键合硅胶色谱柱在其他领域也有一定应用,如食品分析、石油化工、医药中间体合成等。

四、总结氨基键合硅胶色谱柱作为一种常见的色谱柱,具有广泛的应用前景。

本文从氨基键合硅胶色谱柱的原理、结构、应用等方面进行了详细介绍,以期为读者提供有益的参考。

kromasil-氨基柱说明书

kromasil-氨基柱说明书

Kromasil是瑞典AKZO NOBEL公司生产的高性能硅胶基质液相色谱柱填料品牌。

Kromasil是一种高纯度球形硅胶填料,金属杂质含量极低,降低了有些金属螯合物在硅胶基质上的络合效应。

Kromasil硅胶的表面由独特的硅羟基基团组成,硅烷的覆盖率高,在较高或较低的pH条件下不易水解和分解,可在pH=1.5~9.5条件下稳定使用。

瑞典原装进口Kromasil液相色谱柱是目前国际市场上广受欢迎的色谱柱品牌,具有重现行性好,适用性广泛,使用寿命更长的特点,更好的满足制药企业和药物研发对液相色谱柱的严格要求。

Kromasil是一种高纯度、大比表面积、高机械强度、较高的碳链覆盖率的新一代球形硅胶填料。

金属不纯物含量极低,减少了有些螯合物在硅胶基质柱上的络合作用。

Kromasil的表面有独特的硅羟基基团组成,硅烷的覆盖率高,在高或低的pH条件下不易水解和分解。

它允许流动相pH为1.5-9.5。

Kromasil含碳量高,表面极性小,分离效能高。

把几乎所有的羟基钝化,并大大降低了胺性或碱性物质在硅胶基质上的严重拖尾现象。

Kromasil能在6000psi(400bar)的高压下正常运行,具有稳定的柱效及长久的寿命。

Kromasil所有尺寸的柱子,特别是制备柱,都同样具有很高的柱效。

色谱柱品种包括:Kromasil C4液相色谱柱,Kromasil C8液相色谱柱,Kromasil C18液相色谱柱,Kromasil NH2液相色谱柱,Kromasil CN液相色谱柱,Kromasil 300Å大孔填料分析柱,Kromasil AmyCoat手性分析柱, Kromasil CelluCoat手性分析柱,Kromasil DMB 手性分析柱, Kromasil TBB 手性分析柱;Kromasil半制备柱, Kromasil制备柱。

氨基柱的使用和保养

氨基柱的使用和保养

氨基柱的使用和保养氨基柱是一种用于离子交换的色谱柱,常用于生物化学、分子生物学等领域中。

它可以用于样品的富集、分离和纯化,常见的氨基柱有强阳离子交换柱和强阴离子交换柱。

1.样品预处理:氨基柱在使用之前需要进行打膜处理,将柱子封堵活性位点,并参与到离子交换反应中。

常见的打膜方法有傅肯封堵法、交联封堵法等。

2.样品加载:将样品溶液通过柱子,样品中的目标离子与氨基柱上的功能基团发生交换反应,将目标离子吸附在柱子上,而非目标离子会从柱子中洗脱。

3.清洗:清洗是为了去除非目标离子和杂质,保证样品的纯度和分离效果。

主要可以用不同的缓冲溶液进行清洗,也可以使用溶剂进行洗脱。

4.洗脱:洗脱是将吸附在柱子上的目标离子洗脱下来,常用的方法有梯度洗脱、浓度洗脱等。

洗脱时需要控制洗脱缓冲液的pH值和离子浓度,来调节目标离子与功能基团间的亲和力。

5.再生:在使用后,柱子可能会受到杂质的积累或堵塞,需要进行再生。

可以用酸性、碱性溶液或盐溶液进行洗脱,去除污染物和杂质。

氨基柱的保养:1.注意保存:柱子需要保存在干燥、避光的地方,避免受潮和受热。

2.清洗:每次使用后,都要对柱子进行适当的清洗,去除残留的溶液和杂质。

可以用纯水或其他清洗溶液进行清洗,注意不要使用过于强酸或强碱溶液,避免损坏柱子。

3.洗脱剂的pH值:在洗脱时,要注意洗脱缓冲液的pH值,过高或过低的pH值都可能影响柱子的稳定性和分离效果。

推荐使用pH范围在2-10之间的缓冲液。

4.洗脱剂浓度:洗脱剂的浓度也会影响柱子的使用寿命和分离效果,过高的浓度可能会损坏功能基团,过低的浓度则可能无法有效洗脱样品。

根据具体实验需要,选择合适的洗脱浓度。

5.避免堵塞:在使用氨基柱时,样品中的杂质和残留物可能会堵塞柱子,影响分离和洗脱效果。

因此需要注意样品的净化和前处理,以减少污染物对柱子的影响。

总结起来,氨基柱的使用和保养非常重要,它直接影响样品的分离效果和纯度。

正确的使用和保养方法可以延长柱子的使用寿命,提高实验的可靠性和稳定性。

氨基柱 保存 方法

氨基柱 保存 方法

氨基柱保存方法
氨基柱是一种用于色谱分离的柱子,通常用于分离和纯化蛋白
质和肽段。

为了保持其性能和延长使用寿命,正确的保存方法至关
重要。

首先,对于氨基柱的保存,应该避免暴露在极端温度下,最好
存放在常温下,远离阳光直射和高温环境。

此外,氨基柱应该放置
在干燥的环境中,避免受潮或受到水分影响,因为水分可能会影响
柱子的性能。

其次,当氨基柱不在使用时,需要用适当的缓冲液或溶剂进行
储存。

通常情况下,可以使用一些常见的缓冲液比如PBS(磷酸盐
缓冲液)或者甲醇等。

在存放之前,应该用缓冲液进行充分的洗脱,然后用同样的缓冲液进行封存。

这可以防止柱子中的样品残留物变干,影响下一次的使用。

另外,为了保护氨基柱,建议在柱子两端安装保护柱(guard column),这样可以延长氨基柱的使用寿命。

同时,定期对氨基柱
进行保养和清洗也是非常重要的。

在使用完毕后,用适当的缓冲液
进行冲洗,并用推荐的储存溶剂进行封存。

总的来说,正确的保存方法对于延长氨基柱的使用寿命和保持其分离性能非常重要。

避免极端温度、湿度和阳光直射,使用适当的缓冲液进行储存,并定期进行保养和清洗,这些都是保护氨基柱的关键步骤。

希望这些信息能够帮助你更好地保存和保护氨基柱。

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氨基色谱柱,全称氨丙基键合硅胶色谱柱,在HPLC中既可以作为反相色谱柱,又可以作为正相色谱柱.使用者在进行正反相转换操作过程中一定要注意以下几项:
对于新购买到的柱子,首先请注意打开分析测试说明书,了解柱子的保存溶剂。

如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不会互溶,请先用异丙醇过渡。

过渡过程中注意因异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,适当调低流速即可。

如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。

柱效检测:
我用于判断一个用户是否有经验的指标之一,是用户是否习惯配制一些柱效检测标准溶液。

说到柱效检测,我可以向大家提供一个方法,而且很通用,你也可以用同样的标准溶液和流动相来检测硅胶柱和氰基柱。

流动相:
10%乙酸乙酯+90%正己烷流速1.0
标准溶液:
乙苯(如乙苯找不动就用甲苯代替呗)+苯甲酸甲酯
检测波长254nm
这个方法特别适用于新购柱子(新购柱子往往保存在正相溶剂中)时即进行检测,如有问题,可及时与供应商沟通。

也适合在柱子在准备放置相当长一段时间之前进行充分清洗后进行检测作为记录留档。

在平常的使用过程中,如果分析物是固定重复的,我们当然可以从对分析物的分离分析情况来作出判断;但如果分析物和分析条件不同时,定期检测柱效可以避免柱效下降导致分离不佳再分析查找原因这样浪费人力物力的过程。

不过特别要注意的是,当氨基柱(或氰基柱)在反相条件中使用时,如用该条件检测,请注意流动相的换相过渡问题。

氨基柱的使用:
需要注意的是,氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18,C8柱的键合官能团C18,C8要容易水解,所以首先要做好其使用寿命稍逊的心理准备,特别是当你的使用条件是反相条件下时。

反相条件下使用时,要特别注意控制PH值范围,PH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。

所以,在使用后以及准备长时间放置该柱时,必要的清洗和将氨基柱保存于纯的有机溶剂中是很好的保养措施。

有一种情况是,当使用氨基柱进行酸性物质如果汁的分析时(分析其中的糖份),酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。

这时,Kromasil专家所给的建议是:用5-10倍的柱体积的含0.5- 1.0%NH3的50-50乙腈-水溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。

氨基柱的清洗
简单说起来,正相条件下使用的氨基柱你就参照硅胶柱的清洗方法;反相条件下使用的氨基柱你就参照C18的清洗方法。

平时在正相条件下使用:
首先用50倍柱体积的异丙醇清洗,因异丙醇粘度较大可适当放低流速;之后,用50倍的甲醇清洗;之
后,用异丙醇过渡回到平常使用的正相流动相,即可。

平时在反相条件下使用:
缓冲盐应及时冲洗,以及不能直接用纯甲醇冲洗缓冲盐等,属常识就不作特别交待了。

用50倍纯甲醇冲洗;之后,用异丙醇过渡后,用二氯甲烷冲洗色谱柱;之后,再用异丙醇过渡回来到甲醇条件下。

这些清洗方法,主要是针对当样品中有杂质逐步吸附累积到填料上时的处理方法,色谱柱表现行为为诸如柱压增高柱效降低等
LUNA氨基柱的使用方法
1.氨基柱既可以正相使用,也可以反相使用,但是要注意到的是:正相溶剂和反相溶剂往往是不互溶的,正常情况新氨基柱保存在正相环境中,例如LUNA
氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中。

2. 正相使用
2.1
新柱子可直接用流动相。

推荐先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积,再根据流动相选用极性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速冲10倍柱体积,最后换成流动相。

2.2
正相使用时,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于还原糖的分析;流动相要彻底脱气,并不得含有羰基化合物和过氧化物2.3 任何时候更换流动相时都要确保新流动相与柱子原保存液可互溶。

3 反相使用
3.1
先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积,再依次以相同的流速相同的用量用氯仿、异丙醇、甲醇、甲醇-水(50:50)冲柱子。

3.2
以0.5ml/min的流速用30倍柱体积的pH11.0的氢氧化钠(LUNA)水溶液冲柱子(注意pH值切不可超过11.0),立即用水(
0.5ml/min的流速,30倍柱体积)冲洗,再换成流动相。

3.3
配制流动相时,应各组分分别量取,比例较小的组分要精密量取,需调pH值时要精密到0.1。

3.4
反相条件下使用时,要特别注意控制pH值范围,pH值越低越有发生水解的危险,流动相中水的比例越高当然也越有发生水解的危险。

最理想的pH范围在pH
3.0-7.0
3.5
如果要使用的流动相中还含有缓冲盐类,建议在用分析流动相之前,先用不含缓冲盐的同比例流动相过渡,这样可避免缓冲盐在分析柱内的析出。

3.6
有一种情况是,当使用氨基柱进行酸性物质的分析时,酸性物质的存在意味着质子的存在,可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化,导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效
下降。

建议:用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱(冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨),之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1%。

4
色谱柱的冲洗:简单说起来,正相条件下使用的氨基柱就参照硅胶柱的清洗方法;反相条件下使用的氨基柱就参照C18的清洗方法。

5 色谱柱的保存
5.1
正相使用时,将柱子冲洗干净后,用正己烷-乙腈(99:1)保存。

5.2
反相使用时,如短期不用,可用甲醇或乙腈保存;长期不用时需将甲醇依次用异丙醇、氯仿。

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