基因工程抗体
基因工程抗体名词解释
基因工程抗体名词解释基因工程抗体是利用基因工程技术对人工合成抗体进行定制和改造的一种生物工程技术。
抗体是一种由免疫系统产生的蛋白质，它可以识别和结合体内外的异物，从而协助机体进行免疫防御。
基因工程抗体通过选择性克隆和定制抗体基因序列，可以产生特异性更强、稳定性更好、生产成本更低的抗体。
基因工程抗体包括以下几种：1. 单克隆抗体（Monoclonal Antibodies）：基因工程技术可以使得单个淋巴细胞克隆产生大量相同的抗体，从而获得具有高度特异性的单克隆抗体。
这种抗体广泛应用于医学诊断、疾病治疗和科学研究等领域。
2. 重链抗体（Recombinant Antibodies）：重链抗体是利用基因工程技术使抗体重链蛋白的编码基因与其他蛋白的编码基因相融合，生成融合抗体。
这种重链抗体可以通过改变其结构和功能来提高其生物活性和稳定性。
3. 组合抗体（Bispecific Antibodies）：基因工程技术可以将两种不同的单克隆抗体的编码基因进行融合，产生具有双特异性的组合抗体。
这种抗体可以同时结合两个不同的目标分子，从而实现更强的疗效和更多样化的应用。
4. 人源化抗体（Humanized Antibodies）：由于小鼠源抗体和人类抗体在体内效价和安全性方面存在差异，基因工程技术可以通过改造抗体的基因序列，使得抗体具有更接近人类抗体的结构和功能。
这种人源化抗体更适合在治疗和预防疾病时使用。
基因工程抗体的应用广泛，其中的一些常见应用包括：1. 肿瘤治疗：通过基因工程技术，可以定制针对特定肿瘤抗原的单克隆抗体，用于治疗癌症。
2. 自身免疫性疾病治疗：基因工程抗体可以定制具有特异性和高效的抗体，用于治疗自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎和系统性红斑狼疮等。
3. 传染病治疗：通过基因工程技术，可以改造抗体的结构和功能，用于治疗传染病，如艾滋病、流感和乙肝等。
4. 分子诊断：基因工程抗体可以用于检测和诊断疾病，如癌症标志物的检测和感染性病原体的检测等。
基因工程抗体
第五章基因工程抗体分子生物学技术的发展，推动了免疫球蛋白遗传学的研究。
抗体的研究从原来的血清学方法、氨基酸水平分析发展到大免疫球蛋白基因结构、表达及调控DNA水平的研究，揭示了抗体多样性、等位基因排斥现象、抗体的分泌型和膜结合型形式、H链类别转换以及亲和力成熟机制等多种生物学现象。
自1975年Milstein和kÖhler等人研制出单克隆抗体以来，抗体技术得到了广泛的应用和发展，但在生物研究和临床疾病的治疗中却遇到了一定的困难。
异源性鼠抗体在人体内诱生免疫应答，产生抗小鼠抗体；人单克隆杂交瘤制备困难，生产量少，稳定性差；获得特异性类别抗体比较困难。
随着对抗体基因的研究和DNA分子重组技术的应用，通过基因改造获得特异性抗体成为可能。
1989年Huse等首次构建了抗体基因库，从而使抗体的研究从细胞水平进入到分子水平，并推动了第3代抗体—基因工程抗体技术的发展。
至此，抗体的产生技术经历了三个阶段：经典免疫方法产生的异源多克隆抗体；细胞工程产生的鼠源单克隆抗体及基因工程产生的人源单克隆抗体。
抗体产生的技术革命为抗体治疗开辟了广阔的前景。
第一节免疫球蛋白概述免疫球蛋白（immunoglobulin）是指具有抗体活性或化学结构与抗体分子相似的球蛋白。
它是介导体液免疫重要的免疫球蛋白分子。
免疫球蛋白可作为B细胞表面跨膜受体，参与膜信号转导，促进B细胞的激活、分化及凋亡。
血浆中分泌型抗体，具有中和抗原、激活补体或介导细胞毒作用等功能。
一、抗体的生成理论侧链学说( Side chain theory)，模板学说(Template theory )，克隆选择学说(clonal selection theory)二、抗体的结构1、轻链与重链Ig分子由两条轻链（light chain,L）和两条重链（heavy chain, H）组成。
轻链的分子量约为24kD，重链的分子量约为55kD或77kD。
轻链的种类有两种，即κ和λ。
基因工程抗体的例子
基因工程抗体的例子
基因工程抗体是通过基因重组技术将特定抗体基因导入至其他生物细胞中，使其具备产生抗体的能力，从而实现大规模生产高效、高纯度的抗体。
以下是一些基因工程抗体的例子：
1. 重组抗体药物：例如，重组人源单克隆抗体药物，如阿达木单抗（Adalimumab）和帕尼单抗（Panitumumab），用于治疗自身免疫疾病和某些癌症。
2. 基因工程抗体治疗疫苗：例如，COVID-19疫苗中使用的mRNA 疫苗，通过基因工程技术将病毒的抗原编码序列导入到人体细胞中，诱导免疫系统产生抗体来抵抗病毒感染。
3. 重组抗体诊断试剂：例如，基因工程技术可用于生产特定病原体抗体，如新冠病毒SARS-CoV-2抗体，用于开发快速诊断试剂盒，帮助早期检测和诊断疾病。
4. 基因工程抗体治疗：例如，CAR-T细胞疗法，通过基因工程技术将患者自身T细胞中的受体基因改造，使其能够识别和杀死癌细胞，用于治疗某些血液恶性肿瘤。
5. 基因工程抗体生产：基因工程技术可用于大规模生产特定抗体，如重组人源单克隆抗体，用于研究和治疗领域。
这些基因工程抗体的例子说明了基因工程技术在抗体研究、生产和
应用中的重要性和广泛应用性。
基因工程抗体名词解释
基因工程抗体名词解释
基因工程抗体是由人工合成或修改的基因来产生的抗体，也称为重组抗体。
与传统的抗体不同，基因工程抗体不受限于动物来源，可以通过人工合成的方式来获得。
基因工程抗体的制备过程包括选择目标抗原、构建重组抗体基因、转染宿主细胞、高效表达和纯化等步骤。
因为基因工程抗体可以定制化地设计和制备，具有高度特异性和亲和力，因此在生物医学研究、临床诊断和治疗等方面具有广泛的应用前景。
常见的基因工程抗体包括单克隆抗体、人源化抗体、嵌合抗体和重组抗体等。
其中，单克隆抗体是指由单一克隆细胞产生的抗体，具有高度特异性和一致性；人源化抗体是将动物源的抗体人源化，避免了人体免疫系统对异种抗体的攻击；嵌合抗体是将两种或以上不同来源的抗体结合起来产生的新型抗体，具有更广泛的抗原覆盖范围和高亲和力；重组抗体则是根据目标抗原的结构和性质，设计并合成新的抗体基因来产生新型抗体，具有更高的特异性和亲和力。
基因工程抗体的发展将会在生物医学领域带来更多的应用和发展机会，同时也将推动基础研究和药物研发的进步。
基因工程抗体
展望
基因工程抗体由于将抗体基因置于人的操作之 下，抗体分子的大小、亲和力的高低、对细胞 毒性的强弱，以及是否接上其它有用的分子等 都可根据治疗和诊断的要求进行设计，这是杂 交瘤技术所不及的，因此有着强大的生命结束仅依靠免 疫获得抗体的状况。
用三乙撑胺Co3+盐作为金属离子辅因子，所用 半抗原分子带有一肽键。且通过羧酸根及仲胺 基与金属离子相连。将此半抗原通过共价键连 接在载体蛋白上免疫动物后产生的抗体，在金 属离子复合物作为辅因子的参与下，这些抗体 酶能选择性水解甘氨酸和丙氨酸之间的肽键， 其转化数达6×10－4。
4．基因工程抗体技术
催化抗体（catalytic antibody）
催化抗体也叫抗体酶（abzyme），是具 有催化活性的免疫球蛋白，它兼具抗体 的高度选择性和酶的高效催化性
1986年Lerner和Schultz两个研究小组研究已取得了相当 广泛的成功。
在亲和性和结合特异性方面，抗 体－抗原的相互作用与酶-底物的 相互作用相似。
抗体与处于稳定、低能构型的抗原作用，而酶 与处于不稳定、高能的过渡态底物结合。酶结 合能量帮助打开底物分子的化学键。
抗体酶的结构应该与底物过渡态互补。但这种 过渡态往往只存在短时间，所以研究者必须先 制备底物过渡态的稳定低能类似物，然后制备 抗体酶。
优点
这类抗体具有分子量小，作为外源性蛋 白的免疫原性较低；在血清中比完整的 单克隆抗体或F(ab)2片段能更快地被清 除；无Fc片段，体内应用时可避免非特 异性杀伤；能进入实体瘤周围的微循环 等优点。
（四）Ig相关分子
原理：可将抗体分子的部分片段（如V区 或C区）连接到与抗体无关的序列上（如 毒素），就可创造出一些Ig相关分子
基因工程抗体PPT课件
cover illustration Antibody single-chain fragment stability-engineered by point mutations (A) and by a CDR-graft to the most stable human consensus framework (B). Insufficient thermodynamic stability can limit the use of particular antibody fragments as targeting moieties in therapeutic constructs, such as e.g. immunotoxins or immunoliposomes. This limitation can be overcome by a graft of the antigen combining site to a more stable antibody framework. However, such grafts sometimes fail to reach the superior stability of the acceptor framework. Comparison with the stabilization obtained with a set of designed point mutations shows that this is not always due to destabilizing interactions within the complementary determining regions, but to subtle structural differences between different classes of antibody frameworks that introduce strain in CDR grafts to divergent frameworks. For further details please see Kügler et al. (pp.135–148) and Honegger et al. (pp. 121–134).
《基因工程抗体》PPT课件
（三）单链抗体（single-chain antibody
） • 又称FV分子。
• 目的：基因工程手段构建更小的具有结合抗原能力的抗体片段，即FV分子或单链抗体 蛋白。
• 本质：是由VL区氨基酸序列与VH区氨基酸序列经肽连接物（linker）连接而成。此外肽 连接物还可将药物、毒素或同位素与单链抗体蛋白相融合。
优点
• 这类抗体具有分子量小，作为外源性蛋白的免疫原性较低；在血清中比完整的单 克隆抗体或F(ab)2片段能更快地被清除；无Fc片段，体内应用时可避免非特异性 杀伤；能进入实体瘤周围的微循理：可将抗体分子的部分片段（如V区或C区）连接到与抗体无关的序列上（如 毒素），就可创造出一些Ig相关分子
• 催化抗体制备技术的开发预示着可以人为生产适应各种用途的，特别是自然界不存在 的高效催化剂，对生物学、化学和医药等多种学科有重要的理论意义和实用价值。
（二）催化抗体的制备
• 催化抗体（抗体酶）技术是化学和免疫生物学的研究成果在分子水平交叉渗透的产物 ，是将抗体的极其多样性和酶分子的巨大催化能力结合在一起的蛋白质分子设计的新 方法，故而显示出较高的理论和实用价值，成为酶工程领域中的研究热点。
2. 导入骨髓瘤细胞，使之表达嵌合重链 3. 再将小鼠杂交瘤细胞的Ig VL基因与人的CL基因相连 4. 转染含嵌合重链的小鼠骨髓瘤细胞 5. 筛选分泌鼠－人嵌合抗体的骨髓瘤细胞
所分泌的嵌合抗体与原杂交瘤细胞分 泌的抗体特异性和亲和力相同，但减 少了抗体中的鼠源性成分
（二）重构抗体（reshaping anti body）
基因工程抗体
（genetic engineering antibody）
• 随着DNA重组技术以及其它分子生物学技术的发展，人们利用基因工程技术来制备抗体 分子，这种抗体分子称为基因工程抗体，这是分子水平的抗体。
基因工程抗体的名词解释
基因工程抗体的名词解释
嘿，你知道基因工程抗体吗？这可不是什么普通的玩意儿啊！基因
工程抗体就像是一个被精心打造的超级武器！比如说，普通抗体可能
就像一把普通的剑，能战斗，但能力有限。
而基因工程抗体呢，那简
直就是一把经过高科技改良的激光剑，威力超强！
基因工程抗体呀，是通过基因工程技术对抗体进行改造和重组得到的。
这就好像是给抗体来了一场华丽的变身秀！科学家们就像是神奇
的魔法师，运用各种技术手段，让抗体变得更强大、更精准、更有针
对性。
想象一下，疾病就像是一群可恶的小怪兽，而基因工程抗体就是专
门来对付它们的超级英雄。
它可以精准地找到那些小怪兽，然后毫不
留情地发起攻击。
你看啊，在医学领域，基因工程抗体可是有着大用处呢！它能帮助
医生们更有效地诊断疾病，就像一个敏锐的侦探，能迅速找出问题所在。
而且在治疗疾病方面，它也是一把好手，能给患者带来新的希望。
我记得有一次，我和朋友聊天，说到基因工程抗体，他一脸茫然。
我就给他解释，就像给他打开了一扇通往新世界的大门。
他惊叹道：“哇，原来还有这么神奇的东西！”
基因工程抗体的发展真的是太迅速了，就像火箭一样蹭蹭往上冲！
它不断地给我们带来惊喜和希望。
难道你不想多了解了解它吗？它真
的是太有趣、太重要了！我觉得基因工程抗体就是未来医学的一颗闪耀明星，它会给我们的健康带来更多的保障和奇迹！。
基因工程抗体和抗体工程
2023-10-30contents •基因工程抗体概述•基因工程抗体技术•抗体工程技术•基因工程抗体和抗体工程的应用•未来展望与挑战目录01基因工程抗体概述基因工程抗体是指通过基因工程技术对抗体基因进行改造或合成，以产生具有特定性能的抗体分子。
基因工程抗体是通过操作DNA分子层面，根据需求对抗体基因进行各种形式的改造，如插入、敲除或突变等，以获得具有特定性能或去除不良特性的抗体。
基因工程抗体的定义基因工程抗体的种类将鼠源性抗体的人源化改造，使其具有人抗体的亲和性和特异性，同时降低鼠源性抗体的免疫原性。
人源化抗体单克隆抗体双特异性抗体突变体抗体通过杂交瘤技术，将鼠源性的B细胞和骨髓瘤细胞融合，产生的杂交瘤细胞能产生单一抗体的克隆。
具有识别两种不同抗原表位的抗体，通常用于肿瘤免疫治疗和自身免疫性疾病的治疗。
通过基因突变技术，改造抗体分子的结合位点，以获得更强的亲和力、更高的稳定性或降低免疫原性。
基因工程抗体可以用于肿瘤免疫治疗，如靶向肿瘤细胞的抗体-药物偶联物(ADC)，通过将细胞毒性药物偶联到抗体上，实现定向杀伤肿瘤细胞。
肿瘤免疫治疗基因工程抗体可以用于治疗自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等，通过抑制或调节免疫反应达到治疗目的。
自身免疫性疾病治疗基因工程抗体可以作为疫苗的一部分，通过刺激机体产生特异性抗体来增强免疫力。
疫苗开发基因工程抗体的应用02基因工程抗体技术从免疫原刺激的B细胞中提取抗体基因，包括重链和轻链可变区基因。
抗体基因的获取将抗体基因与适当的载体连接，构建成表达载体。
载体构建将表达载体导入合适的宿主细胞，如细菌、酵母或哺乳动物细胞系。
转化宿主细胞在宿主细胞中表达抗体，通常以融合蛋白的形式存在。
抗体表达抗体基因的克隆和表达抗体库的建立和筛选抗体筛选通过亲和力、特异性等指标筛选出高亲和力和高特异性的抗体。
抗体库的建立通过PCR扩增抗体基因，构建成多样性抗体库。
B细胞克隆从免疫动物的脾脏或淋巴结中提取B细胞，并克隆化。
基因工程抗体
由一个仅识别一种抗原表位的B 细胞克隆产生的同源抗体，为单克隆抗体（McAb）。
其理化性状高度均一，抗原结合部位和同种型都相同，生物活性专一，特异性强，纯度高，有效抗体含量高，无效蛋白含量少，易于实验标准化和大量制备。
单克隆抗体在医学领域中有广泛的应用。
基因工程抗体(genetic engineering antibody)又称重组抗体，在充分认识Ig(immunoglobulin)的基因结构和功能基础上，应用DNA 重组和蛋白质工程技术，按人们的意愿在基因水平上对编码Ig分子基因进行切割、拼接与修饰等，并导入受体细胞，使之表达出新型抗体分子。
该抗体保留了天然抗体的特异性和主要生物学活性，减少或去除了无关结构，更接近人的Ig，第一节杂交瘤技术的基本原理杂交瘤技术的基本原理是通过融合两种细胞后同时保持两者的主要特征。
当两个细胞紧密接触时候，其细胞膜可能融合在一起。
融合细胞含有两个不同的细胞核，称为异核体(heterokaryon)，产生具有原来两个细胞基因信息的单个核细胞，称为杂交细胞(hybid cell)，包括B 淋巴细胞杂交细胞和T淋巴细胞杂交细胞。
一、B淋巴细胞杂交瘤技术该技术中采用的两株细胞分别是经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞。
前者的主要特征是它的抗体分泌功能，但在体外不能长期生长；而后者则可在体外培养无限分裂增殖，二者杂交融合，形成在体外无限增殖分裂并产生McAb 的杂交瘤细胞。
其原理如下：（一）细胞的选择与融合融合细胞一方为经过抗原免疫的B 细胞，通常来源于免疫动物的脾细胞；另一方则是具有永生性的肿瘤细胞，选择同一体系的细胞可增加融合的成功率。
浓度为40％(W／V)的聚乙二醇PEG1000~2000)是目前最常用的细胞融合剂。
（二）选择培养基的应用细胞融合是一个随机的物理过程。
经融合过程后细胞将有多种形式出现，须进行特别的筛选得到融合的脾细胞与瘤细胞。
HAT培养基应用原理：细胞的DNA合成一般有两条途径。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
VH和VL是抗原决定簇结 VH和VL是抗原决定簇结 合位点 高变区 HVR 决定簇互补区CDR 决定簇互补区CDR 骨架区FR 骨架区FR CH1和CL：Ig同种异型 CH1和CL：Ig同种异型 的遗传标志 CH2： CH2：补体结合位点 CH3：某些细胞Fc受体 CH3：某些细胞Fc受体 Fc 结合部位
Ag
ScFv应用 ScFv应用： 应用： 用于肿瘤的导向治疗 肿瘤的影像分布 基因治疗 研究基因结构与功能的关系
三、单域抗体 抗体与抗原的结合主要由Ig 抗体与抗原的结合主要由Ig的V区决定， Ig的 区决定， 因此只含V区基因片段的小分子抗体， 因此只含V区基因片段的小分子抗体，即只 有VH或 VL一个功能结构域，也能保持原单 VH或 VL一个功能结构域 一个功能结构域， 克隆抗体的特异性。这种小分子的抗体片段 克隆抗体的特异性。 就称为单域或单区抗体， 就称为单域或单区抗体，其分子量仅为整个 Ig分子的 12，故也称之为小抗体。 Ig分子的1／12，故也称之为小抗体。 分子的1
双特异性抗体的特点
* 将免疫细胞锚着于肿瘤部位，提高肿瘤 部位的效靶比。 * 不受MHC的限制，直接激活免疫细胞的 杀瘤机制。
2 1
3
提高抗体效应功能
双特异性抗体 抗体融合蛋白
提高抗体 效应功能
细胞内抗体
偶连细胞毒物质
抗体融合蛋白：抗体的一部分被非抗体序列替代， 抗体融合蛋白：抗体的一部分被非抗体序列替代，
1、抗体人源化 鼠单克隆抗体人源化 ：嵌合抗体、改型抗体 嵌合抗体、 小分子抗体：单价(Fab ScFv、单域抗体、 (Fab、 小分子抗体：单价(Fab、ScFv、单域抗体、 超变区多肽) 多价（Di- Tri- Minibody） 超变区多肽)、多价（Di-, Tri-, Minibody） 特殊类型抗体 (双特异性抗体、细胞内抗体、 双特异性抗体、细胞内抗体、 抗原化抗体、免疫脂质体) 抗原化抗体、免疫脂质体) 抗体融合蛋白 （免疫粘连素、免疫毒素、催 免疫粘连素、免疫毒素、 化抗体） 化抗体）
单价小分子抗体 一、Fab抗体 Fab抗体 Fab段由重链 Fab段由重链V区及 段由重链V CH1功能区与整个轻链以 CH1功能区与整个轻链以 二硫键形式连接而成，主 二硫键形式连接而成， 要发挥抗体的抗原结合功 能。Fab抗体只有完整IgG Fab抗体只有完整 抗体只有完整IgG 的1/3。 1/3。
单克隆抗体用于治疗存在的问题
1、单克隆抗体的特异性 由于肿瘤特异性抗原较少， 由于肿瘤特异性抗原较少，缺乏对肿瘤有严 格特异性的单抗，对正常组织有交叉反应； 格特异性的单抗，对正常组织有交叉反应； 2、异种抗体反应 鼠源性单抗用于人体， 鼠源性单抗用于人体，导致异源性超敏反应
理想的抗体药物的性质
所形成的具有新的特性融合蛋白。 所形成的具有新的特性融合蛋白。 根据构建方式的不同，主要分为两种形式： 根据构建方式的不同，主要分为两种形式： Fc融合蛋白 Fc融合蛋白（Fc fusion protein,FcFP）由抗体的Fc 融合蛋白（ protein,FcFP）由抗体的Fc 段与某些具有特定功能的蛋白结构域融合而成。 段与某些具有特定功能的蛋白结构域融合而成。 如CD4免疫粘附素，就是由抗体的Fc段与2个CD4 CD4免疫粘附素，就是由抗体的Fc段与2 CD4 Fc段与 分子的Ig 分子的Ig同源区重组而成 Ig同源区重组而成 抗 原 结 合 融 合 蛋 白 （ antigen-Binding fusion antigenprotein,ABFP） protein,ABFP ） 由具有抗原结合功能的抗体结构 与其他功能性蛋白融合构成。如免疫毒素， 与其他功能性蛋白融合构成。如免疫毒素，抗体 部分主要包括嵌合抗体、单链抗体形式。 部分主要包括嵌合抗体、单链抗体形式。
基因工程抗体 基因工程抗体
Genetic engineering antibody
根据研究者的意图，采用基因工程方法， 根据研究者的意图，采用基因工程方法， 在基因水平，对免疫球蛋白基因进行切割、 在基因水平，对免疫球蛋白基因进行切割、 拼接或修饰后导入受体细胞进行表达， 拼接或修饰后导入受体细胞进行表达，产生 新型抗体。主要包括嵌合抗体、单链抗体、 新型抗体。主要包括嵌合抗体、单链抗体、 人源化抗体、双价抗体和双特异性抗体等。 人源化抗体、双价抗体和双特异性抗体等。
双链抗体(diabody) 一、双链抗体(diabody) 制备方法 化学交联法
Ag
粘性蛋白结构域融合法 接头长度控制法。 接头长度控制法。
二、三链抗体(triabody) 三链抗体(triabody)
在制备单链抗体时，当接头的长度为2 在制备单链抗体时，当接头的长度为2 个或2个的以下氨基酸残基时， 个或2个的以下氨基酸残基时，或者直接 把VH结构域的N末端与VL结构域的C末端 VH结构域的 末端与VL结构域的C 结构域的N VL结构域的 相连，通过非共价键而形成的三聚体， 相连，通过非共价键而形成的三聚体，称 为三链抗体。接头长度在3 12个氨基酸 为三链抗体。接头长度在3～12个氨基酸 残基时，则形成双链抗体。 残基时，则形成双链抗体。
多价小分子抗体
在ScFv的基础上，可以把两个或两 ScFv的基础上， 的基础上 个以上的ScFv重组在一起， 个以上的ScFv重组在一起，由此可制备 ScFv重组在一起 成多价小分子抗体即微型抗体（简称多 成多价小分子抗体即微型抗体（ 价微抗）。其中包括双链抗体(diabody)， 价微抗）。其中包括双链抗体(diabody)， ）。其中包括双链抗体(diabody) 微型抗体（minibody），三链抗体 微型抗体（minibody），三链抗体 ）， (triabody)及四链抗体(tetrabody)等 (triabody)及四链抗体(tetrabody)等。 及四链抗体(tetrabody)
抗体治疗存在的问题及对策
问 题 对 策
异源蛋白导致产生抗抗体， • 抗体人源化 异源蛋白导致产生抗抗体， 影响靶向性和效果 靶部位摄取的量太低 效应功能弱 在体内被清除速度快 • 改变抗体分子大小 • 连接毒素、放射性 连接毒素、 同位素、 同位素、药物 • 抗体人源化
抗体药物改造的方向 抗体人源化和人源抗体制备 改变抗体分子大小 增强抗体亲和力 增强抗体效应功能
第二代改型抗体： 第二代改型抗体： ①应用了人抗体基因库； 应用了人抗体基因库； ②引进计算机技术模拟抗体分子的立 体结构(分子模拟法) 体结构(分子模拟法)； ③使用了鼠人嵌合FR。其目的是获得 使用了鼠人嵌合FR FR。 具有高亲和力的治疗性抗体
CDR序列 序列
CDR序列 序列
鼠单克隆抗体
人抗体
单克隆抗体人源化的改进
鼠抗体人源化（ 鼠嵌合、改型抗体） 鼠抗体人源化（人-鼠嵌合、改型抗体） 小分子抗体（Fab、单链、单域、 小分子抗体（Fab、单链、单域、超变区 多肽） 多肽） 基因工程抗体（双特异、免疫黏连素、 基因工程抗体（双特异、免疫黏连素、催 化抗体） 化抗体） 人源抗体（噬菌体抗体库、转基因小鼠） 人源抗体（噬菌体抗体库、转基因小鼠） 人-人抗体
人源化抗体
鼠单克隆V区人源化（ 移植） 鼠单克隆 区人源化（CDR移植） 区人源化 移植
小分子抗体 人源化抗体属完全的抗体分子。通过基 人源化抗体属完全的抗体分子。 因重组技术，可以在保持原有抗原结合活性 因重组技术， 的基础上，把完整的抗体分子改造成较小的 的基础上， 分子，称为小分子抗体。 分子，称为小分子抗体。 根据其价数的不同可分为单价小分子抗体 及多价小分子抗体两种。 及多价小分子抗体两种。
第一代的抗体人源化— 第一代的抗体人源化—嵌合抗体
从杂交瘤细胞分离出鼠MAb功能性 从杂交瘤细胞分离出鼠MAb功能性 可变区基因， 与人Ig 恒定区（ Ig恒定区 可变区基因 ， 与人 Ig 恒定区 （ 决定免 疫原性）基因连接， 疫原性）基因连接， 插入适当表达载 转染宿主细胞，表达人体，转染宿主细胞，表达人-鼠嵌合抗 体 。 嵌合抗体由于这两部分在空间结 构上相对独立， 构上相对独立 ，其独特的抗体亲和力 保持得很好， 保持得很好 ， 但因鼠单抗可变区的存 应用时仍有较强的免疫排斥反应。 免疫排斥反应 在，应用时仍有较强的 免疫排斥反应。 特点： 特点：减少了鼠源性抗体的免疫原 性，同时保留了亲本抗体特异性结合 抗原的能力。 抗原的能力。
四、双特异性抗体（ BfAb ） 双特异性抗体（
天然Ig是由两个完全相同的VL VH区域构成， 天然Ig是由两个完全相同的VL和VH区域构成， Ig是由两个完全相同的VL和 区域构成 该区域是特异性识别并结合抗原的关键部位。而 该区域是特异性识别并结合抗原的关键部位。 经人工设计构建的双特异性抗体（BsAb）则由两 经人工设计构建的双特异性抗体（BsAb） 个不同的抗原结合位点组成，可同时与两种不同 个不同的抗原结合位点组成， 的抗原决定簇结合，并可将其偶连的药物、 的抗原决定簇结合，并可将其偶连的药物、酶或 放射性核素等导向到靶部位，这种具有双价双特 放射性核素等导向到靶部位， 异性的抗体又称为双功能抗体（bifunctional 异性的抗体又称为双功能抗体（ antibody,BfAb） antibody,BfAb）
四.超变区多肽(hypervariable region polypeptides) polypeptides) 抗体抗原结合是经过补体决定区（CDR） 抗体抗原结合是经过补体决定区（CDR） 来实现。因此，CDR是构成抗原抗体结合的 来实现。因此，CDR是构成抗原抗体结合的 最小结构单位。根据这一特点，可以设计出 最小结构单位。根据这一特点， 那些在抗原识别及亲和力方面有重要意义的 CDR多肽，直接用于诊断或治疗， CDR多肽，直接用于诊断或治疗，可望获得 多肽 理想的结果。这种只含有一个CDR CDR多肽的抗 理想的结果。这种只含有一个CDR多肽的抗 体，称为超变区多肽，亦称为最小识别单位 称为超变区多肽， (minimal recognition unit, MRU)。 MRU)。