淀粉的液化实验报告
淀粉水解化学实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解淀粉水解的基本原理和实验方法。
2. 掌握淀粉水解实验的操作步骤。
3. 通过实验观察淀粉水解过程中的现象,验证淀粉水解反应的发生。
4. 探讨影响淀粉水解反应的因素。
二、实验原理淀粉是一种天然高分子碳水化合物,主要由葡萄糖单元通过α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键连接而成。
淀粉水解是指将淀粉分解成较小的糖类物质,如麦芽糖、葡萄糖等。
在酸性条件下,淀粉与水发生水解反应,生成葡萄糖。
实验原理方程式如下:(C6H10O5)n + nH2O → nC6H12O6三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 淀粉- 稀硫酸- 碘液- 氢氧化钠溶液- 新制氢氧化铜悬浊液- 银氨溶液- 碱性溶液2. 实验仪器:- 试管- 烧杯- 滴管- 酒精灯- 玻璃棒- 铁架台- 酒精喷灯四、实验步骤1. 准备淀粉溶液:称取一定量的淀粉,加入适量的蒸馏水,搅拌溶解,备用。
2. 水解反应:- 将淀粉溶液倒入试管中,加入适量的稀硫酸,搅拌均匀。
- 将试管放入烧杯中,用酒精灯加热,观察溶液的变化。
- 加热过程中,每隔一段时间取样,用碘液检测溶液中的淀粉含量,观察溶液颜色的变化。
3. 检验水解产物:- 当溶液颜色由蓝色变为淡黄色,表明淀粉已基本水解。
- 停止加热,用氢氧化钠溶液中和溶液中的稀硫酸,使溶液呈碱性。
- 加入新制氢氧化铜悬浊液,观察是否有砖红色沉淀生成,以验证葡萄糖的存在。
4. 验证淀粉水解程度:- 取少量水解后的溶液,加入碘液,观察溶液颜色的变化,以判断淀粉是否完全水解。
五、实验结果与分析1. 实验结果:- 在加热过程中,溶液颜色由蓝色逐渐变为淡黄色,说明淀粉发生了水解反应。
- 当溶液颜色由蓝色变为淡黄色时,停止加热,加入氢氧化钠溶液中和稀硫酸,使溶液呈碱性。
- 加入新制氢氧化铜悬浊液后,观察到砖红色沉淀生成,说明水解产物中含有葡萄糖。
- 加入碘液后,溶液颜色未发生明显变化,表明淀粉已基本水解。
2. 结果分析:- 实验结果表明,在酸性条件下,淀粉发生了水解反应,生成了葡萄糖。
淀粉的液化实验报告

淀粉的液化实验报告实验目的通过实验了解淀粉的液化过程及其影响因素,并探究合适的条件下淀粉液化的最佳状态。
实验原理淀粉的液化是指将淀粉颗粒分散在水中,并通过加热和机械搅拌,使淀粉颗粒发生溶胀、变软的过程。
液化的最终目的是将淀粉转化为可溶性的糊精,以便后续的糖化和发酵过程。
液化过程中的主要化学反应是淀粉颗粒的溶液化,即淀粉分子链的断裂和胶化。
液化过程中的主要影响因素包括温度、酸度、淀粉浓度和搅拌速度等。
合适的液化条件可以提高淀粉的溶解度和胶化程度,从而提高糊精的产率和质量。
实验步骤与结果1. 准备材料:淀粉溶液、电热板、玻璃棒、PH试纸等;2. 将淀粉溶液倒入锅中,加热至80;3. 在加热的同时,缓慢搅拌淀粉溶液;4. 测量溶液的PH值,记录下来;5. 观察淀粉溶液的状态,如是否变稠;6. 继续加热和搅拌,直至淀粉液化完全。
根据实验结果,我们记录了不同液化条件下淀粉的状态和溶液的PH值,如下表所示:条件淀粉状态溶液PH值80、pH5 未液化,浆糊状态 4.885、pH6 部分液化 5.290、pH7 完全液化 5.595、pH8 过度液化 5.8数据分析与讨论从实验结果可以看出,液化淀粉的最佳工艺条件为90和中性(pH7)环境。
在这种条件下,淀粉的液化程度最高,溶液的PH值也相对稳定。
在实验中观察到,低温下淀粉无法完全液化,形成浆糊状态;高温下淀粉液化过度,导致溶液黏稠度降低。
这说明温度是控制淀粉液化效果的重要因素。
另外,PH值也对液化效果有影响。
过酸或过碱的环境会抑制淀粉的液化,而近中性的环境有利于淀粉分子链的断裂和胶化。
因此,控制液化过程中的酸碱度十分关键。
实验结论通过本次实验,我们得出了以下结论:1. 液化淀粉的最佳工艺条件为90和中性(pH7)环境;2. 温度是影响淀粉液化效果的重要因素;3. 过酸或过碱的环境会抑制淀粉的液化,近中性的环境有利于淀粉的溶解和胶化。
实验改进为了进一步探究淀粉的液化过程,可在后续实验中进行以下改进:1. 考察不同酸度对淀粉液化效果的影响;2. 考察不同淀粉浓度对液化效果的影响;3. 探究其他因素(如搅拌速度)对淀粉液化的影响。
生化实验淀粉的实验报告

一、实验目的1. 学习淀粉的提取和鉴定方法。
2. 掌握淀粉酶的活性测定方法。
3. 了解淀粉在生物体内的作用。
二、实验原理1. 淀粉是一种由葡萄糖分子组成的多糖,广泛存在于植物中,是植物储存能量的主要形式。
2. 淀粉酶是一种能够催化淀粉水解的酶,根据其作用方式可分为α-淀粉酶和β-淀粉酶。
3. 淀粉酶活性可以通过测定在一定时间内淀粉水解的量来衡量。
三、实验材料与仪器1. 材料:马铃薯、淀粉酶、碘液、蒸馏水、盐酸、氢氧化钠、酚酞指示剂等。
2. 仪器:天平、烧杯、试管、滴管、移液管、恒温水浴锅、分光光度计等。
四、实验步骤1. 淀粉的提取(1)称取一定量的马铃薯,去皮,切成小块。
(2)将马铃薯块放入烧杯中,加入适量的蒸馏水,用研钵捣碎。
(3)将捣碎后的马铃薯浆液过滤,收集滤液。
(4)向滤液中加入适量的盐酸,调节pH值为4.5。
(5)将调好pH值的滤液加热至60℃,保持30分钟。
(6)将加热后的滤液冷却,用蒸馏水定容至100mL。
2. 淀粉的鉴定(1)取少量提取的淀粉溶液,加入碘液,观察颜色变化。
(2)将淀粉溶液滴在载玻片上,用显微镜观察淀粉颗粒的形态。
3. 淀粉酶的活性测定(1)取一定量的淀粉酶溶液,加入适量的淀粉溶液,混合均匀。
(2)将混合液置于恒温水浴锅中,设定温度为37℃。
(3)每隔一定时间,取出少量混合液,加入碘液,观察颜色变化。
(4)根据颜色变化,计算出淀粉酶的活性。
五、实验结果与分析1. 淀粉的鉴定:提取的淀粉溶液加入碘液后,溶液呈蓝色,证明提取的淀粉成功。
2. 淀粉酶的活性测定:根据颜色变化,计算出淀粉酶的活性为X单位。
六、实验讨论1. 淀粉的提取过程中,盐酸的作用是调节pH值,使淀粉酶活性适宜。
2. 淀粉酶的活性受温度、pH值等因素的影响,本实验中选取了适宜的温度和pH值进行测定。
3. 实验过程中,要注意操作规范,避免误差的产生。
七、实验总结通过本次实验,我们学习了淀粉的提取和鉴定方法,掌握了淀粉酶的活性测定方法,了解了淀粉在生物体内的作用。
淀粉试验实验报告

一、实验目的1. 掌握淀粉的基本性质及其在不同条件下的变化。
2. 熟悉淀粉的提取、分离和鉴定方法。
3. 了解淀粉在食品、医药和工业等领域的应用。
二、实验原理淀粉是一种天然高分子碳水化合物,广泛存在于植物中。
淀粉分子由许多葡萄糖单元通过α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键连接而成。
根据淀粉分子结构的不同,可将淀粉分为直链淀粉和支链淀粉。
淀粉的提取方法主要有酸水解法、酶解法和溶剂法。
本实验采用酸水解法提取淀粉。
淀粉的鉴定方法有碘液显色法、淀粉旋光法和淀粉酶法等。
本实验主要采用碘液显色法鉴定淀粉。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:马铃薯、碘液、蒸馏水、硫酸、氢氧化钠、无水乙醇、丙酮、滤纸、研钵、烧杯、漏斗、滴管、酒精灯、天平等。
2. 实验仪器:电子天平、磁力搅拌器、电热恒温水浴锅、显微镜、离心机等。
四、实验步骤1. 淀粉的提取(1)将马铃薯洗净,去皮,切成小块。
(2)将马铃薯块放入研钵中,加入适量的蒸馏水,用研杵研磨成匀浆。
(3)将匀浆倒入烧杯中,加入适量的硫酸,搅拌均匀。
(4)将烧杯放入电热恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态30分钟。
(5)停止加热,待溶液冷却后,用漏斗过滤,收集滤液。
(6)将滤液倒入烧杯中,加入适量的氢氧化钠,调节pH值至7。
(7)将烧杯放入电热恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态10分钟。
(8)停止加热,待溶液冷却后,用漏斗过滤,收集滤液。
(9)将滤液倒入烧杯中,加入适量的无水乙醇,搅拌均匀。
(10)将烧杯放入电热恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态10分钟。
(11)停止加热,待溶液冷却后,用漏斗过滤,收集滤液。
(12)将滤液倒入烧杯中,加入适量的丙酮,搅拌均匀。
(13)将烧杯放入电热恒温水浴锅中,加热至沸腾,保持沸腾状态10分钟。
(14)停止加热,待溶液冷却后,用漏斗过滤,收集滤液。
2. 淀粉的鉴定(1)取少量滤液,加入适量的碘液,观察颜色变化。
(2)取少量滤液,用显微镜观察淀粉颗粒的形态。
淀粉观察实验报告

一、实验目的1. 了解淀粉的基本性质及其在不同条件下的变化。
2. 掌握淀粉的检测方法及操作步骤。
3. 通过实验观察淀粉在不同条件下的变化,进一步理解淀粉的化学性质。
二、实验原理淀粉是一种天然高分子碳水化合物,广泛存在于植物中,是植物储存能量的主要形式。
淀粉分子由大量葡萄糖单元通过α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键连接而成。
淀粉分为直链淀粉和支链淀粉,直链淀粉分子结构较紧密,支链淀粉分子结构较松散。
淀粉的检测方法主要有:碘液法、比色法、层析法等。
本实验采用碘液法检测淀粉,利用淀粉与碘液发生蓝色复合物的原理进行检测。
三、实验材料与试剂1. 实验材料:土豆、玉米、面粉、淀粉酶、蒸馏水、碘液等。
2. 试剂:10% NaOH溶液、1% 氢氧化钠溶液、碘液等。
四、实验步骤1. 淀粉提取:取土豆、玉米、面粉各10g,分别加入50mL蒸馏水,用玻璃棒搅拌,充分提取淀粉。
2. 淀粉检测:(1)取3个试管,分别标记为A、B、C。
(2)向A试管中加入5mL淀粉提取液,滴加2滴碘液,观察颜色变化。
(3)向B试管中加入5mL淀粉提取液,加入适量淀粉酶,滴加2滴碘液,观察颜色变化。
(4)向C试管中加入5mL淀粉提取液,加入1% 氢氧化钠溶液,滴加2滴碘液,观察颜色变化。
3. 结果观察与记录:(1)记录A、B、C试管中的颜色变化。
(2)分析实验结果,总结淀粉在不同条件下的变化。
五、实验结果与分析1. A试管:加入碘液后,溶液呈现蓝色,说明淀粉与碘液发生蓝色复合物。
2. B试管:加入淀粉酶后,溶液颜色逐渐变浅,说明淀粉在淀粉酶的作用下被水解。
3. C试管:加入氢氧化钠溶液后,溶液颜色变浅,说明氢氧化钠对淀粉有降解作用。
实验结果表明,淀粉在淀粉酶和氢氧化钠的作用下会发生水解,溶液颜色变浅。
六、实验结论1. 淀粉是一种天然高分子碳水化合物,广泛存在于植物中。
2. 淀粉与碘液发生蓝色复合物,可用来检测淀粉的存在。
3. 淀粉在淀粉酶和氢氧化钠的作用下会发生水解,溶液颜色变浅。
淀粉水解实验报告

淀粉水解实验报告篇一:淀粉水解糖的制备淀粉水解糖的制备一实验目的:(1)通过实验,了解淀粉糊化及酶法制备淀粉糖浆的基本原理;(2)掌握淀粉酶解法制备淀粉糖浆的实验方法。
二实验原理水解淀粉为葡萄糖的方法有三种,即酸解法,酶解法,酶酸法及双酶法。
本实验采用的是双酶法将淀粉水解成葡萄糖。
首先利用的是α-淀粉酶将淀粉液化,转化为糊精及低聚糖,使淀粉可溶性增加;接着利用糖化酶将糊精及低聚糖进一步水解,转化为葡萄糖。
三实验器材1,实验材料玉米粉α—淀粉酶(2000u/g)糖化酶(50000 u/g)2,仪器设备恒温水浴槽真空泵抽滤纸及布氏漏斗四操作步骤50克淀粉置于400毫升烧杯中,加水100毫升,搅拌均匀,配成淀粉浆,用5% Na2CO3调节pH=—,加入1毫升5%CaCL2溶液,于90-95℃水浴上加热,并不断搅拌,淀粉浆由开始糊化直至完全成糊。
加入液化型α---淀粉酶1克,不断搅拌使其液化,并使温度保持在70℃。
然后将烧杯移至电炉加热到95℃至沸,灭活10分钟。
过滤,滤液冷却到55℃,加入糖化酶1克,调节pH=,于60-65℃恒温水浴中糖化3-4小时,即为淀粉糖浆,若要浓浆,可进一步浓缩。
称重篇二:实验一淀粉酸水解制糖与还原糖的测定实验一淀粉酸水解制糖与还原糖的测定一、试验目的①掌握酸法制糖的工艺与方法;②掌握还原糖的测定方法。
二、酸水解制糖原理在淀粉酸水解过程中,有如下三种反应:在水解过程中,淀粉的颗粒结构被破坏,α--糖苷键及α--糖苷键在酸的催化下被切断,示踪同位素原子O18研究证明,H+先与H2O结合生成H3O +,H3O+能与糖苷键的氧原子结合生成不稳定化合物Ⅰ,随后C1-O键断裂生成C1正碳离子Ⅱ,H2O与具有正电荷的C1结合,再使C1失去H+,完成糖苷键的水解过程。
三、实验仪器7230型分光光度计、水浴锅或电炉、100mL量筒、100mL或50mL容量瓶9个、10mL与2mL移液管各1支、250mL 烧杯、250mL锥形瓶2个、布氏漏斗、真空泵、牛皮纸。
淀粉水解的实验报告

淀粉水解的实验报告
《淀粉水解的实验报告》
实验目的:通过观察淀粉在不同温度下的水解反应,探究淀粉在不同条件下的
水解情况。
实验材料:淀粉溶液、玻璃试管、试管架、加热器、温度计、碘液。
实验步骤:
1. 将淀粉溶液倒入玻璃试管中,放入试管架上。
2. 分别将试管放置在不同温度下,如室温、40摄氏度、60摄氏度和80摄氏度。
3. 在每个温度下,观察淀粉溶液的变化,并记录下变化的情况。
4. 用碘液滴在淀粉溶液中,观察颜色的变化。
实验结果:
在室温下,淀粉溶液呈现出浑浊的状态,加入碘液后呈现出蓝黑色。
在40摄氏度下,淀粉溶液开始变得透明,加入碘液后呈现出深蓝色。
在60摄氏度下,淀粉溶液更加透明,加入碘液后呈现出浅蓝色。
在80摄氏度下,淀粉溶液几乎完全透明,加入碘液后呈现出淡黄色。
实验分析:
通过实验结果可以发现,随着温度的升高,淀粉的水解速度逐渐加快,淀粉溶
液的浓度逐渐减小。
同时,加热后的淀粉溶液对碘液的吸收能力也逐渐减弱,
表明淀粉分子的结构发生了改变。
结论:
淀粉在不同温度下的水解速度不同,随着温度的升高,水解速度加快。
淀粉的
水解反应是一个温度敏感的过程,温度升高会加速淀粉的水解速度。
通过本次实验,我们对淀粉水解的过程有了更深入的了解,同时也为淀粉在工业生产和食品加工中的应用提供了参考。
希望本次实验能够对大家有所启发和帮助。
淀粉的性质实验报告

实验名称:淀粉的性质实验一、实验目的1. 探究淀粉在水中的溶解性;2. 了解淀粉与碘液反应的现象;3. 研究淀粉在不同温度下的溶解性;4. 分析淀粉的糊化特性。
二、实验原理淀粉是一种天然高分子多糖,具有良好的溶解性、糊化性和与碘液反应的特性。
在实验中,通过观察淀粉在不同条件下的性质,来了解其特点。
三、实验仪器与试剂1. 仪器:烧杯、玻璃棒、试管、酒精灯、温度计、电热板、天平、滤纸、漏斗、滴管、镊子、剪刀等。
2. 试剂:淀粉、碘液、蒸馏水、氢氧化钠、氯化钠、硫酸铵等。
四、实验步骤1. 溶解性实验:(1)称取一定量的淀粉放入烧杯中,加入适量的蒸馏水;(2)用玻璃棒搅拌,观察淀粉在水中的溶解性;(3)重复上述步骤,分别加入氢氧化钠、氯化钠、硫酸铵等试剂,观察淀粉的溶解性变化。
2. 碘液反应实验:(1)取一定量的淀粉溶液,加入几滴碘液;(2)观察溶液颜色的变化,记录现象。
3. 温度对溶解性的影响实验:(1)取一定量的淀粉溶液,分别放入不同温度的水中;(2)用玻璃棒搅拌,观察淀粉在不同温度下的溶解性;(3)记录实验结果。
4. 糊化特性实验:(1)将淀粉溶液放入烧杯中,用酒精灯加热至沸腾;(2)观察淀粉溶液的糊化过程,记录现象;(3)停止加热,观察淀粉溶液的糊化状态。
五、实验结果与分析1. 溶解性实验:淀粉在蒸馏水中溶解较好,加入氢氧化钠、氯化钠、硫酸铵等试剂后,溶解性有所降低。
2. 碘液反应实验:淀粉与碘液反应生成蓝色复合物,证明淀粉具有与碘液反应的特性。
3. 温度对溶解性的影响实验:淀粉在较高温度下的溶解性较好,随着温度的降低,溶解性逐渐降低。
4. 糊化特性实验:淀粉在加热过程中逐渐糊化,形成粘稠的糊状物,停止加热后,糊状物仍保持粘稠状态。
六、结论1. 淀粉具有良好的溶解性,在蒸馏水中溶解较好;2. 淀粉与碘液反应生成蓝色复合物,具有与碘液反应的特性;3. 温度对淀粉的溶解性有显著影响,较高温度下溶解性较好;4. 淀粉具有糊化特性,加热后形成粘稠的糊状物。
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淀粉的液化实验报告篇一:淀粉液化及糖化实验淀粉液化及糖化实验一、实验目的1. 掌握用酶解法从淀粉原料到水解糖的制备原理及方法;2. 掌握还原糖的测定方法。
二、实验原理在发酵过程中,因有些微生物不能直接利用淀粉,当以淀粉为原料时,必须先将淀粉水解成葡萄糖,才能供发酵使用。
一般将淀粉水解为葡萄糖的过程成为淀粉的糖化,所制得的糖液成为淀粉水解糖。
水解淀粉为葡萄糖的方法包括酸解法、酸酶结合法和酶解法。
实验室常采用酶解法制备淀粉水解糖。
酶解法是指利用淀粉酶将淀粉水解为葡萄糖的过程。
酶解法葡萄糖可分为两步:第一步是利用α-淀粉酶将淀粉转化为糊精及低聚糖,使淀粉的可溶性增加,这个过程称为液化;第二步是利用糖化酶将糊精或低聚糖进一步水解,转变为葡萄糖的过程,这个过程在生产上成为糖化。
淀粉的液化和糖化都是在酶的作用下进行的,故该方法也称为双酶法。
1. 酶解法液化原理淀粉的酶解法液化是以α-淀粉酶作为催化剂,该酶作用于淀粉的α-1,4-糖苷键,从内部随机地水解淀粉,从而迅速将淀粉水解为糊精及少量麦芽糖,所以α-淀粉酶也称内切淀粉酶。
淀粉受到α-淀粉酶的作用后,其碘色反应发生以下变化:蓝色→紫色→红色→浅红色→不显色(即显碘原色)。
酶解法液化因生产工艺不同分为间歇法、半连续法和连续法;液化设备分为管式、罐式和喷射式;加酶方法包括一次加酶法、二次加酶法和三次加酶法;根据酶制剂的耐温性分为中温酶法、高温酶法及中温酶和高温酶混合法。
本实验采用:高温酶法,间歇式,罐式,一次加酶法。
2. 酶解法糖化原理淀粉的酶解法糖化是以糖化酶为催化剂,该酶从非还原末端以葡萄糖为单位依次分解淀粉的α-1,4-糖苷键或α-1,6-糖苷键,由于是从链的一端逐渐一个个地切断为葡萄糖,所以糖化酶也成为外切淀粉酶。
淀粉糖化的理论收率:因为在糖化过程中有水的参与反应,故糖化的理论收率为111.1%(C6H10O5) n +H2O →n C6H12O6三、实验仪器与试剂1. 仪器分光光度计、恒温水浴锅、烘箱、滴定管、酸度计、电炉、离心机、白瓷板、烧杯、试管等。
2. 试剂玉米淀粉、α-淀粉酶、糖化酶、PH试纸、盐酸、葡萄糖溶液、DNS试剂、无水酒精等。
磷酸-柠檬酸缓冲液(PH6.0):称取磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)45.23 g,柠檬酸(C6H8O7·H2O)8.07 g,用蒸馏水溶解定容至1000 mL,配好后应以酸度计调整PH值为6.0。
原碘液(存储液):称取0.5 g碘和5.0 g碘化钾,研磨,溶于少量蒸馏水中,然后定容至100 mL,储存于棕色瓶中备用。
稀碘液(工作液):取1 m/L原碘液用蒸馏水稀释100倍(当天制备)。
反应终止液:0.1 mol/L硫酸。
四、实验方法1. 淀粉的液化配置30%的淀粉乳(按照0.1 L配制)两份,调节PH值至6.5,加入氯化钙(固形物0.2%,钙离子的存在可以保持α-淀粉酶在水解过程中保持活力和稳定性),加入α-淀粉酶(12~20 U/g淀粉);在剧烈搅拌下,先加热至72 ℃,保温15 min;再加热至90 ℃,并维持30 min,中间不停止搅拌,以达到所需的液化程度(DE值15~18%);取小样检测碘色反应呈棕红色;液化反应后,再升温至100~120 ℃,保持5~8 min,以凝聚蛋白质;以6000 r/min离心5 min得到上清液。
2. 淀粉的糖化迅速将上述上清液用盐酸将PH调至4.2~4.5,同时迅速降温至60 ℃;然后加入糖化酶(酶活力为10000 U的酶液0.5 mL),于60 ℃保温1~2 h;当用无水酒精检验无糊精存在时,将溶液PH值调至4.8~5.0,同时,将溶液加热至80 ℃,保温20 min;然后将溶液温度降至60~70 ℃,以6000 r/min 离心5 min即得到糖上清液;量取该糖液体积,取样分析还原糖含量(测定方法参见附录“葡萄糖含量的测定(3,5-二硝基水杨酸比色法)”相关内容)。
五、实验结果1. 在详细记录实验数据基础上完成下表,计算淀粉转化率。
③葡萄糖含量计算六、实验思考1. 分析糖化酶用量对糖化效果的影响?2. 淀粉液化过程中几个保温过程有何作用?附录1:葡萄糖含量的测定(3,5-二硝基水杨酸比色法)一、实验原理本实验是利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂与还原糖溶液共热后被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的含量和棕红色物质颜色深浅的程度成一定比例关系,故可用于比色测定。
葡萄糖与3,5-二硝基水杨酸试剂反应生成的有色物质在540 nm波长下有最大吸收峰,故在此波长下进行比色测定。
二、实验方法1. 标准曲线的绘制取6支大试管,分别编号0~5,按下表1加入各种试剂。
表1 葡萄糖含量的测定将各试管中溶液振荡均匀后,在沸水浴中准确煮沸5 min,将试管取出迅速用冷水冷却至室温,加入蒸馏水15 mL,摇匀。
在540 nm波长下,用0号试管作为空白调零,测定其他试管内溶液的吸光度。
以吸光度为纵坐标,葡萄糖含量为横坐标,绘制标准曲线。
2. 样品的测定将发酵液5 mL,以5000 r/min离心5 min,取上清液1 mL置于试管中,加入DNS试剂3mL,振荡混匀后,在沸水浴中准确煮沸5 min,取出迅速用冷水冷却至室温,加入蒸馏水15 mL,摇匀。
在540 nm波长下,用0号试管作为空白调零,测定其他试管内溶液的吸光度。
利用Origin或Excel 软件绘制的标准曲线,求出样品中葡萄糖的含量。
篇二:玉米淀粉的液化与糖化玉米淀粉的液化与糖化一、实验目的1、掌握用酶法水解淀粉制备水解糖的原理及方法。
2、掌握还原糖的化学测定和比色测定方法。
二、实验仪器、设备和材料1设备25升罐(可用本院25升发酵罐代替);装料按20升计,采用小型板框过滤机压滤,烘箱;水桶,量筒。
2分析仪器分光光度计,水浴锅,糖度计,滴定管,电炉,白瓷板,三角瓶,阿贝折光仪,比重瓶,pH计。
3实验主要原料:玉米淀粉,高温液化酶和糖化酶。
三、实验原理、过程和方法1、主要过程:通过双酶法制糖,从玉米淀粉原料出发,经配料,糊化,液化和糖化,过滤,制备成淀粉水解糖。
本实验所得到的糖液,可用于下一批酵母发酵实验。
2、配料:称重,按照20升有效体积,配制30%淀粉乳。
取样烘干至恒重,测定淀粉中的水分含量。
3、糊化和液化糊化原理:将淀粉乳加热,淀粉颗粒膨胀,由于颗粒的膨胀,晶体结构消失,变成糊状液体,淀粉不再沉淀,这种现象称为糊化。
不同的淀粉的糊化温度不同。
如玉米淀粉开始糊化的温度为62.0℃,中点温度为67℃,终结温度为72℃。
糊化分为:预糊化(吸水),糊化(体积膨胀)。
糊化过程中,要防止淀粉的老化(分子间氢键已断裂的糊化淀粉又重新排列形成新的氢键的过程)。
液化原理:液化是利用液化酶使糊化淀粉水解到一定的糊精和低聚糖程度,粘度大大降低,流动性增加。
液化方法分:酸法、酶酸法、酶法等。
以生产工艺不同又分为间歇法,半连续和连续式;液化设备有:管式、罐式、喷射式。
加酶方法有:一次加酶、二次加酶、三次加酶。
根据酶制剂的耐温性分为中温酶法、高温酶法、或中温酶和高温酶混合法。
本实验采用:高温酶法,间歇式,罐式,二次加酶法。
间歇液化法工艺流程:配制30%的淀粉乳,PH值6.5,加入氯化钙(对固形物0.2%),加入液化酶(加酶量根据酶制剂厂商的要求),在剧烈搅拌下,先加热至72℃,保温15min,再加热至90℃,并维持30min,以达到所需的液化程度(DE值:15—18%)。
碘反应呈棕红色:最好在液化后,再升温至120℃,保持5—8 min,以凝聚蛋白质,改进过滤。
4、糖化糖化理论:糖化的理论收率:因为在糖化过程中,水参与反应,故糖化的理论收率为111.1%。
(C6H10O5)n+nH2O=nC6H12O6 淀粉水葡萄糖162 18 180糖化实际收率:实际收率=淀粉转化率:指100份淀粉中有多少份淀粉被转化为葡萄糖。
淀粉转化率的计算:转化率DE值:用DE值表示淀粉水解的程度或糖化程度。
糖化液中还原性糖以葡萄糖计,占干物质的百分比称为DE值。
DE值计算:DE=[糖液体积(V)?糖液葡萄糖浓度%(C)]?100% [投入淀粉量(W)?淀粉含量(C)]还原糖用裴林氏法等法测定,浓度表示:葡萄糖g/100ml糖液;干物质用阿贝折光仪测定,浓度表示:干物质g/100ml 糖液。
影响DE值的因素:糖化时间:最初糖化时,糖化速度快,DE值显著上升;但24h后,当DE值达到90%以上时,糖化速度显著放慢。
液化DE值与糖化DE值的关系:液化程度应控制适当,太低或太高均不利。
原因是液化程度低,则粘度大,难操作;同时,由于液化程度低,底物分子少,水解机会少,影响糖化速度;液化程度低,易发生老化;但液化超过一定程度,则不利于糖化酶与酶与糊精生成络合结构,影响催化效率,造成糖化液的最终DE值低。
故应在碘试本色的前提下,液化DE值越低,则糖化液的最高DE值越高。
一般液化DE值应控制在12—18%。
酶制剂用量与糖液DE值的关系:糖化时间与糖化酶用量关系表:为加快糖化速度,可以提高酶用量,缩短糖化时间。
但酶用量太高,反而使复合反应严重,最终导致葡萄糖值降低,在实际生产中,应充分利用糖化罐的容量,尽量延长糖化时间,减少糖化酶用量。
糖化酶参考用量:液化DE值17%,淀粉乳33%,60℃,pH4.5,酶制剂(NoVo-150)用量:0.75-1ml/kg绝干淀粉,或150 u/g绝干淀粉。
糖化时间36 h。
糖化工艺流程:液化结束后,迅速将料液用酸将pH调至4.2-4.5,同时迅速降温至60℃,加入糖化酶,60℃保温数小时后,当用无水酒精检验无糊精存在时,将料液pH调至4.8—5.0,同时,将料液加热至80℃,保温20min,然后将料液温度降至,开始过滤。
5过滤在发酵罐内将料液冷却至60—70℃;洗净板框过滤机,装好滤布;接好板框滤机的管道;泵料过滤;热水洗涤(60—70℃);空气吹干;过滤结束后,洗净过滤机及有关设备。
量取糖液体积;取样分析还原糖浓度。
6、组织形式:每班分为四组,每7-8个学生。
四个罐分别由四组操作,加酶量可互不相同,或分为两种,每两组选定一种酶的浓度,以便做出不同加酶量条件下还原糖动力曲线。
四、实验分析项目和方法分析试剂:测定液化反应终点(碘反应);总糖(裴林法);还原糖(水杨酸比色法)的测定方法;原料淀粉含量的测定,原料含水量的测定(烘干称重法);糖液透光率(分光光度计法);糖化终点测定(无水乙醇检验);糊化液和糖化液DE值;用分光分度计对料液透光度的测定方法。
五、数据处理在详细记录实验数据的基础上完成实验报告。
计算转化率:各组配合实验,不同加酶量条件下还原糖浓度动力学曲线。